抗生素筛选标记及原理

抗菌素抗性标记及筛选原理

大多数质粒载体都是用抗菌素抗性标记，包括氨苄青霉素抗性（Ampr ）、卡那霉素抗性（Kanr ）、四环素抗性（Tetr ）、链霉素抗性（Strr ）和氯霉素抗性（Cmlr ））等。

i ）氨苄青霉素（Ampicillin ，Amp ）是青霉素的衍生物，通过干扰细菌细胞壁合成的末端反应，杀死生长的细菌。细菌质粒Amp r基因编码b-内酰胺酶，特异地切割氨苄青

霉素的b-内酰胺环。

ii ）氯霉素（chloramphenicol，Cml ）通过与50S 核糖体亚基结合，干扰细胞蛋白质的合成并阻止肽键的形成。杀死生长的细菌。细菌抗性原理是Cml r 编码乙酰转移酶，特异地使氯霉素乙酰化而失活。

iii）卡那霉素（kanamycin，Kan）通过与70S核糖体结合，导致mRNA发生错读。杀死细菌。而Kan r 编码的氨基糖苷磷酸转移酶，对卡那霉素进行修饰，阻断其与核糖体结合作用。

iv）链霉素（Streptomycin，Str）通过与30S核糖体亚基结合，导致mRNA错译。

杀死细菌。Str r编码一种氨基糖苷磷酸转移酶对链霉素进行修饰，阻断其与核糖体30S亚基结合作用。

v）四环素（Tetracycline，Tet）通过于30S核糖体亚基结合，干扰细胞蛋白质的合成并阻止肽键的形成。杀死生长的细菌。Tet r 编码特异性蛋白质，对细菌的膜结构进行修饰，组止四环素通过细胞膜进入细菌细胞内。

抗生素抗性筛选原理是：不带有抗菌素抗性基因的受体菌不能在含有抗菌素的培养基选择培养基）中生长。当带有抗菌素抗性基因的载体进入受体菌后，受体菌才能生长。