HPLC法测定氯化血红素片剂的含量
HPLC法测定氯化血红素片剂的含量
取对照品 10 mg , 精密称定 , 置 500 mL 容量瓶 中 , 用 0. 1 molΠL NaOH 溶解至刻度 , 分别取此对 照品的碱液 1 、3 、5 、7 、10 mL 置 100 mL 容量瓶 中 , 用甲醇稀释至刻度 , 进样 20μL , 以浓度为横 坐标 , 峰面积为纵坐标 , 绘制标准曲线 , 用最小二 乘法进行线性回归 , 得线性方程为 y = 179857 x + 21101 = 0. 9998 ; 表明氯化血红素的浓度在 0. 2034 ～2. 034μgΠmL 范围内线性关系良好 。 4 检出限和定量限
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HPLCΠDAD 法测定氯化血红素片剂中氯化血红素 的含量 , 取得了满意的结果 。 1 实验部分 1. 1 仪器与试剂
Shimadzu LC10 Avp 高效液相色谱仪 , CTO210 Avp 检测器 , Class2VP 色谱工作站 , BP211D 电子天 平 ( Sartorius) , PB210pH 计 (sartorius) 。
氯化血红素是一种生物铁[2] , 作为缺铁性贫 血的天然补品及药物原料 , 它能被人体很好的吸 收 , 无毒副作用 , 是现代医学公认的防治缺铁性 贫血 、吸收率高 、效果好的生物铁源 , 无铁腥味 , 不刺激胃肠 , 具有较好应用开发前景 。
图1
目前国内文献报道氯化血红素的含量测定的 方法 , 大 多 采 用 紫 外 分 光 光 度 法[3] , 本 文 采 用
HPLC法测定血再生片中丹参酮ⅡA的含量
HPLC 法测定血再生片中丹参酮Ⅱ A的含量的含量测定的方法。
方法：采用摘要：目的：建立血再生片中丹参酮ⅡA（4.6 mm×250 mm,5 μm），甲醇-水（80∶20）HPLC法，选用色谱柱：资生堂C18为流动相，检测波长为:270 nm，流速为1.0 mL/min，柱温：30℃。
结果：线性范围为A=0.1824—1.2748µgr=0.99999（n=6），平均回收率为96.60％，RSD%=1.54%。
结论：本方法操作简便，灵敏度高，可用于血再生片中含量测定的质量控制。
；高效液相色谱法；含量测定；关键词：血再生片；丹参酮ⅡA血再生片由丹参、当归、熟地黄3味中药制成，收载于卫生部《药品标准中药成方制剂》第八册中。
具有活血补血的功效，用于慢性苯中毒引起的白细胞减少症[1]。
现有质量标准中尚未有定量测定研究，不能很好地控制片剂的质量，进为确保药品质量，本试验选用HPLC法对血再生片中丹参的有效成分丹参酮ⅡA行含量测定，为质量标准的制定提供一定依据。
1.仪器与设备样品：血再生片（生产单位：广州；批号为：190601，190602，190603）；对照品：丹参酮Ⅱ（供含量测定用，生产单位：中国食品药品检定研究院，批号：A110726-201011）；甲醇（色谱纯，生产单位：天津市康科德科技有限公司），水为去离子水；其它试剂均为分析纯。
Agilent1260 Series高效液相色谱仪、ChemStation工作站（Agilent科技有限公司）；MS105DU电子分析天平（美国梅特勒,十万分之一）。
2.方法与结果2.1 色谱条件的选择[2]（4.6 mm×250 mm,5 μm）；流动相：甲醇-水（80：20，色谱柱：资生堂C18V/V）；检测波长：270nm；流速：1.0mL/min；柱温：30℃；进样量：10µL。
2.2 溶液的制备2.2.1对照品溶液的制备，加甲醇制成每1mL含0.0921mg的溶液。
片剂含量测定的方法
片剂含量测定的方法片剂含量测定是药品质量控制中的一项重要内容，准确测定片剂的含量对于保障药物疗效和安全性具有重要意义。
现将片剂含量测定的方法进行详细介绍。
实验室中常用的片剂含量测定方法包括荧光分光光度法、高效液相色谱法、紫外分光光度法和重量法。
荧光分光光度法是一种常用的快速含量测定方法。
该方法利用荧光分析仪器对药物中的成分进行测定，通过受激发射和荧光衰减的原理，可以准确测定片剂中的药物含量。
具体操作步骤如下：首先，将待测片剂样品取适量，粉碎并溶解于适量的溶剂中。
然后，将溶液过滤并取适量于荧光分析仪器中，设置合适的激发波长和检测波长。
最后，进行测定并记录荧光强度值，通过标准曲线法计算出样品中的药物含量。
高效液相色谱法是一种常用的精确含量测定方法。
该方法利用高效液相色谱仪器对药物中的成分进行分离和测定，通过样品在柱上的保留时间和峰面积进行定量。
具体操作步骤如下：首先，将待测片剂样品取适量，溶解于适量的溶剂中。
然后，将溶液通过高效液相色谱仪器进行分离，根据不同成分在柱上的分离时间进行定性和定量分析。
最后，通过样品峰面积与标准曲线进行比对，计算出样品中的药物含量。
紫外分光光度法是一种常用的快速含量测定方法。
该方法利用紫外分光光度计对药物中的成分进行测定，通过吸收峰的强度和波长进行定量。
具体操作步骤如下：首先，将待测片剂样品取适量，溶解于适量的溶剂中。
然后，将溶液过滤并取适量于紫外分光光度计中，设置合适的波长进行测定。
最后，通过吸光度值与标准曲线进行比对，计算出样品中的药物含量。
重量法是一种常用且简单的含量测定方法。
该方法通过测量待测片剂的重量与已知浓度药物样品的重量进行比较，计算出样品中的药物含量。
具体操作步骤如下：首先，将待测片剂样品取适量，粉碎并称取固定重量。
然后，取已知浓度的药物样品，称取相同重量。
最后，通过比较不同样品的重量差异，计算出待测片剂中的药物含量。
以上是常用的片剂含量测定方法，不同的方法适用于不同的药物和实验需求。
氯化高铁血红素的使用工艺与检验方法
4、氯化（高铁）血红素的使用工艺与检验方法
一、氯化（高铁）血红素使用工艺
氯化（高铁）血红素是蓝黑色粉末，作为铁类的营养强化剂，在使用过程中，可直接添加至各类食品中或者与其它原料混合后添加。
二、氯化（高铁）血红素检验方法
1、氯化血红素含量的测定
1.1 标准曲线的制备
精密称取经105℃干燥至恒重的对照品约18mg，置100ml量瓶中0.1mol/L 氢氧化钠溶液适量使完全溶解后，稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取上述溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml置100ml量瓶中，用0.1mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，以溶剂为空白，在384 nm±1nm波长处测定吸收值A，经线性回归，得回归方程。
1.2 结果计算
取待测定含量的氯化（高铁）血红素，精密称取约200mg，预先置已加入
0.1mol/L氢氧化钠溶液的烧杯中搅拌溶解，并微热，然后将溶液移入100ml
量瓶中，用0.1mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液5ml置100ml量瓶中，用0.1mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，以溶剂为空白，在384 nm±1nm波长处测定吸收值A，代入回归方程，求算氯化血红素含量。
1.3 准确度与精密度
本方法测定浓度1.80µg/ml―9.10µg/ml范围内，线性关系好，相关系数在0.9993以上。
本方法经不同浓度加标回收实验，回收率为96.7%，RSD=1.35（n=5）。
重复性实验批内相对标准差（RSD）为1.93%。
抗贫血药物的含量检测
抗贫血药物的含量检测1．实验目标（1）练习用比色管配制一定物质的量浓度的溶液，并用目视比色法测定待测溶液某组分的含量。
（2）练习利用滴定管、容量瓶量取、配制一定物质的量浓度的溶液。
（3）灵活运用有关化学计算技能，进行实验结果分析。
2．预习指导（1）实验原理：许多物质本身具有明显的颜色，如KMnO4溶液显紫色，CuSO4溶液显蓝色；有些溶液本身无色，但加入其他试剂后，具有明显的颜色，如Fe3+中加入SCN-（），显红色。
上述溶液颜色的深浅和溶液的浓度有关，在一定条件下，这些溶液的颜色愈深，浓度愈大，故可以通过比较颜色的深浅来测定有色物质的含量，这样的方法叫比色分析法。
比色法具体可分为目视比色法和分光光度法。
目视比色法：比较有色溶液对溶液透过光的强度，如CuSO4溶液透过蓝色光的强度。
分光光度法：比较有色溶液对某一波长光的吸收，如CuSO4溶液对黄色光的吸收强度的比较。
（2）本实验利用反应，通过目视比色法测定含铁物质中的Fe3+的含量。
在制备色阶和待测溶液的过程中，由于Fe3+存在水解的可能，所以应当加入适量盐酸，使溶液的pH<4．5。
如果待测溶液中含有Fe2+化合物，应当加入硝酸使其氧化为Fe3+。
（3）以复方硫酸亚铁片为例，每片药片说明书标示含量（以Fe2+计算）为50 mg，合算铁元素的物质的量约为8．9×10-4 mol，配制成100 mL溶液，其物质的量浓度约为8．9×10-3 mol /L。
色阶溶液的配制应保证其处于色阶范围之内。
（4）色阶溶液浓度的计算：若Fe3+标准溶液的物质的量浓度为c，每次量取该标准溶液的体积为V mL，比色管容积为50 mL，则比色管内标准溶液的物质的量浓度c为：50（5）配制一定物质的量浓度的溶液使用比较精密的分析天平和容量瓶，操作中注意操作规范，以减小操作误差的发生。
使用容量瓶时注意使用玻璃棒引流，以避免溶液的损失，提高实验的准确性。
氯化血红素的制备及含量测定
氯化血红素的制备及含量测定实验目的1、掌握氯化血红素制备的原理。
2、了解血红素的药用价值。
实验原理血红素（heme）是高等动物血的红色素，由原卟啉与Fe2+结合而成，它与珠蛋，另外它还是白结合成血红蛋白。
在体内的主要生理功能是载氧，帮助呼出CO2cty P450、cty c、过氧化酶的辅基。
血红素不溶于水，溶于酸性丙酮及碱性水中，在溶液中易形成聚合物，临床上常用作铁强化剂和抗贫血药及食物中色素添加剂，另外可用于制备原卟啉来治疗癌症。
氯化血红素(hemin)的制备实验室常用酸性丙酮分离提取法，使血球在酸性丙酮中溶血，抽提后再经浓缩、洗涤、结晶得到氯化血红素。
工业上制取氯化血红素常用冰乙酸结晶法，血球用丙酮溶血后，制取血红蛋白，再用冰乙酸提取。
在氯化钠存在下，氯化血红素沉淀析出。
卟啉环系化合物在400nm处有强烈吸收，称Soret带，最大吸收波长对各种卟啉化合物是特征的，但溶剂对最大吸收波长也有影响，采用0.25%碳酸钠作溶剂。
在600nm处有特征吸收峰，光吸收值与氯化血红素浓度的关系符合朗比定律。
实验材料1、器材（1）烧杯 1000ml 1只 500ml 2只 250ml 2只（2）抽滤瓶 500ml 1只（3）布氏漏斗 8cm 1只（4）三颈瓶 500ml 1只（5）电动搅拌机 1台（6）球形冷凝管 30cm 1只（7）温度计 200℃ 1支（8）离心机 1只（9）分液漏斗 500ml 1只（10）小试管 20只2、试剂（1）新鲜猪血 500ml；（2）0.8%柠檬酸三钠 20ml（3）丙酮（4）冰乙酸（5）氯化钠（固体）（6）氯化钾（固体）（7）浓盐酸（8）20%氯化锶（9）0.25%碳酸钠实验方法1、酸性丙酮抽提0.8%柠檬酸三钠抗凝猪血200ml，离心（3000r/min）15min，倾去上层血浆，制得血球，加2-3倍的蒸馏水，充分溶胀后，沸水浴20-30min，纱布过滤，滤渣加入含3%盐酸的丙酮溶液200ml，振摇抽提30min，抽滤，将滤液用旋转蒸发仪浓缩至原体积的1/3-1/4，加入20%氯化锶至终浓度2%，静置15min，离心10min，沉淀用水、95%乙醇、乙醚各洗涤一次，真空干燥后得氯化血红素粗品，称重，计算收率。
片剂和注射剂中药物含量测定
（1）吸收系数法
（2）对照法
98：83．对乙酰氨基酚的含量测定方法为：取本品约40mg，精密称定，置250ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10m1，加水至刻度，摇匀，照分光光度法，在257nm的波长处测定吸收度，按C8H9NO2的吸收系数( )为715计算，即得。若样品称样量为m(g)，测得的吸收度为A，则含量百分率的计算式为（A）
排除 改用氧化电位稍低的氧化剂 硫酸亚铁 高锰酸钾滴定法 硫酸亚铁片 硫酸铈滴定法 氧化剂 氧化电位
KMnO4 + 1.51 V Ce(SO4)2 + 1.44 V HNO3 + 0.94 V FeCl3 + 0.77 V I2 + 0.54 V
A. B. C. D. E.
例：利血平的含量测定方法为： 对照品溶液的制备 精密称取利血平对照品20mg，置100ml量瓶中，加氯仿4ml使溶解，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀；精密量取5m1，置50ml量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。 供试品溶液的制备 精密称取本品0.0205g，照对照品溶液同法制备。
例：丙酸睾酮注射液 含量测定 USP（21）柱色谱——UV法 ChP（2000）甲醇提取——HPLC法 例：碘化油注射液 含量测定
△
例：黄体酮注射液含量测定 ChP（2000）甲醇提取——HPLC法
（3）助溶剂：助溶剂有苯甲酸钠、枸橼酸钠等。没有一般分析方法，根据药物本身性质考虑，如咖啡因注射液，在酸性下用碘量法测定时，苯甲酸在酸性下析出，不产生干扰。
建议选则方法： 主药量大，附加成份不干扰 容量法或重量法测定 主药可溶于有机溶剂 有机溶剂提取后测定 主药量少 光谱法或色谱法
片剂中间体含量实验步骤
片剂中间体含量实验步骤
测试片剂中间体含量的实验步骤如下：
1. 准备所需的实验材料和设备，包括片剂样品、有机溶剂（例如乙醇、甲醇等）、滤纸、电子天平、量筒、移液管等。
2. 将一定量的片剂样品取出，并使用电子天平精确称量其质量。
记录下样品质量。
3. 将称量好的片剂样品放入容器中。
4. 使用一定量的有机溶剂将容器中的片剂样品溶解，使其充分溶解并均匀混合。
可以使用摇床或者超声波处理器协助溶解。
5. 取一定体积的溶液，可以用量筒或移液管等工具，称量溶液的体积，并记录下来。
6. 将取得的溶液通过滤纸过滤，去除其中的固体颗粒。
7. 取一定量的滤过液，可以用量筒或移液管等工具，定量吸取滤过液，称量其质量。
8. 将称量得到的滤过液放入干燥皿中，放置到恒温箱或者烘箱中进行干燥。
干燥的温度和时间根据具体要求进行调节。
9. 将干燥后的皿子和溶液重量称量，并记录下来。
10. 根据所得数据计算片剂样品中间体的含量。
计算公式为：中间体含量（%）=（滤液的质量-空白样品的质量）/片剂样品的质量× 100%。
注意事项：
- 实验过程中要采取适当的措施防止环境污染和交叉污染。
- 操作过程中要保持实验仪器和容器的洁净。
- 实验室操作应严格遵守安全规范，佩戴实验手套、眼镜等个人防护设备。
- 实验结束后，废弃物应正确处理，溶剂可以通过蒸发或其他合适的方式进行处理。
高效液相色谱法测定片剂中的有关物质
高效液相色谱法测定片剂中的有关物质
高效液相色谱法是一种常用的分离和定量分析技术，可以用于测定片剂中的有关物质。
下面是测定片剂中有关物质的高效液相色谱法的一般步骤：
1. 样品制备：将片剂样品研磨或粉碎，并取适量样品称量到容量瓶中，加入适量的溶剂溶解和稀释，制备成一定浓度的溶液。
2. 色谱柱选择：选择合适的色谱柱，如反相色谱柱、离子交换柱等，根据需要选择合适的柱温和洗脱溶剂。
3. 色谱条件设置：设置适当的流速、波长和柱温等条件。
根据目标物的性质和样品矩阵的特点，选择合适的检测波长和色谱条件，以提高分离效果和检测灵敏度。
4. 样品注射：用自动进样器或手动注射器将制备好的样品注入到色谱柱中。
5. 色谱分离：通过调整洗脱溶剂浓度梯度或使用不同的洗脱溶剂组合，将目标物和其他干扰物逐渐从色谱柱中洗脱出来。
6. 结果分析：根据色谱检测器所得到的响应信号，通过定量分析软件对色谱峰进行峰面积计算，进而根据内标法或外标法进行定量测定。
7. 方法验证：对该方法进行准确性、重复性、线性、灵敏度和选择性等方面的验证，确保测定结果的准确性和可靠性。
需要根据具体的有关物质，选择合适的色谱柱和洗脱溶剂，并进行合适的优化和验证，以确保测定的准确性和可靠性。
西泉眼水库污染源分析与评价
表５
。
硫酸盐（ ０ 。计） 以ｓ ｊ
１４ 降水 降 尘 污 染 ．
降水 降尘 的污染可根据多年平均 降水 量和降水 、 降尘 的 总氮、 总磷实测值估算 直接入 库 的降水和 降尘 的氮 、 年贡 磷 献量。我们在西泉 眼水库 库 区分别设 了两个降水 采样点和 两个降尘采样点于神女峰宾馆和渔业公司， 两点位相距约 １５ｉ ．ｋ 。共进行 了 ６ ｎ 次降水 检测 和 ２ 次降尘 检测 ， 测总氮 检 和总磷两项指标 。用 总氮和 总磷 的平均 值 、 多年平均降水量 。 （６ｍ ）年平均降尘量（５２／ｉ ）水库多年平均水面积 ５４ ｍ 、 ８ ．ｔ ｎ 、 ｋ￣
１５ 库 区周围旅 游业及 养殖业污染 ．
西泉眼水 库建 有的旅店 、 饭店规模均不大 。船只数 目也
监测总氮、 、 总磷 高锰 酸盐指 数 、 亚硝 酸盐 、 酸盐 、 硝 氨氮 、 水 温 、Ｈ值 、 ｐ 化学需氧量 、 生化需氧量 、 溶解 氧等 ３ 项指标 ， Ｏ 见
表 ６ 。
表６ 河流水质监测 平均值统计表 单位 ： ｇ Ｌ ｍ／
— —
１ — —
２ 结果与分析
表１ 方 法
２ ｌ ｏ ０１ Ｏｌ ０Ｂ ２ Ｏ１ ｏ Ｉ ０１ ｏ Ｏ ２ ｌ （ ２ Ｏ ０ ｇ ２ ｏ ０ ２ ｏ ８哈 ２ ０ ９ １ ０ ｏ纷０
１ １ 点 污染 源 ．
由于 帽儿 山和平 山两镇生 活污 水均 以沿街泼洒 的方式 排放 ， 所以两个 生活污水 点源 排放 的氮、 仅有一少部 分随 磷 地表径流 以面源污染的形式进入西泉 眼水 库 ， 以下面源 的 在 讨论中将进一 步计算分析 。
１２ 面 源 污 染 ．
片剂和注射剂中药物的含量测定.
抗氧剂
常用抗氧剂有亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠 及维生素C等。
SO
SO
HSO [O] HSO
SO
SO
碘量法 溴量法 铈量法 亚硝酸钠法
抗氧剂的消除
加入掩蔽剂（丙酮或甲醛）
NaHSO3
H 3C
C
O
H3C
H
C
O
H
H 3C
SO3Na
C H3C
加入弱氧化剂氧化(H202和HNO3)
要求——加入的弱氧化剂能将抗氧剂(亚硫酸盐等)氧化，而不氧化 被测药物，不消耗滴定液。
SO32
SO
2 4
HSO3 弱 [ O] HSO4
2S2 O 32
S4 O 62
UV吸收谱差消除干扰
柱色谱法
USP测定丙酸睾酮注射液
油溶液
丙酸睾酮，甾醇，三萜 类
标示量(%)
AX mR W
100％
AR W 标示量(mg / 片)
2.2 高效液相色谱法 (2005版Ch.P) 【含量测定】照高效液相色谱法(附录ⅤD)测定
色谱条件与系统适用性试验 用氰基键合相硅胶为填充剂；以乙腈-水-三乙胺(50:50: 0.5)（用冰醋酸调节pH值至6.5）为流动相；检测波长为258 nm。理论塔板按盐酸苯 海拉明峰计算不低于5000。盐酸苯海拉明峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。
原理 使用阴离子表面活性剂溶液作为滴定剂的方法。常用于呈阳离子态的有机碱 性药物的含量测定。
终点前
BH R SO3 BH·R SO3 有机相
终点时
InH R SO3 InH·R SO3 有机相(变色)
氯化高铁血红素的使用工艺与检验方法
氯化高铁血红素的使用工艺与检验方法
4、氯化（高铁）血红素的使用工艺与检验方法
一、氯化（高铁）血红素使用工艺
氯化（高铁）血红素是蓝黑色粉末，作为铁类的营养强化剂，在使用过程中，可直接添加至各类食品中或者与其它原料混合后添加。
二、氯化（高铁）血红素检验方法
1、氯化血红素含量的测定
1.1 标准曲线的制备
精密称取经105℃干燥至恒重的对照品约18mg，置100ml量瓶中0.1mol/L 氢氧化钠溶液适量使完全溶解后，稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取上述溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml置100ml量瓶中，用0.1mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，以溶剂为空白，在384 nm±1nm波长处测定吸收值A，经线性回归，得回归方程。
1.2 结果计算
取待测定含量的氯化（高铁）血红素，精密称取约200mg，预先置已加入
0.1mol/L氢氧化钠溶液的烧杯中搅拌溶解，并微热，然后将溶液移入100ml
量瓶中，用0.1mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液5ml置100ml量瓶中，用0.1mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，以溶剂为空白，在384 nm±1nm波长处测定吸收值A，代入回归方程，求算氯化血红素含量。
1.3 准确度与精密度
本方法测定浓度1.80μg/ml―9.10μg/ml范围内，线性关系好，相关系数在0.9993以上。
本方法经不同浓度加标回收实验，回收率为96.7%，RSD=1.35（n=5）。
重复性实验批内相对标准差（RSD）为1.93%。
HPLC法测定活血片中血竭素的含量
HPLC法测定活血片中血竭素的含量新疆维吾尔自治区维吾尔医研究所(乌鲁木齐830001) 李建梅 斯拉甫艾白摘 要:目的:研究活血片的含量测定方法。
方法:用RP-HPLC法对血竭素进行含量测定,采用Waters symmetry C18(4. 6×150mm,5um)为色谱柱,乙腈-0.05molΠL磷酸二氢钠(40:60);流速:1.0mlΠmin。
结果:血竭素进样量在0.216mg～0. 648mg的范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9998,日内、日间精密度RSD分别为1.26%和0.96%(n=5),平均加样回收率(n=6)分别为99.52%,RSD分别为1.19%。
结论:本法操作简便,重复性好,结果准确可靠。
关键词:高效液相色谱法;血竭素;活血片中图分类号:R291.5 文献标识码:A 文章编号:1006-6810(2008)08-0033-02 活血片是在维吾尔医基础之上,将其原有工艺细化而成的一种维吾尔医常用制剂,由血竭等多味药材组方而成,具有止痛、利尿的功效。
用于尿痛,尿不尽,尿血,尿道流脓等症。
该制剂在临床上应用多年,实践证明疗效确切,副作用小。
原质量标准提供的方法无含量测定方法,因此为了更有效的提高及控制本品的质量,我们对原工艺进行了细化研究,本文就对新工艺制备的活血片的重点质控项目进行研究,检测活血片中主要成分血竭中血竭素的含量[1]。
目前血竭素的含量测定方法有薄层扫描法[2]、高效液相色谱法[3]、二阶导数光谱法[4]等,而高效液相色谱法以其简便易行,灵敏度高的优势被普遍采用,故本研究以反相HPLC法测定血竭素的含量,取得了较为满意的结果。
1 仪器与试药Water s高效液相色谱仪,Waters600控制器,Waters 2996紫外检测器,Waters Delta600四元泵,W aters717自动进样器,色谱柱:Waters symmetry C18(4.6×150mm, 5um);超声波发生器(上海科导超声仪器有限公司);超纯水器(美国密理博公司)。
高效液相色谱法同时测定中成药红药片中5种成分
.硏究.Drug Research China Pharmaceuticals 2018年5月5日第27卷第9期Vol.27, No.9, May5,2018•检验检测• do i: 10. 3969/j.issn. 1006 -4931. 2018. 09. 005高效液相色谱法同时测定中成药红药片中5种成分李敏1赵健2白钢钢1A(1.江苏省泰州市食品药品检验所，江苏泰州225300; 2.武警安徽总队医院，安徽合肥230000)摘要：目的建立中成药红药片的含量测定方法。
方法采用高效液相色谱法对中成药红药片中三七皂苷R i和人参皂苷R gi、人参皂苷R e、人参皂苷R th、人参皂苷R d进行含量测定。
色谱柱采用Waters XBridge C i8柱牗50 m m x 4. 6m m，3. 5 (xm)，柱温为25 t，流动相A为乙腈溶液，B为水，梯度洗脱，流速为0. 8m L/m in,检测波长为203 nm。
结果三七皂苷R进样量线性范围为0. 05606〜0.420 50 mg(「= 0.9991)，加样回收率为96.60%，兄SZ)为0.62%牗= 6);人参皂苷R g进样量线性范围为0. 227 50〜1. 706 20 m g(r = 0.9991)，加样回收率为99. 64%，兄SZ)为0. 59%牗=6);人参皂苷R e进样量线性范围为0.03087〜0.23160 m g(r = 0. 999 3)，加样回收率为100.21%，兄SZ)为2. 90%牗= 6);人参皂苷R th进样量线性范围为0. 241 30〜1. 809 80 m g(= 0.9990)，加样回收率为100.52%，兄SZ)为 1. 07%牗=6);人参皂苷R d进样量线性范围为0. 05931〜0.444 80 m g( = 0. 999 1)，加样回收率为101. 61%，兄SZ)为2. 72%牗=6)。
高效液相色谱法测定补血调经片中原儿茶酸的含量
高效液相色谱法测定补血调经片中原儿茶酸的含量南劲松孙海涛吴艳丽高波【摘要】目的采纳高效液相色谱法测定补血调经片中原儿茶酸的含量。
方式采纳乙腈－%磷酸溶液（4∶96）作为流动相。
检测波长为260 nm，测定补血调经片中原儿茶酸的含量。
结果标准曲线线性范围为～μg，r= 99；平均回收率为%，RSD%＝%。
结论该实验方式线性关系良好、简便、准确、专属性强，可作为补血调经片操纵原药材和药品的质量方式。
【关键词】补血调经片；高效液相色谱法；原儿茶酸Abstract：ObjectiveTo establish a quality control method of Buxue Tiaojing HPLC system of a Alltima HP C18（ mm ID×250mm, 5 μm） was used and a mixture of acetonitrile-2% phosphoric acid (95∶5, volume ratio) as the mobile phase. The detection wavelength of Protoca-technic acid was 260 nm. ResultsProtocatechuic acid showed good linearity (r= 99) within the range of ～μg. The average recovery was %, RSD% was %. ConclusionThe method is simple, accurate and exclusive and it can be used for the quality control of Buxue Tiaojing Tablets.Key words：Buxue Tiaojing Tablets; HPLC; Protocatechuic acid补血调经片是由鸡血藤、阿胶、岗稔子、肉桂、党参等18味中药组成，具有补血理气、调经的功效，用于妇女贫血、面色萎黄、赤白带下、经痛、经漏、闭经等症。
HPLC测定利可君片的主药含量
ｃ ｏ ｌ ｕ ｍｎ （ ４ ． ６ ｍｘ ２ ５ ０ ｍ ｍ， ５ ｔ ｘ ｍ） ｗ ａ ｓ ａ ｄ ｏ ｐ ｔ ｅ ｄ ．Ｔ ｈ ｅ ｍ ｏ ｂ ｉ ｌ ｅ ｐ ｈ ａ ｓ ｅ ｃ ｏ ｎ ｓ ｉ ｓ ｔ ｅ ｄ ｏ ｆ ｐ ｈ ｏ ｓ ｐ ｈ ａ ｔ ｅ ｂ ｕ ｆ ｆ ｅ ｒ（ ｃ ｏ ｎ ｔ ａ ｉ ｎ ｉ ｎ ｇ １ ． ３ ６ ｇ ｏ ｆ Ｐ ｏ ｔ ａ ｓ ｓ ｉ ｕ ｍｓ ｐ ｈ ａ ｔ ｅ ｉ ｎ １ ｌ ｉ ｔ ｒ ｅ ｏ ｆ ｗ ａ ｔ ｅ ｒ ，ａ ｄ ｊ ｕ ｓ ｔ ｅ ｄ ｔ ｏ ｐ Ｈ ３ ． ０ ｗ ｉ ｔ ｈ ｐ ｈ ｏ ｓ ｐ ｈ ｏ ｒ ｉ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ ） 一 ａ ｃ ｅ ｔ ｏ ｎ ｉ ｔ ｒ ｉ ｌ ｅ（ ６ ０： ４ ０ ） ．
第４ ４卷第 ２ １ 期
２ ０ １ ６年 １ １月
广
州
化
工
Ｖｏ １ ． ４ ４ Ｎｏ ． ２ｌ
Ｇｕ ａ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｕ Ｃｈ ｅ ｍｉ ｃ ａ ｌ Ｉ ｎ ｄ ｕ ｓ ｔ ｒ ｙ
Ｎ Ｏ Ｖ ． ２ ０ １ ６
Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ测 定 利可 君 片 的 主药 含 量
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ：Ｔｏ ｅ ｓ ｔ ａ ｂ ｌ ｉ ｓ ｈ ａ ｎ ＨＰＬＣ ｍｅ ｔ ｈｏ ｄ ｆ ｏ ｒ ｃ ｏ ｎ ｔ ｅ ｎ ｔ ｄｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｌ ｅ ｕ ｃ ｏ ｇ ｅ ｎ ｔ ａ ｂｌ ｅ ｔ ｓ ，ｔ ｈ ｅ Ａｇ ｉ ｌ ｅ ｎ ｔ Ｅｃ ｌ ｉ ｐ ｓ ｅ Ｐ ｌ ｕ ｓ Ｃ ｌ ８
Ｚ Ｈ Ａ Ｎ Ｇ Ｈ ｍｇ － ｉ ｆ ｅ （ Ｃ ｈ ｅ ｎ ｇ ｄ ｕ Ｉ ｎ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ ｓ Ｆ ｏ ｒ Ｆ ｏ ｏ ｄ ａ ｎ ｄ Ｄ ｒ ｕ ｇ Ｃ ｏ ｎ ｔ ｒ ｏ ｌ ， Ｓ ｉ ｃ ｈ ｕ ａ ｎ Ｃ ｈ ｅ ｎ ｇ ｄ ｕ ６ １ ０ ０ ４ ５ ，Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
HPLC测定舒悦胶囊中氯化血红素含量
HPLC测定舒悦胶囊中氯化血红素含量
卿德刚;夏国强;倪慧;陈蕾;贾晓光
【期刊名称】《新疆中医药》
【年(卷),期】2005(023)006
【摘要】目的:测定舒悦胶囊中氯化血红素的含量,为该制剂提供质量控制方法.方法:应用HPLC测定氯化血红素的含量.结果:舒悦胶囊中氯化血红素的含量平均为1.96%,RSD=1.50%(n=6);平均回收率为102%,RSD=1.63%(n=5).结论:该方法消除干扰,简便可靠,可作为该制剂的质量控制方法.
【总页数】2页(P6-7)
【作者】卿德刚;夏国强;倪慧;陈蕾;贾晓光
【作者单位】新疆中药民族药研究所,830002;新疆博州人民医院,833400;新疆中药民族药研究所,830002;新疆维吾尔自治区中医医院,830000;新疆中药民族药研究所,830002
【正文语种】中文
【中图分类】R9
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复方氯化血红素胶囊中氯化血红素和β-胡萝卜素的含量测定
复方氯化血红素胶囊中氯化血红素和β-胡萝卜素的含量测定袁曦;林功舟;陈鼎雄;洪清;黄海水
【期刊名称】《中国药品标准》
【年(卷),期】2002(003)004
【摘要】目的:探讨复方氯化血红素胶囊中主要成分氯化血红素和β-胡萝卜素含量测定方法.方法:用0.1mol·L-1氢氧化钠液和氯仿对氯化血红素和β-胡萝卜素进行萃取分离,用分光光度法进行含量测定,测定波长分别为(385±1)nm和(455±1)nm.结果:氯化血红素的平均回收率为99.78%,RSD为0.86%;β-胡萝卜素的平均回收率为98.76%,RSD为0.93%.结论:本方法操作简单、快速,测定结果准确、可靠,可用于本胶囊的含量测定.
【总页数】4页(P34-37)
【作者】袁曦;林功舟;陈鼎雄;洪清;黄海水
【作者单位】福建医科大学附属第一医院,福州,350005;福建医科大学附属第一医院,福州,350005;福建省药品检验所,福州,350001;福建医科大学附属第一医院,福州,350005;福建医科大学药学98级实习生,福州,350005
【正文语种】中文
【中图分类】R9
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HPLCΠDAD 法测定氯化血红素片剂中氯化血红素 的含量 , 取得了满意的结果 。 1 实验部分 1. 1 仪器与试剂
Shimadzu LC10 Avp 高效液相色谱仪 , CTO210 Avp 检测器 , Class2VP 色谱工作站 , BP211D 电子天 平 ( Sartorius) , PB210pH 计 (sartorius) 。
— 229 —
阴性对照溶液的制备 精密移取 0. 1 molΠL 的 NaOH 溶液 5 mL 置 100 mL 容量瓶中 , 甲醇稀释至 刻度 , 作为阴性对照溶液 , 在相同的色谱条件下 , 进样 20μL , 得色谱图见图 2 。
图 2 对照品 (a) 、供试品 (b) 、阴性对照 (c) 色谱图
9 氯化血红素片剂含量测定 精密量取供试品和对照品 , 按溶液制备项下
甲醇 、乙腈为色谱纯 , 醋酸 、吡啶均为分析 纯 , 水为重蒸水 。
氯化血红素 ( Hematin Chloride) 对照品由 Fluka 公司提供 , 含量 > 98 % ; 氯化血红素片 ( 规格 30 mgΠ片 , 批号 : 020706 , 020707 , 020708) 由新疆华丰 源技术开发公司提供 ; 辅料 : 微晶纤维素 、硬脂酸 镁 、甘露醇等 。 1. 2 色谱条件及测定方法
分别不同日期 、不同的操作人员 、不同的设 备下测定氯化血红素片剂的含量 , 结果 RSD 分别 为 1. 56 %、0. 44 %、0. 28 %。 6 稳定性试验
取“2. 1”项下氯化血红素的对照品溶液 , 在配 制当天每隔 0 、1 、2 、4 、8 、10 h 进样 1 次 , 考察 日内差异 , RSD 为 1. 59 % ( n = 6) ; 并于配制后连 续 3 天进样 , 考察日间差异 , RSD 为 1. 79 % ( n = 4) 。 7 回收率实验
Shimadzu VP2C18 (150 mm ×4. 6 mm) , 流动相 : V (甲醇∶V (乙腈) ∶V (水) ∶V (醋酸) ∶V (吡啶) = 40. 0∶40. 0∶9. 0∶1. 0∶0. 6 ; 流速 1 mLΠmin ; 柱温 : 35 ℃; 检测波长 399 nm ; 进样量 : 20μL 。 2 溶液的制备 2. 1 供试品溶液
分析试验室 Journal of Analysis
Laboratory
Vol. 27. 2008
Suppl -5
.
HPLC 法测定氯化血红素片剂的含量
霍仕霞1 , 闫 明 Ξ2 , 黄 毅3 , 张兰兰1 , 刘晓东1
5μm ; ShimadzuVP2C18 150 mm ×4. 65 μm 和 YMC2 pack ODS2C18 150 mm ×4. 6 5μm 进行分离试验 。结 果 Shimadzu VP2C18 150 mm ×4. 65 μm 分离效果最 佳。 10. 4 流动相的选择
氯化血红素是一个含有两个羧基的酸性化合 物 , 因此流动相的选择对分离测定具有非常大的 影响 。比较了 V (甲醇) ∶V (乙腈) ∶V (水) ∶V (醋酸) ∶V (吡啶) 的比例分别为 4010∶4010∶1910∶110∶014)
分别供试品溶液和对照品溶液 。分别吸取供试品 溶液和对照品溶液 20μL , 注入色谱仪 , 记录色谱 图 , 按外标法以峰面积计算 , 即得 , 结果见表 1 。
表 1 样品含量测定结果 ( n = 3)
批号
含量测定 (标示量Π%)
020706
98. 67
020707 020708
98. 86 98. 42
取对照品 10 mg , 精密称定 , 置 500 mL 容量瓶 中 , 用 0. 1 molΠL 的 NaOH 溶解并稀释至刻度 , 精 密量取对照品的 5 mL 置 100 mL 容量瓶中 , 甲醇稀 释至刻度 。 3 标准曲线和线性范围[4]
取对照品 10 mg , 精密称定 , 置 500 mL 容量瓶 中 , 用 0. 1 molΠL NaOH 溶解至刻度 , 分别取此对 照品的碱液 1 、3 、5 、7 、10 mL 置 100 mL 容量瓶 中 , 用甲醇稀释至刻度 , 进样 20μL , 以浓度为横 坐标 , 峰面积为纵坐标 , 绘制标准曲线 , 用最小二 乘法进行线性回归 , 得线性方程为 y = 179857 x + 21101 = 0. 9998 ; 表明氯化血红素的浓度在 0. 2034 ～2. 034μgΠmL 范围内线性关系良好 。 4 检出限和定量限
第 27 2008
卷增刊 年5月
Chinese
分析试验室 Journal of Analysis
Laboratory
Vol. 27. 2008
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.
10. 3 色谱柱的选择 试验中曾选用 YMC2pack ODS2C18 150 mm ×6. 0
(4010∶4010∶1910∶110∶015) (4010∶4010∶1910∶110∶ 016) 的 3 种系统 , 证实第 3 种作为流动相分离效果 最好 , 所以确定以 V (甲醇) ∶V (乙腈) ∶V ( 水) ∶ V (醋酸) ∶V (吡啶) = 4010∶4010∶1910∶110∶016 为本 法的流动相 。
在选定色谱条件下 , 按 SΠN 为 3 时 , 对最低检 测限进行测定 , 得氯化血红素的检测限为 72 ngΠ mL ; SΠN 为 10 时 , 对最低检出限进行测定 , 得氯 化血红素的定量限为 164 ngΠmL 。 5 精密度试验 (重复性 、中间精密度) 5. 1 重复性
在相同操作条件下同一人在短时间内测定结 果的精密度 。配制 3 个不同浓度的供试品溶液 , 每 个浓度下取 3 份供试品 , 进行含量测定 , 结果 RSD 为 0. 22 %。 5. 2 中间精密度 (重复性 、中间精密度 、重现性)
氯化血红素是一种生物铁[2] , 作为缺铁性贫 血的天然补品及药物原料 , 它能被人体很好的吸 收 , 无毒副作用 , 是现代医学公认的防治缺铁性 贫血 、吸收率高 、效果好的生物铁源 , 无铁腥味 , 不刺激胃肠 , 具有较好应用开发前景 。
图1
目前国内文献报道氯化血红素的含量测定的 方法 , 大 多 采 用 紫 外 分 光 光 度 法[3] , 本 文 采 用
取同一批号已测含量的样品 (批号 020707) , 按供试品制备项下制备供试品 , 称样量减半 , 在 线性范围内选取高 、中 、低浓度分别为 3 、5 、7 mg 3 个浓度 , 按供试品制备项下操作 , 进样量 20μL ,
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结果平均回收率为 96. 83 % , RSD = 1. 24 % ( n = 6) 。 8 空白对照实验
取供试品 0. 250 g ( 约相当于氯化血红素 10 mg) , 精密称定 , 置 500 mL 容量瓶中 , 用 0. 1 molΠL
Ξ 基金项目 : 国家中小企业创新基金 (03C26216500444) 项目资助 作者简介 : 霍仕霞 (1983 - ) , 女 , 研究生 ; E2mail : yanming21cn @sohu. com、huoshixia1983 @163. com
(1. 新疆石河子大学药学院 , 石河子 832000 ; 2. 新疆维吾尔医药研究所 , 乌鲁木齐 830049 ; 3. 新疆维吾尔自治区药物研究所 , 乌鲁木齐 830002)
摘 要 : 建立高效液相色谱法测定氯化血红素片中的氯化血红素含量 。采用 Shimadzu VP2C18 (150 mm ×416 mm , 5μm) ; 流动相为 V (甲醇 、乙腈 、水 、醋酸) ∶ V (吡啶) = 4010∶4010∶1910∶110∶016 流速 : 1 mLΠmin ; 柱温 : 35 ℃; 检测波长 : 399 nm。氯化血红素在 012034～21034 μgΠmL 范围内呈良好的线性关系 , r = 019998 , 平均回收率为 96183 % , RSD = 1124 %。本方法可用于该制剂的质量控 制。
关键词 : 氯化血红素 ; 高效液相色谱法 ; 二极管阵列检测器 ; 含量测定
氯化血红素[1] , 又名氯高铁血红素 , 氯化铁卟 啉 , 氯高铁原卟啉 IX , 高铁原卟啉 , 高铁血红素 等 。从牛血 、羊血及猪血中提取 , 分子式为 C34 H32 ClFeN4O4 , 其结构是一个铁鏊合物 , 性质较稳定 , 结构见图 1 。
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第 27 卷增刊 2008 年 5 月
Chinese
分析试验室 Journal of Analysis
Laboratory
Vol. 27. 2008
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的 NaOH 溶解并稀释至刻度 , 精密量取对照品的 5 mL 置 100 mL 容量瓶中 , 甲醇稀释至刻度 。 2. 2 对照品溶液的制备
参考文献
[1 ] 李兴春. 中国生化药物杂志 , 1993 , 4 : 59 [2 ] 于茂泉 , 宫爱君. 上海预防医学杂志 , 2004 , 16 (9) :
424 [3 ] 袁 曦 , 洪 清 , 陈 樱 , 中国药房 , 1994 , 5 (6) : 36 [4 ] 中国药典 (二部) . 2005. Ⅱ: Appendix(附录) VI D
10 讨论 10. 1 检测方法的选择
目前国内文献报道氯化血红素的含量测定方 法 , 大多采用紫外分光光度法 , 本实验中采用 HPLCΠDAD 法易于监测氯化血红素中的有关物质 , 为质量标准的制定提供依据 , 故采用 HPLC 法 。 10. 2 溶剂的选择
因氯化血红素溶于碱 , 通过稳定性考察 , 在 碱性条件下 , 氯化血红素有降解产物生成 , 对不 同浓度 NaOH 进行考察 , 结果 0. 1 molΠL 的 NaOH 作为溶剂最佳 , 又考虑到氯化血红素在碱中的稳 定性差 , 故样品配制时 , 先用 0. 1 molΠL 的 NaOH 溶解 , 再用甲醇稀释至所需浓度进行测定 。