组织固定液是什么
环保病理组织固定液
环保病理组织固定液组织固定是生物学与医学研究中不可或缺的手段，传统的以甲醛为主体配方的固定液在让我们窥见生物体秘密的同时，却让研究者饱受了甲醛毒性给我们的灾难。
尤其在大量使用甲醛作为组织标本固定液的病理科，取材室内空气中弥散的甲醛浓度高出安全浓度数百至数千倍！在追求和谐生活的今天，我们该换换空气了甲醛是健康的一大杀手，是被世界卫生组织确认为对人体有毒害、致癌、致畸形的化学物质，是公认的变态反应源，在我国有毒化学品控制名单上位居前列。
甲醛对人体的危害有三种：刺激作用：甲醛对皮肤和黏膜有很强的刺激作用，可使人眼部干涩、流泪、视力模糊、鼻黏膜水肿、咽喉不适、皮肤瘙痒。
毒性作用：可引起头晕、失眠、疲倦、注意力不集中、记忆力下降等神经系统损害，腹痛、恶心、呕吐、全身无力等消化系统损害，咳嗽、胸闷、气喘等呼吸系统损害。
还可导致免疫力下降、月经紊乱、不孕症、新生儿畸形等，儿童和孕妇对其尤为敏感。
致癌作用：动物实验证明甲醛既是致癌剂又是促癌剂，有可能导致鼻咽癌、肺癌、皮肤癌、白血病、结肠癌等。
10克甲醛可使人致死。
甲醛一直是污染病理科及周边环境的有害物质，病理科工作人员因此患化学性鼻炎的几率几乎是100%，在英国一份对病理工作人员的疾病调查报告中指出，病理工作人员患恶性淋巴瘤的概率远高于其它医疗部门人员。
组织固定液是以乙醇、多元醇、食品添加剂为主体的新一代复合组织固定液，不含甲醛、甲醇，是无毒无害的水性溶液，完全符合环保要求，克服了福尔马林（甲醛溶液）对环境的污染和对人体健康的危害，是福尔马林的更新换代产品。
使用说明：组织标本固定液与采用富尔马林的使用方法没有差别，适于HE组化和免疫组化染色，使用前无需稀释。
固定液渗透力与富尔马林相近；经固定的标本组织弹性好，便于切片；固定效果良好，细胞结构清晰；染色鲜艳，背景对比度强。
1 使用时，先往容器中注入固定液，然后再放入标本，固定液的体积为标本体积的5-10倍。
2 标本固定前应按规范切开。
固定液和组织的比例依据
固定液和组织的比例依据
固定液和组织的比例是根据所需固定的组织的大小和类型来确定的。
一般而言，常用的固定液和组织的比例是10:1，即10部分的固定液与1部分的组织混合。
然而，不同的组织类型可能需要不同的比例。
以下是一些常用的组织固定液比例：
1. 大体组织：对于较大的器官或动物组织，通常使用10%缓冲福尔马林溶液（10% buffered formalin）固定。
这意味着将10部分的缓冲福尔马林溶液和1部分的组织混合。
2. 细胞和细胞簇：对于大部分细胞和细胞簇的固定，一般使用4%缓冲福尔马林溶液。
这意味着将4部分的缓冲福尔马林溶液和1部分的细胞或细胞簇混合。
3. 骨骼组织：对于骨骼组织的固定，常用的固定液是10%缓冲福尔马林溶液或中性缓冲福尔马林溶液。
需要较长的固定时间。
除了以上常用的固定液比例外，还有其他特殊组织和细胞类型可能需要不同的固定液比例。
此外，固定时间和固定温度也会影响固定效果，需要根据具体实验要求进行调整。
因此，最好根据实验需要和参考相关文献确定合适的固定液和组织比例。
组织固定液的使用
谈谈固定液的使用作者: liza3(站内联系TA)发布：2013—01-11当前，应用于固定试剂的种类较多,它们对于固定不同的组织成分起着不同的作用，因此我们在使用时应该了解不同固定剂的效能,才能合理的固定组织。
根据Bencroft的分类法，将不同的固定剂分为四种类型:Ⅰ类:醛类，甲醛，戊二醛,多聚甲醛，丙烯醛，已二醛，丙二醛等.Ⅱ类:氧化剂类，四氧化锇（奥酸），高锰酸钾,重铬酸钾等。
Ⅲ类：蛋白变性类,甲醇，乙醇，醋酸等.Ⅳ类：其他,氯化汞，苦味酸等.上述四种类型的固定剂，最常使用的是甲醛，其余的也在其它病理技术方面中用到。
下面根据使用的需要，将着重介绍几种常用的固定剂。
(1）甲醛甲醛商品名为福尔马林，一般市售的含甲醛37-40%，由甲醛气体饱和于水而成,比重为1。
12。
它也可以稳定的固体形式存在,它的成分为高分子量的聚合体，称为多聚甲醛。
甲醛溶液较难纯化，在每批市售商品中，都含有不少的杂质如甲醇,这种在组织化学方法当中，能使酶钝化,影响其反应。
甲酸,它可使固定液变酸，在陈列标本或长时间固定的组织，由于酸的作用，往往细胞核染色欠佳。
甲醛有效固定作用的要点是，在蛋白质末端基团之间形成交联链。
参与甲醛固定蛋白质的基团，主要为氨基，亚氨基及酰氨基，肽，胍基，羟基，SH和芳香环.甲醛与组织蛋白类的反应是多样和复杂的，因为它能和多种不同的功能基团结合，在多数情况下在其间形成桥键。
甲醛有这种交联的功能,也是它的缺点，在用甲醛固定过的组织中,需要做免疫组化的，往往提倡用酶消化或热抗原修复法来使蛋白与甲醛交联的醛键断裂开，以利于后来的染色.甲醛可配成简单的或混合的固定液，最简单和最容易掌握的方法,就是取10ml甲醛液，加水90ml，这就是10％的福尔马林。
当然,现在使用的固定液要求较为严格些,最好是使用缓冲福尔马林固定液,这将有利于后来的免疫组化染色的需要.从组织学的观点来说,甲醛是一种良好的固定剂,它有很多的优点:1. 组织收缩较少,损伤少，保存固有物质好。
组织固定液
组织固定液组织固定液北京华越洋生物------------------------------------------------------AAF固定液500ml 固定液40% 室温,避光,12个月组织化学中细胞或组织切片的固定。
主要由乙醇、冰乙酸、甲醛等组成。
常用于快速脱水和固定以及冷冻切片的快速固定。
AAF固定液5L 固定液40% 室温,避光,12个月组织化学中细胞或组织切片的固定。
主要由乙醇、冰乙酸、甲醛等组成。
常用于快速脱水和固定以及冷冻切片的快速固定。
Davidson's fixative 100ml 固定液40% 室温,避光,12个月Davidson's fixative 500ml 固定液40% 室温,避光,12个月Bouin's固定液100ml 固定液40% 室温,避光,6个月活检标本的固定、媒染剂、适用于脂肪较多的组织标本。
主要由PA溶液、甲醛、乙酸组成。
Bouin's固定液500ml 固定液40% 室温,避光,6个月活检标本的固定、媒染剂、适用于脂肪较多的组织标本。
主要由PA溶液、甲醛、乙酸组成。
改良乙醇Bouin固定液100ml 固定液40% 室温,避光,12个月固定肾活检组织,组织学制备固定液,亦可以很好的保存糖原主要由乙醇、甲醛、乙酸乙酯等组成。
改良乙醇Bouin固定液500ml 固定液40% 室温,避光,12个月固定肾活检组织,组织学制备固定液,亦可以很好的保存糖原主要由乙醇、甲醛、乙酸乙酯等组成。
Carnoy固定液100ml 固定液40% 室温,避光,12个月又称卡诺氏固定液,RNA\DNA染色的固定,糖原的固定,能清除血性标本,可以用于细胞学固定Carnoy固定液500ml 固定液40% 室温,避光,12个月又称卡诺氏固定液,RNA\DNA染色的固定,糖原的固定,能清除血性标本,可以用于细胞学固定Carnoy固定液Ⅱ100ml 固定液40% 室温,避光,12个月又称卡诺氏固定液,RNA\DNA染色的固定,糖原的固定,能清除血性标本,可以用于细胞学固定Carnoy固定液Ⅱ500ml 固定液40% 室温,避光,12个月又称卡诺氏固定液,RNA\DNA染色的固定,糖原的固定,能清除血性标本,可以用于细胞学固定BS固定液500ml 固定液40% 室温,6个月细胞核染色固定,尤其适用于DNA染色。
组织固定液说明书
组织固定液说明书【产品名称】通用名称：组织固定液商品名称：10%中性缓冲福尔马林固定液-即用型【包装规格】3ml、5ml、10ml、15ml、30ml、50ml、10L、20L【型号】ANBF01【预期用途】用于新鲜组织样本的固定。
【作用原理】固定是将组织浸入化学溶剂，使细胞内的物质尽量保持其生活状态时的结构和位置，并尽量保存组织中的抗原，使其不被破坏或扩散。
醛类固定液是一种交联性组织固定剂，主要通过使蛋白质分子发生交联而产生固定作用，中性福尔马林固定液采用磷酸氢二钠、磷酸二氢钠调节其pH值至中性，能最大限度地保护组织抗原，固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的甲醛溶液，是生物组织最常用的固定液。
【主要组成成分】主要由甲醛、磷酸氢二钠，磷酸二氢钾组成。
【储存条件及有效期】室温、防潮、防晒、阴凉处密封保存，储存条件下有效期24个月。
【适用仪器】染色结果适用于光学显微镜观察【样本要求】本试剂盒适用于新鲜生物组织。
【检验方法】1、将组织标本固定液编号、写上姓名等；2、组织标本的体积与组织固定液体积的比例为1：4，将离体组织及时浸入组织固定液中，一般不超过5分钟，固定时间为2至12小时。
【检验方法的局限性】1、含有微量甲酸,导致固定液酸变,影响染色。
2、不能固定尿酸和糖类物质。
3、容易挥发,污染环境,可导致标本干涸。
【产品性能指标】1、PH值：6.8～7.5，且瓶间差异不大于0.2，批间差异不大于0.2。
2、甲醛含量：4%～4.2%。
3、常温下，经固定液固定3h后的组织，经切片后在显微镜下观察，应细胞核清晰，无收缩现象。
【注意事项】1、注意使用时通风；2、忌新旧液混合使用；3、避免使用时接触皮肤、粘膜；4、本品仅用于体外诊断。
(完整版)常用的组织固定液及配制
常用固定液及其配制固定液分单纯固定液和混合固定液。
1甲醛（formaldehyde）是无色气体，易溶于水成为甲醛溶液。
易挥发，且有强烈刺激气味，常用得是37％～40％得甲醛溶液，商品名为福尔马林（formalin）。
用作固定的浓度习惯为10％福尔马林（即1份甲醛溶液加9份水配制而成），实际含甲醛4％。
10％福尔马林渗透力强，固定均匀，对组织收缩少。
对脂肪、神经及髓鞘、糖等固定效果好，是最常用的固定剂。
经福尔马林固定时间长的组织，易产生黑色的沉淀，称福尔马林色素。
2 乙醇无色液体，易溶于水，它除可作为固定剂外，还可作为脱水剂，对组织有硬化作用。
固定用一般是80%~95%浓度，乙醇渗透力校弱，它能溶解脂肪，核蛋白被沉淀后，仍能溶于水，因此核的着色不良。
3 中性甲醛液（混合固定液）甲醛（浓）120ml，加蒸馏水880ml,磷酸二氢钠（NaH2PO4?H2O）4g，磷酸氢二纳（Na2HPO4）13g。
此液固定效果比单纯10％福尔马林要好。
4 AF液（混合固定液）95％乙醇90ml，甲醛(浓)10ml。
也有配方是95％乙醇85ml，甲醛（浓）10ml，冰醋酸5ml。
此液除有固定作用外，兼有脱水作用，因此，固定后可直接入95％乙醇脱水。
以上4种固定液中，以中性甲醛为首选，其次为10％福尔马林，乙醇应尽量不用。
yzbai wrote:（1）10%甲醛：对组织渗透性强，固定均匀。
对组织膨胀约5%，经酒精脱水时有较大的收缩。
能保存脂肪，不能沉淀核蛋白及白蛋白，长期用其固定的组织使组织变为酸性，不利于染色，特别是细胞核的着色。
经自来水冲洗6~24小时后，可以使其酸碱中和，并减少结晶。
（2）4%多聚甲醛：对组织穿透性好，组织收缩小，对大多数抗原物质保存较好，特别是对脂肪和各种酶的固定效果更好。
固定的时间不宜太长，以24小时以内为宜，适用于免疫组织化学染色。
几种细胞固定方法选择最佳固定液标准是：（1）最好地保持细胞和组织的形态结构；（2）最大限度地保存抗原的免疫活性。
组织固定液的使用
谈谈固定液的使用作者: liza3(站内联系TA)发布: 2013-01-11当前，应用于固定试剂的种类较多，它们对于固定不同的组织成分起着不同的作用，因此我们在使用时应该了解不同固定剂的效能，才能合理的固定组织。
根据Bencroft的分类法，将不同的固定剂分为四种类型：Ⅰ类：醛类，甲醛，戊二醛，多聚甲醛，丙烯醛，已二醛，丙二醛等。
Ⅱ类：氧化剂类，四氧化锇（奥酸），高锰酸钾，重铬酸钾等。
Ⅲ类：蛋白变性类，甲醇，乙醇，醋酸等。
Ⅳ类：其他，氯化汞，苦味酸等。
上述四种类型的固定剂，最常使用的是甲醛，其余的也在其它病理技术方面中用到。
下面根据使用的需要，将着重介绍几种常用的固定剂。
（1）甲醛甲醛商品名为福尔马林，一般市售的含甲醛37—40%，由甲醛气体饱和于水而成，比重为1.1 2。
它也可以稳定的固体形式存在，它的成分为高分子量的聚合体，称为多聚甲醛。
甲醛溶液较难纯化，在每批市售商品中，都含有不少的杂质如甲醇，这种在组织化学方法当中，能使酶钝化，影响其反应。
甲酸，它可使固定液变酸，在陈列标本或长时间固定的组织，由于酸的作用，往往细胞核染色欠佳。
甲醛有效固定作用的要点是，在蛋白质末端基团之间形成交联链。
参与甲醛固定蛋白质的基团，主要为氨基，亚氨基及酰氨基，肽，胍基，羟基，SH和芳香环。
甲醛与组织蛋白类的反应是多样和复杂的，因为它能和多种不同的功能基团结合，在多数情况下在其间形成桥键。
甲醛有这种交联的功能，也是它的缺点，在用甲醛固定过的组织中，需要做免疫组化的，往往提倡用酶消化或热抗原修复法来使蛋白与甲醛交联的醛键断裂开，以利于后来的染色。
甲醛可配成简单的或混合的固定液，最简单和最容易掌握的方法，就是取10ml甲醛液，加水9 0ml，这就是10%的福尔马林.当然,现在使用的固定液要求较为严格些,最好是使用缓冲福尔马林固定液,这将有利于后来的免疫组化染色的需要.从组织学的观点来说,甲醛是一种良好的固定剂,它有很多的优点:1. 组织收缩较少,损伤少,保存固有物质好.2. 固定均匀,穿透力强.3. 能使组织硬化,增进组织弹性,有利于切片.4. 能保存脂肪及脂类物质.5. 成本较低.虽然甲醛有上述的优点,但这都是相对而言,任何物质都不可能十全十美的,它也有许多缺点:1. 杂质含量较多,如甲醇,可钝化酶类,影响反应.2. 含有微量甲酸,导致固定液酸变,影响染色.3. 可产生福尔马林色素,影响观察.4. 不能固定尿酸和糖类物质.5. 容易挥发,污染环境,可导致标本干涸.6. 可长期存在于固定过的组织上.有人做过实验,组织用甲醛固定后在流水中冲洗5小时后,仍留有相当多的甲醛与蛋白质相结合,但需要经过长时间的流水冲洗(24天的冲洗)方能除去.可见存在于组织上的甲醛是不可能除去的.因为临床活检不可能有这么长的时间来冲洗组织.因此要特别指出的是,在其后的各种技术操作中,要特别注意到甲醛的存在,必须要想办法除去它,否则将会给各种染色造成影响,甚至导致失败。
固定液总结
固定液总结什么是固定液？固定液是一种化学试剂，主要用于固定组织或细胞以保持其形态和结构。
固定液可以阻止生物材料的腐败和变性，防止其在处理和染色过程中失去结构和功能。
固定液在组织学、细胞学和病理学等领域中广泛应用，有助于观察和研究生物组织和细胞的形态、结构和功能。
常见的固定液福尔马林（Formalin）福尔马林是一种常见的固定液，广泛用于组织学研究和病理学诊断中。
它是一种含有37%甲醛的溶液，能够固定组织并保持其形态和结构。
福尔马林固定的组织可用于组织切片制备、免疫组化染色等进一步的实验。
福尔马林固定组织的优点是固定效果好、保存时间长，能够保存大部分的组织结构和抗原表达情况。
然而，福尔马林固定液会对细胞核和某些蛋白质产生交联作用，可能导致染色效果差，同时还有潜在的致癌风险，因此在使用福尔马林固定液时需要注意安全操作和废液处理。
乙醛（Glutaraldehyde）乙醛是一种常用的电子显微镜固定液，主要用于固定细胞和亚细胞结构以进行电子显微镜观察。
与福尔马林不同，乙醛固定液能够更好地保持细胞和细胞器的形态和结构，有利于观察细胞内部的细节。
乙醛固定液的使用需要注意浓度和固定时间的控制，过高的浓度和过长的固定时间可能会导致组织和细胞的变性和损伤。
此外，乙醛固定液对某些酶和蛋白质具有灭活作用，因此在使用乙醛固定液时需要根据实验需要选择合适的条件。
缓冲盐水（Buffered Saline）缓冲盐水是一种用于固定组织和细胞的温和固定液。
它通常由含有适当浓度的盐水和缓冲剂混合而成，能够保持组织和细胞的形态和结构，并且对某些抗原和酶具有较好的保存效果。
缓冲盐水固定液的优点是温和、安全、易于制备和使用，适用于一些对固定条件要求较宽松的实验。
然而，由于其固定效果不如福尔马林和乙醛固定液，保存时间较短，因此在实验设计时需要根据实验目的和需求来选择合适的固定液。
固定液的使用注意事项使用固定液需要注意以下几个方面：1.安全操作：固定液常常含有有害化学物质，使用时需要佩戴防护手套、口罩等个人防护装备，避免直接接触和吸入液体或气体，注意实验室通风。
塞维尔组织固定液成分_概述及解释说明
塞维尔组织固定液成分概述及解释说明1. 引言1.1 概述塞维尔组织固定液是一种常用于生物学和医学领域的试剂，它具有固定、保存组织样本以及提供结构信息的重要功能。
通过将其滴于组织样本上，塞维尔组织固定液能够使细胞蛋白质和核酸变得稳定，并能够保持组织原有的形态和结构。
因此，塞维尔组织固定液被广泛应用于病理学研究、免疫组化分析以及其他相关领域。
1.2 文章结构本文将首先介绍塞维尔组织固定液的概述和背景，包括其定义、历史及发展背景等方面内容。
随后，文章将详细探讨塞维尔组织固定液的成分组成，包括各个成分及其作用机制。
最后，我们将进一步阐述塞维尔组织固定液在实际应用中的用途和应用领域。
通过对这些主题的全面介绍和讨论，旨在深入了解该试剂并促进相关领域的发展。
1.3 目的本文的目的是为读者提供关于塞维尔组织固定液成分的全面了解。
通过对其成分和作用机制的详细解释，希望读者能够掌握该试剂的原理和优势，并能够在实际研究中合理应用。
同时，本文也将探讨进一步研究塞维尔组织固定液的方向，以期在未来改进和拓展该试剂的应用。
2. 塞维尔组织固定液成分概述2.1 定义和背景塞维尔组织固定液是一种常见的化学试剂，用于在医学和生物学研究中对组织样本进行处理和保存。
它具有特殊的成分组合，可以使细胞结构保持在固定状态，并防止其腐败和坏死。
组织固定是一项关键的实验步骤，它允许科学家长时间保存组织样本，并可在后续实验中进行分析。
塞维尔组织固定液的开发旨在解决传统方法所面临的各种问题，例如使组织硬化、减少变性等。
2.2 成分组成塞维尔组织固定液由多种化学物质混合而成。
主要成分包括：a) 缓冲剂：缓冲剂具有调节溶液pH值和稳定性的作用。
常用的缓冲剂有磷酸盐缓冲液、乙酸/醋酸缓冲液等。
b) 固定剂：这些化合物能够与细胞蛋白质和核酸结合，使其固定在组织中，防止其进一步降解。
常见的固定剂有甲醛、戊二醛等。
c) 渗透剂：渗透剂可增加溶液对细胞的渗透性，促使固定剂较好地进入组织内部，确保更好的固定效果。
组织固定液的使用
谈谈固定液得使用作者: ｌiza3(站内联系TA)发布:２013-01-11当前,应用于固定试剂得种类较多,它们对于固定不同得组织成分起着不同得作用,因此我们在使用时应该了解不同固定剂得效能,才能合理得固定组织。
根据Bｅncroft得分类法,将不同得固定剂分为四种类型:ﻫⅠ类:醛类,甲醛,戊二醛,多聚甲醛,丙烯醛,已二醛,丙二醛等。
ﻫⅡ类:氧化剂类,四氧化锇(奥酸),高锰酸钾,重铬酸钾等、Ⅲ类:蛋白变性类,甲醇,乙醇,醋酸等。
Ⅳ类:其她,氯化汞,苦味酸等。
上述四种类型得固定剂,最常使用得就是甲醛,其余得也在其它病理技术方面中用到。
下面根据使用得需要,将着重介绍几种常用得固定剂。
ﻫ(1)甲醛ﻫ甲醛商品名为福尔马林,一般市售得含甲醛３7—4 0%,由甲醛气体饱与于水而成,比重为1。
12。
它也可以稳定得固体形式存在,它得成分为高分子量得聚合体,称为多聚甲醛。
ﻫ甲醛溶液较难纯化,在每批市售商品中,都含有不少得杂质如甲醇,这种在组织化学方法当中,能使酶钝化,影响其反应。
甲酸,它可使固定液变酸,在陈列标本或长时间固定得组织,由于酸得作用,往往细胞核染色欠佳。
ﻫ甲醛有效固定作用得要点就是,在蛋白质末端基团之间形成交联链。
参与甲醛固定蛋白质得基团,主要为氨基,亚氨基及酰氨基,肽,胍基,羟基,SH与芳香环。
甲醛与组织蛋白类得反应就是多样与复杂得,因为它能与多种不同得功能基团结合,在多数情况下在其间形成桥键、甲醛有这种交联得功能,也就是它得缺点,在用甲醛固定过得组织中,需要做免疫组化得,往往提倡用酶消化或热抗原修复法来使蛋白与甲醛交联得醛键断裂开,以利于后来得染色。
甲醛可配成简单得或混合得固定液,最简单与最容易掌握得方法,就就是取10ml甲醛液,加水9０ml,这就就是10％得福尔马林、当然,现在使用得固定液要求较为严格些,最好就是使用缓冲福尔马林固定液,这将有利于后来得免疫组化染色得需要。
1。
组织收缩较少,损伤少,保存从组织学得观点来说,甲醛就是一种良好得固定剂,它有很多得优点:ﻫ固有物质好、2。
组织固定液的类型
组织固定液的类型
组织固定液的类型有很多，主要包括以下几种：
1.福尔马林固定液：福尔马林是一种广泛使用的固定剂，可以固定细胞和组织的结构，同时起到杀菌的作用。
2.酒精固定液：酒精固定液是一种常用的组织固定液。
酒精具有良好的杀菌作用，可以使组织保持良好的形态结构。
3.缓冲福尔马林固定液：缓冲福尔马林固定液是在福尔马林固定液中添加缓冲剂，使其pH值接近细胞内液，更适合某些特定的实验和研究。
4.寡聚肽固定液：寡聚肽固定液是一种对蛋白质固定效果较好的固定液，可以保持细胞和组织的蛋白质结构。
5.甲醛固定液：甲醛是一种常用的固定剂，可以使细胞和组织固定并保持其形态结构。
它有很好的杀菌作用，并且可以使细胞和组织保持较好的染色性能。
以上是几种常见的组织固定液类型，不同类型的固定液具有不同的特点和适用范围，根据不同的实验目的和要求选择合适的固定液非常重要。
licent固定液固定原理
licent固定液固定原理
固定液是一种在生物学和组织学实验中常用的试剂，用于固定细胞和组织样本，以保持其形态结构和化学组成的稳定性。
固定液的固定原理主要涉及以下几个方面：
1. 交联作用，固定液中的化学物质（如甲醛、戊二醛等）能够与细胞和组织中的蛋白质、核酸等分子发生交联反应，形成稳定的化学键，从而固定细胞和组织的结构。
2. 蛋白质沉淀，固定液中的某些成分（如醋酸、乙醇等）能够沉淀蛋白质，使其在细胞和组织中形成固定的沉淀物，从而保持其形态结构。
3. 细胞膜透性改变，固定液中的某些成分（如甲醛）能够改变细胞膜的透性，使得细胞内外的分子无法自由交换，从而固定细胞内的分子组成。
4. 防止腐败和降解，固定液中的一些成分（如甲醛）具有杀菌和防腐作用，可以抑制细胞和组织的腐败和降解，保持其原有的形态和结构。
需要注意的是，不同的固定液具有不同的固定原理和适用范围。
选择适合的固定液需要考虑样本类型、实验目的以及后续实验的要
求等因素。
此外，在使用固定液进行样本固定时，需要控制固定液
的浓度、固定时间和温度等条件，以确保固定效果的稳定和可靠性。
组织固定液的使用
谈谈固定液的使用作者: liza3(站内联系TA)发布: 2013-01-11当前，应用于固定试剂的种类较多，它们对于固定不同的组织成分起着不同的作用，因此我们在使用时应该了解不同固定剂的效能，才能合理的固定组织。
根据Bencroft的分类法，将不同的固定剂分为四种类型：Ⅰ类：醛类，甲醛，戊二醛，多聚甲醛，丙烯醛，已二醛，丙二醛等。
Ⅱ类：氧化剂类，四氧化锇（奥酸），高锰酸钾，重铬酸钾等。
Ⅲ类：蛋白变性类，甲醇，乙醇，醋酸等。
Ⅳ类：其他，氯化汞，苦味酸等。
上述四种类型的固定剂，最常使用的是甲醛，其余的也在其它病理技术方面中用到。
下面根据使用的需要，将着重介绍几种常用的固定剂。
（1）甲醛甲醛商品名为福尔马林，一般市售的含甲醛37—40%，由甲醛气体饱和于水而成，比重为1.12。
它也可以稳定的固体形式存在，它的成分为高分子量的聚合体，称为多聚甲醛。
甲醛溶液较难纯化，在每批市售商品中，都含有不少的杂质如甲醇，这种在组织化学方法当中，能使酶钝化，影响其反应。
甲酸，它可使固定液变酸，在陈列标本或长时间固定的组织，由于酸的作用，往往细胞核染色欠佳。
甲醛有效固定作用的要点是，在蛋白质末端基团之间形成交联链。
参与甲醛固定蛋白质的基团，主要为氨基，亚氨基及酰氨基，肽，胍基，羟基，SH和芳香环。
甲醛与组织蛋白类的反应是多样和复杂的，因为它能和多种不同的功能基团结合，在多数情况下在其间形成桥键。
甲醛有这种交联的功能，也是它的缺点，在用甲醛固定过的组织中，需要做免疫组化的，往往提倡用酶消化或热抗原修复法来使蛋白与甲醛交联的醛键断裂开，以利于后来的染色。
甲醛可配成简单的或混合的固定液，最简单和最容易掌握的方法，就是取10ml甲醛液，加水90ml，这就是10%的福尔马林.当然,现在使用的固定液要求较为严格些,最好是使用缓冲福尔马林固定液,这将有利于后来的免疫组化染色的需要.从组织学的观点来说,甲醛是一种良好的固定剂,它有很多的优点:1. 组织收缩较少,损伤少,保存固有物质好.2. 固定均匀,穿透力强.3. 能使组织硬化,增进组织弹性,有利于切片.4. 能保存脂肪及脂类物质.5. 成本较低.虽然甲醛有上述的优点,但这都是相对而言,任何物质都不可能十全十美的,它也有许多缺点:1. 杂质含量较多,如甲醇,可钝化酶类,影响反应.2. 含有微量甲酸,导致固定液酸变,影响染色.3. 可产生福尔马林色素,影响观察.4. 不能固定尿酸和糖类物质.5. 容易挥发,污染环境,可导致标本干涸.6. 可长期存在于固定过的组织上.有人做过实验,组织用甲醛固定后在流水中冲洗5小时后,仍留有相当多的甲醛与蛋白质相结合,但需要经过长时间的流水冲洗(24天的冲洗)方能除去.可见存在于组织上的甲醛是不可能除去的.因为临床活检不可能有这么长的时间来冲洗组织.因此要特别指出的是,在其后的各种技术操作中,要特别注意到甲醛的存在,必须要想办法除去它,否则将会给各种染色造成影响,甚至导致失败。
环保组织标本固定液详细说明
环保组织标本固定液特点:
1、绿色环保无毒无害，全面替代甲醛。
2、彻底解决了甲醛对病理工作者的伤害。
长期接触甲醛的人群如医院病理科、外科工作人员等经常吸入少量甲醛能引起慢性中毒，记忆力衰退，体内白细胞数明显下降。
【固定原理】
固定任何蛋白质，防止组织和细胞的自溶。
Cannice环保组织标本固定液（即用型）的优越性
1、淡黄色液体、气味清香，绿色环保、无毒、无害，彻底解决了甲醛对病理工作者的危害。
2、适用于病理组织标本、常规染色、组织化学染色、免疫组化染色
等，全面替代甲醛。
3、迅速渗入组织而固定原生态，使短期解剖的组织细胞形态不至于有变化。
4、固定液有相当的渗透力，可使组织内外完全固定，且无损伤。
5、缩短脱水、脱脂时间。
固定的同时，发生脱水、脱脂作用，缩短了病理切片制作过程中的脱水、透明时间。
6、增加细胞内含物质的折光度，易于鉴别，增加媒染作用和染色作用。
7、蛋白间不发生交联反应，免疫组化效果大大优于甲醛。
操作步骤与注意事项
【操作步骤】
1、将组织标本固定液编号、写上姓名等；
2、将离体组织及时浸入组织标本固定液中，一般不超过5分钟，组织标本的体积与液体的比例为1：4，固定时间为2至12小时。
【注意事项】
1、小块组织标本（小于1.2CM*1.2CM*0.6CM）及各种活检组织标本，固定2至12小时即可，直接进行脱水、浸蜡、切片、染色等。
2、大块的组织标本需固定在12小时以上；或将大块的组织标本固定2小时后，取材，再固定2小时即可。
病理组织常用固定液的配制
病理组织常用固定液的配制（免疫组化）一、常规固定液的配制（1）10%甲醛液浓甲醛 10ml蒸馏水 90ml(2 ) 缓冲中性甲醛液浓甲醛10mlPBS缓冲液（Ph7.2）90ml(3 ) 10%中性甲醛液浓甲醛10ml蒸馏水90ml碳酸钙加至饱和(4 ) Bouin氏固定液苦味酸饱和水溶液75 ml甲醛2 ml冰醋酸5 ml该固定液中的冰醋酸，对胶原纤维等组织有膨胀作用，而甲醛对组织有收缩作用，两种试剂的混合使用，用以抵消彼此间的副作用，使组织固定达到优良的固定水平。
（5）醛糖钙固定液甲醛100ml蔗糖300ml乙酸钙20g蒸镏水90ml先将蔗糖和乙酸钙溶于蒸镏水，后加入甲醛。
该固定液对于做酶的组织化学的研究效果较好，组织固定后，做冰冻切片，再给予显示。
当前国内外基本上都还是要用甲醛来固定组织。
从免疫组织化学的角度来说，甲醛固定的组织大部分都可以用免疫组化的手段来检测，据多人认为，它对lgA ，lgM，J链，K 链和λ链的标记效果较好，且背景清晰。
但美中不足的是：经它固定的组织，可与蛋白形成醛交联蛋白，这种醛键可封闭抗原。
固此，在免疫组化实际检测中，应根据不同的要求和需要，采用酶消化或者其它抗原修复如微波、高压等的方法，以便破坏醛键重新暴露抗原。
（6）Zenker氏固定液：重铬酸钾25g升汞50g蒸馏水1000ml冰醋酸50ml先将重铬酸钾和升汞溶于水中，尢其是重铬酸钾，应用热水或加温的方法将其溶解，然后过滤贮存于带盖的玻璃瓶中，如暴露于空气中，该溶液将会被慢慢氧化而便颜色加深，导致失效。
临用时，取贮存液950ml，加入50ml的冰醋酸，即可使用。
应用该固定液固定的组织，一般不要超过24h，取出组织，流水冲冼12小时以上，然后保存于75%-80%的酒精中，在切片染色前，必须用碘除去汞盐的沉着。
应用该固定液的组织，细胞核及细胞浆染色十分清晰，特别是要显示骨骼肌的横纹时，应用本液可获得满意的结果，但由于其含有醋酸，故不能用于保存细胞颗粒，红细胞及含铁血黄素。
常用的组织固定液及配制
常用固定液及其配制固定液分单纯固定液和混合固定液。
1甲醛（formal dehyd e）是无色气体，易溶于水成为甲醛溶液。
易挥发，且有强烈刺激气味，常用得是37％～40％得甲醛溶液，商品名为福尔马林（formal in）。
用作固定的浓度习惯为10％福尔马林（即1份甲醛溶液加9份水配制而成），实际含甲醛4％。
10％福尔马林渗透力强，固定均匀，对组织收缩少。
对脂肪、神经及髓鞘、糖等固定效果好，是最常用的固定剂。
经福尔马林固定时间长的组织，易产生黑色的沉淀，称福尔马林色素。
2 乙醇无色液体，易溶于水，它除可作为固定剂外，还可作为脱水剂，对组织有硬化作用。
固定用一般是80%~95%浓度，乙醇渗透力校弱，它能溶解脂肪，核蛋白被沉淀后，仍能溶于水，因此核的着色不良。
3 中性甲醛液（混合固定液）甲醛（浓）120ml，加蒸馏水880ml,磷酸二氢钠（NaH2PO4?H2O）4g，磷酸氢二纳（Na2HPO4）13g。
此液固定效果比单纯10％福尔马林要好。
4 AF液（混合固定液）95％乙醇90ml，甲醛(浓)10ml。
也有配方是95％乙醇85ml，甲醛（浓）10ml，冰醋酸5ml。
此液除有固定作用外，兼有脱水作用，因此，固定后可直接入95％乙醇脱水。
以上4种固定液中，以中性甲醛为首选，其次为10％福尔马林，乙醇应尽量不用。
yzbaiwrote:（1）10%甲醛：对组织渗透性强，固定均匀。
对组织膨胀约5%，经酒精脱水时有较大的收缩。
能保存脂肪，不能沉淀核蛋白及白蛋白，长期用其固定的组织使组织变为酸性，不利于染色，特别是细胞核的着色。
经自来水冲洗6~24小时后，可以使其酸碱中和，并减少结晶。
（2）4%多聚甲醛：对组织穿透性好，组织收缩小，对大多数抗原物质保存较好，特别是对脂肪和各种酶的固定效果更好。
动物组织各种固定液及优缺点
重铬酸钾 25G 升汞 50G 蒸馏水 1000ml 冰醋酸 50ml
50ml的冰醋酸，即可使用。应用该固定液固定的组织 ，一般不要超过24h，取出组织，流水冲冼12小时以上 ，然后保存于75%80%的酒精中，在切片染色前，必须用碘除去汞盐的沉
着。应用该固定液的组织，细胞核及细胞浆染色十分
清晰，特别是要显示骨骼肌的横纹时，应用本液可获
，还有Bouin氏液和Carnoy氏液等。
重铬酸钾: 它的优点是：1、
能固定脂肪及类脂物。2、
为髓鞘及嗜铬细胞优良的媒染剂。3、
可配成多种的混合固定液足之处有：1、
不能沉淀蛋白质，它必须和醋酸配成混合固定液，方能发挥作用，产生铬酸，沉淀蛋白质。2、
具有毒性及产生高温。在配制液体时，如清洗剂，当加入硫酸时，可产生很高的温度，并挥发出刺鼻的气体，应特
可与其它试剂配成多种的混合固定液，加快固定，它的缺点是：1、
可溶解脂类物质，凡要证明组织是否含有脂类和类脂物时，切不能用含有酒精的固定液去固定组织，也不能用石蜡
切片。2、
对组织收缩较大，不宜作单纯固定液。3、
渗透力不强。当用酒精固定组织时，组织表面很快就被固定，并形成了一层蛋白膜，这层膜可阻挡固定液向里渗透
4 Bouin氏固定液
苦味酸饱和水溶液 75ml 甲醛 2 ml 冰醋酸 5 ml
该固定液是当今流行的固定液,因它对组织固定较好, 损伤较少,因对其后的各方面研究都较好,尤其是对免 疫组化的染色。
这是一种最简单的固定液，适合于边远地区携带的固 定液，但由于它的单一性，因此，只要有条件的单位 都不要求使用这种固定液。 先将Nacl溶于水，再加入甲醛。这也是一种较为简单 的固定液，但由于加入Nacl，它是一种重金属盐物质 ，加入了它可促进和改善染色，增加染色的强度 该固定液中的冰醋酸，对胶原纤维等组织有膨胀作用 。而甲醛对组织有收缩作用。两种试剂的混合使用， 用以抵消彼此间的副作用。使组织固定达到优良的固 定水平
组织固定液与固定方法选择的探讨
“固定”是指将组织浸入适当的化学试剂中，使组织细胞内的物质尽量接近其取材时的形态结构和位置的过程［1］。
固定能使组织中的各种物质沉淀和凝固起来，终止或抑制外源性和内源性酶的活性，防止细胞自溶，保持细胞形态［2］。
固定是制作大体标本和显微镜切片标本的关键，良好的固定有利于切片标本的制作和染色，使组织产生不同的折射率，造成光学上的差异，以便观察、鉴别和硬化组织［3-4］。
固定液可以抑制组织自溶，保持离体组织细胞与生活时的形态相似，使细胞内一些蛋白质等沉淀或凝固，有利于固定后物质的确切定位，是保存组织器官用于病理诊断的必需过程［5-6］。
不同固定液对组织细胞的穿透力不同，可导致细胞内黏多糖、蛋白质、核酸、脂类和低分子质量物质等不同程度的丢失，由固定液因素导致组织细胞形态的改变，对病理诊断产生很大影响，比其他技术操作因素引起的组织细胞形态改变更难把握。
而选取良好的固定液可使组织固定均匀、收缩小、结构清晰，利于保存组织细胞的抗原性，为免疫组化、电镜观察等奠定坚实的基础［7-8］。
本研究就组织固定液和固定方法的选择作如下探讨。
1固定液1.1固定液成分甲醇：为沉淀类固定剂，对组织渗透性强，能迅速沉淀清蛋白、球蛋白和核蛋白［9］。
可以固定核染色质及其部分内容物、核膜、细胞质及胶质等［10］，且固定后核浆对比鲜明，组织结构清晰，能基本保持细胞的正常形态［11］。
乙醇：是一种可溶解脂肪和类脂的脂溶剂，穿透力缓慢，长时间浸泡可使组织硬化，细胞核变形，细胞质收缩，蛋白质变性，糖原沉淀［12］。
乙醇对组织细胞既有固定作用又有脱水作用，一般固定组织以80%～95%浓度为好［13］。
丙酮：是一种易燃易挥发的无色液体，对组织渗透力强，能使蛋白质沉淀，但不能很好地保存糖原，且在部分组织中对核的固定效果欠佳［14-16］。
戊二醛：是一种具有双重作用的醛类。
对糖原、糖蛋白、微管内质网和细胞基质等有较好的固定作用可使组织保存良好，适合电镜和酶组织标本的固定，但其穿透力较弱［12，17］。
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安徽雷根生物技术有限公司
组织固定液说明书
【产品名称】
组织固定液
【包装规格】
货号：DF0111
包装规格分别为：500ml、5000ml。
【预期用途】
用于新鲜组织标本的固定。
【检验原理】
固定的目的在于保护细胞和组织的原有形态结构，固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长，通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变，从而使酶失活。
固定液主要分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等，较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
本组织固定液主要由甲醛、磷酸盐组成，该固定液适合于绝大多数组织的固定，属于中性福尔马林固定液，pH接近于中性。
【主要组成成分】
试剂组成主要成分
组织固定液甲醛、磷酸盐【储存条件及有效期】
5℃～35℃保存，原包装未开封固定液的有效期为24个月，在有效期内的已开封固定液建议在开封后6个月内使用完，每次用后及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】
组织尽量新鲜。
【检验方法】
l、一般标本固定时间控制在1～4小时/mm，大标本应适当延长固定时间；
2、固定好的组织，可在10%福尔马林固定液或70%乙醇中长期保存。
【检验方法的局限性】
仅限于病理组织内容物固定。
【注意事项】
l、避免过度延长固定时间，否则引起生物大分子过度交联，取材厚度不同，固定时间也不同。
2、固定液的容量应足够，一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。
3、温度对固定的影响很明显，提高温度可以加速固定作用，但温度不宜过高。
4、本产品仅用于体外诊断，应由专业人士使用及进行结果的判读。
5、使用前应详细阅读说明书，并做好个人卫生防护，在有效期内使用，生产日期、生产批号和失效
日期见包装。
6、用后应按医院或环保部门要求处置废弃物。
【基本信息】
备案人/生产企业名称：安徽雷根生物技术有限公司
住所：淮北凤凰山经济开发区凤冠路三期标准化厂房三号厂房。