生物碱类成分分析ppt课件
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《生物碱类药物分析》课件
高效液相色谱法
利用高效液相色谱仪分离生物碱，通过检测器测量各组分的峰面积或峰高，与标准品比较来确定生物碱的含量。
06
生物碱类药物分析的样品处
理与分离技术
萃取技术
液-液萃取
利用两种不混溶的溶剂， 使生物碱从一种溶剂转移 到另一种溶剂中的过程。
固-液萃取
利用固体吸附剂吸附样品 中的生物碱，然后用溶剂 洗脱的过程。
嘌呤类生物碱
总结词
具有嘌呤骨架的基本结构
详细描述
嘌呤类生物碱是一类具有嘌呤骨架的基本结 构的生物碱，通常具有嘧啶环和嘌呤环通过 碳-碳键相连的结构特征。
04
生物碱类药物的定性分析
化学反应法
01
02
03
沉淀反应
生物碱类药物与某些试剂 发生沉淀反应，通过沉淀 的颜色、形状等特征进行 鉴别。
显色反应
进行鉴别。
紫外光谱法
最大吸收波长
紫外光谱法可以检测生物碱类药物在紫外光下的最大吸 收波长，通过最大吸收波长的位置进行定性分析。
吸收曲线
紫外光谱法可以获得生物碱类药物的吸收曲线，通过吸 收曲线的形状和变化规律进行鉴别。
核磁共振波谱法与质谱法
核磁共振波谱特征
核磁共振波谱法可以检测生物碱类药物中氢原子和碳原子的核磁共振信号，通过特征峰 的位置和强度进行定性分析。
详细描述
高效液相色谱法是一种常用的分离和分析方法，具有高分离效能、高灵敏度和广泛应用的特点。通过高压泵将生 物碱类药物在固定相和移动相之间进行分配，实现各成分的分离，再通过检测器进行定量和定性分析。
气相色谱法
总结词
适用于挥发性生物碱的分析方法
VS
详细描述
气相色谱法适用于挥发性生物碱的分析， 通过将生物碱类药物在气相状态下进行分 离，利用不同组分的沸点差异实现分离。 该方法具有高分离效能、高灵敏度和分析 速度快的特点。
利用高效液相色谱仪分离生物碱，通过检测器测量各组分的峰面积或峰高，与标准品比较来确定生物碱的含量。
06
生物碱类药物分析的样品处
理与分离技术
萃取技术
液-液萃取
利用两种不混溶的溶剂， 使生物碱从一种溶剂转移 到另一种溶剂中的过程。
固-液萃取
利用固体吸附剂吸附样品 中的生物碱，然后用溶剂 洗脱的过程。
嘌呤类生物碱
总结词
具有嘌呤骨架的基本结构
详细描述
嘌呤类生物碱是一类具有嘌呤骨架的基本结 构的生物碱，通常具有嘧啶环和嘌呤环通过 碳-碳键相连的结构特征。
04
生物碱类药物的定性分析
化学反应法
01
02
03
沉淀反应
生物碱类药物与某些试剂 发生沉淀反应，通过沉淀 的颜色、形状等特征进行 鉴别。
显色反应
进行鉴别。
紫外光谱法
最大吸收波长
紫外光谱法可以检测生物碱类药物在紫外光下的最大吸 收波长，通过最大吸收波长的位置进行定性分析。
吸收曲线
紫外光谱法可以获得生物碱类药物的吸收曲线，通过吸 收曲线的形状和变化规律进行鉴别。
核磁共振波谱法与质谱法
核磁共振波谱特征
核磁共振波谱法可以检测生物碱类药物中氢原子和碳原子的核磁共振信号，通过特征峰 的位置和强度进行定性分析。
详细描述
高效液相色谱法是一种常用的分离和分析方法，具有高分离效能、高灵敏度和广泛应用的特点。通过高压泵将生 物碱类药物在固定相和移动相之间进行分配，实现各成分的分离，再通过检测器进行定量和定性分析。
气相色谱法
总结词
适用于挥发性生物碱的分析方法
VS
详细描述
气相色谱法适用于挥发性生物碱的分析， 通过将生物碱类药物在气相状态下进行分 离，利用不同组分的沸点差异实现分离。 该方法具有高分离效能、高灵敏度和分析 速度快的特点。
05-1生物碱类成分分析
N
奎宁
pKb29.7
O CH3
H3C N
N
OH
N ON
H3C N ON
N N
CH3
咖啡因 （pKb14.15）
CH3
茶碱 （弱酸性）
N CH3
HCl 3H2O
HO
O
OH
盐酸吗啡（两性）
（3）立体结构与碱性的关系
CH3O
N N H
O
OC
OC
OCH3 OCH3
利血平（pKa 6.07）
OCH3 OCH3
残渣加稀盐酸1ml使溶解，加碘化铋钾试液1~2滴,
即生成黄棕色沉淀。
（二）色谱法鉴别
1. TLC法 TLC法是Ch.P.中药制剂常用
鉴别方法，大多用硅胶为吸附剂
硅胶是弱酸性吸附剂，会吸附生物 碱，用中性展开剂时，Rf 小，并会产生 斑点拖尾现象
防止斑点拖尾的措施 A. 展开剂中加入碱性试剂
（例氨水、二乙胺、吡啶） B. 用硅胶铺板时加碱液（例氢氧化钠） C. 改用其他吸附剂（例碱性氧化铝）
有些小分子的呈液态（烟碱、槟榔碱)
麻黄碱具有挥发性 咖啡因具有升华性
O H3C
N
CH3 N
N ON
CH3
咖啡因
OH NHCH3 CH CH CH3
麻黄碱
COOCH3
N 槟榔碱
CH3
N
N
CH3
烟碱
2. 溶解性
游离生物碱OHH 生物碱盐
难溶于水 易溶于有机溶剂
易溶于水 难溶于有机溶剂
例 盐酸吗啡
Ch.P.（2010）
苦味酸钠
K 2HPO4
buffer
过滤
溶醇解、水定容
中药分析5-1-生物碱课件
测定方法包括紫外分光光度法、高效液相色谱法等。
延胡索中延胡索乙素成分分析
1 2 3
延胡索乙素的结构与性质
延胡索乙素是延胡索中的主要生物碱成分，具有 特定的结构和性质，包括分子式、分子量、离
从延胡索中提取延胡索乙素的方法包括溶剂法、 酸水提取法等。常用的分离方法包括色谱法、结 晶法等。
中药分析5-1-生物碱课件
目录
• 生物碱概述 • 生物碱提取与分离方法 • 生物碱鉴定与含量测定方法 • 常见中药中生物碱成分分析 • 生物碱药理活性与临床应用 • 实验操作注意事项与实验报告要求
01
生物碱概述
生物碱定义与分类
生物碱定义
生物碱是一类含氮的碱性有机化 合物，通常存在于植物、动物和 微生物中，具有广泛的生物活性 和药理作用。
操作
将含有生物碱的中药提取物通过色谱柱，以适当的流动相进行洗脱。生物碱在色谱柱上因吸附作用而达到分配平 衡，不同生物碱因吸附力不同而按一定顺序流出色谱柱。通过收集流出液并对流出液进行检测，可以得到单一或 纯度较高的生物碱组分。
03
生物碱鉴定与含量测定方法
呈色反应鉴定法原理及应用
原理
利用生物碱与特定试剂发生颜色反应 的特性，通过观察颜色变化来判断生 物碱的存在。
操作
将含有生物碱的中药粉末与适量的固体吸附剂（如硅胶、氧化铝等）混合均匀， 然后进行加热。生物碱在加热过程中升华，被吸附在固体吸附剂表面。最后通过 冷却、洗脱等步骤将生物碱从吸附剂上分离出来。
色谱法原理及操作
原理
利用生物碱在固定相和流动相之间的分配平衡进行分离。色谱法具有分离效果好、分辨率高等优点，适用于复杂 样品中生物碱的分离和纯化。
原理
利用高效液相色谱仪对生物碱进行分离和检测，通过峰面积或峰高与标准曲线比较来测 定生物碱的含量。
第章生物碱类药物的分析【共27张PPT】
HCCl3
可待因蒸干
过量 H2SO4
剩余H2SO4 NaOH
硫酸奎宁的分析
CH3O
HO CN
CH CH2 ·H2SO4·2H2O
N 2
喹啉类
鉴别 1.绿奎宁反应
H3CO
HO CH N
CH CH2
Br2 O
HO O CH N
CH CH2 Br Br
N
N
CH CH2
HO NH CH N
. OH OH NH3 H2O
试 液
-
3 .
4.磷酸盐
可待因专 属性反应
磷酸盐鉴别
1
.
P
O
3
4
2
.
P
O
3
4
AgNO3
NH3 或
HNO3
浅黄色
氯化铵镁
溶解
白色
3
.
P
O
3
4
钼酸铵
HNO3
NH3
溶解
黄色
检查 有关物质：HPLC
含量测定
原料药 片剂
注射液
非水碱 HPLC 量法
蒸干后的非水 碱量法
糖浆
提取碱 量法
提取碱量法
供试品 NH3
＜ 10－12时
醋酐
非水碱量法 终点的判断
电位法
指示剂法
常用结晶紫
碱性强 蓝色 次之 蓝绿色或绿色
碱性弱 黄绿色
也可用亮绿、喹那啶红、二甲基黄和橙黄Ⅳ号
弱酸
对非水碱量法无干扰
生 有机酸盐和磷酸盐
物
碱 氢卤酸盐 有干扰
盐
的 测
硫酸盐
在冰醋酸中只能 发生一级电离
定 硝酸盐 氧化性
可待因蒸干
过量 H2SO4
剩余H2SO4 NaOH
硫酸奎宁的分析
CH3O
HO CN
CH CH2 ·H2SO4·2H2O
N 2
喹啉类
鉴别 1.绿奎宁反应
H3CO
HO CH N
CH CH2
Br2 O
HO O CH N
CH CH2 Br Br
N
N
CH CH2
HO NH CH N
. OH OH NH3 H2O
试 液
-
3 .
4.磷酸盐
可待因专 属性反应
磷酸盐鉴别
1
.
P
O
3
4
2
.
P
O
3
4
AgNO3
NH3 或
HNO3
浅黄色
氯化铵镁
溶解
白色
3
.
P
O
3
4
钼酸铵
HNO3
NH3
溶解
黄色
检查 有关物质：HPLC
含量测定
原料药 片剂
注射液
非水碱 HPLC 量法
蒸干后的非水 碱量法
糖浆
提取碱 量法
提取碱量法
供试品 NH3
＜ 10－12时
醋酐
非水碱量法 终点的判断
电位法
指示剂法
常用结晶紫
碱性强 蓝色 次之 蓝绿色或绿色
碱性弱 黄绿色
也可用亮绿、喹那啶红、二甲基黄和橙黄Ⅳ号
弱酸
对非水碱量法无干扰
生 有机酸盐和磷酸盐
物
碱 氢卤酸盐 有干扰
盐
的 测
硫酸盐
在冰醋酸中只能 发生一级电离
定 硝酸盐 氧化性
中药学-中药制剂中各类化学成分分析PPT教学课件
（）
(二)生物碱的色谱鉴别 1．薄层色谱法 首先用适当的溶剂提取生物碱，提取液经浓缩 后直接或经过必要的净化后，点在薄层板上，层析后喷洒生物碱显 色剂，再根据生物碱的特性，选择特异的颜色反应或荧光，并应用 纯品对照，或标准药材对照，同时须作阴性对照后确定。如用硅胶 为吸附剂时，一般应用碱性系统展开剂较多，或使生物碱的薄层分 离在碱性环境下进行。
2021/01/21测定
(一)经典化学方法 1.重量法 重量法测定中药制剂中生物碱多为测定其总生物碱的 含量。本法可用于混合总碱、未知结构或分子量相差较大的生物碱 的含量测定。缺点是挥发性生物碱不宜用此法，在蒸发提取溶剂或 加热、干燥时能分解破坏以及加碱使生物碱游离时可发生水解的生 物碱也不可用此法。本法取样量大，得到的残渣在称量的准确度内 方可应用。应用本法要求定量的将生物碱提取完全，并尽可能除去 杂质，须注意选择合适的提取溶剂。 实例 见P135 苦参片中苦参总碱的测定
(2)两相滴定法： 因边滴边使游离生物碱溶于有机溶剂中，不
致影响终点的观察。更重要的是由于游离生物碱进入有机相，明显
地增大了生物碱盐的电离常数pKa。生物碱盐在两相中的水解为
pKa(D)=pKa - log(1+PC)，即与分配系数有关。一般的测定方法是
称取生物碱盐类溶于水中(加氯化钠少许)，然后加一定量有机溶剂，
(2)生物碱的酸性水溶液或稀醇（小于50%）溶液中，滴加碘碘化钾试剂数滴，产生棕色或褐色沉淀，
BH+ + I2-K+I- → BI2HI（棕、褐色） + K+
(3)生物碱的酸性水溶液或稀醇（小于50%）溶液中，滴加碘化 铋钾、碘化汞钾试剂数滴，产生红棕色沉淀、类白色沉淀。
BH+ + BiI3KI → BBiI3HI（红棕色） + K+ 2B02H1/+01/2+1 HgI2KI → BHgI22HI（类白色） + K+ 第一课件网 1
(二)生物碱的色谱鉴别 1．薄层色谱法 首先用适当的溶剂提取生物碱，提取液经浓缩 后直接或经过必要的净化后，点在薄层板上，层析后喷洒生物碱显 色剂，再根据生物碱的特性，选择特异的颜色反应或荧光，并应用 纯品对照，或标准药材对照，同时须作阴性对照后确定。如用硅胶 为吸附剂时，一般应用碱性系统展开剂较多，或使生物碱的薄层分 离在碱性环境下进行。
2021/01/21测定
(一)经典化学方法 1.重量法 重量法测定中药制剂中生物碱多为测定其总生物碱的 含量。本法可用于混合总碱、未知结构或分子量相差较大的生物碱 的含量测定。缺点是挥发性生物碱不宜用此法，在蒸发提取溶剂或 加热、干燥时能分解破坏以及加碱使生物碱游离时可发生水解的生 物碱也不可用此法。本法取样量大，得到的残渣在称量的准确度内 方可应用。应用本法要求定量的将生物碱提取完全，并尽可能除去 杂质，须注意选择合适的提取溶剂。 实例 见P135 苦参片中苦参总碱的测定
(2)两相滴定法： 因边滴边使游离生物碱溶于有机溶剂中，不
致影响终点的观察。更重要的是由于游离生物碱进入有机相，明显
地增大了生物碱盐的电离常数pKa。生物碱盐在两相中的水解为
pKa(D)=pKa - log(1+PC)，即与分配系数有关。一般的测定方法是
称取生物碱盐类溶于水中(加氯化钠少许)，然后加一定量有机溶剂，
(2)生物碱的酸性水溶液或稀醇（小于50%）溶液中，滴加碘碘化钾试剂数滴，产生棕色或褐色沉淀，
BH+ + I2-K+I- → BI2HI（棕、褐色） + K+
(3)生物碱的酸性水溶液或稀醇（小于50%）溶液中，滴加碘化 铋钾、碘化汞钾试剂数滴，产生红棕色沉淀、类白色沉淀。
BH+ + BiI3KI → BBiI3HI（红棕色） + K+ 2B02H1/+01/2+1 HgI2KI → BHgI22HI（类白色） + K+ 第一课件网 1
药物分析课件生物碱ppt演示课件
（四）紫脲酸铵反应：黄嘌呤类生物碱的特征反应
O
CH 3
H 3C
N
N
N
ON
CH 3
HCl KClO3
O
O
H3C N
H HO O
CH3
O NO
O
CH3
O H3C
N
H N
NO CH3 O
CH3
NH3
O N ONH4 O N O
CH3
CH3
紫色（加NaOH试液，紫色消失）
22
生物碱类药物的特殊鉴别反应
（五）甲醛-硫酸反应（Marquis反应）
NO2
+H2O + CO2
N
深紫色
O OK
20
生物碱类药物的特殊鉴别反应
（三）绿奎宁反应：含氧喹啉衍生物的特征反应
CH 3O
CH CH 2
HO C
N
H
Br2
N
CH CH 2
CH CH 2
Br Br
OH OH
HO
O
C
N
H
O
NH3 •H2O
HN
HO
NH
C
N
H
N
N
翠绿色
21
生物碱类药物的特殊鉴别反应
27
一、非水溶液滴定法
（一）原理和方法：
游离生物碱：B + HClO4 生物碱盐： +• A– + HClO4
_
BH+• ClO4
_
BH+• ClO 4+HA
（置换反应）
测定方法：取经适当方法干燥的供试品适量，加冰醋酸 10~30ml溶解。若供试品为氢卤酸盐，应加5%醋酸汞的冰 醋酸溶液3~5ml，用0.1mol/L的高氯酸滴定液滴定至终点， 并将滴定结果用空白试验校正。
生物碱优秀PPT课件学习PPT教案
pKa 10~5~6源自0~1N吡啶
pka= 5.2 ( SP2 )
N H
胡椒啶
pka = 11.2 ( SP3 )
2.诱导效应
1）供电诱导效应（烷基）：可使氮原子周围电子云 密度增加，碱性增强。 2）吸电诱导效应（含氧基团，双键，苯环）：电子云 密度降低，碱性减弱。
CH CH CH3
CH CH CH3
（若在碱性条件下则试剂本身将产生沉淀） （2）在稀醇或脂溶性溶液中时，含水量>50%；
（当醇含量>50%时可使沉淀溶解） （3）沉淀试剂不易加入多量。
（如：过量的碘化汞钾可使产生的沉淀溶解）
结果判断： 1、需要用三种以上生物碱沉淀试剂 2、氨基酸、蛋白质、多糖、鞣质等 + 沉淀试剂—
— 沉淀（假阳性）
碘-碘化钾 碘化铋钾 碘化汞钾
溶解）
硅钨酸 苦味酸 雷氏铵盐
性复盐）
KI-I2 BiI3KI HgI22KI
SiO212WO3 2,4,6-三硝基苯酚
硫氰酸铬铵试剂
棕褐色沉淀 红棕色沉淀 类白色沉淀（若加过量试剂，沉淀又被
乳白色 黄色 紫红色（能与季铵型生物碱生成难溶
沉淀反应条件 （1）通常在酸性水溶液中生物碱成盐状态下进行；
麻黄碱
有(1机R,胺2S类)
挥发性
OH CH CH CH3
NHCH3
伪麻黄碱
(1S,2S)
一、有机胺类
MeO
Me
MeO
OMe
NHCOCH3 HO
MeO O
NH COO(CH2)4 NH
NH2
OMe
益母草碱
秋水仙碱（酰胺类） colchicine
治疗急性痛风，并有
中药化学--生物碱 ppt课件
PPT课件
18
二。 化 学 性 质
一。碱性
1. 碱性强弱的表示方法——pKa（pKa越大，碱性越强） pKa＜2为极弱碱，pKa2～7为弱碱， pKa7～11为中强，
pKa11以上为强碱。 碱性由强到弱的一般顺序： 胍基＞季铵碱＞N-烷杂环＞脂肪胺＞芳香胺≈N-芳杂环＞酰
胺≈吡咯 2. 碱性强弱影响因素 （1）氮原子的杂化方式（ sp3＞sp2＞sp） （2）诱导效应
• “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
精品资料
• 你怎么称呼老师？
• 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你 是否会认为老师的教学方法需要改进？
• 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ • 教师的教鞭
• “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我 笨，没有学问无颜见爹娘 ……”
• “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
咪 唑
毛果芸香碱
PPT课件
15
萜类生物碱
1.单萜类生物碱，环烯醚萜衍生而来。龙胆碱
2.倍半萜类生物碱，石斛属植物
3.二萜类生物碱，乌头属，翠雀属，飞燕草属植 物中，代表物乌头碱。
4.三萜类生物碱。
龙胆碱
甾类生物碱
这类生物碱具有甾体母核，另含有氮原子，甾体生物碱的氮原子 可构成杂环，也可存在环外。藜芦胺，环常绿黄杨碱。
存在形式：有机酸盐、无机酸盐、游离状态、酯、苷、以及氮氧 化合物等。
PPT课件
2
精品资料
• 你怎么称呼老师？
• 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你 是否会认为老师的教学方法需要改进？
• 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ • 教师的教鞭
• “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我 笨，没有学问无颜见爹娘 ……”
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的问题？ ❖ 含生物碱类成分中药制剂定性鉴别，以硅胶为载
体时，展开系统需注意的问题？ ❖ HPLC法分析制剂中单体生物碱的含量时，改进流
动相的常用方法？
中药制剂教研室
概述
❖定义 生物碱是生物界除生物体必须的含氮化合物
（如氨基酸、蛋白质和B族微生素等）之外的所有 含氮有机化合物，因其结构中氮原子上的未共享电 子对而大多具有碱性。
4.固定相即色谱柱的选择：采用ODS柱 5.流动相的选择：部分含水溶剂，水用超纯水，有机溶剂采
用色谱纯溶剂，并用0.45um过滤膜过滤 6.洗脱方式的选择
中药制剂教研室
7.检测器的选择：UVD 8.定量分析 8.1方法学考察：专属性，线性关系和范围，精密
度试验，重现性试验，稳定性试验 8.2含量测定：
定法 重量法：提取生物碱成沉淀 or 加生物碱沉淀试剂
中药制剂教研室
中药制剂教研室
酸碱滴定法
中药制剂教研室
中药制剂教研室
中药制剂教研室
中药制剂教研室
中药制剂教研室
溶液后标示的“（1－10）”等符号， 系指固体溶质1.0g或液体溶质1.0ml 加溶剂使成10ml的溶液；未指明用 何种溶剂时，均系指水溶液；
重 量 法
中药制剂教研室
含量测定
❖分光光度法
样品分离、净化（化学法、柱色谱法、TLC法等） 直接测定法：不经过化学反应用生物碱物质自身
的吸收波长 范围：药物少，内含成分简单的中药制剂 离子对萃取比色法
中药制剂教研室
中药制剂教研室
分 光 光 度 法： 直 接 测 定 法
2010版药典：HPLC 定量黄连、炒白芍
1.提取净化条件的考察 2.测定方法与条件的选择 3. 定量分析方法验证 3.1 专属性 3.2 线性关系考察 3.3 精密度试验 3.4 准确度试验 3.5 稳定性试验 3.6 测灵敏度及检测限的测定
中药制剂教研室
含量测定
❖总生物碱含量测定 化学分析法
范围：处方药味少，内含成分简单的中药制剂 酸碱滴定法：生物碱碱性强弱，水/非溶液酸碱滴
中药制剂教研室
分光光度法
❖酸性染料比色法
适当PH介质中，生物碱可与氢离子结合成生物 碱盐的阳离子，而酸性染料在此条件下解离为阴离子， 生物碱盐的阳离子与染料阴离子定量地结合成有色的 配合物（即离子对），此离子对可定量地溶于某些有 机溶剂，测定有机溶剂的吸收度 or 经碱化后释放出 的染料的吸收度—
固 体 剂 型 大 蜜 丸
中药制剂教研室
中药制剂教研室
定性鉴别
❖色谱鉴别
2.纸色谱法： 显色：含硫酸的试剂不可 3.HPLC法： 快速、灵敏、微量
Rt值法，峰面积 or 峰高加大法（用内标）
中药制剂教研室
含量测定
反映中药制剂中含生物碱的真实情况 提取、净化、分析测定均要准确 方法学考察内容
显色反应：纯品，少用于制剂中生物碱分析
碱性：多呈碱性，碱性强成盐弱游离，供试品制备及分析方法建立及条件 选择的依据
紫外光谱特征：共轭体系，紫外吸收
中药制剂教研室
定性鉴别
❖一般理化鉴别
沉淀反应多用：酸性条件，净化处理（除蛋白质、 多肽、鞣质），制剂中两种以上含生物碱药材（难 说明问题）
中药制剂教研室
马钱子主含生物碱。以番木鳖 碱(士的宁) 与马钱子碱(布鲁 生) 为主, 主效成分及毒性成 分。生物碱以盐的形式存在， 加浓氨水使生物碱盐转变成游 离碱，易溶于氯仿有机溶剂。 地龙含较多多肽、蛋白质等， 不溶于有机溶剂。
中药制剂教研室
定性鉴别
❖色谱鉴别
1.TLC法： 常用载体：硅胶 常用展开剂：氯仿、苯及相应极性调节剂
层板上进行 2.5检视：供试品色谱中，在与对照药材色谱及对
照品色谱相应的位置上，显相同的斑点
中药制剂教研室
1.如何建立一清颗粒定含量测定分析方法？ 叙述实验步骤及注意事项。
1.药味及活性成分的选择 黄连君药 小檗碱主要活性成分
2.供试品溶液的制备：提取、纯化（液－液萃取法）制备供 试品溶液
3.对照品溶液的制备：精密称取干燥至恒重的小檗碱对照品 溶液，溶于甲醇即得对照品溶液
中药制剂教研室
中药制剂教研室
分 光 光 度 法： 直 接 测 定 法
2010版药典：HPLC 定量黄连
中药制剂教研室
分光光度法
离子对萃取比色法
范围：中药制剂中微量生物碱的含量测定 原理：一定PH介质中，有机碱与一些酸性染料或磺酸类、
酸类的阴离子，定量结合为有色离子对，离子对定量溶于 某些有机溶剂，一定波长下测定有机溶剂的或碱化后释放 出的染料的吸收度，按分光光度法计算有机碱的含量。 常用方法：酸性染料比色法和苦味酸盐比色法
➢绝大多数具有显著的生理活性 ➢中药材中生物碱多和植物酸性成分结合成盐的状态存在
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结构特征及理化性质
❖ 结构特征 CHON
大多数生物碱 在酸性水溶液中可 以与某些试剂生成 不溶于水的复盐或 分子复合物，这类
试剂
❖ 理化性质
物理性状：结晶性固体；液体、小分子固体（挥发性、升华性），多无色 溶解性：多样性 沉淀反应：生物碱沉淀试剂，定性（蛋白质、多肽、鞣质，避免假阳性）
问题 1.如何建立一清颗粒的定性鉴别方法？ 叙述实验步骤及注意事项。
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1.薄层板的制备 2.黄连药材的鉴别： 2.1对照品溶液的制备：小檗碱作为对照品，制备
小檗碱甲醇对照品溶液； 2.2黄连对照药材溶液的制备：甲醇回流提取 2.3供试品溶液的制备：甲醇浸渍提取 2.4点样及展开：按照薄层色谱法试验，在同一薄
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第五章 中药制剂中各类化学成分分析
第一节 生物碱类成分分析
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大纲要求
❖ 熟悉生物碱类成分结构特征及理化性质 ❖ 掌握生物碱类制剂定性鉴别常用方法 ❖ 掌握生物碱类制剂定量分析常用方法
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问题
❖ 生物碱类成分的理化性质？ ❖ 含生物碱类成分的中药制剂制备供试品时需考虑
硅胶弱酸性，形成盐至Rf值小、拖尾、复斑，碱性展开系统or碱性条件下
显色剂：改良碘化铋钾（橘红色） 供试品的制备：处方、剂型、存在状态、溶解性、共存成分的性质
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——
固 体 剂 型 回 流 提 取
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——
液 体 剂 型 液 液 萃 取
体时，展开系统需注意的问题？ ❖ HPLC法分析制剂中单体生物碱的含量时，改进流
动相的常用方法？
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概述
❖定义 生物碱是生物界除生物体必须的含氮化合物
（如氨基酸、蛋白质和B族微生素等）之外的所有 含氮有机化合物，因其结构中氮原子上的未共享电 子对而大多具有碱性。
4.固定相即色谱柱的选择：采用ODS柱 5.流动相的选择：部分含水溶剂，水用超纯水，有机溶剂采
用色谱纯溶剂，并用0.45um过滤膜过滤 6.洗脱方式的选择
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7.检测器的选择：UVD 8.定量分析 8.1方法学考察：专属性，线性关系和范围，精密
度试验，重现性试验，稳定性试验 8.2含量测定：
定法 重量法：提取生物碱成沉淀 or 加生物碱沉淀试剂
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酸碱滴定法
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溶液后标示的“（1－10）”等符号， 系指固体溶质1.0g或液体溶质1.0ml 加溶剂使成10ml的溶液；未指明用 何种溶剂时，均系指水溶液；
重 量 法
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含量测定
❖分光光度法
样品分离、净化（化学法、柱色谱法、TLC法等） 直接测定法：不经过化学反应用生物碱物质自身
的吸收波长 范围：药物少，内含成分简单的中药制剂 离子对萃取比色法
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分 光 光 度 法： 直 接 测 定 法
2010版药典：HPLC 定量黄连、炒白芍
1.提取净化条件的考察 2.测定方法与条件的选择 3. 定量分析方法验证 3.1 专属性 3.2 线性关系考察 3.3 精密度试验 3.4 准确度试验 3.5 稳定性试验 3.6 测灵敏度及检测限的测定
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含量测定
❖总生物碱含量测定 化学分析法
范围：处方药味少，内含成分简单的中药制剂 酸碱滴定法：生物碱碱性强弱，水/非溶液酸碱滴
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分光光度法
❖酸性染料比色法
适当PH介质中，生物碱可与氢离子结合成生物 碱盐的阳离子，而酸性染料在此条件下解离为阴离子， 生物碱盐的阳离子与染料阴离子定量地结合成有色的 配合物（即离子对），此离子对可定量地溶于某些有 机溶剂，测定有机溶剂的吸收度 or 经碱化后释放出 的染料的吸收度—
固 体 剂 型 大 蜜 丸
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定性鉴别
❖色谱鉴别
2.纸色谱法： 显色：含硫酸的试剂不可 3.HPLC法： 快速、灵敏、微量
Rt值法，峰面积 or 峰高加大法（用内标）
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含量测定
反映中药制剂中含生物碱的真实情况 提取、净化、分析测定均要准确 方法学考察内容
显色反应：纯品，少用于制剂中生物碱分析
碱性：多呈碱性，碱性强成盐弱游离，供试品制备及分析方法建立及条件 选择的依据
紫外光谱特征：共轭体系，紫外吸收
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定性鉴别
❖一般理化鉴别
沉淀反应多用：酸性条件，净化处理（除蛋白质、 多肽、鞣质），制剂中两种以上含生物碱药材（难 说明问题）
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马钱子主含生物碱。以番木鳖 碱(士的宁) 与马钱子碱(布鲁 生) 为主, 主效成分及毒性成 分。生物碱以盐的形式存在， 加浓氨水使生物碱盐转变成游 离碱，易溶于氯仿有机溶剂。 地龙含较多多肽、蛋白质等， 不溶于有机溶剂。
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定性鉴别
❖色谱鉴别
1.TLC法： 常用载体：硅胶 常用展开剂：氯仿、苯及相应极性调节剂
层板上进行 2.5检视：供试品色谱中，在与对照药材色谱及对
照品色谱相应的位置上，显相同的斑点
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1.如何建立一清颗粒定含量测定分析方法？ 叙述实验步骤及注意事项。
1.药味及活性成分的选择 黄连君药 小檗碱主要活性成分
2.供试品溶液的制备：提取、纯化（液－液萃取法）制备供 试品溶液
3.对照品溶液的制备：精密称取干燥至恒重的小檗碱对照品 溶液，溶于甲醇即得对照品溶液
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分 光 光 度 法： 直 接 测 定 法
2010版药典：HPLC 定量黄连
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分光光度法
离子对萃取比色法
范围：中药制剂中微量生物碱的含量测定 原理：一定PH介质中，有机碱与一些酸性染料或磺酸类、
酸类的阴离子，定量结合为有色离子对，离子对定量溶于 某些有机溶剂，一定波长下测定有机溶剂的或碱化后释放 出的染料的吸收度，按分光光度法计算有机碱的含量。 常用方法：酸性染料比色法和苦味酸盐比色法
➢绝大多数具有显著的生理活性 ➢中药材中生物碱多和植物酸性成分结合成盐的状态存在
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结构特征及理化性质
❖ 结构特征 CHON
大多数生物碱 在酸性水溶液中可 以与某些试剂生成 不溶于水的复盐或 分子复合物，这类
试剂
❖ 理化性质
物理性状：结晶性固体；液体、小分子固体（挥发性、升华性），多无色 溶解性：多样性 沉淀反应：生物碱沉淀试剂，定性（蛋白质、多肽、鞣质，避免假阳性）
问题 1.如何建立一清颗粒的定性鉴别方法？ 叙述实验步骤及注意事项。
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1.薄层板的制备 2.黄连药材的鉴别： 2.1对照品溶液的制备：小檗碱作为对照品，制备
小檗碱甲醇对照品溶液； 2.2黄连对照药材溶液的制备：甲醇回流提取 2.3供试品溶液的制备：甲醇浸渍提取 2.4点样及展开：按照薄层色谱法试验，在同一薄
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第五章 中药制剂中各类化学成分分析
第一节 生物碱类成分分析
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大纲要求
❖ 熟悉生物碱类成分结构特征及理化性质 ❖ 掌握生物碱类制剂定性鉴别常用方法 ❖ 掌握生物碱类制剂定量分析常用方法
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问题
❖ 生物碱类成分的理化性质？ ❖ 含生物碱类成分的中药制剂制备供试品时需考虑
硅胶弱酸性，形成盐至Rf值小、拖尾、复斑，碱性展开系统or碱性条件下
显色剂：改良碘化铋钾（橘红色） 供试品的制备：处方、剂型、存在状态、溶解性、共存成分的性质
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固 体 剂 型 回 流 提 取
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液 体 剂 型 液 液 萃 取