中药制剂检测技术 第四章 中药制剂的杂质检查技术

四、杂质检查的意义
中药制剂质量的优劣主要从两方面来评价： ①药物本身的疗效及其毒副作用。
②药物所含杂质的多少。
杂质的存在严重影响中药制剂的有效性、安全性和稳定性 为确保中药制剂安全有效、稳定可控，必须对所含杂质进 行严格检查。
五、杂质检查的方法
对照法（限量检查法）：供试液与待检杂质对照液在相同
条件下处理，比较反应结果，判断供试品中所含杂 质是否
生硫化氢，与重金属作用生成黄色到棕黑色的金属硫化物混悬液，与一定量的 标准铅溶液同法处理后所呈颜色比较，判断供试品中重金属是否超过限量。
pH=3.5 CH3CSNH2 + H2O CH3CONH2 + H2S pH=3.5 Pb2+ + H2S PbS↓ + 2H+
操作
25ml
注意事项
（1）标准砷溶液的制备：用三氧化二砷配制贮备液，临用前稀释而成。 （2）标准砷溶液的用量：以2ml为宜。 （3）碘化钾和氯化亚锡的作用：主要是使五价砷还原为三价砷 。 （4）醋酸铅棉花：用于吸收硫化氢气体 。应松紧适宜、保持干燥 。
（5）锌粒：无砷锌粒。锌粒大小以能过一号筛（粒径2mm左右）为宜。
地奥心血康中重金属检查
地奥心血康为薯蓣科植物黄山药和穿山龙薯蓣的根茎提取物。 《中国药典》2010年版采用第二法检查其重金属，并规定含重金属不得过 百万分之二十。

《中国药典》收载有两种砷盐检查法：古蔡氏法和二乙基二硫代氨基甲酸 银法 （Ag-DDC法）
一、古蔡氏法
检查原理
砷盐与锌和盐酸作用产生砷化氢气体 ；
甲管
纳 氏 比 色 管
3支
标准铅溶液 2ml 醋 酸盐缓冲液（pH3.5）2ml溶 剂适量 （共25ml） 醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml 供试液适量 （共25ml） 标准铅溶液 2ml
乙管
丙管
醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml
与乙管同量的供试品及溶剂适量（共25ml）
显色与判断：再于甲、乙、丙三管中分别加硫代乙酰胺试液2ml，2分钟
结果判断
三、应用实例
九味羌活丸总灰分和酸不溶性灰分测定
《中国药典》2010年版规定，九味羌活丸应进行“总灰分”和“酸不溶性 灰分”检查。要求总灰分不得过7.0%，酸不溶性灰分不得过2.0%。
总灰分测定：取九味羌活丸5袋，粉碎，过二号筛，混合均匀后，取3～ 5g，置炽灼至恒重的坩埚中，称定重量（准确至0.01g），缓缓炽热，注 意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至500～600℃，使完全灰化并 至恒重，称定残渣重量，计算供试品中总灰分的含量（%）。
与适量的水使溶解成30ml，分取溶液10ml，加盐酸4ml与水14ml，依法
检查砷盐。已知标准砷溶液（每1ml相当于1μg的As）取用量为2ml，计 算砷盐限量。
6 CV 1 10 2.0 ×106 = 3（即百万分之三） 6 解：L = ×10 = 10 W 2.0
30
答：阿胶中砷盐的限量为百万分之三。
2HBr + AsH（HgBr）2（黄色） AsH3 + 2HgBr2
AsH3 + 3HgBr2
3HBr
+ AsH（HgBr）3（棕色）
比较供试品砷斑与标准砷斑颜色的深浅，判定供试品中砷盐是否
超过限量。
供试品砷斑颜色比标准砷斑颜色浅，则供试品含砷盐符合规定； 供试品砷斑颜色比标准砷斑颜色深，则供试品含砷盐不符合规定。
酸不溶性灰分测定：将“总灰分测定”中所得的灰分，在坩埚中小心加 入稀盐酸约10ml，用表面皿覆盖坩埚，置水浴上加热10分钟，表面皿用热 水5ml冲洗，洗液并入坩埚中，用无灰滤纸滤过，坩埚内的残渣用水洗于 滤纸上，并洗涤至洗液不显氯化物反应为止。滤渣连同滤纸移至同一坩埚 中，干燥，炽灼至恒重。根据残渣重量，计算供试品中酸不溶性灰分的含 量（%）。
无毒副作用，但影响药物的稳定性和疗效的物质，如水、铁
盐等。 无毒副作用，也不影响药物的稳定性和疗效，但能反映药物 的生产工艺和贮存状况是否正常的物质，如氯化物、硫酸盐 等。
二、杂质的来源
中药制剂中的杂质主要来源于三个方面：
由中药材原料中带入； 在生产制备过程中引入：使用试剂、溶剂及与生产设 备接触等； 贮存过程中引入：外界条件的影响使中药制剂中的化
后，同置白纸上，自上向下观察，当丙管中显出的颜色不浅于甲管时，乙管中 显示的颜色与甲管比较，不得更深。如丙管中显出的颜色浅于甲管，应取样按 第二法重新检查。
二、 炽灼法
适用于需先灼烧破坏，使与有机分子结合的重金属游离出来，再取炽灼残 渣进行检查的供试品。中药及其制剂的重金属检查多采用此法。
检查原理：将供试品炽灼破坏后，加硝酸处理，使有机物分解、破坏完
重金属：在规定实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠试液作用而显色
的金属杂质。如银、铅、汞、铜、镉等。中药制剂生产过程中接触铅的机会
较多，且铅在人体内易蓄积中毒，故重金属检查一般以铅为代表。
《中国药典》2010年版有三种重金属检查法：
一、硫代乙酰胺法 检查原理：硫代乙酰胺在酸性（pH3.5的醋酸盐缓冲液）条件下水解产
检砷装置
溴化汞试纸
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与AsH3生成砷斑
醋酸铅棉花 标准砷溶液（或供试液）
吸收H2S气体
酸性氯化亚锡、盐酸、 碘化钾、锌粒、水
使五价砷还原为三价砷
A．磨口锥形瓶 B．磨口塞（中有一孔） C．导气管（装醋酸铅棉花60mg） D．有机玻璃旋塞 E．有机玻璃旋塞盖
操作
（1）导气管的准备： 在导气管C中装入醋酸铅棉花60mg（高度为60～ 80mm），再于旋塞D的顶端平面上放一片溴化汞试纸（试纸大小以能覆 盖孔径而不露出平面外为宜），盖上旋塞盖E并旋紧，即得。 （2）标准砷斑的制备：精密量取标准砷溶液2ml，置A瓶中，加盐酸5ml 与水21ml，再加碘化钾试液5ml与酸性氯化亚锡试液5滴，在室温放置10分 钟后，加锌粒2g，立即将照上法装妥的导气管C密塞于A瓶上，并将A瓶置 25～40℃水浴中，反应45分钟，取出溴化汞试纸，即得。 （3）供试品砷盐检查：取按各品种项下规定方法制成的供试品溶液，置 A瓶中，加盐酸5ml与水适量使成28ml，照标准砷斑的制备，自“再加碘 化钾试液5ml”起，依法操作。将生成的砷斑与标准砷斑比较，不得更深。
CV L（%）= W ×100%
杂质最大允许量 杂质限量（ppm）= ×106 样品量
L（ppm）=
C：杂质标准溶液的浓度
V： 杂质标准溶液的体积 W：样品量
CV ×106 W
七、实例解析
阿胶砷盐限量的计算
取本品2.0g，加氢氧化钙1g，混合，加少量水，搅匀，干燥后先用 小火烧灼使炭化，再在500～600℃炽灼使完全灰化，放凉，加盐酸3ml
三、硫化钠法
适用于能溶于碱而不溶于稀酸（或在稀酸中即生成沉淀）的 药物的重金属限量检查。 检查原理：在碱性条件下，药物中的重金属离子，与硫化钠试液作用，生成
有色的金属硫化物混悬液，与一定量标准铅溶液经同法处所呈现 的颜色进行比较，判断供试品中重金属是否超过规定限量。
Pb2+ + Na2S
NaOH PbS↓ + 2Na+
操作方法：除另有规定外，取供试品适量，加氢氧化钠试液5ml与水20ml溶解
后，置纳氏比色管中，加硫化钠试液5滴，摇匀，与一定量的标准 铅溶液同样处理后的颜色比较，不得更深。
三、应用实例
冰片中重金属检查
《中国药典》2010年版收载的冰片为人工合成品，又称合成龙脑。 《中国药典》2010年版采用第一法对冰片进行重金属检查，并规定冰片含 重金属不得过百万分之五。
全，然后按第一法进行检查。
操作：取供试品一定量，缓缓炽灼至完全炭化，放冷，加硫酸0.5～1.0ml
使恰湿润，用低温加热至硫酸除尽后，加硝酸0.5ml，蒸干，至氧 化氮蒸气除尽后，放冷，在500～600℃炽灼使完全灰化，放冷，加 盐酸2ml，置水浴上蒸干后，加水15ml，滴加氨试液至对酚酞指示 液显中性（微粉红色），再加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml，微热溶 解后移置纳氏比色管中，加水稀释成25ml，按照第一法检查。
（6）反应时间：45分钟。 （7）反应温度：控制在25～40℃之间。
课堂活动
导气管中的醋酸铅棉花为什么要松紧适宜，保持干燥？
二、二乙基二硫代氨基甲酸银法
本法简称Ag-DDC法，既可检查药品中砷盐限量，又可准确测定砷盐含量。
重金属检查注意事项
标准铅溶液（每1ml相当于10μg 的Pb）应临用前配制，用量为2ml。配制与贮 存标准铅溶液用的玻璃容器，均不得含有铅。 显色条件：最佳酸度为pH=3.5。最佳显色时间为2分钟。 若供试品溶液有颜色，可在对照液管中加稀焦糖液或其他无干扰的有色溶液， 使之与供试液颜色一致 。 供试品中如含高铁盐，影响检查，可在供试液管和对照液管中分别加入维生素 C 0.5～1.0g，将高铁离子还原成为亚铁离子消除干扰。 炽灼温度必须控制在500～600℃，温度过低灰化不完全，重金属不能全部游离 ，温度在700℃以上，多数重金属盐都有不同程度的挥发损失 。 为了消除盐酸或其他试剂可能夹杂重金属的影响，在配制供试品溶液时，如使 用的盐酸超过1.0ml（或与盐酸1.0ml相当的稀盐酸），氨试液超过2ml，或加 入其他试剂进行处理者，除另有规定外，对照液中应取同样同量的试剂置瓷 皿中蒸干，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml与水15ml，微热溶解后，移置纳氏 比色管中，加标准铅溶液一定量，再用水稀释成25ml。
灰分称酸不溶性灰分（泥砂等外来掺杂物）。
灰分检查
总灰分检查
酸不溶性灰分检查
一、总灰分测定法
供试品粉碎过二号筛 残渣称重
取2～3 g称重
计算总灰分含量
500～600℃炽灼至恒重 结果判断 将计算结果与 该品种项下的 规定值进行比 较，判断供试 品中酸不溶性 灰分是否超过 规定限量。
m1 总灰分含量% = ×100% m2
学成分发生氧化、水解、分解等变化而产生。
三、杂质的分类
一般杂质：自然界中分布广泛，普遍存在于药材中，在大 多数中药制剂的生产和贮存过程中均易引入的杂 质。如酸、碱、泥砂、氯化物、硫酸盐、铁盐、 重金属砷盐等。 特殊杂质：药物在生产和贮存过程中，由于药物本身的性 质、生产方法和工艺的不同可能引入或产 生的 杂质是某种（类）特定药物中特有的杂质。如大 黄流浸膏中的土大黄苷、阿胶中的挥发性碱性物 质等。
超出限量。不需测定杂质的准确含量。 准确测量法（含量测定法）：可测定杂质的准确含量 。 灵敏度法：是以检测条件下反应的灵敏度来控制杂质限量 的方法 。
六、杂质限量及计算
杂质限量：药物中所含杂质的最大允许量称为杂质限量。通常
用百 分之几（%）或百万分之几（ppm）表示。
杂质限量（%）=
杂质最大允许量 ×100% 样品量
灰分
总灰分（生理灰分）：纯净的样品高温灼烧后遗留的灰分称总 灰分（药材本身所含的各种盐类）。每一种中药材或制剂 剂，在无外来掺杂物时，一般都有一定的总灰分含量范围， 此范围内的总灰分不属于杂质。如果总灰分超过含量限度范 围，则说明有泥砂（主要为硅酸盐）等外来杂质掺入 。
酸不溶性灰分：总灰分加盐酸处理，得到的不溶于盐酸的
第一节 灰分检查法 第二节 重金属检查法 第三节 砷盐检查法 第四节 注射剂有关物质检查法
第五节 农药残留量检查法
第六节 甲醇量检查法 第七节 可见异物检查法 第八节 特殊杂质检查法
李萍、崔海燕老师编写
一、杂质定义
中药制剂的杂质：系指中药制剂中存在的无治疗作用 或影响中药制剂的疗效和稳定性，甚至对人体健康有害的物 质。 包括： 毒性物质，如重金属、砷盐、黄曲霉毒素等。
As3 +
3Zn + 3H+
AsH ↑ + 3Zn
3
2+
（反应快）
+ AsO3 3+ 3Zn + 9H
AsH ↑ + 3Zn
3
2+
+ 3H2O （反应快） + 4H2O （反应慢）
+ + 4Zn + 11H AsO34
AsH ↑ + 4Zn
3
2+
砷化氢与溴化汞试纸作用，生成黄色至棕色的砷斑；
m1：为炽灼后残渣的重量（g）；
m2：为炽灼前供试品的重量（g）。
二、酸不溶性灰分测定法
供试品粉碎过二号筛 残渣加稀盐酸
取3～5g称重
无灰滤纸过滤
500～600℃炽灼至恒重 计算酸不溶性灰 分含量
滤渣干燥称重
m1 酸不溶性灰分含量% = ×100% m2
m1：为酸不溶性残渣的重量（g）；
m2：为炽灼前供试品的重量（g）。