浙江大学生物化学丙实验报告3、4
导论 浙江大学生物化学及实验(丙)课件

Symbiotic system can now carry out aerobic catabolism. Some bacterial genes move to the nucleus, and the bacterial endosymbionts become mitochondria.
efficient because fuel is oxidized to CO2.
HH
H H C=C
/\
"J R—C ZCH
基团
Carbonyl (aldehyde)
Carbonyl (ketone)
R —C—R 2 0
Ether
R1—O—R2
Guanidinium
Ester Acetyl R
O H
OH
Imidazole Sulfhydryl
Anhydride (two
carboxylic acids)
A2
Amino (protonated)
H l + R—N—H
1H
Thioester
H
H
R—N—C—N/
JI ,
+N H / \ H H
R——C=CH
HN、 、夕
H
R— O
Carboxyl
R —C—O-o
R—C—N O
Hydroxyl R —O—H <(alcohol)
Enol
?—H,H
R—C=C
Imine N-Substituted
线粒体的进化
Anaerobic metabolism is inefficient because fuel is not completely oxidized.
生物氧化 浙江大学生物化学及实验(丙)课件

Interlocking gears (coupHng device)
Battery (two leal species of
different reduction
potential)
Motor (energy transducer)
(a)
Weight being lifted (mechanical work)
膜结构。外膜outer membrane可允许小分子 (Mr<5000)和离子自 由通过。内膜inner membrane只允许
在内膜上有特异通道的物质通过,对大部分的小分子及离 子不通透。
外膜
Outer membrane ---- Inner membrane
内膜
-Cristae -Matrix
基质
CH2
产—8。一
CO2
CH2
c—COOJ
o
II
a-Ketoglutarate
C—S-CoA
II
o
Succinyl-CoA
CoA-SH
CO2
④
Oxidative
decarboxylation
二、电子传递链:又称为呼吸链。是由存在于线粒体内膜上 的一系列能接受氢或电子的中间传递体组成。
•电子传递链的组成成分
Dehydrogenation
CH2—coo一
CH2
coo-
Succinate CoA-SH
succinyl-CoA synthetase
GTP (ATP)
⑥
Substrate-level phosphorylation
GDP (ADP)
+R
\a-ketoglutarate dehydrogenase \ complex CH2—COO~
浙江大学氨基移换反应及其产物的鉴定实验报告

实验报告课程名称: 生物化学实验(丙) 指导老师: 成绩: 实验名称: 氨基移换反应及其产物的鉴定 实验类型: 定量实验 同组学生姓名: 一、实验目的和要求(必填) 二、实验内容和原理(必填) 三、主要仪器设备(必填) 四、操作方法和实验步骤 五、实验数据记录和处理 六、实验结果与分析(必填) 七、讨论、心得一、 实验目的和要求1、学习鉴定氨基移换反应的简便方法及其原理;2、学习纸层析的原理和操作技术;二、 实验内容和原理1、氨基移换反应:氨基移换反应是在氨基移换酶(转氨酶)的催化下,氨基酸的α-氨基和α-酮酸的α-酮基之间发生的互换反应。
任何一种氨基酸进行转氨作用时都由其专一的转氨酶催化,转氨酶的最适pH 接近7.4,在各种转氨酶中,谷丙转氨酶(glutamic pyruvic transaminase, GPT )和谷草转氨酶(glutamic oxalacetic transaminase,GOT )的活性最强。
转氨作用主要发生在肝脏中。
转氨酶广泛存在于机体的各种组织中。
在肝、心、肾等组织中谷丙转氨酶(GPT )、谷草转氨酶(GOT )活性较高。
2、GPT 催化下的转氨作用装订线L -谷氨酸脱氢酶在体内特别是在肝细胞内含量丰富,活性高,催化L -谷氨酸氧化脱-NH 2,加碘乙酸能抑制其活性,从而可以保护氨基移换反应的产物L -谷氨酸。
3、纸层析原理本实验用纸层析法,检查由丙氨酸和α—酮戊二酸在肝细胞谷丙转氨酶(GPT) 的作用下所生成的谷氨酸,证明组织内的氨基移换作用。
滤纸层析是以滤纸作为惰性支持物的分配层析,是利用不同物质在两个互不相溶的溶剂中分配情况(溶解度)的不同来分离混合物的一种技术。
层析溶剂是由有机溶剂和水组成。
由于滤纸纤维上羟基具有亲水性,因此吸附一层水作为固定相,而通常把有机溶剂作为流动相。
在进行分离时,由于被分离物质的组分在两相中的分布不同,随着流动相的移动,物质将在两相间进行连续的、动态的不断分配,从而造成不同组分移动的速度也不相同。
如何写生物实验报告3篇

如何写生物实验报告如何写生物实验报告3篇如何写生物实验报告3篇篇一:怎么写生物实验报告实验报告一般分为以下几个部分:一、实验名称。
二、实验原理。
将该实验的主要原理用简明扼要的语言进行归纳总结。
三、实验仪器和材料。
如果所用仪器和材料较多,可写重要的部分,常用的可以不写。
四、实验步骤。
该实验如何操作的,方法和顺序。
可以用方框图表示,这样一目了然。
五、实验结果。
将该实验最后结果用文字或图表的方式进行表达。
推荐用表格或图进行表示。
要注意将度量单位写清楚。
六、实验讨论。
该部分主要对上述实验结果进行讨论。
有的是对实际操作中实验现象或结果和实验指导不一致的原因进行讨论,有的是对实际操作中产生的实验现象的原理或原因进行讨论,有的是对实际操作中可以改进的方法进行讨论,有的是对该实验的进一步应用进行讨论等等。
篇二:微生物学实验报告格式图片已关闭显示,点此查看微生物学实验报告图片已关闭显示,点此查看专业学号姓名实验一培养基的配制和高压蒸汽灭菌一、实验目的二、实验原理三、实验材料(实际用到哪些试剂、材料、玻璃器皿等都要写出,包括数量)四、实验步骤(按照实际步骤填写,切忌抄袭)五、注意事项(自己总结实验过程中的注意点)六、思考题1、简述培养基的配制原则?2.为什么湿热灭菌比干热灭菌法更有效?3.高压蒸汽灭菌时,为什么要先将灭菌锅锅内的冷空气完全排尽?实验二自生固氮菌的分离纯化(这是个综合实验,请大家回顾三周来的所有操作步骤,将其整理成连贯完整的一份报告,注意每次实验的衔接,不要把其他的实验项目写进来,但也不要漏写该实验的相关步骤。
)一、实验目的二、实验原理三、实验材料(整个综合实验有涉及到的材料都要列出)四、实验步骤(详叙每周所做的相关步骤)五、注意事项(自己总结实验过程中的注意点)六、思考题1、划线分离时,为什么每次都要将接种环上多余的菌体烧掉?划线为何不能重叠?2、如何从自然界中分离自己所需要的纯培养?实验三平板培养测数法一、实验目的二、实验原理三、实验材料(实际操作有涉及到的材料都要列出)四、实验步骤(详叙相关步骤)五、实验结果六、注意事项(自己总结实验过程中的'注意点)七、思考题1、平板菌落计数法中,为什么溶化后的培养基再冷却至45℃左右才能倒平板?2、本次实验是否成功?如果失败,试分析原因。
工作报告之生物化学实验报告书

工作报告之生物化学实验报告书生物化学实验报告书【篇一:2014生物化学实验报告册模板】生物化学实验报告姓名:学号:专业年级:组别:第六实验室生物化学与分子生物学实验教学中心实验名称实验日期2014-03-01合作者评分folin-酚试剂法测定蛋白质含量实验地点指导老师教师签名第二实验室批改日期格式要求:正文请统一用:小四号,宋体,1.5倍行距;数字、英文用times new roman;标题用:四号,黑体,加粗。
需强调的地方请用蓝颜色标出。
不得出现多行、多页空白现象。
一、实验目的二、实验原理三、材料与方法:以流程图示意四、结果与讨论:①结果:实验数据、现象、图谱;②讨论:以结果为基础的逻辑推论,并得出结论。
【篇二:生物化学实验报告】实验一糖类的性质实验(一)糖类的颜色反应一、实验目的1、了解糖类某些颜色反应的原理。
2、学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法。
二、颜色反应2、器材试管及试管架,滴管3、试剂1%葡萄糖溶液100 ml1%果糖溶液100 ml1%蔗糖溶液100 ml1%淀粉溶液100 ml0.1%糠醛溶液100 ml浓硫酸500 ml4、实验操作取5支试管,分别加入1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液、0.1%糠醛溶液各1 ml。
再向5支试管中各加入2滴莫氏试剂,充分混合。
倾斜试管,小心地沿试管壁加入浓硫酸1 ml,慢慢立起试管,切勿摇动。
观察记录各管颜色。
(二)间苯二酚反应1、原理在酸作用下,酮醣脱水生成羟甲基糠醛,后者再与间苯二酚作用生成红色物质。
此反应是酮醣的特异反应。
醛糖在同样条件下呈色反应缓慢,只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时,才呈微弱的阳性反应。
实验条件下蔗醣有可能水解而呈阳性反应。
2、器材试管及试管架,滴管3、试剂塞氏试剂:0.05%间苯二酚-盐酸溶液1000 ml,称取间苯二酚0.05 g溶于30 ml浓盐酸中,再用蒸馏水稀至1000 ml。
1%葡萄糖溶液100 ml1%果糖溶液100 ml1%蔗糖溶液100 ml4、实验操作取3试管,分别加入1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液各0.5 ml。
浙江大学生物化学丙实验报告

. .. . 实验报告课程名称: 生物化学实验(丙) 指导老师: 方祥年 实验名称: 离子交换柱层析分离纯化蔗糖酶 同组学生: 金宇尊、鲍其琛 一、实验目的和要求(必填) 二、实验容和原理(必填) 三、实验材料与试剂(必填) 四、实验器材与仪器(必填) 五、操作方法和实验步骤(必填) 六、实验数据记录和处理 七、实验结果与分析(必填) 八、讨论、心得一、实验目的和要求1、学习离子交换层析的基本原理;2、学习离子交换层析分离蛋白质的基本方法和技术;3、学习蔗糖酶活性检测的基本原理和方法。
二、实验容和原理(1)实验原理 1、离子交换层析:以离子交换剂为固定相,液体为流动相进行。
离子交换剂与水溶液中离子或离子化合物的反应主要以离子交换方式进行,或者借助离子交换剂上电荷基团对溶液中离子或离子化合物的吸附作用进行。
这些过程都是可逆的。
在某一pH 值的溶液中,不同的蛋白质所带的电荷存在差异,因而与离子交换剂的亲和力就有区别。
当洗脱液的pH 改变或者盐的离子强度逐渐提高时,使某一种蛋白质的电荷被中和,与离子交换剂的亲和力降低,不同的蛋白质按所带电荷的强弱逐一被洗脱下来,达到分离的目的。
离子交换剂是由基质、电荷基团(或功能基团)和反离子构成。
基质 电荷基团 反离子 电荷基团反离子电荷基团反离子基质基质—+—++可逆交换可逆交换++溶液中的离子(交联纤维素、交联葡聚糖、交联琼脂糖)— ——阳离阴离子交专业: 农业资源与环境姓名: 李佳怡学号: 3130100246 日期: 2015.5.19地点: 生物实验中心310 装订线由于蔗糖酶的pI偏酸性,所以在pH7.3 缓冲液的环境中,粗分离纯化样品蔗糖酶带负电荷,因此我们用阴离子交换剂达到分离蔗糖酶的目的。
2、酶活力检测(定性检测)蔗糖酶(β-D-呋喃型果糖苷-果糖水解酶EC 3.2.1.26),能催化非还原性双糖(蔗糖)裂解,将蔗糖水解为等量的葡萄糖和果糖。
本实验采用3.5-二硝基水酸法,其原理是3.5-二硝基水酸与还原糖共热(100℃)被还原成棕红色的氨基化合物,在一定围还原糖的量和反应液的颜色深度成正比,由此来确定并收集蔗糖酶纯化样品。
大学生物实验报告范本三篇

大学生物实验报告三篇Record the situation and lessons learned, find out the existing problems andform future countermeasures.姓名:___________________单位:___________________时间:___________________编号:FS-DY-20594大学生物实验报告三篇篇一:浙江大学生物传感器实验报告实验报告生物传感器与测试技术课程名称生物传感器与测试技术姓名徐梦浙学号专业生物系统工程指导老师王建平/叶尊忠一热电偶传感器实验一、实验目的:了解热电偶测量温度的原理和调理电路,熟悉调理电路工作方式。
二、实验内容:本实验主要学习以下几方面的内容 1. 了解热电偶特性曲线;2.观察采集到的热信号的实时变化情况。
3. 熟悉热电偶类传感器调理电路。
三、实验仪器、设备和材料:所需仪器四、myDAQ、myboard、nextsense01热电偶实验模块、万用表注意事项五、在插拔实验模块时,尽量做到垂直插拔,避免因为插拔不当而引起的接插件插针弯曲,影响模块使用。
六、禁止弯折实验模块表面插针,防止焊锡脱落而影响使用。
七、更换模块或插槽前应关闭平台电源。
八、开始实验前,认真检查热电偶的连接,避免连接错误而导致的输出电压超量程,否则会损坏数据采集卡。
九、本实验仪采用的电偶为K 型热电偶和J型热电偶。
十、实验原理:热电偶是一种半导体感温元件,它是利用半导体的电阻值随温度变化而显著变化的特性实现测温。
热电偶传感器的工作原理热电偶是一种使用最多的温度传感器,它的原理是基于1821年发现的塞贝克效应,即两种不同的导体或半导体A或B组成一个回路,其两端相互连接,只要两节点处的温度不同,一端温度为T,另一端温度为T0,则回路中就有电流产生,见图50-1(a),即回路中存在电动势,该电动势被称为热电势。
最新生物化学设计性实验报告

最新生物化学设计性实验报告实验目的:本实验旨在通过设计性实验,探究特定生物化学过程的机制和特点,验证理论假设,并培养学生的科研能力和实验技能。
实验背景:生物化学是研究生物体化学组成、化学变化及这些变化与生物体功能之间关系的科学。
设计性实验是生物化学教学和研究中的重要组成部分,它能够帮助学生更好地理解生物化学的基本概念,并通过实践活动加深对知识的掌握。
实验材料:1. 酶类样品2. 底物溶液3. 缓冲液4. 酶活性测定试剂盒5. 分光光度计6. 离心机7. 微量移液器8. 试管和比色皿9. 冰浴和恒温水浴实验方法:1. 预实验:首先对酶样品进行纯化,并通过酶活性测定初步了解其活性范围。
2. 实验设计:根据预实验结果,设计一系列实验,包括不同pH值、温度、底物浓度对酶活性的影响。
3. 实验操作:a. 准备一系列不同pH值的缓冲液,并调整酶样品和底物溶液至相应pH值。
b. 在不同温度下(如25℃、37℃、50℃)测定酶活性,记录数据。
c. 改变底物浓度,观察米氏常数(Km)和最大速率(Vmax)的变化。
4. 数据分析:利用图表和统计学方法分析实验数据,得出酶活性与实验条件之间的关系。
实验结果:1. pH值对酶活性的影响图显示,酶活性在特定pH值下达到最大,而在过高或过低的pH值下活性显著降低。
2. 温度对酶活性的影响图表明,酶活性随温度升高而增加,但在接近50℃时急剧下降,表明酶可能发生变性。
3. 底物浓度实验结果显示,当底物浓度增加到一定程度后,酶活性趋于平稳,计算得到的Km值与文献值相近。
讨论与结论:通过本实验,我们验证了酶活性受pH值、温度和底物浓度的影响。
实验结果与理论预期相符,表明设计性实验是理解和掌握生物化学原理的有效手段。
同时,实验过程中可能出现的误差和问题也为我们提供了宝贵的学习和改进机会。
浙江大学生物化学丙实验报告5资料

实验报告课程名称: 生物化学实验(丙) 指导老师: 方祥年 成绩:__________________实验名称:蔗糖酶分离纯化产物的SDS -PAGE 检测分析及蛋白质相对分子质量测定 同组学生姓名: 金宇尊、鲍其琛 一、实验目的和要求(必填) 二、实验内容和原理(必填) 三、实验材料与试剂(必填) 四、实验器材与仪器(必填) 五、操作方法和实验步骤(必填) 六、实验数据记录和处理 七、实验结果与分析(必填) 八、讨论、心得一、实验目的和要求1、学习SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的基本原理和操作方法2、蔗糖酶分离纯化产物的SDS -PAGE 检测分析3、学习测定蛋白质相对分子质量(Mr)的方法二、实验内容和原理(1)实验内容1、SDS -PAGE 凝胶制作;2、蔗糖酶分离纯化产物的SDS -PAGE 电泳分离;3、洗脱测定并计算相对分子质量。
(2)实验原理 1、电泳是带电颗粒在电场作用下,作定向运动即向着与其电荷相反的电极移动的现象。
2、电泳法分离、检测蛋白质混合样品主要是根据各蛋白质组分的分子大小和形状以及所带净电荷多少等因素所产生的电泳迁移率的差别。
3、区带电泳是样品物质在一惰性支持物上进行电泳,因电泳后,样品不同组分形成带状区间,故称区带电泳。
4、聚丙烯酰胺凝胶(PAG)由丙烯酰胺和交联试剂N,N ’-甲叉双丙烯酰胺(Bis)在有催化剂(如过硫酸铵或核黄素)和增速剂(如N,N,N ’,N ’-四甲基乙二胺,TEMED )的情况下聚合而成的。
5、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是在恒定的、非解离的缓冲系统中来分离蛋白质,这主要是由蛋白质样品所带的电荷和分子质量的差异性进行分离;在电泳过程中仍保持蛋白质的天然构象、亚基之间的相互作用及其生物活性。
6、聚丙烯酰胺凝胶电泳可分为⑴连续系统凝胶缓冲液的pH值及凝胶浓度不变。
该电泳系统具有电荷效应、分子筛效应;⑵不连续系统凝胶缓冲离子成分、pH值、凝胶浓度、电位梯度不连续,由浓缩胶和分离胶组成。
(大学)生物化学实验报告

班级: 姓名:座号:实验一生物化学实验基本知识与操作一、课堂目标1.简述生化实验的五点基本知识2.动手练习三种吸量管的使用,培养严谨的科学态度3.选择弹动混匀法做操作练习,使试管内溶液混匀4.仔细观察老师使用离心机的示教过程,并练习使用。
二、生物化学实验基本知识1.实验前做好预习每次实验课前应首先复习与实验有关的理论知识,然后认真阅读实验指导,明确课时目标,了解实验原理、操作程序及实验中应注意的事项。
2.实验中要认真操作、仔细观察实验时要求学生严格按照实验指导和教师的要求,一丝不苟地进行操作,仔细观察和分析实验中出现的各种现象,如实地将实验结果、数据填写在记录本内。
3.正确使用和爱护仪器实验时须遵照教师要求,严格按操作规程正确使用每种仪器。
贵重仪器未经允许不得随意搬动,如不慎损坏,应及时报告指导老师。
4.保持实验室的整洁和秩序遵守实验室规则,实验时保持室内安静。
实验仪器及用具必须洁净,实验试剂的排列应整齐有序。
勿将试剂药品洒于桌面、地上或它处。
废物及强酸、强碱溶液应适当处理,以防堵塞和腐蚀水管。
实验结束,做好清洁工作,注意关断水,电源,关闭好门窗。
5.认真填写实验报告三、生物化学实验几项基本操作1.吸量管的选择和使用(1)刻度吸管常见容量有l0ml、5ml、2m1、1ml、0.5ml等数种。
通常将管身标明的总容量分刻度为100等分。
常选用与移取非整数量的试液,因厂家不同,有分刻度到尖端和刻度不到尖端的两种。
如刻度到管尖的,通常在管壁上标有“吹”字,放液时必须在容液流完后吹出残留于吸管尖端的试液。
使用前先认明。
(2)移液管吸管中间膨大,管壁只有一条总量标线,准确度较高,常用作移取整数量的试液。
常见规格有50ml、25m1、l0ml、5ml、2ml和lml等容量。
操作时在放出试液后,吸管尖端在容器内壁上仍要停留10~15秒钟。
以上两种吸管使用方法如下:用右手拇指和中指靠住吸管标线以上部分,将管尖插入所要移取的试液液面下约lcm处。
浙江大学生化实验报告

浙江大学生化实验报告1.引言1.1 概述概述部分:本实验旨在对浙江大学生化实验进行系统的记录与分析,通过实验结果展现实验的过程和成果,并对实验的意义和未来的发展进行展望。
该实验采用了一系列生化实验方法,旨在研究生物体内生化反应的机制和规律,为生物医学领域的研究和发展提供有力支持。
通过对实验背景、方法和结果的详细描述,本报告旨在为读者提供全面的实验信息,让读者更加深入地了解实验的过程和意义。
1.2 文章结构文章结构部分的内容应该包括对整篇文章的章节安排和内容概要的介绍。
可以简要描述每个章节的主题和重点,以便读者可以更好地理解整篇文章的结构和内容安排。
例如:"文章结构部分将主要介绍本篇文章的整体结构和各个章节的主要内容,以便读者可以更好地理解全文的脉络。
引言部分将从概述、文章结构和目的三个方面介绍本篇文章的主题和写作目的。
正文部分将包括实验背景、实验方法和实验结果三个部分,分别介绍了实验的背景知识、实验的具体操作步骤以及实验结果的分析和讨论。
结论部分将对实验结果进行深入分析和总结,并展望未来可能的研究方向和发展趋势。
通过整体的文章结构,读者将更清晰地了解本篇文章的内容安排和逻辑脉络。
"1.3 目的:本次实验旨在探究特定生化反应的机理和影响因素,通过实验的进行,旨在深入了解该生化反应的特性和规律,从而为相关领域的研究和应用提供理论和实验基础。
同时,通过实验的设计和操作,培养学生的实验操作能力和科学思维,提高他们的实践能力和动手能力。
通过实验结果的分析和总结,使学生们对生化实验有一个更深入的理解和认识,为未来的学习和研究打下坚实的基础。
2.正文2.1 实验背景本次实验旨在探究生化领域相关的实验内容,通过对生物组织、酶活性、代谢途径等方面进行深入研究,加深对生化学原理的理解和掌握。
生化实验既是理论知识的延伸,也是对知识的实践检验,对于培养学生的实验操作能力和科学研究能力具有重要意义。
实验背景包括对常见的生化实验技术和实验原理的介绍,例如酶活性检测方法、代谢途径的测定方法等。
蛋白质化学2 浙江大学生物化学及实验(丙)课件

1.同源蛋白质:在进化上关联的蛋白质,它们在不同的物种 中行使
相似的功能。
Mar-HSC70 C. virginica HSC70 D.meldziogagter HSC70
M.sexta HSC70 M.mutfculud HSC70
HSC70
MA KA?
nonpolar side chain
polar side chain
1.肽键的结构: (1)部分双键性质,反式构象
(2)刚性平面,肽平面
事实上,肽键的构象是受限制的
+180
air 120
60
s①
浇
<D
0
-60
-120
-180
0
Ramchandran 图 6 i degrees)
-180
+180
Mar-HSP70 C.vlrqlnica HSP70
HSP70 M.sexta HSP70 M.musculud HSP70 H.sapiens HSP7O
MASKGP
EiiDAAKNQVM
“IDAAKNQVAN EL.GDAAKNQVAN
IfWAAKNQVAN KlpDAAKNQVAN RL GDAAKNQVAN
hydrogen
4.多肽链主链上的每个肽键中的 羰
基氧原子都与其后的第四个氨 基酸
trogen
残基上的酰胺基形成氢键。 氢键的 方向与螺旋轴平行。
(2) 0-折登(0-sheet):是另种常见的二级结构。
反向平行
view
平行
view
(3)3-转角(p-turn):—种回转式的二级结构。
浙江大学生物化学丙实验报告.

. . . . 实验报告课程名称: 生物化学实验(丙) 指导老师: 方祥年 成绩:实验名称: 质粒DNA 的微量制备及电泳检测 同组学生: 金宇尊、鲍其琛一、实验目的和要求(必填) 二、实验容和原理(必填)三、实验材料与试剂(必填) 四、实验器材与仪器(必填)五、操作方法和实验步骤(必填) 六、实验数据记录和处理七、实验结果与分析(必填) 八、讨论、心得 一、实验目的和要求1、学习并掌握质粒DNA 的提取原理和方法;2、了解琼脂糖凝胶电泳检测核酸的原理和操作;3、学习并掌握对电泳检测结果的初步分析。
二、实验容和原理 1、实验容①质粒DNA 的提取②DNA 的琼脂糖凝胶电泳鉴定2、实验原理①质粒:质粒是一种染色体(核质体)外的寄生性的自主复制子,存在于细菌等细胞中,为双链闭环的DNA分子,大小在1-200kb 之间,具有自主复制和转录功能, 能表达例如抗性、菌毒素等细胞非必需的遗传信息,但其复制和转录必须要利用依赖宿主细胞(细菌)基因组DNA 编码的一些酶和蛋白质。
质粒能够自发的或人为的在细胞间转移,因此是基因工程技术中将外源基因导入受体细胞的重要载体。
②从细菌细胞中抽提质粒DNA 的步骤:a 细菌培养使质粒大量扩增;b 收集和裂解细胞,并去掉细菌碎片和核质体DNA ;c 进一步除去蛋白、脂类、RNA 等杂质,分离和纯化质粒DNA 。
③碱裂解法来分离纯化质粒DNA :在EDTA 存在下,经过SDS 处理使细胞膜裂解,从而使菌体充分裂解,利用在碱性条件下(NaOH ),使核质体DNA 与质粒DNA 的变性;加入乙酸钾,在中性条件下,核质体DNA 与质粒DNA 又存在复性的差异,质粒DNA 很快得以复性,而细菌核质体DNA 分子难以复性,核质体DNA 会缠绕附着在细胞膜专业: 农业资源与环境姓名: 李佳怡学号: 3130100246 日期: 2015.6.9地点: 生物实验中心310 装订线碎片上通过离心被沉淀下来,质粒DNA则留在上清液;上清液中还含有可溶性蛋白质、核糖核蛋白和少量核质体DNA以及脂质类杂质等,可通过碱性酚-氯仿-异戊醇混合液的抽提去除;含有质粒DNA的上清液用无水乙醇或异戊醇沉淀,这是由于当加入无水乙醇时,其会夺去核酸周围的水分子,使其失水而易于聚合。
浙江大学化学实验报告模板
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1 / 1 实验报告 课程名称: 指导老师: 成绩:
实验名称: 实验类型: 同组学生姓名:
一、实验目地和要求(必填) 三、主要仪器设备(必填) 五、实验数据记录和处理 七、讨论、心得
二、实验内容和原理(必填)
四、操作方法和实验步骤
六、实验结果与分析(必填)
一、实验目地和要求
二、实验内容和原理
三、主要仪器设备
实验名称: 姓名:
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常见的生化实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 熟悉常见生化实验的操作步骤和原理。
2. 掌握实验数据的记录和分析方法。
3. 提高实验技能,培养严谨的科学态度。
二、实验原理生化实验是研究生物体内化学反应和代谢过程的重要手段。
本实验主要涉及以下常见生化实验:1. 蛋白质定量实验2. 酶活性测定实验3. 糖类鉴定实验4. 氨基酸分析实验三、实验材料与试剂1. 蛋白质定量实验- 蛋白质样品- 碘量法试剂(硫酸铜、碘化钾、淀粉溶液)- 0.1mol/L NaOH溶液2. 酶活性测定实验- 酶样品- 底物(如葡萄糖、尿素)- 酶活性测定试剂盒3. 糖类鉴定实验- 糖类样品- 糖类鉴定试剂(如斐林试剂、班氏试剂)- 0.1mol/L NaOH溶液4. 氨基酸分析实验- 氨基酸样品- 氨基酸分析试剂盒四、实验器材与仪器1. 电子天平2. 移液器3. 恒温水浴锅4. 紫外可见分光光度计5. 离心机6. 水浴锅五、实验步骤1. 蛋白质定量实验1.1 准备标准曲线:配制一系列已知浓度的蛋白质标准溶液,在特定波长下测定吸光度,绘制标准曲线。
1.2 测定样品蛋白质浓度:取一定量的蛋白质样品,按照标准曲线计算其浓度。
2. 酶活性测定实验2.1 酶样品制备:将酶样品与底物混合,在一定条件下反应,测定反应产物的生成量或消耗量。
2.2 酶活性计算:根据酶活性测定试剂盒提供的公式,计算酶活性。
3. 糖类鉴定实验3.1 准备样品:将糖类样品溶解在水中,制备成适当浓度的溶液。
3.2 糖类鉴定:取一定量的样品溶液,按照糖类鉴定试剂的操作步骤进行鉴定。
4. 氨基酸分析实验4.1 氨基酸样品制备:将氨基酸样品溶解在水中,制备成适当浓度的溶液。
4.2 氨基酸分析:按照氨基酸分析试剂盒的操作步骤进行分析。
六、实验数据记录和处理1. 记录实验数据:包括样品浓度、吸光度、反应时间、温度等。
2. 数据处理:将实验数据输入计算机,进行统计分析,得出结论。
七、实验结果与分析1. 蛋白质定量实验:根据标准曲线,计算出样品蛋白质的浓度。
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实验报告课程名称: 生物化学实验(丙) 指导老师: 方祥年 成绩:__________________ 实验名称: 蔗糖酶蛋白含量的测定、蔗糖酶活力测定及其分离纯化效果的评价同组学生姓名: 金宇尊、鲍其琛、袁平、朱耀仁、蔡玉林 一、实验目的和要求(必填) 二、实验内容和原理(必填)三、实验材料与试剂(必填) 四、实验器材与仪器(必填) 五、操作方法和实验步骤(必填) 六、实验数据记录和处理 七、实验结果与分析(必填) 八、讨论、心得一、实验目的和要求1、蔗糖酶蛋白含量的测定——Folin-酚法①学习Folin-酚法测定蛋白质含量的原理和方法;②掌握分光光度法制作标准曲线,准确测定未知样品的蛋白质含量; ③掌握分光光度计的使用方法。
2、蔗糖酶活力测定——3.5-二硝基水杨酸法 ①掌握酶活力测定的基本原理和方法; ②学习酶的比活力的计算。
二、实验内容和原理1、Folin-酚测定法Folin-酚试剂是由甲、乙两种试剂组成的。
甲试剂由碳酸钠、氢氧化钠、硫酸铜和酒石酸钾钠组成,在碱性条件下蛋白质中的肽键与酒石酸钾钠铜盐起作用,生成紫红色络合物;乙试剂是由磷钼酸和磷钨酸、硫酸、溴等组成,在碱性条件下,铜-蛋白质络合物以及蛋白质中的酪氨酸残基(酚基)和色氨酸还原磷钼酸-磷钨酸试剂(乙试剂)产生深蓝色(钼蓝和钨蓝的混合物),其色泽深浅与蛋白质含量成正比。
可用500nm 波长比色测定,适于测定蛋白质含量0.05~0.5g/L 。
优点: 简单、迅速、灵敏度高;反应较稳定。
缺点: 该反应受多种因素的干扰。
2、蔗糖酶活力测定蔗糖酶(β-D-呋喃型果糖苷-果糖水解酶EC 3.2.1.26),是一种水解酶。
它能催化非还原性双糖(蔗糖)的1,2-糖苷键裂解,将蔗糖水解为等量的葡萄糖和果糖(还原糖)。
因此,每水解1mol 蔗糖,就能生成2mol 还原糖。
还原糖的测定有多种方法,例如:纳尔逊-索模吉试剂比色法,斐林试剂法等。
专业: 农业资源与环境 姓名: 李佳怡 学号: 3130100246 日期: 2015.5. 26 地点: 生物实验中心310装订线本实验采用3.5-二硝基水杨酸法测定还原糖的含量,由此可得出蔗糖酶水解速度。
其原理是3.5-二硝基水杨酸与还原糖共热被还原成棕红色的氨基化合物,在一定范围内还原糖的量和反应液的颜色深度成正比。
因此可利用分光光度计在520nm进行比色测定,求得样品中的含糖量。
此法操作简便、迅速、杂质干扰较小。
3、蔗糖酶活力单位(u):蔗糖酶在室温(25℃), pH4.5的条件下,每分钟水解产生1μmol葡萄糖所需的酶量(ml)。
4、蔗糖酶比活力的计算:酶的比活力——为每毫克蛋白质所具有的酶活力单位数,一般用酶活力单位/mg蛋白质表示。
酶的比活力在酶学研究中用来衡量酶的纯度,对于同一种酶来说,比活力越大,酶的纯度越高。
利用比活力的大小可以用来比较酶制剂中单位质量蛋白质的催化能力,是表示酶的纯度高低的一个重要指标。
比活力=活力单位/mg蛋白三、实验材料与试剂1、实验材料蔗糖酶提取的各步分离纯化样品Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ。
2、实验试剂①标准蛋白质溶液:0.5g/L牛血清白蛋白② Folin-酚试剂(甲试剂;乙试剂)③ 1g/L葡萄糖标准溶液(葡萄糖相对分子量180.16);④0.2mol/L乙酸缓冲液,pH4.5;⑤ 5%蔗糖溶液;⑥ 3,5-二硝基水杨酸试剂;甲液:溶解6.9g 结晶酚于15.2ml 10%NaOH溶液中,并用水稀释至69ml,在此溶液中加6.9g亚硫酸氢钠。
乙液:称取255克酒石酸钾钠加到300ml 10%NaOH溶液中,再加入800ml 1%3,5-二硝基水杨酸溶液.甲,乙二溶液相混合即得黄色试剂,贮于棕色瓶中备用,在室温放置7-10天以后使用。
四、实验器材与仪器1、蔗糖酶蛋白含量的测定——Folin-酚法①试管、试管架以及离心管(7ml)、离心管架;②移液管(1ml、2ml、5ml);③微量移液枪(200μl,1000μl)及枪头;④可见光分光光度计及1cm玻璃比色皿;⑤恒温水浴箱(25℃)。
2、蔗糖酶活力测定——3.5-二硝基水杨酸法①试管、试管架以及离心管(7ml)和离心管架;②移液管(1ml、2ml、10ml);③微量移液枪(200μl,1000μl)及枪头;④恒温水浴(25℃、100℃);⑤可见光分光光度计、1cm玻璃比色皿;五、操作方法和实验步骤1、蔗糖酶蛋白含量的测定——Folin-酚法①制备Folin-酚法蛋白质标准曲线取6支试管,编号1-6,按表1顺序依次加入各种试剂,并在分光光度计于500nm处测定光吸收值(A500nm值)。
②各步分离纯化的蔗糖酶蛋白测定由于蔗糖酶提取、分离纯化的各个样品的蔗糖酶蛋白质含量较高,因此在测蔗糖酶提取分离纯化样品Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的蔗糖酶蛋白质含量以前,可根据各样品溶液的蔗糖酶蛋白质含量高低不同作适当的稀释,以测定蔗糖酶蛋白质含量,A500nm值在蛋白质含量标准曲线范围以内为宜。
取13支试管,编号1~13,按表2依次加入各种试剂,并在分光光度计于500nm处测定光吸收值(A500nm 值)。
注:加入Folin-酚乙试剂后,要迅速混匀(加一管混匀一管),使还原反应产生在磷钼酸-磷钨酸试剂被破坏之前。
③绘制标准曲线并计算⑴绘制标准曲线:以光吸收值(A500nm)为纵坐标,标准蛋白质含量(mg/L)为横坐标,在坐标纸上绘制蛋白质标准曲线。
⑵计算:蔗糖酶提取分离纯化的样品Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ稀释溶液的光吸收值(A500nm),根据蛋白质标准曲线得蔗糖酶蛋白含量,再进行样品Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ溶液的最终蔗糖酶蛋白含量的计算。
2、蔗糖酶活力测定——3.5-二硝基水杨酸法①标准曲线的制作按表3加操作,后以还原糖(mg数或μmol数)为横坐标,A520值为纵坐标,制作葡萄糖浓度-吸光值标准曲线。
②蔗糖酶的酶活力测定按照表4加样,在520nm处测定吸光度。
六、实验数据记录和处理表1表2表3表4混匀 A 520nm0.0250.3040.9780.0280.3491.7270.866>2.0 >2.0 0.0140.0300.223七、实验结果与分析1、蛋白质含量标准曲线 由表2可得:由此得蛋白质含量标准曲线:(1)在做标准曲线和样品曲线时,均应在加入乙试剂后要迅速混匀(加一管混匀一管),使还原反应产生在磷钼酸-磷钨酸试剂被破坏之前,以防出现错误的实验结果。
(2)因为参照液蛋白质含量为0,所以标准曲线趋势线须过原点,即截距为零。
所得R 平方数为0.9944,较接近1,说明实验较为成功。
(3)蛋白质标准曲线的微小偏差可能来自于加入试剂后的局部未混匀以及添加试剂时的微小损失等。
2、样品Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、 Ⅳ溶液的最终蔗糖酶蛋白含量 将表2中的数据带入上述蛋白质含量标准曲线,可计算得:编号 1 2 3 4 5 6 标准蛋白质含(mg/L ) 015.3830.7746.1561.5476.92A500nm0.1360.2600.3720.4930.580编号12345678910111213稀释酶液蛋白质含量(mg)00.1350.0740.0920.0850.1690.5290.0420.5441.1670.0620.1880.521稀释酶液蛋白质量平均含量(mg/mL)0 2.70.370.1841.70.8451.0580.842.722.3341.244.091.042原酶液蛋白质平均含量(mg/mL)0 27.12 12.01 9.82 6.37由表中数据可知,从样品I到样品IV,样品中蛋白质含量呈减少趋势,这说明,随着离心,乙醇沉淀,离子交换柱层析等纯化步骤的进行,杂蛋白在逐步被分离,蔗糖酶的含量在逐渐增多,即蔗糖酶的纯度在逐渐增高。
3、葡萄糖标准曲线由表3处理可得编号 1 2 3 4 5 6 7还原糖(mg)0 0.20 0.30 0.40 0.50 0.60 0.70A52000.1280.0690.1370.4400.6430.815由此得葡萄糖标准曲线(1)葡萄糖浓度-吸光值标准曲线的R平方为0.9953,跟1比较接近,说明我们在测定葡萄糖浓度-吸光值标准曲线的时候操作基本正确,没有出现较大的误差。
微小误差的产生可能是在试剂转移或者反应时间方面有误差。
(2)尽管1号试管本身也有一定值的吸光度,但是因为将1号试管作为参照,所以将其吸光度视为0.为保证理论的正确性,使趋势线经过原点。
4、各步提取液酶活力测定将表4数据代入上述葡萄糖标准曲线可得5、蔗糖酶各步纯化样品的纯度比较总体蛋白质呈下降趋势,活力应呈上升趋势。
因为杂质蛋白被除去,蔗糖酶纯度提高。
我组实验总体上符合该趋势说明大致实验操作准确无误。
但是在样品Ⅳ时,出现活力及比活力大幅度下降这一不正常现象。
本次试验我们组用的是另外组的样品,参照他们之前得出的色谱图和试验情况,分析造成这一现象的原因可能为:另外一组的同学在做实验之前,不小心将保存样品4的离心管打翻,造成了大量样品的损失,后来为了保证样品量足够,对其进行了稀释,使其浓度下降,从而导致蔗糖酶活力、比活力等的下降,并且由于未记录稀释倍数,故无法计算原有样品的酶活力,造成样品4活力显著低于前三个样品。
八、讨论、心得①由于一开始做出结果颜色过深,活性过大,我们组稀释倍数较大。
②酶活力测定时,要控制好反应时间,各管的酶反应时间一定要一致,否则会影响整体结果;加各反应试剂的体积一定要准确且不能加错,否则将无法得到理想结果。
③本实验结果不是很理想,因为本次实验的结果与前面两次实验的操作密切相关,所以可能是因为前面两次实验中的操作不当。
如可能是第一步时碾压不够,得出的样品一量较少,以及分离时操作不当,使得样品二含量也较少,还有离子交换柱制备时可能存在问题,使一部分蔗糖酶没能够分离出来,还有本次实验中可能实验时间控制的不够准确,造成结果的偏差。
④缺乏小组成员之间的沟通。
我们在做实验之前并不知道另一小组的同学把样品打翻了,如果知道的话就应该用我们组的样品。
所以在实验前和实验过程中能够好好沟通,就不会造成实验结果的不正常现象。
⑤在实验中应注意:1)酶活力测定时,要控制好反应时间,各管的酶反应时间一定要一致,否则会影响整体结果;2)加各反应试剂的体积一定要准确,否则也会影响最终结果。
3)加入Folin-酚乙试剂后,要迅速混匀(加一管混匀一管),使还原反应产生在磷钼酸-磷钨酸试剂被破坏之前。
⑥使用分光光度计时应注意波长的设置,以免发生测完之后发现波长设置错误的问题。
⑦本实验的主要操作是各种溶液的取用以及酶液的稀释,每管各种溶液的取用量都不同,且不同组的稀释倍数不同,因此取用时应特别注意,防止取错溶液或取量不对,还要注意不要加错试管等。