全自动生化分析仪的常用检测方法_图文.ppt
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生化分析仪检测原理_
K值的大小取决于吸光物质的性质、入射光 波长、溶液温度和溶剂性质等，与溶液浓度 大小和液层厚度无关。但K值大小因溶液浓 度所采用的单位的不同而异。
精品课件
讨 论：
mber-Beer定律的适用条件（前提）: ➢ 入射光为单色光 ➢ 溶液是均匀，无散射溶液 2.该定律适用于固体、液体和气体样品 3.在同一波长下，各组分吸光度具有加和性，如果
精品课件
一点终点法
一点终点法——在时间-吸光度曲线上吸光 度不再改变时，选择一个时间点测定吸光 度值。
通常在反应终点附近连续读两个吸光度， 求出两点的平均值，并根据两点的差值判 断反应是否达到平衡。
精品课件
一点终点法的设置：
以R和S混合之前的空气空白、水空白或试剂空白 的吸光度值为测定计算基点，以反应达到平衡的 吸光度读数减去空白读数，校准曲线通过零点且 成直线，对于反应速度比较快的实验多用。 多见于单试剂项目，如：总蛋白，白蛋白等。
CRE反应曲线
肌酐在一系列酶的作用下生成H2O2，H2O2和4-氨基氨替 比林反应生成红色醌类物质，在540nm处有吸收峰。
精品课件
Mg反应曲线
在碱性溶液中，Mg与二甲苯胺蓝形成重氮盐类的紫色复合物， Mg2+浓度可由二甲苯胺蓝吸光度的下降，通过光度测定法来测定。
精品课件
免疫比浊法
通过物质对光的散射或透射来测定物质含量的 方法：
缺点：抗体用量大 达平衡时间长
精品课件
双波长法
消除样品中对测定有干扰的物质的影响； 在试样中含有两个组分a和b时，若要测定组分b,组分a有 干扰，应设法消除组分a的吸收干扰。首先选择待测组分b 的最大吸收波长λ1作为测量波长，然后用作图的方法选 择参比波长λ2 ，使组分a在这两个波长处的吸光度相等。
精品课件
讨 论：
mber-Beer定律的适用条件（前提）: ➢ 入射光为单色光 ➢ 溶液是均匀，无散射溶液 2.该定律适用于固体、液体和气体样品 3.在同一波长下，各组分吸光度具有加和性，如果
精品课件
一点终点法
一点终点法——在时间-吸光度曲线上吸光 度不再改变时，选择一个时间点测定吸光 度值。
通常在反应终点附近连续读两个吸光度， 求出两点的平均值，并根据两点的差值判 断反应是否达到平衡。
精品课件
一点终点法的设置：
以R和S混合之前的空气空白、水空白或试剂空白 的吸光度值为测定计算基点，以反应达到平衡的 吸光度读数减去空白读数，校准曲线通过零点且 成直线，对于反应速度比较快的实验多用。 多见于单试剂项目，如：总蛋白，白蛋白等。
CRE反应曲线
肌酐在一系列酶的作用下生成H2O2，H2O2和4-氨基氨替 比林反应生成红色醌类物质，在540nm处有吸收峰。
精品课件
Mg反应曲线
在碱性溶液中，Mg与二甲苯胺蓝形成重氮盐类的紫色复合物， Mg2+浓度可由二甲苯胺蓝吸光度的下降，通过光度测定法来测定。
精品课件
免疫比浊法
通过物质对光的散射或透射来测定物质含量的 方法：
缺点：抗体用量大 达平衡时间长
精品课件
双波长法
消除样品中对测定有干扰的物质的影响； 在试样中含有两个组分a和b时，若要测定组分b,组分a有 干扰，应设法消除组分a的吸收干扰。首先选择待测组分b 的最大吸收波长λ1作为测量波长，然后用作图的方法选 择参比波长λ2 ，使组分a在这两个波长处的吸光度相等。
生化分析仪常用分析方法—课件
●常用于临床酶法测定葡萄糖、总胆固醇、甘油三酯、尿酸、肌酐 等的测定
（二）固定时间法（fixed-time assay)
①概述 ②计算公式 ③临床应用
①概述
1）固定时间法（fixed-time assay):指在时间-吸光度曲线上选择两个 测光点，此两点既非反应初始吸光度，亦非终点吸光度，即样品和 试剂混合后读取延滞期后的吸光度A1和反应一定时间的吸光度A2， 这两点的吸光度差值用于计算结果。如图
样品处理系统
样品架和样品盘 试剂架和试剂盘 加液器：包括定量吸量器和加样针
搅拌器：由电机和搅拌棒组成
检测系统
光路系统：前分光光路、后分光光路 分光装置：滤光片和单色器
比色杯：反应杯 信号检测器：光电信号转换 恒温装置：保持恒温，25℃、30℃、37℃
清洗装置：吸液针、吐液针、擦拭刷经化学 反应后随着被测物的消耗吸光度下降。
②分类
分类
一点终点法 两点终点法
一点终点法（one point end assay)
1）定义：在反应达到平衡时选择一个测光点的吸光度计算待测物 浓度，主要用于单试剂的测定。如图
2）计算公式
Cu=Au×Cs/As=Au×K
2）快速反应干扰物：在样本中含有明显干扰待测物反应的物质时， 固定时间法能有效去除这些干扰，提高特异性。某些干扰物比待测 物更快与试剂发生反应。
3）慢反应干扰物：一些干扰物在待测物反应完全后才开始发生反 应。
②计算公式
C=（A2-A1）×K K为校准系数 K=Cs/As
③临床应用
主要应用于样本中有物 质明显干扰待测物反应 的情况，如苦味酸法测 定肌酐、溴甲酚氯法测 定血清白蛋白等
（三）自动生化分析仪检测项目
常包括肝功能、血糖、血脂、 肾功能、心肌酶谱、骨代谢、 尿蛋白等，例如AST、ALT、 GGT、LDH、TBA、TG、TC、 ALP、GLU、UREA、UA、LDL、 HDL、CK、TP等
（二）固定时间法（fixed-time assay)
①概述 ②计算公式 ③临床应用
①概述
1）固定时间法（fixed-time assay):指在时间-吸光度曲线上选择两个 测光点，此两点既非反应初始吸光度，亦非终点吸光度，即样品和 试剂混合后读取延滞期后的吸光度A1和反应一定时间的吸光度A2， 这两点的吸光度差值用于计算结果。如图
样品处理系统
样品架和样品盘 试剂架和试剂盘 加液器：包括定量吸量器和加样针
搅拌器：由电机和搅拌棒组成
检测系统
光路系统：前分光光路、后分光光路 分光装置：滤光片和单色器
比色杯：反应杯 信号检测器：光电信号转换 恒温装置：保持恒温，25℃、30℃、37℃
清洗装置：吸液针、吐液针、擦拭刷经化学 反应后随着被测物的消耗吸光度下降。
②分类
分类
一点终点法 两点终点法
一点终点法（one point end assay)
1）定义：在反应达到平衡时选择一个测光点的吸光度计算待测物 浓度，主要用于单试剂的测定。如图
2）计算公式
Cu=Au×Cs/As=Au×K
2）快速反应干扰物：在样本中含有明显干扰待测物反应的物质时， 固定时间法能有效去除这些干扰，提高特异性。某些干扰物比待测 物更快与试剂发生反应。
3）慢反应干扰物：一些干扰物在待测物反应完全后才开始发生反 应。
②计算公式
C=（A2-A1）×K K为校准系数 K=Cs/As
③临床应用
主要应用于样本中有物 质明显干扰待测物反应 的情况，如苦味酸法测 定肌酐、溴甲酚氯法测 定血清白蛋白等
（三）自动生化分析仪检测项目
常包括肝功能、血糖、血脂、 肾功能、心肌酶谱、骨代谢、 尿蛋白等，例如AST、ALT、 GGT、LDH、TBA、TG、TC、 ALP、GLU、UREA、UA、LDL、 HDL、CK、TP等
全自动生化分析仪入门操作
开机前的准备工作返回检查去离子水箱打开纯水机检查UPS电源添加W1洗液（2%原液B）添加原液B按绿色ON键开机修改索引时间返回开机后自动进入本画面点击‘▼’出现下拉菜单选择‘1.Current Time ’改为当前时间点击‘Exit’ 二次退出试剂准备返回点击‘仪器状态’进入本画面请点击‘(0) Reagent Status’进入‘试剂状态’画面退出试剂状态返回点击F5 ‘Check Start’进入检查试剂画面点击F7 ‘Test Display’进入显示试剂量画面退出显示试剂量R1试剂mL量, 测定人次, 试剂位R2试剂mL量, 测定人次, 试剂位关闭检查试剂Reagent check○Reset Only○Check Specified position○Check Specified position (with ID)○Check Changed position (with ID)○Check All positionsStart Cancel○复位○检查指定项目○用条形码检查指定项目○用条形码检查位置改变的试剂○检查全部试剂选择检查方式开始检查退出定标返回点击菜单(U) User 出现下拉菜单点击(C ) Calibration 进入定标选项画面注释:定标时首先准备好标准液,在蓝色样品架的1号位放纯水,在黄色定标架放置相应的标准液按提示选完项目,点F9 开始测定.定标选项RB Only: 只做空白One Point: 只做一个标准All: 全做三者用F6 转换1.点击F4进入2.选择定标项目退出3.再点击F4 ‘Entry’ 确认质控返回点击菜单(U) User 出现下拉菜单点击(Q ) QC进入质控选项画面注释日常做质控不需要选项,只要预先输入靶值,把质控液放在绿色样品架上, 默认全做.质控选项1.点击F4进入2.选择质控项目退出3.再点击F4 ‘Entry’ 确认常规标本测定返回点击菜单(U) User 出现下拉菜单点击(N ) Normal 进入编工作单画面常规标本测定方法1.样本号输入：在<S.NO.:>处输入样本号,如果要修改按F8S.NO.。
生化分析仪检测原理
(
一点终点法反应曲线
A
吸
光
度
）
Am
S+R
计算公式：
C=(Am-Ab)*K
2A02m0/-3/-5--终点读数点的吸光 Ab----试剂空白吸光度
T
（时间）
K----校正系数 21
TP反应曲线
蛋白质+Cu2+→Cu-蛋白质络合物 550nm处吸收峰
二点终点法
第二试剂加入以前，选择某一点读取吸光度Am， 经过一定时间后反应达终点后测第二个吸光度值 An,利用两吸光度之差计算结果。
肌酐在一系列酶的作用下生成H2O2，H2O2和4-氨基氨 替比林反应生成红色醌类物质，在540nm处有吸收峰。
Mg反应曲线
在碱性溶液中，Mg与二甲苯胺蓝形成重氮盐类的紫色复合物， Mg2+浓度可由二甲苯胺蓝吸光度的下降，通过光度测定法来测定。
免疫比浊法
通过物质对光的散射或透射来测定物质含量的 方法：
CK-MB采用的检测方法为免疫抑制法
正 常 人 体 中 ， CK 同 工 酶 中 CK-MM﹥CK-MB﹥CK-BB, 其中CK-BB含量极少，可忽略。免疫抑制法正是建 立于忽略CK-BB的基础上。采用抗体抑制其M亚基 活性，使CK-MM失去活性，而CK-MB失去一半的活 性。单测定B亚基的活性，其结果×2即为CK-MB活 性。
酶促反应曲线
连续监测法
即零级反应速率法,亦称斜率法 在较长反应时间区段内(90-180秒)，每隔一定时间(5~30 秒)读取一次吸光度值，至 少读取4点，得到3个以上△A， 最后算出 反应速率△A/min。
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生化分析仪基本原理与结构PPT课件
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23
图1-8
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24
3．反应管 反应管固定在由微型马达带动的链式传
送带上，步进式向前移动。步进速度乘以 反应终点位号，即为总反应时间，可依反 应时间选择适宜步进速度。
4．加热浴 可控温于250C、370C、500C，由传送链带
动反应管至恒温槽中保温。
5检测器
为光电比色计（或分光光度计）。待反应 完成后，进行检测。如图1-9
连续流动式自动生化分析仪
.
6
图1-1单通道连续流动式生化分析仪 的结构示意图
.
7
在微机控制下，通过比例泵将标本和试剂吸到 连续的管道之中，在一定的温度下，在管道内 完成混合、去除干扰物、保温反应、比色测定、 信号放大及运算处理，最后将结果显示并打印 出来。因为这种检测分析是一个样品接着一个 样品在连续流动状态下进行的，故称之为连续 流动式分析仪。
2．比例泵（称量泵）
.
9
图1-2
.
10
是一种蠕动泵，执行两个功能，即提供能 使样品在仪器内进行运动的压力和向流经 塑料管的液体注入空气。它的作用是代替 手工操作时的各种吸管。样品的用量和各 种试剂的用量以及管道气泡的多少均由比 例泵决定，其结构和作用原理如图1-2所示。
比例泵主要由弹簧、压板、塑料管和转轴 组成。转轴由电机带动，几个转轴之间有 链条相连，转轴沿固定轨道循环转动，反 复从富有弹性的硅胶输液管道上挤压滚过， 从而推动管内的液体向前运动。
连续流动式自动生化分析仪连续流动式自动生化分析仪图图1111单通道连续流动式生化分析仪单通道连续流动式生化分析仪的结构示意图的结构示意图在微机控制下通过比例泵将标本和试剂吸到在微机控制下通过比例泵将标本和试剂吸到连续的管道之中在一定的温度下在管道内连续的管道之中在一定的温度下在管道内完成混合去除干扰物保温反应比色测定完成混合去除干扰物保温反应比色测定信号放大及运算处理最后将结果显示并打印信号放大及运算处理最后将结果显示并打印出来
自动生化分析仪
血红蛋白、胆红素、乳糜的光谱吸收曲线
（5）反应方向 有正向和负向两种，正向反应吸光度增加， 负向反应吸光度下降。 （6）样品量与试剂量 一般按照试剂说明书上的比例，并结合仪 器的特性，即样品和试剂最小加样量及加 样范围、最小反应体积等，进行设置。
（7） 试剂选择 单试剂法：在反应过程中只加一 次试剂的方法 双试剂法：在反应过程中试剂分 开配制和加入反应系统，可消除干 扰和非特异性反应，稳定试剂，使 检测结果更准确。
分光装置
前分光
衍射光栅后分光
比色杯
样品装载盘
急诊（STAT）进样口
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四、自动生化分析仪的工作过程
1. 取样加试剂和混匀 2. 保温反应和吸光度检测 3. 计算并显示或打印结果
五、自动生化分析仪 的参数设置
必选分析参数
备选分析参数
必选分析参数 （1）试验代号（test code） 即测定项目标识符 ，通常以项目英文缩写 表示。
根据仪器的结构、原理不同分类
–分立式自动生化分析仪
–干化学式自动生化分析仪 –连续流动式自动生化分析仪 –离心式自动生化分析仪
返回目录
(一)分立式自动生化分析仪
1.原理 按手工操作的方式编排程序，以有序的机 械操作代替手工操作。 2.结构 与管道式自动生化分析仪在结构上的主要 区别为前者各个样品和试剂在各自的试管中起反 应；后者是在同一管道中起反应
半、全自动分析仪比较
二、自动生化分析仪的工作原理
属光学分析仪器，检测原理基于物质对光的 选择性吸收，一般工作波长340nm800nm， 属紫外-可见分光光度法。
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三、自动生化分析仪的基本结构
由样品处理系统、检测系统和计算机系统组成。
全自动生化分析仪基本知识与应用
袋式仪器可以自动制作比色杯 比色杯可以兼作反应杯 比色杯不能作流动比色池（半自动）
6
中新口腔
4.干式生化分析仪
• 干片分：扩散层、试剂层、指示剂和支持层。 • 利用“反射光度法”和“差式电位法”检
测。 • 以液体样品中的“水”为溶剂。 • 理论基础：KubelkaMunk理论。
7
中新口腔
5.半自动生化分析仪
59
中新口腔
• 4.苯衍生物指示反应 • ALP • GGT • NAG
60
中新口腔
• 5.免疫透射比浊法 • Ⅳ型胶原 • TnI • Hs-CRP，LP(a) • 尿微量白蛋白，前白蛋白 • 胱抑素C • 载脂蛋白
61
中新口腔
• 6. 离子选择电极法 • K+ • Na+ • Cl• TCO2
42
中新口腔
• 例22
43
中新口腔
• 例23
44
中新口腔
• 例24
45
中新口腔
• 例25
46
中新口腔
• 例26
47
中新口腔
• 例27
48
中新口腔
• 例28 • 钠电极属于 • A 晶体电极 • B 气敏电极 • C 玻璃电极 • D 酶电极 • E 膜电极
49
中新口腔
• 例29 • 很多分析仪都采用双波长或多波长的光路
27
中新口腔
• 例11 • 大多数全自动生化分析仪比色杯的光径是 • A 0.5~0.7cm • B 0.8~1.0cm • C 1.1~1.9cm • D 2.0~3.9cm • E ≥ 4.0cm
28
中新口腔
• 例12
29
中新口腔
6
中新口腔
4.干式生化分析仪
• 干片分：扩散层、试剂层、指示剂和支持层。 • 利用“反射光度法”和“差式电位法”检
测。 • 以液体样品中的“水”为溶剂。 • 理论基础：KubelkaMunk理论。
7
中新口腔
5.半自动生化分析仪
59
中新口腔
• 4.苯衍生物指示反应 • ALP • GGT • NAG
60
中新口腔
• 5.免疫透射比浊法 • Ⅳ型胶原 • TnI • Hs-CRP，LP(a) • 尿微量白蛋白，前白蛋白 • 胱抑素C • 载脂蛋白
61
中新口腔
• 6. 离子选择电极法 • K+ • Na+ • Cl• TCO2
42
中新口腔
• 例22
43
中新口腔
• 例23
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中新口腔
• 例24
45
中新口腔
• 例25
46
中新口腔
• 例26
47
中新口腔
• 例27
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中新口腔
• 例28 • 钠电极属于 • A 晶体电极 • B 气敏电极 • C 玻璃电极 • D 酶电极 • E 膜电极
49
中新口腔
• 例29 • 很多分析仪都采用双波长或多波长的光路
27
中新口腔
• 例11 • 大多数全自动生化分析仪比色杯的光径是 • A 0.5~0.7cm • B 0.8~1.0cm • C 1.1~1.9cm • D 2.0~3.9cm • E ≥ 4.0cm
28
中新口腔
• 例12
29
中新口腔
贝克曼全自动生化
二、仪器硬件系统
（一）、硬件系统的基本特征
1、MC部分
2、CC部分
1、MC部份： 离子项目（5项）：K、NA、CL 、CALC、CO2 流动池上有K、NA、CL、CALC、CO2、NA参比和CO2参比电极。
钠电极：硅酸铝玻璃
钾电极：缬氨酶膜
氯电极：Ag/AgCl 钙电极：离子载体膜 CO2：PH
3、掌握试剂的装载及更换
1、掌握常用试剂、定标液、质控液的贮存 • MC：大部分室温保存，只有GLUCm/GLU3，BUNm/BUN3 2-8˚C保存。 •CC：大部分2-8˚C保存，TBIL、DBIL、MG、TP、ALB、CREA、PHS常温 保存。 •定标液：离子定标液2-8˚C保存，胆红素、蛋白、多项定标液-15到-20˚C保 存。
●流动池项目（K、NA、CL 、CALC、CO2），测定单项和五项同时测用的 电极参比液、电极缓冲试剂量、样本量一样多。
●流动池项目的试剂在仪器上的稳定期均为30天，故CO2碱性液虽可循环使 用，但需每月更换一瓶，否则定标时易出现“SPAN”错误。
●当MC试剂剩余量10%时，会弹出提示窗口
●装载MC试剂时，只需读取新装载的试剂条码，取下的旧试剂条码不必读取
2、掌握定标的注意事项
●MC项目的定标： AUQUA定标液和蛋白定标液。 （1）AUQUA定标液可定标的项目有：K、NA、CL、CALC、CO2、 GLUm、CREm、BUNm PHOSm； （2）蛋白定标液有两个水平： 在LX20/DxC800/DxC600上可用于定标TPm、ALBm。 其中新批号的蛋白定标液在第一次使用前需装载定标磁盘。而AUQUA定 标液无定标磁盘。 MC上的项目定标时每一水平需重复做4次。
4、常见测试项目的测定方法
全自动生化分析仪
全自动生化分析仪全自动生化分析仪是依据光电比色原理来测量体液中某种特定化学成分的仪器。
由于其测量速度快、精准性高、消耗试剂量小，现已在各级医院、防疫站、计划生育服务站得到广泛使用。
搭配使用可大大提高常规生化检验的效率及收益。
目录定义生化仪测定的方法生化仪测定相关内容重要特点生化仪检验的原理测试项目滤光片与光栅的比较重要部件生化仪生产厂家定义生化分析仪：用于检测、分析生命化学物质的仪器，给临床上对疾病的诊断、治疗和预后及健康状态供给信息依据。
光学系统：是ACA的关键部分。
老式的ACA系统采纳卤钨灯、透镜、滤色片、光电池组件。
新式ACA系统光学部分有很大的改进，ACA 的分光系统因其光位置不同有前分光和后分光之分，目前，先进的光学组件在光源与比色杯之间使用了一组透镜，将原始光源灯投射出的光通过比色杯将光束变成光速（这与传统的契型光束不同），这样，即使比色杯再小，点光束也能通过。
与传统方法相比，能节省试剂消耗40—60%。
点光束通过比色杯后，在经这一组还原透镜（广差矫正系统），将点光束还原成原始光束，在经光栅分成固定的若干种波长（约10种以上波长）。
采纳光/数码信号直接转换技术即将光路中的光信号直接变成数码信号。
将电磁波对信号的干扰及信号传递过程中的衰减完全除去。
同时，在信号传输过程中采纳光导纤维，使信号达到无衰减，测试精度提高近100倍。
光路系统的封闭组合，又使得光路无需任何保养，且分光精准、寿命长。
恒温系统：由于生物化学反应时温度对反应结果影响很大，故恒温系统的灵敏度、精准度直接影响测量结果。
早期的生化仪器采纳空气浴的方法，后来进展到集干式空气浴与水浴优点于一身的恒温液循环间接加温干式浴。
其原理是在比色杯四周设计一恒温槽，在槽内加入一种无味、无污染、不蒸发、不变质的稳定恒温液，恒温液的容量大，热稳定性好、均匀。
在比色杯不直接接触恒温液，克服了水浴式恒温易受污染和空气浴不均匀、不稳定的特点。
全自动生化分析仪样品反应搅拌技术和探针技术：传统的反应搅拌技术采纳磁珠式和涡旋搅拌式两种。
生化检测技术原理ppt课件
分光光度法的工作原理
“墨水颜色”的深浅可以间接反映墨水的浓度
分光光度法的工作原理
不同种类的“墨水”具有不同的颜色及深浅
分光光度法的工作原理
构成这个美丽世界的不同的颜色，是由各种波长的光线产 生的
分光光度法的工作原理
构成这个美丽世界的不同的颜色，是由各种波长的光线 产生的
400-700nm为人肉眼可见光 340nm及以下的紫外波段为人肉眼不可见光 可见光从最冷色（紫色）到最暖色（红色），波长逐渐升高
得到了真正由肌酐产生的吸光度变化率！！
分光光度法的分析类型
Rate A的Blank Read设置
分光光度法的分析类型
让我们再次做一个阶段要点的总结
•1Point End可以读取反应终点的吸光度
•2Point End可以读取终点吸光度，并去除样本空白影响
•Rate A可以分析一段时间内吸光度平均变化率，并且通过设置也可 去除样本空白的影响；或者提示反应中存在着底物耗尽
分光光度法的工作原理
Q：那么，为什么Roche推荐使用双波长检测模式？
在双波长模式下，由于 A=A（主波长）-A（副波长） ，那么电压不稳定等环境影响 ，都将会由于主副波长都产生 了相同程度的影响而被消除。
在双波长模式下，一些常 见的干扰因素如轻度溶血，将 可以由于在主波长和副波长具 有相同的吸光度而被间接消除 。
Clin-Chemistry Technology
全自动生化分析仪检测技术原理
picture placeholder
1. 分光光度法的工作原理 2. 分光光度法的分析类型 3. 分光光度法的校准及常见报警 4. 间接选择离子检测（ISE）的工作原理 5. 间接选择离子检测（ISE）的校准及常见报警
贝克曼全自动生化分析仪的应用课件
01
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
02
03
生物制品检测
贝克曼全自动生化分析仪 可用于检测生物制品的质 量和纯度，确保制品的安 全性和有效性。
基因表达研究
通过检测基因表达相关的 生化指标，研究基因的功 能和调控机制。
药物筛选
利用贝克曼全自动生化分 析仪对大量化合物进行筛 选，寻找具有潜在治疗作 用的候选药物。
03
贝克曼全自动生化分析仪的操作流程
贝克曼全自动生化分析仪的应用课 件
• 贝克曼全自动生化分析仪简介 • 贝克曼全自动生化分析仪的应用范围 • 贝克曼全自动生化分析仪的操作流程 • 贝克曼全自动生化分析仪的维护与保养 • 贝克曼全自动生化分析仪的常见问题及解决方案 • 贝克曼全自动生化分析仪的发展趋势与未来展望
01
贝克曼全自动生化分析仪简介
科研应用
基础研究
贝克曼全自动生化分析仪可用于研究生物体内各种生化反应的机 制，为疾病治疗和药物研发提供理论支持。
临床试验
在临床试验中，使用贝克曼全自动生化分析仪可以对受试者的生化 指标进行精确检测，为试验结果提供可靠依据。
毒理学研究
通过检测实验动物的生化指标，评估药物或物质的毒副作用。
生物技术应用
高效率
贝克曼全自动生化分析仪可同 时进行多个样本的检测，大大 提高了检测效率，缩短了检测
时间。
准确性
该设备采用先进的检测技术， 确保了检测结果的准确性，减 少了人为误差。
可靠性
贝克曼全自动生化分析仪具有 稳定的性能和长寿命，减少了 维修和保养的频率和成本。
灵活性
该设备可根据不同需求进行定 制和升级，满足不同医疗机构
工作原理
样本处理
贝克曼全自动生化分析仪通过自 动加样系统将样本加入到反应杯 中，然后进行加试剂、搅拌、孵
全自动生化分析仪的原理及检测方法
2. 水浴恒温的优点是：温度均匀、稳定；
3. 水浴恒温的缺点是：升温缓慢，开机预热时间长，因 水质变化(微生物、矿物质沉积)影响测定，因此要定 期换水和比色杯。为了加热均匀和防止变质，往往要 设置电动机循环转动和添加防腐剂。
反应杯
在反应盘上安装清洗站。一项检验项目完成后， 反应杯随即被自动清洗，实现了实时清洗。 1.反应杯清洗时，先吸走废液，灌入清洗液，再吸走 清洗液，灌入清水，并自动进行水空白自检，确定反 应杯是否清洗干净。 2.水空白自检通过后，由冲洗站吸掉水，由真空吸湿 干燥反应杯，再做下面的检验项目。 3.假如反应杯污染，不能冲洗干净，仪器会自动放弃 再次使用该反应杯，并且由电脑发出警告，在屏幕上 显示出污染的反应杯所在位置，便于拿出反应杯进一 步处理或更换新杯。
2. 选待测溶液最大吸收峰对应的波长为λp，选等吸收点 的对应的波长为λs。所谓等吸收点，是指对于某个波 长，尽管待测溶液的浓度不同，但对该波长的光的吸 收均相等。等吸收点所对应的波长叫做等吸收波长。 对于吸收光谱具有吸收峰的物质，同浓度下吸光度相 等的两个波长，也是等吸收波长。等吸收波长是双波 长法的理论基础之一。应用这一方法的必要条件是能 准确地测定出等吸收点，否则将造成显著的误差。
双波长测定原理
双波长测光的优点：
可以有效地扣除样 本的混浊、溶血、 黄疸的干扰，并将 噪声部分降低到最 低限度，例如:可消 除或最大限度地减 少因反应液中的污 物、纤维蛋白、光 源的闪烁、漂移、 反应杯的伤痕、污 染、恒温水中的污 物等引起的误差。
选择双波长的方法
1. 根据待测溶液对吸光谱的吸收曲线，选择最大吸收峰 对应的波长为λp，吸收曲线下端较为平坦的某一波长 为λs。
选择双波长的方法
3. 选溶液最大吸收峰的波长为λp，选显色剂的最大吸 收峰对应的波长为λs。该法又称为双波长增敏法， 其原理是：当向一定浓度的显色剂溶液中加入待测物 时，由于生成物质浓度的增大，生成物的吸光度也随 之增大，而显色剂则由于不断消耗，其吸光度逐渐减 小。如果以λp为测定波长，λs为参比波长时，测得 的差吸收光度显然是生成物吸光度与消耗的显色剂的 吸光度之和，从而提高了测定的灵敏度。
3. 水浴恒温的缺点是：升温缓慢，开机预热时间长，因 水质变化(微生物、矿物质沉积)影响测定，因此要定 期换水和比色杯。为了加热均匀和防止变质，往往要 设置电动机循环转动和添加防腐剂。
反应杯
在反应盘上安装清洗站。一项检验项目完成后， 反应杯随即被自动清洗，实现了实时清洗。 1.反应杯清洗时，先吸走废液，灌入清洗液，再吸走 清洗液，灌入清水，并自动进行水空白自检，确定反 应杯是否清洗干净。 2.水空白自检通过后，由冲洗站吸掉水，由真空吸湿 干燥反应杯，再做下面的检验项目。 3.假如反应杯污染，不能冲洗干净，仪器会自动放弃 再次使用该反应杯，并且由电脑发出警告，在屏幕上 显示出污染的反应杯所在位置，便于拿出反应杯进一 步处理或更换新杯。
2. 选待测溶液最大吸收峰对应的波长为λp，选等吸收点 的对应的波长为λs。所谓等吸收点，是指对于某个波 长，尽管待测溶液的浓度不同，但对该波长的光的吸 收均相等。等吸收点所对应的波长叫做等吸收波长。 对于吸收光谱具有吸收峰的物质，同浓度下吸光度相 等的两个波长，也是等吸收波长。等吸收波长是双波 长法的理论基础之一。应用这一方法的必要条件是能 准确地测定出等吸收点，否则将造成显著的误差。
双波长测定原理
双波长测光的优点：
可以有效地扣除样 本的混浊、溶血、 黄疸的干扰，并将 噪声部分降低到最 低限度，例如:可消 除或最大限度地减 少因反应液中的污 物、纤维蛋白、光 源的闪烁、漂移、 反应杯的伤痕、污 染、恒温水中的污 物等引起的误差。
选择双波长的方法
1. 根据待测溶液对吸光谱的吸收曲线，选择最大吸收峰 对应的波长为λp，吸收曲线下端较为平坦的某一波长 为λs。
选择双波长的方法
3. 选溶液最大吸收峰的波长为λp，选显色剂的最大吸 收峰对应的波长为λs。该法又称为双波长增敏法， 其原理是：当向一定浓度的显色剂溶液中加入待测物 时，由于生成物质浓度的增大，生成物的吸光度也随 之增大，而显色剂则由于不断消耗，其吸光度逐渐减 小。如果以λp为测定波长，λs为参比波长时，测得 的差吸收光度显然是生成物吸光度与消耗的显色剂的 吸光度之和，从而提高了测定的灵敏度。
生化分析仪的原理及常用检测方法
1.连续监测法
• 即零级反应速率法,亦称斜率法 在较长反应时间区段内(90-180秒)，每隔一 定时间(5~30秒)读取一次吸光度值，至 少读 取4点，得到3个以上△A，最后算出 反应速 率△A/min。
Au 106 VTu U/L t u l Vu
1.连续监测法特点
• 与固定时间法相比，属于即时观测，无需 停止酶促反应、不需添加其他呈色试剂， 且可将多点的测定结果绘图连线，快速、 直观查看酶促反应进程，很容易找到呈直 线的线性期，检查到是否偏离零级反应。
光吸收曲线
Lamber-Beer定律：分光光度法基本 定律
描述物质对某一波长光吸收的强弱与吸光物 质的浓度及其液层厚度的关系
Lamber定律：A∝l Beer定律：A ∝C
入射光强度I0 透射光强度I 物体截面为S 厚度为l
Lambert-Beer（朗伯-比尔）定律
• 当一束平行单色光通过均匀的非散射样品 时，样品对光的吸光度与样品的浓度及厚 度成正比
• • A = kcb A---吸光度 k---吸光系数 c---溶液浓度 b---液层厚度
吸光系数
• 定义：吸光物质在单位浓度及单位厚度时 测得的吸光度。 • K值的大小取决于吸光物质的性质、入射 光波长、溶液温度和溶剂性质等，与溶液 浓度大小和液层厚度无关。但K值大小因 溶液浓度所采用的单位的不同而异。
Lambert-Beer（朗伯-比尔）定律
• 郎伯-比尔定律表明：当液层厚度固定时， 溶液的吸光度与溶液的浓度成正比。 即：A/C=const • 故：只要测出某种溶液的吸光度，将它与 已知浓度的标准溶液吸光度进行比较，就 可以算出该溶液的浓度。
生化测定方法
终点法： 一点终点法 二点终点法 速率法：