植物组织培养期末复习资料
植物组织培养 期末复习
绪论植物组织培养（Tissue culture）：是指用无菌方法使植物体的离体器官、组织和细胞在人为提供的条件下生长和发育的所有培养技术的总称，也称之为离体培养或试管培养。
器官：根、茎、叶、花、果实、种子；组织：花药、胚珠、胚、胚乳、形成层等。
或指将植物的离体器官、组织、细胞以及去除细胞壁的原生质体，放在离体无菌人工控制的环境条件下培养，对其进行克隆，使其生长、分化并成长为完整植株的过程。
组织（tissue)、器官（organ)或细胞培养：指利用生物体各部分组织、器官或细胞进行离体培养，使之形成愈伤组织或完整有机体的技术。
愈伤组织（callus）：在人工培养基上由外植体上形成的一团无序生长状态的薄壁细胞。
原生质体培养指将微生物或植物细胞游离成原生质体，在适宜培养条件下，依据细胞全能性使其再生细胞壁，并进行细胞分裂分化，形成完整个体的技术。
植物组织培养特点：①培养条件可以人为控制；②生长周期短，繁殖率高；③管理方便，利于工厂化生产和自动化控制()。
1、植物组织培养的理论基础—细胞全能性：植物体的每一个具有完整细胞核的细胞都具有该物种全部遗传的物质，在一定条件下具有发育成完整植物体的潜在能力。
2、植物细胞全能性的表达：①脱分化（dedifferentiation)：将已分化的不分裂的静止细胞，放在培养基上培养后，细胞重新进入分裂状态。
一个成熟的细胞转变为分生状态的过程叫脱分化。
②再分化（redifferentiation)：经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下可转变为各种不同的细胞类型，形成完整植株的过程。
离体的植物器官、组织、细胞→脱分化形成愈伤组织→再分化形成根、芽→再生植株。
4、组织培养植株再生的途径：1）、体细胞胚胎发生途径(胚状体发生途径)：是指在组织培养中起源于一个非合子细胞，经过胚胎发生和胚胎发育过程(经过原胚、球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚5个时期)，形成具有双极性的胚状结构，而发育成再生植株的途径。
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1.植物组织培养按培养对象分为______ 、 _______ 、________ 、 ________ 、________ 等几种类型。
2.一个己停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成耒分化的愈伤组织的现象称为n tv3.不同的灭菌剂其灭菌的机理一般不一样，次氯酸钙和次氯酸钠都是利用分解产生 _________ 来杀菌的；升汞是靠 ________ 来达到灭菌日的。
4.去除植物病毒的主耍方法是 _____ 和_______ 两种方法，当把二者结合起來脱毒效果最好5.在通过微茎尖培养脱毒时，外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定，一般以 __________ mm、带 ________ 个叶原基为好。
6.White培养基________ 浓度低，适合生根培养。
7.一个已停止分裂的成熟细胞转变为_________ 状态，并形成_________ 的现象称为“脱分化”。
8.BA/NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值低时促进 ________ 的生长，这时_________ 占主导地位；比值高促进_________ 的生长，这时 _________ 占主导地位。
9.进行植物组织培养最基本的前提条件是 _____ 。
1、植物组织培养的理论基础是植物细胞全能性。
2、组织培养实验室必要的设备有超净工作台、高压灭菌器、空调机、夭平、显微镜、蒸饱水发生器等。
3、糖在植物组织培养中是不可缺少的，它不但作为离体组织赖以生长的碳源，而且还能维持培养菇渗透压4、培养基灭菌一般在-108 kPa的压力下,锅内温度达121 °C ,维持20-30 min o5、在离体叶培养中，6・BA和KT利于芽的形成:24D利于愈伤纟FI织的形成6、在离体叶组织脱分化和再分化培养屮，茎和芽的分化主要有4个途径：方•接产生不泄芽、由愈伤组织产工不定芽、胚状体形成、形成球状体或小鳞茎等途径。
7、目前培育无病毒苗最广泛和最重要的一个途径是茎尖培养脱毒。
植物组织培养复习重点
组培复习材料一、名词解释1、培养基：是离体植物（外植体）赖以生长、分化的基础，是根据植物的需求，人工配制的含有各种营养成分的营养液。
2、液体培养：把细胞或生物体的一部分，置于液体培养基中使其发育，并不断振荡，使之均匀地在悬浊液中进行培养的一种方法。
3、种子培养：是成熟种子和发育不全的未成熟种子的无菌培养。
4、叶培养：从母体植株上将叶组织（包括叶原基在内）切下，放在无菌的人工条件下使其生长发育形成植株的技术。
5、热处理脱毒：在一定范围内，用高温处理可部分或完全钝化植物组织中的某些病毒而不伤害或很少伤害植物本身的脱毒方法。
6、花药培养：是把花粉发育到一定阶段的花药接种到培养基上，来改变花粉的发育程序，使其分裂形成细胞团，进而分化成杯状体，然后再生植株，或形成愈伤组织，由愈伤组织再分化成植株。
7、连续培养：是利用特别的培养容器进行大规模细胞培养的一种培养方式。
（培养过程中，不断注入新鲜培养基，排掉等体积用过的培养基，或者抽取悬浮培养物，使培养物的营养物质得到不断补充，从而保持其恒定体积的培养。
——8、分批培养：指把细胞分散在一定容积的培养基中进行培养，建立单细胞培养物的培养方式。
（细胞生长在固定体积的培养基中，当主要营养物质耗尽时，细胞的分裂和生长即停止。
）二、简答题1、MS培养基特点。
答：MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的，其特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的离子平衡溶液，具有高含量的氮、钾，尤其是硝酸盐用量大，还有一定数量的铵盐，其养分的数量和比例合适，不需要添加更多的有机附加物，就能满足植物组织对矿质营养的要求，加速愈伤组织和培养物的生长，当培养物就不转移时仍可维持其生存。
目前应用最广泛。
2、植物组培生产特点。
答：①和传统的生产方式相比，具有不占耕地、生产不受季节限制而且能够整年连续进行、不受灾害性天气和病虫害影响的特点；②具有人为可控性，可采用更适合于植物生长的“培养基”代替土壤提供养分和生长调节物质；③具有很高的生产效率。
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植物组织培养复习资料一、名词解释。
（每个3分，共24分）１、植物组织培养：在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或发育成完整植株的技术。
又称植物离体培养。
２、细胞的全能性：指植物体的任何一个有完整细胞核的活细胞都具有该植物的全套遗传基因和产生完整植株的潜在能力。
3、脱分化：离体培养条件下生长的器官、组织、细胞，经过细胞分裂或不分裂而恢复分生状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞过程。
4、外植体：从活体植物上切取下来，用以进行离体培养的那部分组织或器官。
5、单细胞培养：对分离的到的单个细胞进行培养，诱导其分裂增殖，形成细胞团，再通过细胞分化形成芽、根等器官或胚状体，直至长成完整植株的技术。
6、胚状体：亦称体细胞胚。
指在组培过程中，由植物体细胞所形成的类似于合子胚的结构。
它具有根、茎结构，能够一次性形成再生植株。
7、平板培养：是将悬浮培养的细胞接种到未固化的薄层培养基中，使其与培养基充分配合，再倒入培养皿中进行培养的方法。
8、人工种子：指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽，被包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中，从而形成能发芽出苗的颗粒状。
9、次生代谢产物：指植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物，其产生和分布通常有种属、器官、组织以及生长发育时期的特异性。
10、再分化：细胞经过脱分化形成的愈伤组织再次分化，进行器官形成，产丛生芽或胚状体，形成完整植株的过程。
11、无病毒苗:指不含该种植物主要危害病毒的苗木。
二、不定项选择1、培养室里的湿度一般保持在____C_____.A 30~40%；B 50~60%；C 70~80%；D 80~90%2. 下列不属于生长素类的植物激素是____A D____。
A Kt；B IAA；C NAA；D ZT3. 影响培养基凝固程度因素有_______A B C D__.A 琼脂的质量好坏；B 高压灭菌的时间；C 高压灭菌的温度；D 培养基的PH4. 活性炭在组织培养中的作用有_______ABC_。
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植物组织培养期末复习资料一、名词解释1.植物组织培养：是指在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术。
又称为植物离体培养、微型培养、试管培养。
2.愈伤组织：是指外植体因受伤或在离体培养时，其未分化的细胞和已分化的细胞进行活跃的分裂增殖而形成的一种无特定结构和功能的组织。
3.细胞全能性：指植物的每一个具有完整细胞核的活细胞，具有该植株的全部遗传信息，在一定条件下发育成完整植株的潜在能力。
4.胚状体：指在植物组织培养过程中，由细胞诱导分化形成的胚状结构，其功能类似于合子胚，可进一步再生成一个完整植株。
5.器官离体培养：是指对植物某一器官的全部或部分或器官原基进行离体培养的技术。
6.胚胎培养：指对植物的胚、子房、胚珠和胚乳进行离体培养，使其发育成完整植株的技术。
7.花药培养：是将花粉发育至一定阶段的花药接种到人工培养基上进行培养，以形成花粉胚或愈伤组织进而分化成植株的技术。
8.花粉培养：是将花粉从花药中分离出来进行离体培养的过程。
9.细胞培养：是指对植物器官或愈伤组织上分离出的单细胞（或小细胞团）进行培养，形成单细胞无性系或再生植株的技术。
10.原生质体培养：在人工控制条件下，将原生质体进行培养，使其形成完整植株的技术11.原生质体融合：也称体细胞杂交，指通过物理化学方法使原生质体融合，经培养获得具有双亲全部或部分遗传物质的后代的方法12.植板率：已形成细胞团的百分数（即每100个铺在平板上的细胞中有多少个能长出细胞团）13.脱分化〔dedifferentiation〕:指在离体培养条件下，已分化的细胞、组织和器官在人工诱导条件下，失去原来的结构和功能而恢复分生能力，回复到分生组织状态的过程。
（掌握）14.再分化（redifferentiation):指在离体培养条件下，经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下可转变为各种不同的细胞类型，形成完整植株的过程。
植物组织培养期末复习题
植物组织培养期末复习题一、填空题每空0.5分1.植物组织培养按培养对象分为__组织培养__、_器官培养_、_胚胎培养_、__细胞培养_、_原生质体培养__等几种类型.2.在分离原生质体的酶溶液内,需要加入一定量的Cacl2·2H2O和葡聚糖硫酸钾_其作用是保持原生质体膜的稳定,避免破裂.3.1902年德国植物生理学家Haberlandt第一次提出植物__细胞具有全能性_____的理论概念；1943年White提出植物细胞“____全能性_____”学说,并出版了植物组织培养手册,从而使植物组织培养成为一门新兴的学科;4.用烘箱迅速干燥洗净后的玻璃器皿时温度可以设在_80_℃的温度范围内,而若用它高温干燥灭菌则需在__150__℃的温度下1-3小时；烘干植物材料的温度是_60_℃.5.细胞全能性是指植物的每个细胞都具有该植物的__全部遗传信息__和___形成完整植株的潜在__的能力;6.1962年,Murashige和Skoog为培养烟草花叶细胞设计了__MS_培养基,其特点是_无机盐_浓度较高,且为较稳定的__________;7. 7.6-BA/NAA的高低决定了外植体的发育方向,比值低时促进_根_的生长,这时_脱分化_占主导地位；比值高促进_芽_的生长,这时_分化占主导地位.9.组织培养的特点是：__无菌_、__人工控制_、_离体_.10.1962年印度Guha等人成功地培养毛叶曼陀罗花药获得__单倍体植株_,这促进了花药和花粉培养的研究;11.在组织培养中,不耐热的物质用__过滤__法灭菌,而培养基常用___湿热灭菌__法灭菌.13.在组织培养中,非洲菊是靠_从生芽的方式进行繁殖的,而蝴蝶兰是以__原球茎_的方式进行快繁的;15.在通过微茎尖培养脱毒时,外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定,一般以__0.3-0.5__mm、带__1-2__个叶原基为好;16.原生质体的分离有_机械法_和__酶解法_两种方法.17.进行植物组织培养最基本的前提条件是__离体_;18.植物组织培养按培养过程中是否需要光,可分为___适光_培养和___嗜光培养;20.组织培养中有三大不易解决的问题,它们分别是__黄化污染、_褐化__、_玻璃化;21.White培养基_无机盐_浓度低,适合生根培养;22.在无毒苗的组织培养中,外植体的大小与其成活率成__正比_,而与脱毒效果成__反比__;23.一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态,并形成未分化的愈伤组织的现象称为"__脱分化___";25.茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为__普通茎尖__培养和_茎尖分生组织_培养两种类型;27.愈伤组织的形态发生有_器官发生__和__体细胞胚发生__两种情况;28.植物组织培养按培养的方式分为__液体_培养和__固体__培养;29.1960年,英国学者Cocking用__真菌纤维素酶酶解_分离原生质体成功,从而创新原生质体的培养技术;30.大多数植物组织培养的适宜温度范围是_23-25__℃,培养基的PH值是__5.8_.32.在组织培养中,ZT和GA必须用_过滤_法灭菌,而接种室空间采用_紫外线照射__或_甲醛熏蒸_法灭菌.33.不同的灭菌剂其灭菌的机理一般不一样,次氯酸钙和次氯酸钠都是利用分解产生_cl离子ClO-_来杀菌的；升汞是靠_汞离子_来达到灭菌目的;34.幼胚培养时,其发育过程有_早熟萌发___、___胚性发育__、_形成愈伤__三种方式;35.植物的胚胎培养,包括__胚胎__培养、幼胚培养、__胚乳__培养、胚珠_培养以及子房的培养.38.一个已停止分裂的成熟细胞转变为__分生_状态,并形成_愈伤组织_的现象称为"脱分化".39.由胚乳培养可以获得__单__倍体植株,经秋水仙素处理可以获得_二_倍体植株.40.去除植物病毒的主要方法是_理化法_和_组培法__两种方法,当把二者结合起来脱毒效果最好.41.花药培养是_器官__培养,花粉培养属于__细胞__培养,但二者的培养目的一样,都是要诱导花粉细胞发育成单倍体细胞,最后发育成__单倍体植株__.43.原生质体的融合可实现_体细胞_的杂交,其融合的方式分为__自然融合_和__人工诱导_两类.二、不定选择题每小题2分1.培养室里的湿度一般保持在_C_.A30~40%；B50~60%；C70~80%；D80~90%2.下列不属于生长素类的是__AD_;AKt；BIAA；CNAA；DZT3.影响培养基凝固程度因素有_ABD_.A琼脂的质量好坏；B高压灭菌的时间；C高压灭菌的温度；D培养基的PH4..活性炭在组织培养中的作用有_ABC_;A吸附有毒物质；B减少褐变,防止玻璃化；C创造黑暗环境,增加培养基的通透性,利于根的生长；D增加培养基中的养分；5.下列具有细胞全能性的细胞是：_ABCD_;A成熟的老细胞；B幼嫩的组织细胞；C愈伤组织细胞D番茄的受精合子6.第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是_B_：.A□Morel；BHaberland；C□Schleiden；D□White7.下列培养基中__C_无机盐的浓度最低;AMS培养基；BB5培养基；CWhite培养基；N6培养基8.高温易被破坏分解的植物激素是__AbD_;AIAA；BGA；CNAA；DZt9.从单个细胞或一块外植体形成典型的愈伤组织,大致经历__ACD三个时期;A诱导期；B潜伏期；C分化期；D分裂期10.下列不属于活性炭在组织培养中作用的是___D_.A吸附有毒物质；B减少褐变,防止玻璃化；C创造黑暗环境,增加培养基的通透性,利于根的生长；D增加培养基中的养分；11.下列不属于细胞分裂素的植物激素是_B_;A6-BA；BNAA；CZt；DKt12.植物组织培养的特点是_ABC_;A培养条件可人为控制；B生长周期短,繁殖率高；C管理方便；D产量大14..下列不属于大量元素的盐是_C_;ANH4NO3；BKNO3；CZnSO4.7H2O；DMgSO4.7H2O15.下面属于处于愈伤组织分裂期的特征是__ABCD_;A细胞分裂加快B正在分裂的细胞体积小,内无液泡C细胞的核和核仁增至最大D细胞中的RNA含量减少,16.在原生质体的培养中,渗透稳定剂的作用是：AA稳定原生质体的形态而不使其被破坏B支持作用C提供营养D调节PH值17.能打破种子休眠,促进种子、块茎、鳞茎等提前萌发的激素是：ABAGA；BIAA；CNAA；DZt3.下列实验中可能获得单倍体植株的是_BCD_;A小麦的茎尖培养；B番茄花药培养；C玉米胚乳培养；D玉米花粉培养18.在组培条件下,花粉的发育大致有下列几种途径：cdA营养细胞发育途径B生殖细胞发育途径C营养细胞和生殖细胞同时发育途径D花粉的均等分裂19.同一植株下列_B_部位病毒的含量最低.A叶片细胞；B茎尖生长点细胞；C茎节细胞；D根尖生长点细胞20.第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是__B_：.AMorel；BHaberland；CSchleiden；DWhite21.脱落酸ABA需要用__C__法灭菌;A灼烧灭菌；B干热灭菌；C过滤灭菌；D高压湿热灭菌；23.下列实验中可能获得三倍体植株的是__C__.A小麦的茎尖培养；B番茄花药培养；C玉米胚乳培养；D玉米花粉培养24.原生质体纯化步骤大致有如下几步：①将收集到的滤液离心,转速以将原生质体沉淀而碎片等仍悬浮在上清液中为准,一般以500r／min离心15min;用吸管谨慎地吸去上清液;②将离心下来的原生质体重新悬浮在洗液中除不含酶外,其他成分和酶液相同,再次离心,去上清液,如此重复三次;③将原生质体混合液经筛孔大小为40~100um的滤网过滤,以除去未消化的细胞团块和筛管、导管等杂质,收集滤液;④用培养基清洗一次,最后用培养基将原生质调到一定密度进行培养;一般原生质体的培养密度为104~106／ml;正确的操作步骤是：③①②④CA①②③④B②③①④C③①②④D③②①④25.下列不属于生长素类的植物激素是_A_D_.AKtBIAACNAADABA26.玉米素ZT需要用_C_法灭菌.A灼烧灭菌B干热灭菌C过滤灭菌D高压湿热灭菌三、判断题对的画“√”；错题画“×”,并改正;每小题2分1.一个已分化的细胞若要表现其全能性,首先要经历脱分化过程;√2.由胚乳培养获得的三倍体植株,也一定要进行染色体倍数的检查.√3.一般来说,光照强度较强,幼苗容易徒长,而光照强度较弱幼苗生长的粗壮;×4.经过花药培养所获得的植株都是单倍体;×5.2,4—D可用0．1mol／L的HCl助溶,再加蒸馏水定容.×6.环境的相对湿度可以影响培养基的水分蒸发,一般要求80％-90％的相对湿度;√7.幼年细胞和组织比成年细胞和组织诱导愈伤组织容易.√8.一般的说,PH值高于6.5时,培养基全变硬；低于5时,琼脂不能很好地凝固;√9.在配制6-BA母液时,要先加少量的1mol的HCl溶解,再加蒸馏水定容;√10.未成熟胚较小、较嫩、颜色浅,不易培养；成熟胚较大、较硬、颜色较深,易培养.√11.花器脱分化比茎叶容易；幼嫩的组织比成熟的老组织脱分化难;×12.通过子房的培养,即可能得到单倍体植株,又可能得到二倍体植株..√13.在配制NAA母液时,要先加少量的1mol的HCl溶解,再加蒸馏水定容;×15.环境的相对湿度过低会使培养基丧失大量水分,湿度过高时,易引起棉塞长霉,造成污染;√16.White培养基无机盐浓度低,适合生根培养;√17.由性细胞发育而成的胚叫做胚状体,而由体细胞发育而成的胚叫做合子胚.×18.2,4-D可用0．1mol／L的NaOH或KOH助溶,而后加无菌水定容;√20.二倍体细胞比单倍体细胞容易诱导愈伤组织.×21.在MS的培养基成分中,MgSO4.7H2O属于微量元素.×22.未成熟胚较小、较嫩、颜色浅,易培养；成熟胚较大、较硬、颜色较深,不易培养.×23.固体培养基可加进活性炭来增加通气度,以利于发根;×24.兰花可以通过芽丛分离的组培途径快繁,非洲菊通过原球茎增殖的途径快繁.×25.用于外植体、手、超净台等的表面消毒酒精浓度越大,消毒效果越好.×四、名词解释1.植物组织培养：是指在无菌和人工控制的环境条件下,利用适当的培养基,对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养,使其再生细胞或完整植株的技术;2.细胞全能性：指每一个植物细胞都携带有该植物的全部遗传信息,在适当条件下可表达出该细胞的所有遗传信息,分化出植物有机体所有不同类型的细胞,形成不同类型的器官甚至胚状体,直至形成完整植株的潜在能力;3.脱分化：是指离体培养条件下生长的细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂逐渐失去原来的结构和功能而恢复分生状态,形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞的过程;4.母液：在配制培养基之前,为了使用方便、简化操作、用量准确,减少每次配药称量各种化学成分所花费的时间和误差,常常将配制培养基所需无机大量元素、微量元素、铁盐、有机物、激素成分分别配制成比需要量大若干倍的浓缩母液5.驯化：指通过改变其遗传性状以适应新环境的过程6.外植体：把由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官叫做外植体7.愈伤组织培养：将一个细胞、一块组织或一个器官的细胞,通过去分化形成愈伤组织,并在体外培养使之再分化成植株的技术;8.单细胞培养.:亦称游离细胞培养freecellculfure;是指酵母菌、细菌等单细胞生物的培养,或取多细胞生物体上的一个细胞的无菌培养;9.灭菌：是指用物理或化学的方法杀灭全部微生物,包括致病和非致病微生物以及,使之达到无菌保障水平;10.玻璃化现象：指试管苗的一种生长失调症状,当植物材料进行离体繁殖时,有些培养物的嫩茎、叶片往往会出现半透明状和水渍状,这种现象称为玻璃化;其苗称为玻璃化苗;11.无病毒苗：指不含该种植物主要危害病毒的苗木;12.胚状体：离体培养条件下,没有经过受精过程,但是经过了过程所形成的胚状类似物,此现象无论在培养还是生殖细胞培养中均可以看到,因而统称为胚或胚状体;在离体、组织或过程中,由一个或一些体细胞,经过和发育过程,形成与相类似的结构13.细胞全能性：指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组,并具有发育成完整植株的潜在能力;14.指示植物：指示植物与被指示对象之间在全部分布区内保持联系的称为普遍指示植物；只在分布区的一定地区内保持联系的则称为地方指示植物;15.消毒：消毒是指杀死病原、但不一定能杀死细菌芽孢的方法;通常用化学的方法来达到消毒的作用;16.植物生长物质：是指一些在低浓度下能调节植物生长发育的微量有机物;植物生长物质包括五大类被公认的植物激素和其他内源植物生长调节物质;17.单倍体：只含有配子体染色体组数的植株;18.无菌操作：用于防止进入人体组织或其它无菌范围的操作技术称为无菌操作19.脱分化：离体培养条件下生长的器官、组织、细胞,经过细胞分裂或不分裂而恢复分生状态,形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞过程;21.花粉胚：花粉胚就是用花粉经过人工的组织培养而形成的幼胚,发育成的植株就只有正常胚一半的染色体组,所以由花粉胚发育成的植株不会产生种子;22.褐变：饲料在加工过程中或长期贮存于湿热环境下,其所含的氨基化合物如、氨基酸及醛、酮等与还原糖相遇,经过一系列反应生成褐色聚合物的现象称为褐变反应,简称褐变;24.指示植物法：25.再分化：离体培养的植物细胞和组织可以脱分化状态重新进行分化,形成另一种或几种类型的细胞、器官、组织、、甚至完整植株;26．平板培养：亦称平面培养;将琼脂或明胶等凝胶状固体培养基制成平面状,然后在此平面上培养微生物或多细胞生物的细胞、组织或器官,这种培养称为平板培养27．次生代谢产物：植物中一大类并排植物生长发育所需的小分子化合物,其产生和分布通常有种属、器官组织和生长发育期的特异性;次生产物在植物中的合成与分解过程称为此生代谢;28．人工种子：又称合成种子,指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽,被包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中,从而形成能发芽出苗的颗粒状;五、简答题1.植物组织培养有哪些特点答：植物组织培养的主要特点是采用微生物学的实验手段来操作植物离体的器官、组织和细胞;特点：①培养条件可人为控制②植物生长周期短,繁殖系数高③管理方便,不受季节环境条件影响,有利于工厂化生产和自动化控制;2.培养基一般包括哪些基本成分其作用是什么如何配制答：培养基的构成要素通常可分为：水分、无机盐类、有机营养成分、植物生长调节物质、天然物质、Ph、凝固剂等;水分是一切生物生命活动的物质基础,是很多生物化学反应的原料和代谢产物;无机盐类是构成植物细胞中核酸、蛋白质以及生物膜系统等必不可少的营养元素;有机营养成分为植物生命活动提供必不可少的碳源、氮源、能源等物质;植物生长调节剂可以促进植物组织的脱分化和形成愈伤组织,还可以诱导不定芽、不定胚的形成;天然有机添加剂通常富含有机营养成分或生理活性物质;pH过高时,培养基会变硬；pH过低时,则影响培养基的凝固;凝固剂是在配制固体培养基时使用,使培养基凝固;其他添加物是有时为了减少外植体的褐变,需要向培养基中加入一些防止褐化的物质;3.简述愈伤组织细胞分化;4.原生质体融合有哪几种主要方法答：植物原生质体最大特性是去掉细胞壁的裸细胞无论来源如何都具有彼此融合的能力1.自发融合2.诱发融合：a,NaNO处理b,高PH值—高浓度钙离子处理c,聚乙二醇PEG处理d,电融合3.化学融合5.组织培养中,pH值起什么作用如果pH值过高或过低会有什么后果6.植物组织培养技术主要包括哪些环节各环节的主要工作内容是什么答：1培养基配置技术：包括培养基的选择、母液配制、培养基配制、培养基灭菌;2培养材料制备灭菌技术：供体植物材料选择、外植体的选择和处理;3无菌接种技术：包括接种室的消毒、工作人员用工作服、口罩等的消毒、超净工作台的清洁与杀菌、操作工具的灭菌;4培养技术：主要是培养条件的控制,包括温度、光照、湿度等各种物理环境条件及培养基组成、PH、渗透压等各种化学环境条件;7.培养基、培养器皿和植物材料通常怎样灭菌答：1培养基一般采用湿热灭菌,如果培养基中的有些成分高温易分解,则可采用过滤灭菌;2培养器皿可采用湿热灭菌或干热灭菌;3植物材料一般采用药剂浸泡灭菌,具体操作如下：A外植体的预处理,对植物组织进行修整,去掉不需要的部分,并将外植体用流水冲洗干净;B用70%的酒精浸润材料30s左右;C用灭菌剂浸泡灭菌,灭菌时不时搅动,使植物材料与灭菌剂有良好的接触,若灭菌过程中加入数滴吐温,则灭菌效果更好;D植物材料用无菌水冲洗3--5次,以除去灭菌剂;8.由胚乳培养获得的植株,是否一定要进行染色体倍数的检查为什么9.花药培养产生的植株染色体倍性如何其产生的原因是什么10.为什么对脱毒处理后产生的植株必须进行病毒鉴定为什么已通过病毒特定病毒鉴定的无病毒苗还须重复鉴定11.使用植物生长物质应注意些什么12.为什么幼胚比成熟胚培养要求的培养基成分复杂13.胚胎培养技术在育种工作中有哪些应用14.试比较花药培养与花粉培养的异同;15.简述酶法分离原生质体的步骤.答：叶片表面消毒→去除表皮,将叶片切成小块→叶碎片放入含有酶和渗透压稳定剂的溶液中→摇床保温培养→原生质体沉到培养皿底部→除去酶溶液→将原生质体移入CPW清洗→离心→清洗基质两次→重悬浮于培养基16.影响马铃薯茎尖培养脱毒的因素有哪些17．简述人工种子生产步骤答：选取目标植物→从适合的外植体上诱导愈伤组织→将愈伤组织转移到液体培养基→愈伤组织在液体培养基中增生扩大→愈伤组织转移至无激素培养基→产生体细胞胚→包裹人工种皮→炼苗→温室大棚播种→获得目标植物18．愈伤组织的形态发生有哪两种情况并比较各自由此形成完整植株的不同;1、答：愈伤组织的形态发生可通过两种途径实现,一种是根芽器官直接分化形成植株,即器官发生途径；另一种是产生具胚芽、胚根的胚状体结构再形成植株,即体细胞胚胎发生途径;在器官发生途径中,芽或芽原基起源于培养组织中比较表层的细胞,即外起源,而根原基则发生于组织较深处,呈现单向极性,所形成植株的维管组织与外植体的维管组织联在一起;而在胚状体发生途径中,绝大多数体细胞胚起源于单细胞,形成的胚状体有双极性,维管组织与外植体没有联系;19．简述幼胚和成熟胚的区别;20．无病毒原种母株的保存及繁殖中最关键的问题是什么怎样解决21．NAA的中文名称是什么有何作用和特点答：NAA的中文名称叫萘乙酸,是一种人工合成的生长素;其在植物体内有促使茎和节间伸长、向性运动、顶端优势、器官脱落和生根的作用;在组织培养中NAA被用于诱导细胞的分裂和根的分化,并能与细胞分裂素互作促进茎芽的增殖;六、论述题1.请你设计一个组培实验室,说明你设计组培实验室各分室的作用及其所需主要仪器设备;2.请论述非洲菊的无菌苗的诱导、继代快繁、生根培养及其驯化移栽过程;3.某地区的一种马铃薯经多年的种植后,植株变的矮小,产量和品质都下降,怀疑是由病毒所至;请你设计一个病毒的鉴定和脱毒的技术方案;4.请阐述原生质体的分离、纯化和活力鉴定的技术过程;5.请分别列出七种仪器设备和七种玻璃器皿的名称,并说明它们的作用;6.请阐述用大蒜脱毒和快繁的程序;为什么试管苗在经过热处理和茎尖培养等方法脱毒后,还需要进行病毒的鉴定7.请论述非洲菊的无菌苗的诱导、继代快繁、生根培养及其驯化移栽过程;8.请论述香石竹的无菌苗的诱导、继代快繁、生根培养及其驯化移栽过程;9.现在需要你配制3升胡萝卜肉质根愈伤组织诱导培养基,其配方为MS＋2.4-D2mg/L＋KT0.2mg/L＋蔗糖3%＋琼脂0.7%,请你阐述培养基的配制和分装直到灭菌的全部技术过程;。
植物组织培养复习笔记【最新】
植物组织培养复习资料第一章绪论一、概念：植物组织培养：在无菌条件下，将离体的植物器官.组织，细胞以及原生质体. 培养在人1:培养基上和人工控制的环境中，使其生长，分化，增殖，甚至长出新的植株的过程和技术。
外植体：在无菌条件下，离体培养于人工培养基上的，用于达到某种培养目的的原始植物材料C培养基：根据植物营养原理和植物组织离体培养的要求而人匚配制的营养基质即为培养基。
细胞全能性：植物体每一个细胞都含有该植物全部的遗传信息，在合适的条件下，具有形成完整植株的能力。
脱分化：一个成熟细胞恢复到分生状态或胚性细胞状态的现象。
再分化：是脱分化细胞重新恢复细胞分化能力，沿若正常的发育途径，形成具有特定结构和功能的细胞C二、组织培养的类型，不同分类依据（根据培养材料不同）可分为植株培养，胚胎培养，器官培养，组织或愈伤组织培养.细胞或原生质休培养5类：（根据培养目的）可分为试管嫁接，试管受精，试管加倍，试管育种等：（根据培养方法）可分为平板培养，微室培养，悬浮培养，单细胞培养等：（根据培养过程）可分为初代培养和继代培养：（根据培养基类型）可分为固体培养和液体培养。
三、三个发展阶段的关键人物1,haberlandt-一于1902年提出植物细胞全能性理论，被称为“组织培养之父”。
2,white—于1943年出版《植物组织培养手册》。
3,murashine和skoog -- 在1962年筛选出MS培养基。
四、植物全能性表达的过程培养一►脱分彳~再分化一培养五、组织培养的特点：1、植物基础学科研究的良好系统。
2、生物技术的基础。
3、经济高效.管理方便，利于自动化。
4、技术含量高，实验误差小，人工控制能力强。
5、生长周期短，生长速度快，实验重复性好。
6、实验材料经济，来源单一。
六、缺点：需要设备负复柴，投入资金多，电能消耗大：对人员技术水平要求高，对实验场所要求也高，不能代替田间试验。
第二章植物组织培养设备与培养条件一、实验室的组成及主要仪器和设备准备室：干燥箱，高压灭菌锅，电子天平，酸度计，水浴锅，冰箱。
植物组织培养复习资料
1、植物组织培养：在无菌条件下，对植物组织，器官，细胞原生质体等离体活材料进行培养促使其生长发育，并再生成完整植株的过程。
2、外植体：植物组织培养过程中从活体植株上切去下来的用于离体培养的一切材料。
（如器官、组织、细胞、原生质体、种子等）3、愈伤组织：在离体培养的条件下，经过植物细胞脱分化和不断增殖所形成的无特定结构的细胞团或组织。
4、玻璃化现象：在组织培养过程中，培养物叶片或嫩梢呈透明或半透明的水渍状现象。
5、脱分化：一个成熟细胞转化为分生状态并形成为分化的愈伤组织的现象6、再分化：指脱分化形成的愈伤组织细胞在十一的培养条件下，又分化为胚状体，或直接分化出根和芽等器官形成完整植株的过程。
7、细胞的全能性：植物体的每一个生活细胞都具备母体的全套基因，在一定条件下可以发育成完整植株的能力。
8、人工种子：指通过组织培养技术，将植物的体细胞诱导在形态上和生理上均与合子胚相似的体细胞胚，然后将它包埋于有一定营养成分和保护功能的介质中，组成便于播种的类似种子的单位9、植物离体培养：利用植物细胞的全能性，在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术。
10、种子败育：是指由于植物自身的原因导致植物胚胎在发育过程中的任何一个阶段死亡或者即使幼胚发育为成熟种子胚、但在常规条件也不能萌发的现象。
11、双极性：表示具有双向极性电平的脉冲信号激素分类：生长素类细胞分裂素赤霉素脱落酸水杨酸植物组织培养{组织培养、器官培养？胚胎培养？细胞培养、原生质体培养}—--次生代谢物的生产、种植创新和品种选育、植物的快速繁殖、无病毒苗木的培育、人工种子的生产、种质资源的离体保存植物组织培养的大致过程是：在无菌条件下，将植物器官或组织（如芽、茎尖、根尖或花药）的一部分切下来，用纤维素酶与果胶酶处理用以去掉细胞壁，使之露出原生质体，然后放在适当的人工培养基上进行培养，这些器官或组织就会进行细胞分裂，形成新的组织。
植物组培复习资料
1、愈伤组织：原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞，在组培中则指人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。
2、植物细胞全能性：任何具有完整细胞核的植物细胞，都拥有形成一个完整植珠所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。
3、胚状体：是指在组织培养中起源于一个非合子细胞，经过胚胎发生和胚胎发育过程形成的具有双极性的胚状结构。
4、体细胞杂交：完全不经过有性过程，只通过体细胞融合制造杂种的方法称为体细胞杂交。
快速繁殖(微繁殖)：用组织培养的方法，使植物的部分器官、组织迅速扩大培养，并移到温室或农田繁殖出大量幼苗的繁殖方法。
6、再分化：愈伤组织形成不定芽或不定根或胚状体。
7、原生质体融合（体细胞杂交）：就是使分离下来的不同亲本的原生质体，在离体条件下通过诱导发生的质膜融合进而细胞核融合，像性细胞受精作用那样互相融合成一体的现象。
8、脱毒苗：是指不含该种植物的主要危害病毒，即经检测主要病毒在植物内的存在表现阴性反应的苗木。
9、愈伤组织培养:是指将母体植株上的外植体，接种到无菌的培养基上，进行愈伤组织诱导、生长和发育的一门技术。
10、外植体：在植物组织培养过程中，由植物体上切取的根、茎、叶、花、果、种子等器官以及各种组织、细胞或原生质体等统称为外植体。
11、热处理脱毒：利用病毒和植物细胞对高温忍耐性不同，选择适当的高温处理染病植株，使植株体内的病毒部分或全部失活，而植株本身仍然存活。
12、平板培养法：是把单细胞悬浮液与融化的琼脂培养基均匀混合，平铺一薄层在培养基底上的培养方法。
13、消毒：指杀死、消除或充分抑制部分微生物，使之不再发生危害作用。
14、玻璃化现象：在长期的离体培养繁殖时，有些试管苗的嫩茎、叶片呈现半透明水渍状，这种现象称为玻璃化。
15、初代培养基：是指用来第一次接种外植体的培养基。
16、脱分化：一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成未分化的愈伤组织的现象。
17、液体培养：指在进行培养时，培养基中不加琼脂等凝固剂，一般需要通过振荡等方法解决培养基的通气情况。
植物组织培养复习
植物组织培养复习1、概念：组织培养：利⽤植物离体器官、组织或细胞(包括原⽣质体)，在适宜的⼈⼯培养基上和⽆菌条件下进⾏培养，使其⽣长、增殖、进⽽发育形成⼩植株的⽅法。
也称之为离体培养（In vitro culture）。
愈伤组织：原指植物在受伤后，于伤⼝表⾯形成的⼀团薄壁细胞。
在组织培养中，指在⼈⼯培养基上由外植体长出来的⼀团⽆序⽣长的薄壁细胞。
外植体：由活植物体上切取下来的可以⽤于组织培养的组织或器官2、为什么说愈伤组织是最为常见的培养⽅式？原因：⼤部分组织培养经历callus再⽣途径长出植株；callus可以⽤于悬浮培养和原⽣质体培养。
3、组织培养的类型有哪些？a按培养⽅法：固体培养、液体培养、看护培养、微室培养、包埋培养等b按培养过程：初代培养、继代培养4、组织培养在园艺业（农业）上的应⽤有哪些？a倍性育种：花药培养、胚乳培养b突变体筛选：愈伤组织培养c创造新种质：细胞融合d克服胚败育：胚培养e植物性药物和⽣物制品的⽣产5、在组织培养技术的发展中做出巨⼤贡献的⼈。
6、⼀个正规的组织培养实验室应具备哪些基本仪器？有何⽤途？烘箱，冰箱，灭菌锅，超净⼯作台，酸度计，摇床，显微镜，天平，培养箱。
玻璃器⽫，微孔过滤器，细胞计数器，接种⽤具。
7、⼀个正规的组织培养实验室应具备哪些房间？洗涤室（区），制备室（区），灭菌室（区），贮放室（区），操作室（区），培养室（区），观察室（区），药品室（区）8、详细叙述组织培养过程中的基本技术规程洗涤，灭菌，⽆菌操作~9、培养基的类型有哪些？a按性质分：基本培养基，完全培养基b按状态分：固体培养基，液体培养基10、培养基的主要成分有哪些？各有何作⽤？a⽆机营养成分：⼤量元素（氮，磷，钾，钙，镁，硫）微量元素（硼、锰、锌、钼、铜、钴、氯、铁）b有机营养成分：含氮有机物（维⽣素、氨基酸）碳源和能源，植物激素c其他成分：活性炭，琼脂，抗⽣素，缓化剂11、配制培养基的基本步骤及注意事项有哪些？选择，配置（取样，加成分，测PH）12、什么是⼈⼯种⼦？有哪些特点与优点？⼈⼯种⼦：(artificial seeds)亦称体细胞种⼦。
植物组织培养复习资料(精缩版)
绪论课程基本情况植物组织培养：植物的离体器官、组织或细胞在人工制备的培养基上进行无菌培养并使其发育成完整植株的科学技术。
简称组培。
也称离体培养或试管培养。
理论依据——植物细胞全能性：任何有完整细胞核的植物细胞，具有全部的遗传信息，在一定条件下均具有发育成一个完整植株的潜在能力。
动植物细胞分化差异。
植物细胞全能性必须满足的条件：1、要使这些细胞处于离体条件下，解除植物体其余部分对这些细胞的抑制性影响；2、要给予它们适当的刺激，就是给予它们一定的营养物质和激素的作用。
植物组织培养过程（无菌环境操作）：外植体→（脱分化）→愈伤组织→（再分化）→试管苗→→植株外植体（离体器官）：由活植物体上切取下来的可以用于组织培养的组织或器官（包括胚、芽茎尖、叶、花瓣等）。
初代培养：指外植体的最初培养。
继代培养：将初代培养得到的培养体移植于新鲜培养基中进行再培养，称为继代培养脱分化：由高度分化的植物器官、组织或细胞经过离体培养，产生无结构的愈伤组织或细胞团的过程。
再分化：脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化出根或芽等器官的过程。
组织培养类型：根据所培养的植物材料的不同：组织培养；细胞培养；器官培养；胚胎培养；原生质体培养愈伤组织：原来是指植物在受伤之后，在伤口表面形成的一团薄壁细胞。
在组织培养中，它是指在培养基上由培养物产生的无序的薄壁细胞团。
愈伤组织培养：将一个细胞、一块组织或一个器官的细胞，通过去分化形成愈伤组织，并在体外培养使之再分化成植株的技术。
（最常用）悬浮细胞培养：不断搅动或摇动的液体培养基中培养单细胞或小细胞团的培养方式。
（主要目的生产有用产物）。
器官培养：对植物的根、茎、叶片、花器等各个器官进行离体培养。
（用于苗木快速繁殖）。
茎尖分生组织培养：使用茎尖无病毒分生组织为材料进行培养。
（脱毒培养）。
原生质体培养：去除细胞壁、裸露的原生质体的培养。
（创建种间或属间新品种）。
根据培养过程：初代培养；继代培养；生根培养：根据培养基的物理状态（培养条件）：固体培养；液体培养；半固体培养；双层培养：器官再分化两种方式：器官发生型；胚胎发生型器官发生型：由愈伤组织不同部位产生不定芽或不定根，通常是单极性。
植物组织培养复习资料
植物组织培养复习资料1、植物组织培养：在⽆菌和⼈⼯控制的环境条件下，利⽤⼈⼯培养基，对植物的胚胎、器官、组织、细胞、原⽣质体等进⾏离体培养，使其再⽣发育成完整植株的过程。
由于外植体已脱离了母体，植物组织培养⼜叫植物离体培养。
2、植物组织培养的特点：⽆菌条件下进⾏；多数情况下是利⽤成分完全不确定的⼈⼯培养基进⾏时；材料为离体状态；可以不断增殖，并通过调整成分控制实验的⽬的；在封闭的容器中进⾏，⽓体通过封⼝材料进⾏交换；环境、温度、光照强度都可⼈为控制。
3、植物组织培养的类型：按培养对象分：植株培养：对完整植株材料的离体⽆菌培养；胚胎培养：从果实或⼦房中分离出成熟或未成熟的胚进⾏离体⽆菌培养的技术；器官培养：以植物的根、茎、叶、花、果等器官为外植体的离体⽆菌培养技术；组织培养：对植物体的各部分组织如茎尖分⽣组织、形成层、⽊质部、韧⽪部、表⽪组织、胚胎组织和薄壁组织等，或对植物器官培养产⽣的愈伤组织进⾏培养，⼆者均通过再分化诱导形成植株；细胞培养：对植株器官或愈伤组织上分离出的单细胞、花粉单细胞或很⼩的细胞团进⾏培养，形成单细胞⽆性系或再⽣植株的技术；原⽣质体培养：对⽤酶、物理等⽅法除去植物细胞壁的、裸露的、有活性的原⽣质体团进⾏培养的技术；按培养过程分：初代培养、继代培养；按培养基的物理状态分：固体培养、液体培养。
4、植物组织培养在农林中的应⽤：植株离体快繁、⽆病毒苗⽊培育、次⽣代谢物的产⽣、培育新品种或创造新品种、植物种质资源的离体保存、⼈⼯种⼦、基因⼯程的应⽤。
5、外植体：植物组织培养中作为离体培养材料的器官或组织的⽚段。
在继代培养时，将培养的组织切段移⼊新的培养基时，这种切段也称外植体。
6、愈伤组织：指在植物受伤后的伤⼝处或在植物组织培养中外植体切⼝处产⽣的⼀团不定形的薄壁组织。
7、脱分化：指离体培养条件下⽣长的细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂，逐渐失去原来的结构和功能⽽恢复分⽣状态，形成⽆组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞的过程。
植物组织培养 复习资料
第一章绪论植物组织培养类型根据培养材料不同分为：（1）完整植株培养：对幼苗和较大植株等的培养。
（2）胚胎培养：包括成熟胚、幼胚、子房、胚珠等的培养。
（3）器官培养：包括离体根、茎、叶、果实、种子、花器官的培养。
（4）组织培养：如分生组织、薄壁组织、输导组织培养。
（5）细胞培养：指对单细胞或较小的细胞团进行培养。
（6）原生质体培养：指对去掉细胞壁后所获得的原生质体进行培养。
根据再生途径分为：（1）器官发生途径（2）体细胞胚胎发生人工种子：是指植物离体培养产生的胚状体或不定芽被包裹在含有营养和保护功能的人工胚乳和人工种皮中，从而形成能发芽出苗的颗粒体。
作为繁殖材料。
植物组织培养技术的应用：1、优质种苗的快速无性繁殖1）无性繁殖作物及不易繁殖作物的快速繁殖2）通过茎尖培养生产脱毒健康种苗2、用于植物遗传育种包括种质资源离体保存；花粉花药培养产生单倍体；胚乳培养产生三倍体；胚培养拯救杂种胚克服远缘杂交障碍；原生质体培养进行体细胞杂交；植物体细胞无性系变异诱导和筛选；用于植物基因转移操作等。
3、大规模植物细胞、组织和器官培养生产次生代谢物质4、用于植物生长发育理论研究，包括生理学、病理学、胚胎学和细胞与分子生物学等第二章植物组织培养的基本技术组培实验室：包括化学实验室或准备室、接种室以及培养室三部分，并且按顺序排列。
在化学实验室与接种室之间应留有缓冲空间。
（1）准备室：用于培养器皿的清洗、培养基的配制、分装和灭菌、试管苗的出瓶及整理等工作。
冰箱、天平、高压灭菌锅、pH计、干燥箱、实验台、水槽、凉干架、药品柜、离心机、水浴锅、微波炉、电炉、磁力搅拌器、蠕动泵、移液器、各种玻璃器皿（烧杯、量筒、容量瓶、试剂瓶、三角瓶等）及培养基分装用品等。
（2）接种室：植物材料的灭菌、接种以及培养物的继代转接等。
超净工作台、紫外灯、小推车、搁架、磁盘、接种工具（各种镊子、解剖刀、手术剪、普通剪刀接种针、酒精灯、手持喷雾器、细菌过滤器等）等。
植物组织培养期末考试习题参考答案
仅供参考植物组织培养复习题一、名词解释1植物细胞全能性：任何具有完整细胞核的植物细胞，都拥有形成一个完整植珠所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。
2初代培养：芽、茎段、叶片、花器等外植体从植物体上分离下来的第一次培养的过程。
3继代培养：初代培养后，将组织转移到新的培养基上进行培养的都称为继代培养。
4体细胞胚：植物组织培养过程中能够产生与正常合子胚相似的结构，由体细胞发育而成，也称为胚状体。
5胚的培养：在无菌条件下将胚从胚珠或种子中分离出来，置于培养基上进行离体培养的方法。
6外植体：从植物体上分离下来的用于离体培养的材料。
7驯化现象：植物组织经长期继代培养，要加入生长调节物质，其后加入少量或不加入生长调节物质就可以生长，这种现象称为“驯化”现象。
8玻璃化苗：当植物材料不断地进行离体繁殖时，有些试管苗的嫩茎、叶片往往会呈半透明水迹状，这种现象通常称为玻璃化，这种出现玻璃化现象的试管苗成为玻璃化苗。
9愈伤组织：在人工培养基上由外植体组织的增生细胞产生的一团无定形的疏松排列的薄壁细胞，类似分生组织。
10脱分化：已分化好的细胞在人工诱导条件下，恢复分生能力，回复到分生组织状态的过程。
11再分化：脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相同的分化过程，重新形成各类组织和器官的过程。
12人工种子：人工种子是指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中所形成的能发芽出苗的颗粒体。
13褐化现象：褐化是指在接种后，外植体表面开始褐化，释放出褐色物质，有时甚至会使整个培养基褐化的现象。
14器官培养：以植物器官作为外植体进行离体培养，包括离体的根、茎、叶、花器和果实的培养。
15原生质体培养：用酶及物理方法除去细胞壁，对所得到的原生质体进行培养的方法。
16基本培养基：人工配制的仅能满足外植体最基本生长需要的培养基，如MS、MT、White培养基。
17完全培养基：在基本培养基的基础上添加各种各样的附加物（激素、有机物质等），具备可使其最大限度地生长和繁殖的条件，含有满足各种营养要求的培养基二、填空、选择、判断、简答、问答1植物组织培养的定义、特点、发展简史（1）定义：把无菌操作分离植物体的一部分，接种到培养基上，在人工控制的条件下（包括营养、激素、温度、光照、湿度）进行培养，使其产生完整植株的过程。
植物组织培养复习资料
组培复习资料第一章绪论1、植物组织培养：是指将植物的离体器官、组织、细胞以及去除细胞壁的原生质体，放在人工控制的无菌环境条件下培养，使其生长、分化并成长为完整植株的过程。
2、植物细胞组织培养：指在离体(in vitro)条件下利用人工培养基(medium)对植物器官、组织、细胞、原生质体等进行培养，使其长成完整植株的过程3、组织培养材料：◆器官：根、茎尖、叶、花、果实、种子等◆组织：形成层、表皮、皮层、胚、胚乳等◆细胞：大孢子、小孢子、体细胞◆原生质体基本特点：无菌、离体材料、人工培养基与培养环境4、根据组织培养材料分类：器官培养、茎尖分生组织培养、愈伤组织培养、细胞培养、原生质体培养5、组织、器官或细胞培养：指利用生物体各部分组织、器官或细胞进行离体培养，使之形成愈伤组织或完整有机体的技术。
6、愈伤组织: 指在人工培养基上由外植体（explant）形成的一团无序生长的薄壁细胞。
7、外植体（explant）: 在植物组织培养中，由活体（in vivo）植物体上提取下来，接种在培养基上的无菌细胞、组织、器官等。
8、脱分化（dedifferentiation）：一个成熟细胞或分化细胞转变成为分生状态的过程，即形成愈伤组织的过程。
9、再分化（redifferentiation）：植物成熟细胞经历了脱分化之后，即形成愈伤组织之后，由愈伤组织再形成完整的植株的过程。
10、原生质体培养：指将微生物或植物细胞游离成原生质体，在适宜培养条件下，依据细胞全能性使其再生细胞壁，并进行细胞分裂分化，形成完整个体的技术。
11、培养方式:固体培养、液体培养◆培养物量:大量培养、微量培养◆培养过程中是否需要光: 光培养、暗培养◆培养方法不同: 平板培养、微室培养、悬浮培养、单细胞培养◆培养器官的不同：花药培养、胚珠培养、根培养、茎尖培养12、细胞全能性（cell totipotengcy）学说：植物体的每一个细胞都携带有一套完整的基因组，在一定条件下具有发育成为完整植株的潜在能力。
金科院《植物组织培养》期末复习资料
植物组织培养强化版题型构成：一、填空题每空一分，共30分二、名词解释5题，共10分三、简答题7题，40分四、问答题，一题共20分。
两题中任选一题做一、填空题，30分1、植物离体快速繁殖是指利用植物组织培养技术，将植物的外植体、、、等进行离体培养在短时间内获得大量遗传性一致的个体的方法。
2、原生质体分离的主要方法有：机械法、酶解法。
3、植物组织培养前外植体灭菌时常用的消毒剂的种类有：、、、对植物外植体的毒害分别表现为：、、。
4、植物组培室的空间构成？5、培养基的灭菌方法有哪些类型？紫外线灭菌，高压蒸汽灭菌，熏蒸灭菌，过滤膜灭菌6、如何调节渗透压？通常利用蔗糖来调节渗透压。
胚越小要求越高的渗透压；随着胚的发育啧要求逐步降低蔗糖浓度。
曼陀罗心型胚期要求的蔗糖浓度为0.8%，鱼类型要求蔗糖浓度为1%~0.5%甘露醇或山梨醇作为渗透压稳定剂调节7、植物生长调节剂如何配置，如何溶解？a．若不溶于水，则应先把他们溶解在很少量的适当溶剂中，然后再加蒸馏水到最终容积（生长素一般溶于1mol/L的NaOH或95%酒精中，细胞分裂素一般溶于1mol/L的HCL中。
8、影响组培苗移栽成活的主要因素有哪些？9、体细胞胚胎发生的方式有哪两种形式？10、离体植物培养的几个重要概念11、体细胞杂种的鉴定方法有哪些？形态和育性鉴定；细胞学和分子细胞学鉴定；生化鉴定；分子生物学鉴定12、花粉培养的最佳取样时间是什么？单核期，尤其是单核中，晚期（单核靠边期13、单细胞分离采用的植物材料，如何维持渗透压？二、名词解释复习1、植物组织培养：在无菌条件下，对植物组织，器官，细胞原生质体等离体活材料进行培养促使其生长发育，并再生成完整植株的过程。
12、人工种子：指通过组织培养技术，将植物的体细胞诱导在形态上和生理上均与合子胚相似的体细胞胚，然后将它包埋于有一定营养成分和保护功能的介质中，组成便于播种的类似种子的单位。
15、体细胞杂交：在离体条件下通过两个亲本体细胞原生质体的融合以及随后将融合产物培养成杂种植株的过程。
植物组织培养复习资料
植物组织培养复习资料植物组织培养知识点一：《植物组织培养概述》概述一、名语解释植物组织培养细胞全能性细胞分化细胞脱分化细胞再分化器官发生状体发生二、填空1、组织培养的理论依据是：（）2、植物组织培养的类型有：（）、（）、（）、（）、（）等。
3、1943年，（）提出了植物细胞（），并出版了《植物组织培养手册》，从而使植物组织培养为一门新兴学科。
答案：1、细胞全能性学说2、愈伤组织培养、器官培养、胚培养、细胞培养，原生质体培养3、white，“全能性”学说三、简答题1、简述植物组织培养的理论依据？2、植物组织培养的类型？答案：1、植物组织培养的理论依据是细胞全能性学说，即植物体的每一个细胞都携带有一套完整的基因组，并具有发育成为完整植株的潜在能力。
2、愈伤组织培养、器官培养、胚培养、细胞培养、原生质体培养。
四、论述题论述组织培养在农业上的应用。
知识点二：植物组织培养实验室的基本设备和操作技术一、名词解释植物生长调节物质外植体外植体污染外植体褐变玻璃化现象二、填空1、组织培养实验室必要的设备有（）、（）、（）、（）、（）、（）、（）、（）。
2、实验室中常用移液管容量有（）、（）、（）、（）、（）、（）。
3、培养基成分主要包括（）、（）、（）、（）、（）、（）、（）。
4、糖在植物组织培养中是不可缺少的，它不但作为离体组织赖以生长的（），而且还能（）。
5、琼脂在固体培养时，是作为培养基的（），一般用量为（）。
6、常用的生长素有（）、（）、（）、（）等，常用的细胞分裂素（）、（）、（）。
7、外植体污染原因从病源分面主要有（）和（）两大类。
8、防褐变的措施有（）、（）、（）、（）。
9、驯化的目的（）。
10、外植体灭菌一般先用（），再用（）浸泡（） min。
答案：1、超净工作台、高压灭菌器、空调机、天平、显微镜、蒸馏水发生器、酸度计等。
2、0.1ml、0.2ml、0.5ml、2ml、5ml、10ml3、无机营养、维生素类、氨基酸、有机附加物、植物生长调节物质、糖类、水和琼脂等。
组织培养技术期末复习资料
组织培养技术期末复习资料1．目前植物组织培养的农业应用主要是种苗快速繁殖和无病毒苗生产。
2. 组织培养的理论依据是：植物细胞的全能性理论。
3植物组织培养的类型有：器官培养、组织培养、胚胎培养、细胞培养、原生质体培养。
4. 1943年，white 提出了植物细胞“全能性”学说，并出版了《植物组织培养手册》，从而使植物组织培养成为一门新学科。
5. 组织培养实验室必要的设备有药品及仪器柜、无菌台、实验台、搁架（水槽）、培养架、消毒设备、接种器械、（冰箱、空调、排气扇、天平等）。
6. 接种室要求室内密封性好、长时间保持无菌，墙面密闭光滑，门为滑动拉门，并设置紫外线灭菌灯，防止出入时带进杂菌。
7. 紫外灯灭菌利用200~300波长左右的紫外光，他的灭菌强度弱，须离被灭菌物不超过1.2米。
8. 培养架一般长为1.2米，宽为0.5米（5层）。
9. 植物组织培养，从接种到商品苗可以分为五个阶段，他们是入选品种外植体的筛选和获取、外植体灭菌（接种）、初代培养、继代培养（继代扩繁）、诱导出芽生根、炼苗、驯化和包装。
二、名词解释1.植物组织培养：指使用无菌方法使植物的离体器官、细胞、原生质体等在人为提供的条件下进行培养，使其长成完整的植株。
2.细胞全能性：植物的大多数由核细胞在适当的条件下都能由单个细胞经过分裂、生长、分化在适宜条件下具有发育成完整植株的能力。
三、问答题1.根据你所学的知识和所查阅的文献，综述植物组织培养在生产上的应用，都有哪些成功的例子？答：自从Morell952年发现采用微茎尖培养方法可得到无病毒苗(virus free)后，微茎尖培养就成为解决病毒病危害的重要途径之一。
兰花、园林植物的生产。
2.你认为植物组织培养在当前的农业生产上有什么价值？为什么？答：价值：保持母本优良性状、实现脱毒和扩繁，培养高价植物和稀有植物。
提高农业生产经济效益。
植物组织培养可以人为控制，产量高，生长周期短，繁殖率高，管理方便，经济效率高。
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植物组织培养期末复习资料2011.05.191、植物组织培养：是指在无菌和人工控制的环境条件下，利用人工培养基，对植物得胚胎、器官、组织、细胞、原生质体等进行离体培养，使其再生发育成完整植株的过程。
又称植物离体培养。
2、外植体：用于培养的植物胚胎、器官、组织、细胞、原生质体通常称为外植体。
3 、愈伤组织：是指在植物受伤后的伤口处或在植物组织培养中外植体切口处产生的一团不定形的薄壁组织。
4、初代培养：将外植体进行的第一次培养，称为初代培养。
5、继代培养：将初代培养得到的培养体移植于新鲜培养基中这种反复多次移植的培养，称为继代培养。
6、植物细胞全能性：一个细胞所具有的产生一个完整植株的固有能力称做细胞的全能性。
7、细胞分化：是指细胞的结构和功能从一种类型转变为另一种的过程。
8、脱分化：一个成熟细胞转变为分生状态并形成未分化的愈伤组织的现象称为脱分化也称去分化。
9、再分化：离体培养的植物细胞和组织可以由脱分化状态重新进行分化，形成另一种或几种类型的细胞、组织、器官，甚至形成完整植株，这个过程（现象）称为再分化。
10、胚状体（或体细胞胚）：在组织培养中，起源于一个非合资细胞，经过胚胎发生和胚胎发育过程形成具有双极性的胚状结构，叫胚状体或体细胞胚。
11、体细胞胚与合子胚的比较：（1）、体细胞胚是由愈伤组织或胚性细胞团的表面细胞起源的，所处的发育条件与合子胚不相同。
（2）、在自然界，不定胚早期分裂顺序与合子胚也不完全相同：即使是合子胚本身，他们的早期胚胎发育过程也常偏离正常的方式。
（3）、合子胚和不定胚一般都能发育成正常的成熟胚。
与合子胚相似，球形期后的体细胞胚呈现一种固定的极性，根极指向愈伤组织或胚性细胞团的中央，茎芽极朝外，与合子比，成熟体细胞胚的进一步发育过程及形态特征也是相当正常的。
（4）、多数情况下，体细胞胚并不具有一个明显的胚柄。
（5）、与合子胚不同的是，在培养中形成的体细胞胚常常具有两个以上的子叶。
12、培养基：是植物组织培养的物质基础，也是组织培养能否成功的重要因素之一。
13、茎段培养：是指不带芽和带有侧芽或叶柄的茎切段，包括幼茎和木质化的茎切段，进行离体培养的技术。
14、茎段培养方法：（1）、外植体的选取和消毒：（2）、接种：（3）、培养基：15、植物激素对茎段培养的影响：（1）、生长素：（2）、细胞分裂素：（3）、赤霉素：16、植物愈伤组织培养：是指在人工培养基上诱导植物外植体产生一团无序生长的薄壁细胞及对其培养的技术。
17、愈伤组织的形成过程：（1）、启动期（诱导期）：是外植体细胞进行分裂准备的时期。
在这一时期外植体细胞大小虽然没有多大变化，但细胞内合成代谢活跃，RNA含量迅速增加，细胞核体积明显增大，其长短由一系列内外因素决定。
（2）、分裂期：经过诱导期之后，外植体外层细胞开始迅速分裂，不过外植体中间部分的细胞不分裂，形成了一个静止的芯。
其细胞分裂的速度大大超过了细胞伸张的速率，细胞体积迅速变小，逐渐回复到分生状态（脱分化），脱分化细胞不断进行分裂，从而形成了愈伤组织。
（3）、分化期（形成期）：外植体细胞经过诱导期和分裂期后形成了无序结构的愈伤组织的时期。
其细胞的平均大小相对稳定，不再减少，细胞分裂由原来局限在组织外缘的平周分裂转为组织内部较深层细胞的分裂，结果形成瘤状或片状的拟分生组织。
18、影响愈伤组织培养的因素：（1）、外植体（2）、培养基（3）、植物生长调节剂（4）、培养环境条件19、细胞培养：是指在离体条件下对单个细胞或小的细胞团进行培养使其增殖的技术。
20、单细胞的分离方法（2种）：（1）、由植物器官分离单细胞（两种方法）：①机械法：细胞不致受到酶的伤害；无须质壁分离，对生理和生化研究来说是很理想的；但细胞产量低、细胞结构会受到一定得伤害；②酶解法：细胞结构一般不会受到大的伤害，细胞产量高，在某些情况下，有可能得到海绵薄壁细胞或栅栏薄壁细胞的纯材料；但使用其法，对酶的用量要求比较严格，否则容易造成细胞损伤；（2）、由培养组织中分离单细胞。
21、看护培养法：是指用一块活跃生长的愈伤组织块来看护单细胞，使单细胞持续分裂和增殖，而获得由单细胞形成的细胞系的培养方法。
（用途：诱导形成单细胞系。
用看护培养效果较好，已在单细胞培养中广泛采用。
不足之处是不能在显微镜下直接观察细胞的生长过程。
愈伤组织块给单细胞传递了某些生物信息，或为单细胞的生长繁殖提供了某些物质条件。
）22、微室培养法：是将接种有单细胞的少量培养基，置于微室中培养，使单细胞生长繁殖的培养方法。
（用途：主要用来观察细胞生长、分裂、形成细胞团的过程。
运用这种技术可对单细胞的生长与分化、细胞分裂的全过程及胞质环流的规律等进行深入分析连续观察。
微室培养还可以将接种有单细胞的少量液体培养基置于培养皿中，形成一薄层，在静止条件下进行培养。
微室培养的优点是能在显微镜下追踪观察单细胞分裂增殖形成细胞团的全过程，但缺点是培养基少，营养和水分难以保持，PH值变动幅度大，培养细胞仅能短期分裂。
）23、单细胞培养的影响因素：①、培养基②、细胞密度③、植物激素④、温度：一般控制在25℃；⑤、PH值：单细胞培养的PH值一般控制在5.2~6.0范围内；⑥、CO2含量。
24、细胞悬浮培养方法：（1）、分批培养：是指将一定量的细胞或细胞团分散在一定量得液体培养基中进行培养，目的是建立单细胞培养物。
【分批培养细胞数目增生长的变化呈一条S形曲线：①、延迟期②、指数生长期③、（细胞迅速增殖的）直线生长期④、（细胞增殖减慢的）减缓期⑤、（停止生长的）静止期。
】（2）、连续培养：是利用特制的培养容器进行大规模细胞培养的一种培养方式。
①、封闭型连续培养是指新鲜培养液和旧培养基以及等量进出，并把排出的细胞收集起来，放入培养系统继续培养，所以培养系统中的细胞数目不断增加。
②开放型连续培养（分为两种方式：化学恒定式、混度恒定式）：是指在连续培养期间，新鲜培养液的注入速度等于细胞悬浮液的排出速度，细胞也随悬浮液一起排出，当细胞生长达到稳定状态时，流出的细胞数相当于培养系统中的新细胞的增加数。
25、悬浮培养细胞的同步化：细胞同步化是指同一悬浮培养体系的所有细胞都同时通过细胞周期的某一特定时期。
实现细胞同步化的几种方法：①分选法②低温处理③饥饿法④抑制剂法26、细胞增殖的测定：鲜重、干重、密实体积和数量是细胞增殖的衡量标准。
（1）、细胞鲜重：细胞培养物过滤，洗去培养基，真空抽虑，称重。
（2）、细胞干重：以每毫升培养物或106个细胞的重量表示。
60℃干燥48小时，称重。
（3）、细胞密实体积：将体积已知、均匀分散的悬浮液放入一个 15ml 的离心管中，2000转下离心，用每ml培养液中细胞总体积的ml数表示。
（4）、细胞计数：5％铬酸或0.25％果胶酶使悬浮细胞团分散。
用血细胞计数板进行细胞计数。
27、人工种子：又称合成种子、人造种子或体细胞种子，是指利用细胞的全能性，将植物离体培养产生的体细胞或具有发育成完整植株能力的分生组织（如胚状体、芽和茎段等）包埋在含有营养物质和具有保护功能的外壳内，形成适宜条件下能够发芽出苗的颗粒体。
28、人工种子的结构：体细胞胚、人工胚乳、人工种皮3部分组成。
29、人工种子的意义：人工种子不仅能像天然种子一样可以贮存、运输、播种、萌发和长成正常植株，而且还有许多独特的优点：（1）、名贵植物的快速繁殖人工种子是的一些自然繁殖困难的名优珍贵品种等在短期内提供足够的种源。
（2）、固定杂种优势人工种子在本质上属于无性繁殖，其继代培养一般不出现性状分离，即使外植体来自杂合体亦是如此，可以保持杂种优势。
（3）、快速高效的繁殖方式天然种子在农业生产上受季节限制，而体细胞胚可常年在实验室获得，还可用生物反应器大规模生产。
人工种子的生产还不受季节限制，一年四季都可在室内生产和扩大繁殖，可及时为农业生产提供种源。
（4）、控制植物的生长发育与抗逆性人工种子技术在理论上成本低、贮藏运输方便、无玻璃化缺陷，减少了移栽驯化过程和生产周期短等优点。
人工种子能繁殖大量的从人工杂交和遗传工程植株中筛选出来的优良基因型。
人工种子还可以为不育的和不稳定的基因型提供一种繁殖方法。
30、人工种子的包埋：包埋人工种子的方法主要有液胶包埋法、干燥包裹法和水凝胶法。
液胶包埋法是将胚状体或胚功能类似物悬浮在一种粘滞的流体胶中直接播入土壤。
干燥法是将胚状体经干燥后再用聚氧乙烯等聚合物进行包埋的方法。
水凝胶法是指通过离子交换或温度突变形成凝胶来包裹材料的方法。
常用以海藻酸钠来包埋的离子交换法，具体操作如下：在MS培养基中加入0.5%--5.0%的海藻酸钠制成胶状，加入一定比例的胚状体，混匀后，用滴管将胚状体连同凝胶吸起，再滴到2%氯化钙溶液中停留10—15分钟，其表面即可完成结合，形成一个个圆形的具有刚性的人工种子。
而后以无菌水漂洗20分钟，终止反应，捞起晾干。
31、植物病毒病：是指有病毒和类似病毒的微生物如类病毒、植原体、螺原体以及类细菌等引起的一类植物病害。
32、无病毒苗培育的意义（源自课件）（1）. 去除病毒危害，提高作物品质与产量。
采用生物、物理、化学等途径防治病毒病收效甚微，甚至毫无成效。
而通过组织培养的方法可以脱除严重患病毒植物的病毒种类，提高产量、质量。
因此，到60至70年代在花卉、蔬菜和果树等得到广泛的应用。
（2）. 减少环境污染，有利于保护环境栽培去病毒植物可减少药剂的使用。
33、植物脱毒的意义（源自书上）：培育和栽培无病毒种苗是防治作物病毒病的根本措施。
同时栽培无病毒种苗不仅会增强作物的适应能力和抗逆能力、提高作物的产量和品质，而且脱毒种苗的应用还能消减生化农药的使用，对生态环境的保护、健康农产品的生产和农业的可持续发展也具有十分重要的意义。
34、植物脱毒的方法：（1）、热处理病毒 (2)、茎尖培养脱毒 (3)、微体嫁接脱毒(4)、其它脱毒方法（花器官培养脱毒、珠心胚培养脱毒）35、茎尖培养脱毒原理感染病毒植株的体内病毒的分布不均匀，病毒的数量随植株部位及年龄而异，越靠近茎顶端区域的病毒的感染程度越低，生长点(分生组织约0.1~1.0mm区域)则几乎不含或含病毒很少。
茎尖培养脱毒，由于其脱毒效果好，后代稳定，所以是目前培育无病毒苗最广泛和最重要的一个途径。
36、生物学检测的方法生物学检测也称指示植物检测，是最早应用于植物病毒检测的方法。
植物病毒都有一定得寄主范围，并在某些寄主上表现特定的症状，借此可作为鉴别病毒种类的标准。
对某些或某几种病毒及类似病原物或株系具敏感反应并表现明显症状的植物称为指示植物。
生物学检测在植物病毒检测中具有观察的直观性、结果的可靠性和准确反映病毒生物学特性的特点，是病毒检测的传统方法，目前仍广泛应用。