实验报告 植物基因组的提取和检测
实验一植物基因组DNA提取
DNA的紫外分光光度计检测
原理：核酸在260nm处有最大吸收峰 蛋白质在280nm处有最大吸收峰 盐和小分子在230nm处有最大吸收峰
OD260/OD280>1.7 OD260/OD230>2.0 1OD260=50 μg/mL DNA
思考题:
1. 如何检测和保证DNA的质量？ 2. 基因组提取过程中注意事项有哪些？
植物基因组DNA的提取
பைடு நூலகம் 一、实验目的： 1. 了解真核生物基因组DNA提取的一般 原理。 2. 掌握DNA提取的方法和步骤。
二、一般原理
提取DNA的一般原理，是将分散好 的真核生物组织细胞在含SDS和蛋白酶K 的溶液中消化分解蛋白质，再用酚：氯仿： 异戊醇抽提的方法去除蛋白质，得到的 DNA经乙醇沉淀方法进一步纯化。
三、材料
玉米叶片
四、设备
移液器，冷冻高速离心机，台式高速离 心机，水浴锅，陶瓷研钵，1.5 mL 离心管。
五、试剂
1. 提取缓冲液： 100mmol/L Tris·Cl，20mmol/L EDTA，500mmol/L NaCl，1.5% SDS。
2. 氯仿：异戊醇：乙醇（80：4：16）。 3. TE缓冲液：10mmol/L Tris·Cl（pH8.0），
7.室温下12000rpm离心5 min。
8.吸取600ul上清液加入等体积的异丙醇，上下颠倒充 分混匀，观察絮状沉淀，后12000rpm离心5min。
9.倒去上清后用70%的乙醇清洗两次，每次在 12000rpm下离心1min。空气中干燥，后加入30ul 的TE（或ddH2O）缓冲液，充分溶解。
10.DNA用于后续实验研究或放于-20 ℃保存备用。
1mmol/L EDTA（pH8.0）。 4. 其他试剂：液氮，异丙醇，无水乙醇，70%乙醇，
实验六 植物组织基因组DNA的提取与分析(SDS法)
7
五、实验结果与分析
1 2 3 4
将凝胶图片打印出 来，需要说明： 1、小组点样孔号； 2、DNA质量分析。
图1 植物组织基因组DNA提取结果
8
六、注意事项
（1）叶片磨得越细越好。
（2）移液器的使用。
（3）由于植物细胞中含有大量的DNA酶，因此， 除在抽提液中加入EDTA抑制酶的活性外，第一 步（研磨）的操作应迅速。
实验六 植物组织中DNA的提取与分析 （SDS法）
温馨提示：实验中-20℃冰浴时，请将样品放
入6309室冰箱冷冻层。
1
一、实验目的
（1）掌握植物组织中DNA提取的原理和方法。 （2）掌握DNA的琼脂糖凝胶电泳检测方法
2
二、实验原理
高浓度的SDS在EDTA存在下裂解细胞，使染色体离析
，蛋白质变性，释放出核酸，PVP与多酚类物质结合形成复
加入600ul氯仿:异戊醇，、DNA电泳检测
（1）1%琼脂糖凝胶：称取0.3g琼脂糖，加入30mL 1×TAE
缓冲液，在微波炉中加热，反复加热、振荡 2-3 次，使琼 脂糖充分融化。待凝胶冷却至60℃左右，倒入插入梳子的
凝胶板中（避免产生气泡），让凝胶自然凝固。
4
四、实验步骤
1、DNA的提取
称取30mg植物幼苗放入研钵中 加入300ul抽提缓冲液+75ul无水乙醇 +20ulβ巯基乙醇，充分研磨 匀浆液全部转入1.5ml离 心管中 用200ul抽提缓冲液冲洗研钵 ，然后倒入离心管中 12000r/min离心10min 上层水相移入另一新离心管 加600ul预冷的异丙醇，混 匀后-20℃静止30min 12000r/min离心10min 弃上清，沉淀用600ul 70%乙醇漂洗 12000r/min离心10min 弃上清，加20μLTE溶解 沉淀，即得DNA溶液
植物基因组dna的提取实验报告
植物基因组dna的提取实验报告植物基因组DNA的提取实验报告。
植物基因组DNA的提取是分子生物学研究中的重要步骤，本实验旨在通过提取植物细胞中的DNA，为后续的PCR扩增、基因克隆、基因组测序等实验打下基础。
本报告将详细介绍植物基因组DNA提取的实验步骤、方法和结果。
实验材料和仪器。
1. 实验材料，植物叶片样品、液氮、细胞裂解缓冲液、蛋白酶K、异丙醇、等离子体膜、异丙醇沉淀液、乙醇、夹板、离心管、PCR管等。
2. 实验仪器，搅拌器、冰箱、冷冻离心机、显微镜、紫外可见分光光度计等。
实验步骤。
1. 取少量植物叶片样品置于液氮中，研磨成细碎的粉末状。
2. 将研磨好的植物叶片样品加入细胞裂解缓冲液，混合均匀后浸泡于65°C水浴中。
3. 加入蛋白酶K，继续65°C水浴裂解。
4. 加入等体积的异丙醇，轻轻摇晃离心管，使溶液混合均匀后放置于室温。
5. 加入等体积的等离子体膜，轻轻摇晃离心管，使溶液混合均匀后放置于室温。
6. 加入等体积的异丙醇沉淀液，轻轻摇晃离心管，使溶液混合均匀后放置于室温。
7. 将混合液转移至PCR管中，加入等体积的乙醇，轻轻摇晃离心管，使溶液混合均匀后放置于室温。
8. 离心沉淀后，弃上清液，加入70%乙醇洗涤。
9. 将洗涤后的DNA溶解于TE缓冲液中，用紫外可见分光光度计检测DNA浓度和纯度。
实验结果。
通过上述步骤，成功提取了植物基因组DNA，并进行了浓度和纯度的检测。
实验结果显示，提取的DNA浓度为120 ng/μl，纯度（A260/A280）为1.8，符合后续实验的要求。
结论。
本实验通过简单、快速、高效的方法成功提取了植物基因组DNA，为后续的分子生物学实验提供了可靠的基础。
通过本实验，我们对植物基因组DNA的提取过程有了更深入的了解，为今后的科研工作积累了宝贵的经验。
总结。
植物基因组DNA的提取是分子生物学研究中的重要步骤，本实验通过简单、快速、高效的方法成功提取了植物基因组DNA，并进行了浓度和纯度的检测。
植物dna提取实验报告
植物dna提取实验报告植物基因组研究已经成为生物学的一个重要分支，特别是在农业生产和生态环境保护方面。
在这个研究领域中，植物DNA提取是基础且必不可少的一步。
本文将详细介绍植物DNA提取实验的过程、步骤和注意事项。
一、实验材料和仪器本实验所需材料和仪器如下：植物样品、溶解缓冲液、提取缓冲液、酒精、异丙醇、洗涤盐溶液、碱性蛋白酶、液氮、离心机、温水浴、电泳仪、比色皿等。
二、实验步骤1. 样品准备首先，选取新鲜植物样品，清洗并研磨成粉末。
为了提高DNA的纯度，应尽量避免样品中的杂质和污染。
2. DNA提取将研磨后的样品加入提取缓冲液中，并加入适量的洗涤盐和碱性蛋白酶，混匀后加入异丙醇，离心分离DNA。
将得到的上清液加入溶解缓冲液中，使用离心机将DNA沉淀至底部。
上清液中的DNA可以通过多次酒精沉淀提高回收率。
3. DNA纯化将得到的DNA溶于TE缓冲液中，使用电泳方法确定DNA含量和质量。
DNA的含量和质量可以通过紫外线吸收光谱测定和琼脂糖凝胶电泳检测。
4. DNA保存DNA保存有两种方式：一种是在-80℃低温下保存，这种方式比较适合需要长期保存的植物DNA；另一种是将DNA溶液保存在干燥的、无污染的环境中，这种方式比较适合短期保存的植物DNA。
三、注意事项1. 在样品制备和提取过程中，应尽量避免污染和杂质的混入，否则会影响DNA的纯度和质量。
2. 在DNA提取和纯化的过程中，应注意洗涤缓冲液、异丙醇等试剂的使用时间和浓度，以免影响DNA的回收率和纯度。
3. 在电泳检测中，应根据植物物种的不同选择适合的电泳参数，以确保DNA检测的准确性和可靠性。
四、结语DNA提取是植物基因组研究的基础，它是了解植物遗传信息和探究植物繁殖机制的必要步骤。
本实验详细介绍了植物DNA提取的方法和注意事项，希望可以为植物基因组研究者提供帮助。
植物组织中dna的提取及鉴定实验报告
植物组织中dna的提取及鉴定实验报告实验目的：1、了解植物组织中DNA的提取和鉴定方法；2、学习DNA凝胶电泳和显色的实验操作；3、掌握实验数据处理和分析方法。
实验原理：DNA提取：DNA提取是从生物体组织中分离出DNA分子的过程。
植物组织的DNA提取主要采用CTAB法，其基本步骤如下：1. 将植物样本冷冻在液氮或在-80℃的冰箱中保存。
2. 取出植物组织并磨碎，用盐水淋洗去表面的杂质。
3. 加入抑制物质，如PVP（聚乙烯吡咯烷酮）和β-多聚糖。
4. 加入CTAB提取缓冲液，破解细胞壁并溶解细胞质。
5. 加入丙酮使DNA沉淀。
6. 安排离心管，离心沉淀。
7. 用乙醇洗涤、重悬DNA。
DNA鉴定：鉴定常用的方法包括电泳、吸光度法、荧光PCR 等。
本实验采用琼脂糖凝胶电泳法，基本步骤如下：1. 制备琼脂糖凝胶。
2. 调制电泳缓冲液。
3. 加载DNA样品。
4. 进行电泳。
5. 显色染色。
实验材料：1、植物样本（如玉米叶片、小麦胚芽等）2、CTAB提取缓冲液（含CTAB，EDTA，NaCl，Tris-HCl等）3、琼脂糖4、电泳缓冲液5、DNA标准品6、DNA分子量标记实验步骤：1. 取少量植物样本，将其用盐水淋洗，除去表面污垢和杂质。
2. 装入离心管并加入CTAB提取缓冲液，放在60℃水浴中孵育20分钟。
3. 加入冷丙酮沉淀DNA，离心5分钟。
4. 加入70%乙醇，洗涤DNA，离心5分钟。
5. 将DNA重悬于1 x TE缓冲液中，放在冰箱中储存。
6. 取一定体积的DNA样品，加入适量电泳缓冲液稀释。
7. 制备含DNA分子量标记的DNA样品，混合后加入琼脂糖凝胶槽中。
8. 加载DNA样品，与分子量标记一起进行琼脂糖凝胶电泳。
9. 进行电泳10-20分钟，直至DNA分子离子迁移完毕。
10. 取出琼脂糖凝胶，进行染色与分析。
实验结果：通过电泳可见DNA样品的带状图谱，观察带状图谱的大小、稠密程度、条带间距和条带的清晰度等特征，进而分析DNA样品的品质和纯度。
生化药物提取实验报告
标题：植物基因组DNA提取实验报告一、实验目的和要求1. 学习并掌握植物基因组DNA的提取原理和方法；2. 了解DNA的纯度与含量测定方法；3. 通过实验，提高动手操作能力和分析问题的能力。
二、实验内容和原理本实验采用酚-氯仿法提取植物基因组DNA，利用DNA与蛋白质等其他成分在不同溶剂中的溶解度差异进行分离纯化。
酚-氯仿法是一种常用的DNA提取方法，具有操作简便、提取效率高等优点。
三、实验材料与试剂1. 植物材料：新鲜植物叶片；2. 试剂：酚、氯仿、异丙醇、氯化钠、TE缓冲液、SDS、RNA酶、DNA标准品等。
四、实验器材与仪器1. 器材：玻璃棒、移液器、离心机、微波炉、紫外分光光度计等；2. 仪器：高速离心机、电泳仪、凝胶成像系统等。
五、操作方法和实验步骤1. 准备提取液：取适量植物材料，加入适量提取液（含SDS、RNA酶），研磨充分；2. 加入酚-氯仿，充分混匀，室温下静置10分钟；3. 4℃、12000r/min离心10分钟，取上清液；4. 加入等体积的异丙醇，混匀，室温下静置2小时；5. 4℃、12000r/min离心10分钟，弃上清液；6. 用70%乙醇洗涤沉淀，4℃、12000r/min离心5分钟；7. 弃上清液，空气干燥沉淀；8. 加入适量TE缓冲液溶解DNA，测定DNA浓度和纯度。
六、实验数据记录和处理1. 记录提取过程中各步骤的观察结果；2. 计算DNA浓度和纯度；3. 对实验数据进行统计分析。
七、实验结果与分析1. 观察结果：在提取过程中，观察到植物材料被充分研磨，酚-氯仿层与水层分离明显；2. DNA浓度：根据紫外分光光度计测定结果，DNA浓度为100ng/μl；3. DNA纯度：根据A260/A280比值，DNA纯度为1.8。
八、讨论、心得1. 本实验成功提取了植物基因组DNA，表明酚-氯仿法是一种有效的DNA提取方法；2. 实验过程中，要注意操作规范，避免DNA降解；3. 在后续实验中，可进一步研究DNA的应用，如基因克隆、基因表达等。
植物基因组的提取实验一
加入95%乙醇后，随着搅拌，溶液由澄清变浑浊， 有白色絮状物出现，并随着搅拌逐渐缠绕在玻璃 榜上。
实验结果
电泳结果如下图所示，条带不够清晰并有拖尾现 象。
结果分析
在加入氯仿/异戊醇后，溶液由绿色变为白绿色，这是 因为氯仿是非极性分子，水是极性分子，当溶液与氯 仿混合时，蛋白质分子之间的水分子被氯仿挤去，使 蛋白质失去水合状态而变性。由于溶液中有变性蛋白 质析出，因而由绿色变为白绿色。溶液中的绿色颗粒 是研磨时未完全破碎的植物组织。
氯仿/异戊醇
95%乙醇
TE溶解
测定吸光度和琼脂糖凝胶电泳
实验流程
电泳加样量如下表所示。
样品
DNA样品 DNA样品
Marker
DNA样品 DNA样品
样品量 /μL 染液量 /μL
5
7.5
10
10
12.5
1
1.5
2
2
2.5
实验结果
第一次加入氯仿/异戊醇后，溶液由绿色变为白绿 色，溶液中有绿色颗粒状固体。
试剂作用
Tris-HCl(pH8.0)提供的pH环境可防止核酸被酸水 解。 EDTA螯合Mg2+和Mn2+可抑制DNase的活性。
试剂作用
巯基乙醇能防止酚类氧化，使酚类容易除去。 NaAc和乙醇用于沉淀DNA。1/10体积的NaAc和 两倍样品体积的乙醇可有效沉淀DNA 。 RNase用于选择性的降解RNA。
植物基因组提取 实验汇报
汇报内容
实验原理 实验流程 实验结果 结果分析 实验总结
实验原理
植物DNA的制备，必须首先注意植物细胞与动 物及细菌细胞的不同：
植物基因检测实验报告
一、实验目的1. 掌握植物基因提取的基本原理和方法。
2. 了解植物基因检测的原理和操作步骤。
3. 通过实验，学会运用PCR技术检测植物基因。
二、实验原理植物基因检测是利用分子生物学技术，对植物基因进行定性或定量分析的方法。
实验中，首先提取植物基因组DNA，然后通过PCR技术扩增目标基因，最后对扩增产物进行检测。
本实验采用CTAB法提取植物基因组DNA，并利用PCR技术检测目标基因。
三、实验材料1. 植物样品：小麦、水稻、玉米等。
2. 试剂：CTAB裂解液、NaCl溶液、Tris-HCl缓冲液、蛋白酶K、SDS、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶、琼脂糖凝胶、电泳缓冲液等。
3. 仪器：高速离心机、PCR仪、凝胶成像系统、显微镜等。
四、实验步骤1. 植物基因组DNA提取（1）取适量植物样品，加入CTAB裂解液，研磨充分。
（2）加入NaCl溶液，混匀。
（3）加入蛋白酶K和SDS，混匀。
（4）65℃水浴1小时，期间每隔10分钟混匀一次。
（5）加入等体积的酚/氯仿，混匀。
（6）12,000 rpm离心15分钟，取上清液。
（7）加入等体积的氯仿，混匀。
（8）12,000 rpm离心15分钟，取上清液。
（9）加入1/10体积的3 mol/L的NaAc溶液和2.5倍体积的无水乙醇，混匀。
（10）-20℃沉淀2小时。
（11）12,000 rpm离心15分钟，弃上清液。
（12）用75%乙醇洗涤沉淀。
（13）12,000 rpm离心5分钟，弃上清液。
（14）将沉淀溶于适量的TE缓冲液中。
2. PCR扩增（1）设计特异性引物，针对目标基因。
（2）配制PCR反应体系，包括模板DNA、引物、dNTPs、Taq DNA聚合酶等。
（3）95℃预变性5分钟。
（4）95℃变性30秒，55℃退火30秒，72℃延伸30秒，共35个循环。
（5）72℃延伸10分钟。
3. PCR产物检测（1）取PCR产物，加入适量的琼脂糖凝胶电泳缓冲液。
实验植物DNA提取及检测
结果解读
实验结果：成功提取出植物DNA 数据分析：DNA质量、浓度和纯度分析 结果解释：DNA提取效率、影响因素及实验结论 实验结论：成功实现植物DNA的提取与检测
实验结论
结论总结
实验过程中需要注意实验条 件和操作细节，避免DNA降 解或污染
实验植物DNA提取及检测成 功，得到较为完整的DNA片 段
将更加简便高效
THANK YOU
汇报人：XX
实验植物DNA提取通 常采用研磨法或酶解 法，其中研磨法是通 过机械研磨将植物细 胞破碎，释放出细胞 核中的DNA；酶解法 则是利用酶制剂将植 物细胞壁和细胞膜分 解，使DNA得以释放。
在提取过程中，需要 使用多种化学试剂， 如洗涤剂、盐离子、 有机溶剂等，以去除 杂质、分离出较纯的
DNA。
提取出来的DNA需 要进行质量检测，确 保其质量和纯度满足
后续实验的要求。
实验材料
实验植物：选取适当的植物样本 仪器：离心机、PCR仪等 试剂：植物基因组DNA提取试剂盒、缓冲液、乙醇等 实验器具：移液器、吸头、离心管等
实验步骤
准备实验材料：植物样本、离心管、移液 器、DNA提取试剂等
DNA沉淀：在上清液中加入适量的乙醇， 使其中的DNA沉淀下来
植物样本处理：将植物样本剪碎，加入 适量的缓冲液，用研磨棒研磨成匀浆
清洗DNA：将沉淀的DNA用70%的乙 醇清洗，去除杂质
离心分离：将研磨后的匀浆进行离心分离， 干燥：将清洗后的DNA晾干，溶解于适
收集上清液
量的水中
注意事项
实验前确保植物材 料无菌，避免污染
使用新鲜、健康的 植物材料，以提高 DNA提取质量
实验操作过程中保 持低温，防止 DNA降解
植物基因组dna的提取实验报告
植物基因组dna的提取实验报告植物基因组DNA的提取实验报告引言：DNA提取是生物学研究中的基础实验之一，它可以帮助我们了解植物的遗传信息和基因组结构。
本实验旨在通过提取植物基因组DNA，探索DNA的提取方法以及其在植物基因研究中的应用。
材料与方法：1. 实验材料：新鲜植物叶片、细碎器、提取液（含有细胞裂解酶、蛋白酶K和盐酸）、离心管、离心机、冰浴装置、乙醇、磷酸盐缓冲液等。
2. 实验步骤：- 步骤一：取一片新鲜植物叶片，用细碎器将其细碎成细小颗粒。
- 步骤二：将细碎的植物组织转移到离心管中，并加入适量的提取液。
- 步骤三：将离心管放入冰浴装置中，在4℃下反应30分钟。
- 步骤四：离心管中的混合液离心10分钟，将上清液转移到新的离心管中。
- 步骤五：加入等体积的冷乙醇，轻轻摇晃离心管，使DNA沉淀。
- 步骤六：用微量移液器将DNA沉淀转移到新的离心管中。
- 步骤七：加入适量的磷酸盐缓冲液溶解DNA。
结果与讨论：通过上述实验步骤，我们成功地从新鲜植物叶片中提取到了DNA。
下面将对实验结果进行讨论。
首先，实验中使用的提取液含有细胞裂解酶和蛋白酶K。
细胞裂解酶可以破坏细胞膜，使细胞内容物释放出来，而蛋白酶K则能降解蛋白质，避免其对DNA的影响。
这两种酶的作用协同进行，为DNA的提取提供了基础。
其次，实验中的冰浴装置和离心机的使用是为了维持低温和分离混合液中的固体和液体。
低温可以减缓酶的活性，防止DNA的降解。
离心则可以将细胞碎片和其他杂质沉淀下来，使上清液中富含DNA。
最后，实验中的乙醇是用来沉淀DNA的。
加入乙醇后，DNA会与乙醇结合形成白色沉淀物。
通过轻轻摇晃离心管，可以帮助DNA更好地沉淀。
而且，乙醇的加入还能帮助去除杂质，使得提取到的DNA更纯净。
DNA的提取是植物基因研究的重要步骤之一。
通过提取到的DNA，我们可以进行一系列的遗传学研究，如PCR扩增、DNA测序等。
此外，DNA的提取还可以用于植物种质资源的鉴定和保护，以及基因工程的应用等领域。
植物基因组的提取实验报告
植物基因组的提取实验报告一、实验目的本次实验旨在掌握从植物组织中提取高质量基因组 DNA 的方法，为后续的分子生物学实验如 PCR 扩增、基因克隆和测序等提供纯净的DNA 模板。
二、实验原理植物细胞包含细胞壁、细胞膜、细胞质和细胞核等结构，基因组DNA 存在于细胞核中。
提取植物基因组 DNA 的基本原理是通过物理和化学方法破碎细胞，使 DNA 释放出来，然后去除蛋白质、多糖、多酚等杂质，最后通过沉淀和洗涤获得纯净的 DNA。
在实验中，通常使用液氮研磨植物组织来破碎细胞壁，然后使用裂解液（如 CTAB 或 SDS 等）使细胞膜破裂，释放出 DNA 和其他细胞成分。
接着，加入蛋白酶 K 消化蛋白质，用酚/氯仿抽提去除蛋白质，再用乙醇或异丙醇沉淀DNA，最后用70%乙醇洗涤去除盐离子等杂质。
三、实验材料与试剂（一）实验材料新鲜的植物叶片（如菠菜、豌豆等）（二）实验试剂1、 CTAB 提取缓冲液（2% CTAB，14 M NaCl，20 mM EDTA，100 mM TrisHCl pH 80，02% β巯基乙醇）2、氯仿/异戊醇（24:1）3、异丙醇4、 70%乙醇5、 TE 缓冲液（10 mM TrisHCl pH 80，1 mM EDTA）6、蛋白酶 K（20 mg/ml）（三）实验仪器1、研钵和研杵2、离心机3、移液器4、恒温水浴锅5、紫外分光光度计6、电泳仪和琼脂糖凝胶四、实验步骤（一）材料预处理选取新鲜、健康的植物叶片，用蒸馏水洗净，吸干表面水分，剪成小块备用。
（二）细胞破碎与 DNA 释放1、在研钵中加入适量液氮，将预处理好的植物叶片迅速放入研钵中，研磨成粉末状。
2、将研磨好的粉末迅速转移至预冷的离心管中，加入预热至 65℃的 CTAB 提取缓冲液，轻轻颠倒混匀，65℃水浴保温 30 60 分钟，期间每隔 10 15 分钟轻轻颠倒混匀一次。
（三）去除蛋白质和杂质1、加入等体积的氯仿/异戊醇（24:1），轻轻颠倒混匀 10 15 分钟，使其充分乳化。
植物基因组DNA的提取及其定性、定量分析研究报告
《分子生物学》实验报告实验一植物基因组DNA地提取及其定性、定量分析【实验目地】通过本实验学习利用CTAB法从植物组织中提取DNA并通过琼脂糖凝胶电泳及紫外分光光度法对DNA进行定性定量分析.b5E2R。
【实验原理】CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)是一种阳离子型去污剂，可溶解细胞膜，在高离子强度下(大于0.7 M NaCl)，与蛋白和中性多糖形成复合物沉淀出来.利用液氮对植物组织进行研磨，从而破碎细胞.然后加入CTAB缓冲液将DNA溶解出来，再用酚、氯仿抽提地方法去除蛋白，最后经乙醇沉淀得到DNA.p1Ean。
琼脂糖凝胶电泳是分离和纯化DNA片段地常用技术.把DNA样品加入到一块包含电解质地多孔支持介质(琼脂糖凝胶)地样品孔中，并置于静电场上.DNA分子在高于等电点地pH溶液中带负电荷，在电场中向正极移动.DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应.由于糖-磷酸骨架在结构上地重复性质，相同数量地双链DNA几乎具有等量地净电荷，因此，在一定地电场强度下，DNA分子地迁移速度取决于分子筛效应，即DNA分子本身地大小和构型.DNA分子地迁移速度与相对分子质量地对数值成反比关系，分子量小地DNA分子比分子量大地DNA分子迁移速率快，迁移距离远，由此得到分离.凝胶电泳也可以分离相对分子质量相同，但构型不同地DNA分子，超螺旋质粒DNA(cccDNA)泳动最快，其次为线状DNA(L DNA)，最慢地为开环质粒DNA(ocDNA).DXDiT。
核酸分子(DNA或RNA)由于含有嘌呤环和嘧啶环地共轭双键，在260 nm波长处有特异地紫外吸收峰，其吸收强度与核酸地浓度成正比，这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基础.1 OD260相当于dsDNA 50 μg/mL，ssDNA 33 μg/mL和ssRNA 40 μg/mL.可以此来计算核酸样品地浓度.紫外分光光度法不但能确定核酸地浓度，还可通过测定260 nm和280 nm地紫外线吸收值地比值(A260/A280)估计核酸地纯度，若DNA地A260/A280比值高于2.0，则可能有RNA污染，低于1.8则有蛋白质污染.RTCrp。
植物基因组dna的提取实验报告
植物基因组dna的提取实验报告
实验报告：
实验目的：
本实验旨在从植物样品中提取基因组DNA，为后续的分子生物学研究打下基础。
实验原理：
基因组DNA提取是利用化学或物理方法将细胞壁和细胞膜溶解，使基因组DNA裸露并获得。
提取过程包括浸泡、分离、洗涤、溶解等步骤。
具体步骤如下：
取所需植物材料，洗净、切碎样品；
加入提取缓冲液（Tris-HCl pH 8.0，EDTA，SDS，NaCl），使样品充分混合，破坏细胞膜和核膜；
加入蛋白酶K，分解蛋白质，避免DNA被酶水解；
加入异丙醇或氯仿使蛋白质、核酸等组分分层，去除上层杂质；
加入70%乙醇将DNA沉淀，并进行清洗和干燥；
加入TE缓冲液（Tris-HCl pH 8.0, EDTA）溶解DNA。
实验步骤：
取植物样品（番茄、酸枣等）粉碎，加入4ml提取缓冲液，放入离心管中；
加入1μl蛋白酶K，轻轻颠倒离心管使样品混合均匀；
培养30分钟于65°C恒温器内；
加入1ml氯仿并振荡10次后，离心5分钟，将上层液体转移至新的离心管中；
加入1ml异丙醇，并离心5分钟，将上层液体转移至新的离心管中；
加入1ml70%乙醇，并离心5分钟，将上层液体倒掉，留下沉淀；
加入1ml去离子水，将沉淀溶解，得到DNA提取液。
实验结果：
经过以上步骤，成功从植物样品中提取到基因组DNA。
通过分光光度法检测DNA浓度为200 ng/μl，纯度可达到A260/A280=1.8。
结论：
本实验成功从植物样品中提取到基因组DNA，提取效果良好，为后续的分子生物学实验打下基础。
植物基因提取实验报告
一、实验目的1. 掌握植物基因提取的基本原理和方法；2. 熟悉实验操作流程，提高实验技能；3. 学习DNA的定性、定量分析技术。
二、实验原理植物基因提取是分子生物学研究的重要基础，主要步骤包括：细胞破碎、DNA提取、DNA纯化、DNA定量等。
本实验采用CTAB法从植物组织中提取DNA，并通过琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度法对DNA进行定量分析。
CTAB法利用十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）作为阳离子去污剂，可以裂解细胞膜，使DNA与蛋白质、多糖等杂质分离。
在CTAB存在下，DNA与蛋白质、多糖等杂质形成复合物，经酚/氯仿抽提去除杂质，最后通过乙醇沉淀得到纯化的DNA。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜植物叶片（如菠菜、水稻等）、液氮、无水乙醇、氯仿、异戊醇、CTAB缓冲液、EDTA、NaCl、琼脂糖、DNA marker、电泳仪、紫外分光光度计等。
2. 实验仪器：研钵、离心机、微量移液器、电热恒温水浴锅、凝胶成像系统等。
四、实验方法1. 植物组织研磨：将新鲜植物叶片放入研钵中，加入适量液氮，研磨成粉末。
2. DNA提取：将研磨好的植物粉末转移至离心管中，加入CTAB缓冲液、EDTA、NaCl等试剂，充分混匀后，加入氯仿-异戊醇混合液，混匀后静置5分钟，离心分离上清液。
3. DNA纯化：将上清液转移至新离心管中，加入等体积的酚/氯仿混合液，混匀后静置5分钟，离心分离上清液。
4. DNA沉淀：将上清液转移至新离心管中，加入2倍体积的无水乙醇，混匀后静置1小时，离心收集沉淀。
5. DNA溶解：将沉淀用适量去离子水溶解，即为提取的植物DNA。
6. DNA定量：取适量DNA溶液，利用紫外分光光度计测定其在260nm和280nm处的吸光度值，计算DNA浓度。
7. 琼脂糖凝胶电泳：取适量DNA溶液，加入适量的上样缓冲液，进行琼脂糖凝胶电泳，观察DNA条带。
五、实验结果与分析1. 紫外分光光度法测定DNA浓度：根据260nm和280nm处的吸光度值，计算DNA 浓度为50.0ng/μl。
实验一_植物DNA提取及检测
实验一_植物DNA提取及检测实验一：植物 DNA 提取及检测在生物学的领域中，对植物 DNA 的提取和检测是一项至关重要的实验技术。
通过这一过程，我们能够深入了解植物的遗传信息，为植物的分类、进化研究、基因功能分析以及生物技术应用等提供坚实的基础。
一、实验目的本次实验的主要目的是掌握从植物组织中提取高质量DNA 的方法，并通过特定的检测手段来验证所提取 DNA 的纯度和完整性。
二、实验原理DNA 存在于植物细胞的细胞核、线粒体和叶绿体中。
提取植物DNA 的基本原理是利用细胞裂解液破坏细胞壁和细胞膜，使细胞内的物质释放出来，然后通过一系列的化学和物理方法去除杂质，如蛋白质、多糖、多酚等，最终获得纯净的 DNA 。
在检测 DNA 时，通常采用紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳法。
紫外分光光度法是基于 DNA 在 260nm 处有特征吸收峰，通过测定其吸光度值来计算 DNA 的浓度和纯度。
而琼脂糖凝胶电泳法则是根据DNA 分子在电场中的迁移速率与其分子量大小成反比的原理，来观察DNA 的完整性和分子量大小。
三、实验材料与设备（一）实验材料新鲜的植物叶片（如菠菜、豌豆等）。
（二）实验试剂1、提取液：包含 TrisHCl、EDTA、NaCl 等成分。
2、蛋白酶 K ：用于消化蛋白质。
3、氯仿/异戊醇（24:1）：用于去除蛋白质和酚类物质。
4、无水乙醇：用于沉淀 DNA 。
5、 70%乙醇：用于洗涤 DNA 沉淀。
6、 RNA 酶：用于去除 RNA 。
7、琼脂糖：用于制备凝胶。
8、 TAE 缓冲液：电泳时使用的缓冲液。
9、 DNA 上样缓冲液：用于增加样品密度，便于上样。
（三）实验设备1、研钵和研杵。
2、离心机。
3、恒温水浴锅。
4、紫外分光光度计。
5、电泳仪和电泳槽。
6、移液器。
四、实验步骤（一）植物 DNA 的提取1、称取约 2g 新鲜的植物叶片，洗净擦干后剪碎放入研钵中，加入液氮迅速研磨成粉末状。
2、将粉末转移至 15ml 离心管中，加入 5ml 提取液，充分混匀，65℃水浴保温 30 分钟，期间不时轻轻颠倒离心管。
植物基因组提取及DNA的浓度测定
植物基因组提取及DNA的浓度测定植物基因组提取及DNA的浓度测定一、实验目的1、掌握用CTAB法提取植物总DNA的方法和基本原理。
2、学习利用紫外分光光度计法测定DNA溶液的浓度。
二、实验原理三、实验步骤1、2%CTAB抽提缓冲液在65摄氏度水浴中预热，与此同时，用剪刀、镊子取8片约0.2g的子叶于研钵中，放在冰水研至匀浆状。
2、用移液器向研钵中加入700微升2%CTAB抽提缓冲液，轻轻搅拌。
然后将研磨液倒入1.5ml的灭菌离心管中，再置于65摄氏度的恒温水浴锅中，每隔10min轻轻摇动，40min后取出。
3、冷却2min后，用移液器吸700微升的氯仿/异戊醇到离心管中，剧烈振荡2~3min，使两者混合均匀。
4、与另一组同学的离心管平衡，对称放入离心机中，10000r/min离心10min，与此同时，将60微升的预冷的异丙醇加入另一个新的灭菌离心管中。
5、移液器轻轻地吸取上清液（约600微升），转入含有异戊醇的离心管内，将离心管慢慢上下摇动30s，使异丙醇与水层充分混合至能看到DNA絮状物。
6、同样，与另一组同学的离心管平衡，对称放入离心机中，10000r/min离心1min，然后立即倒掉液体，注意勿将白色DNA沉淀倒出。
7、将离心管倒立于滤纸上1min，直立离心管，加入720微升的75%的预冷的乙醇及80微升5mol/L的乙醇钠，轻轻转动，用手指弹管尖，使沉淀与管底的DNA块状物浮游于液体中。
放置10min，使DNA块状物的不纯物溶解。
8、与另一组同学的平衡，对称放入离心机，10000r/min离心1min，倒掉液体，再加入800微升75%乙醇，将DNA再洗2min。
9、与另一组同学的平衡，对称放入离心机，10000r/min离心30s，立即倒掉液体，将离心管倒立于滤纸上，数分钟后，直立离心管，干燥DNA。
10、加入50微升0.5XTE(含RNase)缓冲液，使DNA溶解，置于37摄氏度恒温箱中约1.5h，消化RNA。
植物组织遗传物质的提取与检测实验报告(一)
植物组织遗传物质的提取与检测实验报告(一)植物组织遗传物质的提取与检测实验报告实验目的1.理解DNA提取原理和方法；2.掌握植物组织DNA的提取方法；3.学习PCR扩增技术，并进行基因检测。
实验材料1.植物组织样本（如叶片、花瓣等）；2.CTAB提取液：2% CTAB，1.4M NaCl，100mM Tris-HCl（pH 8.0），20mM EDTA；3.LiCl；4.大肠杆菌管（Eppendorf管）；5.PCR试剂盒（如Taq PCR MasterMix等）；6.扩增素；7.DNA marker。
实验步骤DNA提取1.取约0.5克植物组织样本，用PBS洗涤后，切成小碎片；2.将样本碎片加入含有CTAB提取液的大肠杆菌管中，室温下异位研磨5min；3.将研磨过程中产生的提取液转移至50ml离心管中，加入等体积的Tris-ClNaOH pH8.0稀释至2%CTAB和LiCl浓度小于1mol/L，70℃水浴30min；4.高速离心10min，水洗沉淀物，将沉淀物用75%乙醇洗涤，离心获得DNA；5.用TE稀释DNA溶液至合适浓度（约20ng/ul），即DNA提取完成。
PCR检测1.取2ul DNA模板，加入PCR试剂盒中；2.加入扩增素（如正确的引物和酶），混匀；3.进行PCR扩增反应，设置相应的程序和温度；4.扩增结束后，取适量扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳分析；5.根据DNA Marker，可粗略估计扩增片段大小。
实验结果经过PCR扩增后，可得到植物组织DNA的扩增产物。
在琼脂糖凝胶电泳分析中，根据PCR扩增产物的大小和DNA Marker比较，可得出大致的扩增目标片段大小。
实验结论本实验成功提取了植物组织中的DNA，并进行了PCR扩增检测。
该实验可应用于植物基因的分析和研究中。
实验注意事项1.操作过程中需要严格遵守实验室安全操作规程和标准；2.使用试剂需要遵守试剂说明书，注意保存条件和有效期；3.相关仪器操作需要专业人员培训后操作；4.DNA提取过程中需要避免污染，尽可能保证操作环境的清洁。
生化提取实验报告
一、实验名称：植物基因组DNA提取二、实验日期：2023年X月X日三、实验地点：生物实验室四、实验人员：XXX，XXX，XXX五、实验目的：1. 掌握植物基因组DNA的提取原理和方法；2. 了解琼脂糖凝胶电泳检测核酸的原理和操作；3. 学习对电泳检测基因组DNA结果的初步分析；4. 学习紫外吸收法测定核酸基本原理和方法；5. 掌握紫外吸收法测定基因组DNA纯度与含量的方法。
六、实验原理：植物基因组DNA的提取主要基于以下原理：- 利用十六烷基三乙基溴化铵（CTAB）和十二烷基硫酸钠（SDS）等离子型表面活性剂溶解细胞膜和核膜蛋白，使核蛋白解聚，从而使DNA得以游离出来；- 加入苯酚和氯仿等有机溶剂，能使蛋白质变性，并使抽提液分相，核酸（DNA、RNA）水溶性很强，经离心后即可从抽提液中除去细胞碎片和大部分蛋白质；- 上清液中加入无水乙醇使DNA沉淀，沉淀DNA溶于TE溶液中，即得纯化的DNA。
七、实验材料与试剂：- 植物样本（如菠菜叶片）- CTAB试剂- NaCl溶液- Tris-HCl缓冲液- EDTA溶液- 氯仿/异戊醇混合液- 95%乙醇- 无水乙醇- 琼脂糖凝胶- DNA分子量标准- 紫外分光光度计- 电泳仪- 离心机- 移液器- 试管、离心管、玻璃棒等实验器材八、实验器材与仪器：- 离心机- 电泳仪- 紫外分光光度计- 移液器- 玻璃棒- 试管、离心管- 琼脂糖凝胶电泳槽九、实验步骤：1. 植物样本的制备：取适量植物样本，用液氮研磨成粉末；2. DNA提取：将研磨好的样本加入CTAB试剂和NaCl溶液，混匀后加入氯仿/异戊醇混合液，充分振荡，离心取上清液；3. DNA纯化：在上清液中加入95%乙醇，混匀后静置，离心取沉淀；4. DNA溶解：将沉淀溶于TE溶液中；5. DNA浓度测定：用紫外分光光度计测定DNA溶液的吸光度，计算DNA浓度；6. 琼脂糖凝胶电泳：将DNA分子量标准与提取的DNA进行琼脂糖凝胶电泳，观察DNA条带；7. 结果分析：根据电泳结果和DNA浓度，分析提取的DNA纯度和含量。
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四川大学实验报告
题目：的提取与检测植物基因组DNA一、实验目的
1.了解真核生物基因组DNA提取的一般原理；
2.掌握基因组DNA提取的方法和步骤。
二、实验原理
1.在液氮中对植物组织进行研磨，破碎细胞；
2.SDS等离子型表面活性剂能溶解膜蛋白而破坏细胞膜，使核蛋白解聚，从而使DNA游离出来；
3.苯酚和氯仿等有机溶剂能使蛋白质变性，并使抽提液分相，因核酸水溶性很强，经离心后即可从抽提液中除去细胞碎片和大部分蛋白质；
4.上清液中加入异丙醇使DNA沉淀，沉淀DNA溶于TE缓冲液中，即得植物基因组DNA溶；
5.DNA的琼脂糖凝胶电泳鉴定：带电荷的物质，在电场中的趋向运动称为电泳。
DNA的琼脂糖凝胶电泳可以分离长度为200bp至近50kb的DNA分子。
DNA的迁移率（U）的对数与凝胶浓度（T）之间存在反平行线性关系。
因此，要有效地分离不同大小的DNA片段，选用适当的琼脂糖凝胶浓度是非常重要的。
三、实验材料
1.设备
移液器，台式高速离心机，水浴锅，陶瓷研钵，1.5ml离心管
2.材料
植物幼嫩叶片
3.试剂
（1）细胞提取液：100mmol/L Tris-HCl, pH8.0, 5mmol/L EDTA, 500mmol/L NaCl, 1.25%
SDS，1%β-巯基乙醇（去除酚类）
（2）氯仿:异戊醇（24:1）
（3）其它试剂：液氮、无水乙醇、 TE缓冲液、异丙醇、洗涤缓冲液
四、方法和步骤
0C水浴（金属浴）中加热备用；μ500L细胞提取液于651、取2、研钵用液氮预冷，新鲜植物叶片（自来水清洗，蒸馏水冲洗干），去除叶脉，剪成细条状，置于研钵中研磨成粉末状（越细越好）；
0C预热的细胞提取液中，迅速摇匀，65500、取0.1g粉末（大约两勺半）转移至
μL3水浴（金属浴）中保温30min，10min左右温和颠倒混匀一次；
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四川大学实验报告题目：的提取与检测植物基因组DNA4、从水浴（金属浴）中取出离心管，加等体积(约500μL)氯仿/异戊醇
（24:1），室温下10000rpm×10min；
5.将上清液转移到另一1.5mL离心管中（使用的枪头用剪刀剪成大口），加等2/3体积的异丙醇，轻轻混匀，静置1min,使核酸沉淀下来，12000r/min× 5min，
倒掉上清液；
6、加入1ml洗涤缓冲液，轻轻转动离心管使核酸沉淀悬浮起来，静置
5min,12000r/min× 2min,去除上清液，再加入1ml洗涤缓冲液，轻轻转动离心管使核酸沉淀悬浮起来，放置5min;
7、12000r/min× 10min后，倒去上清液，用小滤纸条将管壁上多余的水分吸掉，室温静置干燥；
8、干燥后，加入20μLTE缓冲液，溶解DNA，做好标记；
9、取5μL溶液，0.7%琼脂糖凝胶电泳检测DNA大小和质量。
MarkerDNA为DL15000。
五、注意事项
（一）提取DNA的过程：
1.DNA的二级结构和双链易受多种因素（如强酸、强碱、加热、低盐浓度、有机溶剂、酰胺类、尿素等）的影响引起双链解开，即“变性”，因此抽提时避免使用变性的条件；
2.抑制内外源Dnase的活力。
Dnase就像一把刀，它能把大分子的DNA切成碎片，所以要加以杜绝，现可以通过多种途径来做到这一点：a.低温操作；b.调节pH,使偏碱2+）Mg,加螯合剂（EDTA）除去酶的辅助因子（pH8.0);c.（抽提液中加表明活性剂；d.使酶活性丧失；
3.防止物理因素降解。
如温度太高或机械张力剪切等，DNA分子特别大，极易被机械张力拉断，甚至在细管中稍急一些的流动也会使DNA断裂，所以在抽提过程中要特别注意这一点，操作过程要尽量简便、温和、减少搅拌次数，也不要剧烈摇动；
4.植物的次生代谢物（主要是胞质内的多酚类或色素类化合物）对核酸提取有干扰作用。
因此，一般进可能选幼嫩的、代谢旺盛的新生组织作为提取DNA的材料，这是因为幼嫩的新生组织次生代谢物较少，DNA含量高，切易于破碎，植物材料最好是新鲜的。
（二）琼脂糖凝胶电泳检测基因组DNA：
1.EB为诱变剂、致癌物，接触凝胶必须戴手套操作；
2.将溶液加入样品槽时，勿划破或戳破加样孔，勿带入气泡；
3.紫外线对眼睛有害，将胶块置于紫外灯下观察时，带上防护镜或眼睛，或隔着玻璃或有机玻璃观察。
六、实验结果与分析
1.植物基因组DNA提取结果：
页 2 第
Marker:TM DL1500150010007505002501000 250
普通灯光下的观察结果1 实验结果分析：图、个为715000bp、10000bp泳道的I.Marker带： MMarker与预期结果相符合，出现条带，但是出现拖带现象；、、7500bp、5000bp2500bp、1000bp250bp个条带，均出现拖带现象，其中第二条带和第II.泳道1号3：植物基因组DNA跑出了三条带拖带较严重；第一条带位于点样孔下方，亮度较小，可能是提取过程中出现的杂质；表明提取的较成功；DNA是提取的植物基因组，亮度较小，15000bp第二条带位于附近， 250bp第三条带位于的下方，亮度大，是提取过程中的杂质；
页 3第紫外灯下的观察结果2 图
四川大学实验报告题目：的提取与检测植物基因组DNA七、讨论
1.实验方法比较：
由于植物中的次生代谢产物-多酚类化合物可介导DNA降解，而多糖的污染也是影响植物核酸纯度最常见的问题，这些多糖能抑制限制酶、连接酶及DNA
聚合酶等分子生物学酶类的生物活性。
传统的CTAB-DNA提取法步骤多，较繁琐，DNA产率低，而且由于酚很难完全去除，容易影响以后的酶切等工作的效率。
SDS 法操作简单，温和，也可提取到较高分子量DNA，但所得产物含糖类杂志较多，这将直接影响DNA的限制性核酸内切酶酶切效果。
由于植物细胞匀浆含有多种酶类（尤其是氧化酶类）对DNA的抽提产生不利影响，在抽提缓冲液中需加入抗氧化剂或强还原剂（如巯基乙醇）以降低这些酶类的活性。
2.植物研磨操作，一定是研磨，不是用力捶！提取基因组过程有很多操作需要温和的进行，考虑一下它们的目的。
答：温和操作是防止基因组DNA的断裂。
3.在植物提取DNA实验和第一次质粒提取中为什么用到的电泳胶浓度不一样？答：因为提取的目的DNA大小不一样，跑胶适合的浓度就不一样。
植物基因组DNA分子量大适合用浓度较低的胶。
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