常见微生物培养基

常见微生物培养基

培养基Medium是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料一般都含有碳水化合物、含氮

物质、无机盐包括微量元素以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素。

按所用原料不同可分为两类应用肉汤、马铃薯汁等天然成分配制的称为天然培养基应用化学药品配成并标

明成分的称为合成培养基或综合培养基。化学试剂中的培养基大多为合成培养基。由于液体培养基不易长期保

管现在均改制成粉末。培养基由于配制的原料不同使用要求不同而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在

受热、吸潮后易被细菌污染或分解变质因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培

养基如组织培养基较长时间的贮存必须放在2~6。C的冰箱内。

常见培养基有

1、细菌培养基

配方一牛肉膏琼脂培养基

牛肉膏0.3克蛋白胨1.0克氯化钠0.5克琼脂 1.5克

水100毫升

在烧杯内加水100毫升放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠用蜡笔在烧杯外作上记号后放在火上加热。待烧杯内各

组分溶解后加入琼脂不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足失水用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH

值到7.27.6,分装在各个试管里加棉花塞用高压蒸汽灭菌30分钟。

配方二马铃薯培养基

取新鲜牛心除去脂肪和血管250克用刀细细剁成肉末后加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。在烧杯上做好

记号煮沸转用文火炖2小时。过滤滤出的肉末干燥处理滤液pH值调到7.5左右。每支试管内加入10毫升

肉汤和少量碎末状的干牛心灭菌备用。

配方三根瘤菌培养基

葡萄糖10克磷酸氢二钾0.5克

碳酸钙3克硫酸镁0.2克

酵母粉0.4克琼脂20克

水1000毫升1%结晶紫溶液1毫升

先把琼脂加水煮沸溶解然后分别加入其他组分搅拌使溶解后分装灭菌备用。

2、放线菌培养基

配方一淀粉琼脂培养基高氏培养基

可溶性淀粉2克硝酸钾0.1克

磷酸氢二钾0.05克氯化钠0.05克

硫酸镁0.05克硫酸亚铁0.001克

琼脂2克水100毫升

先把淀粉放在烧杯里用5毫升水调成糊状后倒入95毫升水搅匀后加入其他药品使它溶解。在烧杯外做好

记号加热到煮沸时加入琼脂不停搅拌待琼脂完全溶解后补足失水。调整pH值到7.27.4分装后灭菌

备用。

配方二面粉琼脂培养基

面粉60克琼脂20克

水1000毫升

把面粉用水调成糊状加水到500毫升放在文火上煮30分钟。另取500毫升水放入琼

脂加热煮沸到溶解后

把两液调匀补充水分调整pH值到7.4分装灭菌备用。

3、真菌培养基

配方一萨市Sabouraud’s培养基

蛋白胨10克琼脂20克

麦芽糖40克水1000毫升

先把蛋白胨、琼脂加水后加热不断搅拌待琼脂溶解后加入40克麦芽糖或葡萄糖搅拌使它溶解

然后分装灭菌备用。

本培养菌是培养许多种类真菌所常用的。

配方二马铃薯糖琼脂培养基

把马铃薯洗净去皮取200克切成小块加水1000毫升煮沸半小时后补足水分。在滤液中加入10克琼脂

煮沸溶解后加糖20克用于培养霉菌的加入蔗糖用于培养酵母菌的加入葡萄糖补足水分分装灭菌备

用。

把这培养基的pH值调到7.27.4配方中的糖如用葡萄糖还可用来培养放线菌和芽孢杆菌。

配方三黄豆芽汁培养基

黄豆芽100克琼脂15克

葡萄糖20克水1000毫升

洗净黄豆芽加水煮沸30分钟。用纱布过滤滤液中加入琼脂加热溶解后放入糖搅拌使它溶解补足水分到

1000毫升分装灭菌备用。

把这培养基的pH值调到7.27.4可用来培养细菌和放线菌。

配方四豌豆琼脂培养基

豌豆80粒琼脂5克

水200毫升

取80粒干豌豆加水煮沸1小时用纱布过滤后在滤液中加入琼脂煮沸到溶解分装灭菌备用。

4、食用菌菌种培养基

配方一马铃薯—蔗糖--琼脂培养基

20%马铃薯煮汁1000毫升

蔗糖20克琼脂18克

把马铃薯洗净去皮后切成小块。称取马铃薯小块200克加水1000毫升煮沸20分钟后过滤。在滤汁中补

足水分到1000毫升即成20%马铃薯煮汁。在马铃薯煮汁中加入琼脂和蔗糖煮沸使它溶解后补足水分分

装灭菌备用。使用该培养基对pH值要求不严格可以不测定。

配方二综合马铃薯培养基

20%马铃薯煮汁1000 毫升

磷酸二氢钾3克硫酸镁1.5克

葡萄糖20克维生素10毫克

琼脂18克

先配制20%马铃薯煮汁方法同上。在煮汁中加入上述各种组分加热溶解后补足水分

调整pH值到6。分装

灭菌备用。该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。

5.烟草的培养基

在植物组织培养时,通过调节IAA和CTK的比值能影响愈伤组织分化出根或芽.CTK/IAA高时,愈伤组织分化芽

CTK/IAA低时,分化根;CTK/IAA比例适中维持愈伤组织不分化

愈伤组织诱导培养基制备

以MS培养基母液为基础,向洁净铝锅中顺序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,铁盐100×母

液20mL ,维生素100×母液20mL,肌醇200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL,配制得MS 培养基后,再加入0.5m

g·L-1的BA8mL,0.5mg·L-1的NAA8mL.然后加入实际配制培养基体积约2/3-3/4的蒸馏水,加入40g蔗糖后搅拌使

其溶化,用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl调整pH值至5.8-6.0.加入14g琼脂,将铝锅置于电炉上,搅拌

加热使琼脂完全溶化,然后用蒸馏水定容至终体积2L,继续加热几分钟使之混合均匀后分装于三角瓶中.

烟草叶片愈伤组织诱导

取一无菌培养皿,用解剖刀切取1-2片无菌苗叶片置于无菌培养皿中,并用解

剖刀将叶片切成2mm2左右的小片,然后将其接种于准备好的培养基上,每瓶接种