酱油中氨基态氮的测定

实验步骤（双指示剂法）
（1）空白实验：吸取50mL蒸馏水→至 于250mL的锥形瓶→加3滴中性红（8.2） 指示剂→再用0.100NNaOH溶液滴定至琥 珀色→记录滴定所消耗的碱液毫升数→记 录数据 样品的测定：吸取酱油0.1mL→置于 250mL的锥形瓶→50mL蒸馏水→加3滴 中性红（8.2）指示剂→再用 0.100NNaOH溶液滴定至琥珀色→记录滴 定所消耗的碱液毫升数→记录数据

中华人民共和国专业标准 氨 基 态 氮 测 定 法 ZB X 66038—87
实验现象
实验数据分析

pH计法


双指示剂法

由于pH计仪器本身 存在一些机械问题， 同时人为手动控制滴 定也存在一定的误差。 所以数据也存在一定 的误差
中性红样品消耗 0.25mL的NAOH存在 比较大的误差。 由于不太清楚NAOH 的用量多少。所以终 点滴过头。
实验注意事项
1.pH计法操作过程中，因为仪器检测速 度比较慢，不能连续滴定。要等仪器上的 数字稳定后在慢慢的滴定。尤其是在快接 近终点的时候。 2.双指示剂法操作过程中，尤其是在加入 中性碱的滴定中由于消耗NAOH的量极少， 所以在滴定的时候格外注意。一滴两滴对 实验影响极大。

PH计法空白及样品溶液的测定
空白实验：取80mL水→先用氢氧化钠标准 滴定溶液调节pH为8.2→加入10.0mL甲醛溶 液→混匀→用氢氧化钠标准滴定溶液滴定至 酸度计指示pH=9.2→读取消耗氢氧化钠标准 滴定溶液的毫升数→记录数据 样品的测定：吸取酱油20mL→置于250mL 锥形瓶→插入玻璃电极和甘汞电极→开动磁 力搅拌器→用氢氧化钠标准滴定溶液→滴定 至酸度计指示pH=8.2→加入10.0mL甲醛溶 液→混匀→再用氢氧化钠标准滴定溶液滴定 →酸度计指示pH=9.2→读取消耗氢氧化钠标 准滴定溶液的毫升数→记录数据

实验数据（pH计法）
表一、pH计法空白及样品溶液的测定 PH=7时消 PH=8.2 耗量(mL) 时消耗量 (mL) 样品滴定 空白滴定 样品质量 样1 样1 20mg 5.350 PH=9.2时 消耗量 (mL) 8.950 NaOH标 准液浓度 /mol.L-1 0.04991
计算公式 X=(V1-V2)*C1*0.014*100/5*(V3/100） 范例：｛（8.90-）-（5.350-）｝*0.05*0.014*100/5*20/100= 计算结果

----------------------------（2）空白实验：吸取50mL蒸馏水→至于 250mL的锥形瓶→加中性甲醛10毫升→3滴 百里酚酞（9.2）指示剂→摇匀，静置1分钟 →再用0.100NNaOH溶液滴定至淡蓝色→记 录滴定所消耗的碱液毫升数→记录数据 样品的测定：吸取酱油0.1mL→置于250mL 的锥形瓶→50mL蒸馏水→加中性甲醛10毫 升→3滴百里酚酞（9.2）指示剂→摇匀，静 置1分钟→再用0.100NNaOH溶液滴定至淡 蓝色→记录滴定所消耗的碱液毫升数→记录 数据
任务描述
本任务主要为用两种方法（PH计法、双 指示剂甲醛法）同时测定实验室所提供的酱 油样品中氨基态氮的含量。整个任务过程主 要包含pH计的较正、维护；然后分别用PH计 法、双指示剂甲醛法测定酱油氨基态氮的含 量，并通过实验过程现象和结果来比较两种 方法的优缺点。在本任务过程中还包含了果 汁总酸的测定作为样品不同的对比，比较样 品色泽对检测过程及方法选择的影响

实验数据（双指示Baidu Nhomakorabea法）
表二、双指示剂甲醛法空白及样品溶液的测定 加入指示剂1 加入指示剂2 NaOH标准 时消耗量 时消耗量 液浓度 (mL) (mL) /mol.L-1 样品滴定 样1 0.25 3.00 0.04991
空白滴定
样品质量
样1
20mg
0.05
1.80
实验现象描述：加入指示剂1的滴定终点为琥珀色，加入指示剂2滴定终 点为浅蓝色。 计算公式： (V1-V2)*N*0.014*100/M 范例｛（3.000-1.800）-（0.25-0.05) ｝ *0.04991*0.014*100%/0.1*20/100 =3.49% 计算结果 3.49%
制作者：Cioffii
任务相关参考资料的查阅
1、GB： GB/T5009.39-2003,中华人民共和国国家标准，食品卫生检验方法，理化 部分 2、〈食品分析与检验技术〉： 张意静，食品分析技术（M），北京：中国轻工业出版社，2008年：408-410 3、〈分析化学〉： 陆旋，张星海，基础化学实验指导，北京：化学工业出版社，2007年： 101--103 4、食品伙伴网上相关内容（网址、资料格式） http://www.foodmate.net/ 5、维普（标准文献） 陈美春，康明武，杨勇.酱油中氨基酸态氮测定方法的探讨（J）.四川 食品与发酵，2008，44（2）：54-56 邵渝，陈薇.食品中氨基酸态氮含量测定方法的探讨（J）.预防医学情 报杂志，2006，4（22）：500-501 黎碧坚.关于氨基酸态氮实验中空白值的探讨（J）.实用医技杂志， 2005，3（12）：622-623 GB/T18186-2000“酿造酱油”中“6.4氨基酸态氮” ZB X 66038—87,氨基态氮测定法
实验试剂与器材
试剂： 36%～38%甲醛溶液 0.1000mol/L的NaOH标准溶液 1%酚酞氢氧 器材：10mL滴定管、250mL锥形瓶、感 重0.0001g分析天平（双指示剂法） 1.000ml最小刻度移液管、250锥 形瓶、pH计（pH计法）

实验步骤（pH计法）
PH计的较正 用蒸馏水清洗电极→插入PH=6.86的标 准溶液中→调节斜率最大→待读数稳定→调 “定位”键→再清洗电极插入PH=9.18的标 准溶液中→定位不动→待读数稳定→调“斜 率”键，使读数为该溶液当时的PH值。 酱油、果汁溶液稀释 吸取酱油、果汁样品5.0mL→置于 100mL容量瓶中→加水至刻度→混匀定溶→ 待用