pH示差法测总花青素含量
合集下载
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
pH示差法测总花青素含量
实验试剂氯化钾、醋酸钠、浓盐酸、蒸馏水
实验器材容量瓶、烧杯、离心机、电子天平、pH计、紫外可见分光光度计
实验操作
取两个100 mL 容量瓶，各加入一定量离心待测液，分别用pH1.0 缓冲液和pH4.5 缓冲液定容后混匀，4℃静置2 h，然后将两种样品各在510 nm和700 nm波长下测定吸光度。
总花青素含量按公式 2.3 计算，结果以矢车菊-3-葡萄糖苷（C3G）表示
公式2.3 中：A 由公式2.4 计算所得，Mw 为分子量（以C3G 计算，449.2g/mol），
Df 为稀释倍数（参考文献依据A取值在0.2-0.7），ε 为C3G 的消光系数（26900 L/mol·cm），l 为光程（1.0 cm）。
缓冲液的配制
①pH1.0 缓冲液配置
准确称取1.86 g KCl，与980 mL 蒸馏水混合，用浓HCl 校正pH 至1.0，移至1 L 的容量瓶中，用蒸馏水定容
②pH4.5 缓冲液配置
准确称取32.82 g 醋酸钠，与960 mL 蒸馏水混合，用浓HCl 校正pH 至4.5，移至1 L 的容量瓶中，用蒸馏水定容。