生物化学实验2 (动态)PPT课件
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生物化学教学课件ppt
分子间作用力
分子间作用力包括范德华力、氢键和疏水作用力等，影响分子的聚集状态和稳 定性。
化学反应与能量转化
化学反应
化学反应是原子或分子重新组合的过程，遵循质量守恒和能 量守恒定律。
能量转化
化学反应中伴随着能量的吸收或释放，可用于解释反应的动 力学和热力学性质。
酸碱反应与缓冲溶液
酸碱反应
酸和碱通过质子转移反应生成水和盐，酸碱反应是化学反应中的重要类型之一。
生物化学教学课件
目录
• 生物化学概述 • 生物化学基础知识 • 生物大分子与细胞结构 • 生物化学代谢过程 • 生物化学实验技术与方法 • 生物化学前沿研究与发展趋势
01
生物化学概述
生物化学的定义与重要性
定义
生物化学是生物学和化学两门学 科的交叉学科，主要研究生物体 内的化学过程和物质代谢。
重要性
02
生物化学基础知识
分子结构与性质
分子结构
分子由原子组成，通过化学键连接， 具有空间构型和电子分布，决定分子 的物理和化学性质。
分子性质
分子的性质由其结构决定，包括极性 、溶解度、挥发性等，影响分子的物 理状态和化学反应活性。
化学键与分子间作用力
化学键
化学键是原子间通过电子转移或共享形成的相互作用力，分为共价键、离子键 和金属键等。
核酸的结构与功能
总结词
核酸是生物体中重要的遗传物质，具有多种结构和功能。
详细描述
核酸包括DNA和RNA，它们由核苷酸组成，具有一级、二级和三级结构。一级结构决定了核酸的序列 ，二级结构决定了核酸的双螺旋结构，三级结构决定了核酸的空间构象。核酸的功能是携带和传递遗 传信息。
酶的结构与催化机制
总结词
分子间作用力包括范德华力、氢键和疏水作用力等，影响分子的聚集状态和稳 定性。
化学反应与能量转化
化学反应
化学反应是原子或分子重新组合的过程，遵循质量守恒和能 量守恒定律。
能量转化
化学反应中伴随着能量的吸收或释放，可用于解释反应的动 力学和热力学性质。
酸碱反应与缓冲溶液
酸碱反应
酸和碱通过质子转移反应生成水和盐，酸碱反应是化学反应中的重要类型之一。
生物化学教学课件
目录
• 生物化学概述 • 生物化学基础知识 • 生物大分子与细胞结构 • 生物化学代谢过程 • 生物化学实验技术与方法 • 生物化学前沿研究与发展趋势
01
生物化学概述
生物化学的定义与重要性
定义
生物化学是生物学和化学两门学 科的交叉学科，主要研究生物体 内的化学过程和物质代谢。
重要性
02
生物化学基础知识
分子结构与性质
分子结构
分子由原子组成，通过化学键连接， 具有空间构型和电子分布，决定分子 的物理和化学性质。
分子性质
分子的性质由其结构决定，包括极性 、溶解度、挥发性等，影响分子的物 理状态和化学反应活性。
化学键与分子间作用力
化学键
化学键是原子间通过电子转移或共享形成的相互作用力，分为共价键、离子键 和金属键等。
核酸的结构与功能
总结词
核酸是生物体中重要的遗传物质，具有多种结构和功能。
详细描述
核酸包括DNA和RNA，它们由核苷酸组成，具有一级、二级和三级结构。一级结构决定了核酸的序列 ，二级结构决定了核酸的双螺旋结构，三级结构决定了核酸的空间构象。核酸的功能是携带和传递遗 传信息。
酶的结构与催化机制
总结词
生物化学检验ppt课件
酶类CK-MB,α-AMY等。
底物/代谢产物类：包括TG，TC，HDL-C，LDL-C，UA， UREA，Cr，Glu，TP，Alb，T-Bil，D-Bil，NH4+,CO2 等。
无机离子类：包括Ca，P，Mg，Cl 等。
认识到了贫困户贫困的根本原因，才 能开始 对症下 药，然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视， 已经展 开了“ 精准扶 贫”项 目
吸收曲线
波长从200nm-400nm 的电磁波，称为紫外光，波长从400nm-760nm 的电磁波，称为可见光。以波长(λ)为横坐标，以吸光度为纵坐标而绘 制出的一条曲线称为吸收曲线，在一段波长范围内，有最大吸收波长 λmax 和最小吸收波长λmin，在最大吸收波长处测定可获得最大的测 定灵敏度。
认识到了贫困户贫困的根本原因，才 能开始 对症下 药，然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视， 已经展 开了“ 精准扶 贫”项 目
二、连续监测法
连续监测法属于动态法检测的一种，适用于酶活性测 定和代谢物检测，多有酶的参与。该法是通过适当的 仪器，连续测定酶促反应过程中某一反应产物或底物 的浓度随时间变化的情况。原理是：在酶反应的最适 条件下，用物理、化学或酶促反应的分析方法，在反 应速度恒定期（零级反应期）来连续观察和记录一定 时间内底物或产物量的变化，以单位时间酶反应初速 度计算出酶活力大小代谢物的浓度。计算方法有：1） 绝对法：酶活力（U/L）=△A×（反应液体积/样品体 积）×（1000/消光系数）；2）相对法：酶活力 （U/L）=〔 △A （测定）/ △A （标准） 〕标准物的 活力或浓度。
两点终点法
两点终点法也称因定时间法，它可以用一种试剂或两 种试剂。这种方法是近年来，可加双试剂的生化分析 仪问世后，才被广泛应用。优点是可以消除样品、试 剂的颜色、浊度，以及一些干扰物对测定的干扰。原 理是：加入样品→试剂1 →读取A1 →试剂2 →读取 A2，其中要读取两次吸光度值，第一次相当于读出样 品空白的值，加入试剂2至第二次读数才是实际呈色 反应，因此A=A1-A2。比浊法也是一种终点法，不过 是一种浊度测定，而不是比色测定。比浊法可分为化 学比浊法与免疫比浊法，免疫比浊法又分为透射比浊 法和散射比浊法。免疫比浊法目前主要用于血清特种 蛋白的测定，如载脂蛋白(apoAI,apoB 等)、补体类(C3、
底物/代谢产物类：包括TG，TC，HDL-C，LDL-C，UA， UREA，Cr，Glu，TP，Alb，T-Bil，D-Bil，NH4+,CO2 等。
无机离子类：包括Ca，P，Mg，Cl 等。
认识到了贫困户贫困的根本原因，才 能开始 对症下 药，然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视， 已经展 开了“ 精准扶 贫”项 目
吸收曲线
波长从200nm-400nm 的电磁波，称为紫外光，波长从400nm-760nm 的电磁波，称为可见光。以波长(λ)为横坐标，以吸光度为纵坐标而绘 制出的一条曲线称为吸收曲线，在一段波长范围内，有最大吸收波长 λmax 和最小吸收波长λmin，在最大吸收波长处测定可获得最大的测 定灵敏度。
认识到了贫困户贫困的根本原因，才 能开始 对症下 药，然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视， 已经展 开了“ 精准扶 贫”项 目
二、连续监测法
连续监测法属于动态法检测的一种，适用于酶活性测 定和代谢物检测，多有酶的参与。该法是通过适当的 仪器，连续测定酶促反应过程中某一反应产物或底物 的浓度随时间变化的情况。原理是：在酶反应的最适 条件下，用物理、化学或酶促反应的分析方法，在反 应速度恒定期（零级反应期）来连续观察和记录一定 时间内底物或产物量的变化，以单位时间酶反应初速 度计算出酶活力大小代谢物的浓度。计算方法有：1） 绝对法：酶活力（U/L）=△A×（反应液体积/样品体 积）×（1000/消光系数）；2）相对法：酶活力 （U/L）=〔 △A （测定）/ △A （标准） 〕标准物的 活力或浓度。
两点终点法
两点终点法也称因定时间法，它可以用一种试剂或两 种试剂。这种方法是近年来，可加双试剂的生化分析 仪问世后，才被广泛应用。优点是可以消除样品、试 剂的颜色、浊度，以及一些干扰物对测定的干扰。原 理是：加入样品→试剂1 →读取A1 →试剂2 →读取 A2，其中要读取两次吸光度值，第一次相当于读出样 品空白的值，加入试剂2至第二次读数才是实际呈色 反应，因此A=A1-A2。比浊法也是一种终点法，不过 是一种浊度测定，而不是比色测定。比浊法可分为化 学比浊法与免疫比浊法，免疫比浊法又分为透射比浊 法和散射比浊法。免疫比浊法目前主要用于血清特种 蛋白的测定，如载脂蛋白(apoAI,apoB 等)、补体类(C3、
生物化学ppt ppt
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自从1950年以来，由于电镜技术、超速离心
技术、各种色谱技术和电泳技术、x—射线晶体衍
射技术等现代化技术和设备的发明和发展，加上
许多优秀的物理学家、化学家、微生物学家和遗
传学家参加到生物化学的研究领域中来，生物化
学进入了突飞猛进大发展的新时期。集中体现在
对蛋白质、酶和核酸等生物大分子的研究，从分
由于这些有机化合物相对分子质量 很大，所以称为生物大分子 。
除上述四大类物质外，生物体还含 有可溶性糖、有机酸、维生素、激素、 生物碱及无机离子等。
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2．生物体的物质代谢、能量转换 和代谢调节
生命活动包括生物体与外界的物质 交换(摄人营养和排出废物)，能量交换， 信息传递，生长发育，遗传变异，运动， 生殖，应激性等。
离提纯和一般性质的测定，发展到确定其化学组
成、序列、空间结构及其与生物学功能的联系，
进而发展到人工合成、人工摹拟，并创立了基因
工程。
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1944年,麦克劳德(Macleod)和麦卡蒂 (Mc Carty)(美)证明DNA是遗传物质.
1953年,Watson和Crick 提出DNA双螺 旋结构模型
生物化学
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绪论
第一章 核酸的结构与功能
第二章 蛋白质化学
第三章 酶
第四章 脂类与生物膜
第五章 糖类代谢
第六章 生物氧化和氧化磷酸化
第七章 脂类代谢
第八章 蛋白质的酶促降解及氨基酸代谢
第九章 核酸的酶促ຫໍສະໝຸດ - 解及核苷酸代谢2绪论
一、生物化学的研究范围 二、生物化学的发简史 三、生物化学与其他学科的关系 四、生物化学的应用和发展前景
生物化学实验2.双缩脲测定血清蛋白质含量
实验四 双缩脲法测定 血清蛋白
蛋白质是生命的物质承担者，要揭示生命 的本质，探讨各种生命活动的物质基础，就必 须对蛋白质的结构、性质和功能进行深入的研 究，这首先就需要将蛋白质分离出来，进行纯 化，再进一步进行测定。
蛋白质是是构成人体及动物细胞组织的重要成分，参 与机体内的各种生命活动
人体内蛋白质含量直接关系着人体的健康状况，测定 蛋白质含量在临床上尤为重要。
4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0
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1 2 4 6 8 10
混匀后，37℃水浴中放置20分钟，然后在540nm波长 处，以空白管调零，在分光光度计上读取各管吸光度， 以吸光度为纵坐标，蛋白质浓度（g/L）为横坐标，绘 制标准曲线。
实验步骤
2、样品测定
取2只试管，分别标上测定管和空白管，加入试剂
注意事项
加完试剂需要将试管混匀 注意水浴的温度及时间 分光光度计的正确使用
标准溶液
实验原理
绘制出蛋白质标准溶液的标准曲线：以吸光 度为纵坐标，蛋白质浓度（mg/mL）为横坐 标，绘制标准曲线。
在相同的实验条件下，测定未知蛋白质含量 的血清样品溶液，在540nm处的吸光度，查 标准曲线求得样品的蛋白质浓度（g/L）。
试剂和仪器
(一）试剂 1、双缩脲试剂：取3g硫酸铜，500mL蒸馏水 溶解，加9g酒石酸钾钠、5g碘化钾，加入 100mL6mol/L氢氧化钠，用蒸馏水稀释到 1000mL，贮存于塑料瓶中，避光保存。 2、0.9%（W/V)NacL溶液 3、小牛血清 4、蛋白质标准溶液
血清蛋白质中某些蛋白质含量的变化可以作为临床上 某些疾病诊断的依据
方 法 灵敏度 时间 原 理 干扰物质 说 明
凯氏定氮法 (Kjedahl法)
蛋白质是生命的物质承担者，要揭示生命 的本质，探讨各种生命活动的物质基础，就必 须对蛋白质的结构、性质和功能进行深入的研 究，这首先就需要将蛋白质分离出来，进行纯 化，再进一步进行测定。
蛋白质是是构成人体及动物细胞组织的重要成分，参 与机体内的各种生命活动
人体内蛋白质含量直接关系着人体的健康状况，测定 蛋白质含量在临床上尤为重要。
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混匀后，37℃水浴中放置20分钟，然后在540nm波长 处，以空白管调零，在分光光度计上读取各管吸光度， 以吸光度为纵坐标，蛋白质浓度（g/L）为横坐标，绘 制标准曲线。
实验步骤
2、样品测定
取2只试管，分别标上测定管和空白管，加入试剂
注意事项
加完试剂需要将试管混匀 注意水浴的温度及时间 分光光度计的正确使用
标准溶液
实验原理
绘制出蛋白质标准溶液的标准曲线：以吸光 度为纵坐标，蛋白质浓度（mg/mL）为横坐 标，绘制标准曲线。
在相同的实验条件下，测定未知蛋白质含量 的血清样品溶液，在540nm处的吸光度，查 标准曲线求得样品的蛋白质浓度（g/L）。
试剂和仪器
(一）试剂 1、双缩脲试剂：取3g硫酸铜，500mL蒸馏水 溶解，加9g酒石酸钾钠、5g碘化钾，加入 100mL6mol/L氢氧化钠，用蒸馏水稀释到 1000mL，贮存于塑料瓶中，避光保存。 2、0.9%（W/V)NacL溶液 3、小牛血清 4、蛋白质标准溶液
血清蛋白质中某些蛋白质含量的变化可以作为临床上 某些疾病诊断的依据
方 法 灵敏度 时间 原 理 干扰物质 说 明
凯氏定氮法 (Kjedahl法)
生物化学实验2.醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白质
5. 染色 电泳完毕后断电，用镊子取出薄膜条投入染
液氨基黑中1分钟，染色过程中不时轻轻晃动 染色皿，使染色充分。 6. 漂洗
用漂洗液漂洗，不停摆动薄膜条，至背景 颜色脱去。将薄膜夹在干净滤纸中，吸去多余 溶液。
注意： 控制染色和漂洗的时间，防止背景过深或 某些区带太浅。
五、结果与分析：
一般的染色后的薄膜上 可显现清楚的五条区带。 从正极端起，依次为白蛋 白、α1球蛋白、α2球蛋 白、β球蛋白和γ球蛋白
实验二 醋酸纤维素薄膜电泳分离蛋白质
蛋白质是生命的物质承担者，要揭示生命 的本质，探讨各种生命活动的物质基础，就必 须对蛋白质的结构、性质和功能进行深入的研 究，这首先就需要将蛋白质分离出来，进行纯 化，再进一步进行测定。
蛋白质是是构成人体及动物细胞组织的重要成分，参 与机体内的各种生命活动
人体内蛋白质含量直接关系着人体的健康状况，测定 蛋白质含量在临床上尤为重要。
注意： 分清电泳槽上的正负极 如有很多膜条同时电泳时,膜条间应相距 1～3mm ,使之不互相接触,以免相互干扰。
4. 电泳 将电泳槽和电泳仪连接，注意电泳槽上的
正负极（红正黑负）。调节电流1.5mA/1膜； 通电时间45-60分钟。
点样端
1.滤纸桥 2.电泳槽 3.醋酸纤维素薄膜 4.电泳槽膜支架 5.电极室中央隔板
区带观察：1.排列顺序 2.区带宽窄 3.颜色深浅
临床意义
肝硬化：白蛋白降低，γ-球蛋白极度升高； 肝癌患者：白蛋白与球蛋白间多出一条甲胎蛋白
（AFP）带； 急慢性肾炎、肾病综合症：白蛋白降低，a1、a2
和β球蛋白升高；
注意事项
分清光面和毛面 取样要适量、均匀（点样器下端均匀沾有一层血 清即可） 点样时动作要轻稳，用力要均匀，点样时用力不 能太大，以免损坏膜片或印出凹陷影响电泳区带 分离效果。 只能点一次。 分清电泳槽上的正负极 如有很多膜条同时电泳时,膜条间应相距1～ 3mm ,使之不互相接触,以免相互干扰。
《生物化学》PPT课件
8
Endocrine
imbalance整s理:课H件ormonal
8
deficiencies,excesses.
常见的体检验单里的部分内容
肝功十项
ALT(u/L)
20
AST(u/L)
22
TBL(umol/L)
14.4
DBL(umol/L)
5.6
BIL(L)
8.8
总蛋白TP(g/L)
80
清蛋白ALB(g/L) 50
3 Biologic agents生物因子:Viruses病毒,bacteria细菌,fungi真菌,
higher forms of parasites寄生虫.
4 Oxygen lack: Loss of blood supply,depletion of the oxygen-
carrying capacity of the blood, poisoning of the oxidative enzymes酶
分子、基因水平——形成分子生物学——基因技术（基因工程、 克隆技术、基因诊断、 基因治疗
整理课件
4
• 生化研究的主要内容：
•
1. 研究生物体的物质组成及生物分子
的结构与功能；
•
2. 物质代谢、能量变化及其调节；
•
3. 基因表达及其调控。
整理课件
5
二、生物化学与医学、药学的关系
• Medical Biochemistry is that branch of medicine concerned with the biochemistry and metabolism of human health and disease.
食品生物化学实验 课件 实验二 糖类性质实验 (一) ———糖类颜色反应(共10张PPT)
戊糖在浓酸溶液中脱水生成糠醛，后者与间苯三酚结合成樱桃红
因α－为萘糠酚醛反及应糠２（醛.试Ｍ衍剂ｏ生ｌ物ｉ对ｓ此ｃ反ｈ应反均应呈）阳性，故此反应不是糖类的
将３支试管同时放入沸水浴中，注意观察 ／Ｌ阿拉伯糖（溶１液），莫混氏匀（。Ｍｏｌｉｓｃｈ）试剂５０ｇ／
Ｌα－萘酚的酒精溶液，称取α－萘酚
α－萘５酚ｇ反，应溶（于Ｍ９ｏ５ｌ％ｉ乙ｓ醇ｃ中ｈ，反总应体）积１００ｍＬ，贮于棕色瓶内，使用前配制。 衍生物，后者能与α－萘酚生成紫红色物质。
阳性反应。在实验条件下蔗糖有可能水解而呈阳性反应。
３.杜氏实验 戊糖在浓酸溶液中脱水生成糠醛，后者与间苯三酚结合成樱桃红
色物质。
三、器材与试剂
（２）塞氏（Ｓｅｌｉｗａｎｏｆｆ）试剂０.
（１）莫氏（１Ｍ.器ｏ材ｌｉｓｃｈ）试剂５０ｇ／
取３支试管分别加入１０ｇ／Ｌ的葡萄糖溶液、１０ｇ／Ｌ
戊糖在浓酸溶试液管中，脱试水管生架成糠，醛滴，管后，者水与浴间苯锅三。酚结合成樱桃红
，记录各管颜色的变化及变化时间。
３.杜氏实验取３支试管分别加入杜氏试剂１ｍＬ，再分别加入
１滴１０ｇ／Ｌ葡萄糖溶液、１０ｇ／Ｌ半乳糖溶液、１０ｇ
／Ｌ阿拉伯糖溶液，混匀。将试管同时放入沸水浴中，观察颜色的 变化，并记录颜色变化的时间。
思考题
α－萘酚反应（Ｍｏｌｉｓｃｈ反应） 间苯二酚反应（Ｓｅｌｉｗａｎｏｆｆ反应） ０５ｇ溶于３０ｍＬ浓盐酸中，再用蒸馏水稀释至１００ｍＬ。 杜氏实验取３支试管分别加入杜氏试剂１ｍＬ，再分别加入
将３支试管２同时ư放入沸α水－浴萘中，酚注反意应观的察原理是什么？
，记录各管颜色的变化及变化时间。 间苯二酚反应（Ｓｅｌｉｗａｎｏｆｆ反应） 取３支试管分别加入１０ｇ／Ｌ的葡萄糖溶液、１０ｇ／Ｌ （２）塞氏（Ｓｅｌｉｗａｎｏｆｆ）试剂０. 糖类性质实验（一）———糖类颜色反应 （１）莫氏（Ｍｏｌｉｓｃｈ）试剂５０ｇ／ 硫酸层沉于试管底部与糖溶液分成两层，在液面交界处有紫红色环 果糖溶液、１０ｇ／Ｌ蔗糖溶液各０.
因α－为萘糠酚醛反及应糠２（醛.试Ｍ衍剂ｏ生ｌ物ｉ对ｓ此ｃ反ｈ应反均应呈）阳性，故此反应不是糖类的
将３支试管同时放入沸水浴中，注意观察 ／Ｌ阿拉伯糖（溶１液），莫混氏匀（。Ｍｏｌｉｓｃｈ）试剂５０ｇ／
Ｌα－萘酚的酒精溶液，称取α－萘酚
α－萘５酚ｇ反，应溶（于Ｍ９ｏ５ｌ％ｉ乙ｓ醇ｃ中ｈ，反总应体）积１００ｍＬ，贮于棕色瓶内，使用前配制。 衍生物，后者能与α－萘酚生成紫红色物质。
阳性反应。在实验条件下蔗糖有可能水解而呈阳性反应。
３.杜氏实验 戊糖在浓酸溶液中脱水生成糠醛，后者与间苯三酚结合成樱桃红
色物质。
三、器材与试剂
（２）塞氏（Ｓｅｌｉｗａｎｏｆｆ）试剂０.
（１）莫氏（１Ｍ.器ｏ材ｌｉｓｃｈ）试剂５０ｇ／
取３支试管分别加入１０ｇ／Ｌ的葡萄糖溶液、１０ｇ／Ｌ
戊糖在浓酸溶试液管中，脱试水管生架成糠，醛滴，管后，者水与浴间苯锅三。酚结合成樱桃红
，记录各管颜色的变化及变化时间。
３.杜氏实验取３支试管分别加入杜氏试剂１ｍＬ，再分别加入
１滴１０ｇ／Ｌ葡萄糖溶液、１０ｇ／Ｌ半乳糖溶液、１０ｇ
／Ｌ阿拉伯糖溶液，混匀。将试管同时放入沸水浴中，观察颜色的 变化，并记录颜色变化的时间。
思考题
α－萘酚反应（Ｍｏｌｉｓｃｈ反应） 间苯二酚反应（Ｓｅｌｉｗａｎｏｆｆ反应） ０５ｇ溶于３０ｍＬ浓盐酸中，再用蒸馏水稀释至１００ｍＬ。 杜氏实验取３支试管分别加入杜氏试剂１ｍＬ，再分别加入
将３支试管２同时ư放入沸α水－浴萘中，酚注反意应观的察原理是什么？
，记录各管颜色的变化及变化时间。 间苯二酚反应（Ｓｅｌｉｗａｎｏｆｆ反应） 取３支试管分别加入１０ｇ／Ｌ的葡萄糖溶液、１０ｇ／Ｌ （２）塞氏（Ｓｅｌｉｗａｎｏｆｆ）试剂０. 糖类性质实验（一）———糖类颜色反应 （１）莫氏（Ｍｏｌｉｓｃｈ）试剂５０ｇ／ 硫酸层沉于试管底部与糖溶液分成两层，在液面交界处有紫红色环 果糖溶液、１０ｇ／Ｌ蔗糖溶液各０.
《生物化学》全套PPT课件
04 糖代谢途径与调控机制
糖类概述及分类方法
糖类定义
多羟基醛、多羟基酮及其缩聚物和某些衍生物的 总称。
糖类分类
单糖、低聚糖、多糖。
糖类生物学作用
提供能量；物质代谢的碳骨架；细胞的组成成分。
糖无氧氧化过程剖析
糖无氧氧化定义
在无氧条件下，葡萄糖经分解代谢为乳酸或乙醇的过程。
糖无氧氧化过程
葡萄糖磷酸化；异构化；裂解；还原。
质谱法
利用蛋白质分子在电场或 磁场中的运动规律进行测 定。
cDNA测序法
通过测定编码蛋白质的 cDNA序列，间接推断蛋 白质序列。
蛋白质高级结构类型及特点
二级结构
主要依靠氢键维持的局部 空间结构，包括α-螺旋、 β-折叠等。
三级结构
整条肽链中全部氨基酸残 基的相对空间位置，包括 结构域、超二级结构等。
脂类分类方法
根据化学结构和性质，脂类可分为简单பைடு நூலகம்质（如脂肪酸、甘油酯等） 和复合脂质（如磷脂、糖脂等）。
脂类在生物体内的分布
不同生物体内的脂类分布有差异，如动物体内主要储存甘油三酯， 而植物体内则以脂肪酸为主。
甘油三酯分解代谢过程剖析
01
甘油三酯的分解代谢途径
甘油三酯在体内主要通过脂肪酶的催化作用分解为甘油和脂肪酸，进而
糖异生作用及其生理意义
糖异生定义
非糖物质转变为葡萄糖或糖原的 过程。
糖异生过程
乳酸、甘油、生糖氨基酸等转变为 葡萄糖或糖原。
糖异生生理意义
维持血糖恒定；补充或恢复肝糖原 储备；利用乳酸。
05 脂类代谢途径与调控机制
脂类概述及分类方法
脂类定义及主要功能
脂类是生物体内重要的有机化合物，包括脂肪、磷脂、固醇等， 主要功能是储存能量、构成生物膜、参与信号传导等。
生物化学实验 PPT课件
电位梯度的不连续性
E：每厘米的电压降 E＝I(电流强度)/(电导率)
E与电泳速度成正比
电泳开始后，由于快离子泳动 率最大，在快离子后面形成一 个离子浓度低的低电导区，产 生较高的电位梯度，使蛋白质 和慢离子加速移动，蛋白质样 品被进一步浓缩。
A. 样品的浓缩效应
四个不连续性造成样品浓缩效应原 理包括：
蛋白质样品被夹在中间。
缓冲液
样品 浓缩胶
分离胶
缓冲液成分及pH的不连续性导致蛋白质样品浓缩效 应示意图
快离子 慢离子 蛋白质
样品
电位梯度的不连续性
E：每厘米的电压降 E＝I(电流强度)/(电导率)
E与电泳速度成正比
电泳开始后，由于快离子泳动 率最大，在快离子后面形成一 个离子浓度低的低电导区，产 生较高的电位梯度，使蛋白质 和慢离子加速移动，蛋白质样 品被进一步浓缩。
五.聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳原理
3.聚丙烯酰胺凝胶的孔径
凝胶越浓T，凝胶孔径↓，所受阻力，机械强度
丙稀酰胺浓度
分离物质分子量
4％
大于100万
7－7.5％
1－100万
15－30％
小于1万
胶的孔径为蛋白质分子平均大小一半时效果好
凝胶强度的选择
先用7.5%的标准凝胶或4%--10%的凝胶梯度测试
生物化学实验biochemicalexperiment实验基本知识容量瓶液体的量取液体的倾倒滴管的使用试纸的使用一定质量分数的溶液的配制滤纸的折叠物质分离与提纯过滤萃取与分液实验内容安排共36学时1绪论时生物化学实验规则及常用仪器使用入门2学2实验一纸层析分离鉴定氨基酸6学时3实验二血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳4学时4实验三蛋白质的颜色反应2学时5实验四蛋白质的沉淀变性反应3学时6实验五凝胶过滤法除蛋白质中的离子4学时7实验六酵母rna的提取和鉴定4学时8实验七血糖含量的测定4学时9实验八脂肪酸的氧化5学时10实验报告讲解及考核2学时1实验目的?掌握蛋白质酶核酸糖等重要物质的分离纯化和测定技术的原理及方法
生物化学2(共73张PPT)
氨基酸缩写符号：略
氨基酸的理化性质
①PI，两性解离 概念： ②紫外吸收：280nm（色、苯、酪） ③颜色反应、“茚三酮”570nm
3. 掌握肽键、多肽链一级结构和高级结构的概念
[肽]
概念：2个aa之间
→以酰胺缩合，此酰胺键称为
肽键。-CONHC-
肽链：有方向性自N→C，链内的aa叫残基。
生物活性肽：10肽以内为寡肽，MW. 1万以内为多
蛋白质变性是由于 A. 蛋白质的一级结构的改变 B 蛋白质亚基的解聚 C 蛋白质空间构象的破坏
D 辅基的脱落 E 蛋白质水解
答案：[C]
[评析]： 本题考点：蛋白质变性的概念
在某些理、化因素作用下，使蛋白质特定的空间构象破坏，导致 其理化性质 改变、生物学性质改变，称为蛋白质的变性作用。一般认为蛋白质变性主要发生二 硫键和非共价键破坏，即空间构象的破坏并不涉及一级结构的改变。
酶
[概念]：
缺O 时，葡萄糖分解生成乳酸的过程。 主要: 肝 70 ~ 80 %
2 [调节]：四个关键酶。
FFA ATP CoA 脂酰CoA +AMP + PPi
[部位]：胞液。 特点：Km不变， Vmax↓
核酸的一级结构、空间结构与功能。
白三烯：过敏反应的慢反应物质，促进炎症和过敏反应等
抗代谢物的作用及机制。
米式常数的意义
①Km为速度是最大反应速度一半时的[S] ②[S]≥Km, Km不计, V=Vmax ③[S]≤Km,分母的[S]不计,反应速度V与[S]成正比
④Km反映酶与作用物的亲合力,Km大，亲合力小； Km小，亲合力大。
（2）酶浓度的影响：V与酶浓度成正比。 （3）pH的影响：最适pH——酶活性最大时的pH。
氨基酸的理化性质
①PI，两性解离 概念： ②紫外吸收：280nm（色、苯、酪） ③颜色反应、“茚三酮”570nm
3. 掌握肽键、多肽链一级结构和高级结构的概念
[肽]
概念：2个aa之间
→以酰胺缩合，此酰胺键称为
肽键。-CONHC-
肽链：有方向性自N→C，链内的aa叫残基。
生物活性肽：10肽以内为寡肽，MW. 1万以内为多
蛋白质变性是由于 A. 蛋白质的一级结构的改变 B 蛋白质亚基的解聚 C 蛋白质空间构象的破坏
D 辅基的脱落 E 蛋白质水解
答案：[C]
[评析]： 本题考点：蛋白质变性的概念
在某些理、化因素作用下，使蛋白质特定的空间构象破坏，导致 其理化性质 改变、生物学性质改变，称为蛋白质的变性作用。一般认为蛋白质变性主要发生二 硫键和非共价键破坏，即空间构象的破坏并不涉及一级结构的改变。
酶
[概念]：
缺O 时，葡萄糖分解生成乳酸的过程。 主要: 肝 70 ~ 80 %
2 [调节]：四个关键酶。
FFA ATP CoA 脂酰CoA +AMP + PPi
[部位]：胞液。 特点：Km不变， Vmax↓
核酸的一级结构、空间结构与功能。
白三烯：过敏反应的慢反应物质，促进炎症和过敏反应等
抗代谢物的作用及机制。
米式常数的意义
①Km为速度是最大反应速度一半时的[S] ②[S]≥Km, Km不计, V=Vmax ③[S]≤Km,分母的[S]不计,反应速度V与[S]成正比
④Km反映酶与作用物的亲合力,Km大，亲合力小； Km小，亲合力大。
（2）酶浓度的影响：V与酶浓度成正比。 （3）pH的影响：最适pH——酶活性最大时的pH。
第二章--生物化学检验基本知识PPT课件
2024/10/16
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二、生物化学检验报告单的发放
即使是临床医护人员能够通过“医院信息系统（HIS）”在医生 工作站直接读取检验结果的临床科室或医疗单位，实验室也 应该用电话向临床报告，这是考虑到临床一线医护人员可能 会忙于抢救而不能及时观察到检测结果需要提醒的缘故。
“危急值”报告不同于“急诊检验”报告，是两个完全不同
4．技术要求高的检测项目 检测系统本身的不稳定因素，影响检验结果可靠性的检
验项目，或者检测系统本身存在着影响检验质量的诸多人
为环节，对检验人员的理论和技能要求较高的检验项目。
（三）急诊生化检验
急诊检验是实验室为了配合临床对危、急、重症患者的诊 断和抢救而实施的一种特需检验。如血气分析、电解质、 淀粉酶、心肌标志物、血糖等。
2．标本难以获得的检测项目
某些检验项目的标本获得比较困难，或者因为标本数 量极少，对标本的处理和保存都不能按规定要求和程序 进行，甚至不能进行复检的检验项目。
2024/10/16
8
一、生物化学检验的项目
3．发病率低或成本高的检测项目 由于某疾病的发病率很低造成标本数量过少或检验成 本过高的检验项目。
2024/10/16
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第二节 生物化学检验的标本
一、标本的采集
生物化学检验最常用的标本是血液，其次是尿液，此外还有 脑脊液、浆膜腔积液、羊水等各种体液。 正确采集标本是获得准确、可靠检验结果的关键。
标本采集时应尽可能避免一切干扰因素，选择最佳的采集时 间，减少饮食和药物影响，减少昼夜节律带来的干扰。对于 有创伤性的操作，操作前应先与患者沟通建立互信，消除患 者的恐惧和紧张情绪。
剂及抗凝原理；尿液标本的采集方法；标本收检、分离、储存和转运；生物 化学检验项目类型；危急值、危急值报告的概念；检验报告单的发放方式。
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Henan University of Technology
生物化学实验
河南工业大学生物工程学院 生物技术系 2015.3
实验内容
1. 1. 淀粉含量测定 2. 2. 氨基酸的纸上层析 3. 蛋白质分子量测定 4. 淀粉酶活力测定 5. 蛋白质含量测定 1. 6. 甲醛滴定测氨基氮 2. 7. 酵母RNA的提取、组分鉴定和含量测定 3. 8. 赖氨酸含量测定 9. 凝胶层析法分离蛋白质 10. 蔗糖酶的提取与部分纯化 11. 蔗糖酶活力的测定 12. Bradford法测定蛋白质含量
二、实验原理
聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质相对分子质量的方法， 主要是根据各蛋白质组分的分子大小和形状以及所带净电荷 多少等因素所造成的电泳迁移率的差别。 在聚丙烯酰胺凝胶 系统中，加入一定量的十二烷基硫酸钠（SDS），使所有蛋 白质颗粒表面覆盖一层SDS分子，导致蛋白质分子间原有的 电荷差异消失，此时，蛋白质分子的电泳迁移率主要取决于 它的分子量大小。当蛋白质的分子量在15000～200000之间 时，电泳迁移率与分子量的对数呈直线关系。
实验一 淀粉含量测定
一、实验目的
1. 掌握旋光仪的操作使用。 2. 了解旋光法测粗淀粉的基本原理。
二、实验原理
❖ 在加热及稀盐酸的作用下，淀粉水解并转入盐酸溶 液中。在一定的水解条件下，不同谷物淀粉的比旋 光度是不同的。其在171～195之间，因此可用旋 光法测定粗淀粉的含量。
.
三、实验仪器和试剂
.
三、仪器和试剂
1、主要仪器： （1）层析缸 （2）微量进样器 （3）喷雾器 2、试剂 ： （1）展开剂：乙醇：水：冰乙酸＝50:10:1 （2）氨基酸溶液：0.5%的赖氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸溶液
及它们的混合液 （3）显色剂：0.1%水合茚三酮丙酮溶液。
.
四、பைடு நூலகம்验步骤
1、平衡：将展开剂（乙醇：水：冰乙酸＝50:10:1）放入培养 皿中置于密闭容器内使其充满展开剂（24h左右） 2、点样：取滤纸1张用铅笔在距下方2cm处划线并将所得线段 分成5等分从而得到4个标记点，用微量进样器分别取5 μ L 下列 样品①phe②lys③pro④混合Aa向4个标记点上加样（样品扩散 中Ø≤1cm） 3、展层：将滤纸卷成筒状且不能够重叠 ， 并用棉线扎紧然后垂 直放入培养皿中进行展层2h（当展开剂沿到达滤纸长度三分之 二时，即可取出）测量展开剂前沿移动距离（a） 4、显色：用0.1%茚三酮-丙酮溶液朝点样面喷雾（不要喷得太 多）然后将滤纸置于电炉上方20cm处加热直至斑点出现为止， 测量各斑点中心到点样点距离（b. ）
取滤液20mL置于旋光管中，先用1%HCl 调节旋光仪“0” 点，然后将样品溶液放入旋光仪中测α
.
❖ 五 、 结果计算
淀粉含量（ ％ 2D0.L 1） 0W0＝ 100
其中：
20
D
182.7
L 2dm
W：样品质量（ g）
.
六、思考题
❖ 样品加盐酸处理时，煮沸时间少于或多于15min会对测定 结果产生什么影响？
.
教学目的
生物化学是专业基础实验课，其先修课程为 无机化学、分析化学和有机化学 。其目的是： 学习和掌握生物技术，培养动手观察和思维能力 。
.
学习方法
1 、 预习：实验前必须进行充分的预习和准备，并写出预习报告，做到心 中 有数，这是做好实验的前提。
2 、 操作：应按拟定的实验操作计划与方案进行。做到轻（动作轻、讲话轻 ），细（细心观察、细致操作），准（试剂用量准 确 、结果及其记录准 确），洁（使用的仪器清洁，实验桌面整洁，实验结束把实验室打扫清 洁）。
五、结果计算
Rf
斑点中心到点样点距 （离 b） 展开剂前沿移动距离 a）（
六、思考题
❖ 1．计算出各种氨基酸的Rf值，并根据Rf值鉴定出混 合氨基酸中的各组分，在层析图谱上标出各氨基酸 名称。
❖ 2．对氨基酸移动快慢的原因给予简要分析。
.
实验三 蛋白质分子量测定
一、实验目的
掌握电泳基本原理、分类、影响因素, SDS-聚丙烯酰胺凝 胶电泳用途,凝胶制备。
.
实验二 氨基酸的纸上层析
一、实验目的
通过对氨基酸的分离，学习纸层析法的基本原理及操作方法 。
二、实验原理
纸层析是以滤纸作为惰性支持物的分配层析，滤纸纤维上的 －OH具有亲水性，因此能吸附一层水作为固定相，而通常 把有机溶剂作为流动相。有机溶剂自上而下流动，称为下行 层析；自下而上流动，称为上行层析。流动相流经支持物时 与固定相之间连续抽提，使物质在两相之间不断分配而得到 分离。
.
实验室守则
生物化学实验室守则是学生实验正常进行的保证，学生进入实验室必须遵守 以下规则：
1. 进入实验室，须遵守实验室纪律和制度，听从老师指导 2. 未穿实验服、未写实验预习报告者不得进入实验室进行实验。 3. 进入实验室后，要熟悉周围环境，熟悉防火及急救设备器材的使用方法和存放位置，
遵守安全规则。 4. 实验前，清点、检查仪器、明确仪器规范操作方法及注意事项，否则不得动手操作。 5. 使用药品时，要求明确其性质及使用方法后，据实验要求规范使用。禁止使用不明确
药品或随意混合药品。 6. 实验中，保持安静，认真操作，仔细观察，积极思维，实验过程中必须有原始记录，
不得擅自离开岗位。 7. 实验室公用物品（包括器材、药品等）用完后，应归放回原指定位置。实验废液、废
物按要求放入指定收集器皿。 8. 爱护公物，注意卫生，保持整洁，节约用水、电、气及器材。 9. 实验完毕后，要求整理、清洁实验台面，检查水、电、气源，打扫实验室卫生。 10. 实验记录经教师签名认可后，方可离开实验室. 。
3 、 在实验全过程中，应集中注意力，独立思考解决问题。自己难以解释时 可请老师解答。
4 、 写实验报告：做完实验后，应解释实验现象，并作出结论，或根据实验 数据进行计算和处理。主要包括：a、目的，b、原理，c、操作步骤及实 验性质、现象，d、数据处理（含误差原因及分析），e、讨论，f、思考 题回答。
1、主要仪器： （1）旋光仪 （2）电子天平（感量0.0001g） 2、试剂：
⑴1％盐酸溶液 ⑵30％硫酸锌溶液。 ⑶15％亚铁氰化钾溶液。
.
四、实验步骤
1.样品的处理 在电子天平上称取小麦粉2.5000g置于三角瓶中→加入
50mL 1%HCl混成浆状（不能有结块）→沸水浴中准确加热 15min→先加1mL 30% ZnSO4混匀→再加1mL 15%亚铁氰 化钾混匀→移至100mL容量瓶中加水定容混匀后过滤→弃去 最初15mL收集其余滤液。 2.旋光度测定
生物化学实验
河南工业大学生物工程学院 生物技术系 2015.3
实验内容
1. 1. 淀粉含量测定 2. 2. 氨基酸的纸上层析 3. 蛋白质分子量测定 4. 淀粉酶活力测定 5. 蛋白质含量测定 1. 6. 甲醛滴定测氨基氮 2. 7. 酵母RNA的提取、组分鉴定和含量测定 3. 8. 赖氨酸含量测定 9. 凝胶层析法分离蛋白质 10. 蔗糖酶的提取与部分纯化 11. 蔗糖酶活力的测定 12. Bradford法测定蛋白质含量
二、实验原理
聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质相对分子质量的方法， 主要是根据各蛋白质组分的分子大小和形状以及所带净电荷 多少等因素所造成的电泳迁移率的差别。 在聚丙烯酰胺凝胶 系统中，加入一定量的十二烷基硫酸钠（SDS），使所有蛋 白质颗粒表面覆盖一层SDS分子，导致蛋白质分子间原有的 电荷差异消失，此时，蛋白质分子的电泳迁移率主要取决于 它的分子量大小。当蛋白质的分子量在15000～200000之间 时，电泳迁移率与分子量的对数呈直线关系。
实验一 淀粉含量测定
一、实验目的
1. 掌握旋光仪的操作使用。 2. 了解旋光法测粗淀粉的基本原理。
二、实验原理
❖ 在加热及稀盐酸的作用下，淀粉水解并转入盐酸溶 液中。在一定的水解条件下，不同谷物淀粉的比旋 光度是不同的。其在171～195之间，因此可用旋 光法测定粗淀粉的含量。
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三、实验仪器和试剂
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三、仪器和试剂
1、主要仪器： （1）层析缸 （2）微量进样器 （3）喷雾器 2、试剂 ： （1）展开剂：乙醇：水：冰乙酸＝50:10:1 （2）氨基酸溶液：0.5%的赖氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸溶液
及它们的混合液 （3）显色剂：0.1%水合茚三酮丙酮溶液。
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四、பைடு நூலகம்验步骤
1、平衡：将展开剂（乙醇：水：冰乙酸＝50:10:1）放入培养 皿中置于密闭容器内使其充满展开剂（24h左右） 2、点样：取滤纸1张用铅笔在距下方2cm处划线并将所得线段 分成5等分从而得到4个标记点，用微量进样器分别取5 μ L 下列 样品①phe②lys③pro④混合Aa向4个标记点上加样（样品扩散 中Ø≤1cm） 3、展层：将滤纸卷成筒状且不能够重叠 ， 并用棉线扎紧然后垂 直放入培养皿中进行展层2h（当展开剂沿到达滤纸长度三分之 二时，即可取出）测量展开剂前沿移动距离（a） 4、显色：用0.1%茚三酮-丙酮溶液朝点样面喷雾（不要喷得太 多）然后将滤纸置于电炉上方20cm处加热直至斑点出现为止， 测量各斑点中心到点样点距离（b. ）
取滤液20mL置于旋光管中，先用1%HCl 调节旋光仪“0” 点，然后将样品溶液放入旋光仪中测α
.
❖ 五 、 结果计算
淀粉含量（ ％ 2D0.L 1） 0W0＝ 100
其中：
20
D
182.7
L 2dm
W：样品质量（ g）
.
六、思考题
❖ 样品加盐酸处理时，煮沸时间少于或多于15min会对测定 结果产生什么影响？
.
教学目的
生物化学是专业基础实验课，其先修课程为 无机化学、分析化学和有机化学 。其目的是： 学习和掌握生物技术，培养动手观察和思维能力 。
.
学习方法
1 、 预习：实验前必须进行充分的预习和准备，并写出预习报告，做到心 中 有数，这是做好实验的前提。
2 、 操作：应按拟定的实验操作计划与方案进行。做到轻（动作轻、讲话轻 ），细（细心观察、细致操作），准（试剂用量准 确 、结果及其记录准 确），洁（使用的仪器清洁，实验桌面整洁，实验结束把实验室打扫清 洁）。
五、结果计算
Rf
斑点中心到点样点距 （离 b） 展开剂前沿移动距离 a）（
六、思考题
❖ 1．计算出各种氨基酸的Rf值，并根据Rf值鉴定出混 合氨基酸中的各组分，在层析图谱上标出各氨基酸 名称。
❖ 2．对氨基酸移动快慢的原因给予简要分析。
.
实验三 蛋白质分子量测定
一、实验目的
掌握电泳基本原理、分类、影响因素, SDS-聚丙烯酰胺凝 胶电泳用途,凝胶制备。
.
实验二 氨基酸的纸上层析
一、实验目的
通过对氨基酸的分离，学习纸层析法的基本原理及操作方法 。
二、实验原理
纸层析是以滤纸作为惰性支持物的分配层析，滤纸纤维上的 －OH具有亲水性，因此能吸附一层水作为固定相，而通常 把有机溶剂作为流动相。有机溶剂自上而下流动，称为下行 层析；自下而上流动，称为上行层析。流动相流经支持物时 与固定相之间连续抽提，使物质在两相之间不断分配而得到 分离。
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实验室守则
生物化学实验室守则是学生实验正常进行的保证，学生进入实验室必须遵守 以下规则：
1. 进入实验室，须遵守实验室纪律和制度，听从老师指导 2. 未穿实验服、未写实验预习报告者不得进入实验室进行实验。 3. 进入实验室后，要熟悉周围环境，熟悉防火及急救设备器材的使用方法和存放位置，
遵守安全规则。 4. 实验前，清点、检查仪器、明确仪器规范操作方法及注意事项，否则不得动手操作。 5. 使用药品时，要求明确其性质及使用方法后，据实验要求规范使用。禁止使用不明确
药品或随意混合药品。 6. 实验中，保持安静，认真操作，仔细观察，积极思维，实验过程中必须有原始记录，
不得擅自离开岗位。 7. 实验室公用物品（包括器材、药品等）用完后，应归放回原指定位置。实验废液、废
物按要求放入指定收集器皿。 8. 爱护公物，注意卫生，保持整洁，节约用水、电、气及器材。 9. 实验完毕后，要求整理、清洁实验台面，检查水、电、气源，打扫实验室卫生。 10. 实验记录经教师签名认可后，方可离开实验室. 。
3 、 在实验全过程中，应集中注意力，独立思考解决问题。自己难以解释时 可请老师解答。
4 、 写实验报告：做完实验后，应解释实验现象，并作出结论，或根据实验 数据进行计算和处理。主要包括：a、目的，b、原理，c、操作步骤及实 验性质、现象，d、数据处理（含误差原因及分析），e、讨论，f、思考 题回答。
1、主要仪器： （1）旋光仪 （2）电子天平（感量0.0001g） 2、试剂：
⑴1％盐酸溶液 ⑵30％硫酸锌溶液。 ⑶15％亚铁氰化钾溶液。
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四、实验步骤
1.样品的处理 在电子天平上称取小麦粉2.5000g置于三角瓶中→加入
50mL 1%HCl混成浆状（不能有结块）→沸水浴中准确加热 15min→先加1mL 30% ZnSO4混匀→再加1mL 15%亚铁氰 化钾混匀→移至100mL容量瓶中加水定容混匀后过滤→弃去 最初15mL收集其余滤液。 2.旋光度测定