HIV检测技术
hiv磁微粒化学发光法
HIV磁微粒化学发光法（HIV Magnetic Particle Chemiluminescence Assay）是一种用于检测人体血液样本中HIV抗体的检测方法。
该方法结合了磁性微粒技术和化学发光技术，具有高度的敏感性和特异性。
下面是HIV磁微粒化学发光法的基本原理和步骤：
样本处理：将待检测的血液样本进行预处理，通常包括血清或血浆的离心分离，以获取清晰的液体部分。
磁微粒标记：将特定的磁性微粒与HIV抗原或抗体进行结合。
这些磁性微粒通常表面上包含有特异性的抗原或抗体，能够与HIV抗体或抗原发生特异性的结合。
洗涤步骤：通过洗涤步骤去除非特异性的反应物和杂质，以减少干扰和背景信号。
化学发光反应：添加化学发光底物，触发化学反应，使标记在磁微粒上的酶释放能量并产生发光信号。
信号检测和分析：利用光学设备或化学发光分析仪器，测量和记录产生的发光信号强度。
结果解读：根据标准曲线或比较待测样本与阴性和阳性对照样本的发光强度，确定样本中HIV抗体的存在与否。
HIV磁微粒化学发光法具有灵敏度高、特异性好、操作简便等优点，被广泛用于HIV感染的诊断和筛查。
它可以快速、准确地检测HIV抗体，为临床医生提供重要的诊断依据和决策支持。
全国人类免疫缺陷病毒检测技术规范(2023年修订版)
全国人类免疫缺陷病毒检测技术规范(2023年修订版)引言本文档是全国人类免疫缺陷病毒（HIV）检测技术规范的修订版，旨在规范全国范围内HIV检测的质量和准确性，以提高HIV 感染者的早期发现和治疗。
1. 范围本技术规范适用于全国范围内所有医疗机构、疾病预防控制中心、实验室等单位进行HIV检测。
2. 术语定义- HIV：Human Immunodeficiency Virus，人类免疫缺陷病毒。
- HIV抗体：人体对HIV感染产生的免疫反应所产生的抗体。
- HIV抗原：HIV感染人体内HIV病毒产生的抗原。
- HIV核酸：HIV病毒的遗传物质（RNA）。
3. 检测方法3.1 HIV抗体检测- 检测方法应使用经国家药品监督管理部门批准的HIV抗体检测试剂盒。
- 检测过程应严格按照检测试剂盒说明书进行操作。
- 检测结果应根据检测试剂盒说明书的判断标准进行解读。
3.2 HIV抗原检测- HIV抗原检测可作为HIV感染早期诊断的辅助方法。
- 检测方法应使用经国家药品监督管理部门批准的HIV抗原检测试剂盒。
- 检测过程应严格按照检测试剂盒说明书进行操作。
- 检测结果应根据检测试剂盒说明书的判断标准进行解读。
3.3 HIV核酸检测- HIV核酸检测可作为HIV感染确认和病毒负载监测的方法。
- 检测方法应使用经国家药品监督管理部门批准的HIV核酸检测试剂盒。
- 检测过程应严格按照检测试剂盒说明书进行操作。
- 检测结果应根据检测试剂盒说明书的判断标准进行解读。
4. 质量控制4.1 检测设备- 检测设备应符合国家标准和相关法规的要求。
- 设备应定期进行校准和维护，确保其准确性和稳定性。
4.2 检测人员- 检测人员应具备相关专业知识和技能，经过专业培训并持有相关资质证书。
- 检测人员应定期参加质量控制和技术培训，保持技术能力和水平。
4.3 质量控制物质- 检测过程中应使用经国家质量控制中心认证的质控物质，以保证检测结果的准确性和可靠性。
全国艾滋病检测技术规范
全国艾滋病检测技术规范艾滋病是一种由人类免疫缺陷病毒（HIV）引起的病毒性感染，对个人和社会都具有极大的危害。
为了有效预防、控制艾滋病传播，提高艾滋病检测技术水平，本文档旨在提供全国艾滋病检测技术规范的主要内容，以便各地开展规范的艾滋病检测工作。
本规范旨在明确艾滋病检测技术的要求、方法和结果判断原则，提高检测质量，为防治艾滋病的科学决策提供技术支持。
本规范适用于全国各级医疗卫生机构、疾病预防控制中心、血液中心等开展艾滋病检测的相关单位。
检测前要求：开展艾滋病检测的单位应具备相应的资质和条件，包括合格的人员、设备、实验室设施等。
检测人员需经过专业培训，掌握艾滋病检测技术和相关政策法规。
检测中要求：艾滋病检测应遵循科学、规范的原则，使用经国家认证的试剂和仪器。
检测过程中应建立严格的质控体系，确保检测结果的准确性和可靠性。
同时，要保护受检者的隐私权和知情权。
检测后要求：检测结束后，应将检测结果及时告知受检者，并为其提供相应的咨询和转介服务。
同时，按照国家相关规定，定期向上级主管部门报送艾滋病疫情信息。
血清学检测：常用方法包括HIV抗体筛查试验和确认试验。
抗体筛查试验包括ELISA、化学发光或免疫荧光等方法；确认试验常用免疫印迹法。
病毒载量检测：用于监测HIV病毒在体内的复制情况，常用方法有逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和核酸序列依赖性扩增（NASBA）等。
细胞学检测：通过观察淋巴细胞亚群和细胞因子水平，评估患者的免疫状态。
常用方法包括流式细胞术、免疫细胞化学染色等。
病理学检测：通过活检或尸检观察艾滋病患者的组织病理学变化，对疾病诊断、病情监测和预后评估具有重要意义。
血清学检测： HIV抗体筛查试验阳性，需进行确认试验。
确认试验阳性者即可判定为HIV感染。
病毒载量检测：病毒载量高于正常范围即可判定为HIV感染。
细胞学检测：根据淋巴细胞亚群和细胞因子水平，评估患者的免疫状态。
细胞计数低于正常范围可能提示病情加重或治疗不理想。
艾滋病检测技术HIV-1核酸检测规范
艾滋病检测技术HIV-1核酸检测规范1 范围本章规定了HIV-1核酸定性和定量检测（病毒载量）的意义、实验室要求、检测方法、质量控制及结果判定标准，适用于HIV-1核酸的定性检测和定量的测定。
2 核酸检测的意义核酸检测可用于HIV感染诊断、血液筛查、病程评估及抗病毒治疗效果监测。
2.1 感染诊断2.1.1 作为补充试验：用于筛查试验有反应但抗体确证试验不确定或阴性样本的判定；对筛查试验有反应但抗体确证试验不确定或阴性的疑似艾滋病晚期患者需将核酸检测、临床病史和CD4+T淋巴细胞计数检测结果综合判断。
对于抗体筛查试验阴性但免疫功能低下者，也可进行核酸检测，结合临床综合判断。
2.1.2 急性期诊断：对近期有明确流行病学史的个体，包括患有性病或有性病史，有同性和异性性接触不安全性行为，有共用注射器吸毒史，有医源性暴露史，有职业暴露史，HIV/AIDS 患者的配偶或性伴侣，HIV/AIDS 母亲所生子女等，如抗体筛查试验无反应，可通过核酸检测判定是否为急性期感染。
核酸检测结果阴性或低于最低检测限不能排除HIV-1感染。
2.1.3 HIV-1暴露婴儿感染早期诊断HIV-1感染母亲所生小于18个月龄的婴儿，不同时间的两次HIV-1核酸检测均为阳性即可作出诊断。
18个月龄以上儿童诊断与成人相同。
2.2 血液筛查：对献血者及采供血机构的原料血浆进行核酸检测，可及时发现窗口期感染，降低输血的“残余危险度”，减少二代传播。
2.3 抗病毒治疗效果监测HIV感染者和艾滋病病人经抗病毒药物治疗后，定期进行HIV-1病毒载量检测，可判断抗病毒药物治疗的疗效。
病毒载量结果动态分析，对决定是否继续使用原定的治疗方案以及是否需要更改治疗方案起到重要作用。
一般启动抗病毒治疗6个月后应进行病毒载量检测，以监测治疗效果，每年应检测一次。
治疗前进行检测可了解病人的病毒载量基线，有助于评价治疗后效果。
如适时重复检测病毒载量，没有低于检测限，需要考虑治疗是否失败。
hiv 临床检测技术进展及应用
hiv 临床检测技术进展及应用HIV临床检测技术进展及应用HIV（Human Immunodeficiency Virus，人类免疫缺陷病毒）是一种危害人类健康的病毒，它会导致艾滋病（AIDS）的发生。
随着科学技术的不断进步，HIV的临床检测技术也在不断更新和完善，为准确检测HIV感染提供了更好的手段。
本文将就HIV临床检测技术的进展及应用进行探讨。
一、传统的HIV检测技术传统的HIV检测技术包括酶联免疫吸附法（ELISA）和西方印迹法（Western Blot）。
ELISA是最常用的HIV抗体检测方法，通过检测患者血清中是否存在HIV抗体来判断是否感染HIV。
而Western Blot则是用于确证ELISA检测结果的一种辅助检测方法，能够识别和鉴定特定蛋白质。
然而，传统的HIV检测技术存在着一定的缺陷，比如需要多次检测来确诊、耗时长、误差率高等。
因此，科研人员们一直在努力寻找更加准确、快速、便捷的HIV检测技术。
二、新型HIV检测技术近年来，随着生物技术的不断发展，新型的HIV检测技术不断涌现。
其中，核酸检测技术被认为是目前HIV检测的一项重要突破。
核酸检测技术指的是利用PCR（Polymerase Chain Reaction）等方法检测HIV病毒核酸，从而实现早期感染的准确诊断。
此外，流式细胞术（Flow Cytometry）也被广泛运用于HIV检测领域。
流式细胞术能够对血液样本中的细胞进行高通量、高灵敏度的检测，可以更快速地筛查出HIV感染者。
三、HIV检测技术的应用新型的HIV检测技术不仅提高了HIV感染的检测准确率和速度，也为HIV病毒的治疗和控制提供了更好的手段。
通过及时检测和诊断，可以让感染者尽早接受到抗病毒治疗，延缓疾病进展，提高生活质量。
此外，HIV检测技术的进步也为HIV预防工作提供了重要支持。
通过对易感染人群的定期检测，可以及早发现HIV感染者，采取有效措施阻断病毒传播链，有效降低HIV在人群中的传播风险。
人类免疫缺陷病毒(HIV) 检测
④检测时，先将硝基纤维素膜细条恢复室温，再与待检血清（用稀释 液稀释后）共同浸泡，37℃孵育60min（需用振荡摇床）。 ⑤取出硝基纤维素膜细条，用洗涤液洗涤5次，每次5min（用振荡摇 床）。 ⑥加酶标记抗人IgG 抗体，于37℃孵育60min（需用振荡摇床）。 ⑦洗涤同⑤。 ⑧加酶底物，显色10～20min。终止反应（放置于室温观察）。
第 4页
（1）ELISA 间接法检测HIV 抗体：将待测的血清稀释后按HIV 酶标诊断试剂盒的说明进行操作；该法的特异性和敏感性强， 操作简单、快速安全，比较适合大批量标本和筛选实验，但对 HIV 感染初期病人不能检测到抗体是其不足之处。
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（2）蛋白印迹试验：ELISA 法确诊的阳性标本应做蛋白印迹试 验以确证。
人类免疫缺陷病毒（HIV） 检测
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人类免疫缺陷病毒（HIV）是引起人类艾滋病（获得性免疫缺 陷综合征，AIDS）的病原体。
第 2页1.方法第 Nhomakorabea页有检测HIV 抗原和检测HIV 抗体两种。前者可用组织细胞培养 法、核酸检测法及免疫酶标法；后者有凝集试验、免疫荧光试 验、蛋白印迹试验及放射免疫试验和免疫酶标技术等。 目前世界上常用酶联免疫吸附试验（ELISA）间接法作为经典筛 选试验，蛋白印迹试验作为确证试验。
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谢谢大家！
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（2）蛋白印迹试验：AIDS病人血清中的抗HIV 抗体与HIV的 多肽片段（外膜蛋白与核心蛋白）特异性结合后可形成多条蛋 白区带。强阳性反应显示HIV 几个基因组编码的全部蛋白带， 弱阳性反应显示两条或几条显色较弱的蛋白带，阴性反应则无 任何蛋白带显示。
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3.注意事项 （1）使用公认的HIV 酶标诊断试剂盒，不同厂家的试剂盒有可 能操作有异，应严格按说明书操作；不同厂家的产品有不同的 阳性判断标准，应按说明书慎重判断。 （2）鉴于HIV 及有关试验过程的特殊危险性，应严格规范实验 室操作规程，增加试验结果的准确性；严格规范安全防范措施， 防止感染；阳性结果应重复试验。
艾滋病病的PCR检测技术
艾滋病病的PCR检测技术PCR（Polymerase Chain Reaction）是一种常用的分子生物学技术，在艾滋病病毒的检测中起着重要作用。
本文将介绍艾滋病病毒的PCR检测技术以及其在诊断、病毒量测定和研究中的应用。
一、PCR检测技术简介PCR是由美国生物化学家基里尔·穆利斯（Kary Mullis）于1983年发明的一种体外扩增DNA的方法。
它通过模拟DNA在体内复制的过程，能够对少量DNA进行放大，从而便于检测和分析。
二、艾滋病病毒的PCR检测技术艾滋病病毒的PCR检测主要包括两个方面：一是检测病毒的核酸，在感染早期和晚期均可检测到；二是检测病毒的基因型，有助于了解病毒的分类和毒株差异。
1. 检测病毒核酸PCR技术可以通过特异性引物和酶来扩增病毒核酸，并通过凝胶电泳等方法进行检测。
该方法具有高度敏感性和特异性，可以检测到非常低浓度的艾滋病病毒。
2. 检测病毒基因型PCR技术可以通过特定的引物和扩增条件来扩增不同基因型的艾滋病病毒，例如HIV-1和HIV-2。
通过PCR扩增产物的序列分析，可以确定不同基因型的遗传特征和抗药性。
三、PCR技术在艾滋病病毒诊断中的应用PCR技术在艾滋病病毒的诊断中有以下几个方面的应用：1. 早期感染检测艾滋病病毒感染初期，体内的病毒数量较少，无法通过传统的抗体检测方法进行诊断。
而PCR技术则可以在感染后的数天内检测到病毒核酸，从而早期发现感染者。
2. 感染源追踪通过PCR技术检测病毒核酸，并进行基因型分析，可以追踪艾滋病病毒的感染源，了解传播途径和病毒变异情况，从而制定相应的预防和控制策略。
3. 抗病毒治疗监测艾滋病病毒的抗病毒治疗需要监测病毒的荷载量，即病毒在体内的含量。
PCR技术可以对病毒核酸进行定量检测，从而监测治疗效果，并调整治疗方案。
四、PCR技术在艾滋病病毒研究中的应用PCR技术在艾滋病病毒的研究中有以下几个方面的应用：1. 病毒变异研究通过PCR技术扩增不同基因型的艾滋病病毒，并进行序列分析，可以研究病毒的变异情况和进化规律，为疫苗研发和治疗策略提供理论支持。
艾滋病检测技术规范ppt课件
初筛结论
CONCLUTION
检测者
OPERATOR
全血□ 血浆□ 血清□ 唾液□ 尿□ 其它：_____
年龄 AGE 民族
ETHNICS
编号： NO.： 送检日期
DATE
送检人群
POPULATION
性别
GENDER
婚姻状况
MARRIAGE
□□□□□□□□□□□□□□□□□□
年月日
对样品进行初筛检测，
▪ 对呈阴性反应的样品，可出具HIV抗
体阴性（-）报告；对呈阳性反应的 样品，需要进一步做复检试验和确证 试验。
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筛查程序
复检试验
▪ 对初筛呈阳性反应的样品，应使用原有试剂和另外一
种不同原理（或厂家）的试剂，或另外两种不同原理 或不同厂家的试剂进行复检试验。
▪ 如果初筛检测使用抗原抗体联合试剂，则复检必须包
现住址
____________省__________市________县（区）_____________乡（镇、街道） ____________村__________（门牌号）
____________省__________市________县（区）_____________乡（镇、街道） 户籍地址
村__________（门牌号）
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(3)快速检测（RT）及其它检测试验
▪ 明胶颗粒凝集试验（PA）：是HIV血清抗体检测的一种简便方法。
将HIV抗原致敏明胶颗粒作为载体，与待检样品作用。当待检样 品含有HIV抗体时，明胶颗粒与抗体发生凝集反应，根据凝集情 况判读结果。PA试剂有两种：同时检测HIV-1和HIV-2抗体以及分 别检测HIV-1和HIV-2抗体。有效试验必须有阴性和阳性质控。
HIV实验室检测技术
来源：WS 293—2019
HIV核酸检测
➢ 样本采集、送检和保存
◆ 使用以乙二胺四乙酸（EDTA）为抗凝剂的真空采血管，按常
规采取全血并在6 h内分离血浆。应避免溶血和高脂样本。
◆ 用于核酸检测的血浆和血细胞样品4天内进行检测的可存放于 4℃，3个月以内应存放于-20℃以下。3个月以上应置于-70℃
两次试验抗体均无反应，出具“HIV抗体阴性”报告；复
检试验有反应（均有反应或一个有反应一个无反应）， 报告为“HIV感染待确定”，不能出具阳性报告，进一步 做补充试验。
来源：WS 293—2019
HIV抗体确证试验
➢ 抗体确证试验试剂 ◆ 应使用经国家注册批准、在有效期内的试剂。 ➢ 确证试验 ◆ 包括免疫印迹法 (WB) ，条带 /线性免疫试验
（RIBA/LIA），间接免疫荧光(IFA)和快速确证等方法。
➢ 抗体确证试验 ◆ 复检试验有反应样品，进行抗体确证试验。出现HIV-2 型特异性条带者，可进一步做HIV-2抗体确证试验。
来源：WS 293—2019
HIV抗体确证试验--质量控制
➢ 应制定实验室质量保证和质量控制计划。 ➢ 应建立实验室内部质量控制制度。 ➢ 应定期参加实验室检测能力验证。
➢ 检测方法
➢ 可采用自动检测方法和手工操作法：自动检测方法包括流式细胞仪
(双平台法和单平台法) 和专门的细胞计数仪；手工操作法需要显微 镜。
➢ 双平台法：需要用专门的细胞计数仪和流式细胞仪共同完成。
➢ 单平台法：用流式细胞仪，主要以微球计数方法和体积计数方法为 主。
来源：WS 293—2019
CD4+T淋巴细胞检测
阴性。
◆ HIV-1分离培养阳性可以确证为HIV-1感染，分离培养阴性不能 排除HIV-1感染。
HIV实验室检测技术
HIV实验室检测技术
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操作方法
• 实验准备:试验开始前将试剂和样品放置在 室温(18~23℃), 按实验室SOP做好试剂准 备。
• 备好试剂盒、待检样品和外部对照质控血 清后,严格按试剂盒说明书以及质控和安全 防护要求进行筛查检测.
1/3/2021
HIV实验室检测技术
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注意事项
• ELISA 是目前公认的抗-HIV 较佳的筛选方 法，但在实际工作中，ELISA抗-HIV的检测 受诸多因素影响。
艾滋病期：保持和发展AIDS早期症状，出现多种机 会性感染，神经细胞和功能损伤的表现，易发生 多种肿瘤
* AIDS的病程通常2年
1/3/2021
HIV实验室检测技术
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关于检测抗-HIV的残余危险度
含义：在目前条件下，筛查后仍具感染性的机率 称为残余危险度。
影响因素： * 窗口期和检测时机的选择问题 * 实验室质控 * 个别人免疫功能低下，对HIV无反应 * 试剂质量和保存问题 * 是否在有效期内使用 * 试验操作错误：标本或结果登记的差错、仪器校准否、 错误的操作
第4代试剂
• 从理论上来讲，这种试剂是很完美的，但其 敏感度和特异度尚需通过大量的临床评估加 以确认。在初筛诊断试剂上还发展了特异的 HIV IgA，用作围产期儿童诊断，敏感度达 93.1%，特异度在1月龄以上的婴儿可达 100%。此外，在对抗HIV IgM的诊断也正在 积极研究，并取得了可喜的成绩，无形中可 缩短窗口期7—10天。
B
± ±或 ＋ 再次采样，做确证实验
C
±－
报告抗-HIV阴性
D
－ 不必复检 报告抗-HIV阴性
1/3/2021
HIV实验室检测技术
艾滋病病的抗体检测技术
艾滋病病的抗体检测技术艾滋病的抗体检测技术艾滋病是一种严重的传染病，由人体免疫缺陷病毒（HIV）引起。
为了及早发现和诊断HIV感染，抗体检测技术被广泛应用。
本文将介绍艾滋病的抗体检测技术。
一、ELISA检测技术酶联免疫吸附测定（ELISA）是最常用的艾滋病抗体检测技术之一。
该技术通过检测人体产生的特定抗体来判断是否感染了HIV。
ELISA测试通常包含两个步骤：首先，将被测试的血液样本与HIV抗原结合；然后，通过添加酶标记的抗体来检测是否形成了抗原-抗体复合物。
ELISA技术的优点是简单、快速、灵敏，但结果可能存在假阳性和假阴性的情况。
二、免疫层析试纸检测技术免疫层析试纸是一种简单、便捷的艾滋病抗体检测方法。
该技术通常以尿液或血液为样本，通过试纸上的抗体与被测样本中的HIV特异性抗体相互作用，从而读取结果。
免疫层析试纸检测技术运行时间短，结果易于解读，适用于快速筛查，但其灵敏度和特异性较ELISA技术稍低。
三、核酸检测技术核酸检测技术是一种直接检测HIV核酸的方法，可以早期发现感染者。
PCR（聚合酶链式反应）是最常用的核酸检测技术之一，它能够扩增HIV核酸的特定片段。
PCR方法的灵敏度高，可在感染后的早期阶段检测到HIV，但需要复杂的实验室设备和技术，并且成本较高。
四、抗原检测技术抗原检测技术是一种直接检测HIV抗原的方法。
抗原检测通常结合核酸检测，以提高诊断的准确性。
抗原检测技术通过检测患者体液中的HIV抗原来确定感染情况。
此技术的灵敏度高，且能够捕捉到感染的早期，但需详细的实验室操作和设备。
综上所述，艾滋病的抗体检测技术提供了快速、准确的检测手段，对于早期发现和干预HIV感染具有重要意义。
ELISA、免疫层析试纸、核酸检测和抗原检测等技术的应用不断完善，为我们提供了有效的工具来控制和防治艾滋病。
然而，需要注意的是，不同的技术在灵敏度、特异性和成本等方面存在差异，使用时应根据具体情况选择合适的技术。
艾滋病检测技术
艾滋病检测技术艾滋病（Acquired Immunodeficiency Syndrome，简称AIDS）是由人类免疫缺陷病毒（HIV）感染引起的一种严重的、长期进展性免疫系统疾病。
艾滋病母婴传播、性传播、血液传播是主要的传播途径，因此艾滋病的早期检测显得尤为重要。
随着科技的不断进步，艾滋病的检测技术也得到了极大的改进。
早期的艾滋病检测主要依靠ELISA（酶联免疫吸附试验）和Western Blotting（印迹法）等传统方法。
但这些方法具有一定的局限性，如长时间的检测周期、误差率较高等。
近年来，随着分子生物学和生物技术的发展，新型的艾滋病检测技术不断涌现。
其中最值得关注的是核酸检测技术，即通过检测患者病毒核酸（如HIV的RNA、DNA）来确定是否感染艾滋病。
核酸检测技术具有高灵敏度和高特异性的优点，能够提前发现患者感染的艾滋病毒，因此被广泛应用于艾滋病的早期诊断。
除了核酸检测技术，近年来还出现了其他一些新型的艾滋病检测技术，如免疫荧光技术、激光散射流式细胞仪技术等。
这些技术在提高诊断效率和准确性方面都有重要的作用。
值得一提的是，除了检测技术的不断进步之外，艾滋病检测的便捷性也得到了显著提升。
传统的艾滋病检测需要到医院进行，周期较长，需要等待结果。
而现在，已经出现了一些自检产品，如艾滋病检测试纸。
这种试纸可以让患者在家中进行自主检测，大大提高了艾滋病的检测覆盖率。
然而，尽管现有的艾滋病检测技术已经相当先进，但仍然存在一些问题和挑战。
首先，许多检测技术仍然需要设备和专业人员进行操作，增加了检测的成本和复杂性。
其次，对于一些特殊人群，如婴儿和艾滋病毒突变株感染者，现有的检测技术可能存在一定的误差。
因此，对于这些问题，我们需要继续加大研究力度，不断改进和完善艾滋病检测技术。
总之，艾滋病检测技术的进步对于早期发现和有效控制艾滋病具有重要意义。
随着科技的不断发展，我们相信未来艾滋病检测技术将会更加便捷、准确和可靠，为全球艾滋病防控工作作出更大的贡献。
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➢ 1985年，FDA批准第一个HIV抗体筛 选试剂
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第二代ELISA试剂
➢ 包被抗原：重组抗原、合成多肽
➢ 窗口期：4-5星期
➢ 优点：重组抗原可消除HLA（人类白细 胞抗原）所致的抗体假阳性，生产成本
低，不使用HIV病毒颗粒，较为安全， 敏感性特异性较高
➢ 缺点：仍有一定的假阳性
➢ 1990年，FDA批准第一个重组抗原筛
选试剂
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第三代ELISA试剂
➢ 包被抗原：重组抗原加合成多肽 ➢ 合成多肽抗原是抗原决定簇的氨基酸序列人工
合成的多肽片段。一般只含有一个抗原决定簇， 纯度高，特异性也高 ➢ 窗口期：3星期左右 ➢ 优点：可检测所有不同种类的抗体，增加了试 剂的敏感性和特异性 ➢ 1994年发展了双抗原夹心法，酶标物由抗人 IgG改变为特异性HIV抗原
➢ ELISA、免疫印迹法（WB）已经美国 FDA批准
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➢ 优点:
1. 样品稳定,各种温度下稳定性大于三 周
2. 敏感性和特异性与标准的血清学实验 相当
➢ 缺点:
1. 预处理复杂，重复性较差
2. 会出现不同于血清抗体的种类和滴度
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尿液检测试剂
➢ 适用对象：静脉吸毒人群，其他高危人群的 大 面积流调、监测
<= window =>
=>
=>
第一/二代试剂检测IgG抗体，第三代试剂检测IgG 、IgM抗体,
第四代试剂同时检测IgG、 IgM抗编体辑版和pptP24抗原使窗口期缩短。
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筛查样品
HIV抗体筛查可采用血清、血浆、 滤纸干血斑、唾液和尿液样品。
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唾液检测试剂
➢ 在硝酸纤维膜上包被人工合成的 HIVgp41/gp36蛋白抗原，可以同时 检测HIV－1/HIV－2抗体，原理为酶 免间接法。
以监测为目的的检测是为了解不同人群 HIV感染率及其变化趋势，包括各类高 危人群、重点人群和一般人群。
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5
初筛实验室设备条件
独立实验室用房，建筑设备和仪器
要符合要求II级生物安全实验室
酶标仪，洗板机，精确移夜管， 专用冰箱，离心机，水浴箱， 温箱等
消毒和污染处理设施
安全防护设施
➢ 优点： 1. 采集、处理费用低，较血液标本安全 2. HIV抗体在尿中十分稳定，尿液中IgG与
血液相当
➢ 缺点： 1. 检测时间长 2. 精确性低于血、唾液，阳性者需作血清学
检测
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筛查方法
酶联免疫吸附试验（ELISA） 化学发光或免疫荧光试验
快速检测（RT）
明胶颗粒凝集试验（PA） 免疫渗滤试验：斑点ELISA和斑点免 疫胶体金（或胶体硒）快速试验
免疫层析试验
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酶联酶联免疫吸附－－ELISA方法
➢ 间接法 ➢ 夹心法－－双抗原和双抗体 ➢ 竞争法 ➢ 捕获法
窗口期
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3
HIV抗体检测的目的和要点
HIV抗体检测可用于诊断、血液筛查、 监测等。
以诊断为目的的检测是为了确定个体 HIV感染状况，包括临床检测、自愿咨 询检测、根据特殊需要进行的体检等。
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4
以血液筛查为目的的检测是为了防止输 血传播HIV，包括献血员筛查和原料血 浆筛查。
➢ HIV抗体检测试剂根据其抗原的来源和 检测方式可分为四代
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9
筛查试验
筛查试剂
经国家食品药品监督管理局注册批准 在试剂有效期内 酶联免疫试剂应批批检合格 临床质量评估敏感性和特异性高
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第一代ELISA试剂
➢ 包被抗原：全病毒裂解抗原 ➢ 窗口期：6-8星期 ➢ 优点：灵敏度高，可检出各种抗体 ➢ 缺点：制备麻烦，成本高，假阳性
HIV检测技术
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1
艾滋病实验诊断技术
HIV抗体测定
抗原测定
核酸测定
病毒分离
CD4淋巴细胞计数
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2
HIV感染以后的血清学动态
急性期 HIV RNA
Anti-Ag
潜伏期 Anti-Ab
艾滋病期
Anti-gp41/120 (anti-gp36)
Anti-P24…………….1年 2年 3年…………….10年………..
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6
艾滋病检测方法的意义
HIV抗体筛查检测
HIV/AIDS的筛查，但初筛阳性结果不能做为艾滋病诊断依据，需将 该标本送确证实验室进行确证。
HIV抗体确认检测（免疫印迹试验）
--- HIV/AIDS诊断的唯一依据 ---艾滋病确认实验室负责
HIV核酸检测
• 辅助诊断：在特殊情况下，如出现某些非典型的抗体反应，特别是 不确定反应时，RNA的测定可提供有用的证据。
代次
抗原
1
全病毒
2
重组或多肽
3
重组+多肽
4
抗原+抗体
方法 间接 间接 夹心
夹心
检测时间 > 2个月 3-4 周 2-3 周
2周左右
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Closing the window
HIV antigen
IgM ab
4th gen 3rd gen
IgG ab 1st-2nd gen
Detection limit
• 感染早期：在HIV感染的窗口期，无法使用抗体检测进行诊断，此时 RNA的测定具有特殊的意义，提示是否有感染的可能，但仍需追踪 检测HIV抗体，最终根据抗体的检测情况做出诊断。
• 病程监控：帮助确定疾病发展的阶段。
• 指导治疗方案及疗效测定。
• 预测疾病进程 。
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7
抗体检测
➢ 根据检测HIV感染后产生的HIV抗体的间接指标而 发展起来的血清学诊断技术，分为初筛试验和确认
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第四代ELISA试剂
➢ 包被物：重组或多肽抗原+重组抗体 ➢ 窗口期：2星期左右 ➢ 优点：同时检测HIV抗原抗体，缩短窗
口期 ➢ 注意：抗原检测敏感性低于单独抗原试
剂 (50~70pg/ml,5~10pg/ml)
➢ 1998年第四代试剂编辑版p首pt 次上市
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HIV抗体试剂盒进展
试 验。
➢ 初筛试验 用于对检测对象感染情况的初步筛查，检测结果可
能会有假阳性，不能发抗体阳性报告
➢ 确认试验 确定检测对象是否有HIV抗体，可发抗体阳性报告
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8
酶联免疫试验 ( ELISA )
➢ 最早用于检测血清中HIV抗体的有效筛 检方法
➢ 很高的敏感性和特异性
➢ 根据检测方法，可分成4类间接法、双 抗原夹心法、竞争法和捕获法