HPLC中常用的检测器
不同液相检测器的区别
不同液相检测器的区别公司标准化编码 [QQX96QT-XQQB89Q8-NQQJ6Q8-MQM9N]高效液相色谱仪的常用检测器有哪几种，有什么区别高效液相色谱仪常用检测器种类及分析检测器的作用是将柱流出物中样品组成和含量的变化转化为可供检测的信号，常用检测器有紫外吸收、荧光、示差折光、化学发光等。
1.紫外可见吸收检测器(ultraviolet_visibledetector,UVD)紫外可见吸收检测器(UVD)是HPLC中应用最广泛的检测器之一，几乎所有的液相色谱仪都配有这种检测器。
其特点是灵敏度较高，线性范围宽，噪声低，适用于梯度洗脱，对强吸收物质检测限可达1ng，检测后不破坏样品，可用于制备，并能与任何检测器串联使用。
紫外可见检测器的工作原理与结构同一般分光光度计相似，实际上就是装有流动地的紫外可见光度计。
(1)紫外吸收检测器紫外吸收检测器常用氘灯作光源，氘灯则发射出紫外-可见区范围的连续波长，并安装一个光栅型单色器，其波长选择范围宽(190nm-800nm)。
它有两个流通池，一个作参比，一个作测量用，光源发出的紫外光照射到流通池上，若两流通池都通过纯的均匀溶剂，则它们在紫外波长下几乎无吸收，光电管上接受到的辐射强度相等，无信号输出。
当组分进入测量池时，吸收一定的紫外光，使两光电管接受到的辐射强度不等，这时有信号输出，输出信号大小与组分浓度有关。
局限：流动相的选择受到一定限制，即具有一定紫外吸收的溶剂不能做流动相，每种溶剂都有截止波长，当小于该截止波长的紫外光通过溶剂时，溶剂的透光率降至10%以下，因此，紫外吸收检测器的工作波长不能小于溶剂的截止波长。
(2)光电二极管阵列检测器(photodiodearraydetector，PDAD)也称快速扫描紫外可见分光检测器，是一种新型的光吸收式检测器。
它采用光电二极管阵列作为检测元件，构成多通道并行工作，同时检测由光栅分光，再入射到阵列式接收器上的全部波长的光信号，然后对二极管阵列快速扫描采集数据，得到吸收值(A)是保留时间(tR)和波长(l)函数的三维色谱光谱图。
高效液相色谱常用的检测器的适应范围及工作原理
高效液相色谱常用的检测器的适应范围及工作原理高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography, HPLC）是现代化学分析技术中最常用的一种分离和分析方法之一，其核心部分是检测器。
液相色谱检测器的选择主要与分析物的化学性质以及检测要求有关。
本文将介绍常见的高效液相色谱检测器及其适应范围和工作原理。
一、紫外检测器紫外检测器是液相色谱最基本的检测器之一，也是最常用的一种检测器。
利用紫外线在分子中的吸收特性，可对分析物进行检测和定量分析。
该检测器的灵敏度较高，检测精度较高，且对多种化合物均有良好的适应性。
其适应范围主要包括多种天然产物、非天然产物、药物、生物大分子等。
二、荧光检测器荧光检测器是另一种常见的液相色谱检测器。
该检测器通过激发分析物所带有的荧光原子或分子，从而检测和识别分析物，并完成定量检测。
荧光检测器具有高灵敏度、高选择性、分析速度快等特点。
其适应范围主要包括药物、染料等。
三、电化学检测器电化学检测器可以测量液相色谱中化合物之间的电化学反应以及氧化还原反应和电导率的变化。
该检测器对含有化合物的样品可以提供非常高的灵敏度和精度。
电化学检测器特别适用于具有化学反应性的化合物的分析。
其适应范围主要包括有机化学物质、生化物质、食品、化妆品等领域。
四、质谱检测器质谱检测器作为高效液相色谱技术的升级版，可以在分子级别上对样品进行分析。
该检测器的主要作用是在分离后的化合物中，继续通过质谱仪进行定性和定量的分析。
质谱检测器适用范围广泛，可以用于药物、生物物质、食品、环境样品等领域的分析和检测。
五、散射检测器散射检测器可以检测非常低浓度的化合物，该检测器适用于具有高分子物质的分析。
由于高分子物质的分析需要非常低的检测量，因此散射检测器成为一种最好的分析工具。
散射检测器适用范围主要包括聚合物、羟基酸、脱氧核糖核酸等。
综合来看，高效液相色谱常用的检测器适应范围较广，能够应对多种化学物质的检测需求。
hplc检测器种类及特点
hplc检测器种类及特点HPLC检测器种类及特点HPLC（高效液相色谱法）是一种常用的分离和分析技术，广泛应用于各个领域的实验室。
HPLC系统由多个部分组成，其中检测器是其中之一，用于监测样品在色谱柱中的分离和识别。
不同类型的HPLC检测器具有不同的特点和适用范围，本文将详细介绍一些主要的HPLC检测器种类及其特点。
紫外检测器（UV检测器）：紫外检测器是使用紫外线（UV）光源照射样品，并测量样品吸收/透射的紫外光强度的一种检测器。
这种检测器适用于大多数化学物质，因为大多数有机化合物和某些无机化合物（如金属离子）对紫外线具有吸收能力。
紫外检测器的工作原理是通过比较进样溶液和参比溶液对紫外光的吸收量来确定样品的存在和浓度。
UV检测器具有极高的检测灵敏度和广泛的线性范围，且对各种溶剂和化合物的稳定性较好。
然而，该检测器不能提供化合物的结构信息，因为它只是根据吸收强度进行检测。
荧光检测器：荧光检测器是在分离柱后的样品流中使用荧光探针，通过测量样品产生的荧光强度来检测化合物。
这种检测器适用于大多数有荧光性质的化合物，包括天然化合物、药物、色素等。
荧光检测器的工作原理是在激发光源（通常是紫外线）的作用下，分子从低能级跃迁到高能级，然后放射出荧光光子。
荧光检测器具有较高的检测灵敏度和特异性，且具有多通道检测的能力，可以同时测定多个组分。
然而，荧光检测器对环境和溶剂的要求比较高，并且需要选择合适的激发波长和荧光波长。
电化学检测器：电化学检测器是使用电化学技术进行检测的一种检测器。
电化学检测器可以测量样品中的电子转移反应、电荷转移反应、离子传递等电化学过程。
常见的电化学检测器有电导检测器（CD）和安培检测器（AD）。
电导检测器是通过电荷传递反应量测样品离子浓度的一种方法，适用于带电离子和非离子。
安培检测器则是通过测量样品中电流强度来识别化合物的一种方法，适用于具有可测电流的化合物。
电化学检测器具有非常高的选择性和灵敏度，能够检测到微量的化合物，但它们对电极的选择和维护要求较高。
高效液相色谱仪的五大组成部分
高效液相色谱仪的五大组成部分
高效液相色谱仪（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）的五大组成部分包括：
1. 液相分离部分：液相分离部分由色谱柱和液相泵组成。
色谱柱是分离和分析样品的地方，其中填充有固定相，可以根据其化学特性选择不同的色谱柱。
液相泵则通过压力将试样和溶剂混合并推送进入色谱柱。
2. 采样和进样系统：采样和进样系统用于将待分析的样品引入到色谱柱中。
这包括样品的准备、进样量的控制和溶剂的混合等操作。
3. 检测器：检测器用于检测分离出的化合物，并将其转化为可观察的信号。
常见的HPLC检测器包括紫外-可见吸收光谱检
测器、荧光检测器、折射率检测器和质谱检测器等。
4. 数据处理系统：数据处理系统用于记录和分析检测到的信号，并进行数据的整理、处理和解释。
这些系统可以包括计算机软件和数据处理设备。
5. 溶剂系统：溶剂系统由溶剂储罐、混合器、进样泵和排泄器等组成，用于准备溶剂，并将其送入色谱柱中。
溶剂系统需要保持恒定的压力和流量，以确保色谱分离的准确性和重现性。
HPLC中常用的检测器
能会掩盖前期脱洗的色谱峰
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注意事项: a: 洗脱液的组成一定要恒定，不能使用梯度洗脱。 b: 不能使检测池带压工作，在与其它检测器串联使用时应放在最
后。 c: 流速要恒定，泵的流速波动要小于0.5％，使用往复泵时要用阻
尼装置。 d: 温度要恒定，恒温控制要达±10-4℃,在使用时预热时间要充足
，否则基线漂移十分严重 。
通用型检测器 约有80％的分析样品具有紫外吸收,可以使用这种检测器检测。
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优点: a: 灵敏度高，检测下限约为 10-6 g／ml b: 线性范围广 C: 对温度和流速不敏感，适于进行梯度洗脱
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限制: a: 没有紫外吸收的物质不能检测 b: 应尽可能选择在检测波长下没有背景吸收的流动相 (限制了一些 一些截止波长在200~300nm之间的良好溶剂的使用 )
阵列的每一单元有一只光敏二极管和一只与之并联的电容器． 光电二极管紫外检测器n个单元同时检测，从而使采样时间减 少到普通的１／Ｎ．使用２１１个二极管的阵列元件，最快时，每 １０ms可完成一次测量．每秒中可以收集２００００～１００００ ０个数据．
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与普通UV-VIS检测器不同之处:
a: 普通UV-VIS检测器是先用单色器分光，只让特定波长的光进入 流动池。 而二极管阵列UV-VIS检测器是先让所有波长的光都通过流动池，然 后通过一系列分光技术，使所有波长的光在接受器上被检测.
率乘以各自的摩尔浓度之和． 溶有样品的流动相与流动相本身之间折射率之差就表示样品
在流动相中的浓度．原则上，凡是与流动相折射指数有差别的样品 都可以测定它的浓度．
通用型检测器 (浓度检测器 ) 检测限可达１０－６ ～１０－７g/ml
液相检测器原理
液相检测器原理
液相检测器是一种用于分析化学样品中溶解物的工具，它利用液相色谱法（HPLC）或凝胶电泳法等方法进行分析。
液相检测器的工作原理是利用化学或物理性质来检测溶解物的存在和浓度。
以下是几种常见的液相检测器原理：
1. 紫外-可见光检测器（UV-Vis Detector）：该检测器利用样品中溶解物对紫外-可见光的吸收特性进行检测。
当光线通过样品时，溶解物会吸收特定波长的光，产生吸收峰。
通过测量吸收光的强度，可以确定溶解物的存在和浓度。
2. 荧光检测器（Fluorescence Detector）：该检测器利用溶解物的荧光性质进行检测。
在样品中加入荧光染料或特定的荧光标记物后，当激发光照射样品时，溶解物会发射荧光。
通过测量发射荧光的强度或波长，可以确定溶解物的存在和浓度。
3. 振动式试管检测器（Refractive Index Detector）：该检测器利用溶解物对折射率的影响进行检测。
当溶解物与载体溶剂相互作用时，会使溶剂的折射率发生变化。
通过测量样品和纯溶剂间的折射率差异，可以确定溶解物的存在和浓度。
4. 电导检测器（Conductivity Detector）：该检测器利用溶解物对电流的导电性进行检测。
溶解物的存在会改变电解液的电导率，从而产生电流信号。
通过测量电流信号的强度，可以确定溶解物的存在和浓度。
液相检测器根据不同的原理可以选择合适的检测器进行分析，以实现对溶解物的准确检测和分析。
高效液相色谱仪组成及检测器种类
高效液相色谱仪组成及检测器种类HPLC主要由四个核心组成部分：溶剂系统、进样系统、分离柱和检测器。
下面将详细介绍HPLC的组成部分及常见的检测器种类。
1.溶剂系统：溶剂系统是HPLC的基础部分，主要由溶剂瓶、溶剂泵和混合器组成。
溶剂系统的主要功能是提供流动相，使待分离物质在分离柱中迅速传递，并保持色谱的稳定。
常见的溶剂选择有水、有机溶剂（如甲醇、乙醇）和酸碱溶液等。
2.进样系统：进样系统主要由进样装置和进样口组成。
进样系统的主要功能是将待测样品溶液精确地进样到分离柱中，进行分离分析。
常见的进样方式有手动进样、自动进样和微量进样等。
3.分离柱：分离柱是HPLC用于分离待测物质的核心部分，其主要作用是将混合物中的化合物按照其化学性质进行分离。
分离柱通常由不同类型的填料填充而成，包括反相色谱柱、离子交换色谱柱、凝胶过滤柱等。
根据填料粒径的不同，分离柱可以分为常规柱和超高效柱。
4.检测器：检测器是HPLC中用于检测分离柱中物质浓度的装置。
根据不同的原理和应用要求，常见的HPLC检测器包括：(1) 紫外可见检测器（UV-Vis Detector）：紫外可见检测器是HPLC常用的检测器之一，主要通过测量样品在紫外或可见光区域的吸收来确定成分的浓度。
该检测器具有灵敏度高、通用性强、操作简单等特点。
(2) 荧光检测器（Fluorescence Detector）：荧光检测器主要通过测量分析物在激发光源作用下发射出的荧光信号来确定成分的浓度。
该检测器具有灵敏度高、选择性好、检测限低等特点，广泛应用于药物分析、环境分析、食品安全等领域。
(3) 折射率检测器（Refractive Index Detector）：折射率检测器主要通过测量分析物引起的溶剂折射率变化来确定成分的浓度。
该检测器适用于不含色团的非极性物质的检测，具有灵敏度较低、通用性强的特点。
(4) 质谱检测器（Mass Spectrometer）：质谱检测器将柱前的液相分离与质谱技术相结合，可实现化学物质的分离和结构表征。
HPLC检测器
检测器⑴紫外光度检测器它的作用原理是基于被分析试样组分对特定波长紫外光的选择性吸收，组分浓度与吸光度的关系遵守比尔定律。
最常用的检测器，应用最广，对大部分有机化合物有响应。
特点：a.灵敏度高：其最小检测量10-9g·mL-1,故即使对紫外光吸收很弱的物质，也可以检测；b. 线性范围宽；（比尔定律）c. 流通池可做的很小(1mm × 10mm ，容积8μL)；d. 对流动相的流速和温度变化不敏感可用于梯度洗脱；e. 波长可选，易于操作：如，使用装有流通池的可见紫外分光光度计（可变波长检测器）。
缺点：对紫外光完全不吸收的试样不能检测；同时溶剂的选择受到限制。
⑵光电二极管阵列检测器紫外检测器的重要进展；阵列由1024个光电二极管阵列，每个光电二极管宽仅50μm，各检测一窄段波长。
如图所示，在检测器中，光源发出的紫外或可见光通过液相色谱流通池，在此流动相中的各个组分进行特征吸收，然后通过狭缝，进入单色其进行分光，最后由光电二极管阵列检测，得到各个组分的吸收信号。
经计算机快速处理，得三维立体谱图。
⑶荧光检测器荧光检测器是一种高灵敏度、高选择性检测器。
对多环芳烃，维生素B、黄曲霉素、卟啉类化合物、农药、药物、氨基酸、甾类化合物等有响应。
荧光检测器的结构及工作原理和荧光光度计相似。
⑷差示折光检测器除紫外检测器之外应用最多的检测器。
差示折光检测器是借连续测定流通池中溶液折射率的方法来测定试样浓度的检测器。
溶液的折射率是纯溶剂（流动相）和纯溶质（试样）折射率乘以各物质的浓度之和。
因此溶有试样的流动相和纯流动相之间折射率之差表示试样在流动相中的浓度。
⑸电导检测器其作用原理是根据物质在某些介质中电离后所产生电导变化来测定电离物质含量。
色谱分析期末考试题库及答案
色谱分析期末考试题库及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 色谱分析中，固定相是：A. 流动相B. 柱子C. 样品D. 检测器答案：B2. 色谱图上，峰的宽度与下列哪项因素有关？A. 柱长B. 柱径C. 流动相流速D. 所有选项答案：D3. 高效液相色谱（HPLC）中，常用的检测器是：A. 紫外检测器B. 质谱检测器C. 火焰光度检测器D. 所有选项答案：D4. 下列哪项是色谱分析中常见的分离模式？A. 离子交换B. 反相C. 凝胶渗透D. 所有选项5. 色谱分析中，样品的分离效果与下列哪项无关？A. 固定相的选择B. 流动相的组成C. 柱温D. 样品的浓度答案：D6. 色谱分析中，样品的洗脱顺序与下列哪项无关？A. 样品与固定相的相互作用B. 样品与流动相的相互作用C. 样品的分子量D. 样品的沸点答案：D7. 色谱分析中，峰面积与下列哪项无关？A. 样品量B. 检测器的灵敏度C. 流动相的流速D. 样品的分子量答案：D8. 色谱分析中，柱效与下列哪项有关？A. 柱长B. 柱径C. 柱内填料的粒径D. 所有选项答案：D9. 色谱分析中，样品的分离度与下列哪项有关？B. 样品的保留时间C. 样品的洗脱时间D. 所有选项答案：D10. 色谱分析中，样品的保留时间与下列哪项有关？A. 样品与固定相的相互作用B. 流动相的流速C. 柱温D. 所有选项答案：D二、填空题（每题2分，共20分）1. 色谱分析中，样品的分离是通过_________和_________的相互作用实现的。
答案：样品固定相2. 色谱分析中，提高柱效的方法之一是减小_________。
答案：填料粒径3. 在反相色谱中，固定相通常是_________。
答案：非极性4. 色谱分析中，样品的保留时间是指样品从进样到_________的时间。
答案：检测器5. 色谱分析中，样品的分离度可以通过改变_________来优化。
答案：流动相组成6. 色谱分析中，样品的检测可以通过_________来实现。
高效液相色谱仪组成及检测器种类
高效液相色谱仪组成及检测器种类引言高效液相色谱仪（High Performance Liquid Chromatography, HPLC）是一种广泛应用于分离与分析化学领域的仪器。
它采用液体为流动相，将样品溶解在溶剂中，通过样品与固定相之间的相互作用进行分离。
本文将介绍高效液相色谱仪的组成以及常用的检测器种类。
高效液相色谱仪的组成液相输送系统高效液相色谱仪的核心部分是液相输送系统。
它包括溶剂管理系统、进样装置和柱温控制装置。
1.溶剂管理系统：溶剂管理系统主要由溶剂储存瓶、溶剂泵和混合器组成。
溶剂储存瓶用于存放溶剂，溶剂泵负责将溶剂从储存瓶中抽取并送入进样装置。
2.进样装置：进样装置用于将待测样品注入色谱柱中。
常见的进样方式有自动进样器和手动进样器。
自动进样器通常能够实现精确的样品量注入，并具有较高的重复性。
3.柱温控制装置：柱温控制装置用于控制色谱柱的温度，提供恒温环境以保证分析结果的准确性和重现性。
色谱柱色谱柱是高效液相色谱仪中起到分离样品的重要组成部分。
根据不同的应用需求和样品特性，可选择不同类型的色谱柱，如反相柱、离子交换柱、凝胶柱等。
1.反相柱：反相柱是最常用的色谱柱类型，广泛应用于多种领域。
它以疏水性为基础，用于分离非极性或有机溶剂溶解的样品。
2.离子交换柱：离子交换柱主要用于分离离子化合物，根据样品离子性选择阴离子或阳离子交换柱。
3.凝胶柱：凝胶柱适用于分离生物大分子，如蛋白质、核酸等。
凝胶柱内部常含有凝胶材料，通过凝胶间的空隙大小来实现不同分子量的分离。
柱后检测系统柱后检测系统是高效液相色谱仪中的另一个重要组成部分，它用于检测分离后的样品，并将数据转化为电信号输出。
常见的柱后检测系统包括：1.紫外可见检测器（UV-Vis Detector）：紫外可见检测器利用样品在紫外或可见光区域的吸收特性进行检测。
它具有广泛线性范围和较高的检测灵敏度。
紫外可见检测器适用于大多数有色或紫外可见吸收的标准分析物。
高效液相色谱常用的检测器的适应范围及工作原理
高效液相色谱常用的检测器的适应范围及工作原理
高效液相色谱（HPLC）是一种常用的色谱分析技术，具有分离效率高、检测灵敏度高、样品处理简单等优点。
在HPLC中，检测器是
至关重要的组成部分，它能够将分离出的化合物转化为可测量的信号。
本文将介绍HPLC常用的检测器的适应范围及工作原理。
1. 紫外检测器
紫外检测器是HPLC中最常用的检测器之一，它适用于检测含有
芳香环的化合物。
紫外检测器的工作原理是，分离出的化合物通过紫外光的吸收而产生信号。
紫外检测器的检测波长通常为200-400 nm，其中254 nm和280 nm是最常用的波长。
2. 荧光检测器
荧光检测器适用于具有荧光性质的化合物。
荧光检测器的工作原理是，分离出的化合物被激发产生荧光信号，荧光信号经过荧光检测器的荧光探测器检测后输出。
荧光检测器的灵敏度高，但有些化合物可能需要通过前处理方法使其具有荧光性质。
3. 电化学检测器
电化学检测器适用于检测具有电化学反应性质的化合物，如氨基酸、糖类、药物等。
电化学检测器的工作原理是，化合物在电极上发生氧化还原反应，产生电流信号，通过电流信号来检测化合物的含量。
4. 蒸发光散射检测器
蒸发光散射检测器适用于检测具有低紫外吸收、低荧光性质的化合物，如脂肪酸、磷脂等。
蒸发光散射检测器的工作原理是，通过蒸
发将化合物转化为气态，再通过光散射检测器检测出化合物的含量。
总之，不同类型的检测器适用于不同类型的化合物，选择合适的检测器能够提高HPLC的分析效率和准确性。
高效液相色谱检测器的种类及特点
一、概述高效液相色谱（HPLC）是一种常用的分析化学技术，广泛应用于化学、生物、医药和食品等领域。
在HPLC技术中，检测器是至关重要的一部分，它负责检测样品中化合物的浓度，并将其转化为可读的信号输出。
本文将对HPLC检测器的种类及特点进行详细介绍。
二、紫外-可见光（UV-Vis）检测器1. 原理：UV-Vis检测器利用化合物中的紫外或可见光吸收特性来检测化合物。
2. 特点：1）广泛适用：UV-Vis检测器适用于大多数有机化合物和许多无机化合物的分析。
2）灵敏度高：对于绝大多数有机化合物，UV-Vis检测器的灵敏度较高。
3）简单易用：UV-Vis检测器的操作相对简单，适合实验室常规分析。
三、荧光检测器1. 原理：荧光检测器利用化合物在受激光照射下产生荧光的特性来检测化合物。
2. 特点：1）高灵敏度：荧光检测器对于有荧光活性的化合物具有极高的灵敏度。
2）特异性强：由于荧光本身具有较高的特异性，荧光检测器可以用于分析中对混杂物的忽略。
3）应用广泛：在生物学、医学和环境领域，荧光检测器得到了广泛的应用。
四、蒸发光散射检测器1. 原理：蒸发光散射检测器通过样品与蒸发后的溶剂之间的差异来检测化合物。
2. 特点：1）通用性强：蒸发光散射检测器对于大多数非吸收性化合物都具有较好的检测能力。
2）无需色谱柱：相比于其他检测器，蒸发光散射检测器可以不需要色谱柱，适用于高分子化合物的检测。
3）灵敏度较低：蒸发光散射检测器的灵敏度通常较低，需要较高浓度的样品才能进行检测。
五、质谱检测器1. 原理：质谱检测器通过将化合物转化为离子，并对离子进行质量分析来检测化合物。
2. 特点：1）高分辨率：质谱检测器具有极高的分辨率，可以准确确定化合物的质荷比。
2）特异性强：质谱检测器对于复杂混合物的成分分析具有很强的特异性。
3）操作复杂：相比于其他检测器，质谱检测器的操作和维护较为复杂，需要专业的操作人员。
六、综述HPLC检测器种类繁多，每种检测器都有其特定的适用场景和优势。
高效液相色谱-检测器介绍
择性，可检测能产生荧光的化合物。某些不发荧光的 物质可通过化学衍生法生成荧光衍生物，适用于痕量 分析。
➢2、原理与结构：由光源发出的光，经激发 光单色器后，得到所需波长的激发光。通过检 测池的激发光部分被样品吸收，并使其被激发 后发射出荧光。在经选择发射波长的单色器分 光后，单一波长的发射光被送至光电检测器进 行检测。由于吸光强度与激发光强度成正比， 光源应具有高强度、连续、平滑、稳定的辐射 输出功能。
该检测器是一种新型检测器。
➢1、特点：快速、灵敏的新型检测，最 小检出量可达10-12g/ml, 设备简单、价廉、 线性范围宽等。
➢2、原理与结构：某些物质在常温下进行 化学反应，生成处于激发态势反应中间体 或反应产物，当它们从激发态返回基态时， 就发射出光子。物质激发态的能量是来自 化学反应。当分离组分从色谱柱中洗脱出 来后，立即与适当的化学发光试剂混合， 引起化学反应发光，通过光电倍增管将光 信号变成电信号，进行检测。其光强度与 该物质的浓度成正比。
结构图
氘灯
发射单色器 光电倍增管
激发单色器
样品流通池
荧光检测器
光二极管（UV）
检 测 器
光 源
滤光片
滤光片 检测室
常见荧光检测器光路图
➢3、局限：只能适合于能产生荧光的物 质（或通过衍生化能产生荧光的物质） 的检测。其线性范围不如紫外检测器宽。
示差折光检测器
(differential refractive Index detector， RID)
流动相的选择受到一定限制，紫外吸收大的溶剂不 能做流动相。每种溶剂都有截止波长，当小于该截 止波长的紫外光通过溶剂时，溶剂的透光率降至 10%以下，因此，流动相的截止波长不能大于紫外 吸收检测器的工作波长。
高效液相色谱——电喷雾式检测器的校准方法
高效液相色谱——电喷雾式检测器的校准方法1. 引言高效液相色谱（HPLC）作为一种重要的分析方法，在科研和工业领域有着广泛的应用。
而在HPLC分析中，检测器起着至关重要的作用，其准确性直接影响到实验结果的可靠性。
电喷雾式检测器作为HPLC 中常用的一种检测器，其校准方法对于保证分析结果的准确性至关重要。
2. 电喷雾式检测器的工作原理电喷雾式检测器是利用毛细管内的溶液在高压电场的作用下被喷成细小的液滴，形成雾状物，再通过干燥后使得待检化合物得以赴电离，最后通过质谱仪进行检测。
其工作原理复杂，所以对其进行校准尤为重要。
3. 校准方法的基本步骤a. 校准前的准备工作：检查仪器的各个部件是否完好，保证流动相的纯度和稳定性。
b. 内部标定：使用标准物质进行内部标定，并通过仪器的自动调节功能使其达到最佳状态。
c. 校准曲线的绘制：使用不同浓度的标准溶液进行测试，绘制出校准曲线。
d. 稳定性评估：检测器在长时间运行后的性能是否稳定，需要进行稳定性评估，确保实验结果的准确性和可靠性。
4. 校准方法的注意事项a. 校准曲线的选择：根据分析物的特性选择合适的校准曲线类型，可采用线性、二次、对数等不同类型的校准曲线。
b. 校准标准物质的选择：校准物质的纯度和稳定性对校准结果有着重要影响，因此需要选择高纯度和稳定性的标准物质。
c. 校准条件的选择：在校准过程中需要考虑到流动相的选择、流速的设定、温度的控制等因素，以保证校准的准确性和可重复性。
5. 个人观点和理解电喷雾式检测器的校准方法十分重要，它不仅仅是为了保证仪器的准确性和稳定性，更是为了保证分析结果的准确性和可靠性。
在实际操作中，需要严格按照校准方法的步骤进行操作，并且需要耐心细致地进行校准曲线的绘制和稳定性的评估。
只有这样，才能保证实验结果的高质量和可信度。
6. 总结电喷雾式检测器的校准方法是HPLC分析中至关重要的一环。
通过内部标定、校准曲线的绘制和稳定性评估等步骤，可以保证检测器的准确性和稳定性。
HPLC几种最常用的主要检测器(四)
HPLC几种最常用的主要检测器（四）(4)目前用法最多的几种非挑选性(通用性)HPLC检测器。
①示差折光检测器(RID)。
示差折光检测器在20年前是一种用法最多的非挑选性检测器；它是一种利用物质的折射率变幻，来做定性或定量测量的仪器。
图2-66是一种典型的示差折光检测器。
1-微调器；2-粗调器；3-池棱镜；4-参比溶液；5-样品；6-检测池；7-透镜；8-光检测器(光接收器) 图2-66 反射式折光仪光路图②蒸发光散射检测器(ELSD)。
ELSD 是目前HPLC中用法最广泛的一种非挑选性的通用型检测器。
我国2010版药典中十分重视它的应用。
我国上海通微公司近几年推出了一种UM5000型ELSD，已经销售100多台，深受广阔用户欢迎。
下面容易介绍UM5000型ELSD的有关状况。
a．国产UM 5000型ELSD工作原理：UM 5000型ELSD是我国“＋五”国家科技攻关方案重大项目研发成绩，是我国首台国产化的ELSD，其性能指标达到国际同类产品先进水平。
它可检测挥发性低于流淌相的任何样品，而不需要样品含有发色基团。
ELSD的敏捷度比示差折光检测器高，对温度变幻不敏感，基线稳定，适合干梯度洗脱液相色谱联用。
UM 5000型ELSD的形状2-67所示。
图2-67 UM 5000型ELSD的形状图雾化原理为液体流淌相在载气压力的作用下在雾化室内改变成细小的液滴，从而使溶剂更易于蒸发。
液滴的大小和匀称性是保证检测器的敏捷度和重复性的重要因素。
UM5000型蒸发光散射检测器，通过对气压和温度的精确控制，确保在雾化室内形成一个较窄的液滴尺寸分布，使液滴蒸发所需要的温度大大降低。
蒸发原理为载气把液滴从雾化室运输到漂移管举行蒸发。
在漂移管中，溶剂被除去，留下微粒或纯溶质的小滴。
UM5000型ELSD采纳低温蒸发模式，维持了颗粒的匀称性，对半挥发性物质和热敏性化合物同样具有较好的敏捷度。
检测：光源采纳650nm激光，溶质颗粒从漂移管出来后进入光检测池，并穿过激光光束。
HPLC中常用的检测器分有如下几种
HPLC中常用的检测器分有如下几种，紫外吸收检测器（UVD）、二极管阵列检测器（PDAD）、荧光检测器（FLD）、示差折光检测器（RID）、蒸发光散射检测器（ELSD）、质谱检测器（MSD）等。
下面就分别介绍简单介绍一下。
光学类检测器1、紫外吸收检测器（UVD）是目前HPLC中应用最广泛的检测器。
它的主要特点是灵敏度高，线性范围宽，对流速和温度变化不敏感，可用于梯度洗脱。
它要求被检测样品组分有紫外吸收，属于选择性检测器。
2、二极管阵列检测器（PDAD）是20世纪80年代才出现的一种光学多通道检测器，它可以看作是UVD的一个分支。
在对每个洗脱组分进行光谱扫描，经计算机处理后，得到光谱和色谱结合的三维图谱。
其中吸收光谱用于定性（确证是否是单一纯物质），色谱用于定量，常用于复杂样品（如生物样品、中草药）的定性定量分析。
3、荧光检测器（FLD）同样属于选择性检测器，其灵敏度在目前常用的HPLC 检测器中是最高的，应用也较多，仅次于UVD。
它适用于能激发荧光的化合物。
很多与生命科学有关的物质，如氨基酸、胺类、维生素、甾族化合物及某些代谢药物都可以用荧光法检测。
荧光检测器在生物样品痕量分析中很有用，尤其在用荧光衍生后，可以检测很微量的氨基酸和肽。
通用型检测器1、示差折光检测器（RID）是一种通用型检测器，只要被测组分与洗脱液的折光指数有差别就可使用。
生命科学中常遇到各类糖类化合物，没有紫外吸收，一般常用示差折光检测器。
它的通用性比UVD广，但灵敏度要低，对温度变化敏感，并与梯度洗脱不相容，因而限制了它的使用。
2、蒸发光散射检测器（ELSD）也是一种通用型的检测器，可检测挥发性低于流动相的任何样品，而不需要样品含有发色基团。
ELSD的响应值与样品的质量成正比，因而能用于测定样品的纯度或者检测未知物。
ELSD灵敏度比RID高，对温度变化不敏感，基线稳定，可用于梯度洗脱。
现在ELSD已被广泛应用于碳水化合物、类脂、脂肪酸和氨基酸、药物以及聚合物等的检测。
hplc名词解释
hplc名词解释HPLC，全称高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography），是一种常用的分离与分析技术，属于色谱技术的一种。
HPLC利用液相在固定相上的分离原理，通过样品在高压下通过柱床的流动，在固定相的作用下，根据样品中化学物质的相互作用、分离效果和保留时间等，实现样品的分离与定量分析。
HPLC的名词解释如下：1. 高效液相色谱仪（High Performance Liquid Chromatograph）：用于HPLC分析的主要仪器，包括进样器、泵、柱、检测器等部分，用于实现样品的分离和分析。
2. 压力容器（Pressure Vessel）：用于提供高压流动液相的容器，通常是由不锈钢制成，能够耐受较高的压力。
3. 柱床（Column Bed）：用于样品分离的部分，可由固定相填充或涂覆在柱内壁上，根据样品的性质和分离需求选择不同的柱床材料和固定相类型。
4. 保留时间（Retention Time）：溶质在柱中停留的时间，是进行分离和定量分析的重要参数。
5. 梯度洗脱（Gradient Elution）：在分离过程中改变流动液相的成分或浓度，以提高分离效果和减少分析时间的方法。
6. 反相色谱（Reverse Phase Chromatography）：常用的HPLC分离模式之一，使用非极性固定相和极性溶剂作为流动相，根据样品溶质的极性差异进行分离。
7. UV检测器（UV Detector）：常用的HPLC检测器之一，利用溶质吸收紫外光的特性来测定样品的浓度。
8. 标准曲线（Standard Curve）：通过一系列已知浓度的标准溶液制备的曲线，用于根据待测样品的响应值来计算其浓度。
紫外检测器在hplc的应用原理
紫外检测器在HPLC的应用原理1. 紫外检测器简介紫外检测器（UV 检测器）是一种常用于高效液相色谱（HPLC）系统中的检测器。
它利用样品在紫外光谱范围内的吸收性质来进行分析和检测，具有高灵敏度和广泛的应用范围。
2. 紫外检测器的工作原理紫外检测器的工作原理基于样品分子吸收紫外光的特性。
当通过样品的光线通过紫外检测器时，如果样品中的化合物能够吸收紫外光，那么光线的强度就会减弱。
紫外检测器测量的是光线的强度差异，这个差异反映了样品中吸收紫外光的化合物的浓度。
3. 紫外检测器的主要组成部分紫外检测器由光源、进样器、流动池、光学系统和检测器五个主要组成部分组成。
3.1 光源光源通常使用氘灯和钨灯，两者之间可以根据不同的波长要求进行切换。
氘灯主要用于紫外光区域，而钨灯主要用于可见光区域。
3.2 进样器进样器的作用是将样品传输到流动池中。
进样器通常采用自动进样器或手动进样器。
3.3 流动池流动池是分离技术中样品流经的区域。
通常使用光学透明的材料制成，以确保光线可以通过样品。
3.4 光学系统光学系统由一组镜片、滤光片和光电二极管（或光电倍增管）组成。
它们的作用是收集和转换经过流动池的光线。
3.5 检测器检测器负责转化光信号为电信号。
光电二极管和光电倍增管是常用的检测器类型。
4. 紫外检测器的优势和限制4.1 优势•高灵敏度：紫外检测器对很多化合物的检测灵敏度非常高。
•宽波长范围：紫外检测器可以在200至400 nm的波长范围内进行分析。
•通用性：紫外检测器适用于大多数溶剂和化合物类型。
4.2 限制•有些化合物在紫外光谱范围内没有吸收峰，因此无法使用紫外检测器进行分析。
•紫外检测器对溶剂的质量要求较高，溶剂中的杂质可能会引起背景信号的变化。
•检测器的线性范围有限，超出线性范围的样品可能无法准确测量。
5. 紫外检测器在HPLC分析中的应用紫外检测器在HPLC分析中广泛应用，特别是在药物分析、环境监测和化学分析等领域中。
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些截止波长在200~300nm之间的良好溶剂的使用 )
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2:荧光检测器
• 原理:
• 物质的分子或原子经光照射后，有些电子被激发至较高的能 级，这些电子从高能级 跃至低能级时，物 质会发出比入射光 波长较 长的光，这种光称为荧光。荧光检测器就是在样品的激发波长处检测发射光的
• 例子：花生酱提取物中衡量黄曲霉素的荧光检测法
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• 缺点: • a:适用范围有一定的局限性 –只适用于有荧光基团＆衍生化之后有
荧光基团的化合物 • b: 定量分析时线性范围较窄
• 它适合于 稠环芳烃、氨基酸、胺类、维生素、蛋 白质等荧光物质的 测定
• １９７６年Ｎilano等人首先报道这种检测器，它不必停留就可获
得“在流”色谱的全部光谱信息，可跟随色谱峰扫描，用来观察色 谱柱流出组分的每个瞬间的动态光谱吸收图．
• 由于比其他快速扫描检测器具有结构简单，工作可靠，性能好 的优点，自一问世，就得到迅速发展．
通用型检测器 • 约有80％的分析样品具有紫外吸收,可以使用这种检测器检测。
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• 优点:
• a: 灵敏度高，检测下限约为 10-6 g／ml • b: 线性范围广 • C: 对温度和流速不敏感，适于进行梯度洗脱
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• 限制:
• b:普通UV-VIS检测器只能得到二维的谱图,而DAD可以得到三维图谱.
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应用
• a: 色谱峰纯度检查
•
比较光谱法
•
吸收比法
•
双波长法
• b: 色谱峰鉴定
•
与标准品或标准光谱比较
•
正常紫外光谱的比较
Байду номын сангаас
• 三维色谱能提供更多全面的信息。
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1:紫外-可见光（UV-VIS）检测器
• 工作原理：
• 基于Lambert-Beer定律，即被测组分对紫外光或可见光具有吸收， 且吸收强度与组分浓度成正比
•
A=lg Io/I=εbc
• 其中A为吸光度（消光值）,Io为入射光强，I为透射光强，ε为样品 的吸光度（消光系数）b为光程长，c为样品浓度。
一:目前HPLC中常用的检测器
• 检测器是一套分离分析设备的关键.
• 目前有两种基本类型的检测器: • 一类是溶质性检测器，它仅对被分离组分的物理或化学特性有响
应，属于这类检测器的有紫外、荧光、电化学检测器等。 • 另一类是总体检测器，它对试样和洗脱液总的物理或化学性质有
响应，属于这类检测器的有示差折光，蒸发光散射，电导检测器等。
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3:二极管阵列检测器（diode-array detector, DAD）
• 原理:
• 光电二极管阵列（或CCD阵列，硅靶摄像管等）作为检测元件的 UV-VIS检测器。它可构成多通道并行工作，同时检测由光栅分光， 再入射到阵列式接受器上的全部波长的信号，然后，对二极管阵列 快速扫描采集数据，得到的是时间、光强度和波长的三维谱图。
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与普通UV-VIS检测器不同之处:
• a: 普通UV-VIS检测器是先用单色器分光，只让特定波长的光进入流 动池。
• 而二极管阵列UV-VIS检测器是先让所有波长的光都通过流动池，然 后通过一系列分光技术，使所有波长的光在接受器上被检测.
后补加适量电解质溶液，这并不影响分离效率）
• 现在在药物分析领域里面已经没有其他方法常用了.
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5:示差折光检测器 (RID)
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4:电化学检测器
• 理论基础 • a: 法拉第第一定律 • 在电介过程中，电极上起反应的物质量 • （W）与通过电介池的电量（Q）成正比。
• b: 法拉第第二定律 • 各种不同的电介质溶液中，通过相同的电量 • 时，电极上析出的电极产物的当量数相同。 • （96487库仑）
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• 结构：
• 核心是二极管阵列元件，它由一系列光敏二极管蚀刻在硅片上 组成．一般，每个阵列又２００～１０２４个光电二极管组成，他 们的光敏范围是２００～６００nm，每只二极管的分辨率是１～２ nm，光电二极管越多，分辨率越高．
• 阵列的每一单元有一只光敏二极管和一只与之并联的电容器．
• 光电二极管紫外检测器n个单元同时检测，从而使采样时间减少 到普通的１／Ｎ．使用２１１个二极管的阵列元件，最快时，每１ ０ms可完成一次测量．每秒中可以收集２００００～１０００００ 个数据．
在垂直的方向上进行检 测
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• 优点: • a: 灵敏度非常高(灵敏度在目前常用的HPLC检测器中最高 )，其检出
限可达10-9g/ml，(比紫外检测器高2—3个数量级，适合于痕量分析 ) • b: 可以用于梯度洗脱 • c: 对仪器的稳定性（如温度和压力的稳定性）依赖较小 • d: 选择性好，优于紫外
强弱.
• 在样品浓度足够低时,下，荧光强度与如射光强度,量子效率及样品浓度成线形关系。
•
荧光强度: F=I0 εφ L C
• 荧光检测器是一种选择性检测器
• 不到20%的物质使用这种检测手段,许多药物如喹诺酮类药物采用这种检测方法.
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• 优点: • • a:专用型检测器,具很强的专属性。 • b:线性范围可达106，宽广 • c:高灵敏度 10-12g/l，可与荧光相比，
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• 缺点:
• a: 只能测定具有电解活性（电氧化一还原性）物质 • b: 要求洗脱液具有导电性（可向洗脱液中加入少量电解质，或在柱