第四章免疫球蛋白
第四章 免疫球蛋白

第四章免疫球蛋白第一节基本概念1、抗体:B淋巴细胞在有效的抗原刺激下分化为浆细胞,产生具有与相应抗原发生特异性结合功能的免疫球蛋白,这类免疫球蛋白称为抗体。
1937年,Tiselius用电泳方法将血清蛋白分为白蛋白、α1、α2、β及γ球蛋白等组分,其后又证明抗体的活性部分是在γ球蛋白部分。
因此,相当长一段时间内,抗体又被称为γ球蛋白(丙种球蛋白)。
实际上,抗体的活性除γ球蛋白外,还存在于α和β球蛋白处。
20世纪40年代初期,Tiselius和Kabat用肺炎球菌多糖免疫家兔,证实了抗体活性与血清丙种球蛋白组分相关。
肺炎球菌多糖免疫家兔后可获得高效价免疫血清。
然后加入相应抗原吸收以除去抗体,将除去抗体的血清进行电泳图谱分析,发现丙种球蛋白(γ-G)组分明显减少,从而证明了抗体活性是存在于丙种球蛋白内。
2、免疫球蛋白:具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白统称为免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。
区别:抗体都是免疫球蛋白,而免疫球蛋白并不都是抗体。
如骨髓瘤蛋白,巨球蛋白血症、冷球蛋白血症等患者血清中存在的异常免疫球蛋白结构与抗体相似,但无抗体活性。
免疫球蛋白可分为分泌型(secreted Ig,SIg)和膜型(membrane Ig, mIg)。
前者主要存在于血清及其他体液或外分泌液中,具有抗体的各种功能;后者是B细胞表面的抗原识别受体。
第二节免疫球蛋白结构一、免疫球蛋白的基本结构(一)重链和轻链免疫球蛋白分子是由两条相同的重链(heavy chain,H链)和两条相同的轻链(light chain,L链)通过链间二硫键连接而成的四肽链结构。
X 射线晶体结构分析发现,IgG分子由3个相同大小的节段组成。
1. 重链分子量约为50~75kD,由450~550个氨基酸残基组成。
免疫球蛋白重链恒定区由于氨基酸的组成和排列顺序不同,故其抗原性也不同。
据此,可将免疫球蛋白分为五类,即IgM、IgD、IgG、IgA和IgE,其相应的重链分别为μ链、δ链、γ链、α链和ε链。
第四章免疫球蛋白免疫学

具 有 活 化 补 体 经 典 途 径 的 能 力 (IgG3>IgG1>IgG2);
14
互补决定区
(complementarity-determining region, CDR)
高变区乃抗体与抗原(表位) 特异性结合的位置,此为CDR。
高变区=互补决定区
15
骨架区 (framework region, FR) V区中非HVR部位的氨基酸组成和 排列相对保守,此为FR。VH和VL 各有4个FR。
CL和CH1:某些同种异型(allotype)遗传标记;
IgG的CH2、IgM的CH3:
补体C1q结合点
激活补体经典途径;
IgG的CH3: 结合单核/巨噬细胞表面FcR
不同生物学效应
23
功能区或结构域
结合抗原
遗传标记
结合补体 结合细胞
24
25
结构域的二级结 构是“β 三明治”
Flash 3
2)轻链(light chain, L链) 约214个氨基酸 轻链有两型:κ 及λ
但每一Ig分子的两条轻链 总是同型的。
10
2.可变区和恒定区
掌握
11
恒定区
掌握
(constant region,C区)
位于免疫球蛋白分子的C端,占轻链 1/2和重链3/4(IgA、IgD)或4/5 (IgM、IgE)。在同一种属中,同 一类重链和同一类轻链C区氨基酸的 组成或排列比较恒定。介导免疫球 蛋白多种生物学功能。
16
恒定区
骨架区
高变区 可变区
17
高变区形状特异性
18
19
3.铰 链 区
位 于 CH1 和 CH2 之 间 , 含 丰 富 的 脯氨酸,易伸展弯曲,有利于 免疫球蛋白V区与抗原互补性结 合;有利于暴露补体结合位点;
第四章 免疫球蛋白

Ab=Ig,Ig≠Ab;Ab是功能描述,Ig是化学结构描述;
第二节 免疫球蛋白的结构
一 、Ig的基本结构
(一)、重链和轻链 Ig的两条长链称为重链(Heavy chain, H链),
含 450-550aa,分子量为50-75kD。
重链可分为μ、γ、α、δ、ε链
IgM IgG IgA IgD IgE
2.功能区的作用
VL+VH区: 抗原结合部位(2个)
V区
CL和CH 区:具有同种 异型抗体的遗传标记。 (2个)
铰链区:赋予弹性 和伸展性. CH2区:IgG的补体结 合点和通过胎盘的部位
C区
CH3区:是Ig与多种
细胞Fc受体结合的部 位.
二、Ig的其他结构
(一)连接链(J链):富含半胱氨酸得多肽链
由浆细胞合成的一种糖蛋白。
IgA和IgM含有J链
可稳定Ig多聚体的成份
(二)分泌片 是分泌型IgA(sIgA)的一个辅助成分,
为一种糖肽,由粘膜上皮细胞合成和分泌。
介导IgA二聚体的转运
保护sIgA的铰链区免受蛋白酶的水解破坏
sIgA
分泌片
J链
三 Ig的酶解片断
1.木瓜蛋白酶
2个Fab 段:结合抗原 1个Fc段:结合细胞 2.胃蛋白酶 F(ab’)段:双价抗体活性 pFc’段:无生物学活性
第四节Ig的基因及抗体的多样性
一、Ig的基因结构 1.Ig轻链基因结构 (1)Ig κ 型轻链基因:Vκ
小鼠:350
、Jκ 、Cκ
5 1
人:100
5
1
(2)Igλ 型轻链基因:Vλ
小鼠:2
、Jλ
4
、Cλ
4
人:2
免疫学 第四章 免疫球蛋白

H链抗原性:
μ、 γ、 α、 δ、 ε Ig类别 : IgM IgG IgA IgD IgE
一个天然Ig的两条H链的类, 和两条L链的型是完全相同的 免疫球蛋白的基本结构
17
18
(二)可变区与恒定区
1、可变区(variable region,V区) 氨基酸组成和排列顺序多变
赋予Ab特异性,与表位结合的部位
可变区
超变区(hypervariable region, HVR)
骨架区(framework region,FR)
19
超变区 位置:
VH 29~31、49~58、95~102
VL 28~35、49~56、91~98
分子结构:
Ag接触面(Ig的裂隙) 在结构上与抗原决定簇互补 ——互补决定区(complementarity-determining region,
45
1、 激活补体
激活经典途径:IgG1~3、IgM 激活旁路途径:凝聚的Ig如聚合的IgA
46
补体活化作用
47
48
输血反应
血液
49
2、结合细胞表面的Fc受体(FcR)
Fc段/FcR
Ag-Ab
组织细胞
生物学效应
不同 不同 不同 (IgE游离状态下可与FcR结合:亲细胞抗体)
(1)调理作用 (2)抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用 (3)介导Ⅰ型超敏反应
30
三、铰链区(hinge region) 位于CH1和CH2之间,即H链链间-SS-连接处附近。 IgM、 IgE无铰链区; 特点: ◎含脯胺酸残基多——富弹性,易伸展; 功能: ◎改变Ig构型 弹性和调节作用 使HVR能与不同距离2个表位结合 介导生物学功能 暴露补体结合位点,显示结合补 体活性 ◎对蛋白酶敏感 被酶处理的Ig,多在此区被切断
免疫学第四章 免疫球蛋白

五聚体IgM
(1)分子量最大(900 kd),又称巨球蛋白;存于血流内,抗败血
症
J Chain
(2)合成最早,半衰期短(5天--- 血清中特异性IgM
水平增高提示有近期感染),用于早期诊断和产前诊断
(3)具有强大的调理作用,激活补体及杀菌作用
(4)占血清Ig含量的5~10%
(5)天然血型抗体主要为IgM
1.与Ag特异性结合 2.激活补体
1
3.与Fc受体结合:Ig通过Fc端与多种细胞上的Fc受体 结合,激发效应功能。
(1)调理吞噬作用:Ig可结合到吞噬细胞的Fc受体, 促进M的吞噬颗粒性抗原。
(的FcR结合后,使细胞脱颗粒,释放生物活性物 质,激发I型过敏反应。
中和作用 溶解细胞
特异性结合抗原
激活 补体 通过胎盘和粘膜
结合 FcR
ADCC作用 调理作用
联合调理作用
通过胎盘
二、 各类免疫球蛋白的特性和功能
(一)IgG(单体)150KD 产生部位:淋巴结 脾
1、分4个亚类:IgG1、IgG2、IgG3、IgG4 2、血清中含量最高(75%),分子量最小,在抗体介导的防卫
(3)半衰期: 3天
Tail Piece
(4)防止免疫耐受的发生
人各类Ig的理化和免疫学性质比较
特性 重链 主要存在形式
IgG
γ 单体
分子量(kD)
150
抗原结合价 血清含量(mg/ml) 占血清Ig总量(%) 血管内分布(%) 外分泌液中 半衰期(日) 开始合成时间 血清含量达到正常成人水平的 年龄 通过胎盘 经典途径活化补体 替代途径活化补体 结合吞噬细胞 结合嗜碱性粒细胞和肥大细胞
鼠的IgG1(品系A)
医学细胞生物学第4章免疫球蛋白

1
免疫疗法
免疫球蛋白在治疗自身免疫疾病和肿瘤方面的应用正在逐渐发展和成熟。
2
疫苗研究
免疫球蛋白研究为疫苗开发提供了重要的理论基础,有助于提高疫苗的效力和安 全性。
3
疾病诊断
免疫球蛋白的检测可以用于许多疾病的诊断和监测,为临床医学提供了重要的工 具。
3
分泌途径
成熟的免疫球蛋白可以通过分泌途径被输送到体液中或被固定在细胞膜上。
免疫球蛋白的功能机制
1 中和病原体
免疫球蛋白可以结合病原体,并通过激活免疫细胞或直反应的强度和方向,确保免疫系统的平衡和正常运作。
3 识别自身和非自身
免疫球蛋白可以识别自身分子和非自身分子,帮助免疫系统辨别与抗原相关的问题。
Y型结构
免疫球蛋白具有Y型的结构,其中的抗原结合部 位能与特定的抗原结合,触发免疫反应。
抗体多样性
由于基因的重组和变异,免疫球蛋白具有非常 大的多样性,能够识别各种不同的抗原。
免疫球蛋白的合成和分泌
1
基因重组
免疫球蛋白的合成始于基因重组,通过基因的重排组合产生不同的免疫球蛋白。
2
成熟过程
免疫球蛋白在淋巴细胞中的合成和分泌过程经历了多个复杂的步骤,包括剪接和 翻译。
免疫球蛋白与免疫系统的关系
免疫系统组成部分 淋巴细胞 抗原提呈细胞 免疫调节细胞
免疫球蛋白的作用
免疫球蛋白可以与淋巴细胞相互作用,激活和调 节免疫反应。
免疫球蛋白可以识别和结合抗原提呈细胞上的抗 原,触发免疫反应。
免疫球蛋白可以与免疫调节细胞相互作用,控制 免疫系统的平衡和正常功能。
免疫球蛋白的临床应用和前景
医学细胞生物学第4章免 疫球蛋白
免疫球蛋白是免疫系统中非常重要的蛋白质,具有多种定义和功能。它们可 以识别和中和病原体,保护我们免受感染。
d第四章免疫球蛋白

免疫学教研室 武延雋 2012(3-5)
概述
1、免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)
是指具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白 统称为免疫球蛋白。可分为分泌型和膜型,前者存 在血清中,后者构成B细胞膜上的抗原识别受体。
2、抗体(antibody,Ab)
是B细胞识别抗原后增殖分化为桨细胞,由桨细胞产 生的一种糖蛋白,主要存在于血清等体液中,能与 相应抗原特异性地结合,具有免疫功能。抗体是免 疫球蛋白,但免疫球蛋白不一定都是抗体。
二硫键联接两条重链与两条轻链成一个单体Ig分子。 每条重链和轻链又分为氨基端(N)和羧基端(C) 。
Heavy
Fab VH CH1
VL
CL
CH2
Fc
CH3
Chains (five types: Light Chains (two types: and Fab fragment Fc fragment Constant regions variable regions Disulfide linkages
四、 IgE
1 2 3 4 种系进化中最晚出现的Ig,也是血清中含 量最低的Ig 单体形式存在,结构式为:22或22 结合肥大细胞和嗜碱性性粒细胞,参与I 型超敏反应的发生 结合嗜酸性粒细胞,有效杀伤寄生虫
Immunoglobulin E (IgE)
2、轻链(light chain L) (每条分子量约25KD ,由214-220个氨基酸组成) 轻链可分为两种链:κ(kappa)链、λ(lambda) 链,据此将Ig分为κ型和λ型。 一个天然Ig分子上的两条轻链总是相同的,同一个 体内不同Ig分子上的轻链是可以不同的。 κ :λ=2:1;根据λ链恒定区个别氨基酸的差异,又 分为λ1、λ2、λ3和λ4四个亚型。
第四章免疫球蛋白

(Immunoglobulin,Ig)
内
容
一、抗体与免疫球蛋白 二、免疫球蛋白的分子结构 三、各类免疫球蛋白的特点与功能 四、抗体的生物学活性 五、免疫球蛋白的血清型
抗体——生物体最奇妙的分子
●无限的多样性(diversity)
●功能与结构的双重性
可变区——抗原特异性结合
(三)IgA
分为血清型和分泌型两种。 血清型IgA主要由肠系膜淋巴组织中的浆细胞产生,为 单体。有抗菌、抗病毒、抗毒素的作用。 分泌型IgA(sIgA)是由呼吸道、消化道、泌尿生殖道 等处的固有层中浆细胞产生,为双体、三体或多体。
四肽链对称结构 ,链间二硫键连接 两条相同的重链(heavy chain,H)和两条相同的轻 链(light chain,L) 氨基端和羧基端。
1.重链与轻链
1.重链(heavy chain,H链)
400~500个氨基酸残基,分子量约50~70kD。 根据Ig重链抗原性的差异,Ig可分为五类 即 IgG、IgM、IgA、IgD、IgE, 相应H链为γ、 μ、 α、 δ及 ε链。
Arne Wilhelm Kaurin Tiselius 1948 The Nobel Prize in Chemistry
Elvin A. Kabat 1914–2000
与抗体有关的诺贝尔奖获得者
1901 1908 von Bering Ehrlich & Metchnikoff 血清治疗 抗体生成、吞噬
2、结合Fc受体
Ig的Fc段经与不同细胞表面的Fc受体(FcR)结合,可 表现出不同功能 (1) 调理作用(opsonization) 是指抗体、补体等调 理素(opsonin)促进吞噬细胞吞噬细菌等颗粒性抗原的作用。 抗体的调理作用是指IgG或IgA抗体的Fc段与中性粒细胞、 巨噬细胞、嗜酸性粒细胞等的相应 Fc受体结合,从而增 强吞噬细胞的吞噬作用
第四章 免疫球蛋白

二、免疫球蛋白的功能区
二、免疫球蛋白的功能区
IgG、 IgA、IgD 有4个功能区, IgM、IgE有5个功 能区。
动画演示
IgG功能区的功能
VL、 VH: 特异性识别和结合Ag CL、CH1:同种异型的 遗传标记 CH2: 结合补体、通过胎盘 CH3: 与细胞的Fc受体结合
三、IgG的水解片段
第四节
Ig的生物学活性
一、V区的功能 特异性识别和结合Ag 二、C区的功能
四节
Ig的生物学活性
一、V区的功能 二、C区的功能 1.激活补体 IgG 、IgM参与
动画演示
第三节
Ig的生物学活性
一、V区的功能 二、C区的功能
1.激活补体 2.与细胞表面Fc受体结合 3.通过胎盘、粘膜 IgG能通过胎盘,保护胎儿。sIgA能通过 粘膜和乳腺,保护局部或新生儿。
免疫球蛋白通过互补决定区(高变区)与抗原特异性结合
(三)Ig的其它结构
1.J链 分布在IgM,sIgA
2.分泌片 (secretory piece,SP)
分布于分泌型IgA ( sIgA )。 功能:保护sIgA免于被蛋白水解酶降解。
(四)绞链区
含大量脯氨酸,富 有弹性,使Ig能变构, 利于Ig与Ag特异结合。 绞链区对蛋白酶敏 感。 IgM和IgE无绞链区。
(一)重链与轻链
(一)重链与轻链
1.根据重链的aa组成和抗原性的不同,分为: γ链、α链、μ链、ε链、δ链。
Ig分为5类: IgG 、IgA、 IgM 、IgE 、IgD 2. 根据轻链的aa组成(二)可变区与恒定区
L链和H链近N端约 110个aa组成或排列顺 序变化很大,称可变区 (V区,Variable) 。
第4章 免疫球蛋白

四、免疫球蛋白IgG的水解片段
Fab
抗原结合片段
Fab
Fc (可结晶 片段)
, F(ab) 2
意义:
⑴ 用于研究免疫球蛋白的结构和功能; ⑵ 避免超敏反应。
, pFc
第二节 免疫球蛋白的血清型
(一)同种型 指同一种属所有个体间的 Ig分子共有的抗原特异性。因种属而不同 (二)同种异型 指同一种属不同个体间 的Ig分子具有特异性不同的抗原决定簇。 因人而不同 (三)独特型 指不同B细胞所产生的Ig 分子V区具有的抗原特异性标志。
N
轻链(L)
二硫键
铰链区
重链(H)
C
IgA(IgA1、IgA2)
IgM
μ
α
IgE
γ
IgD
ε
IgG
(IgG1~IgG4)
δ
2. 可变区和恒定区
N
3.超变区 (HVR)或称 互补决定区 (CDR)
VH
CH 1
V区
VL CL CH2
C区 C
CH3
4. 铰链区
位于CH1-CH2之间,富含脯氨酸 特点:易伸展 —— 有利于结合Ag, 易被木瓜蛋白酶、胃蛋白酶水解。 * IgM、IgE无铰链区(CH2)
第四章
一、抗体与免疫球蛋白 二、免疫球蛋白的结构 三、免疫球蛋白的血清型(了解)
四、免疫球蛋白的生物学特性
五、人工制备抗体
抗体与免疫球蛋白
抗原
浆细胞
B
抗体
抗体 (antibody,Ab)
是B细胞识别抗原后增殖分化为浆细胞所产 生的一种糖蛋白,主要存在于血清等体液中,能 与相应抗原特异性结合,具有免疫功能。
免疫球蛋白 (immunoglobulin,Ig) 具有抗体活性或化学结构与抗体相似 的球蛋白统称为免疫球蛋白。
第四章免疫球蛋白

一、名词解释1.抗体2.免疫球蛋白3.VH 4.CH 5.Fab段6.绞链区7.独特型8.单克隆抗体9.基因工程抗体l0.Ig同种异型二、填空题1、木瓜蛋白酶将IgG水解为——段和——。
胃蛋白酶将IgG重链间二硫键近端切断,得——段和小分子肽链碎片——。
2、Ig分子与抗原结合的功能区是——和——。
3、IgG、IgA、IgM、IgD、IgE的重链分别用——、——、——、——、——来表示。
4、机体最先产生的Ig是——,血清中含量最多的是——,婴儿从初乳中得到的是——,能通过胎盘的是——,与I型变态反应有关的是——。
5、B细胞膜上有——和——,称为膜表面Ig,是B细胞的抗原受体,肥大细胞膜上具有——Fc受体。
6、IgA有——型和——型两类,SIgA是机体粘膜局部抗感染的主要因素。
SIgA常存在于——、——、——、——、——、——、——、等外分泌液中。
7、IgE由——、——、——、——等处的浆细胞产生。
8、抗体多样性的原因主要有两方面:——和——。
9、人Ig的血清型包括——、——及——。
10、婴儿胃肠道内的局部特异性免疫是由母体的——中的——决定的。
11、Ig的——段与抗原结合,——段决定Ig抗原性。
12、人工制备的抗体类型有——、——、——。
13、Ig分子是由三个连锁的基因——、——、——所编码。
14、具有CH4功能区的免疫球蛋白是——和——。
15、免疫球蛋白的基本结构是由——条相同的重链和——条相同的轻链,以——连接而成。
16、免疫球蛋白轻链可分为——和——两个功能区。
17、IgG绞链区位于——与——之间的区域,其补体(Clq)结合点位于——。
18、IgA在血清中多以——形式存在,而出现在外分泌液中的SIgA则以——形式存在。
19、IgG由于——氨基酸组成和二硫键数目的差异又可分为——个亚类。
20、基因工程抗体主要有——、——、——三种类型。
21、免疫球蛋白的生物学活性有——、——、——、——。
三、最佳选择题.1、人类IgG合成开始于出生后( )A.2~3周B.3个月C.4个月D.6个月E.2岁2、人类IgM的合成开始于( )A.15周胚胎龄B.28周胚龄C.出生后3个月D.出生后2—3周E.出生后3岁3、大多数免疫原给多种动物接种后,首先检出的抗体是( )A.IgG B.IgA C.IgM D.IgE E.IgD4、Ig的V区包括( )A.近N端1/2H链和1/2L链B.N端1/3H链和1/3L链C.近N端l/4H链和1/2L链D.近C端l/4H链和1/2L链E.近C端l/3H和1/2L链5、抗体分子与抗原结合的部分是( )A.Fc段B.Fab C.绞链区D.H链的C区E.L链的C区6、免疫球蛋白中,与分泌片有关的是( )A.IgG B.IgA C.IgM D.IgE E.IgD7、产生抗体的细胞是( )A.嗜碱性粒细胞B.浆细胞C.肥大细胞D.吞噬细胞E.B细胞8、抗体的特异性是由( )A.重链和轻链决定的B.重链易变区决定的C.轻链易变区决定的D.重链和轻链的易变区决定的E.重链和轻链的恒定区决定的9、免疫球蛋白的绞链区位于( )A.VH与CHl之间B.CHl与CH2之间C.CH2与CH3之间D.CH3与CH4之间E.VL与CL之间10、免疫球蛋白独特型抗原决定簇的位置是( )A.VH/VL B.CH/CL C.VH/CH D.VL/CH E.VH/CL 11、免疫球蛋白的补体结合点位于( )A.CL B.CHl C.CH2 D.CH3 E.CH412、免疫球蛋白的同种型抗原决定簇存在于( )A.C区B.V区C.超变区D.A+B E.以上都不是13、机体粘膜抗感染的主要抗体是( )A.IgG B.SIgA C.IgM D.IgE E.IgD14、异种动物免疫血清是( )A.抗原B.抗体C.即是抗原又是抗体D.不是抗原也不是抗体E.以上都不是15、唾液中主要的抗体是( )A.SIgA B.IgG C.IgM D.IgD E.IgE16、母体IgG通过下述哪个功能区通过胎盘( )A.VH B.CHl C.CH2 D.CH3 E.CH417、天然的血型抗体为( )A.IgG B.IgA C.IgM D.IgD E.IgE18、分泌型IgA可抵抗蛋白酶水解与下述哪种结构有关?( )A.α链氨基酸组成B.二硫键的存在C.J链的存在D.分泌片的存在E.双体结构19、关于IgG,下述哪项是错误的( )A.IgG以单体形式存在,广泛分布于体液中B.IgG的半衰期相对较长C.IgG可通过经典途径激活补体D.IgG4固定补体的能力最强E.IgG参与ADCC效应20、SPA能非特异性与下述哪种Ig的Fc段结合( )A.IgG B.IgA C.IgM D.IgD E.IgE2l、脐血中出现抗风疹病毒的何种Ig,则表示子宫内感染( )A.IgG B.IgA C.IgM D.IgD E.IgE22、中和抗体主要是( )A.IgG B.IgA C.IgM D.IgD E.IgE23、新生儿早期易患呼吸道胃肠道感染的可能原因是( )A.补体成份缺陷B.先天免疫缺陷C.皮肤粘膜的天然屏障差D.SIgA功能尚未成熟E.呼吸道胃肠道发育不良24、凝集作用最强的Ig是( )A.IgG B.IgA C.IgM D.IgD E.IgE25、作为B细胞成熟重要标志的抗原受体成分的Ig是( )A.IgG B.IgM C.IgA D.IgD E.IgE26、IgG经木瓜蛋白酶水解为( )A.两个Fab段和一个PFc/段B.一个F(ab/)2段和一个Fc段C.一个Fc段和一个Fab段D.两个Fab和一个Fc段E.一个F(ab/)2段和一个PFc/27、IgM的主要特征是( )A.在生物进化过程中最先出现B.分子量最大C.主要存在血管内D.可通过胎盘E.A+B+C28、IgE的主要特点正确者为( )A.血清中含量极微B.生物进化过程中产生最晚C为亲细胞抗体D.与肥大和嗜碱性细胞有高度亲和力E.以上都对29、抗体在机体内的抗感染作用( )A.在体液中主要靠IgG B.在血管中主要靠IgM C.在粘膜表面主要靠SIgAD.杀游离的微生物E.以上都对30、免疫球蛋白同种异型取决于下列何种部位上几个氨基酸的差异( )A.VL及VH B.VL及CH C.CH及CL D.VH及CL E.VL四、问答题1、抗体与免疫球蛋白的区别与联系。
第四章 免疫球蛋白

第四章免疫球蛋白第四章免疫球蛋白第一节基本概念1、抗体:b淋巴细胞在有效的抗原刺激下分化为浆细胞,产生具有与相应抗原发生特异性结合功能的免疫球蛋白,这类免疫球蛋白称为抗体。
1937年,Tiselius用电泳法将血清蛋白分为白蛋白α1、α2、β和γ球蛋白等组分,后来证明抗体的活性部分在γ球蛋白部分。
因此,长期以来,抗体也称为丙种球蛋白(gamma globin)。
事实上,抗体的活性除了γ球蛋白外,还存在于α和β球蛋白中。
20世纪40年代早期,Tiselius和Kabat用肺炎球菌多糖免疫兔子,并证实抗体活性与血清丙种球蛋白成分有关。
用肺炎球菌多糖免疫家兔可获得高滴度的免疫血清。
然后加入相应的抗原吸附剂去除抗体,并对血清电泳图谱进行分析,发现丙种球蛋白(γ-g)组分显著降低,证明丙种球蛋白中存在抗体活性。
2、免疫球蛋白:具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白统称为免疫球蛋白(immunoglobulin,ig)。
区别:抗体是免疫球蛋白,免疫球蛋白并不是所有的抗体。
例如,骨髓瘤蛋白、巨球蛋白血症和冷球蛋白血症患者血清中的异常免疫球蛋白结构与抗体相似,但没有抗体活性。
免疫球蛋白可分为分泌型(secretedig,sig)和膜型(membraneig,mig)。
前者主要存在于血清及其他体液或外分泌液中,具有抗体的各种功能;后者是b细胞表面的抗原识别受体。
第二节免疫球蛋白结构一、免疫球蛋白的基本结构(I)重链和轻链免疫球蛋白分子是由两条相同的重链(heavychain,h链)和两条相同的轻链(lightchain,l链)通过链间二硫键连接而成的四肽链结构。
x射线晶体结构分析发现,igg分子由3个相同大小的节段组成。
1.重链其分子量约为50~75kd,由450~550个氨基酸残基组成。
由于氨基酸的组成和排列不同,免疫球蛋白重链恒定区的抗原性也不同。
因此,免疫球蛋白可分为五类:IgM、IgD、IgG、IgA和IgE,它们对应的重链是μ链δ链γ链α链和ε链。
医学免疫学第四章 免疫球蛋白

第二节 免疫球蛋白的异质性
Chapter 2 Heterogeneity of Immunoglobulin
一、免疫球蛋白的类型
IgG
IgG
IgG
IgG
1
2
3
4
第二节 免疫球蛋白的异质性
Chapter 2 Heterogeneity of Immunoglobulin
二、免疫球蛋白的多样性
多样性抗原表位的存在是导致Ig异质性(即具有不同 的抗原特异性)的外源因素,是Ig异质性的物质基础。
一、免疫球蛋白的基本结构
四肽链 二硫键 “Y”
第一节 免疫球蛋白的结构
Chapter 1 Structures of Immunoglobulin
一、免疫球蛋白的基本结构
(一)重链和轻链(Heavy chain and Light chain)
第一节 免疫球蛋白的结构
Chapter 1 Structures of Immunoglobulin
一、免疫球蛋白的基本结构
(三)铰链区(hinge region)
第一节 免疫球蛋白的结构
Chapter 1 Structures of Immunoglobulin
一、免疫球蛋白的基本结构
第一节 免疫球蛋白的结构
Chapter 1 Structures of Immunoglobulin
一、免疫球蛋白的基本结构
第一节 免疫球蛋白的结构
Chapter 1 Structures of Immunoglobulin
一、免疫球蛋白的基本结构
(二)可变区和恒定区(Variable region and Constant region)
第一节 免疫球蛋白的结构
免疫球蛋白

二、单克隆抗体 (monoclonal antibody,McAb或mAb) 由一个B细胞和一个恶性骨髓瘤细胞 融合成的B细胞克隆仅识别一种抗原表位, 故经筛选和克隆化的杂交瘤细胞仅能合 成、分泌单一抗原表位的特异性抗体。
HAT培养基: 次黄嘌呤(Hypoxanthine,H) 氨基蝶呤(Aminopterin ,A) 胸腺嘧啶核苷(Thymidine,T)。
小
结
一、Ig与Ab的概念 二、Ig的结构 三、Ig的异质性 四、各类Ig的特性与功能(Ab) 五、五类免疫球蛋白的特性与功能 六、人工制备抗体
第二节 免疫球蛋白的异质性
免疫球蛋白基本结构相似,但在结构与功能上差别甚 大,也就出现了特异性与类别的不同,即明显的异质性 (heterogenecity)。 一、免疫球蛋白的类型: (一)类(class):同一种属不同个体,重链C区差异,重链五种, 类别五类; (二)亚类(subclass):同类免疫球蛋白,重链抗原性及二硫 键数目和位置差异,再分亚类:IgG(1、2、3、4); IgA(1、 2); (三)型(type):同一种属所有个体,轻链C区差异,Ig可分为 κ和λ两型; (四)亚型(subtype):同一型别Ig,轻链C区差异,如: λ链 190氨基酸为亮氨酸时,称为OZ(+),为精氨酸时,称为
四、IgD 1.血清含量低:0.2%,功能不详; 2.个体发育的任何时期都可产生; 3.半衰期仅3天; 4.BCR:mIgM--未成熟B细胞, BCR:mIgM、mIgD--成熟 B细胞。
五、IgE 1.血清含量最低:5×10-5mg/ml 2.引起Ⅰ型超敏反应; 3.可能参与抗寄生虫感染。
一、多克隆抗体 第五节 人工制备抗体 (polyclonal antibody,pAb) 天然抗原分子中常含多种不同抗原 特异性的抗原表位,以该抗原物质刺激 机体免疫系统,体内多个B细胞克隆被 刺激,产生的抗体中实际上含有针对多 种不同抗体表位的免疫球蛋白。 克隆(clone):一个纯的无性细胞繁殖 系。
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第四章 免疫球蛋白抗体(antibody,Ab)是介导体液免疫的重要效应分子,是B细胞接受抗原刺激后增殖分化为浆细胞所产生的糖蛋白,主要存在于血清等体液中,能与相应抗原特异性地结合,显示免疫功能。
早在十九世纪后期,von Behring及其同事Kitasato就发现白喉或破伤风毒素免疫动物后可产生具有中和毒素作用的物质,称之为抗毒素(antitoxin),随后引入抗体一词来泛指抗毒素类物质。
1937年Tiselius和Kabat用电泳方法将血清蛋白分为白蛋白、α1、α2、β及γ球蛋白等组分,并发现抗体活性存在于从α到γ的这一广泛区域(图4-1),但主要存在于γ区,故相当长一段时间内,抗体又被称为γ球蛋白(丙种球蛋白)。
1968年和1972年世界卫生组织和国际免疫学会联合会的专门委员会先后决定,将具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白统一命名为免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。
免疫球蛋白可分为分泌型(secreted Ig,SIg)和膜型(membrane Ig, mIg)。
前者主要存在于血液及组织液中,具有抗体的各种功能;后者构成B细胞膜上的抗原受体。
第一节 免疫球蛋白的结构一、免疫球蛋白的基本结构X射线晶体衍射结构分析发现,免疫球蛋白由四肽链分子组成,各肽链间有数量不等的链间二硫键。
结构上Ig可分为三个长度大致相同的片段,其中两个长度完全一致的片段位于分子的上方,通过一易弯曲的区域与主干连接,形成一”Y”字型结构(图4-2),称为Ig单体,构成免疫球蛋白分子的基本单位。
图4−2(一)重链和轻链任何一类天然免疫球蛋白分子均含有四条异源性多肽链,其中,分子量较大的称为重链(heavy chain, H),而分子量较小的为轻链(light chain, L)。
同一天然Ig 分子中的两条H链和两条L链的氨基酸组成完全相同。
1. 重链 分子量约为50~75kD,由450~550个氨基酸残基组成。
各类免疫球蛋白重链恒定区的氨基酸组成和排列顺序不尽相同,因而其抗原性也不同。
据此,可将免疫球蛋白分为5类(class)或5个同种型(isotype),即IgM、IgD、IgG、IgA和IgE,其相应的重链分别为μ链、δ链、γ链、α链和ε链。
不同类的免疫球蛋白具有不同的特征,如链内和链间二硫键的数目和位置、连接寡糖的数量、结构域的数目以及铰链区的长度等均不完全相同。
即使是同一类Ig其铰链区氨基酸组成和重链二硫键的数目、位置也不同,据此又可将同类Ig分为不同的亚类(subclass)。
如人IgG可分为IgG1~IgG4;IgA可分为IgA1和IgA2。
IgM、IgD和IgE尚未发现有亚类。
2. 轻链 分子量约为25 kD,由214个氨基酸残基构成。
轻链有两种,分别为κ(kappa)链和λ(lambda)链,据此可将Ig分为两型(type),即κ型和λ型。
一个天然Ig分子上两条轻链的型别总是相同的,但同一个体内可存在分别带有κ或λ链的抗体分子。
5类Ig中每类Ig都可以有κ链或λ链,两型轻链的功能无差异。
不同种属生物体内两型轻链的比例不同,正常人血清免疫球蛋白κ:λ约为2:1,而在小鼠则为20:1。
κ:λ比例的异常可能反映免疫系统的异常,例如人类免疫球蛋白λ链过多,提示可能有产生λ链的B细胞肿瘤。
根据λ链恒定区个别氨基酸的差异,又可分为λ1、λ2、λ3和λ4 四个亚型(subtype)(二)可变区和恒定区通过分析不同免疫球蛋白重链和轻链的氨基酸序列,发现重链和轻链靠近N 端的约110个氨基酸的序列变化很大,其他部分氨基酸序列则相对恒定。
免疫球蛋白轻链和重链中靠近N端氨基酸序列变化较大的区域称为可变区(variable region, V),分别占重链和轻链的1/4和1/2;而靠近C端氨基酸序列相对稳定的区域,称为恒定区(constant region, C区),分别占重链和轻链的3/4和1/2(图4−2)。
1. 可变区 重链和轻链的V区分别称为V H和V L。
V H和V L各有3个区域的氨基酸组成和排列顺序高度可变,称为高变区(hypervariable region, HVR)或互补决定区(complementarity determining region, CDR),分别用HVR1(CDR1)、HVR2(CDR2)和HVR3(CDR3)表示,一般CDR3变化程度更高。
V H的3个高变区分别位于29~31、49~58和95~102位氨基酸,V L的3个高变区分别位于28~35、49~56和91~98位氨基酸。
V H和V L的3个CDR共同组成Ig的抗原结合部位(antigen-binding site),决定着抗体的特异性,负责识别及结合抗原,从而发挥免疫效应。
在V区中,CDR之外区域的氨基酸组成和排列顺序相对不易变化,称为骨架区(framework region,FR)。
V H或V L各有FR1、FR2、FR3和FR4四个骨架区,分别用FR1、FR2、FR3和FR4表示。
图4−32. 恒定区 重链和轻链的C区分别称为C H和C L。
不同型(λ或κ)Ig其C L的长度基本一致,但不同类Ig CH的长度不一,有的包括C H1、C H2和C H3;有的更长,包括C H1、C H2、C H3和C H4。
同一种属的个体,所产生针对不同抗原的同一类别Ig,其C区氨基酸组成和排列顺序比较恒定,其免疫原性相同,但V区各异。
例如:针对不同抗原的人IgG抗体,它们的V区不同,所以只能与相应的抗原发生特异性结合,但C区是相同的,均含γ链,因此抗人IgG抗体(第二抗体)均能与之结合。
再如,针对同一抗原的人IgG和IgM抗体,它们的V区是相同的,所以均能与该抗原特异性结合,但C区是不同的,分别含γ和μ链。
(三)铰链区铰链区(hinge region)位于C H1与C H2之间,含有丰富的脯氨酸,因此易伸展弯曲,能改变两个结合抗原的Y形臂之间的距离,有利于两臂同时结合两个不同的抗原表位。
铰链区易被木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等水解,产生不同的水解片段(见水解片段部分)。
五类Ig或亚类的铰链区不尽相同,例如人IgG1、IgG2、IgG4和IgA的铰链区较短,而IgG3和IgD的铰链区较长。
IgM和IgE无铰链区。
(四)结构域Ig分子的两条重链和两条轻链都可折叠为数个球形结构域(domain),每个结构域一般具有其相应的功能。
轻链有V L和C L两个结构域;IgG、IgA和IgD重链有V H、C H1、C H2和C H3四个结构域;IgM和IgE重链有五个结构域,比IgG多一个C H4。
这些结构域的功能虽不同,但其结构相似。
每个结构域约由110个氨基酸组成,其氨基酸的序列具有相似性或同源性,二级结构是由几股多肽链折叠形成的两个反向平行的β片层(anti-parallelβsheet),两个β片中心的两个半胱氨酸残基由一个链内二硫键垂直连接,可稳定结构域,形成一个“β桶状(βbarrel)”或“β三明治(β sandwich) ”结构(图4−4)。
这种折叠方式称为免疫球蛋白折叠(immunoglobulin folding)。
具有这类独特折叠结构的分子不仅有Ig,其它许多膜型和分泌型分子也含有该类结构,因此,这类分子被统称为免疫球蛋白超家族(immunoglobulin superfamily,IgSF)。
二、免疫球蛋白的其他成分Ig轻链和重链除上述基本结构外,某些类别的Ig还含有其他辅助成分,分别是J链和分泌片。
(一)J链J链(joining chain)是一富含半胱氨酸的多肽链(图4-5),由浆细胞合成,主要功能是将单体Ig分子连接为多聚体。
2个IgA单体由J链相互连接形成二聚体,5个IgM单体由二硫键相互连接,并通过二硫键与J链连接形成五聚体。
IgG、IgD和IgE常为单体,无J链。
(二)分泌片分泌片(secretory piece,SP)又称为分泌成分(secretory component, SC),是分泌型IgA分子上的一个辅助成分,为一种含糖的肽链,由黏膜上皮细胞合成和分泌,以非共价形式结合于IgA二聚体上,使其成为分泌型IgA(SIgA),并一起被分泌到黏膜表面。
分泌片具有保护分泌型IgA的铰链区免受蛋白水解酶降解的作用,并介导IgA二聚体从黏膜下通过黏膜等细胞到黏膜表面的转运。
三、免疫球蛋白的水解片段在一定条件下,免疫球蛋白分子肽链的某些部分易被蛋白酶水解为不同片段。
木瓜蛋白酶(papain)和胃蛋白酶(pepsin)是最常用的两种Ig蛋白水解酶,并可籍此研究Ig的结构和功能,分离和纯化特定的Ig多肽片段。
(一)木瓜蛋白酶水解片段木瓜蛋白酶水解IgG的部位是在铰链区二硫键连接的2条重链的近N端,可将Ig裂解为两个完全相同的Fab段和一个Fc段(图4−6)。
Fab段即抗原结合片段(fragment antigen binding, Fab),相当于抗体分子的两个臂,由一条完整的轻链和重链的V H和C H1结构域组成。
一个Fab片段为单价,可与抗原结合但不形成凝集反应或沉淀反应; Fc段即可结晶片段(fragment crystallizable,Fc),相当于IgG 的C H2和C H3结构域。
Fc无抗原结合活性,是Ig与效应分子或细胞相互作用的部位。
4−6 图(二)胃蛋白酶水解片段胃蛋白酶作用于铰链区二硫键所连接的两条重链的近C端,水解Ig后可获片段和一些小片段pFc’ (图4−6)。
F(ab’)2是由两个Fab及铰链得一个F(ab’)2片段为双价,可同区组成,由于Ig分子的两个臂仍由二硫键连接,因此F(ab’)2时结合两个抗原表位,故与抗原结合可发生凝集反应和沉淀反应,而且,由于片段保留了结合相应抗原的生物学活性,又避免了Fc段免疫原性可能引F(ab’)2起的副作用,因而被广泛用作生物制品。
如白喉抗毒素、破伤风抗毒素经胃蛋白酶消化后精制提纯的制品,因去掉Fc段而降低发生超敏反应。
胃蛋白酶水解Ig 后所产生的pFc’最终被降解,无生物学作用。
第二节 免疫球蛋白的异质性尽管所有的免疫球蛋白分子在结构上均由V区和C区组成,但不同抗原甚至同一抗原刺激B细胞产生的免疫球蛋白,在其特异性以及类型等诸方面均不尽相同,呈现出明显的异质性(heterogeneity)。
免疫球蛋白的异质性可表现为:不同抗原表位刺激机体所产生的不同类型的免疫球蛋白分子,其识别抗原的特异性不同,其重链类别和轻链型别也有差异;不同抗原表位诱导的同一类型的免疫球蛋白(如IgG),其识别抗原的特异性不同。
导致免疫球蛋白异质性的因素包括内源性因素和外源性因素。
一、免疫球蛋白的类型(一)类(class)在同一种属的所有个体内,Ig重链C区所含抗原表位不同,据此可将重链分为γ、α、μ、δ、ε链5种,与此对应的Ig分为5类,即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。