实验十九 血清钾测定

实验十九血清钾测定

（火焰光度法）

【目的】

1.熟悉火焰光度法测定钾的原理和方法。

２.掌握血清钾测定的参考范围及临床意义。

【原理】

火焰光度分析法是一种发射光光谱分析，被测溶液经压缩喷雾变成雾状物后，与可燃气混合燃烧成火焰。由火焰激发后各元素可发射出特有的光谱，样品中钾、钠原子受到火焰热能的激发而处于激发态，激发态的原子不稳定，迅速回到基态放出能量，发射出元素特有波长的辐射谱线。钠的特征谱线为589nm(黄色)，钾的特征谱线为767nm(深红色)，用相应波长的滤光片将谱线分离，然后通过光电管或光电池转换成电信号，经放大器放大后进行测量。样品中钾、钠的浓度越大，所发射的光谱就越强。用已知浓度的标准液与待测标本比较，即可计算出标本中钾、钠的浓度。

火焰光度法测定钾有两种方法。①内标法：用含一定浓度的锂盐稀释液稀释样品，经火焰激发溶液中的钠、钾、锂，各自产生特异光谱，分别通过相应滤光片，照射在光电管上产生各自的光电流，并与锂（浓度恒定）产生的光电流比较，即可得出钠、钾的含量。②外标法：用去离子水稀释样品，并雾化，经火焰激发钠、钾产生特异光谱，钠589nm，钾767nm。浓度与光谱强度在一定范围内成正比。

内标法要求燃料纯度高，但精确度较好。外标法干扰因素多。

【器材】

火焰光度计、可燃气、试管、试管架、吸管。

【试剂】

钾钠标准液：K+ 4mmol/L；Na+ 140mmol/L。

【操作】

1.开机测定程序

①按下地面插座上红色开关，马达自行开动。

②向上扳动仪器面板上的电源开关，见指示灯亮。

③持续按住红色点火按扭同时逆时针缓慢转动燃气开关，观察窗内电热丝变亮，出现由小火，逐渐变成大火。

④放开点火按扭，进样开关逆时针转至开的位置，观察窗内见兰色火焰。

⑤调节燃气开关，使观察窗内火焰呈绿色轮廓清晰的梅花圈状。

⑥用去离子水将仪表表头指针调至零点。

⑦标准K、Na溶液以100倍稀释后，将钠离子仪表表头指针调至70％，将钾离子仪表表头指针调至40％。

⑧再用去离子水将仪表表头指针调至零点。

⑨样品血清用去离子水100倍稀释，进样后读数并记录。根据公式换算，可得到血清钾浓度。

2.关机程序

①关闭仪器面板上的电源开关。

②关闭马达开关。

③等待观察窗内火焰熄灭后，将燃气开关顺时针关闭到底。

④将进样开关顺时针转动到底。

⑤使用完毕，做好仪器周围的清洁整理工作，并做好仪器使用登记。

【计算】

根据以下公式换算，可得到血清钾浓度：

血清钾浓度 = 血清读数／标准液读数×标准液钾浓度

读数与钾浓度的关系如下：

40％＝ 4mmol/L

30％＝ 3mmol/L

20％＝ 2mmol/L

若样品读数大于50％，则将血清对信稀释，进样后读数与钾浓度的关系如下：

40％＝ 8mmol/L

30％＝ 6mmol/L

20％＝ 4mmol/L

【正常参考范围】

血清钾 3.5-5.1mmol/L

【临床意义】

1．血清钾降低血清钾浓度低于3．5mmol／L为低血钾，临床上常见于：

(1)胃肠道失钾：如严重腹泻、呕吐、胃肠引流。

(2)钾排出增多：如肾上腺皮质功能亢进、肾小管性酸中毒时、长期使用皮质激素或利尿剂等。

(3)钾的进食量不足：如患者长期不能正常饮食、手术后长期禁食等。

(4)细胞外钾内移：如碱中毒时、用胰岛素治疗糖尿病。

2．血清钾增高血清钾浓度高于5．5mmol／L为高血钾。：临床上可见于：

(1)钾排出减少：如各种原因引起的少尿症、闭尿症，急性肾衰竭，肾上腺皮质功能减退（艾迪生病)。

(2)细胞内钾外移：如严重溶血、组织挤压伤、大面积烧伤，组织缺氧及酸中毒。

【注意事项】

1．标本溶血或延迟分离血清均可使血清钾浓度明显增高(红细胞内钾浓度远高于血清)，故应及时分离血清。若不能立即测定应将血清置于具塞试管内冰箱保存。

2．测定用的玻璃器皿必须用去离子水冲洗干净，不得有离子污染。

3．火焰光度计的各种管道应保持畅通，不得有堵塞，燃料气压与助燃气压应保持恒定及适当比例。

4．尿液标本钾、钠浓度波动范围大，故稀释倍数要作适当调整，：使尿钾的测定浓度在lOmmol／L以内。

5．严重的高血脂和高蛋白血症的血清标本，会出现假性低钾钠现象。原因是脂质和蛋白质占据了一定体积，使得单位体积血清中水量明显减少。

【结果及分析】

【思考题】

1.火焰光度分析法测定血清钾的原理是什么？有哪两种方法，各有何特点？

2．标本溶血血清钾测定有何影响？