放线菌的形态观察
微生物实验放线菌的形态观察
实验一：丝状微生物的鉴定实验目的：1、观察常见放线菌的基本形态特征。
2、观察镰刀菌与木霉的基本形态。
3、掌握埋片培养法培养放线菌。
4、掌握载片培养法培养丝状真菌。
5、学会用显微镜观察未染色样品。
实验原理：放线菌的菌落早期绒状同细菌菌落月牙状相似，后期形成孢子菌落呈粉状、干燥，有各种颜色呈同心圆放射状。
放线菌一般由分枝状菌丝组成，它的菌丝可分为基内菌丝(营养菌丝)、气生菌丝或有孢子丝三种。
放线菌生长到一定阶段，大部分气生菌丝分化成孢子丝，通过横割分列的方式产生成串的分生孢子。
孢子丝形态多样，有直、波曲、钩状、螺旋状、轮生等多种形态。
孢子也有球形、椭圆形、杆状和瓜子状等等。
它们的形态构造都是放线菌分类鉴定的重要依据。
真菌的菌丝较放线菌粗，菌落疏松，主要用肉眼观察，必要时借助放大镜或显微镜。
利用显微镜主要观察孢子的着生状态，孢子形状及菌丝有无横隔等。
3材料3.1菌种链霉菌（Streptomyces sp.）；诺卡氏菌（Nocardia sp.）；尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)；绿色木霉（Trichoderma viride）3.2培养基高氏1号培养基，PDA培养基。
3.3器皿培养皿，载玻片、盖玻片、无菌滴管、镊子、接种环、小刀(或刀片)、水浴锅，显微镜，超净工作台，恒温培养箱。
4流程4.1埋片培养法: 倒琼脂→切槽→接种→埋片→培养→镜检→记录绘图。
4.2载片培养法：滴琼脂→凝固→边缘接种→盖盖玻片→培养→镜检→记录绘图。
5步骤埋片培养法：1 向每个培养皿倒约20毫升高氏一号琼脂培养基，待凝固。
2 用无菌手术刀在琼脂平板上平行开两条槽，取出其中的琼脂培养基。
3 在槽的外侧边缘接种待鉴定的放线菌菌株。
4 将无菌载玻片呈与槽垂直的方向盖在平板上面，用镊子轻轻压下，使载玻片与琼脂平板接触。
5 放于28℃培养3天。
6 将载玻片从平板上取下，直接在显微镜下观察。
载片培养法：1 将无菌载玻片放于洁净工作台。
放线菌的形态观察
实验四放线菌的形态观察一、目的要求1. 学习并掌握观察放线菌形态的基本方法。
2. 了解放线菌的形态特征和繁殖方式。
二、基本原理放线菌是由纤细的有分枝的菌丝构成，菌丝体为单细胞原核微生物。
大多数放线菌的菌丝分化为营养菌丝和气生菌丝两部分。
营养菌丝深入培养基中生长，气生菌丝则生长在培养基的表面，并向空中伸展。
因此用普通方法制片，往往很难观察到放线菌的整体形态。
必须采用适当的培养方法，以便将自然生长的放线菌直接置于显微镜下观察。
通常采用的方法有玻璃纸培养法、插片法和印片法。
三、材料及器材1. 菌种：细黄链霉菌(5406放线菌)2. 溶液和试剂：吕氏美蓝染液3. 仪器及其他用具：盖玻片，载玻片，擦镜纸，接种环，显微镜，剪刀，镊子，吸管，玻璃涂布棒，玻璃纸等。
四、方法与步骤（一）插片法1. 取一淀粉琼脂培养基平板，用接种环将菌种在琼脂平板上划线接种，然后用无菌镊子将灭菌的盖玻片以大约45°角插人琼脂内(插在接种线上，插片数量可根据需要而定。
2. 倒置培养，28℃，3～5天。
3. 用镊子小心取出盖玻片，擦去背面培养物，然后将有菌的一面朝上放在载玻片上，直接镜检。
（二）玻璃纸法1. 以无菌操作用镊子将已灭菌的小块玻璃纸片铺在琼脂淀粉培养基表面，用无菌涂布棒将玻璃纸压平，使其紧贴在琼脂表面，不留气泡，每个平板可铺5～10块玻璃纸。
2. 用接种环挑取菌种斜面培养物在玻璃纸上划线接种。
3. 平板倒置，28℃，培养3～5天。
4. 镜检在载玻片上加一小滴水，用镊子小心取下玻璃纸片，菌面朝上放在玻片的水滴上，使玻璃纸平贴在玻片上，中间不要有气泡，直接镜检。
（三）印片法用一洁净盖玻片，平放在培养皿中放线菌的培养物上，轻轻按压一下，取出盖玻片，将印有放线菌的一面朝下，放置在加有一滴美蓝染液的载玻片上，观察孢子丝和孢子。
五、实验作业及实验报告（一）结果绘图说明你所观察到的放线菌的主要形态特征。
（二）思考题1. 试比较3种培养和观察放线菌方法的优缺点。
放线菌的形态观察实验报告
放线菌的形态观察实验报告放线菌的形态观察实验报告放线菌是一类广泛存在于自然界中的微生物，具有丰富的多样性和重要的生物学功能。
本次实验旨在通过对放线菌的形态进行观察，了解其基本特征和生长习性。
以下是实验过程和观察结果的详细描述。
实验材料和方法：1. 实验材料：放线菌培养基、无菌培养皿、无菌匙、显微镜、石英片。
2. 实验方法：a. 取一块无菌培养皿，将放线菌培养基倒入培养皿中，待其凝固。
b. 使用无菌匙，将待观察的放线菌菌落划入培养基表面，尽量避免交叉污染。
c. 将培养皿盖好，放置在恒温箱中，温度设定为28摄氏度。
d. 每隔一段时间，取出培养皿进行观察，使用显微镜观察放线菌的形态特征，并用石英片进行取样。
实验观察结果：1. 放线菌的形态特征：a. 放线菌呈现为长而细的菌丝状，类似于细长的线状结构。
b. 放线菌的菌丝通常呈现分枝状，形成复杂的网络结构。
c. 放线菌的菌丝颜色多样，包括白色、黄色、红色等，具有一定的色彩变异性。
d. 放线菌的菌丝表面常常有颗粒状物质附着，形成颗粒状结构。
2. 放线菌的生长习性：a. 放线菌生长缓慢，通常需要较长时间才能形成可见的菌落。
b. 放线菌的菌落呈现不规则形状，边缘模糊不清，有时会形成分支状的菌落。
c. 放线菌的菌落表面通常光滑而湿润，有时会有微小的颗粒状结构。
d. 放线菌在培养基上生长的过程中，会逐渐扩散并形成新的菌落。
3. 放线菌的细胞结构：a. 放线菌的菌丝由一系列细胞组成，细胞间通过连接点相互连接。
b. 放线菌的细胞内含有细胞质和细胞核，细胞核通常位于细胞中央。
c. 放线菌的细胞质内含有丰富的有机物质和细胞器，包括线粒体、内质网等。
实验讨论和结论：通过对放线菌的形态进行观察，我们可以发现放线菌具有独特的细胞结构和生长习性。
放线菌的菌丝状结构和分枝状特征使其能够在土壤中广泛分布，并与其他微生物相互作用。
放线菌的色彩变异性可能与其生长环境和代谢产物有关，这也为进一步研究放线菌的生态功能提供了线索。
实验七 放线菌的形态观察
实验七放线菌的形态观察实验七放线菌的形态观察实验七放线菌生物学形态学观察112周红照1102040226 1。
客观的1.学习观察放线菌形态的基本方法；2.观察放线菌的个体形态特征。
二、原理放线菌是一种丝状原核微生物，因其菌落常在固体表面呈放射状生长而得名。
放线菌主要存在于土壤中，多数为腐生菌，少数为寄生菌，有的与植物共生固氮。
放线菌通常由分支发达的菌丝体组成，菌丝直径为0.2-1.2μm。
主要由两部分组成，一部分生长在培养基内，一般没有横隔，有固定和吸收养分的作用，称为基内菌丝或营养菌丝，当基内菌丝发育到一定阶段，即可向空中伸展形成气生菌丝。
在显微镜下观察时，气生菌丝颜色较深，并且比基内菌丝粗两倍左右。
有些种的气生菌丝发育到一定阶段，其顶端可形成孢子丝。
有的仅在气丝上形成单个或一对球形孢子。
孢子丝分直、波曲、螺旋等形状。
螺旋有松、紧、大、小之分，其方向也有左旋和右旋之分，大多数种为左旋，少数种为右旋。
螺旋的数目也是种的特征之一。
孢子丝的着生方式分为单生、丛生和轮生。
大部分放线菌的孢子丝长到一定阶段均可凝聚分裂形成孢子，少数的则以较原始的横隔分裂方式形成孢子。
孢子有球状、椭圆状、杆状、瓜子状等形状，在光镜下即可观察。
放线菌菌落小，与培养基结合紧密，不适合用接种钩拾取，难以直接观察。
本实验采用插入法对放线菌的形态进行了观察。
插入法适用于营养菌丝、气生菌丝和孢子菌丝的对比观察。
在接种放线菌的培养基一侧以45度角插入无菌盖玻璃，使放线菌在培养基和盖玻璃的交界处生长，并附着在盖玻璃上。
菌丝生长一段时间后，取下盖玻璃进行染色，然后直接观察。
3、材料1.菌种:紫色直丝链霉菌(streptomycesviolaoeorectus)灰红紫类群黑化链霉菌（streptomycesnigrificans）灰褐类群天蓝链霉菌（streptomycescoelicolor）蓝色类群丰加链霉菌（streptomycestoyocaensis）白孢类群2.染色剂：石炭酸复红染液3.培养基：高氏一号培养基4.其他：玻片、镊子、酒精灯、洗瓶、雪松油、二甲苯、镜子清洁纸、吸水纸。
放线菌的形态观察
4、观察：在载玻片中央滴一滴染液，小心用镊 子将盖玻片抽出，带菌面朝下，覆盖于染色 液上，浸泡2min后，用吸水纸将多余染色液 吸干，镜检。低-高-油
五、实验结果
菌名
培养法
菌丝形态 形态特征
六、思考题 用插片法制备放线菌标本的优点
基内菌丝、气生菌丝和孢子丝三类。
基内菌丝：伸入培养基内的菌丝，具有吸收 营养的功能
该种菌丝无隔，直径较细，有的无色，有的 产生色素，呈现不同的颜色
气生菌丝：基内菌丝向空间生长的菌丝。直径较 基内菌丝粗，呈直形或弯曲形。产生的色素较深
孢子丝：气生菌丝发育到 一定阶段，其顶端可分化 形成孢子。这种形成孢子 的菌丝称孢子丝。孢子成 熟后，可从孢子丝中逸出 飞散
孢子丝的形状、着生方式， 螺旋方向（左旋还是右 旋）、数目、疏密程度以 及形态特征是鉴定放线菌 的重要依据
放线菌孢子丝形态
孢子 --孢子是孢子丝成熟后，分化产生出的繁殖 细胞
孢子的形状多样，球、椭圆、杆状等；
表面结构不一样，光滑、疣刺、毛发状等；
孢子常有色素，单个无色透明，聚集表现；
孢子抗干燥能力强，抗热性不及芽孢，强于营养细 胞。
三、实验材料 菌种：链霉菌 染色液：0.1%美兰 培养基：马铃薯培养基 器皿：显微镜、载玻片、盖玻片、接种环、
酒精灯、镊子等
四、方法与步骤
1、倒平板：将马铃薯培养基
2、插片：用无菌镊子取无菌盖玻片，插在平板 培养基上（40°-50°插入）
实验四 放线菌的形态观察
一、实验目的 1、学会用插片培养法培养放线菌的制片方法 2、观察放线菌的菌落特征、个体形态特征
二、实验原理
放线菌的形态观察
放线菌的形态观察（一）实验目的要求学习并掌握放线菌形态的基本方法初步了解放线菌的形态特征（二）基本原理放线菌是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌．常见放线菌大多能形成菌丝体，紧贴培养基表面或深入培养基内生长的叫基内菌丝(简称“基丝”)，基丝生长到一定阶段还能向空气中生长出气生菌丝(简称“气丝”)，并进一步分化产生孢子丝及孢子．有的放线菌只产生基丝而无气丝．在显微镜下直接观察时，气丝在上层、基丝在下层，气丝色暗，基丝较透明．孢子丝依种类的不同，有直、波曲、各种螺旋形或轮生．在油镜下观察，放线菌的孢子有球形、椭圆，杆状或柱状．能否产生菌丝体及由菌丝体分化产生的各种形态特征是放线茁分类鉴定的重要依据．为了观察放线茵的形态特征，人们设计了各种培养和观察方法，这些方法的主要目的是为了尽可能保持放线菌自然生长状态下的形态特征。
本实验介绍其中几种常用方法．扦片法：将放线菌接种在琼脂平板上，扦上灭菌盖玻片后培养，使放线菌苗丝沿着培养基表面与盖玻片的交接处生长而附着在盖玻上．观察时，轻轻取出盖玻片，置于载玻片上直接镜检．这种方法可观察到放线茵自然生长状态下的特征，而且便于观察不同生长期的形态。
玻璃纸法：玻璃纸是一种透明的半透膜，将灭菌的玻璃纸覆盖在琼脂平板表面，然后将放线菌接种于玻璃纸上，经培养，放线菌在玻璃纸上生长形成菌苔。
观察时，揭下玻璃纸，固定在载玻片上直接镜检。
这种方法既能保持放线菌的自然生长状态，也便于观察不同生长期的形态特征．印片法：将要观察的放线菌的菌落或苗苔，先印在载玻片上，经染色后观察．这种方法主要用于观察孢子丝的形态、孢子的排列及其形状等．方法简便，但形态特征可能有所改变．（三）实验设备1．菌种细黄链霉菌(Streptomyces microflavus)或青色链霉菌(S.glaucus)，弗氏链霉菌(S.fradiae).2．培养基灭菌的高氏Ⅰ号琼脂。
3、仪器或其他用具经灭菌的：平皿，玻璃纸，盖玻片，玻璃涂棒，以及载玻片，接种环，接种铲，镊子，石炭酸复红染液，显微镜等。
放线菌形态观察课件
颜色
生长环境
主要生长在土壤、植物根际等环境中 ，对植物病害具有一定的拮抗作用。
菌落较小，颜色多为白色、黄色或橙 色。
诺卡菌属
特征描述
诺卡菌属的菌丝体发达，呈网状 或束状，革兰氏染色呈阳性。
颜色
基内菌丝和气生菌丝的颜色多为黄 色、橙色或褐色。
生长环境
主要生长在土壤、木材、植物残体 等环境中，对植物病害具有一定的 拮抗作用。
培养观察法
总结词
通过培养观察放线菌的生长特性和形 态变化
详细描述
将放线菌接种在适宜的培养基上，观 察其生长速度、菌落形态、色素分泌 等特性，以及在显微镜下观察其形态 变化，有助于深入了解放线菌的生物 学特征。
03
放线菌的形态特征
链状放线菌
链状放线菌是一种常见的放线菌 类型，其菌落呈圆形或椭圆形的 颗粒状，表面干燥、粗糙，有时
05
放线菌的应用与价值
在医药领域的应用
抗生素生产
放线菌是抗生素的主要生产者， 如青霉素、头孢菌素等。
药物筛选
放线菌可用于发现新的药物，如 抗癌药物、免疫抑制剂等。
疾病治疗
某些放线菌具有抗菌、抗炎和抗 肿瘤活性，可用于疾病治疗。
在农业领域的应用
生物防治
孢子
放线菌的孢子有多种形状，光滑或具刺，有的能抗酸。
03
菌落
放线菌的菌落一般圆形、隆起、表面光滑，有的菌落与培养基连接处产
生放线状或放射状排列的气生菌丝。
放线菌的分类
01
02
03
链霉菌属
基内菌丝不断裂，气生菌 丝通常发育良好，形成长 链状孢子丝，在固体培养 基上形成致密的菌苔。
小单孢菌属
只含有一个孢子的分生孢 子梗，常气生，有时伸长 达5～6cm并产生大量基 内菌丝体。
学习手册-放线菌的形态观察.
学习手册《情境：放线菌的形态观察》引导文-单元设计-实训指导书情境：引导文放线菌的形态观察阅读材料材料一：放线菌简介放线菌（Actinomycete）是原核生物的一个类群。
因在固体培养基上呈辐射状生长而得名。
大多数有发达的分枝菌丝。
菌丝纤细，宽度近于杆状细菌，约0.5～1微米。
可分为：营养菌丝，又称基质菌丝，主要功能是吸收营养物质，有的可产生不同的色素，是菌种鉴定的重要依据；气生菌丝，叠生于营养菌丝上，又称二级菌丝（见下图）。
放线菌是一群革兰氏阳性、高( G + C) mol% 含量( >55% ) 的细菌。
放线菌因菌落呈放线状而的得名。
它是一个原核生物类群，在自然界中分布很广，主要以孢子繁殖，其次是断裂生殖。
与一般细菌一样，多为腐生，少数寄生。
放线菌与人类的生产和生活关系极为密切，目前广泛应用的抗生素约70%是各种放线菌所产生。
一些种类的放线菌还能产生各种酶制剂（蛋白酶、淀粉酶、和纤维素酶等）、维生素（B12）和有机酸等。
弗兰克菌属（Frankia）为非豆科木本植物根瘤中有固氮能力的内共生菌。
此外，放线菌还可用于甾体转化、烃类发酵、石油脱蜡和污水处理等方面。
少数放线菌也会对人类构成危害，引起人和动植物病害。
因此，放线菌与人类关系密切，在医药工业上有重要意义。
放线菌在自然界分布广泛，主要以孢子或菌丝状态存在于土壤、空气和水中，尤其是含水量低、有机物丰富、呈中性或微碱性的土壤中数量最多。
放线菌只是形态上的分类，不是生物学分类的一个名词。
有些细菌和真菌都可以划归到放线菌。
土壤特有的泥腥味，主要是放线菌的代谢产物所致。
放线菌细胞的结构与细菌相似，都具备细胞壁、细胞膜、细胞质、拟核等基本结构。
个别种类的放线菌也具有细菌鞭毛样的丝状体，但一般不形成荚膜、菌毛等特殊结构。
放线菌的孢子在某些方面与细菌的芽孢有相似之处，都属于内源性孢子，但细菌的芽孢仅是休眠体，不具有繁殖作用，而放线菌产生孢子则是一种繁殖方式。
实验5-放线菌形态观察
实验六放线菌的形态观察；霉菌子实体、分生孢子及菌落形态观察Ⅰ放线菌的形态观察一、目的要求1、学习并掌握观察放线菌的操作方法。
2、巩固掌握放线菌的形态特征。
二、实验原理放线菌是单细胞原核微生物。
菌丝无隔、分枝、纤细，分为生长于培养基内或匍匐于培养基表面的、从培养基吸取营养物质的基内菌丝，以及伸出培养基表面的气生菌丝。
气生菌丝的上部分化出孢子丝，呈螺旋状、波纹状，或分枝状等，孢子丝的着生方式因种而。
放线菌多可产生色素，菌丝呈各种颜色，有的放线菌能产生水溶性色素分泌至培养基中使培养基变色。
孢子丝长出各种形态的孢子，孢子有不同的颜色。
放线菌的菌落在培养基上着生牢固，与基质结合紧密，难以用接种针挑起。
而且由于有大量孢子存在，因而表面呈干粉状，使得易于与其他类型的微生物相区别。
放线菌的形态特征是其菌种鉴定与分类的重要依据。
三、实验器材1、菌种未鉴定放线菌菌株；2、仪器显微镜；3、材料玻璃纸、载玻片、盖玻片，镊子、盖玻片、接种环、香柏油、二甲苯。
4、染料石炭酸复红染色液。
四、操作步骤1、观察自然生长状态的放线菌用镊子小心取出用插片法培养的放线菌培养皿中的一张盖玻片，将其背面附着的菌丝体擦净。
然后将长有菌的一面向上放在洁净的载玻片上，用低倍镜、高倍镜观察。
找出3类菌丝及其分生孢子，并绘图。
注意放线菌的基内菌丝、气生菌丝的粗细和色泽差异。
2、水封片观察取石炭酸复红染色液一滴滴于载玻片中央，从培养皿中取出插片法培养放线菌的盖玻片，将无菌或菌较少的一面以擦镜纸擦净，并将有菌面朝下，放在载玻片上，浸在染色液中，制成水封片，用高倍镜观察其单个分生孢子及其基内菌丝，并绘图。
五、注意事项1、培养放线菌中要注意，放线菌的生长速度较慢，培养期较长，在操作中应特别注意无菌操作，严防杂菌污染。
并控制培养时间。
2、在镜检观察时，要仔细观察放线菌的营养菌丝、气生菌丝和孢子丝等。
六、实验报告1、绘图绘出观察的放线菌基内菌丝、气生菌丝和孢子丝的形态。
实验6放线菌形态的观察
放线菌菌丝形态和功能
• 菌丝形态和功能的不同，放线菌菌丝可分为基 内菌丝、气生菌丝和孢子丝三种
产生无性孢子是放线菌主要的繁殖方式。
• 在显微镜下直接观察时，气丝在上层、 基丝在下层，气丝色暗，基丝较透明。 孢子丝依种类的不同，有直、波曲、各 种螺旋形或轮生。在油镜下观察，放线 菌的孢子有球形、椭圆、杆状或柱状。 能否产生菌丝体及由菌丝体分化产生的 各种形态特征是放线菌分类鉴定的重要 依据。
实验十、放线菌形态的观察
一、实验目的：
学习丝状微生物制片和染色技术；
观察和掌握典型放线菌的形态结构特征
二、实验材料
1、链霉菌埋片培养材料。
三、实验原理
放线菌形态结构
• 是一类具有 丝状分枝细 胞的革兰氏 阳性细菌， 因菌落呈放 射状而得名。
放线菌的形态和大小
• 放线菌呈分枝丝状 • 菌丝无隔膜，单细胞 • 菌丝直径与细菌相似， 小于1微米
四、实验方法
放线菌的培养与观察方法
• 插片法-水封片法 • 埋片法 • 压片法
放线菌形态观察——埋片法
• (1)将灭菌后的高氏1号培养基倒入培 养皿，每皿倒15ml左右，凝固后备用。 • (2)用经火焰灭过菌的小铲将平皿培 养基挖2个平行凹槽。 • (3)在凹槽周围和槽内接种放线菌。 • (4)在每一凹槽上覆盖两片无菌的盖 玻片；置于适宜温度培养。 •
实验报告
• 绘出放线菌的
题
• 如果按照细菌的制片方法观察放线菌，
• 你认为在显微镜下，细菌、放线菌、酵
母菌和 霉菌的主要区别是什么 ？
• (5)取洁净的载玻片备用。取出培养皿， 打开皿盖，用无菌的镊子将盖玻片轻轻 取出，菌面（与培养基接触的一面）朝 上置于载玻片上。 • (6)将载玻片置显微镜下观察。 • 附：盖玻片在灭菌时，应置于一干 净的铺有滤纸的培养皿中，注意勿用手 接触盖玻片，手上的汗液易使盖玻片灭 菌后粘在一起不易分开；同时应用滤纸 把其分成几层进行灭菌。
放线菌的构造和形态观察：形态构造、繁殖、菌落特征
一、放线菌的形态构造
１ 放线菌的概述
➢ 放线菌的应用： a.能产生大量的、种类繁多的抗生素，到目前为止，已分离得到的放线菌产生
的抗生素达4000种以上； b.生产维生素和酶； c.进行甾体转化、烃类发酵和污水处理；
一、放线菌的形态构造
一、放线菌的形态构造
2 形态构造
➢ 菌丝（根据形态和功能不同分为）：基内菌丝（营养菌丝）：产色素，吸收营养 气生菌丝：可分化出繁殖结构，即孢子丝 孢子丝：繁殖，直、波曲、螺旋，丛生、轮生
一、放线菌的形态构造
2 形态构造
➢ 放线菌孢子丝类型：直、波曲、螺旋，丛生、轮生
单轮生
螺旋状
项目二 放线菌的构造和形态观察
小单孢菌属（Micromonospora）：可产生多种 抗生素，如庆大霉素、利福霉素等
放线菌属（Actinomyces) ： 多为致病菌
一、放线菌的形态构造
2 形态构造 ➢ 大部分放线菌由分枝状的菌丝组成，菌丝大多无隔膜，属单细胞，G+。菌丝的 粗细与细菌中的杆菌宽度相近（1μm左右）。细胞壁含胞壁酸、二氨基庚二酸， 不含几丁质、纤维素。
微生物学基础
原核微生物的构造和形态观察
项目二 放线菌的构造和形态观察
一、放线菌的形态构造
１ 放线菌的概述 ➢ 介于细菌和真菌之间的单细胞G+原核生物，细胞构造和细胞壁的化学组成与细 菌相似；由分枝状的菌丝组成，以外生孢子的形式繁殖,这些特征又与霉菌相似； 放线菌菌落中的菌丝常从一个中心向四周辐射状生长,因此叫放线菌。
4 横隔孢子
➢ 基内菌丝或气生菌丝横隔分裂形成，孢子常为球杆状，体积大小相似，又称节孢 子或粉孢子。
放线菌形态观察
菌丝断裂 凝聚分裂（链霉菌）
分生孢子
无性孢子 横膈膜分裂（诺卡氏菌）
孢囊孢子(链孢囊菌属)
插片法观察放线菌
• 鉴于放线菌菌落致密特性，接种环难以 直接挑取观察。
• 插片法使放线菌沿培养基与盖玻片交界 处生长并附着于盖玻片上。一定时间后， 可直接将盖玻片取下、染色观察。
使用高氏一号培养基（28ºC），平板划线培养 ２Ｄ，在培养基菌落处以45º角插入盖玻片（已 灭菌），插片后继续培养一周，实验观察。
实验材料：
• 紫色直丝链霉菌（Streptomyces violaoeorectus） • 黑化链霉菌（ Streptomyces nigrificans） • 天蓝链霉菌（ Streptomyces coelicolor） • 丰加链霉菌（ Streptomyces toyocaensis）
实验步骤
• 镊子酒精灯上烧三次灭菌，小心取出盖玻 片在酒精灯上稍微加热固定
• 用复红或结晶紫染色1 min,水洗（小心） • 置于载玻片上，油镜下观察
注意事项：
• 取玻片需无菌操作
• 盖玻片两面均有菌丝附着，以锐角面附 着菌丝量较多，建议染色、观察此面。
作业
• 1.画图 • 2.表格
菌名
菌落形 气味 背面
孢子丝的形态以及排列方式 是放线菌的重要分类特征。
孢子丝形态 分类
直
波曲 螺旋
松、紧 大、小
左、右
孢子丝 排列方式
单生 丛生 轮生 互生
放线菌孢子丝类型：
直丝 丛生
弯曲 丛生
弯曲 丛生
直丝 单轮生
钩状
松螺旋？
紧螺旋？
具螺旋一级轮生 直丝 二级轮生
具螺旋二级轮生
放线菌的形态观察
【实验题目】放线菌的形态观察【实验目的】1、掌握放线菌观察方法—插片法2、了解放线菌的基本形态【实验器材】1、菌种：青色链霉菌、弗氏链霉菌2、培养基：灭菌的高氏Ⅰ号琼脂培养基3、仪器和用具：显微镜、酒精灯、载玻片、盖玻片、接种环、镊子、培养皿等【实验原理】1．高氏I号培养基高氏I号培养基是用来培养和观察放线菌形态特征的合成培养基。
此合成培养基的主要特点是含有多种化学成分已知的无机盐，这些无机盐可能相互作用而产生沉淀。
因此，在混合培养基成分时，一般是按配方的顺序依次溶解各成分，甚至有时还需要将二种或多种成分分别灭菌，使用时再按比例混合。
此外，合成培养基有的还要补加微量元素，如高氏I号培养基中，需要加入FeSO4。
2．放线菌放线菌是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌。
常见放线菌大多能形成菌丝体，紧贴培养基表面或深入培养基内生长的叫基内菌丝，基丝生长到一定阶段还能向空气中生长出气生菌丝，并进一步分化产生孢子丝及孢子。
有的放线菌只产生基内菌丝而无气生菌丝。
在显微镜下直接观察时，气生菌丝在上层、基内菌丝在下层，且气生菌丝较暗，基内菌丝较透明。
孢子丝依种类的不同，有直、波曲、各种螺旋形或轮生。
在油镜下观察，放线菌的孢子有球形、椭圆、杆状或柱状。
能否产生菌丝体及由菌丝体分化产生的各种形态特征是放线菌分类鉴定的重要依据。
图1：链霉菌一般形态和构造（模式图）图2：链霉菌属孢子丝的主要类型3． 插片法将放线菌接种在琼脂平板上，插上灭菌盖玻片后培养，使放线菌菌丝沿着培养基表面与盖玻片的交接处生长而附着在盖玻上。
观察时，轻轻取出盖玻片，置于载玻片上直接镜检。
这种方法可观察到放线菌自然生长状态下的特征，而且便于观察不同生长期的形态。
【实验内容及步骤】1、高氏I 号培养基的制备（100ml ）1) 根据配方按照一定比例称取可溶性溶粉、及 其他成分溶解。
2) 待将所有药品溶解后，补充水分到所需的总体积，进行pH 调节到7.2～7.43) 材料灭菌：将所配溶液装在三角烧瓶中并加棉塞，棉塞外包一层牛皮纸，并用麻绳捆好，1-直形，交叉分枝 2-丛生，波曲 3-顶端形成大螺旋 4-松螺旋 5,6-紧螺旋 7-短而直，轮生1-盖玻片 2-琼脂层图3用记号笔标记组号。
微生物学 实验3 放线菌的形态观察
3、孢子丝——有些气生菌丝分化成各种孢子丝，呈螺 旋状、波浪形或分枝状等，着生形式有丛生、互生和轮 生三种。
孢子的表面光滑或粗糙，圆或椭圆和杆状。孢子有各 种颜色。这些形态特点都是鉴别放线菌的重要依据。
分生孢子形态
三、材料
1、菌种：“5406”放线菌培养72 h的 平培养物； 2、染料：蕃红； 3、器材：载玻片、盖玻片、酒精灯、镊 子、接种针、接种铲等。
3 、染色及干燥。滴加适量番红染液，染色 1 min ；水 洗至流出液为无色； 在酒精灯高处加热干燥。
4 、镜检。先用低倍镜寻找视野，然后用油镜进行观察。 注意区分气生菌丝、孢子丝和孢子的形态及排列方式。
五、观察与绘图
1.描述放线菌5406的菌落特征（大小、形 状、颜色、边缘情况等特征）。 2.绘制观察到的放线菌气生菌丝及孢子丝 形态。
细黄链霉菌(Streptomyces microflavus)
显微形态：单细胞菌丝体，菌丝内一般无隔膜。
菌丝体分为三部分： 1、基内菌丝—深入培养基中的营养型一级菌丝 （较透明、颜色浅色）。一般无隔膜，直径 0.2～0.8 µ m，可产生各种色素。 2、气生菌丝—由基内菌丝从培养基向上伸展的 二级菌丝（颜色较深），直径1～1.4 µ m。
四、方法及步骤
1、印片。取2片干净的载玻片，用解剖刀无菌挖取一块 放线菌的菌落（注：带培养基切下），放在一块载玻 片的中央（注：菌落面朝上）；用另一干净的载玻片 盖在这一菌落上轻轻按压，再小心取下这块载玻片 （注：不要使菌落移动）。 2、干燥固定。将取下的上面的载玻片在酒精灯火焰高 处烘烤干燥（注：有菌落的面朝上）；然后迅速通过 火焰2～3次，加热固定。
放线菌是呈丝状生长的同细菌简单染色法放线菌也可用石炭酸复红或吕氏碱性美蓝等染料着色后在显微镜下观察其形态
实验五放线菌真菌形态观察及各类微生物菌落特征观察
实验五放线菌真菌形态观察及各类微生物菌落特征观察实验目的：通过观察和描述放线菌和真菌的形态特征，掌握不同菌落特征的观察方法，提高对微生物的认识和识别能力。
实验原理：放线菌和真菌是常见的微生物，它们具有不同的形态特征。
观察和描述这些特征可以帮助我们区分不同的微生物并进行分类鉴定。
实验步骤：1.实验准备：准备好放线菌和真菌的培养基、菌液和培养皿等实验用品。
2.放线菌的形态观察：a.取一支具有单菌落特征的放线菌菌液，用活性碳笔在无菌琼脂培养基板上绘制X字形标记。
b.将放线菌菌液均匀涂抹在标记处，用棉签在菌液涂抹的区域进行均匀划线。
c.倒转琼脂培养基板，放置在培养皿中，用保鲜膜密封，并在底部划上标记。
d.将培养皿倒置放置在恒温培养箱中，温度设定为适宜放线菌生长的温度。
e.等待一段时间，观察和记录放线菌的形态特征，包括菌落外观、颜色、形状和边缘。
3.真菌的形态观察：a.取一支具有单菌落特征的真菌菌液，用活性碳笔在无菌琼脂培养基板上绘制O字形标记。
b.将真菌菌液均匀涂抹在标记处，用棉签在菌液涂抹的区域进行均匀划线。
c.倒转琼脂培养基板，放置在培养皿中，用保鲜膜密封，并在底部划上标记。
d.将培养皿倒置放置在恒温培养箱中，温度设定为适宜真菌生长的温度。
e.等待一段时间，观察和记录真菌的形态特征，包括菌落外观、颜色、形状和边缘。
4.其他微生物菌落的特征观察：a.取一支具有单菌落特征的其他微生物菌液，用活性碳笔在无菌琼脂培养基板上绘制其他形状标记。
b.将其他微生物菌液均匀涂抹在标记处，用棉签在菌液涂抹的区域进行均匀划线。
c.倒转琼脂培养基板，放置在培养皿中，用保鲜膜密封，并在底部划上标记。
d.将培养皿倒置放置在恒温培养箱中，温度设定为适宜其他微生物生长的温度。
e.等待一段时间，观察和记录其他微生物的形态特征，包括菌落外观、颜色、形状和边缘。
实验结果分析：通过观察和记录放线菌、真菌和其他微生物的形态特征，可以得出不同菌落的外观、颜色、形状和边缘的差异。
放线菌的形态观察实验报告
放线菌的形态观察实验报告实验报告：放线菌的形态观察摘要：本实验在实验室中观察放线菌的形态特征，通过显微镜观察其菌丝和孢子的形态，分析其结构与特性。
实验结果表明，放线菌的形态特征多种多样，具有很强的多样性和适应性，不同品种之间具有一定的差异性。
实验对于深入理解放线菌的生产、利用与控制具有较大的意义。
关键词：放线菌；形态特征；显微镜；差异性引言：放线菌是一类广泛存在于自然界的一种微生物，其具有非常多样化的菌种，广泛分布于不同的环境中，对于人类和动植物的生长生产有着重要的作用。
在实验室中，对于放线菌的形态特征进行分析与研究，对于探究其生存规律、研究其应用和利用等领域具有十分重要的意义。
因此，本实验旨在观察放线菌的形态特征及其差异性，通过显微镜观察其形态结构，为后续有关放线菌研究提供重要的实验数据。
材料和方法：1.实验材料：放线菌、琼脂培养基、显微镜、盖玻片、显微摄像机；2.实验步骤：（1）接种放线菌，利用琼脂培养基进行培养；（2）在培养好的放线菌中，选择纯种菌体，取一定量的菌体；（3）将放线菌菌体放到盖玻片上进行备用；（4）使用显微镜观察放线菌中的细芽和孢子的形态结构，进行拍照记录。
结果：通过显微镜对放线菌的形态进行观察，得到了如下结论：1.不同的放线菌之间表现出彼此独特的形态特征，表现出了很强的差异性；2.在显微镜镜头下观察，不同的放线菌的形态和结构也呈现出了很大的多样性；3.通过观察发现，放线菌中不仅存在菌丝，还产生广泛的分生孢子，形态结构也因菌种的不同而差异较大。
讨论与分析：放线菌形态的差异性和多样性是由于其环境适应性的结果。
在自然环境中，它能够适应不同的温度、水分、PH值等环境因素，因而其形态特征与结构也有所变化。
通过本实验，可以深入了解放线菌的生存规律和自身的适应性，对于进一步研究放线菌的生产和利用方向提供重要的数据支持。
结论：本实验通过观察分析放线菌的形态特征与差异性，得到了如下结论：放线菌具有很强的多样性和适应性，其形态特征和结构因菌种差异而不同，表现出很大的差异性和多样性。
实验四 放线菌的形态观察
实验四放线菌的形态观察杨明轩生物111班1102040128一、实验目的1、学习观察放线菌形态的基本方法。
2、观察放线菌的个体形态特征。
二、实验原理放线菌是一类丝状原核微生物，因其菌落在固体表面长成放射状生长而得名，放线菌主要存在于土壤中，大部分腐生，少数寄生，也有的与植物共生固氮。
放线菌是最主要的抗生素产生菌，其形态特征是菌种选育和分类的重要依据。
放线菌通常有分枝发达的菌丝体组成，菌丝直径为0.2-1.2μm。
主要由两部分组成，一部分长在培养基内，一般没有横隔，有固定和吸收养分的作用，称为基内菌丝或营养菌丝。
当基内菌丝发育到一定阶段，即可向空中伸展形成气生菌丝（有的菌种没有气生菌丝）。
在显微镜下观察时，气生菌丝颜色较深，并且比基内菌丝粗两倍左右。
有些种的气生菌丝发育到一定阶段，其顶端可形成孢子丝。
孢子丝分直、波曲、螺旋等形状。
孢子丝的着生方式分别为单生、丛生、轮生和互生。
放线菌菌落小，与培养基结合紧密，不易用接种钩挑取，因而难以直接观察。
通常采用玻璃纸培养法和插片法观察。
本次实验采取插片法。
该方法适合进行营养菌丝、气生菌丝和孢子丝的比较观察。
在接种放线菌的培养基一侧，以45°角插入无菌盖玻片，使放线菌沿培养基与盖玻片交界处生长，并附着于盖玻片上，待菌丝生长一段时间后，取下盖玻片进行染色，即可直接观察。
三、实验材料1、菌种：紫色直丝链霉菌（Streptomyces violaoeorectus）、黑化链霉菌（Streptomyces nigrificans）、天蓝色链霉菌（Streptomyces coelicolor）、丰加链霉菌（Streptomyces toyocaensis）2、染色剂：石炭酸复红染液3、培养基：高氏一号培养基4、其他：干净载玻片、盖玻片、无菌水、洗瓶、擦镜纸、吸水纸、二甲苯、香柏油、接种用具四、实验方法1、制备平板：将已融化的高氏一号培养基（冷却到45℃左右）倒入无菌培养皿，每皿15~20ml（厚度约为培养皿高度的一半），凝固后备用。
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【实验题目】
放线菌的形态观察
【实验目的】
1、掌握放线菌观察方法—插片法
2、了解放线菌的基本形态
【实验器材】
1、菌种：
青色链霉菌、弗氏链霉菌
2、培养基：
灭菌的高氏Ⅰ号琼脂培养基
3、仪器和用具：
显微镜、酒精灯、载玻片、盖玻片、接种环、镊子、培养皿等
【实验原理】
1．高氏I号培养基
高氏I号培养基是用来培养和观察放线菌形态特征的合成培养基。
此合成培养基的主要特点是含有多种化学成分已知的无机盐，这些无机盐可能相互作用而产生沉淀。
因此，在混合培养基成分时，一般是按配方的顺序依次溶解各成分，甚至有时还需要将二种或多种成分分别灭菌，使用时再按比例混合。
此外，合成培养基有的还要补加微量元素，如高氏I号培养基中，需要加入FeSO4。
2．放线菌
放线菌是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌。
常见放线菌大多能形成菌丝体，紧贴培养基表面或深入培养基内生长的叫基内菌丝，基丝生长到一定阶段还能向空气中生长出气生菌丝，并进一步分化产生孢子丝及孢子。
有的放线菌只产生基内菌丝而无气生菌丝。
在显微镜下直接观察时，气生菌丝在上层、基内菌丝在下层，且气生菌丝较暗，基内菌丝较透明。
孢子丝依种类的不同，有直、波曲、各种螺旋形或轮生。
在油镜下观察，放线菌的孢子有球形、椭圆、杆状或柱状。
能否产生菌丝体及由菌丝体分化产生的各种形态特征是放线菌分类鉴定的重要依据。
图1：链霉菌一般形态和构造（模式图）
1-直形，交叉分枝
2-丛生，波曲
3-顶端形成大螺旋
4-松螺旋
5,6-紧螺旋
7-短而直，轮生
图2：链霉菌属孢子丝的主要类型
3．插片法
将放线菌接种在琼脂平板上，插上灭菌盖玻片后培养，使放线菌菌丝沿着培养基表面与盖玻片的交接处生长而附着在盖玻上。
观察时，轻轻取出盖玻片，置于载玻片上直接镜检。
这种方法可观察到放线菌自然生长状态下的特征，而且便于观察不同生长期的形态。
1-盖玻片
2-琼脂层
图3
【实验内容及步骤】
1、高氏I号培养基的制备（100ml）
1)根据配方按照一定比例称取可溶性溶粉、及其他成分溶解。
2)待将所有药品溶解后，补充水分到所需的总体积，进行pH调节到7.2～7.4
3)材料灭菌：将所配溶液装在三角烧瓶中并加棉塞，棉塞外包一层牛皮纸，并用麻绳捆好，
用记号笔标记组号。
取4个平皿，包好并标记。
同理盖玻片也用牛皮纸包好，10片一包，准备4包。
将上述物品放入密封的加压灭菌锅中进行高压蒸汽灭菌121℃、20分钟。
2、插片法进行链霉菌的观察
1) 倒平板：取融化并冷至大约50℃的高氏I 号培养基分装到4个培养皿中，倒平板时尽量使培养基厚一些，凝固待用。
（可用记号笔在培养基底部画好方向）
2) 接种：待培养基冷却凝固后，无菌操作，用接种环挑取菌种在平板上密集划线接种。
（沿着之前用记号笔标注的方向进行划线接种）
3) 插片：以无菌操作用镊子将灭菌的盖玻片以大约与培养基成45°角插入平板内，并与划线垂直（即与记号笔标注的方向垂直），每个平板至少插入3个盖玻片。
4) 培养：将平板倒置，28℃下培养7天。
5) 镜检：用镊子小心拔出盖玻片，擦去背面培养物，将无菌面朝上放在载玻片上，直接镜检。
观察时，宜用略暗光线；先用低倍镜找到适当视野，再换高倍镜观察，必要时可用油镜观察。
【实验结果】
一、链霉菌形态观察记录表 菌种 基内菌丝 气生菌丝 孢子丝 青色链霉菌 菌丝较长，较疏松，
多分枝 毛状 螺旋状，末端有 弗氏链霉菌
菌丝直或折曲，较密，
多分枝
厚絮状
直链状，末端有圆形
孢子
二、镜检结果
图4：弗氏链霉菌（10*40） 图5：弗氏链霉菌局部放大图 图6：弗氏链霉菌孢子丝
基内菌丝（明）
气生菌丝（暗）
图7：青色链霉菌（10*40） 图8：青色链霉菌局部放大图 图9：青色链霉菌孢子丝
【实验小结】
1、链霉菌的菌落特征：经过镜检，可观察到放线菌菌丝呈分枝丝状，且多交错在一起，由基内菌丝、气生菌丝和孢子丝三部分组成，基内菌丝透明，有较多的分枝，而气生菌丝较暗。
两种菌丝在不同的焦平面上，可通过调节细准焦螺旋分别进行观察。
放线菌有与细菌不同的菌落特征：干燥、不透明，表面呈紧密的丝绒状，菌落和培养基的连接紧密，难以挑取菌落。
2、为何采用插片观察法：放线菌菌落小，与培养基结合较紧密，不易用接种钩挑取，因而难以直接观察。
而采用插片法，在接种放线菌的培养基一侧，以45°角插入无菌盖玻片，使放线菌沿培养基与盖玻片交界处生长，并附着于盖玻片上，待菌丝生长一段时间后，可直接取下盖玻片进行染色观察。
该方法可以进行放线菌营养菌丝、气生菌丝和孢子丝的比较观察。
3、为何采用高氏一号培养基：这是一种半合成培养基，采用可溶性淀粉为碳源、KNO3为氮源。
因为缺乏速效的碳源和氮源，该培养基的营养较为匮乏，有利于放线菌产生孢子。
同时，由于链霉菌生长较慢，因此用来培养链霉菌的培养基平板要比培养细菌的要厚一些。
4、实验操作时应注意哪些：
①倒平板要稍厚一些，接种时划线要密，最好用记号笔标好划线方向，插片时与划线方向相垂直，这样可防止插到划线的空隙上，较容易使菌丝长在盖玻片上。
②镜检时，宜用略暗光线，先用低倍镜找到适当视野，再换高倍镜观察。
③低倍镜观察时，菌面应该朝上，不然菌体会被压扁，不好观察。
换用油镜观察，要把菌面朝下，否则滴加香柏油后，菌体会滑动影响观察且会污染镜头。
【思考与讨论】
1.镜检时如何区分放线菌基内菌丝、气生菌丝及孢子丝？
基内菌丝（明）
气
生菌丝（暗）
答：在光学显微镜下观察，气生菌丝在上层、较明亮，基内菌丝在下层、颜色较暗，气生菌丝较基内菌丝粗。
有些气生菌丝发育到一定阶段在菌丝末端分化形成孢子丝。
【附录】培养基配方
高氏I号培养基（培养放线菌用）。