牛奶中抗生素残留的几种常用检测方法
牛奶中的抗生素残留检测方法研究进展
牛奶中的抗生素残留检测方法研究进展3.1微生物检测法微生物检测法是应用较广泛的方法，其测定原理是根据抗生素对微生物的生理机能、代谢的抑制作用,来定性或定量确定样品中抗微生物药物残留，如纸片法（PD）、TTC法、拭子法（STOP）等。
采用传统的微生物检测方法，缺点是：(1)时间长；(2)显色状态判断通过肉眼辨别，易产生误差，对微红色者无法做出准确判断；(3)操作复杂。
优点是费用低，一般实验室都能操作。
其中，纸片法和TTC法是牛奶中药物残留检测的两种常用的微生物检测法。
3.1.1纸片法纸片法，即PD法(Paper Disc)。
常用的纸片法有枯草杆菌纸片法和嗜热脂肪杆菌纸片检测法。
这两种方法主要用来检测牛奶中的β－内酰胺类抗生素，其操作过程基本相同，而选用的菌种不同。
枯草杆菌纸片法检测的结果易出现假阳性，为了确定阳性物质是否为青霉素（或β－内酰胺类），对加热后的乳样用青霉素酶处理，以灭活乳样中的青霉素。
然后再行检测，检测限可达0.01 IU/mL。
而嗜热脂肪杆菌纸片检测法不仅用于检测奶样中β－内酰胺类抗生素，并能暗示是否还存在其它抑菌物质，检测限可达0.008 IU/mL以下。
一般在4h 内即可获得结果。
因此，在实践中嗜热脂肪杆菌纸片法比枯草杆菌纸片法应用更为广泛。
此外，神保胜彦(1991)对纸片法作了进一步研究和改进。
改进后的纸片法不仅能够确定抗生素的种类，而且提高了检出率和准确性，氯霉素最低检出量0.01mg/kg，土霉素0.05mg/kg，链霉素1mg/kg，红霉素0.05mg/kg，青霉素0.0025mg/kg。
3.1.2 TTC法TTC法，即氯化三苯基四氮唑法( tripheye tetrazolium chloride)，是目前我国食品卫生标准中规定的检查牛乳中抗生素残留的检测方法(GB5409—85)。
该法简便、快速，无需特殊设备，3～4h可见报告，很适合牧场、乳品厂及食品卫生检测部门采用。
牛奶中抗生素残留的检测方法
doi:10.19369/j. cnki. 2095 — 9737.2021.04.043牛奶中抗生素残留的检测方法范松阳(黑龙江省地质矿产实验测试研究中心，黑龙江哈尔滨150000)摘要：牛奶等乳制品中如果残留抗生素既会导致品质变差，严重时还会对发酵乳制品的生产造成影响，使其产量降低，并导致后期产品风味变差，损害生产者的经济效益，同时人们摄入后会 严重危害健康，如导致人体发生过敏反应（过敏性休克、皮疹等），使肠道中有益菌的生长被抑制，而致病菌、念珠菌等大量增殖，引起局部或者全身感染，还会使人体对抗生素形成抗药性，明显加大临床治疗难度。
现概述奶牛中抗生素残留的检测方法，供参考。
关键词：牛奶；抗生素残留；检测方法中图分类号：T S252. 7 文献标识码：B文章编号2095—9737(2021)04 —0074 —021理化检测法1.1检测原理该法主要是根据抗生素分子的性质，使用相 关实验仪器对其进行分离检测。
分离时常用的实 验技术为电泳检测或者色谱检测等，检测时常用 的实验技术为紫外检测、化学发光检测、荧光检测 或者质谱检测等。
1.2优缺点该法具有精确可靠、重复性好、检测灵敏、分 离效率高、结果稳定的特点，属于检测抗生素残留 的一种精确方法。
2微生物检测法该法是检测牛奶抗生素残留时应用比较广泛 的经典方法，主要有氯化三苯基四氮唑法（T TC 法）、纸片法、管蝶法以及试剂盒法等。
2.1检测原理主要是根据抗生素对微生物的机能、生理代 谢产生的抑制作用来对样品中残留抗微生物药物 进行定性。
2.2优缺点这种检测方法具有费用低、操作简单、结果可 靠、不需使用高级实验设备的优点，可应用于普通 养殖场及实验室。
但由于需要进行微生物培养，因此有相对较长的检测时间，无法实现定量检测，不可检测出某些抗生素的最低限。
2.3常用方法2.3. 1T TC 法将9m L灭菌脱脂乳中接种提前制备好的嗜热链球菌菌种，放人3 6±1C恒温培养箱中经过15 h活化，然后对脱脂乳按1 〇 1比例进行稀释制 成测试菌液。
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法牛奶是人们日常生活中常见的食品，其中所含的营养物质不仅能够滋养身体，还有助于提高体质和免疫力。
然而，由于养殖过程中存在着防疫和治疗等需要用到的药物，这些药物残留在牛奶中，可能会对人体造成不良影响，尤其是抗生素类药物。
抗生素残留对人体健康的危害抗生素是治疗疾病的重要药物，但如果残留在食品中，就可能造成对人体健康的危害。
抗生素残留可能会引起一系列不良反应，比如过敏、消化系统不适、免疫力下降、对药物产生抗拒性等，甚至会导致肝脏、肾脏等重要器官的损害。
为了确保牛奶中不存在抗生素残留，需要进行检测。
以下是常见几种抗生素类药物的残留检测方法：1. 青霉素类药物的残留青霉素类药物是公认的大肠杆菌等细菌感染的有效抗菌药物，但残留在食品中对人体有害。
目前，青霉素类药物的检测方法主要包括高效液相色谱法、液相色谱-串联质谱法、酶联免疫分析法和生物传感器等方法。
其中，高效液相色谱法和液相色谱-串联质谱法的检测精度高，并且具有较高的灵敏度和准确性。
2. 地塞米松的残留地塞米松是一种合成类地方性免疫耐受调节剂，主要应用于牲畜的体外免疫调节和兽医治疗。
但如果过量使用，就可能导致地塞米松在动物身体中的残留，从而污染牛奶等食品。
地塞米松的检测方法主要包括酶免疫测定、高效液相色谱等。
其中，酶免疫测定是一种速度快、操作简单、灵敏性好和准确性高的方法。
金霉素是一种广谱抗生素，用于治疗猪、牛等家畜的肺炎、败血症和伤寒等疾病，残留在食品中会引起人体过敏等不良反应。
金霉素的检测方法主要包括酶免疫分析、薄层色谱法、气相色谱法等。
其中，酶免疫分析是一种特异性好、检测范围广的方法。
总结在现代食品安全监管中，控制抗生素残留已经成为一个重要的问题。
对于牛奶中的抗生素残留，需要通过科学的检测和监管手段来避免对人体健康造成影响。
只有保证牛奶食品的安全和质量，才能让人们吃得更健康，饮得更放心。
鲜乳中抗生素残留量测定原理(一)
鲜乳中抗生素残留量测定原理(一)鲜乳中抗生素残留量测定引言鲜乳是我们日常饮食中重要的一部分，然而，为了保护牛群健康和提高产量，农民普遍使用抗生素来预防和治疗乳牛疾病。
尽管抗生素在牛体内被分解和排除，但仍有可能在牛奶中残留一定量的抗生素。
因此，针对鲜乳中抗生素残留量的测定显得尤为重要。
测定原理鲜乳中抗生素残留的测定可以采用多种方法，其中一种常用的方法是高效液相色谱（HPLC）法。
高效液相色谱（HPLC）法HPLC法运用液相对样品进行分离和测定，通过测定样品中特定化合物的浓度来确定抗生素的残留量。
具体步骤如下：1.样品预处理：首先，将鲜乳样品与适量的溶剂混合，使抗生素的分子从样品中转移到溶剂中。
这个步骤通常包括提取和净化。
2.样品注射：将预处理后的样品注入高效液相色谱仪中。
3.色谱柱分离：样品中的化合物在色谱柱中以不同的速率通过，分离出混合物中的目标化合物。
某些特定的色谱柱可对抗生素具有选择性。
4.检测器检测：使用特定的检测器（如紫外检测器）对分离出的目标化合物进行测定。
抗生素在特定波长下会吸收特定的光，因此可以通过检测样品对光的吸收来测定目标化合物的浓度。
5.数据分析：根据样品中目标化合物在色谱柱上的峰面积或峰高，结合标准曲线，计算出样品中抗生素的浓度。
抗生素残留量的标准和限制不同国家和地区对鲜乳中抗生素残留量有着不同的标准和限制。
这些标准和限制是为了保护消费者的健康，避免抗生素过量对人体造成潜在的风险。
通常，标准的抗生素残留限制应保持在安全的水平，最大限度地减少对人体健康的危害。
结论通过高效液相色谱法，我们能够准确测定鲜乳中抗生素的残留量。
这对于监测和控制鲜乳质量具有重要意义，有助于保护消费者的健康。
随着科学技术的不断发展，相信将来会有更先进的测定方法出现，为鲜乳中抗生素残留量的测定提供更好的解决方案。
我们期待着未来鲜乳产业的健康发展。
目前存在的问题与挑战尽管高效液相色谱法已经成为鲜乳中抗生素残留量测定的常用方法，但仍然存在一些问题和挑战需要解决。
牛奶中抗生素残留及其三种检测方法的比较分析研究
般 认 为 ，对 奶 牛用 药不 当或 不注 意 安全 时 间是 牛奶 中抗 生素 残 留 的重要 因素 ，奶 牛饲 养环
一
最全 面 、 消化 率 最 高 的有 机 食 品之 一 ，其质 量 及
其 安全 性 倍受 关注 。自 １４ ９ ９年美 国首次 发现 抗 生 素对 畜 禽 有促 生 长 作用 ，此 后 ，许 多 国家将 抗 生 素广泛 应 用于 畜牧 业 ，我 国在 ２ ０世 纪 ５ ０年 代 开 始将 抗 生 素作 为 饲料 添 加 剂 ，其 在 防治 动物 疾 病
Ｔｈｒ ｅ ｋ ｎ ｆＤ ｅ ｅ ｔｏ ｅ ｈｏ ｅ ｉ ｄｓｏ ｔ ｃ ｉ ｎ Ｍ ｔ ｄｓ
Ｃｈ ｑ ｕ Ｌｉｕｎ
Ｓｈａ ｈａ ｉ ｈｔ ｉｙ Ｈ ｏ ｓａ ｎｇ ｉＢｒｇ ｄａｒ ｌｔ ｎ Ｃｏ．Ｌｔ ，Ｓｈ ｎｇ ａ ００ ３， ， ｄ． ａ Ｈ ｉ２ ４４ Ｃｈｉ ｎａ
ｗａ ｙ．
Ｋｅ ｒ ｓ ｍｉ ， ｎ ｉ ｉ ｔ ｅ ｉ ｕ ｓ Ｔ ｙ ｗｏ ｄ ： ｌ ａ ｔ ｏ ｉ ｒ ｓｄ ｅ ， ＴＣ， ＮＡＰ ＥＣＬＩ Ｓ ５ ｋ ｂ ｃ Ｓ ， Ｐ Ｅ ０
近 年来 畜 牧业 在迅 速 发展 ， “ 绿色 ” “ 保 ” 环 “ 机 ”食 品倍 受老 百姓 的欢迎 。牛 奶 作 为营 养 有
乳 业 学与 技术
２１ ０ ０年第 ４期
（ 第 １３ ） 总 ４期
１３ ９
牛奶 中抗生素残 留及其三种检测方 法 的 比较分析研 究
褚 立 群
光 明荷斯 坦牧 业有 限公 司，上 海 ２ ０４ ０４ ３ 摘 要 ：抗 生素 残 留不仅 危 害人 类健 康 ，同时也 影 响牛奶 的品质 ，造 成经 济损 失 。本文讨 论 了牛奶 中抗
牛奶中抗生素残留的测定方法比较
FOOD INDUSTRY ·125周萌 北京市海淀区疾病预防控制中心牛奶中抗生素残留的测定方法比较进入到机体内部。
在机体新陈代谢时有些药物会产生不良影响，有些药物则没有。
当动物在进行治疗时药物就会在机体内被代谢，在代谢过程中会向不同组织扩散。
因此，抗生素在奶牛体内一般会被代谢出去，但是某些“长期效应”抗生素却很难排出，这就可能会导致牛奶中抗生素残留。
哺乳期乳房处理及残留物的持续。
牛奶中抗生素残留的另外一个原因是奶牛哺乳期乳房处理不当。
奶牛哺乳期很容易发生乳房炎，对于该疾病的处理方法主要有两种，一是进行物理治疗，二是生物治疗。
物理治疗就是每次对奶牛进行挤奶工作以奶液的形式排出，从而降低牛奶中抗生素。
生物治疗就是利用抗生素的高扩散性，使得抗生素能够快速穿过细胞壁进入到血液循环，再通过代谢方式排出。
图1为常见抗生素的副作用及我国允许的最高残留限量。
生素是为了治疗奶牛的疾病而在养殖业中广泛应用，使用过量的抗生素会导致牛奶中抗生素超标。
牛奶中的抗生素残留不仅会导致牛奶的质量下降，而且还会危害食用者的生命健康。
新鲜牛奶中抗生素超标会引发很多问题，因此要提高牛奶中抗生素残留的检测方法。
牛奶中抗生素残留的原因分析目前越来越多的奶牛养殖业使用抗生素治疗奶牛的疾病，但是使用过多的抗生素会导致奶牛的耐药性增强，降低鲜奶的品质。
因此为了保证消费者的健康，就要分析牛奶中抗生素残留的原因。
其主要原因是新陈代谢和药物代谢动力学、哺乳期乳房处理及残留物的持续、干乳期乳房处理。
以下是具体分析：新陈代谢和药物代谢动力学。
牛奶中抗生素超标的原因之一是由于抗生素在机体的新陈代谢。
一般来说，药物都可以通过运输途径抗干乳期乳房处理。
牛奶中抗生素残留的原因还有奶牛干乳期乳房处理不当。
在干乳期要采取特殊的方式处理奶牛的乳房，因为这一时期奶牛停止产奶。
在奶牛的哺乳期过程中其自身的特点和抗生素的形式都会影响奶牛干乳期的乳房处理。
常用检测方法比较为了降低牛奶中抗生素，为了提高牛奶的质量，就要提高牛奶中抗生素残留的检测手段。
牛奶中抗生素残留来源及几种常用检测方法
液相 一 质谱（ Ｃ— Ｓ 联用技术先通过 Ｌ Ｌ Ｍ ） ｃ对样 品进行有效分离 ， 提供与定性分析有关的保留时间等 信息 ， 然后用质谱 仪对不 同的液 相洗脱成分进 行分 析， 确定其分子质量 和化学结构信息 ， 该技术具有重 复性好 、 信息量大、 应用范围广等优点 。 Ｃ ｅｅ Ｍ等用液相色谱 一电喷雾串联质谱法检 ｈｒ ｔ ｌ 测牛奶 中链霉素 ， 将样品用磷酸缓 冲液 （ Ｂ 液相萃 Ｐ） 取 后再 用 阳离子 交换 柱 净化 ， 以五氟 丙酸 和 乙腈为 流 动 相 ， 用 反相 Ｃ 柱 ， 后 用 电喷 雾 串联 质谱 检 测 ， 采 他 最 检测 灵敏 度 为 ０ ６ｎ／ ， 低 于欧 盟 规定 的最 高 残 ． ｇｍＬ 远 留限量 ２ ０ ｎ ／ 。 ０ ｇ ｍＬ 综上 所 述 ， 于 牛奶 中抗 生 素残 留是 涉及人 类 健 鉴 康的公共卫生问题 ， 应重视和加强监测工作 ， 力研 努 究一 些简 便 、 快速 、 确 的 检测 方 法 ， 展 高效 、 准 发 高灵 敏 的联用 技术 和 多残 留组 分确 证技 术 ， 现分析 过 程 实 的 自动化 和智 能化 ， 以提 高分 析效 率 、 降低 成本 。
青海 湖裸 鲤 （ ｙ ｎｃ ｒ ｒｗ ｌ ｉ 是 青海 湖 中 Ｇ ｍ ｏｙ ｉｐｚ ａ ｋｉ ｐｓ ｅ ｓ ）
唯一生存 的大型鱼种 ， 是青海湖水域长期地理隔离所 演化 而来 的冷 水性 、 淡水 特有 鱼种 ， 称湟 鱼 ， 咸 俗 隶属
鲤科 裂腹 鱼亚科 裸 鲤属 。 作为 青海 省极 为重 要 的经 济鱼类 ， 有必要 对 裸鲤 肌 肉 中重 金属 元素 进行 严格 检测 ， 可从 侧 面反 映青 其 海湖水 体 质量 变化 。
环 开始 退却 时 ， Ｓａ 按 ｎｐ键 ；３ 反 应 ４ｒｎ 由 Ｓａ （） ｉ， ｎｐ读 ａ
鲜乳中抗生素残留检测
1.原理 细菌生物氧化有三种方式，即加氧、脱氢和脱电子。 当样品中加入嗜热链球菌后，如果样品中没有抗生素残 留，嗜热链球菌就生长繁殖，在新陈代谢过程中进行生 物氧化，其中脱出的氢可以和加在样品中的氧化型TTC 结合而成为还原型TTC，氧化型TTC是无色的，还原型 TTC是红色的，所以可以使样品变红色。相反，如果样
鲜乳中抗生素残留检测
注：嗜热链球菌的筛选方法
（1）培养 培养基配方：酵母膏7.5g 、蛋白胨7.5g、葡萄糖10g 、KH2PO4 2g、西红柿 汁100mL 、吐温80 0.5mL、 蒸馏水900mL pH 7.0 ★ 西红柿汁的制作方法： 将新鲜番茄洗净，去皮切碎（切勿捣碎），放入锥形瓶，置4℃冰箱8~12h，取 出后用纱布过滤。如一次使用不完，可将其置入0℃冰箱，可保存四个月。使 用时让其在常温下自然溶解。 制法：将上述各成分加热溶解，校正pH，分装于灭菌锥形瓶中，在115℃下高 压灭菌20min。取适量酸奶（3~5mL）接种于培养基，进行培养分离。
品中存在抗生素，嗜热链球菌就不能生长繁殖不变色。
鲜乳中抗生素残留检测
2.设备与材料
水浴锅 恒温培养箱
温度计
试管架 灭菌10mL吸管
灭菌1mL吸管
灭菌15×150mm试管 杀菌锅
鲜乳中抗生素残留检测
3.培养基和试剂
菌种：嗜热链球菌 脱脂乳：脱脂奶粉按10%含量（W/V）加蒸馏水调
鲜乳中抗生素残留检测
5. 判断方法
准确培养30min，观察结果，如为阳性，再继续培养30min做第二次观 察。在观察时要迅速，避免光照过久干扰，乳中有抗生素存在，则在向 检样中加入菌液培养时细菌不增殖，此时由于加入的指示剂TTC不还原， 所以不显色。与此相反，如果没有抗生素存在，则加入菌液即进行增殖， TTC被还原而显红色，也就是说检样呈乳的原色时为阳性，成红色为阴 性。
牛奶中抗生素残留检测的研究现状
第１７期 收稿日期：２０２０－０６－１３作者简介：马 娅（１９８７—），女，甘肃定西人，兰州石化职业技术学院讲师，硕士研究生，主要研究方向为化学与生物传感器。
牛奶中抗生素残留检测的研究现状马 娅，马丽娜，史俊杰，焦林宏，王红玉（兰州石化职业技术学院，甘肃兰州 ７３００６０）摘要：牛奶在人们饮食中占有重要地位，但是种种原因使得抗生素残留于牛奶中，严重影响奶品品质及人体安全，乳品中抗生素残留的检测和管理尤为重要。
本文主要介绍牛奶中抗生素残留的三种检测方法：微生物检测法、理化检测法和免疫法。
而我国在生产管理上常用的筛查检测方法有ＴＴＣ法和ＳＮＡＰ法，两种方法各有优劣，而基于ＴＴＣ法的试纸检测法是一种正在研发的有潜力的筛查分析方法。
关键词：牛乳；抗生素；残留；检测方法中图分类号：Ｏ６５７ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００８－０２１Ｘ（２０２０）１７－００８３－０２ 牛奶因其营养成分齐全、营养价值高、易消化吸收等特点，被誉为“食品之王”，逐渐成为人们生活中不可或缺的一种食品。
然而，奶牛饲养中为预防疾病常在饲料中添加抗生素，服用大剂量抗生素药物，获得的奶品中添加抗生素防止其腐坏［１］，这些因素均会导致抗生素在牛奶中残留，长期饮用含抗生素残留的牛奶不仅危害人类的健康，同时由于抗生素对发酵乳中发酵菌种的繁殖产生抑制作用使其发酵异常从而影响奶制品的品质［２］。
世界卫生组织（ＷＨＯ）在１９７９年就已经将抗生素列为污染物，之后各个国家都开始关注牛奶中抗生素残留检测，提出了不应检出抗生素的要求。
２００１年中华人民共和国农业行业标准也规定了无公害食品－生鲜牛乳中不能检出抗生素。
我国农业部在２００１年１０月发布实施了《无公害食品生鲜牛乳行业标准》，明确规定“新鲜牛乳中抗生素不得检出”。
２００２年发布的《动物性食品中兽药最高残留限量》中规定，奶中最高允许残留量（单位ｎｇ／Ｌ）标准是：新霉素为５００；庆大霉素为２００；林可霉素为１５０；四环素、土霉素、磺胺类等均为１００［３］。
牛奶中抗生素残留检测技术
牛奶中抗生素残留的
主要来源是奶牛饲养中普
遍采用的药物性饲料添加
剂，其根源是工厂化、高
密度饲养方式使奶牛面临
发病和死亡的巨大压力。
抗生素不仅被用于动物疾
病的治疗，而且作为药物
性饲料添加剂，使用剂量
通常是治疗剂量的1／3或更低。这种长
期的亚治疗剂量抗生素的使用不仅诱导
素；残留； 检测技术
团
牛奶中抗生素残留是
个全球性问题，日益受到
世界各国政府的重视。世
界粮农组织(FAO )、世
界卫生组织(WHO )的
食品法对牛奶中抗生素最
高残留限量都有明确规
定，欧盟(EC )和美国
食品与药品管理局
(FDA )等也有具体严格
的规定，禁止抗生素残留
超出最高残留限量
维普资讯
方法相似。
1．1提取
牛奶中抗生素残留提取前通常用水、
磷酸盐缓冲液或稀酸溶液等稀释。一般
采取离心除去脂肪，液一液分配也常用
于脱脂。例如，乙腈或酸性水相提取液，
可以用正己烷、环己烷和异辛烷洗涤，以
除去脂类杂质。亦可将有机相提取液在
一20℃或一80 oC冷冻，使样液中的脂
将脂溶性杂质留在有机相中。如大环内
酯类和林可霉素类具有亲脂性，液一液
分配时，在碱性介质中本类抗生素被抑
制电离，可用二氯甲烷、乙酸乙酯、氯
仿来提取。再将提取液蒸发至干，用流
动相溶解后进样分析，或用酸性缓冲液
进行抽提。为达到更好的净化效果，有
时需要几步液一液分配，以消除干扰杂
质，但操作繁琐、费时，溶剂用量大。
牛奶中抗生素残留的几种常用检测方法
牛奶中抗生素残留的几种常用检测方法1.高效液相色谱法（HPLC）：高效液相色谱是一种基于溶剂流动的液相色谱方法，具有灵敏度高、分离能力强等特点。
在牛奶中检测抗生素残留时，首先将牛奶样品经过样品前处理，去除干扰物，然后使用适当的洗脱液将抗生素从固相萃取柱中洗脱出来，最后用高效液相色谱对抗生素进行分离和定量。
2.毛细管电泳法（CE）：毛细管电泳法是一种基于电场作用下溶液中离子迁移速度的分析方法。
该方法具有高分离能力、快速分析速度等特点。
在牛奶中检测抗生素残留时，首先将牛奶样品进行前处理，然后通过毛细管电泳仪器进行分析。
该方法不仅可以同时检测多种抗生素，而且样品准备过程相对简单。
3.气相色谱法（GC）：气相色谱法是一种基于色谱柱分离原理的分析方法，通过适当的蒸发和衍生反应可以将抗生素样品转换为易于气相色谱分析的衍生化物。
该方法具有高度选择性、高灵敏度等优点。
在牛奶中检测抗生素残留时，通常需要进行样品前处理。
首先将牛奶样品中的脂肪物质去除，然后使用适当的溶剂将抗生素从样品中提取出来，并通过气相色谱进行分离和定量分析。
4.酶联免疫吸附法（ELISA）：酶联免疫吸附法是一种基于抗原-抗体反应原理的免疫学方法。
在牛奶中检测抗生素残留时，首先利用适当的蛋白质工程技术制备特异性抗生素抗体，然后将牛奶样品中的抗生素与抗体结合，通过酶标记的二抗或亲和素染色法对特异性抗体进行检测。
该方法具有灵敏度高、操作简单等特点。
5.高分辨质谱法（HRMS）：高分辨质谱法是一种基于质荷比检测的方法，具有高灵敏度、高分辨率等优点。
在牛奶中检测抗生素残留时，首先将牛奶样品经过适当的前处理，然后通过质谱仪对抗生素进行定性和定量分析。
该方法不仅可以同时检测多种抗生素，而且可以准确测定其残留量。
总结起来，牛奶中抗生素残留的检测方法包括高效液相色谱法、毛细管电泳法、气相色谱法、酶联免疫吸附法和高分辨质谱法等。
这些方法具有不同的优点和适用范围，可以根据具体需求选择合适的方法进行检测。
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法牛奶作为我们日常生活中重要的营养食品之一，具有丰富的营养成分，但是如果牛奶中存在抗生素残留，对人体健康会有一定的危害。
本文将介绍牛奶中抗生素残留的危害，以及常用的检测方法。
抗生素是一种广泛应用于畜牧业的消费品，用于预防和治疗动物疾病，提高动物生产性能。
如果使用不当或超量使用抗生素，就会导致抗生素在畜牧产品中的残留。
牛奶中抗生素残留的危害主要有以下几个方面：1. 长期摄入抗生素残留的牛奶会破坏人体内部的微生态平衡。
抗生素不仅可以杀死有害菌，还会杀死人体内有益的菌群。
长期摄入抗生素残留的牛奶会导致肠道菌群失衡，降低人体免疫力，容易感染疾病。
2. 抗生素残留会增加人体对抗生素的耐药性。
长期摄入含有抗生素的牛奶，会导致人体内的细菌逐渐产生对抗生素的抗性，使抗生素疗效降低，从而增加了治疗感染性疾病的难度。
3. 抗生素残留可能会引起过敏反应。
有些人对某些抗生素过敏，如果摄入了含有抗生素残留的牛奶，可能会出现过敏反应，如皮疹、呼吸困难等症状。
为了保护消费者的健康，牛奶中抗生素残留的检测至关重要。
目前，常用的牛奶中抗生素残留的检测方法主要有以下几种：1. 荧光免疫检测法：该方法利用特定抗体与抗原结合后的荧光现象进行检测。
只需要将样品添加到试剂盒中，通过特定的仪器测量荧光的强度，即可判断样品中是否存在抗生素残留。
2. 高效液相色谱法：该方法利用高效液相色谱仪对样品中的抗生素进行分离和检测。
首先将样品进行处理，然后通过高效液相色谱仪分离样品中的抗生素成分，最后根据峰面积或峰高进行测定。
3. 比色法：该方法通过比色试剂与样品中抗生素之间的化学反应，形成有色产物来测定抗生素残留的含量。
该方法简便快速，但只适用于测定特定抗生素。
牛奶中抗生素残留对人体健康存在一定的危害，因此牛奶及其制品中抗生素残留的检测非常重要。
通过选择合适的检测方法，可以及时发现并预防牛奶中抗生素残留的问题，保障消费者的健康。
乳品中抗生素的检测方法
乳品中抗生素的检测方法引言：抗生素是一种用于治疗和预防疾病的药物，但在食品中的残留量超标可能对人体健康造成负面影响。
乳制品是人们日常生活中常见的食品之一，因此对乳品中抗生素残留的检测方法至关重要。
本文将介绍几种常用的乳品中抗生素检测方法。
一、高效液相色谱法（HPLC）高效液相色谱法是一种常见的用于检测乳制品中抗生素残留的方法。
该方法能够在短时间内对多种抗生素进行分离和定量。
具体操作步骤如下：1.准备样品：将待测乳制品样品样品加入适量的提取剂中，经过摇晃和离心等操作，获得样品提取液。
2.样品的制备：将样品提取液进行蒸发浓缩，得到浓缩样品。
3.高效液相色谱分离：将浓缩样品溶解于适量的溶剂中，并通过高效液相色谱仪器进行分离，获得不同抗生素的峰。
4.定量分析：通过标准曲线法，根据峰的面积或高度进行定量分析，得出样品中抗生素的浓度。
优点：高效液相色谱法能够同时检测多种抗生素，具有较高的定量精度和分辨率。
二、酶联免疫吸附试验法（ELISA）酶联免疫吸附试验是一种利用抗生素与酶标记物结合来检测乳制品中抗生素残留的方法。
具体操作步骤如下：1.制备测定板：首先将具有抗生素特异性的抗体固定在微孔板上。
2.加样：将待测样品加入微孔板中，经过一定的反应时间，让样品中的抗生素与抗体结合。
3.洗涤：用洗涤缓冲液清洗微孔板，去除未结合的物质。
4.酶标记：加入酶标记抗体，使其与结合到微孔板上的抗生素形成复合物。
5.底物溶液：加入底物溶液，通过底物的催化反应，将其转变为有颜色的产物。
6.测定：通过酶标仪器测定样品中产生的颜色和强度，得出抗生素的浓度或者阳性相关性结果。
优点：酶联免疫吸附试验法具有操作简便、快捷、敏感性高等优点，能够检测到低浓度的抗生素残留。
三、质谱法（MS）质谱法是一种通过对乳品样品中的物质进行化学分析的方法，它能够精确地分析样品中的抗生素成分。
该方法结合了质谱仪和色谱仪的特点，具体步骤如下：1.样品制备：将待测乳制品样品加入适量的提取剂中，经过摇晃和离心等操作，获得样品提取液。
乳品中抗生素的检测方法
乳品中抗生素的检测方法引言：乳制品是广大人群日常生活中必不可少的食品之一、为保证乳制品的质量安全，检测乳制品中的抗生素成分显得尤为重要。
本文将介绍几种常见的乳品中抗生素的检测方法。
一、抗生素的简介抗生素是指一类可以抑制或杀灭细菌的化学物质，广泛应用于药物治疗、动物饲料和农业生产当中。
但当抗生素滥用或者超量使用时，会对人体健康带来一定的风险。
二、检测乳品中抗生素的方法1.高效液相色谱法（HPLC）高效液相色谱法是目前最常用的乳品中抗生素的检测方法之一、它以色谱为基础，通过流动相和固定相之间的相互作用来分离样品中的化学成分。
该方法检测灵敏度高，测量结果可靠，因此被广泛应用于抗生素的检测领域。
不过，高效液相色谱法的缺点是需要进行复杂的样品准备和操作步骤，且检测过程耗时较长。
2.液质联用技术液质联用技术（LC-MS/MS）是目前应用较广的一种检测方法。
它将液相色谱法和质谱法结合起来，通过质谱仪对液相色谱分离出的化合物进行定性和定量分析。
液质联用技术的优点是准确、灵敏度高、分析速度快，并且能够同时检测多个抗生素成分，适用于同时检测多种抗生素的复杂样品。
3.酶联免疫吸附试验（ELISA）酶联免疫吸附试验是一种常用的抗生素快速检测方法，其原理是利用酶和抗体之间具有高度特异性的结合反应来检测抗生素的存在。
该方法操作简便、迅速，且不需要复杂的设备，可以在实验室和现场快速检测乳制品中的抗生素。
但是，酶联免疫吸附试验在灵敏度上相对较低，不能满足一些特殊要求。
4.快速液相色谱法（RPLC）快速液相色谱法是传统液相色谱法的改进。
该方法通过改善液相色谱柱的设计和技术参数的优化，使得样品分离更快速、更高效、更稳定。
快速液相色谱法在抗生素的检测中具有一定的优势，能够满足高通量和快速分析的需求，但其设备和耗材价格较高。
结论：综上所述，乳品中抗生素的检测方法有很多种，不同的方法在灵敏度、准确性、操作复杂度、分析速度和设备成本等方面存在差异。
牛奶抗生素检测方法
牛奶抗生素检测方法
牛奶中抗生素残留的检测方法通常包括以下几种：
1. 高效液相色谱-质谱联用技术（HPLC-MS/MS）：这是目前最常用的方法之一，其原理是利用高效液相色谱和质谱联用技术，可以对牛奶中的抗生素进行快速、准确的检测和分析。
2. 酶联免疫吸附测定法（ELISA）：这种方法利用特定的抗体和牛奶中的抗生素结合，通过酶的作用来检测抗生素的残留量，具有高灵敏度和快速的特点。
3. 色谱-质谱联用技术（GC-MS/MS）：这种方法也是一种常用的检测方法，通过气相色谱和质谱联用技术可以对牛奶中的抗生素进行准确的检测和分析。
4. 生物传感技术：这种技术利用生物传感器对牛奶中的抗生素进行检测，具有快速、灵敏度高，操作简便等优点。
需要注意的是，以上方法都需要在实验室条件下进行，使用专业设备和技术进行检测，确保牛奶中的抗生素残留符合国家标准和食品安全要求。
奶制品抗生素检测方法
奶制品抗生素检测方法引言：随着人们对食品安全的要求越来越高，检测食品中的抗生素残留成为了一个重要的问题。
其中，奶制品作为重要的食品之一，其抗生素残留问题尤为重要。
本文将介绍一些常用的奶制品抗生素检测方法，包括微生物学方法、生物传感器方法和色谱法等，以期提高奶制品抗生素残留检测的准确性和可靠性。
一、微生物学方法1. Bacillus subtilis生物传感器法该方法主要是利用Bacillus subtilis感应菌株的响应来检测奶制品中抗生素的残留。
此感应菌株具有对多种抗生素具有特异性响应的特点，通过菌株呼吸过程中释放的二氧化碳的生成量来检测抗生素的残留水平。
2.抑菌圈法抑菌圈法是通过将抗生素加入到含有抗生素敏感菌的培养基上，观察形成的抑菌圈的大小，从而判断抗生素的残留水平。
这是一种简单、快速、经济的奶制品抗生素检测方法。
二、生物传感器方法1.酶传感器法酶传感器法是以酶为敏感元件，通过测定酶催化底物的反应产物或底物消失的速度，来确定奶制品中抗生素的残留水平。
例如，可以利用氨化酶催化酶法检测β-内酰胺类抗生素。
2.免疫传感器法免疫传感器法利用抗生素抗原和特异性抗体之间的结合反应来检测奶制品中抗生素的残留。
可以采用电化学、光学等方法来检测抗生素-抗体结合反应产生的信号差异。
三、色谱法1.高效液相色谱法高效液相色谱法是常用的奶制品抗生素检测方法之一、它通过在液相中将混合物分离，然后通过检测不同组分的保留时间、峰面积等参数来确定抗生素的残留水平。
2.气相色谱法气相色谱法是另一种常用的奶制品抗生素检测方法。
首先将奶制品中的抗生素以化学方法提取，然后通过气相色谱的分离和检测来确定抗生素的残留水平。
该方法具有高灵敏度和高分辨率的优点。
结论：奶制品抗生素残留检测是食品安全中的重要环节，需要提高检测方法的准确性和可靠性。
微生物学方法、生物传感器方法和色谱法是常用的奶制品抗生素检测方法，它们各有优缺点，需要根据实际情况选择合适的方法。
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牛奶中抗生素残留的几种常用检测方法随着奶牛饲养业的发展，抗生素在预防和治疗奶牛疾病方面得到广泛的应用。
生鲜牛奶中抗生素的来源主要是：第一，治疗泌乳期病牛时使用的抗生素会从奶牛体内移行到乳腺残留进入牛奶中，资料表明治疗后的奶牛，其挤出的牛奶5天内都有抗生素残留；其二，为了预防奶牛疾病并提高产量，在奶牛饲料中添加抗生素也会造成牛奶中抗生素的残留；第三，由于牧场管理不善，挤奶、储奶没有严格的卫生制度和配套的设施，人为添加或造成牛奶抗生素的污染。
牛奶中含有抗生素，不仅对人的健康造成很大的危害，而且对乳品加工企业带来经济损失（因无法生成酸奶和奶酪）。
因此必须严格控制牛奶中抗生素残留，除了要做好科学饲养、精心管理；正确挤奶和预防疾病外，还要规范抗生素的使用，按国标中有关规定，用药后的奶牛5天后所产的牛奶才可作为原料乳，并且要检测其残留。
世界粮农组织（FAO）、世界卫生组织（WHO）、欧盟（EC）及美国的食品和药品管理局（FDA）等对食品中抗生素最大残留量都有明确的规定，我国也有鲜奶中抗生素残留量检验标准（GB4689.27—94）。
目前，鲜奶中抗生素残留的检测方法大致分为三类：生物测定法（微生物测定法、放射受体测定法）、免疫法（放射免疫法、荧光免疫法、酶联免疫法）、理化分析法（波谱法、色谱及联用技术）。
下面介绍几种常用的牛奶中抗生素残留检测方法。
TTC法TTC法是我国鲜奶中抗生素残留量检验标准（GB4689.27—94）的检测法，属生物检测法。
其测定原理基于抗生素对微生物的抑制作用。
如果牛奶中含有抗生素，则加入菌种（嗜热链球菌）经培育2.5~3小时后,加入TTC指示剂(三苯基四氮唑)不发生还原反应,所以样品呈无色状态;如果牛奶中不含抗生素,则样品呈红色.这样实验后样品颜色不变的为阳性,样品染成红色的为阴性。
TTC法的具体操作步骤:1.菌液制备:将单菌种(嗜热链球菌)以脱脂乳为培养基,在36±1℃培养箱中培养15小时后,再以脱脂乳以至于1:1稀释待用;2.取待检样液9mL,在80℃水浴加热5分钟后冷却到37℃以下,加活菌液1mL,在36℃±1℃水浴2小时,加入4%的TTC指示剂0.3mL, 36℃±1℃水浴培养30分钟;3.若样液颜色不变为阳性,呈红色为阴性;若阳性的样液,再置于水浴中培养30分钟,不显色的为阳性,呈红色为阴性.TTC法测定各种抗生素的灵敏度为:青霉素:4ppb,链霉素:500ppb,庆大霉素:400ppb,卡那霉素:5000ppb.它具有费用低,易开展的优点;缺点是耗时长，要求操作人员需有一定专业知识且实验过程中菌液的制备、水浴过程控制都要求严格遵守操作规程，否则易出现假阳性，以致出现检验结果的不稳定性。
Delvotest? sp法（戴尔沃检测法）该法最早在香港传到广东的，其使用是基于20世纪80年代初香港要求广东出口的生奶必须“无抗”且要求采用Delvotest法检测。
该方法也是生物测定法，其试剂是由荷兰DSM公司生产并由AOAC认证。
原理是利用微生物—嗜热芽胞菌在64℃条件下培养2.5～3小时后会产酸,酸引起指示剂BCP(溴甲酚紫)变为黄色;若牛奶样品中不含抗生素,培养后样品呈黄色,如样品中含有抗生素, 嗜热芽胞菌生长受到抑制而无法产酸,指示剂将不变色.Delvotest? sp 法的操作步骤:1.以无菌操作将一片营养药片夹放入小试管内;2.用微量移液管将0.1mL牛奶样品注入小试管内;3.把小试管放入已预热至64℃的水浴箱或恒温器中培养;4).定时3小时取出观察颜色变化.如果底部2/3的固体介质是黄色,则为阴性, 如果底部2/3的固体介质是紫色,则为阳性.Delvotest? sp 法具有广谱性,可检测到?-内酰胺类抗生素在内的更多抗生素,如磺胺类、四环素类、大环内酯类、氨基糖苷类、氯霉素等，其中对青霉素和磺胺类抗生素特别灵敏. 其灵敏度为：青霉素:3ppb,链霉素:300ppb,庆大霉素:400ppb,卡那霉素:2500ppb。
Delvotest? sp 法集操作方便，严格实用，容易判断，结果可靠，费用适中等优点；但也易出现假阳性，实验证明：当牛奶样品中添加微生物防腐剂（如乳酸链球菌素—Nisn）或样品中有足够的洗涤剂残留时，便可影响嗜热芽胞菌生长而使实验为阳性。
Snap?法该方法是酶联免疫法，由美国IDEXX公司生产其检测分析仪及其试剂盒，均获得AOAC认证，它利用了竟争酶联免疫技术。
其基本原理是用特异性抗体将固相载体激活，加入含待测抗原的溶液和一定量的酶标记抗原在45℃±5℃共同保温，使样品内的抗生素与内置抗生素标志物竟争与固定的抗体结合，然后进行洗涤和显色，内置抗生素标志物与固定的抗体结合形成的复合体，通过酶的作用分解可形成有色物质，通过测定色度并与参照物对照，就可以确定结果是阳性或阴性。
Snap?法操作步骤：1.加入乳样于样品管中,摇匀,加热样品和检测板5分钟;2.加入乳样于样品孔中,当激活圆环开始退却时,按Snap键;3.反应4分钟,由Snap?读数仪读取并打印结果.检测读数小于1.05时判为阴性,大于1.05时判为阳性.Snap?法是一种将酶化学反应的敏感性和抗原抗体免疫反应的特异性相结合的方法,其敏感性和特异性好,检测的灵敏度以普遍使用的?-内酰胺类计：青霉素:5ppb,阿莫西林:10ppb,氨苄西林:10ppb,头孢西林:8ppb.其他抗生素如四环素等的检测,则需购买相应的试剂来检测. Snap?法检测结果快速准确, 9分钟内即可检测出牛奶中?-内酰胺类、四环素类、磺胺类等抗生素的残留含量，且有半定量的读数，可监控牧场用药的情况；检测仪器稳定性良好，结果重现性高，整个检测过程简单方便；但需购置专用仪器和试剂，成本较高。
高效液相色谱检测法它是一种理化检测方法,是利用抗生素分子中的基团所具有的特殊反应来测定其含量.检测的过程采用了气相色谱理论,通过高压液相和高灵敏度的检测器,分离速度快、效率高和操作自动化。
一般要经过样品的提取、脱蛋白、离心、层析柱净化、衍生化等步骤，能检测抗生素的具体含量，敏感性较高，但检测程序复杂，费用较高，需购买色谱仪等检测设备，不适合小型检验室。
传统的抗生素检测方法不少,有的操作烦琐,有的实验条件要求高,有的检验时间太长;这些不仅会给乳制品生产企业造成经济上和时间上的损失,而且检测结果常常会被原辅材料和人为操作等因素所影响.鉴于牛奶中抗生素残留是涉及人类健康的公共卫生问题,乳品企业及牧场应重视和加强检测工作,应用一些简单、快速和准确性高的方法来监控产品的质量，保证消费者的健康。
/foodonline/newsdetail.asp?id=15933反应原理本产品主要是利用抗原与抗体的特异性免疫化学反应的基本原理来进行的。
在整个反应当中,样品中氯霉素含量越多，反应呈色就越淡。
反之，样品中氯霉素含量越少，则呈色越深。
试剂盒组成1、微量测试孔：每条8孔，每板12条2、氯霉素标准溶液：0ppb、0.05ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35 ppb、4.05 ppb，1.5ml/瓶3、10倍浓缩萃取稀释液：一瓶，30ml/瓶4、10倍浓缩洗涤液：一瓶，30 ml /瓶5、氯霉素酶标记物：一瓶，8 ml/瓶6、底物溶液：一瓶，12 ml/瓶7、反应终止液：一瓶，13 ml/瓶使用说明A、注意事项1、使用前先将氯霉素标准溶液6瓶，浓缩萃取稀释液，浓缩洗涤液，酶标记物，底物溶液及微量测试孔条置于室温下，回温30分钟。
2、原倍萃取稀释液及洗涤液配制用蒸馏水将10倍浓缩萃取稀释液及浓缩洗涤液分别以1：9的比例稀释(即1mL 浓缩液+9mL蒸馏水)，即可作为样品萃取稀释液与微孔板清洗液。
3、回温后，取出所需微量测试孔条，将剩余板条立即放回铝箔袋中用胶带封好，置于4oC保存。
B、样品制备1.待测物为生乳，则依以下方法进行处理(5倍稀释)取100ul待测生乳加入400ul萃取稀释液，振荡混合后备用。
2.待测物为蜂蜜，则依以下方法进行处理a.取2g蜂蜜、4ml蒸馏水与2ml 乙酸乙酯置入离心管中，震荡约5分钟，使其充分混合均匀。
b.离心10分钟(3000rpm)，取0.5ml上清液(乙酸乙酯)至玻璃管中，于50℃下氮气吹干(温度请勿超过50oC)。
c.加入0.5ml萃取稀释液，震荡约10秒钟后备用。
3. 待测物为血清、则依以下方法进行处理a.抽取待检动物血液，离心或静置取其较透明之上层液(血清层)使用，注意不要有溶血。
b.将3ml血清加入离心管中，再加入6ml乙酸乙酯，震荡混合约30秒。
c.离心10分钟(3000rpm)，取2ml上层液(乙酸乙酯)至玻璃管中，于50oC下氮气吹干。
d.于此玻璃管中加入正己烷2ml，先将残余物完全溶解后，再加入1 ml萃取稀释液，震荡约30秒钟。
e. 离心10分钟(3000 rpm)，用吸管吸去上层液(正己烷) 及中间乳化层部分，弃掉。
再吸取下层液(水层)备用。
f.若有乳化现象，请先将大部分上层液(正己烷)取出后，再将玻璃管置入80oC水中，隔水加热约5~10分钟，可改善乳化情形。
4. 待测物为鸡肉或鱼、虾，则依以下方法进行处理a.将3克样品剪碎后放入50 ml离心管中，再加入6ml乙酸乙酯，并以均质机均质约1分钟，再震荡约30秒。
b.离心10分钟(3000rpm)，取2ml上清液(乙酸乙酯)至玻璃管中，于50oC下氮气吹干。
c.于此玻璃管中加入正己烷2 ml，先将残余物完全溶解后(若未能完全溶解，可能会导致回收率降低)，再加入1 ml萃取稀释液，震荡约30秒钟。
d.离心10分钟(3000 rpm)，用吸管吸去上层液(正己烷) 及中间乳化层部分，弃掉。
再吸取下层液(水层)备用。
e.若有乳化现象，请先将大部分上层液(正己烷)取出后，再将玻璃管置入80oC 水中，隔水加热约5~10分钟，可改善乳化情形。
待测物为血清、则依以下方法进行处理5.待测物为内脏(肝、心等)，则依以下方法进行处理(5倍稀释)同上述步骤a~d，但下层液吸出后，再以萃取稀释液稀释5倍(即下层液50ul加萃取稀释液200ml)。
6.待测物为饲料，则依以下方法进行处理(10倍稀释)同上述步骤a~d，但下层液吸出后，再以萃取稀释液稀释10倍(即下层液30ul 加萃取稀释液270ml)。
C、操作步骤本产品的酶标记物与氯霉素标准溶液均直接使用，无需再稀释。
1、于适当微孔中分别加入100mL标准溶液(0,0.05,0.15,0.45,1.35和4.05ppb)。
2、在另外的微孔中加入100mL 已完成前处理的样品溶液。
3、再于每一微孔中另再加入50mL酶标记物。
4、轻敲盘子四周，使其充分混合后于室温下避光静置温育1小时。