实验一 细胞形态细胞器的显微结构的观察
实验一细胞形态结构的观察和普通光学显微镜的使用
实验一细胞形态结构的观察和普通光学显微镜的使用引言：细胞是生命的基本单位，具有复杂的结构和功能。
观察细胞的形态结构对于深入了解生命的本质和进行生物学研究至关重要。
本实验的主要目的是通过使用普通光学显微镜观察和学习细胞形态结构的观察方法。
一、实验方法1.收集样本：从鲜植物叶片中切取小型组织样本，并将其放入显微片中。
2.准备显微片：在显微片上滴加一滴蒸馏水，然后放置样本在蒸馏水上。
3.制备盖片：将一个玻璃盖片轻轻放置在样本上方。
4.准备显微镜：打开普通光学显微镜，并将显微镜调整到最佳聚焦状态。
5.放置显微片：将显微片放入显微镜的样本托盘中，并将其轻轻固定。
6.观察样本：通过调节目镜的焦距和光源的亮度，观察样本并记录所见。
7.绘制图表：根据观察结果，绘制细胞形态结构图表。
二、实验结果1.观察细胞膜：通过放大镜镜头观察细胞膜，可以看到细胞膜呈现出一个薄膜状的结构。
细胞膜起着维持细胞形态和保护细胞内部结构的作用。
2.观察细胞核：通过调整镜头的焦距和光源的亮度，可以清晰地观察到细胞核在细胞质中的位置。
细胞核通常呈圆形或卵圆形，具有较深的染色质和一个明亮的核仁。
3.观察细胞质：细胞质是细胞核周围的液体，其中包含着细胞器如线粒体、内质网、高尔基体等。
通过调整显微镜的焦距和光源的亮度，可以清楚地看到这些细胞器。
4.观察细胞壁：在观察植物细胞时，可以通过增加显微镜的放大倍数来观察到细胞壁。
细胞壁是细胞外的一个多层结构，可以提供细胞的支持和保护。
三、实验讨论1.细胞形态结构的观察需要适当的样本处理：使用新鲜的样本可以提供更清晰的显微观察结果，因此，在进行实验前最好收集到新鲜的细胞样本。
2.调整显微镜的焦距和光源亮度是关键：观察细胞结构需要将显微镜调整到最佳的聚焦状态，并调节光源的亮度，以确保能够看到细胞结构的细节。
3.多个角度观察样本可以提供更全面的结果：在实验中，可以从不同的角度观察样本，以获得更全面的细胞形态结构信息。
细胞形态结构观察技术
固定
（固定剂，染色剂知识介绍） 固定剂的作用：穿透，固定，保形，防腐 固定剂的选择：P83
细胞内组分的差异染色。 染色剂的选择： Giemsa—染色体桃红色。 本书P84 Feulgen—DNA紫红色，细胞质绿色。鄂P141 吖啶橙—RNA红色，DNA亮绿色。本书P86 苏木精-伊红（HE)—细胞核蓝色，细胞质红色 本书P85 过碘酸席夫—细胞内含糖原区—紫红色。章P58 苏丹红III—细胞内含脂肪区—橘红色。章P59 鬼笔环肽—溦丝染色。章P59 免疫荧光法—溦管染色。章P60 联苯胺+H2O2—过氧化氢体染色。小章P37 詹纳斯绿B—活体细胞线粒体。小章P43
适用：记录细胞或细胞器连续动态变化过程 正常时态连续拍照 缩时逐格拍照 主要装备：倒置显微镜，16mm摄影机，自控 缩时启动拍摄装置。 原理：缩时间隔时间：目标物实际活动时间 X 1/24
影片排成后要求放镜时间
=3600秒 ／10秒
x 1／24=15秒
所以，每隔15秒摄取1张照片。
三、光镜下的固定细胞观察法（组胚，病理）
CCD 的三层结构：上：增光镜片、中：色块网格 下： 感应线路
由微型镜头、马赛克分色网格，及垫于最底层的电子 线路矩阵所组成
5.摄影操作： 胶片相机：p69-74(生物教研室，李相伟） 数码相机：p74-75(同上） CCD图像采集：（病理教研室，姚海涛 实验中心，刘君星）
二、缩时显微摄影术
2.LSCM的主要组成部分及工作原理 ①激光光源:氢离子激光,能同时 / 顺序 / 分别输出紫 外光和可见光
实验一 细胞的显微结构—光镜下的细胞器
二、实验原理
光学显微镜通常采用两级放大， 光学显微镜通常采用两级放大，分别由物镜和目 镜完成。被观察物体位于物镜的前方， 镜完成。被观察物体位于物镜的前方，被物镜作第 一级放大后成一倒立的实象， 一级放大后成一倒立的实象，然后此实像再被目镜 作第二级放大，成一虚象，人眼看到的就是虚像。 作第二级放大，成一虚象，人眼看到的就是虚像。 而显微镜的总放大倍率就是物镜放大倍率和目镜放 大倍率的乘积。光学显微镜一般由载物台、 大倍率的乘积。光学显微镜一般由载物台、聚光照 明系统、物镜，目镜和调焦机构组成。 明系统、物镜，目镜和调焦机构组成。
三、实验用品和试剂
②1%、1/5000詹姆斯绿B溶液 1%、1/5000詹姆斯绿B 詹姆斯绿 称取50mg詹姆斯绿B溶于5ml Ringer溶液 称取50mg詹姆斯绿B溶于5ml Ringer溶液 50mg詹姆斯绿 稍加微热（30~400C）使之溶解，用滤纸过滤后， 中，稍加微热（30~400C）使之溶解，用滤纸过滤后， 即为1%原液。 1%原液1ml加入 1%原液 原液1ml加入49ml Ringer溶液 溶液， 即为1%原液。取1%原液1ml加入49ml Ringer溶液，即成 1/5000工作液 装入瓶中备用。最好现用现配， 工作液， 1/5000工作液，装入瓶中备用。最好现用现配，以保持 它的充分氧化能力。 它的充分氧化能力。 70%酒精 ③Wright 染液 ④70%酒精 ⑤香柏油 材料：洋葱、石蜡切片、 3．材料：洋葱、石蜡切片、涂片
（示线粒体） 线粒体）
五、实验相关技术
1.石蜡切片制作基本技术 1.石蜡切片制作基本技术 石蜡切片（ section） 石蜡切片（paraffin section） 组织学 常规制片技术中最为广泛应用的方法。 常规制片技术中最为广泛应用的方法。石蜡切 片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构， 片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构，也 是病理学和法医学等学科用以研究、 是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判 断细胞组织的形态变化的主要方法， 断细胞组织的形态变化的主要方法，而且也已 相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。 相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。 光镜下观察切片标本多数是石蜡切片法制备的。 光镜下观察切片标本多数是石蜡切片法制备的。 活的细胞或组织多为无色透明， 活的细胞或组织多为无色透明，各种组织间和 细胞内各种结构之间均缺乏反差， 细胞内各种结构之间均缺乏反差，在一般光镜 下不易清楚区别出； 下不易清楚区别出；
生物易错亚显微与显微结构——显微镜观察细胞器
细胞中的结构如染色体、叶绿体、线粒体、中心体、核仁等结构的大小均超过0.2微米，用普通光学显微镜都能看到，因而这些结构属于细胞的显微结构
但是线粒体、叶绿体的内部结构需要电子显微镜观察，所以他们是亚显微结构（注意内部二字）
超微结构，又称亚显微结构。
指在普通光学显微镜下观察不能分辨清楚，但在电子显微镜下能观测到的细胞内各种微细结构（普通光学显微镜的分辨力极限约为0.2微米，细胞膜、内质网膜和核膜的厚度，核糖体、微体、微管和微丝的直径等均小于0.2微米），如各种细胞器。
生物实验观察细胞结构
生物实验观察细胞结构细胞是生物体的基本结构和功能单位，通过观察细胞结构，可以了解细胞的组成和特点。
本文将介绍一种常见的生物实验方法，用来观察细胞结构，以及相关的实验步骤和结果。
实验材料和仪器准备：1. 高倍显微镜2. 目镜和物镜3. 植物组织切片或动物组织切片4. 盐水溶液5. 盖玻片和载玻片6. 染色剂（如甲苯红、甲苯蓝）7. 镊子和显微镊8. 实验记录本和笔实验步骤：1. 取一片细胞切片放到载玻片上。
2. 使用镊子将切片浸泡在盐水溶液中，以保持切片湿润。
3. 添加染色剂到载玻片上，利用染色剂可以使细胞结构更加清晰可见。
4. 用盖玻片将切片覆盖，并轻轻压平，去除气泡。
5. 将载玻片放到显微镜的载物台上，调节目镜和物镜，逐渐增大放大倍数。
6. 观察细胞结构，并进行记录。
实验结果：通过观察细胞切片，我们可以看到细胞具有以下结构特点：1. 细胞膜：细胞膜是细胞的外包层，起到保护细胞内部结构的作用。
2. 细胞质：细胞质包括细胞膜内的细胞液和细胞器，是细胞内部的基质。
3. 细胞核：细胞核是细胞的控制中心，内含染色体和核仁。
4. 染色体：染色体携带着细胞的遗传信息，通过染色剂染色后呈现出颜色。
5. 质粒、线粒体等细胞器：细胞器是细胞体内具有特定功能的结构，如质粒、线粒体等。
根据细胞的特点，我们可以进一步观察细胞的形态和数量，以及细胞器的分布和形状等。
这些观察结果可以为我们研究生物学、医学等领域提供重要的基础信息。
结论：通过生物实验观察细胞结构，我们可以了解细胞的组成和特点，进而深入研究生物体的结构和功能。
细胞实验观察的结果对于推动生物学和医学的发展起到了重要的作用。
因此，细胞实验观察应成为学生学习生物学的重要内容之一。
总结：通过本次实验观察，我们对细胞的结构有了更深入的了解。
细胞是生物体的基本单位，每个细胞都具有独特的结构和功能。
通过观察细胞切片，我们可以看到细胞膜、细胞质、细胞核以及其他细胞器的存在。
这些细胞结构的研究对于生物科学的发展具有重要的意义，也为我们更好地理解生命的奥秘提供了线索。
3第三章 细胞形态结构的观察
第三章细胞生物学的研究方法归纳起来大体上可划分为四大类：形态观察、生化分析、生理检测、实验性操作技术。
第一节细胞形态结构的观察方法光学显微镜（light microscope ）电子显微镜（electron microscope）扫描隧道显微镜（scanning tunneling microscope）（一）普通显微镜0.2um由聚光器、物镜和目镜三部分组成。
普通显微镜最大放大倍数1000－1500倍，因为它的分辨率有限，再放大也是空放大分辨率（resolution）：能将物体相近两点分辨清楚的距离极限D代表分辨力：D= 0.61λ / N.A.λ代表光波波长；N. A. 为镜口率，也称数值孔径（Numerical aperture)。
N. A. =n·Sin α/2N:物镜与标本间介质的折射率；（1或1.515）α:镜口角（聚光焦点对物镜镜口的张角，<180º）通过公式可知光学显微镜最大分辨率0.2um，减小分辨率需减小λ显微镜的几个光学特点：介质折射率越接近镜头玻璃的（ 1. 7 ）越好。
sinα/2的最大值小于1；普通光线的波长为400~700nm，光镜分辨力约为0.2μm，人眼的分辨力为0.2mm，因此显微镜的最大有效倍数为1000X。
（二）紫外线显微镜（ultraviolet microscope）0.1um根据光学原理，光源光波越短，显微镜的分辨本领越大。
紫外线显微镜以紫外线为光源，分辨率可提高一倍。
可看到在普通光学显微镜下看不到的胶体颗粒。
可用来测定细胞中的核酸含量。
透镜：石英、萤石（CaF2)、碳酸锂等制作。
价格昂贵，使用受限。
（三）荧光显微镜（fluorescent microscope）20世纪40年代在紫外线显微镜基础上发明。
原理：细胞中有些物质，如叶绿素等，受紫外线照射后可发荧光；另有一些物质本身虽不能发荧光，但如果用荧光染料或荧光抗体染色后，经紫外线照射也可发荧光。
显微观测实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 熟悉显微镜的使用方法，掌握显微镜的构造和功能。
2. 通过观察不同生物样本，加深对细胞结构和组织形态的认识。
3. 提高实验操作技能，培养观察能力和分析问题的能力。
二、实验原理显微镜是一种利用光学原理放大微小物体的仪器。
通过显微镜，我们可以观察到肉眼无法直接看到的生物样本，如细胞、组织等。
显微镜主要由物镜、目镜、光源和载物台等部分组成。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：洋葱鳞片叶、口腔上皮细胞、人体皮肤切片等。
2. 实验仪器：显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、滴管、纱布、吸水纸等。
四、实验步骤1. 准备工作：将显微镜擦拭干净，调整光源，确保视野明亮。
2. 制作临时装片：a. 取洋葱鳞片叶或口腔上皮细胞，用镊子轻轻撕取一小块，放入载玻片中。
b. 滴一滴生理盐水或清水于样本上，用盖玻片轻轻覆盖。
c. 将载玻片放在显微镜载物台上，用镊子调整样本位置，使其位于视野中心。
3. 观察：a. 从低倍镜开始，缓慢调节粗准焦螺旋，使样本清晰可见。
b. 逐渐更换高倍镜，继续调节焦距，观察细胞和组织的形态结构。
c. 对不同样本进行观察，比较其形态和结构特点。
4. 绘图与分析：a. 用铅笔在纸上描绘观察到的细胞和组织的形态。
b. 分析不同样本的细胞结构和组织特点，总结实验结果。
五、实验结果与分析1. 洋葱鳞片叶细胞：a. 细胞呈长方形，具有明显的细胞壁和细胞膜。
b. 细胞核位于细胞中央，核仁明显。
c. 细胞质中分布着大量的淀粉粒。
2. 口腔上皮细胞：a. 细胞呈扁平状，细胞膜较薄。
b. 细胞核位于细胞中央，核仁不明显。
c. 细胞质中分布着丰富的线粒体和内质网。
3. 人体皮肤切片：a. 皮肤由表皮、真皮和皮下组织组成。
b. 表皮由多层细胞组成，细胞排列紧密。
c. 真皮富含血管和神经，细胞排列疏松。
六、实验讨论1. 通过本次实验，我们了解了显微镜的使用方法，掌握了观察细胞和组织的基本技能。
2. 观察到的细胞和组织的形态结构特点与细胞的功能密切相关。
细胞形态结构观察研究报告
CCD IMAGE SENSOR外形
彩色CCD的组成结构分图
CCD 的三层结构：上：增光镜片、中：色块 网格 下：感应线路
由微型镜头、马赛克分色网格，及垫于最底层 的电子线路矩阵所组成
4.拍摄技术步骤：
胶片相机拍摄：p69-74(生物教研室李相伟）
数码相机拍摄：p74-75(同上）
CCD图像采集： （病理教研室姚海涛
以像点的方式在计算机屏幕上形成图像。 同时，也可沿z轴方向逐渐改变焦平面，完 成对样品厚片不同层面的扫描，进行类似CT断 层扫描的无损伤连续光学切片，经计算机三维重 建处理，可形成观察标本的三维结构图形。
2.LSCM的主要组成部分及工作原理
①激光光源:氢离子激光,能同时 / 顺序 / 分别输出紫 外光和可见光
三、光镜下的固定细胞观察法（组胚，病理）
细胞器培养皿内铺盖片单层培养 细胞悬液 离心沉淀 涂片
取盖片
固定
染色
观察 拍照
（固定剂，染色剂知识介绍） 固定剂的作用：穿透，固定，保形，防腐 固定剂的选择：P83
细胞内组分的差异染色。
染色剂的选择：
Giemsa—染色体桃红色。 本书P84
Feulgen—DNA紫红色，细胞质绿色。鄂P141
上层：聚光镜片（增光镜片）
中层：一个类似马赛克的网络（分色网络）
下层：垫在下层的电子线路矩阵（感应线路
是可记录光线变化的半导体）
CCD工作方式之一：
当数码相机的快门开启，来自影像的光线穿 过，这些马赛克会让感光点的=氧化硅材料释 放出电子（正电）与电洞（负电）。经由外部 加入电压，这些电子和电洞会被转移到不同极 性的另一个硅区暂存。电子数的多寡和曝光点 所接受的光量成正比。在一个影像最明亮部位， 可有十万电子被积存起来。
细胞生物学实验本科生实验内容
细胞生物学实验（本科生）实验内容实验一细胞的结构目的：1、熟悉实验室规范2、掌握光镜下细胞器的形态、分布特点；3、掌握临时制片法；4、学会生物绘图内容：（一）录像：临时标本片的制作（二）光镜下细胞器形态学观察：1、高尔基体（兔神经节切片）2、细胞核及核仁（蝾螈表皮装片）3、线粒体（肾小管切片）4、细胞骨架（培养肝癌细胞飞片）5、中心体*（马蛔虫受精卵切片）（二）操作：制作人口腔上皮细胞临时制片（显示活体线粒体）（三）实验报告：绘制人口腔粘膜上皮细胞实验二细胞化学细胞工程目的：1、掌握甲基绿-派洛咛染色法原理及操作技巧2、了解几种化学成分的显示方法及原理；3、观察各种化学成分在细胞中的分布；4、了解PCC原理；5、了解细胞融合及其应用；内容：（一）录象：克隆羊（二）观察：1、糖原（动物肝切片，PAS反应）2、酸性蛋白（蟾蜍血涂片，酸性固绿染色）3、酸性磷酸酶*（鼠腹腔液涂片，金属沉淀法显色）4、DNA* （小鼠睾丸切片，Feulgen反应）5、DNA、RNA*（人口腔粘膜上皮细胞涂片，吖啶橙染色，荧光显微镜观察）6、细胞融合（鸡血细胞、培养细胞）7、PCC*（Hela细胞）（三）操作：制作蟾蜍血涂片，显示DNA、RNA（四）实验报告：甲基绿-派洛咛染色原理、步骤及结果实验三显微测量细胞的生理活动目的：1、掌握显微测量技术；2、观察细胞的生理活动；3、掌握死活细胞的鉴别方法及原理；内容：(一)录象：细胞的活动显微测量（二）观察：1、胞质环流（黑藻叶片）2、吞噬作用*（小鼠白细胞）3、吞噬作用（蟾蜍白细胞）（三）操作：1、显微测量（蟾蜍红细胞）2、死活细胞鉴别（酵母细胞）（四）实验报告：1、测量5-10个细胞的大小，计算平均值；2、计算细胞存活率。
实验四细胞增殖染色体（质）目的：1、熟悉细胞增殖的主要方式；2、掌握细胞增殖周期各期的形态学特点；3、熟悉人染色体的基本形态特征；4、掌握X染色质标本的制备方法及原理；内容：（一）观察：1、动物细胞有丝分裂（马蛔虫受精卵切片）2、植物细胞有丝分裂（洋葱根尖纵切片）3、收缩环*（肝癌细胞飞片）4、无丝分裂*（草履虫装片）5、人染色体的基本形态（人血涂片）（二）操作：1、制作有丝分裂压片（洋葱根尖）2、制作X染色质标本片（人口腔粘膜上皮细胞）（三）实验报告：绘有丝分裂图、X染色质图。
显微镜的使用以及细胞、细胞器的观察
华中科技大学生命科学与技术教学实验中心
光学显微镜成像原理
数值孔径（NA，镜口率）：光线投射到物镜上的 最大开口角度一半的正弦乘上标本与物镜间介 质的折射率的乘积。 NA=n•sinα/2 n为介质的折射率， α为镜口角。
分辨率：能分辨被检物体细微结构最小间隔的能力。 D=0.61λ/NA
λ为波长。数值孔径越高，分辨率越高。 放大率：最终成像大小与原物体大小的比值。 总放大倍数＝物镜的放大倍数×目镜的放大倍数
物镜的镜口角=AOB
华中科技大学生命科学与技术教学实验中心
其它光学显微镜
倒置显微镜(invertcd m1Lfoscope) 是普通光学显微镜的一个类型，倒置显微 镜有几个特点不同于普通生物显微镜。
1） 透射光倒置显微镜的光源和聚光器位于 载物台的上方，照明光源自上方向下照射；
2） 物镜安装在载物台的下方，向上对焦； 3） 物镜、聚光镜以及其他光学具组均适用
华中科技大学生命科学与技术教学实验中心
其它光学显微镜
OLYMPUS－1X51荧光显微镜
荧光显微镜是荧光显微术的基本装 置。荧光显微术是利用一定波长的光 （通常是波长短的紫外光和蓝紫光）照 射被检样品，激发荧光物质发出可见的 荧光。通过物镜和目镜的成像、放大， 以供检视和拍摄。荧光显微镜具特殊光 源，提供足够强度和波长的激发光，诱 发荧光物质发出荧光。视场中所见的像， 主要是样品的荧光映像。
细胞及细胞器形态的观察
【实验目的】 【实验用品】 【实验内容】
河南中医学院 基础医学院 实验教学中心 显微形态实验室
《基础形态实验》 基础实验
实验二 细胞器的结构 【实验目的】 1 通过观察、分析电子显微镜图片，掌握几种主要细胞器的
形态结构特点。 2 了解人类染色体标本的制备方法。 3 掌握人类染色体的数目及形态特征 。
《基础形态实验》 基础实验
《基础形态实验》
河南中医学院 基础医学院 实验教学中心 显微形态实验室
《基础形态实验》 基础实验
欢迎同学们来到 “显微形态实验室”
河南中医学院 基础医学院 实验教学中心 显微形态实验室
《基础形态实验》 基础实验
显微形态实验室
基本要求 1.显微镜为精密仪器，应严格按照操作规范使用。 2.组织切片为易碎材料，应放置于指定位置，规范使用。 3.显微镜观察室严禁喧哗，有问题需举手示意，然后提问。 4.实验作业（绘图）写在实验报告册上，当堂交给带课老师。
河南中医学院 基础医学院 实验教学中心 显微形态实验室
《基础形态实验》 基础实验
实验二 细胞器的结构 【实验用品】
电镜下细胞器图片。
河南中医学院 基础医学院 实验教学中心 显微形态实验室
《基础形态实验》 基础实验
实验一 细胞的基本结构 【实验内容】
动物细胞电镜图片观察
河南中医学院 基础医学院 实验教学中心 显微形态实验室
动物细胞电镜图片观察
河南中医学院 基础医学院 实验教学中心 显微形态实验室
《基础形态实验》 基础实验
实验一 细胞的基本结构 【实验内容】
动物细胞电镜图片观察
河南中医学院 基础医学院 实验教学中心 显微形态实验室
《基础形态实验》 基础实验
实验一细胞的显微结构-光镜下的细胞器
记录观察结果
记录
详细记录观察到的细胞器形态、大小、 分布和染色特点。
分析
根据观察结果，分析细胞器的功能和 在细胞中的地位。
04
实验结果与分析
观察到的细胞器种类和形态特征
细胞器种类
实验观察到了线粒体、高尔基体、内质网、溶酶体、中心体等细胞器。
形态特征
线粒体呈现为圆形或椭球形，高尔基体呈现为扁平的囊状结构，内质网呈现为网状结构，溶酶体呈现为圆形或卵 圆形，中心体呈现为圆形小体。
根据实验需求选择适当的染色剂，如苏木精-伊红染色剂用于 显示细胞组织的一般结构。
染色过程
将染色剂与细胞样本混合，确保染色均匀，然后用水冲洗掉 多余的染色剂。
在显微镜下观察细胞器
放置样本
将染色后的细胞样本放置在载玻片上，用盖玻片轻轻覆盖。
观察
通过显微镜观察细胞器的形态和分布，注意不同细胞器的特征和差异。
对实验过程的反思与改进建议
反思
在实验过程中，我们需要注意实验操作和观察的准确性，避免因操作不当导致观察结果 出现误差。同时，还需要注意实验过程中的安全问题，如避免使用过于尖锐的刀片等。
改进建议
为了提高实验效果，我们可以更加细致地观察细胞器的形态和分布，同时加强对实验原 理和操作步骤的理解和掌握。此外，我们还可以尝试采用其他实验方法和技术来进一步
解细胞的显微结构。
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与理论知识的对比分析
实验结果与理论知识基本一致，实验中观察到的细胞器种类 、形态特征和功能均符合理论描述。这表明实验操作正确， 观察结果可靠。
实验中可能存在一些误差，如细胞器的形态特征可能受到细 胞固定和染色等因素的影响，导致观察结果与理论不完全一 致。因此，需要进一步优化实验条件和方法，提高实验结果 的准确性。
高中一年级生物观察实验细胞结构
高中一年级生物观察实验细胞结构细胞是生物体的基本单位，具有复杂而精密的结构。
为了更好地理解细胞的结构和功能，实验是一种非常有效的方式。
本文将介绍一种适用于高中一年级生物的细胞观察实验方法，以及实验的步骤和观察结果。
实验材料和设备：1. 镜片和载玻片2. 显微镜3. 细胞物质样本（如洋葱片、鳃组织等）实验步骤：1. 准备工作：将显微镜放在平稳的台面上，打开光源，调节放大倍数为低倍。
2. 取一个洋葱片：用刀切取一个洋葱的叶片，并将其切成约1cm ×1cm的小块。
3. 准备玻片：取一个玻片，用酒精棉球擦拭玻片的表面，使其无尘。
4. 取细胞物质样本：用镊子将洋葱片的一小块放置在载玻片上，轻轻压碎洋葱片，使细胞释放出来。
5. 加水：在载玻片上加一滴水，以保持细胞的湿润。
6. 覆盖玻片：将另一个玻片倾斜地放在载玻片上，使之与载玻片上的细胞样本完全接触。
7. 观察细胞：将装有细胞样本的载玻片放在显微镜的台面上，用夹子夹住载玻片，调节镜头，观察细胞的结构。
观察结果及分析：通过实验观察，我们能够观察到细胞的不同结构和组成部分：1. 細胞膜：细胞的外部覆盖物，起着保护细胞的作用。
2. 细胞核：位于细胞的中心，包含着细胞的遗传物质——DNA，控制着细胞的生长和分裂。
3. 线粒体：细胞内的“动力站”，负责产生细胞所需的能量。
4. 内质网：细胞内的管道系统，参与蛋白质的合成和转运。
5. 高尔基体：细胞内的“包装站”，参与蛋白质的修饰和包装。
6. 液泡：细胞内的小囊泡，储存细胞的物质和废物。
7. 叶绿体：植物细胞中特有的结构，参与光合作用，将阳光转化为能量。
实验小结：通过本次实验，我们成功观察到了细胞的结构和组成。
细胞是生物体最基本的单位，其复杂而精密的结构决定了生物体的功能和特性。
通过观察细胞的不同结构和组成，我们可以更深入地理解细胞的功能和作用。
这对于高中生物教学具有重要意义，也有助于学生对生命科学的兴趣和理解。
2014细胞生物学实验课内容（细胞形态观察、细胞器活体染色、细胞骨架观察）
2014细胞生物学实验课内容（细胞形态观察、细胞器活体染色、细胞骨架观察）第一篇：2014 细胞生物学实验课内容(细胞形态观察、细胞器活体染色、细胞骨架观察)实验三细胞形态的观察【实验目的】1.认识光学显微镜下细胞的形态结构；2.掌握临时制片和显微绘图的方法。
【材料、器材和试剂】材料：人体口腔黏膜上皮细胞、洋葱鳞茎；器材：显微镜、剪刀、镊子、载玻片、盖玻片、牙签、滤纸；试剂：1%碘液。
【方法和步骤】1.口腔黏膜上皮细胞的制片与观察口腔黏膜细胞涂片标本的制备：吸取一滴碘液滴在一张洁净的载玻片中央，用一根事先灭菌的牙签伸入自己的口腔内壁轻轻刮取黏膜上皮细胞，然后，将其放入载玻片上的染液中并来回搅动使细胞散开，染色1 min左右后小心加盖玻片（尽量避免产生气泡），用滤纸吸去盖玻片周围的液体。
观察：将自制的口腔黏膜上皮细胞标本装片置于显微镜下观察，先用低倍镜观察较分散的、轮廓清晰的黏膜上皮细胞。
由于该细胞体积较小、着色较淡，观察时应稍降低视野亮度以便于较快找到目标（在低倍镜下，用碘液染色的细胞呈黄色，成群或分散分布，形态大小多呈扁平椭圆形）。
选择轮廓清晰的细胞移至视野中央，转换至高倍镜下观察。
在高倍镜下，可见口腔黏膜上皮细胞外围有一层薄薄的细胞膜，扁圆形的细胞核呈深黄色，细胞质呈浅黄色或浅蓝色，核中央致密的结构为核仁。
2.洋葱鳞茎内表皮细胞的制片与观察表皮细胞装片标本的制备：取一干净载玻片，在其中央滴一滴碘液，将洋葱鳞茎用小刀分为几块，取一块肉质鳞叶，用剪刀在内表皮划“田”字形小方格，每一小方格边长3-4mm，然后用镊子轻轻撕下一小方格的膜质表皮，置于载玻片的碘液滴中铺平，取一干净的盖玻片，将其一侧先接触标本旁的碘液，再缓缓地盖上盖玻片，尽量避免产生气泡，用滤纸吸去盖玻片周围的液体。
观察：将制备好的装片标本放到显微镜下，先用低倍镜观察，可见许多长柱状、排列整齐、彼此相连的细胞，选择其中一个典型的细胞移至视野中央，再转换至高倍镜下仔细观察细胞壁、细胞核、细胞质和液泡等结构。
实验一 细胞形态及细胞器的观察
1.2 放大镜：约在四百年前眼镜片工匠们开始磨制 放大镜。当时的放大镜的放大倍数只有3—5x 1.3 显微镜： 1590年，荷兰和意大利的眼镜制造者造出类似显 微镜的放大仪器。 1673～1677年期间，列文胡克制成单组元放大镜 式的高倍显微镜 19世纪70年代，德国人阿贝奠定了显微镜成像的 古典理论基础。 1850年出现了偏光显微术； 1893年出现了干涉显微术； 1935年荷兰物理学家泽尔尼克创造了相衬显微术 ，
3.9工作距离
工作距离也叫物距，即指物镜前透镜的表面 到被检物体之间的距离。 在物镜数值孔径一定的情况下，工作距离短孔 径角则大。 数值孔径大的高倍物镜，其工作距离小。
提高显微镜分辨率的方法：
（1）增大物镜的数值孔径 在物镜和盖玻片之间充以n 较大的油，如香柏油n =1.52,不仅使n 增大，而且孔径角 也增大。 （2）用短波长的光照射 如紫外光显微镜，电子显微镜。
观察细胞及细胞器的形态
口腔上皮细胞
洋葱表皮鳞状细胞
植物和动物细胞形态差别
动植物细胞都可以观察到细胞核 动物细胞没有细胞壁（形状不规则） 植物细胞具有细胞壁（形状较为规则）
洋葱根尖细胞
细胞有丝分裂
根据细胞形态结构的变化，将有丝分裂人为地划 分为6个时期： 前期(prophase)、前中期(premetaphase)、中期 (metaphase)、后期(anaphase)和末期 (telophase)、胞质分裂。
3 显微镜的几个基本概念
3.1 光源：能发射光波的物体。 可见光频率范围：7.5×1014 - 3.9×1014 Hz。 真空中对应的波长范围：390nm – 760nm 相应光色：紫、蓝、青、绿、黄、橙、红
3.2分辨率(鉴别距离)：显微镜能分辨的最小距离，用 D表示。显微镜的鉴别距离越小，分辨率越高。 D=0.61λ / nsin D：分辨率 λ :光波的波长 N:介质折射率 α :物 镜镜口角 3.3孔径角：由标本上一点发出的进入物镜最边缘光线 L和进入物镜中心光线OA之间的夹角称为孔径角。 3.4数值孔径：N·A = nsin , 叫物镜的数值孔径 。 数值孔径与显微镜的分辨率有密切关系，越短 ，NA越大，分辨率越高。
实验1-植物细胞的基本形态与结构
植物细胞的结构与功能是相互关联的，未来可以通过深入研究不同植物 细胞的结构特点与功能特性，来揭示植物细胞结构与功能之间的内在联 系和规律。
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组成
主要由磷脂和蛋白质组成，具有 选择透过性。
功能
控制物质进出细胞，维持细胞内环 境的相对稳定。
特点
具有一定的流动性和选择透过性， 能够根据需要调节物质的进出。
细胞质
组成
包括细胞质基质和细胞器，如线粒体、叶绿体、核糖 体等。
功能
进行细胞内的各种生化反应，维持细胞的正常生理功 能。
特点
呈半透明的胶状物质，其中含有多种酶和细胞器，是 细胞代谢的主要场所。
实验1植物细胞的基本形态与结构
目录
• 引言 • 植物细胞的基本形态 • 植物细胞的基本结构 • 植物细胞的特殊结构 • 植物细胞的生理功能 • 实验步骤与操作 • 数据记录与分析 • 结论总结与讨论
01 引言
实验目的
掌握植物细胞的基本 形态和结构特征。
学会使用显微镜观察 植物细胞的基本方法。
了解植物细胞的显微 结构和亚显微结构。
功能
液泡对细胞内的环境起着调节作用，能维持细胞的渗透压和膨压，同时也与植物 的代谢活动密切相关。此外，液泡还能贮存和分解细胞内的某些物质。
05 植物细胞的生理功能
物质运输功能
细胞膜的选择透过性
控制物质进出细胞，维持细胞内部环境的相对稳定。
细胞质流动
促进细胞内的物质运输，将营养物质和代谢废物运送到细胞的不同 部位。
图。
注意事项及安全规范
操作规范
使用显微镜时要轻拿轻放，避免损坏镜头； 盖玻片要轻放，防止产生气泡。
实验一显微镜的使用及植物细胞的基本结构
实验一显微镜的使用及植物细胞的基本结构实验名称：显微镜的使用及植物细胞的基本结构实验目的：1.掌握显微镜的使用方法和注意事项；2.了解植物细胞的基本结构特征。
实验器材：显微镜、载玻片、盖玻片、草叶、切片刀、切片夹、蒸馏水、盐水溶液。
实验步骤：1.准备草叶和显微镜。
将一片新鲜的草叶放入1%的盐水溶液中浸泡片刻。
2.将一张载玻片拿起放在平坦的桌面上，取一片已经与盐水溶液的草叶，用切片刀切取一块足够薄的组织，并小心放在载玻片上。
3.盖上盖玻片，然后在载玻片上滴加一两滴蒸馏水。
4.将载玻片放到显微镜物镜下，调节电源开关，调焦器和照明系统，观察植物细胞的基本结构。
实验原理：显微镜是一种用透镜或反射镜放大显微物体的仪器。
在显微镜的使用中，需要进行以下步骤：1.准备样本：选择一个适当的植物组织，将其切割成薄片。
用盐水溶液进行浸泡，以保持组织的活性和细胞的形态。
2.制作载玻片：将样本放在载玻片上，然后盖上盖玻片。
3.调节显微镜：打开显微镜电源开关，调节照明系统并通过显微镜调焦器使样本清晰。
4.观察样本：用低倍镜先观察样本的整体结构，然后再用高倍镜观察样本的细节。
结果分析：通过显微镜观察植物细胞，可以看到细胞膜、细胞壁、细胞质、细胞核以及细胞器等结构。
细胞膜是细胞的外包层，起控制物质进出的作用，细胞壁是位于细胞膜外侧的结构，提供细胞的保护和机械支撑，细胞质是细胞核外的胞质区，包含各种细胞器，细胞核是细胞的控制中心，包含遗传物质和调控细胞活动的基因。
实验总结：通过这个实验，我们学会了使用显微镜和观察植物细胞的基本结构。
显微镜是一种非常有用的工具，可以帮助我们观察到微小的细胞和细胞器，进一步了解生物组织和细胞的结构和功能。
同时，了解细胞的基本结构对于后续的生物学学习也是非常重要的基础知识。
细胞生物学实验报告记录
细胞⽣物学实验报告记录细胞⽣物学实验报告记录————————————————————————————————作者：————————————————————————————————⽇期：实验⼀：细胞的形态观察及其⼤⼩测量⼀、实验⽬的：1、通过对原核和真核各种形态细胞的光学显微镜观察，了解细胞的形态及其显微结构；2、学习显微测量的⽅法，对细胞的⼤⼩有⼀直观认识。
⼆、实验材料和仪器：⼩⽩⿏肝细胞切⽚；鸡⾎红细胞；蚕⾖叶⽚横切⽚；普通光学显微镜；⽬镜测微尺；镜台测微尺；载玻⽚；盖玻⽚。
三、实验步骤：(⼀)细胞形态观察l、动物细胞的观察（1）⼈肝细胞切⽚：在显微镜下仔细观察肝细胞的形态构造。
（2）鸡⾎细胞涂⽚的观察：观察⾎细胞的组成；红细胞、⽩细胞、⾎⼩板的形态特点。
2、植物细胞的观察（1）取蚕⾖叶⽚横切⽚的观察：注意表⽪细胞和叶⾁细胞的基本结构。
（⼆）细胞的⼤⼩和测量1、卸下⽬镜的上透镜，将⽬镜测微尺刻度向下装在⽬镜的焦平⾯上，再旋上⽬镜的上透镜。
2、将镜台测微尺刻度向上放在镜台上夹好，使测微尺分度位于视野中央。
调焦⾄能看清镜台测微尺的分度。
3、⼩⼼移动镜台测微尺和转动⽬镜测微尺(如⽬镜测微尺分度模糊，可转动⽬镜上透镜进⾏调焦)，使两尺左边的⼀直线重合，然后由左向右找出两尺另⼀次重合的直线。
4、记录两条重合线间⽬镜测微尺和镜台测微尺的格数。
按下式计算⽬镜测微尺每格等于多少µm：镜台测微尺的格数⽬镜测微尺每格的微⽶数=—————————× 10⽬镜测微尺的格数四、实验结果：1、⽬镜校正：40倍显微镜⽬镜测微尺每格的微⽶数=17/70=0.242、细胞⼤⼩的测量：测量次数细胞种类⼀/um ⼆/um 三/um 平均/um⼈肝细胞（10×19.44×21.3618.00×18.96 16.32×19.68 17.92×20.0040）⾎红细胞（10×7.20 7.68 7.68 7.5240）⾎⽩细胞（10×9.12 9.60 9.84 9.5240）⾎⼩板（10×10） 1.44 1.44 1.44 1.44栅栏组织（10×9.12×79.20 10.08×81.1210.56×80.649.92×80.3240）五、作业与思考：1、⾎细胞按含量⾼低，主要含有：红细胞，⽩细胞，⾎⼩板。
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2. 显微镜的调节
瞳距调节
屈光度调节
调节
粗调松紧调节旋钮
聚光镜中心调节
②10X物 镜
①标 本
④ 聚光镜升降 旋钮
③ 孔径 光栏
⑤ 光轴中心调节 螺钉
③ 视场 光栏
孔径光栏调节
N.A聚=(0.6-0.8)N.A物
孔径光栏开度与图象
100% 70% 30%
孔径光栏的运用
操作步骤如下:
(1）可变光栏的中心对准聚光镜的中心。如果可变光栏的水 平是固定的，则装配时已保证它与聚光镜合轴，不必调整;如果 可变光栏的水平位置可以移动，则应把可变光栏关到最小，使它 的中心孔对准聚光镜下方的透镜中心。
五、 实验步骤
(一)显微镜的使用 1. 观察前的准备工作
(1)观察者要养成显微镜镜检的工作习惯，观察时要双 眼同时睁开，一边观察一边进行记录或描绘。
(2)观察时所用的材料、药品和各种器具要预先准备好。 (3)显微镜在使用之前应检查一下它的各个部件是否完整
和正常，并对载物台、目镜、物镜以及聚光器上端透 镜进行必要的清洁工作。然后进行合轴调节。
(2) 兔肝细胞苏木精-伊红(H·E·)染色玻片标本的观察
先在干燥系物镜下观察肝小叶的概况，辨认肝细胞，然后用油镜仔细 观察肝细胞的显微结构。注意肝细胞的形状，细胞核和核仁的形状和数 量，细胞核和细胞质的染色区别等。
（二）观察标本
六、注意事项 1.低、高倍镜的使用。 2.合轴调节。
七、实验报告 1.描绘一个所观察细胞的基本形态结构。 2.绘图比较所观察到的不同的细胞形态与结构。 3.简述显微镜的主要结构和操作要领。 4.熟练显微镜的调节。
(2)载物台上放置观察标本，把聚光器上升到它上端透镜平 面稍低于载物台平面的高度，并将它的可变光栏开到最大，用低 倍物镜，进行调焦到能看见标本，可调反射镜使视野得到最亮和 最均匀 的照明，或把光栏关小，最亮的照明区正处在视野的中 央。
(3)转到高倍镜，并调焦到看清标本，然后去掉标本，拔出 目镜，眼睛直接向镜筒观察，并把可变 光栏关小，看其亮点是 否在视野中心，如果不是，就要转动聚光器的调节螺旋，把亮点 调到视野中 央，再慢慢开启可变光栏，使视野看到光栏边缘和 聚光镜的边缘相接为止。
N·A·=n·sina/2
式中D为分辨率，A为光波波长， n=介质折射率；α=镜口角（标本对 物镜镜口的张角）， N·A·为物镜的数值孔径(镜口率)。镜口角总是要小 于180˚，所以sina/2的最大值必然小于1。
在物镜上，有镜口率(N.A.)的标志，它反应该镜头分辨力的大小，其数 字越大，表示分辨率越高，各物镜的镜口率如下表：
厚度，必须调节螺旋仔细地从上到下进行观察。
厚标本和薄标本
4 - 5 um
2um
基础知识
三、显微镜概述
显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同，可分为 光学显微镜和电子显微镜两大类。前者以可见光（紫外线显 微镜以紫外光）为光源，后者则以电子束为光源。
1.光学显微镜
普通生物显微镜由3部分构成：
①照明系统：包括光源和聚光器。
荧光显微镜和普通显微镜有以下的区别：
1.照明方式通常为落射式，即光源通过物镜 投射于样品上。
2.光源为紫外光，波长较短，分辨力高于普 通显微镜。
3.有两个特殊的滤光片，光源前的用以滤除 可见光，目镜和物镜之间的用于滤除紫外线， 用以保护人目。
4. 激光共聚 焦扫描显微镜 （具有高分辨 率可进行显微 断层扫描）
普通光线的波长为400~700nm，因此显微镜分辨力数值不会小于 0.2μ m，人眼的分辨力是0.2mm，所以一般显微镜设计的最大放大倍 数通常为1000X。
显微镜的分辨率: 也称为分辨力，它是指能把两个物点辨清的最小距离，
分辨距离越大，则分辨率越低。所以，分辨率是以分辨
距离来表示的。
其计算公式为: D=0.61λ/N·A
实验一 细胞形态、 细胞器的显微结构的观察
一、实验目的
1.了解普通光学显微镜的工作 原理，掌握光学显微镜的使 用方法。
2.熟悉光学显微镜下细胞的基 本形态与结构。
二、实验原理
细胞是生物体的基本结构单位。构成生 物机体的细胞是多种多样的。要对细胞进行 研究，首先要从其形态结构人手。所以，要 借助显微镜的成像及放大原理，在显微镜下， 才能观察到细胞的基本形态结构。
LCSM照片 蓝色为细胞核，绿 色为微管
（能观察活细胞）
5.暗视野显微镜
暗视野显微镜（dark field microscope）的聚光镜中央有当 光片，使照明光线不直接进人物镜，只允许被标本反射和衍射的光 线进入物镜，因而视野的背景是黑的，物体的边缘是亮的。利用这 种显微镜能见到小至 4-200nm的微粒子，分辨率可比普通显微镜高 50倍。
物镜
镜口率(N.A.)
工作距离(mm)
10×
0.25
5.40
40×
0.65
0.39
100×
1.30
0.11
显微镜的总放大倍数等于目镜和物镜放大倍数的乘积，
公式为: M = K1xK2
焦点深度: 显微镜调焦到看清标本某一点时，不仅是这一物点，而且它的
上下两侧也能看清楚两侧的厚度叫做焦点深度。看到标本的全
②光学放大系统：由物镜和目镜组成，
是显微镜的主体。
③机械装置：用于固定材料和观察方便，
包括镜台(载物台) 、调节器和、
物镜转换器(旋转器)等。
尼康E-600显微镜 基础知识
2.体视显微镜（可直接进行解剖及观察并具有正像立体感）
3.荧光显微镜
尼康E800荧光DIC显微镜
荧光显微镜照片（微管呈绿 色、微丝红色、核蓝色）
经物镜形成倒立实像，经目镜进一步放大成像。
显微镜物象是否清楚不仅决定于放大倍数，还与显微镜的分辨力有关。
制作光学镜头所用的玻璃折射率为1.65~1.78，所用介质的折射率越 接近玻璃的越好。对于干燥物镜来说，介质为空气，镜口率一般为 0.05~0.95；油镜头用香柏油为介质，镜口率可接近1.5。
6.相差显微镜
一种介壳虫的染色体
7. 偏光显微镜（对于双折射物质进行结构研究）
偏光显微镜（polarizing microscope）用于检测具有双折射性的物 质，如纤维丝、纺锤体、胶原、染色体等等。
8.微分干涉差显微镜（图像具有浮雕感）
DIC显微镜其优点是能显示结构的三维立体投影影像。与相差显微 镜相比，其标本可略厚一点，折射率差别更大，故影像的立体感更强。
3. 观察操作：
(1) 低、高倍镜的使用: 先把低倍的物镜用粗调焦螺旋下降至离盖玻片 0.5cm处，然后一边观察视野一边上升物镜，直至看到图像，再将标本移 到视野中心，用细调焦螺旋把物镜调至最清晰处，若要用高倍镜观察时， 把所要进一步放大观察的部位移至视野中央，直接顺时针转换成高倍物镜， 然后用细调焦螺旋调焦，至看清物像。
DIC显微镜下的 硅藻（伪彩色）
9. 倒置显微镜（组织培养中长工作距离的）
组成和普通显微镜一样， 只不过物镜与照明系统颠 倒，前者在载物台之下， 后者在载物台之上（右 图），用于观察培养的活 细胞，具有相差物镜。
ห้องสมุดไป่ตู้
10. 显微操作技术
尼康NT-88NE显微操作/注射 仪
四、实验用品
各种组织切片