褐鳟Salmo trutta血液生理生化指标的测定
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褐鳟Salmo trutta血液生理生化指标的测定
谷伟;户国;孙鹏;白庆利;王炳谦
【摘要】选择健康的体质量约为336g的褐鳟Salmo trutta 20尾,雌雄各半,在常规环境中暂养观察10d,禁食12h后,尾静脉采血,利用BT-2100全自动血液分析仪测定16项血液生理值,利用DXC800型贝克曼全自动生化分析仪测定31项血清生化值,以建立2龄褐鳟的血液正常生理生化指标.结果表明:雌雄褐鳟血液生理指标差异不显著(P>0.05),但血液中Mg、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)和直接胆红素(DBIL)含量及白球比(A/G)显著差异(P<0.05),说明褐鳟生理指标不受性别影响,而某些生化指标却受性别的影响.
【期刊名称】《水产学杂志》
【年(卷),期】2016(029)005
【总页数】5页(P12-16)
【关键词】褐鳟;血液生理指标;血液生化指标
【作者】谷伟;户国;孙鹏;白庆利;王炳谦
【作者单位】中国水产科学研究院黑龙江水产研究所淡水鱼类育种国家地方联合工程实验室,黑龙江哈尔滨150070;中国水产科学研究院黑龙江水产研究所淡水鱼类育种国家地方联合工程实验室,黑龙江哈尔滨150070;中国水产科学研究院黑龙江水产研究所淡水鱼类育种国家地方联合工程实验室,黑龙江哈尔滨150070;中国水产科学研究院黑龙江水产研究所淡水鱼类育种国家地方联合工程实验室,黑龙江哈尔滨150070;中国水产科学研究院黑龙江水产研究所淡水鱼类育种国家地方联合工程实验室,黑龙江哈尔滨150070
【正文语种】中文
【中图分类】S965.1
血液是动物生命的核心,有运输、调节机体温度、防御、调节渗透压和酸碱平衡的功能。鱼类血液指标是反映鱼体生理状态的标尺,与代谢、营养状况及疾病有密切关系。可根据血液生理生化指标评价鱼类的生理、营养及对环境的适应状况,在养殖中有助于预防和控制鱼类疾病[1-4]。大量研究表明:不同鱼类或同种鱼类的不
同种群的血液学指标会因生物和环境条件的改变而变化[5-10]。因此,测定养殖条件下鱼类血液指标就显得尤为重要。
褐鳟Salmo trutta原产于欧洲、非洲北部和西亚地区[11],在我国仅见于西藏亚
东县,是十九世纪由英国人引种至此形成的种群,命名为亚东鲑[12],1992年被
列入西藏自治区二级重点保护水生动物[13]。褐鳟营养丰富,氨基酸种类齐全,是一种优质脂肪酸的食物源[14],我国已对其养殖、遗传和生物学开展了相关研究工作[15-18]。本研究通过测定褐鳟的血液常规值范围,建立褐鳟的血液生理生化指
标数据库,以期为褐鳟养殖和疾病防控提供参考。
1.1 材料
试验在中国水产科学研究院黑龙江水产研究所渤海冷水性鱼类试验站进行。选用体质健壮的2+龄雌雄褐鳟,体质量分别为(334±61.86)g和(338±46.32)g,
体长分别为(28.77±1.28)cm和(29±1.31)cm。试验开始前各取10尾,于
4m× 1.50m×0.60m、水深0.45m的水泥池中暂养10d,试验用水的pH 6.9~7.6,溶氧 9.8~11.5mg/L,水温6~8.5℃。
1.2 血样制备
禁食12h的试验鱼取出后,立即放入装有0.5mL/L的苯氧乙醇溶液中麻醉30min,经尾静脉采血8~9mL,立刻分装到采血管中。其中,3.5mL血样置于含有肝素钠
的采血管中抗凝,1mL加入到含EDTA的采血管中抗凝,3mL血样于4℃下自然
析出血清,经离心后取适量血清用于测定生化指标。
1.3 生理生化指标及其测定方法
参照徐革锋等[19]的方法测定16项生理指标:中性粒细胞比率(NE,%)、淋巴细胞比率(LYM,%)、单核细胞比率(MO,%)、嗜酸性细胞比率(EO,%)、嗜碱性细胞比率(BA,%)、红细胞数(RBC,1012/L)、血红蛋白含量(HGB,g/L)、红细胞压积(HCT,%)、红细胞体积(MCV,fl)、红细胞蛋白含量(MCH,pg)、红细胞蛋白浓度(MCHC,%)、红细胞分布宽度(RDW,%)、血小板数(PLT)、血小板压积P(CT)、血小板体积(MPV),和血小板分布
宽度(PDW)。
参照张永泉等[20]的方法用DXC800型贝克曼全自动生化分析仪(美国BECKMAN公司)测定31种血液生化指标,具体参数如下:总蛋白(TP,g/L)、白蛋白(ALB,g/L)、球蛋白(GLB,g/L)、白球比A/G、谷丙转氨酶(ALT,IU/L)、谷草转氨酶(AST,IU/L)、谷草转氨酶/谷丙转氨酶(AST/ALT)、r-
谷氨酪转肽酶(GGT,IU/L)、碱性磷酸酶(ALP,IU/L)、钾(K,mmol/L)、钠(Na,mmol/L)、氯(Cl,mmol/L)、钙(Ca,mmol/L)、磷(P,
mmol/L)、镁(Mg,mmol/L)、尿素氮(BUN,mmol/L)、肌酐(CREA,
μmol/L)、尿酸(URIC,μmol/L)、血浆渗透压(OSM,m OSM/L)、葡萄
糖(GLU,mmol/L)、血淀粉酶(PAMY,IU/L)、总胆红素(TBIL,
μmol/L)、直接胆红素(DBIL,μ mol/L)、间接胆红素(IBIL,μmol/L)、甘
油三酯(TG,mmol/L)、总胆固醇(CHOL,mmol/L)、高密度脂蛋白(HDL,mmol/L)、低密度脂蛋白(LDL,mmol/L)、乳酸脱氢酶(LDH,IU/L)、肌
酸激酶(CK,IU/L),和a-羟丁酸脱氨酶(HBDH,IU/L)。
1.4 血液流变学指标测定
在室温条件下,选用10s-1、60s-1和150s-1三个切变率(γ)测定全血粘度ηb。
1.5 数据分析
试验数据用平均值±标准差(x±SD)表示,用SAS9.0统计软件处理分析,利用
独立样本的t检验,采用Duncan多重比较进行两两比较,当P<0.05时差异显著,P<0.01时差异极显著。
2.1 褐鳟血液的生理指标
雌雄褐鳟血液生理指标差异不显著(P>0.05),其中雄褐鳟的HGB、MCH和MCHC值高于雌性,而雌性褐鳟仅PLT高于雄性(表1)。
2.2 褐鳟血液的生化指标
雌雄褐鳟血液生化指标见表2。由表2可知:雌雄个体的Mg、TP、ALB、GLB、
A/G和DBIL指标呈显著性差异(P<0.05),其余指标差异不显著(P>0.05)。
2.3 褐鳟血液流变学指标
雌雄褐鳟在10s-1、60s-1和150s-1三个切变率下的全血粘度曲线(图1),随
着切变率的增加呈典型的对数模式降低,雌雄褐鳟方程分别为:
y=12.23+63.65/x,R2=0.9404;
y=13.79+76.83/x,R2=0.9302。
从图1中看出,在不同切变率下,雌褐鳟血液的全血粘度值低于雄性个体。
3.1 褐鳟血液生理指标
目前认为,鱼类血液的某些性状指标与其活动能力及食性密切相关,大多数情况下,活动能力强的鱼类高于活动能力弱的鱼类[21]。本研究中,褐鳟血液生理特点与其活动特性也表现出了上述规律。褐鳟泳动迅捷,喜逆流,可离水1m多高,颇具
垂钓价值。从表1可知,雄褐鳟的HGB、MCH和MCHC三个指标高于雌性,而雌褐鳟仅PLT指标高于雄性,但差异均不显著,说明褐鳟性别对血液生理指标没
有显著影响。通常情况下,鱼类血液中的血红蛋白数量与鱼类耐低氧能力和水环境