检验科开展超氧化物歧化酶(SOD)测定的可行性报告
实验三超氧化物歧化酶SOD的提取及活性测定
六、本实验教学内的深化和拓展
通过本实验的学习，使学生明确实验的意义，联 系实际，使学生了解本实验的应用。明确植物 SOD与动物SOD的区别，了解植物SOD的优势。
七、思考题，完成实验报告
1 什么是分段盐析，为什么要分段盐析？ 2 SOD有哪些用途？
三、材料与试剂
1. 材料
玉米籽粒
2. 主要试剂 1、0.05mol/L磷酸缓冲液（pH7.8）,500mL 2、氯仿-乙醇混合液：氯仿:无水乙醇=3:5 3、丙酮：用前需预冷至4-10℃ 4、0.05mol/L碳酸盐缓冲液（pH10.2） 5、0.1mol/LEDTA溶液
2.3 仪器 恒温水浴锅、 冷冻高速离心机、 可见分光光度计、 研钵、玻棒、烧杯、量筒，等。
3、除杂蛋白：上清液加入0.25体积的氯仿乙醇混合液搅拌15min，5000rpm离心 15min，得到的上清液为粗酶液。
4、SOD的沉淀分离：粗酶液中加入等体积 的冷丙酮，搅拌15min，5000rpm离心 15min，得SOD沉淀。将SOD沉淀溶于 0.05mol/L磷酸缓冲液（pH7.8）中，于5560℃热处理15min，得到SOቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ酶液。
3.2 SOD活性测定
试剂（mL）
空白对照管 样品管
碳酸缓冲液
5.0
5.0
EDTA溶液
0.5
0.5
蒸馏水
0.5
—
样品液
—
0.5
混合均匀，在30℃水浴中预热5min，测定
OD480
3.3 结果计算
总酶活力=酶液总体积X稀释倍数/抑制 50%的酶液量X样品重
五、本实验教学内容的重点和难点
重点：粗提液的获得玉米SOD的提取 难点：提取条件的控制
实验报告 猪血中超氧化物歧化酶
实验三 猪血中超氧化物歧化酶(SOD)的分离纯化及活力测定一、 实验原理超氧化物歧化酶(SOD)是一种能够专一性清除超氧离子自由基-2O 的金属酶。
它是一种酸性蛋白，对热、pH 和蛋白酶的水解较一般酶稳定。
SOD 催化下述反应：222222O O H O H +→+-+.。
机体内-2O 过量或不足都会对人体产生危害，SOD 对过量的-2O 及时清除保证-2O 含量的相对平衡。
本实验采用有机溶剂沉淀法以新鲜猪血为材料，从中提取SOD 并进行纯化。
该实验SOD 酶活性采用邻苯三酚自氧化法测定，其酶活性单位定义为：每毫升反应液中，每分钟抑制邻苯三酚自氧化速率达50%酶量定义一个酶单位。
样品中蛋白质含量采用考马斯亮蓝250-G 法测定。
考马斯亮蓝250-G 在游离状态下呈粉红色，与蛋白质结合后呈蓝色。
在一定范围内，溶液在595nm 波长下的光密度与蛋白质含量成正比，可用比色法测定，测定范围是1-1000ug 。
SOD 同工酶鉴定采用不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳技术分离鉴定。
二、试剂与材料[1]试剂：ACD 抗凝剂、0.9%NaCl 、丙酮、05%乙醇、氯仿、50mmol/L pH8.3磷酸缓冲液、10mmol/LEDTA 钠盐溶液、3 mmol/L 邻苯三酚钠溶液、考马斯亮蓝250-G 标准蛋白质溶液、[2]器材：分光光度计、试管、刻度吸管、离心机、烧杯。
三、操作步骤1、SOD 提取[1] 取40ml 新鲜猪血，5000r/m 离心10min ，去上层血浆，取下层红血球粘稠液。
加入2倍体积的0.9%Nacl 溶液清洗，5000r/m 离心10min ，弃上层清液。
[2] 向洗净的红血球中加入适量蒸馏水至15ml ，剧烈搅拌30min ，使其充分溶血。
再向溶血溶液中缓慢加入预冷的0.25倍体积的95%的乙醇溶液和0.15倍体积的氯仿，均浆呈红色，再继续搅拌15min ，4000r/m 离心10min ，去变性蛋白质沉淀物，得上层液，留样1ml 。
超氧化物歧化酶（SOD）的分离纯化及活力测定、同工酶电泳
超氧化物歧化酶（SOD）的分离纯化及活⼒测定、同⼯酶电泳实验⼆猪⾎中超氧化物歧化酶(SOD)的分离纯化及活⼒测定、同⼯酶电泳⼀、实验原理超氧化物岐化酶SOD⼴泛存在于⽣物体内的含Cu、Zn、Mn、Fe的⾦属类酶。
它作为⽣物体内重要的⾃由基清除剂，可以清除体内多余的超氧阴离⼦，在防御⽣物体氧化损伤⽅⾯起着重要作⽤。
SOD是⼀种酸性蛋⽩，对热、pH和蛋⽩酶的⽔解较⼀般酶稳定。
根据⾦属辅基的不同，它可以分为四类，分别为Mn-SOD、Cu-Zn-SOD、Fe-SOD、Ni-SOD，其中最常见是(CuZn-SOD)，主要存在于真核细胞的细胞质中。
CuZn-S0D酶蛋⽩的分⼦量约为3.2×104，每个酶分⼦由2个亚基通过⾮共价键的疏⽔基相互作⽤缔合成⼆聚体，每个亚基(肽链)含有铜、锌原⼦各⼀个，活性中⼼的核⼼是铜。
SOD作为机体内最重要的抗氧化酶体之⼀，可以直接清除过量的超氧⾃由基，阻⽌机体的过氧化，对机体有较⾼的防护作⽤及保健价值。
本实验采⽤有机溶剂沉淀法以新鲜猪⾎为原料，从中提取SOD硬进⾏纯化。
酶活⼒测定可⽤以下⽅法：黄嘌呤氧化酶法、细胞⾊素C法、肾上腺素⾃氧化法亚硝酸法、NBT光还原法、化学发光法以及邻苯三酚⾃氧化法等。
⽽该实验SOD酶活性采⽤邻苯三酚⾃氧化法测定。
酶活性单位定义为:在1ml的反应液中，每分钟抑制邻苯三酚⾃氧化速率达50%时的酶量定义为⼀个活⼒单位。
SOD同⼯酶奠定采⽤不连续聚丙烯酰胺-的作⽤，因此，电泳分离SOD后，凝凝胶电泳技术分离鉴定。
⽤“负”显⾊法显⽰。
由于SOD能够抑制O2胶上⽆SOD处显⽰为蓝⾊，⼜SOD处为⽆⾊透明，由此可以鉴定SOD同⼯酶酶谱。
⼆、实验试剂与器材ACD抗凝剂、0.9%Nacl、丙酮、95%⼄醇、氯仿、考马斯亮蓝G-250、50mmol/L pH8.3磷酸缓冲液、10mmol/L EDTA钠盐溶液、3mmol/L 邻苯三酚溶液等以及752分光光度计、分析天平、具塞试管、刻度吸管、离⼼机、烧杯、电泳装置、微量进样器、注射器等。
SOD(超氧化物歧化酶)应用价值前景预测可行性学术报告
SOD（超氧化物歧化酶）应用价值前景可行性学术报告作者左有权关键词SOD 超氧化物歧化酶抗衰老临床应用纳米技术前言SOD（超氧化物歧化酶）是国际上公认的具有人体垃圾“清道夫”、“抗衰王”、“美容骄子”之称，是对抗“百病之源”活性氧自由基最有力的物质，是近半个世纪以来社会科学界、医学界、生物界最举世瞩目的价值发现，它的研究与发展代表着生物医药的高科技技术发展的前沿，在科技成果及学术领域占据重要的国际地位。
SOD（超氧化物歧化酶）被国家列入生物医药“国家十一五规划”重点项目。
2011年是“国家十二五规划”的第一年，SOD 行业将再次跻身国家当前优先发展的高科技产业化项目，标志着中国健康产业链SOD新兴行业的崛起, 使全人类迈入健康经济时代。
利用超氧化物歧化酶（SOD）产业化建设，一方面可架构生物医药、保健食品、日用美容化妆品、化工化学、农业五大版块经济支柱的绿色产业链循环经济圈发展。
另一方面打造SOD科技应用成果转化的孵化器平台引领生化医药美容化妆品食品等行业的新型健康原料的应用，有利于促进再生资源利用，产生巨大的社会效益和经济效益。
SOD（超氧化物歧化酶）是21世纪追求健康，挑战衰老，战胜疾病的“长寿金钥匙，抗衰王”，是未来唯一能改善并提高国民寿命的生物药用酶(临床医药、医药美容、第三代保健食品)，未来（5-10）年内生物医药及食品化妆品领域发展的主流。
SOD是21世纪巨大商机和热门行业，最具投资价值潜力的项目。
继改革开放“下海”产业、城市场化进程（房地产）、网络及知识经济产业之后的第四次产业变革之路，迎接跨时代新财富第五波的到来，将造就一批新的财富弄朝儿。
一、SOD（超氧化物歧化酶）学术与研究美国著名的生物化学家Michelson教授在欧洲分子生物学学会1976年6月在法国班生诺斯组织召开的首届SOD超氧化物歧化酶的学术研讨会。
1989年美国召开的第五届国际ＳＯＤ学术会上，与会代表一致认为深入进行ＳＯＤ的科学及应用研究，不仅具有重大的理论和实践意义，而且也具有重大的经济价值和广阔的应用前景。
SOD项目可行性报告 (已修改3)
关于开发SOD项目初步意见一项目背景1、SOD概述超氧化物歧化酶Orgotein (Superoxide Dismutase，SOD)，别名肝蛋白、奥谷蛋白，简称：SOD，ECl.15.1.1。
SOD是一种源于生命体的活性物质，能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质。
超氧物歧化酶是一种新型酶制剂。
它在生物界的分布极广，几乎从动物到植物，甚至从人到单细胞生物，都有它的存在。
SOD被视为生命科技中最具神奇魔力的酶、人体内的垃圾清道夫。
SOD是氧自由基的自然天敌，是机体内氧自由基的头号杀手，是生命健康之本。
它催化如下的反应：2O2-+2H+→H2O2+O2O2-称为超氧阴离子自由基，是生物体多种生理反应中自然生成的中间产物。
它是活性氧的一种，具有极强的氧化能力，是生物氧毒害的重要因素之一。
SOD是机体内天然存在的超氧自由基清除因子，它通过上述反应可以把有害的超氧自由基转化为过氧化氢。
尽管过氧化氢仍是对机体有害的活性氧，但体内的过氧化氢酶（CAT）和过氧化物酶（POD）会立即将其分解为完全无害的水。
这样，三种酶便组成了一个完整的防氧化链条。
由于SOD具有清除体内O2的能力，能较好地抵御氧自由基和基他氧化物自由基对细胞质膜的毒性，在机体保护方面起重要作用。
超氧化物歧化酶SOD，是国际上公认的具有人体垃圾“清道夫”、“抗衰王”、“美容骄子”之称，是对抗“百病之源”，是消除自由基最有力的物质，是近半个世纪以来社会科学界、医学界、生物界最举世瞩目的价值发现，它的研究与发展代表着生物医药的高科学技术发展的前沿，在科技成果及学术领域占据重要的国际地位。
SOD（超氧化物歧化酶）被国家列入生物医药“国家十一五规划”重点项目。
同时也列入了“国家十二五规划”，SOD行业将再次跻身国家当前优先发展的高科技产业化项目，标志着中国健康产业链SOD新兴行业的崛起，使全人类迈入健康经济时代。
2、SOD的分类与分布2.1、SOD分类SOD 是一类金属酶按照其结合的金属离子主要分为三类：第一种含铜和锌，称为Cu、Zn-SOD，是最常见的一种，呈蓝绿色，主要存在于真核生物细胞中。
超氧化物歧化酶SOD的分离纯化实验报告
超氧化物歧化酶SOD的分离纯化技术证明SOD提取过程工艺不同浓度的硫酸铵对纯化SOD蛋白酶的效果的综合影响一、摘要：通过对绿豆的研磨破碎获得SOD粗酶，经过(NH4)2SO4分级分离、透析除盐和浓缩等过程，除去粗酶中的杂质及干扰蛋白。
二、关键词：SOD 连苯三酚自氧化法SOD酶活性测量透析除盐三、前言：超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase），简称SOD，是一种新型酶制剂，属金属酶.它是一种源于生命体的活性物质，SOD是机体内危害最大的氧自由基专一清除剂，亦是其他自由基最有效的清除剂，它与体内的谷胱甘肽过氧酶、过氧化氢酶联手，把自由基转化为水和氧分子。
能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质。
对人体不断地补充SOD具有抗衰老的特殊效果。
本实验以绿豆为原料提取SOD，通过各步的分离提纯，应测得酶总活力逐渐减小，比活逐渐升高.通过本实验掌握物质分离纯化的实验设计过程，以及硫酸铵分离、透析除盐、浓缩和葡聚糖凝胶层析等物质分离技术。
四、实验技术路线：我们的这次试验主要的路线是通过测定经过不同浓度的硫酸铵分离出来的不同的SOD蛋白的上清和沉淀，以此来确定硫酸铵沉淀SOD酶和其他杂蛋白的一个大致区间。
经过40%的硫酸铵和50%的硫酸铵作用过后的提取液，得到40%的上清和沉淀，50%的上清和沉淀。
然后分别测定这4份样品的SOD酶活力，来推理出硫酸铵沉淀区间。
五、材料和试剂：绿豆（实验使用前需先用蒸馏水浸泡20h）；连苯三酚（使用时需先稀释5倍）；硫酸铵（粉末）；Tris-HCL缓冲液；蒸馏水。
六、仪器：匀浆机；低温离心机；分光光度计；移液枪；500ml量筒；纱布；烧杯和试管若干。
七、实验步骤：1、取30g绿豆，并加入300ml蒸馏水，用匀浆机匀浆。
2、匀浆出来的豆液用二层纱布过滤，离心（5℃，3000rpm / 8min）取上清液，取1ml上清液测量其总活性（用连苯三酚自氧化测SOD活性法），其余量取150ml分装成两支各75ml。
植物sod酶项目可行性研究报告
植物sod酶项目可行性研究报告项目名称：植物sod酶的应用研究项目背景超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）是一种酶类物质，能够清除细胞内的氧自由基。
氧自由基是一种具有较强氧化性的活性氧分子，对生物体内的脂质、蛋白质和核酸等生物大分子会造成氧化损伤，而SOD则可以有效清除这些氧自由基，减少对生物体内部结构的损害。
因此，SOD在生物体内具有重要的生理作用，对于提高生物体的抗氧化能力和延缓衰老具有重要的意义。
植物sod酶作为一种绿色抗氧化剂，在医药、保健品和食品等领域有广泛的应用前景。
本项目旨在从植物来源中提取SOD酶，并进行应用研究，探索其在抗氧化领域的潜在价值。
项目目标1. 研究植物sod酶的提取技术，寻找最佳的提取工艺方案；2. 获得纯度较高的植物sod酶，并对其生化特性进行初步分析；3. 测试植物sod酶的抗氧化活性和稳定性，并与市场上常见的抗氧化剂进行比较；4. 探讨植物sod酶在医药、保健品和食品等领域的应用前景，制定市场推广计划。
项目内容和方法1. 从不同植物材料中提取sod酶，比较提取效率和质量，优化提取工艺；2. 利用聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和免疫印迹等技术对提取得到的sod酶进行鉴定和纯度检测；3. 测定sod酶的抗氧化活性，包括清除自由基能力和抗氧化稳定性；4. 在不同模型体系中验证植物sod酶的抗氧化效果，并与市场上常见的抗氧化剂进行对比分析；5. 结合市场需求和植物sod酶的特性，制定市场推广计划，包括产品定位、宣传推广和渠道拓展等方面。
预期效益1. 通过本项目的研究，可以找到提取植物sod酶的最佳工艺方案，为工业化生产奠定技术基础；2. 获得高纯度的植物sod酶，为后续生化特性分析和应用研究提供可靠的物质基础；3. 发现植物sod酶的抗氧化活性和稳定性，为其应用于医药、保健品和食品等领域提供科学依据；4. 制定市场推广计划，拓展植物sod酶的市场份额，实现经济效益和社会效益的双赢。
实验三超氧化物歧化酶(SOD)的提取及活性测定
七、思考题，完成实验报告
1 什么是分段盐析，为什么要分段盐析籽粒
2. 主要试剂 1、0.05mol/L磷酸缓冲液（pH7.8）,500mL 2、氯仿-乙醇混合液：氯仿:无水乙醇=3:5 3、丙酮：用前需预冷至4-10℃ 4、0.05mol/L碳酸盐缓冲液（pH10.2） 5、0.1mol/LEDTA溶液
2.3 仪器 恒温水浴锅、 冷冻高速离心机、 可见分光光度计、 研钵、玻棒、烧杯、量筒，等。
生物技术综合实验
实验三 超氧化物歧化酶（SOD）的提取及活性测定
一、目的和要求 通过植物材料（玉米）超氧化物歧化 酶（SOD）的提取及活性测定，掌握硫 酸铵盐析沉淀蛋白质及超滤浓缩蛋白质的 方法和原理。
二、实验原理
超氧化物歧化酶（SOD）广泛存在于植物 体内，它是一种重要的自由基清除剂，对 生物体有多种保护作用。超滤是一种蛋白 质浓缩方法，只要选择适当的滤膜可将玉 米浆中的SOD与其他小分子杂蛋白、可溶 性糖等分离。
4、SOD的沉淀分离：粗酶液中加入等体积 的冷丙酮，搅拌15min，5000rpm离心 15min，得SOD沉淀。将SOD沉淀溶于 0.05mol/L磷酸缓冲液（pH7.8）中，于5560℃热处理15min，得到SOD酶液。
3.2 SOD活性测定 试剂（mL） 空白对照管 样品管 碳酸缓冲液 5.0 5.0 EDTA溶液 0.5 0.5 蒸馏水 0.5 — 样品液 — 0.5 混合均匀，在30℃水浴中预热5min，测定 OD480
四、操作步骤
4.1 SOD粗提液的制备
1、组织细胞破碎：称取5g大蒜蒜瓣或玉米 种子，置于研钵中研磨。 2、SOD的提取：破碎后的组织中加入2-3 倍体积的0.05mol/L磷酸缓冲液（pH7.8）， 继续研磨20min，使SOD充分溶解到缓冲液 中，然后在5000rpm下离心15min，取上清 液。 3、除杂蛋白：上清液加入0.25体积的氯仿乙醇混合液搅拌15min，5000rpm离心 15min，得到的上清液为粗酶液。
sod实验报告
sod实验报告
SOD实验报告
实验目的：通过测定超氧化物歧化酶（SOD）的活性，探究不同条件对SOD活性的影响。
实验材料：
1. 超氧化物歧化酶（SOD）提取液
2. 超氧化物歧化酶（SOD）标准品
3. 丙酮
4. 磷酸盐缓冲液
5. 磷酸盐缓冲液-EDTA
6. 碳酸氢钠
7. 氯化铝
8. 硝酸银
9. 氢氧化钠
10. 乙酸钠
11. 乙醇
12. 硫酸
13. 硫酸铵
14. 硫酸钾
15. 氮气
实验步骤：
1. 提取SOD：将植物组织磨碎后加入磷酸盐缓冲液，离心后取上清液，再将上
清液加入磷酸盐缓冲液-EDTA中，再次离心后取上清液即为SOD提取液。
2. 测定SOD活性：将SOD提取液与标准品、丙酮、碳酸氢钠等混合后，通过测定吸光度来测定SOD的活性。
3. 影响因素的实验：分别在不同温度、pH值、金属离子浓度等条件下进行SOD活性的测定。
实验结果：
通过实验发现，SOD的活性受到温度、pH值、金属离子浓度等因素的影响。
在适宜的条件下，SOD的活性较高，而在不适宜的条件下，SOD的活性会受到抑制。
实验结论：
SOD在生物体内起着重要的抗氧化作用，其活性受到环境条件的影响。
通过对SOD活性的测定，可以更好地了解其在生物体内的作用机制，为进一步研究提供重要的参考依据。
结语：
本实验通过测定SOD的活性，探究了不同条件对SOD活性的影响，为进一步研究SOD的作用机制提供了重要的实验数据。
希望本实验能够为相关领域的研究工作提供有益的参考。
检验科开展超氧化物歧化酶(SOD)测定的可行性报告
体检科开展超氧化物歧化酶（SOD）测定的可行性报告一、检验科开展超氧化物歧化酶（SOD）测定的必要性人体利用的氧气中约有1%-3%转化为O2-。
体内有98%的氧还原成水，1%-2%的氧还原为氧自由基。
据估计人体内的氧自由基约占总自由基的95%以上，由此可见超氧阴离子自由基很大程度的决定了总自由基的量。
大量的临床研究表明自由基是导致各种疾病的元凶，在人体中扮演着破坏者的角色，自由基过量可导致细胞膜以及蛋白质的损伤，DNA发生突变，从而发展为各种更严重的疾病。
在辐射损伤、炎症和应激反应、肿瘤病变、再灌注损伤、衰老等情况下氧自由基的量会大幅增加。
SOD 是人体内清除自由基的主要工作酶，它可以催化超氧阴离子自由基发生歧化反应生成过氧化氢及氧分子，人体内的过氧化氢酶继续催化过氧化氢生成水和氧分子，这一系列的反应可以消耗大量的氧自由基，阻止氧自由基对人体的破坏。
人体中 SOD 水平与自由基含量呈负相关，其水平的高低可间接反映机体内自由基的含量。
SOD 广泛分布于全身的各个组织，以肝含量最高，其次为肾和红细胞。
红细胞主要功能是携带氧气，暴露在富氧的环境中，因此需要大量的 SOD 用于消除可能产生的自由基。
另外在尿、脑脊液、浆膜腔积液、精液、支气管肺泡灌注液等各种体验中也含有 SOD。
二、超氧化物歧化酶（SOD）测定的原理及开展意义。
测定原理：1、邻苯三酚红桔酚 + O2ˉSOD2、 O2ˉ H2O2 + O2开展意义：(1)在健康体检方面开创了健康检测的新纪元，使机体损伤体检监测走向了健康防护监测；开创了预防体检项目能够真正意义上的新思维；开创了亚健康状态检测指标崭新模式；给健康分级能够从实验室检测量化成为一种可能。
(2)临床应用方面临床上，SOD常用于对缺血、出血性心、脑、肾、肝、肺等重要脏器病变（或手术治疗后）引发的继发性（自由基）过氧化损伤及其自由基清除药物治疗效果的监测，以指导临床制定相应的自由基清除干预对策及最佳治疗时间窗口的确立，它对自由基继发损伤病情的诊断、自由基清除治疗疗效跟踪和预后判断与评估等具有重要参考价值。
实验四 超氧化物歧化酶测定
高级植物生理实验报告植物抗性生理农学院农药学东保柱20132020542013年12月27日实验1 超氧化物歧化酶（SOD ）活性和丙二醛含量的测定（操作步骤）1 试剂配制1.1 磷酸缓冲液 (PBS) 配制注：配成PBS2000ml ，其中1000ml 用于A 液配制，另1000ml 用于酶液制备。
1.2 其它溶液配制2 酶液制备称取植物材料１g ，加少许0.05mol/L 、pH7.8的磷酸缓冲液在冰浴中研磨，最终定容制得10 ml 匀浆。
转移至10ml 离心试管中，在3000 rpm 下粗离心１分钟，粗提液再转移至2个5ml 离心管中，在冷冻离心机13000g 、４℃下离心20分钟，上清液即为酶液，用于SOD 活性和丙二醛含量的测定。
3 丙二醛含量测定吸取酶液２ml →加入Ｆ液２ml →沸水浴加热15分钟(呈粉红色)→快速冷却→4000rpm 下离心５分钟。
若以种子为材料，则加热后溶液混浊，需增加离心力。
以Ｆ液为参比液，分别在532nm 和600nm 处测定光密度值。
丙二醛含量（nmol ·g -1）＝式中：V/v --- 提取液总量(10ml)／测定液用量(2ml)R --- 反应液总量(４ml)Ｗ --- 植物材料鲜重或干重(g)0.155 --- 丙二醛的摩尔浓度消光系数(当[MDA]=1nmol/ml 时,OD 532-OD 600=0.155)[即( OD532—OD600) / 0.155的单位为1nmolMDA / ml ]室温下处理的叶片在523nm出的光密度值室温下处理的叶片在600nm出的光密度值室温下丙二醛含量（nmol·g-1）=-0.0022+0.039/0.155×4×10/2×1=4.75 nmol·g-1 冷处理下的叶片在523nm出的光密度值室温下处理的叶片在600nm出的光密度值冷处理下丙二醛含量（nmol·g-1）=0.077-0.026/0.155×4×10/2×1=6.58 nmol·g-14 超氧化物歧化酶活性测定4.1 操作及说明* 仪器调零液中的“酶液”0.1ml，可以取对照植株的，也可以取胁迫植株的。
超氧化物歧化酶
嘉兴市康慈医院开展医疗新技术新项目审批表科室检验科申请日期实施日期项目名称超氧化物歧化酶 (SOD)检测项目承担者查显友项目指导者查显友性质为老年衰老新陈代谢诊断提供参考意义项目基本情况：1、仪器：AU58002、试剂：配套3、方法：分光光度测定法4、标本要求：随机，血清、血浆特性及临床意义：别名肝蛋白、奥谷蛋白，简称：SOD。
SOD是一种源于生命体的活性物质，能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质。
对人体不断地补充SOD具有抗衰老的特殊效果。
生理性降低：一般老年人清除酶活力降低，老年人新陈代谢功能下降，酶诱导生成减少，不能维持自由基的低浓度动态平衡病理性降低：脑部神经疾病脑血管病—急性脑梗死、脑出血、蛛网膜下腔出血、HIE(Hypoxic-Ischemic Encephalopathy, 缺氧缺血性脑病)缺血性心脏病心肌缺血（冠状动脉粥样硬化性心脏病）、急性心肌梗塞医学手术救治治疗后继发损伤血标本采集注意事项★空腹静脉血，不加抗凝剂，血清管（黄盖）可行性分析及效果预测：按照浙江省医疗服务价格手册此项目收费为8元/次，为医保项目，每一个人次的成本为0.704元左右，预收益为7.296元/次。
技术操作规范：1、标本：血清、血浆。
2、操作简单：立即上机检测。
检验人员经培训指导即可操作。
3、检测速度快：20分钟左右报告结果。
存在风险及处理预案：1、无论病人是否已被诊断有传染病，都应视为传染病人。
所有标本、试剂、使用中能造成伤害的所有锐器、接触过标本的仪器设备，都应视为传染源，在实验时或是在维护时都要十分小心，应彻底消毒处理，避免对人造成感染。
2、严格物品分类，检验后的废弃物分别装入不同污染袋中。
检验人员接触污物时，必须戴手套、戴口罩和洗手，减少皮肤黏膜接触，严格消毒隔离程序，避免意外损伤，必要时戴防护眼镜。
3、洗手是控制感染的重要步骤，也是预防感染最简单、最有效、最重要的措施，检验人员应特别重视，并认真坚持。
sod实验报告
sod实验报告SOD实验报告一、引言自从人类开始探索自然界以来，科学家们一直致力于了解和解释生命的奥秘。
其中，生物学是研究生命现象和生命规律的重要学科之一。
在生物学领域中，酶是一个非常重要的研究对象。
酶作为生物催化剂，可以加速化学反应的速率，而超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，简称SOD）则是其中的一种重要酶类。
本实验旨在通过对SOD的研究，深入了解其催化机理和生物学功能。
二、实验方法1. 实验材料和仪器本实验所用材料包括SOD酶、超氧化物离子（O2-）、缓冲液、显色剂等。
实验仪器包括分光光度计、离心机等。
2. 实验步骤（1）制备SOD酶溶液：将SOD酶粉末溶解于缓冲液中，得到一定浓度的SOD酶溶液。
（2）制备超氧化物离子溶液：将超氧化物离子溶解于缓冲液中，得到一定浓度的超氧化物离子溶液。
（3）实验组设置：将一定浓度的SOD酶溶液与超氧化物离子溶液混合，并加入显色剂，形成实验组。
（4）对照组设置：将缓冲液与超氧化物离子溶液混合，并加入显色剂，形成对照组。
（5）测量吸光度：使用分光光度计测量实验组和对照组的吸光度值，并记录下来。
（6）数据处理：根据吸光度值计算SOD酶的活性。
三、实验结果通过实验测量和数据处理，我们得出了如下结果：（1）实验组的吸光度值明显低于对照组，说明SOD酶的存在可以降低超氧化物离子的浓度。
（2）根据吸光度值的差异，我们计算出了SOD酶的活性，得到了一个定量的结果。
四、实验讨论1. SOD酶的催化机理根据实验结果，我们可以推测SOD酶的催化机理。
SOD酶能够催化超氧化物离子的歧化反应，将其转化为氧气和过氧化氢。
这个反应过程中，SOD酶通过提供反应活化能降低了反应的能垒，从而加速了反应速率。
2. SOD酶的生物学功能SOD酶在生物体内起着重要的保护作用。
超氧化物离子是一种高度活性的自由基，会对细胞内的蛋白质、脂质和核酸等生物分子造成氧化损伤。
而SOD酶能够将超氧化物离子转化为较为稳定的氧气和过氧化氢，从而起到了清除自由基的作用，保护细胞免受氧化损伤。
实验四 超氧化物歧化酶测定
高级植物生理实验报告植物抗性生理农学院农药学东保柱20132020542013年12月27日实验1 超氧化物歧化酶（SOD ）活性和丙二醛含量的测定（操作步骤）1 试剂配制1.1 磷酸缓冲液 (PBS) 配制注：配成PBS2000ml ，其中1000ml 用于A 液配制，另1000ml 用于酶液制备。
1.2 其它溶液配制2 酶液制备称取植物材料１g ，加少许0.05mol/L 、pH7.8的磷酸缓冲液在冰浴中研磨，最终定容制得10 ml 匀浆。
转移至10ml 离心试管中，在3000 rpm 下粗离心１分钟，粗提液再转移至2个5ml 离心管中，在冷冻离心机13000g 、４℃下离心20分钟，上清液即为酶液，用于SOD 活性和丙二醛含量的测定。
3 丙二醛含量测定吸取酶液２ml →加入Ｆ液２ml →沸水浴加热15分钟(呈粉红色)→快速冷却→4000rpm 下离心５分钟。
若以种子为材料，则加热后溶液混浊，需增加离心力。
以Ｆ液为参比液，分别在532nm 和600nm 处测定光密度值。
丙二醛含量（nmol ·g -1）＝式中：V/v --- 提取液总量(10ml)／测定液用量(2ml)R --- 反应液总量(４ml)Ｗ --- 植物材料鲜重或干重(g)0.155 --- 丙二醛的摩尔浓度消光系数(当[MDA]=1nmol/ml 时,OD 532-OD 600=0.155)[即( OD532—OD600) / 0.155的单位为1nmolMDA / ml ]室温下处理的叶片在523nm出的光密度值室温下处理的叶片在600nm出的光密度值室温下丙二醛含量（nmol·g-1）=-0.0022+0.039/0.155×4×10/2×1=4.75 nmol·g-1 冷处理下的叶片在523nm出的光密度值室温下处理的叶片在600nm出的光密度值冷处理下丙二醛含量（nmol·g-1）=0.077-0.026/0.155×4×10/2×1=6.58 nmol·g-14 超氧化物歧化酶活性测定4.1 操作及说明* 仪器调零液中的“酶液”0.1ml，可以取对照植株的，也可以取胁迫植株的。
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体检科开展超氧化物歧化酶（SOD）测定的可行性报告
一、检验科开展超氧化物歧化酶（SOD）测定的必要性
人体利用的氧气中约有1%-3%转化为O2-。
体内有98%的氧还原成水，1%-2%的氧还原为氧自由基。
据估计人体内的氧自由基约占总自由基的95%以上，由此可见超氧阴离子自由基很大程度的决定了总自由基的量。
大量的临床研究表明自由基是导致各种疾病的元凶，在人体中扮演着破坏者的角色，自由基过量可导致细胞膜以及蛋白质的损伤，DNA发生突变，从而发展为各种更严重的疾病。
在辐射损伤、炎症和应激反应、肿瘤病变、再灌注损伤、衰老等情况下氧自由基的量会大幅增加。
SOD 是人体内清除自由基的主要工作酶，它可以催化超氧阴离子自由基发生歧化反应生成过氧化氢及氧分子，人体内的过氧化氢酶继续催化过氧化氢生成水和氧分子，这一系列的反应可以消耗大量的氧自由基，阻止氧自由基对人体的破坏。
人体中 SOD 水平与自由基含量呈负相关，其水平的高低可间接反映机体内自由基的含量。
SOD 广泛分布于全身的各个组织，以肝含量最高，其次为肾和红细胞。
红细胞主要功能是携带氧气，暴露在富氧的环境中，因此需要大量的 SOD 用于消除可能产生的自由基。
另外在尿、脑脊液、浆膜腔积液、精液、支气管肺泡灌注液等各种体验中也含有 SOD。
二、超氧化物歧化酶（SOD）测定的原理及开展意义。
测定原理：
1、邻苯三酚红桔酚 + O2ˉ
SOD
2、 O2ˉ H2O2 + O2
开展意义：
(1)在健康体检方面
开创了健康检测的新纪元，使机体损伤体检监测走向了健康防护监测；开创了预防体检项目能够真正意义上的新思维；开创了亚健康状态检测指标崭新模式；给健康分级能够从实验室检测量化成为一种可能。
(2)临床应用方面
临床上，SOD常用于对缺血、出血性心、脑、肾、肝、肺等重要脏器病变（或手术治疗后）引发的继发性（自由基）过氧化损伤及其自由基清除药物治疗效果的监测，以指导临床制定相应的自由基清除干预对策及最佳治疗时间窗口的确立，它对自由基继发损伤病情的诊断、自由基清除治疗疗效跟踪和预后判断与评估等具有重要参考价值。
比较一致的意见是：SOD测定虽然是一种非特异的辅助诊断指标，对机体自由基代谢紊
乱、自由基清除干预对策、以及对于同一病患者病程转归（自由基损伤的加剧或降低、自由基清除剂药物或手术治疗效果）的判断，对临床上急、慢性疾病的疗效观察、预后以及并发症的预测，临床上经常出现的对症治疗无效、实时动态监测比现普遍用的“三大常规”更具有非常重要参考价值。
临床意义：
1、SOD水平降低
（1）生理性降低：
①机体抗氧化营养素摄入不足如VitE、VitA, VitC、β-胡萝卜素、硒、铜、锌、锰
等缺乏，硒是GSHPS的组成部分，铜、锌是Cu/Zn-SOD的成分，锰是Mn-SOD的成分。
②一般老年人清除酶活力降低老年人新陈代谢功能下降，酶诱导生成减少，不能维持
自由基的低浓度动态平衡。
（2）病理性降低：
①脑部神经疾病
脑血管病：急性脑梗死、脑出血、蛛网膜下腔出血、HIE。
外伤：颅脑损伤。
②缺血性心脏病
心肌缺血（冠状动脉粥状硬化性心脏病）、急性心肌梗塞。
③医学手术救治治疗后继发损伤
◆缺血-再灌注损伤（IRI）
全身循环障碍待恢复血液供应后造成再灌注损伤：休克微循环痉挛解除、心脏骤停
后心脑肺复苏、体外循环的建立与撤除(如：心脏外科体外循环术后重新恢复血液供
应后可能造成心肌缺血-再灌注损伤等)。
某一组织器官缺血后血流恢复或某一血管再通后造成再灌注损伤：如动脉搭桥术、经皮腔内冠脉血管成形术（PTCA）、溶栓疗法、器官移植、断肢再植、冠状动脉痉挛
解除等
◆高压氧（HBO）治疗后过度氧化损伤
◆放射治疗后过氧化损伤：放射性脑病
2、SOD水平增高
（1）生理性增高
长时间外源性增加过多SOD，机体将不能维持一定量的自由基水平，免疫细胞使用自由基作为一个方法执行其免疫功能，过低的自由基会引起生理生化过程失常，破坏正常的生理功能，如：机体解毒、吞噬功能下降、凝血过程受阻及胶原蛋白、前列腺素、环核苷酸合成受损等，并引起严重的毒副作用。
（2）病理性增高：
国内外研究表明，在急性病患发生初期，当机体自由基产生大幅过多激增时，机体会很快引起氧化应激，并影响到蛋白质表达等调节、应答机制。
在自由基的诱导及机体代偿应激下，细胞或机体会诱导性地增强抗氧化能力，一般会出现一过性SOD水平增高现象。
但随着高浓度自由基对SOD的大量消耗，以及机体的失代偿，SOD的生物合成能力会很快回落到低水平，并与较高浓度的自由基保持新的动态平衡。
三、开展超氧化物歧化酶（SOD）测定的经济效益分析
1、投入情况：直接在生化仪上进行，不需投入新设备及其它成本。
2、经济效益：根据省内其它同类医院分析，按每天200人份计算，收费41元/人份，试剂成本24元/人份，每月按25天计算，每月利润：200×17×25＝85000元
鉴于上述开展超氧化物歧化酶（SOD）测定的社会和经济效益，检验科拟在近期开展超氧化物歧化酶（SOD）的项目测定。
四、目前省内已开展此项目的医院及开展情况
2013年版的《医疗机构临床检验项目目录（2013年版）》中已将超氧化物歧化酶（SOD）划入肾功能检测项目。
北京、上海、山东、广东、陕西等省早已开展此类项目并取得了良好的社会效益及经济效益。
我省目前已开展此类检测项目的医院及开展情况列举如下：
南昌大学第二附属医院（生化）
南昌市第三医院（生化、体检）
南昌大学第四附属医院
新余市人民医院（生化、体检）
新余市中医院（生化、体检）
新余市妇幼保健院（生化）
新建县人民医院（生化）
新建县中医院（生化、肝功能、肾功能）
分宜县人民医院
上高县人民医院
……。