紫外分光光度法检测饮料中防腐剂的实验方案[20121120][1]
分析化学综合实验 紫外-可见分光光度计
紫外-可见分光光度法测定饮料中的苯甲酸钠含量一、实验目的（1）掌握紫外-可见分光光度法的分析原理。
（2）熟悉紫外-可见分光光度法的结构、特点，掌握及使用方法。
（3）了解紫外-可见分光光度法技术定量测定物质含量的方法。
二、实验原理苯甲酸，俗称安息香酸，是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。
在我国，苯甲酸及其钠盐常用于酱菜类、罐头类和一些饮料类等食品中。
苯甲酸及其钠盐的过量摄入会对人体产生很大危害，所以监测食品中苯甲酸及其钠盐的含量，对保障人们身体健康有着重要意义。
由于苯甲酸钠在200~350 nm有吸收，因此可利用紫外-可见分光光度法测定饮料中的苯甲酸钠含量。
三、仪器与试剂1、仪器UV-1800/V紫外-可见分光光度计；10 mL石英比色皿2个；1000 mL容量瓶1个；1.0 mL和5.0 mL移液管各1个；50 mL容量瓶8个。
2、试剂0.1 mol/L NaOH溶液；6.0×10-3mol/L标准苯甲酸钠溶液；去离子水；市售可乐或雪碧等。
四、实验步骤（1）移取6.0×10-3mol/L标准苯甲酸钠溶液1.0 mL于50 mL容量瓶中，加入0.6 mL 0.1 mol/L NaOH溶液，用去离子水定容，摇匀，以试剂空白为参比，在210~350 nm范围内绘制吸收曲线，确定最大吸收波长λmax。
（2）分别移取0.0 mL、0.5 mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL、2.5 mL、3.0 mL 苯甲酸钠标准溶液于7个50 mL容量瓶中，各加入0.6 mL 0.1 mol/L NaOH 溶液，用去离子水定容至刻度。
在定量测定模式下，以试剂空白为参比，在λmax处测定各溶液的吸光度。
（3）分别移取5 mL可乐或雪碧于50 mL容量瓶中，用超声波脱气5min 以驱赶CO2，加入0.6 mL 0.1 mol/L NaOH溶液，用去离子水定容至刻度。
以试剂空白为参比，在λmax处测定各溶液的吸光度。
紫外光谱吸收法测定雪碧中的防腐剂
3、利用上一步测定的最大吸光度处的 λmax 测定苯甲酸标准溶 液的吸光度，平行测三组（苯甲酸标准溶液的浓度为 6.4ug/mL）。
4、绘制雪碧吸收曲线（A-λ）。 5、由朗比定律计算得出配制的雪碧溶液中苯甲酸的浓度
三、 数据记录及处理
1、苯甲酸钠最大吸收峰的寻找
λ（nm） 210
215
220
222
224
226
227
228
吸光度 A
λ(nm)
230
235
240
245
250
255
Байду номын сангаас
260
吸光度 A
2、待测液、标准溶液在 λmax 处的吸光度平行测定
测量液 测量次序
雪碧溶液 标准溶液
1 2 3
3、根据测定数据绘制雪碧吸收曲线（A-λ）如例图所示。
4、浓度计算
由 A∝C 可知 雪碧 = େ雪碧 进而计算出雪碧中苯甲酸的
标准液
େ标准液
浓度（注意：求得的浓度为稀释后的浓度，需换算成原液浓
度）。
实验三：紫外光谱吸收法测定雪碧中的防腐剂
一、 实验目的 1、了解苯甲酸钠的紫外吸收特性，利用该特性检测食物中的
防腐剂 2、进一步掌握朗伯比尔定律
二、实验原理 为防止食物在储藏、运输等过程中变质、腐败等现象的发生，
食品生产者常在食品中加入一定量的防腐剂。苯甲酸和山梨酸以 及它的钠盐都是卫生组织允许的主要防腐剂。
苯甲酸具有芳香结构，在 210nm-260nm 范围内有最大吸收 峰，由朗比定律 A=lg(1/T)=Kbc 可知，吸光度 A 与溶液浓度 C 成正比，可根据苯甲酸钠的吸光度测量雪碧中的苯甲酸含量。 二、 实验步骤
紫外分光光度法测定饮料中的苯甲酸
紫外分光光度法测定饮料中的苯甲酸TYYGROUP system office room 【TYYUA16H-TYY-TYYYUA8Q8-实验三紫外分光光度法测定饮料中的防腐剂—苯甲酸1 实验试剂与仪器试剂苯甲酸（AR），雪碧汽水仪器日立UV-3010紫外-可见光谱仪，1cm石英比色皿2 实验原理与方法为了防止食品在储存、运输过程中发生腐败、变质，常在食品中添加少量防腐剂。
防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。
我国规定了苯甲酸（盐）在碳酸饮料中最大使用量为0.2g/kg。
苯甲酸具有芳香结构，在波长225nm和272nm处有强吸收由于食品中苯甲酸用量很少，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此一般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。
从食品中分离防腐剂常用的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。
本实验测定雪碧中苯甲酸，含有人工合成色素、甜味剂等，但一般在紫外区无吸收，故不干扰测定，样品不用处理，苯甲酸（钠）在225nm处有最大吸收，可在225nm波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。
3 实验步骤苯甲酸标准储备液配制称取0.1000g苯甲酸于100mL容量瓶中，加适量蒸馏水定容，配制成1mg/mL溶液，吸取此液5mL于50mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，每毫升溶液相当于苯甲酸100ug。
标准曲线绘制取苯甲酸标准储备液、、、、，分别置于50mL容量瓶中，用蒸馏水溶液稀释至刻度。
以水为对照液，测定其中5号标准溶液的紫外可见吸收光谱（测定波长范围为200~350nm），找出λmax ，然后在λmax处测定五个标准溶液的吸光度A。
样品处理和测定雪碧饮料除二氧化碳后，准确移取于100mL容量瓶中，用蒸馏水定容，在λ处测定max吸光度。
4 实验结果测得苯甲酸在227nm波长处有最大吸光值表1 标准液吸光度测定标准液（μg/ml） 0 2 4 8 12吸光度图1 苯甲酸标准溶液标准曲线测得雪碧样品的苯甲酸吸光度为=μg/ml从曲线上找出相应的苯甲酸浓度Cx: 样品定容后体积为100mlV1: 所取样品体积为 25mlV2因为雪碧的密度约等于1kg/m3,故μg/ml≈μg/g=kg根据中华人民共和国国家标准《食品添加剂使用卫生标准一》对汽水类食品中苯甲酸的最大使用量做了规定：苯甲酸<=0.2g/Kg，本实验使用的雪碧样品苯甲酸浓度Kg<0.2g/Kg,即低于国家标准，符合国家标准。
实验 紫外分光光度法测定饮料中的防腐剂
实验紫外分光光度法测定饮料中的防腐剂实验目的：1．掌握蒸馏操作；2．掌握紫外可见分光光度法测定苯甲酸的方法和原理。
实验原理：为了防止食品在储存、运输过程中发生腐败、变质，常在食品中添加少量防腐剂。
防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。
其使用量一般在0.1%左右。
苯甲酸具有芳香结构，在波长225nm和272nm处有K吸收带和B吸收带。
由于食品中苯甲酸用量很少，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此一般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。
从食品中分离防腐剂常用的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。
本实验采用蒸馏法对鲜橙多中的苯甲酸进行了测定，苯甲酸（钠）在225nm处有最大吸收，可在225nm波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。
仪器与试剂：紫外分光光度计，蒸馏装置；无水硫酸钠，磷酸，硫酸，氢氧化钠，重铬酸钾，苯甲酸；鲜橙多。
操作步骤：1、样品前处理：准确称取10.0g均匀的样品，置于250 mL蒸馏瓶中，加1mL H3PO4，20g无水Na2SO4，70mL水，三粒玻璃珠进行第一次蒸馏。
用预先加有5mL 0.1mol﹒L-1 NaOH的50mL容量瓶接收馏出液，当蒸馏液收集到45mL时，停止蒸馏，用少量水洗涤冷凝器，最后用水稀释至刻度。
吸取上述蒸馏液25mL，置于另一个250mL蒸馏瓶中，加入25mL 0.033mol﹒L-1 K2Cr2O7溶液,6.5mL 2mol﹒L-1H2SO4溶液，连接冷凝装置，水浴上加热10min，冷却，取下蒸馏瓶，加入1mL H3PO4、20g无水Na2SO4、40mL水和三颗玻璃珠，进行第二次蒸馏，用预先加有的5mL 0.1mol﹒L-1 NaOH的50mL容量瓶接收蒸馏液，当蒸馏瓶收集到45mL左右时，停止蒸馏，用少量洗涤冷凝器，最后用水稀释至刻度。
根据样品中苯甲酸含量，取第二次蒸馏液5～20mL，置于50mL容量瓶中，用0.01mol﹒L-1 NaOH定容，以0.01mol﹒L-1 NaOH作为对照液，于紫外分光光度计225nm处测定吸光度。
紫外可见分光光度法测碳酸饮料中苯甲酸钠的含量
化学工业科技创新导报 Science and Technology Innovation Herald112食品添加剂对于改善食品色、香、味,延长食品保质期具有重要作用。
苯甲酸及它们的盐在饮料中使用较为广泛,但都有一定的毒性[1],其中苯甲酸还是防腐剂中使用量最大者[2]。
监测它们在饮料中的使用量, 对于保障人们身体健康具有重要的现实意义。
目前主要有气相色谱法、液相色谱法、AOAC 法(氧化法)[3]等。
其中以气相色谱法经常使用,但仪器要求高,不便于基层实验室使用。
该文提出把苯甲酸钠用磷酸酸化后蒸馏出苯甲酸直接于紫外分光光度计上分别在两组分的最大吸收波长处测定,根据吸光度加和性的原理再分别进行定量。
1 实验部分1.1 仪器与试剂北京瑞利U V-1801紫外可见分光光度计1 c m 石英比色皿2只磷酸、氢氧化钠、苯甲酸、重铬酸钾、硫酸均为分析纯试剂苯甲酸标准储备液：称取1.000 ｇ苯甲酸，用0.01 m ol/ＬN a O H 稀释至1000 ｍＬ容量瓶中。
此溶液1 ｍＬ含有1 ｍg的苯甲酸。
苯甲酸标准操作液：移取10.00 ｍＬ苯甲酸标准储备液用0.01 m o l /ＬN a O H稀释至100 ｍＬ此溶液此溶液1ｍＬ含有0.1 ｍg的苯甲酸。
1.2 样品处理取雪碧样品溶液10.00 ｍＬ至于250 m L的蒸馏瓶中，加1 m L磷酸，70 m l 水蒸馏，用预先加有5 m L 0.1 m o l /ＬN a O H 100 m L 容量瓶接收流出液，约收集45 m L时停止蒸馏，用少量的水洗涤冷凝器，最后将容量瓶内蒸馏液稀释至刻度。
吸取20.00 m L 蒸馏液置于另一个250 m L 蒸馏瓶中，加入33 m ol/L重铬酸钾25 m L、2 m o l /Ｌ硫酸溶液6.5 m L ，加热回流10 m i n ，冷却，再加1 m L 磷酸，40 m L 水，蒸馏，收集流出液于100 m L容量瓶，用0.01 mol/ＬNaOH稀释至刻度，摇匀。
紫外分光光度法测定碳酸饮料中苯甲酸钠的含量
紫外分光光度法测定碳酸饮料中苯甲酸钠的含量作者：杨森徐莲杨留勇吕瑜环来源：《数码设计》2017年第05期摘要：针对目前防腐剂苯甲酸钠的测定方法较多，本方法采用紫外分光光度法测定碳酸饮料中苯甲酸钠的含量，具有灵敏度高、加标回收率高、操作简单、分析速度快和结果准确等优点。
该方法能为碳酸饮料的生产企业提供一种实用、便捷和低成本的分析技术，可作为饮料企业对防腐剂苯甲酸钠含量监控的有效方法提供重要依据。
关键字：碳酸饮料；紫外分光光度法；苯甲酸钠；测定中图分类号：O657.32 文献标识码：A 文章编号：1672-9129（2017）05-0076-02Abstract：In view of the current preservative， the method for the determination of sodium benzoate is more，In this method， the content of sodium benzoate in carbonated drinks was determined by UV Spectrophotometry，The utility model has the advantages of high sensitivity，high recovery rate， simple operation， fast analysis speed and accurate result，This method can provide a practical， convenient and low cost analytical technique for carbonated beverage enterprises，It can serve as an important basis for the effective methods of monitoring the content of preservatives and sodium benzoate in the beverage enterprises.Key words：carbonated drinks；ultraviolet spectrophotometry；sodiumbenzoate Determination引言苯甲酸钠，又名安息香酸钠，是目前我国在食品工业上最常用的防腐剂之一。
食品中防腐剂测定方法的研究
食品中防腐剂测定方法的研究摘要：研究了紫外分光光度法测定食品中防腐剂(苯甲酸)的含量。
样品中苯甲酸的最小检出量为 0.0010mg/ml, 回收率为 98%。
该方法简便易行, 灵敏准确。
关键词：防腐剂;测定;紫外分光光度法食品防腐剂苯甲酸的测定 ,通常采用乙醚提取碱滴定法和水蒸气蒸馏紫外分光光度法测定,这两种方法测定程序复杂且周期长 ,回收率也较低。
本文作者在前人工作的基础上 ,采用了新的测定方法。
即乙醚萃取紫外分光光度法测定。
样品分析结果表明：该方法简便准确、快速可行。
1食品防腐剂对微生物或霉菌具有杀灭、抑制或阻止生长作用的食品添加剂为防腐剂。
我国准许使用的防腐剂GB2760-1986 有：苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钾盐、二氧化硫、焦亚硫酸钠及其钾盐、丙酸钙、丙酸钠、对羟基苯甲酸乙酯、丙酯、脱氢醋酸、双乙酸钠、葡萄糖-δ-内酯和乳酸链球菌素。
1996 年对GB2760-1986 作很大修订,把二氧化硫、焦亚硫酸钾及其钠盐列入漂白剂。
将葡萄糖-δ-内酯归到稳定和凝固剂中。
特别是把保鲜剂、过氧化氢、乙氧基喹、仲丁胺、桂醛、噻苯咪唑、苯基苯酚、苯基苯酚钠等统统归到防腐剂中。
这与日本相反。
1997 年以前日本把噻苯咪唑、联苯、苯基苯酚、苯基苯酚钠等列为防腐剂,1997 年单列项为防霉剂。
食品防腐剂 GB2760-1996共有 28个品种,1997 年新增丙酸、纳他霉素和液体二氧化碳(催化法)。
1998 年增补单辛酸甘油脂。
1999 年增加脱氢醋酸钠。
2002 年增加对羟基苯甲酸甲酯钠,对羟基苯甲酸乙酯钠和对羟基苯甲酸丙酯钠。
截止到2003 年共 36 个品种。
2试剂与仪器苯甲酸标准溶液：0.05mg/ml (准确称取 0.5000g 苯甲酸以 0 .01mol/L 的 NaOH 溶解并定容至1000ml, 使用时再以蒸馏水稀释 10 倍)。
756 型紫外可见分光光度计上海分析仪器厂3实验条件的选择取 0.05mg/ml 苯甲酸标准溶液 3ml 于 125ml 分液漏斗中 ,加入 20ml 饱和氯化钠溶液, 再加入一定量的1：1HCl 和 25ml 乙醚, 充分振荡后静置。
苏秀琴 紫外分光光度法同时测定饮料中的山梨酸钾和苯甲酸钠
甘肃联合大学学生毕业论文题目：紫外分光光度法同时测定饮料中的苯甲酸钠和山梨酸钾作者：苏秀琴指导老师：展惠英学院系化工学院专业 2010 级工业分析与检验三年制班工业分析与检验日 20 月 6 年2012．紫外分光光度法同时测定饮料中的山梨酸钾和苯甲酸钠内容摘要：介绍了饮料中山梨酸钾和苯甲酸钠的紫外分光光度法同时测定方法。
实验表明该方法可快速准确地测定饮料中的山梨酸钾和苯甲酸钠，样品中山梨酸钾最小检出限为0.00067g/L,回收率为92%-94%;苯甲酸钠最小检出限为0.0014g/L,回收率为94%-96%。
关键词：山梨酸钾；苯甲酸钠；同时测定；紫外分光光度法一﹑实验目的(一)通过实验了解食品防腐剂的紫外光谱吸收特性,并利用这些特性对食品中所含的防腐剂进行定型鉴定.(二)掌握工作曲线的制作方法，并对食品中防腐剂的含量进行定量测定.二﹑实验原理食品添加剂对于改善食品色﹑香﹑味，延长食品保质期具有重要作用.山梨酸和苯甲酸及它们的盐在饮料中使用较为广泛，但都具有一定的毒性，其中苯甲酸还是防腐剂中使用量最大者.监测它们在饮料中的使用量，对于保障人们身体健康具有重要的现实意义.为了防止食品在储存﹑运输过程中发生变质﹑腐败，常在食品中添加少量防腐剂.防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸和山梨酸以及他们的钠盐﹑钾盐是食品标准允许使用的两种主要防腐剂.苯甲酸具有芳烃结构，在波长228nm和272nm处有K吸收带和B吸收带，山梨酸具有α不饱和羟基结构，在波长250nm处有β跃迁的K吸收带，因此根据他们的紫外吸收光谱特征可以对他们进行定性鉴定和定量测定.由于食品中防腐剂的用量很少，一般在千分之一左右，同时食品中其他成分可能产生干扰.因此需要预先将防腐剂与其他成分分离，并经提纯浓缩后进行测定.常用的从食品中分离防腐剂的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等.本实验可以采用溶剂萃取的方法，用乙醚将防腐剂从样品中提取出来，在经碱性水溶液处理及乙醚萃取以达到分离﹑提纯的目的.三﹑试剂山梨酸钾标准溶液:0.0052㎎/ml﹑苯甲酸钠标准溶液：0.0052㎎/ml﹑盐酸（1:1）；乙醚（AR）﹑饱和NaCl溶液，以上试剂为分析纯，水为重蒸馏水，7%的葡萄糖饮料.四﹑仪器紫外分光光度计UV-1201五﹑实验部分(一)实验方法取一定量实验所用溶液于分液漏斗中，加入20ml饱和NaCl溶液，再加入10ml 盐酸（1：1）和25ml乙醚充分振摇5min后静置弃去无机相，以试剂空白为参比测吸光度。
教案：紫外可见分光光度计法测定食品中苯甲酸钠的含量
紫外可见分光光度计法测定食品中苯甲酸钠的含量一、实验目的1、了解和熟悉紫外-分光光度计的原理、结构和操作方法；2、掌握紫外分光光度法测定苯甲酸的吸收光谱图；3、掌握标准曲线法测定样品中苯甲酸钠的含量。
二、实验原理为了防止食品在储存、运输过程中发生腐蚀、变质，常在食品中添加少量防腐剂。
防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一，其使用量一般在0.1%左右。
苯甲酸及苯甲酸钠具有芳香结构在近紫外光区具有较强的吸收。
通过实验证实，苯甲酸在230nm处具有最大吸收。
另一方面，它在水中具有适当的溶解度，所以，可将标样和样品处理成水溶液，采用紫外分光光度计，通过标准曲线法而实现酸性食品中苯甲酸（钠）含量的测定。
由于食品中苯甲酸用量很少，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此一般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。
从食品中分离防腐剂常用的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。
本实验测定雪碧、可口可乐、醒目等饮料中苯甲酸（钠），样品不用处理，在230nm波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。
三、仪器和试剂仪器：紫外可见分光光度计TU-1810（北京普析通用仪器有限公司），1.0cm石英比色皿，50ml容量瓶11个，吸量管5mL一支、1mL两支。
试剂：苯甲酸钠标准贮备液（1.000g/L）：准确称量经过干燥的苯甲酸钠1.000g（105℃干燥处理2h）于1000mL容量瓶中，用适量的蒸馏水溶解后定容。
该贮备液可置于冰箱保存一段时间；0.1mol/L NaOH溶液；市售饮料。
四、实验步骤1、标准曲线的制作苯甲酸钠标准溶液（100.0mg/L）：准确移取苯甲酸储备液5.00mL于50mL容量瓶中，加入蒸馏水稀释定容。
苯甲酸钠系列标准溶液的配制：分别准确移取苯甲酸钠标准溶液0.00mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL和5.00mL于6个50mL容量瓶中，各加入0.1mol/LNaOH溶液1.00mL蒸馏水稀释定容，摇匀。
饮料中防腐剂含量的检测
饮料中防腐剂含量的检测1 引言随着食品工业的发展，防腐剂的种类也由过去单一苯甲酸及其盐类、山梨酸及其盐类发展到了更加丰富多样的产品。
如丙酸盐、对羟基苯甲酸酯等。
近年来，天然食品防腐剂也得到了人们重视与发展，如壳聚糖、海藻糖等。
苯甲酸钠作为一种常用的防腐剂，成人日允许摄入量(ADI)为0－5mg/kg。
过量摄入防腐剂会对人体部分器官造成不同程度的损害, 我国大部分地区的食品都不同程度地存在过量使用防腐剂的情况，因此检测它在食品中的使用量，对于保障人们身体健康具有非常重要的现实意义。
2紫外光谱法对苯甲酸钠含量的测定3.1 药品与仪器苯甲酸钠标准溶液(0.032g/L)；蒸馏水；紫外 -可见分光光度计（Agilent-8453）。
3.2 实验方法取7.5mL标准溶液于50mL容量瓶中，并加蒸馏水至刻度。
用1cm比色皿，以蒸馏水为参比，用紫外 -可见分光光度计测定紫外吸收光谱，见图1中曲线3。
选择最大吸收波长为224nm，分别取标准溶液2.5mL； 5.0mL；10.0mL；12.5mL于50mL容量瓶中用蒸馏水稀释到刻度。
以蒸馏水为参比，测定紫外吸收光谱（见图1中曲线1、 2、 4、 5）。
得到不同浓度下各溶液的最大吸光度（见表1）图1 各溶液的紫外吸收光谱图2 苯甲酸钠溶液的浓度与吸光度关系图(224nm)表1 不同浓度苯甲酸钠溶液的吸光度（224nm）3.3 稳定性检测选择溶液3，放置10min， 20min， 30min， 60min， 90min， 120min后，进行紫外光谱测定，得到的紫外光谱图中最大吸光度基本没有发生变化，说明苯甲酸钠溶液的稳定性很好（见表2）。
表2 稳定性实验结果（224nm）3.4 线性关系的确定以不同浓度的苯甲酸钠溶液为横坐标，选择224nm最大吸收波长对应的吸光度为纵坐标，扣除背景影响，选择可能不过零点的直线方程，绘制直线（见图2）。
3.5 样品中苯甲酸钠含量的测定分别取3种饮料样品，用不含苯甲酸钠的饮料为参比液(即饮料相应的水果汁)，用紫外-可见分光光度计进行检测，结果见表3。
实验D 防腐剂测定
实验9（序号待统编）紫外分光光度法测定雪碧中苯甲酸的含量一、目的要求1、掌握用紫外——可见分光光度法测定防腐添加剂的原理和方法2、加深对蒸馏分离不同有机物的方法理解和操作技术的掌握二、原理将样品酸化后进行蒸馏，苯甲酸随蒸汽馏出。
收集馏出的馏分，加入强氧化剂将馏出液中的有机物完全氧化分解，再次蒸馏，并用碱吸收得苯甲酸钠。
用紫外分光光度计于225nm 处进行测定。
采用标准曲线法并计算样品中苯甲酸的含量。
三、仪器与试剂紫外分光光度计，蒸馏装置。
NaOH溶液：0.1mol·L-1, 0.01mol·L-1；K2Cr2O7溶液：0.03333mol·L-1；H2SO4溶液：2 mol·L-1；苯甲酸标准溶液：100mg/L，称取0.1000g苯甲酸（经105℃烘干）于250mL烧杯中，加入0.1mol·L-1NaOH100mL，搅拌溶解后，转移入1000mL容量瓶中，用水定容；Na2SO4（无水）；H3PO4。
四实验步骤1、标准曲线的绘制（1）、移取50.00mL苯甲酸标准液于250mL蒸馏瓶中，加H3PO41mL，Na2SO4（无水）20g，水70mL，玻璃珠（防爆沸）3-4粒进行蒸馏。
用50mL容量瓶（预先加有5mL0.1mol·L-1NaOH）收集馏出液。
当馏出液约为40mL时，停止蒸馏，用少量水吹洗冷凝器，洗液并入容量瓶，最后用水定容。
（2）、移取第一次馏出液于另一个250mL蒸馏瓶中，加入0.03333 mol·L-1K2Cr2O7溶液25mL，2mol·L-1H2SO4溶液6.5mL，连接冷凝装置，在水浴上加热约10min，冷却，加入H3PO41mL，Na2SO4（无水）20g，水40mL，玻璃珠（防爆沸）3-4粒进行蒸馏。
以下操作同（1）。
（3）、移取第二次馏出液2.00，4.00，6.00，8.00，10.00mL，分别置于50mL容量瓶中，用0.01mol·L-1NaOH溶液定容。
紫外可见分光光度法测定饮料中的防腐剂——苯甲酸
4、苯甲酸钠溶液0.5mg/ml：
59.02mg苯甲酸，加入100ml的0.1mol/L NaOH溶解，最后加入900ml纯化水，浓度为50mg/L；
0.2361g苯甲酸，加入400ml的0.1mol/L NaOH溶解，最后加入3600ml纯化水，浓度为50mg/L；
序号
试剂名称
瓶
Байду номын сангаас备注
1
85%磷酸
6
白试剂瓶（60ml），AR（原瓶）分装
2
无水Na2SO4
3
AR（原瓶），用量25g/组
3
NaOH溶液
6
0.1mol/L，白试剂瓶（250ml），用量10ml/组
4
H2SO4溶液
6
2mol/L，白试剂瓶（250ml）
5
K2Cr2O7溶液
6
0.033mol/L，白试剂瓶（250ml）
紫外可见分光光度法测定饮料中的防腐剂——苯甲酸
仪器：10组（2-4人/组）
序号
仪器名称
个
备注
1
紫外可见分光光度计
2
411仪器室，配擦镜纸、滤纸条、比色皿（1cm）
2
蒸馏装置
20
2个/组，单口圆底烧瓶（250ml、磨口24#）
10
平衡管（磨口24#），胶管连接
10
蛇形冷凝管（40cm、磨口24#），配胶管
6
苯甲酸钠溶液
6
0.1mg/ml，棕试剂瓶（500ml），用量30ml/组
7
玻璃珠
3
白试剂瓶（广口，60ml）
8
分光光度法在食品防腐剂检测中的应用
侯芳菲（天津生物工程职业技术学院 天津 300400）分光光度法在食品防腐剂检测中的应用分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸光度或发光强度，对该物质进行定性和定量分析的方法。
所用方法有紫外可见分光光度法、红外分光光度法、荧光分光光度法和原子吸收分光光度法。
防腐剂作为重要的食品添加剂之一，能防止食品腐败、变质，抑制食品中微生物繁殖，延长食品保存期。
防腐剂在抑制微生物繁殖的同时，也不可避免的对人体产生副作用，但是在正确的使用范围、正确的使用量内，其安全性完全能够保障。
因此，防腐剂的检测对于保障人民群众的健康具有非常重要的意义。
1 紫外分光光度法纳他霉素，也称游链霉素,是一种重要的抗菌素,能有效杀灭及抑制食品中的霉菌、酵母菌和其他真菌的生长。
目前,纳他霉素作为一种天然的食品防腐剂已被批准应用于某些乳制品。
纳他霉素在实际应用中的使用量仅为山梨酸钾的1/50～1/100。
周玉虎[1]建立了一种紫外分光光度法快速测定酸奶中纳他霉素的方法。
该方法在甲醇和醋酸介质下，采用超声萃取进行前处理，优化了超声萃取时间、波长、酸度等试验条件，并由正交试验进一步验证。
对几种酸奶样品中纳他霉素进行测定，回收率均在92.89%～104.61%之间。
摘 要：对紫外分光光度法、红外分光光度法、荧光分光光度法及原子吸收分光光度法在食品防腐剂检测中的应用进行了阐述。
关键词：分光光度法 防腐剂 检测目前，我国食品工业多使用苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钠盐，苯甲酸和山梨酸均为共扼型有机化合物,在近紫外光区具有较强的吸收。
卫敏[2]等用紫外分光光度法测定调味品酱油和醋中苯甲酸含量，对影响提取效果的因素进行了试验，确定了水浴时间和水浴温度对苯甲酸含量测定结果的影响是有限的，而馏分体积、无水硫酸钠的加入量和蒸馏速度是影响苯甲酸含量测定的主要因素。
测得的结果与气相色谱法测定结果的相对误差10%以内，样品加标的回收率为91%～102%。
雪碧饮料中防腐剂苯甲酸含量的分析研究【文献综述】
毕业论文文献综述化学工程与工艺雪碧饮料中防腐剂苯甲酸含量的分析研究一、前言部分目前市场上各类饮料越来越多的得到人们的青睐，由于其含有丰富的蛋白质、糖类及多种维生素，已成为小朋友的首选饮品。
一般这类产品中都要添加一些苯甲酸(防腐剂)来延长产品的保质期但使用量过大对人体会造成一定危害，能引起哮喘等一系列过敏症状。
随着人民生活水平的提到，人民群众越来越关注食品安全。
二、主题部分原理去除试样中的脂肪和蛋白质，甲醇稀释，过滤后，采用反相液相色谱法分离测定。
试剂和材料除非另有规定，本方法所使用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。
甲醇（CH3OH）：色谱纯。
亚铁氰化钾溶液（92 g/L）：称取亚铁氰化钾[K4Fe(CN)6·3H2O] 106 g，用水溶解于1000 mL 容量瓶中，定容到刻度后混匀。
乙酸锌溶液（183 g/L）：称取乙酸锌[Zn(CH3COO)2·2H2O]219 g，加入32mL乙酸，用水溶解于1000 mL容量瓶中，定容到刻度后混匀。
磷酸盐缓冲液（pH=6.7）：分别称取2.5g磷酸二氢钾（KH2PO4）和2.5 g 磷酸氢二钾（K2HPO4·3H2O）于1000 mL 容量瓶中，用水定容到刻度后混匀，用滤膜过滤后备用。
氢氧化钠溶液（0.1 mol/L）：称量4g氢氧化钠（NaOH），用水溶解于1000 mL容量瓶中，定容到刻度后混匀，硫酸溶液（0.5mol/L）：移取30 mL的浓硫酸（H2SO4）到500 mL 水中，边搅拌边缓慢加入，冷却到室温后转移到1000 mL 容量瓶，定容到刻度后混匀。
甲醇水溶液：体积分数为50%。
标准溶液苯甲酸和山梨酸标准贮备液：每毫升含苯甲酸、山梨酸各500μg。
准确称取苯甲酸、山梨酸标准品各50.0 mg，分别置于100 mL容量瓶中，用甲醇溶解，并稀释至刻度。
摇匀后，冷藏于冰箱中，有效期2个月。
GB21703—2010苯甲酸和山梨酸的混合标准工作液：每毫升含苯甲酸、山梨酸各10μg。
实验1 食品中防腐剂的紫外光谱测定
实验食品中防腐剂的紫外光谱测定一、实验目的通过实验了解食品防腐剂的紫外光谱吸收特性，并利用这些特性对食品中所含的防腐剂进行定性鉴定。
掌握最小二乘法处理光度分析数据的方法并对食品中防腐剂的含量进行定量测定。
二、实验原理为了防止食品在储存、运输过程中发生变质、腐败，常在食品中添加少量防腐剂。
防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定。
苯甲酸和山梨酸以及它们的钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的两种主要防腐剂。
苯甲酸具有芳烃结构，在波长228nm和272nm处有K吸收带和B吸收带；山梨酸具有α、β不饱和羰基结构，在波长250nm处有π→π＊跃迁的K吸收带,因此根据它们的紫外吸收光谱特征可以对它们进行定性鉴定和定量测定。
由于食品中防腐剂用量很少，一般在千分之一左右，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此需要预先将防腐剂与其它成分分离，并经提纯浓缩后进行测定。
常用的从食品中分离防腐剂的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。
本实验采用溶剂萃取的方法，用乙醚将防腐剂从样品中提取出来，再经碱性水溶液处理及乙醚萃取以达到分离、提纯的目的。
采用最小二乘法处理标准溶液的浓度和吸光度数据，以求得浓度与吸光度之间的回归直线方程，并根据直线方程计算样品中防腐剂的含量。
三、仪器、试剂及材料1. 仪器：UV-2000紫外可见分光光度计和TU-1901紫外可见分光光度计；电子天平；带盖石英比色皿2个；分液漏斗 150mL，250mL；容量瓶 0mL，25mL，100mL；移液管 1 mL ，2mL，5mL，10 mL2. 试剂：苯甲酸；山梨酸；乙醚；NaCl；NaHCO3(1％水溶液）；HCl（0.05mol·L-1，2mol·L-1）待测样品：饮料、果汁、果酱或酱油。
(学生自备)四、实验步骤1. 认真阅读UV-2000紫外可见分光光度计的操作说明书。
2．样品中防腐剂的分离准确称取待测样品2.0g，用40mL蒸馏水溶解，移入150mL分液漏斗中，加入适量的粉状NaCl，待溶解后滴加 0.lmol·L-1HCl，使溶液的pH＜4。
饮料中防腐剂含量的检测
饮料中防腐剂含量的检测
王永明;李彩云;努娜
【期刊名称】《内蒙古民族大学学报》
【年(卷),期】2009(015)004
【摘要】本文简要介绍了防腐剂的含义及分类,指出了人们对防腐剂认识的误区,并提出了一种简便、快捷、准确检测饮料中防腐剂含量的方法--紫外光谱法.
【总页数】2页(P98-99)
【作者】王永明;李彩云;努娜
【作者单位】河北廊坊武誓学院基础部,河北廊坊06S000;河北廊坊武誓学院基础部,河北廊坊06S000;河北廊坊武誓学院基础部,河北廊坊06S000
【正文语种】中文
【中图分类】O6-3
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4.高效液相色谱法测定饮料中防腐剂的含量 [J], 刘志忠;袁姗;高明珠
5.2004年中国省级疾控中心食品检验质控考核结果与分析——酱油和饮料中常见防腐剂和甜味剂含量测定 [J], 李业鹏;杨大进;方从容;宋书峰;王竹天
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实验四食品中防腐剂的测定-紫外可见分光光度法
实验四食品中防腐剂的测定-紫外可见分光光度法光谱技术在食品分析中的应用实验四食品中防腐剂的测定-紫外可见分光光度法一、实验目的1、了解紫外可见分光光度计仪器的基本结构和原理；2、学会紫外可见分光光度计仪器的操作技术；3、了解食品中防腐剂的测定意义；4、学会用此法测定山梨酸。
二、基本原理用三氯甲烷从样品中提取出山梨酸，再以碳酸氢钠提取，使山梨酸形成钠盐溶于水溶液中，山梨酸钠水溶液在254nm处有最大的吸收峰，测其吸光度可对其定量。
三、仪器和试剂1、仪器（1）紫外分光光度计UV-2450（岛津），石英比色皿（2）组织捣碎机2、试剂（1）三氯甲烷：以三氯甲烷体积之半的碳酸氢钠（0.5mol/L）提取两次，用无水硫酸钠干燥，过滤备用。
（2）0.5mol/L碳酸氢钠：取21克碳酸氢钠溶于500毫升水中。
（3）0.3mol/L碳酸氢钠：将13.6克碳酸氢钠溶于500毫升水中。
（4）6mol/L盐酸（5）山梨酸标准液（100微克/毫升）：准确称取100毫克山梨酸于1000毫升容量瓶中，用0.3mol/L碳酸氢钠稀释至刻度，使用时再稀释成50ug/ml的山梨酸标准使用液。
四、实验步骤1、样液的制备：称取50.0克样品加450毫升水于组织捣碎机中，搅5分钟，取10克匀浆于50毫升容量瓶中，以水定容，移取10毫升此溶液于分液漏斗中，加6mol/L盐酸1～2滴酸化，用50毫升氯仿提取1分钟，将氯仿层分至250毫升带塞锥形瓶中，用3克无水硫酸钠干燥，振摇后静置。
2、标准曲线的绘制：取25毫升比色管5支，分别加入山梨酸标准使用液0、0.5、1.0、1.5、2.0毫升，用0.3mol/LNaHCO3稀释至刻度，于254nm处测吸光度，作标准曲线。
3、样品中山梨酸的测定：取上述氯仿液25毫升于125毫升分液漏斗中，用25毫升0.3mol/L碳酸氢钠提取1分钟，静置分层后，小心放出氯仿层，测水层吸光度，从标准曲线中找出山梨酸的含量。
紫外分光光度法检测饮料中防腐剂的实验方案[20121120][1]
![紫外分光光度法检测饮料中防腐剂的实验方案[20121120][1]](https://img.taocdn.com/s3/m/05a34b42af1ffc4ffe47acc0.png)
紫外可见分光光度计法测定食品中防腐剂的含量一、实验目的1.进一步了解和熟悉紫外-分光光度计的原理和结构，以岛津UV-2450为例学习紫外分光光度计的操作。
2.掌握利用紫外分光光度法测定苯甲酸和山梨酸的吸收光谱图。
3.掌握标准曲线法测定样品中苯甲酸和山梨酸及其钠盐和钾盐的含量。
二、实验原理为了防止食品在储存、运输过程中发生腐蚀、变质，常在食品中添加少量防腐剂。
防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸和山梨酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。
苯甲酸具有芳香结构，在波长225nm和272nm处有K吸收带和B吸收带。
根据苯甲酸（钠）在225nm处有最大吸收，测得其吸光度即可用标准曲线法求出样品中苯甲酸的含量。
山梨酸具有α,β-不饱和羰基结构，在波长255nm处有π—π*跃迁的K吸收带，因此可根据它们的紫外吸收光谱特征可以对它们进行定性鉴定和定量测定。
由于食品中防腐剂用量很少，GB2760-2011 规定0.2-1.5g/kg，并且食品样品中其它的成分也可能对防腐剂的测定具有干扰作用，因此一般可预先将样品中的防腐剂与其它成分进行分离，再经过提纯和浓缩进行测定。
常用的分离方法包括蒸馏法和溶剂萃取法等。
本实验采用溶剂萃取法，先用HCl溶液将样品进行酸化，再利用乙醚将这两种防腐剂品从样品中萃取出来，然后将乙醚蒸发，剩下的萃取物经过碱性溶液（NaOH）溶解与处理。
最后对照标准物质，利用紫外分光光度计对目的成分进行检测。
三、实验仪器和试剂1.紫外可见分光光度计UV2450（日本岛津），1.0cm石英比色皿，50mL容量瓶。
2.HCl溶液（1:1）、NaOH溶液（40g/L）、NaCl溶液（5%）。
3.苯甲酸钠标准溶液的配制（1）苯甲酸钠标准贮备液（1.000g/L）：准确称量经过干燥的苯甲酸钠 1.000g（105℃干燥处理2h）于1000mL容量瓶中，用适量的蒸馏水溶解后定容。
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紫外可见分光光度计法测定食品中防腐剂的含量
一、实验目的
1.进一步了解和熟悉紫外-分光光度计的原理和结构，以岛津UV-2450为例学习紫外分光光度计的操作。
2.掌握利用紫外分光光度法测定苯甲酸和山梨酸的吸收光谱图。
3.掌握标准曲线法测定样品中苯甲酸和山梨酸及其钠盐和钾盐的含量。
二、实验原理
为了防止食品在储存、运输过程中发生腐蚀、变质，常在食品中添加少量防腐剂。
防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸和山梨酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。
苯甲酸具有芳香结构，在波长225nm和272nm处有K吸收带和B吸收带。
根据苯甲酸（钠）在225nm处有最大吸收，测得其吸光度即可用标准曲线法求出样品中苯甲酸的含量。
山梨酸具有α,β-不饱和羰基结构，在波长255nm处有π—π*跃迁的K吸收带，因此可根据它们的紫外吸收光谱特征可以对它们进行定性鉴定和定量测定。
由于食品中防腐剂用量很少，GB2760-2011 规定0.2-1.5g/kg，并且食品样品中其它的成分也可能对防腐剂的测定具有干扰作用，因此一般可预先将样品中的防腐剂与其它成分进行分离，再经过提纯和浓缩进行测定。
常用的分离方法包括蒸馏法和溶剂萃取法等。
本实验采用溶剂萃取法，先用HCl溶液将样品进行酸化，再利用乙醚将这两种防腐剂品从样品中萃取出来，然后将乙醚蒸发，剩下的萃取物经过碱性溶液（NaOH）溶解与处理。
最后对照标准物质，利用紫外分光光度计对目的成分进行检测。
三、实验仪器和试剂
1.紫外可见分光光度计UV2450（日本岛津），1.0cm石英比色皿，50mL容量瓶。
2.HCl溶液（1:1）、NaOH溶液（40g/L）、NaCl溶液（5%）。
3.苯甲酸钠标准溶液的配制
（1）苯甲酸钠标准贮备液（1.000g/L）：准确称量经过干燥的苯甲酸钠 1.000g（105℃干燥处理2h）于1000mL容量瓶中，用适量的蒸馏水溶解后定容。
该贮备液可置于冰箱保存一段时间。
（2）苯甲酸钠标准溶液（32mg/L）：准确移取苯甲酸钠储备液32.00mL于1000mL容量瓶中，加入蒸馏水稀释定容。
（3）系列标准溶液的配制：分别准确移取苯甲酸钠标准溶液0.50mL、1.00mL、1.50mL 、
2.00mL和2.50mL于5个10mL容量瓶中，用NaOH溶液稀释定容。
得到浓度分别为
1.6 mg/L、3.2 mg/L、4.8 mg/L、6.4 mg/L和8.0 mg/L的苯甲酸钠系列标准溶液。
4.山梨酸钾标准溶液的配制
（1）山梨酸钾标准贮备液（1.000g/L）：准确称量经过干燥的山梨酸钠 1.000g（105℃干燥处理2h）于1000mL容量瓶中，用适量的蒸馏水溶解后定容。
该贮备液可置于冰箱保存一段时间。
（2）山梨酸钾标准溶液（16mg/L）：准确移取山梨酸钾储备液16.00mL于1000mL容量瓶中，加入蒸馏水稀释定容。
（3）系列标准溶液的配制：分别准确移取山梨酸钾标准溶液0.50mL、1.00mL、1.50mL 、
2.00mL和2.50mL于5个10mL容量瓶中，用NaOH溶液稀释定容。
得到浓度分别为
0.8mg/L、1.6 mg/L、2.4 mg/L、3.2 mg/L和4.0 mg/L的山梨酸钾系列标准溶液。
四、样品前处理
液体样品：酱油、食醋取5mL，饮料取10mL于125mL分液漏斗中，加入盐酸溶液2mL进行酸化，用无水乙醚萃取三次，每次30mL，每次振摇1min。
合并乙醚层于250mL 分液漏斗中，用NaCl溶液洗涤2次，每次5-10mL。
然后用索氏抽提器回收乙醚，用NaOH 溶液溶解，定容至100mL备用。
若用雪碧等碳酸饮料可直接移取饮料1.5ml于50mL容量瓶中，用超声脱气5min驱赶二氧化碳后，用NaOH稀释定容备用。
五、实验操作
5.1开机
（1）打开计算机，打印机。
（2）打开主机开关，双击软件图标UVProbe，点击“Connect”与仪器联机，仪器开始自检，通过后按“OK”。
5.2吸收光谱的测定
（1）选择“Window”→“Spectrum”，打开光谱模块。
（2）选择“Edit”→“Method”，设定波长范围（从大到小），扫描速度（Fast），采样间隔（1.0），扫描方式（Single），Instrument Parameters（Absorbence）。
（3）样品池和空白池均放上2.5mL缓冲溶液，点击光度计按键条中的“Baseline”，启动基线校正，点击确定。
注：在开始基线校正之前，确认样品或参比光束无任何障碍物，且样品室中没有样品。
（4）参比池中加入缓冲溶液，样品池中加入标准液，点击按键条中的“Start”，测定紫外可见吸收光谱。
（5）扫描完成后，在弹出的新数据采集对话框中输入样品名，点击确定。
（6）图谱保存：选择“File”→“Save as”，在对话框顶部的保存位置中选择适当的路径，输入文件名，保存类型中选择Spc，点击“保存”。
（7）最大吸收峰：选择“Operations”→“Peak Pick”，找到最大吸收峰对应的波长。
5.3标准曲线法测定待测样品的浓度
(1)选择“Window”→“Photometric”，打开测量光度模块。
(2)选择“Edit”→“Method”，设置合适的波长（“Wavelength”），如225nm，点击“Add”，
点击选定的Wavelength，根据提示，点击next，next，方法，设定保存路径，点击“保存”。
(3)样品池和空白池均放上2.5mL缓冲溶液，点击光度计按键条中的“Cell blank”，进行背
景校正。
(4)标准曲线：在Standard table框里输入Sample ID（从1开始），标准溶液的浓度
“Concentration”，输入完毕，将光标移到WL225下。
在样品池中由稀到浓，依次放入系列标准溶液，点击按键条中的“Read std”，依次读出标准系列溶液的吸光度值。
（浓度为0 的空白液可先按“自动归零”后再读数）
(5)点击“Graph”→“Standard Curve Statistics”→“Equation”，“Correlation Coefficient”，
得到标准曲线的方程和相关系数。
(6)同样，样品池中分别放入样本，在Sample table框里框里输入Sample ID，点击按键条中
的“Read std”，读出待测溶液的浓度和对应的吸光度值。
4.4关机
点击菜单中“Instrument”→“configure”→“maintenance”，进入界面后点击“D2”、“W1”，关闭氘灯和钨灯，再点击按键条中“Disconnect”，然后关仪器软件，最后关电脑和仪器电源。
4.5 数据处理
六、思考题
1. 紫外可见分光光度计由哪些部件构成？各有什么作用？
光源单色器样品池检测器记录装置
1.为什么在吸光度测定时，要尽量控制A在0.2—0.7之间比较合理？
2.简述电子跃迁图。
解释吸光度的加和性出师表
两汉：诸葛亮
先帝创业未半而中道崩殂，今天下三分，益州疲弊，此诚危急存亡之秋也。
然侍卫之臣不懈于内，忠志之士忘身于外者，盖追先帝之殊遇，欲报之于陛下也。
诚宜开张圣听，以光先帝遗德，恢弘志士之气，不宜妄自菲薄，引喻失义，以塞忠谏之路也。
宫中府中，俱为一体；陟罚臧否，不宜异同。
若有作奸犯科及为忠善者，宜付有司论其刑赏，以昭陛下平明之理；不宜偏私，使内外异法也。
侍中、侍郎郭攸之、费祎、董允等，此皆良实，志虑忠纯，是以先帝简拔以遗陛下：愚以为宫中之事，事无大小，悉以咨之，然后施行，必能裨补阙漏，有所广益。
将军向宠，性行淑均，晓畅军事，试用于昔日，先帝称之曰“能”，是以众议举宠为督：愚以为营中之事，悉以咨之，必能使行阵和睦，优劣得所。
亲贤臣，远小人，此先汉所以兴隆也；亲小人，远贤臣，此后汉所以倾颓也。
先帝在时，每与臣论此事，未尝不叹息痛恨于桓、灵也。
侍中、尚书、长史、参军，此悉贞良死节之臣，愿陛下亲之、信之，则汉室之隆，可计日而待也。
臣本布衣，躬耕于南阳，苟全性命于乱世，不求闻达于诸侯。
先帝不以臣卑鄙，猥自枉屈，三顾臣于草庐之中，咨臣以当世之事，由是感激，遂许先帝以驱驰。
后值倾覆，受任于败军之际，奉命于危难之间，尔来二十有一年矣。
先帝知臣谨慎，故临崩寄臣以大事也。
受命以来，夙夜忧叹，恐托付不效，以伤先帝之明；故五月渡泸，深入不毛。
今南方已定，兵甲已足，当奖率三军，北定中原，庶竭驽钝，攘除奸凶，兴复汉室，还于旧都。
此臣所以报先帝而忠陛下之职分也。
至于斟酌损益，进尽忠言，则攸之、祎、允之任也。
愿陛下托臣以讨贼兴复之效，不效，则治臣之罪，以告先帝之灵。
若无兴德之言，则责攸之、祎、允等之慢，以彰其咎；陛下亦宜自谋，以咨诹善道，察纳雅言，深追先帝遗诏。
臣不胜受恩感激。
今当远离，临表涕零，不知所言。
3.。