牙科生物材料细胞毒性试验方法的研究进展
3Y-TZP全瓷材料体外细胞毒性试验(MTT法)
3Ｙ－ＴＺＰ全瓷材料体外细胞毒性试验（ＭＴＴ法）目的：初步评价牙科全瓷材料3Y-TZP生物相容性。
方法：根据ISO标准采用体外细胞毒实验（MTT法）测试不同浓度和浸提时间的材料浸提液L-929小鼠结缔组织成纤维细胞的影响从而对全瓷材料3Y-TZP的生物相容性进行初筛。
结果：各浓度组OD值均与阴性对照无显著性差异（P>0.05），与阳性组差异显著(P＜0.01)，材料毒性级别0级。
结论：两种材料体外细胞毒实验阴性，初步认为材料具有较好的生物相容性。
Abstract: Objective To preliminarily evaluate the biocompatibility of 3Y-TZP which were used as a new dental all-ceramic materials. Methods According to ISO standards, in vitro cytotoxicity-test (MTT method) on L-929 cell were carried on. Results The OD-value of each test group were similar to the negative control and significantly different from positive control which indicated that the materials tested were safe to L-929 cells. Conclusion It is preliminarily estimated that 3Y-TZP is a safe material for dental clinical application.Key words：3Y-TZP;biocompatibility;vitro cytotoxicity-test(MTT method)随着人们对审美要求的不断提高，越来越多的修复专业人士及患者乐于接受色泽逼真，无龈缘灰线的全瓷修复体。
四种牙科陶瓷材料细胞毒性研究
四种牙科陶瓷材料细胞毒性研究目的:初步评价牙科陶瓷材料的生物相容性。
方法:根据ISO标准采用体外细胞毒性试验(MTT法)测试不同材料和浸提时间的浸提液对L929小鼠结缔组织成纤维细胞的影响,从而对全瓷材料的生物相容性进行初筛。
结果:各组A490 nm 值均与阴性对照无显著性差异(P>0.05),材料毒性级别除培养48 h后金属烤瓷粉浸提液组的细胞毒性为1级外,其他各浸提液组均为0级。
结论:四种材料体外细胞毒性实验阴性,初步认为材料具有较好的生物相容性。
[Abstract] Objective: To preliminarily evaluate the biocompatibility of four dental ceramics materials. Methods: According to ISO standards, in vitro cytotoxicity-test(MTT method) on L929 cells were carried on. Results: The A-value of each test group were similar to the negative control and the cytotoxicity of low-temperature ceramic group after 48 hours culture was in grade 1 and those of the other groups were all in grade 0. Conclusion: It is preliminarily estimated that four dental ceramics are safe for dental clinical application.[Key words] Dental ceramics materials; Biocompatibility; In vitro cytotoxicity-test (MTT method)目前临床普遍应用的金瓷修复体存在色彩及生物相容性等方面的不足,随着修复技术及材料学的发展,非贵金属烤瓷冠的不足之处亦表现出来[1],全瓷冠具有与牙釉质相似的折光性、颜色与邻牙协调等优点,临床效果良好[2]。
多孔NiTi合金种植材料的细胞毒性实验研究
ａ ｄｐｏ ｉｅｅｉｅ ｃ ｒａｉ ｌ ｘ ｅ ｍｅ ｔ ｎ ｈ ｉ ｐ ｈ ａ ｏ 、 ｔ ｏ ｓ Ｔ ｅｂｏｏ ｃ ａ ｔ ｆ ｎ ｒｖｄ ｖｄ ｎ ｅｆ ｎｍａ ｅ ｐ ｒ ｎ ｄｃ ｎｃ ａｐ ｃｔ ｎ Ｍｅｈ ｄ ： ｈ ｉｌｇ ａ ｓ ｅ ｏ ｏ ｉ ａ ｌ ａ ｉ ｉ ｌ ｆｙ
多孔 Ｎ Ｔ 合金材 料与多孔 Ｎ Ｔ ｉｉ ｉ ｉ灌注羟基 磷灰石试样 作 为实验组，纯铅为阳性对照组 ，光滑纯钛 为阴性对照组 ，
未放 置 任 何 浸 提 物 的 Ｒ Ｍ培 养 液 为 空 白对 照 。 Ｐ
Ｋｅ ｒ ｓ ｄ ｎ ａ ｐ ａ ｔ ； ｐ ｒ ｕ ｔ ｃｕ ｅ ｃ ｔ ｔ ｘ ｃｔ ｙ ｗｏ ｄ ： ｅ ｔｌ ｍ ｌｎ ｓ ｉ ｏ ｏ ｓｓ ｕ ｔ ｒ ； ｙ ｏ ｏ ｉｉ ｒ ｙ
多孔 状 结构 的材 料 改变 了种 植 体表 面 的 形 态 ，
小时。 １ ２ 方 法 ．
中 图分 类 号 ：Ｒ ８ ． ７ ３６ 文献 标 识 码 ： Ａ 文 章编 号 ： １０ — ９ ７２０ ）２ ０ — ５ — ０ ７ ３５ （０ ７１— ４ １５ ３
Ｔｈ ｔ ｄ ｆＣｙ ｏ ｏ ｉｉｙ ０ ｈ ｒ ｕ ｅ Ｓ ｕ ｙ ０ ｔ ｔ ｘ ｃｔ ｆｔ ｅ Ｐｏ ｏ ｓ
Ｏｂｅｔ ｅ Ｔ ｖｌａ ｅ ｉｌｇｃ ｆｔ ｏ ｒｕ Ｔ ｌｙｆｒ ｏｓ ｌ ｕｅａ ｄ ｎａ ｉ ｌ ｔ ｊｃｉ ： ｏｅ ａ ｔ ｔ ｏ ｉ ｓ ｅｙ ｆ ｏｏ ｓ ｖ ｕ ｅｈ ｂ ｏ ａ ａ ｐ ｌ Ｎｉ ｉｌ ｓｂｅ ｓ ｅ ｔ ａ ， ａｏ ｏ ｐ ｉ ｓ ｌｍｐ ｎ
壳聚糖-丝素-磷酸三钙复合支架的细胞毒性研究
四环科 学 仪 器 厂 ） ：高 糖 达 氏 修 正 依 氏 培 养 基 （ ＭＥ （ ｉｃ 公 司 ）胎 牛 血 清 （ 州 四季青 生 物 Ｄ Ｍ）Ｇｂｏ ； 杭
价该复合支架材料是否具有潜在的细胞毒性作用 ， 为其 作 为细胞 生 长支持 物 和牙周组 织工 程支 架材料
提供 实 验依据 。
支架 材料 的研 究是牙 周组 织工 程 的重要组 成部 分 ， 课 题应用 共混 修饰 的方 法将 壳 聚糖 、 素与磷 本 丝 酸 三 钙 ３种 材 料 混合 制 备 成 一 种 多 孔 复合 支 架 材 料 ， 择 细胞 毒性 试 验来 评 估 该 支架 材料 的生 物相 选
容性 。选择小 鼠皮肤 成纤 维 细胞 系 Ｌ ９ ９细 胞作 为 ．２
柏 国艳 张 蕊 赵 彬 张 芳
【 摘 要 】 目的 对壳聚糖一 丝素一 磷酸三钙复合支架体外进行细胞毒性实验 ， 材料在牙周组织工程 中 为该
的应用 提供依据 。方法 制备壳 聚糖． 丝素一 三钙复合支架 ， 磷酸 并制备该支架材料 的浸提液 ， 通过 四甲基偶氮 唑
盐 （ Ｙ 法检测 ２ ％、０ １０ ＭＴ ） ５ ５ ％、０ ％浓度 的壳聚糖一 丝素． 磷酸三钙浸提液对小 鼠皮肤成纤 维细胞系 Ｌ９ ９细胞的毒 ．２
ｚ Ａ ＧＲ ｉｚ Ａ０Ｂｎ Ｚ Ａ ＧＦ ｎ ．Ｄ ｐ ｒ ｎ ｏ Ｏ ａ Ｓ ａｘ ｄｃ ｎ ｅｓｙ Ｔｉｕｎ０ ０ ０ ． ｈｎ Ｈ Ｎ ｕ， Ｈ ｉ． Ｈ Ｎ ａｇ ＊ｅａｔ ｔ ｆ ｒ ， ｈ ｔ ｍｅ ｌ ｎ Ｍｅｉ Ｕ ｉ ｒｉ， ａ ａ ３０ １ Ｃ ｉａ ｌ ａ ｖ ｔ ｙ 【 ｂ ｔ ｃ】０ｂｅｔ ｅ Ｔ ｅｆ ｍｅ ｙｏ ｘｃｙｔ ｔ ｎｃｉ ｓｎｓｋｆ ｒｉ—ｉａ ｉｍ ｐ ｏｐ ａ Ｔ Ｐ ｏ — Ａ ｓｒ ｔ ａ ｊｃ ｖ ｏｐｒ ｒ ｄｃｔｔ ｉ ｔ ｅ ｈｔ ａ— ｌ ｉ ｏｎｔｃｌｕ ｈ ｓｈ ｔ Ｃ １ｃｍ ｉ ｏ ｏ ｉ ｓｏ ｏ ｉ ｂ ｒ ｃ ｅ（
不同齿科合金对L929细胞的毒性及凋亡相关基因表达的影响
不同齿科合金对L929细胞的毒性及凋亡相关基因表达的影响目的齿科合金作为口腔修复的常用材料,在口腔内行使功能时,会发生各种形式的腐蚀。
细胞毒性一直是医用金属材料使用中的重要问题之一。
随着分子生物学的迅速发展,生物材料生物相容性的研究手段逐渐多样化,其评价已从整体、细胞水平进入了分子水平。
本研究应用MTT法和RT-PCR法比较了在细胞水平和分子水平上5种齿科合金浸提液对小鼠L929细胞的影响,为从分子水平上评价材料的生物相容性提供实验依据。
材料与方法一、细胞培养L929细胞用含10%胎牛血清的RPMI 1640细胞培养基在37℃、5%CO2的培养箱中培养并传代。
二、本实验室L929细胞生长代谢曲线将对数生长期的L929细胞按1～10×10~4个/ml制成10种不同浓度的细胞悬液,72小时后加入MTT液继续培养4小时后加入DMSO,在波长为490nm的条件下测其光密度值(OD值),计算各浓度组均值制图。
三、MTT实验根据上述曲线确定接种细胞悬液的浓度。
以5种金属浸提液及阴性对照培养L929细胞48小时后测其OD值,计算细胞增殖率P。
四、RT-PCR实验将5种金属合金浸提液及阴性对照与L929细胞培养48小时,用RT-PCR方法检测细胞caspase-3、caspase-8和caspase-9的mRNA表达。
结果一、细胞生长曲线结果当接种细胞量＜4000个/孔时各组的差异不明显。
当细胞量≥7000个/孔时,OD值随着接种细胞量的增加反而降低。
最佳细胞状态为5000-7000个/孔。
二、MTT实验评价细胞毒性5种合金浸提液在MTT比色法结果中,培养48h 后除铜浸提液组的细胞毒性为4级外,其它各浸提液组均为0级。
三、5种合金浸提液对L929细胞caspase-3、caspase-8和caspase-9mRNA表达的影响5种合金浸提液及阴性对照培养的L929细胞的caspase-8mRNA无明显差异caspase-3和caspase-9mRNA差异显著,由低到高依次为铜合金组＜阴性对照组＜金合金组＜钴铬合金组＜银钯合金组＜镍铬合金组。
口腔材料细胞毒性评价方法的研究进展
口腔材料细胞毒性评价方法的研究进展作者：石平蒋均红来源：《中国美容医学》2014年第14期随着科学技术的进步，每年都有大量的口腔材料出现，而材料的生物相容性评价是确保材料能否用于人体的最重要因素，在细胞培养基础上的细胞毒性试验作为检测生物材料毒性的手段目前已广泛应用于口腔材料的生物相容性评价。
细胞毒性试验[1]是运用体外细胞培养技术检测医疗器械和（或）其浸提液可能造成的细胞生长抑制、细胞变异、细胞溶解、细胞死亡等影响细胞正常功能和生物学行为的作用。
该实验是各种医疗器械临床应用前安全性评价的必选项目和重要指标，其特点是能在短期内检出供试品对细胞新陈代谢的影响，对毒性物质具有较大的敏感性，试验重复性好，可以减少不必要的动物体内实验。
本文就细胞培养及两种细胞毒性的评价方法综述如下。
1 细胞培养的历史沿革细胞生物学是生命科学的理论基础，也是现代生命科学的前沿科学，而细胞培养是其中的重要部分。
细胞培养分为原代培养和传代培养[2]，目前细胞培养技术广泛应用于生物医学各个领域，是分子生物学和实验室生物技术等的核心实验室技术[3]。
细胞培养始于20世纪初，1907年，Harrison利用悬滴法将分离自青蛙胚胎的神经细胞种植在青蛙的淋巴液中，首次在体外模拟了细胞的生长活动，为后来开展体外细胞研究开辟了新途径， Harrison也因此被誉为“细胞培养之父”[4]。
1910年， Burrows在从Harrison实验室学习了这种技术以后尝试用鸡血浆代替淋巴液培养细胞并获成功。
此后，Burrows与其外科医生出身的同事Alexis Carrel进一步致力于哺乳动物组织的培养技术研究。
1912年，Alexis Carrel[4]将外科手术严格的无菌技术引入细胞培养并发明了专门的细胞培瓶（Carr-el flask，卡氏培养瓶），显著改良了Harrison所建立的培养技术并将其应用于成年组织细胞和肿瘤细胞的体外培养实践中，由于此研究成果的重大贡献，1912年，Alexis Carrel被授予诺贝尔医学与生理学奖，此后Alexis Carrel在体外成功培养了分离自鸡胚心脏的心肌细胞，并将其一直培养到了1946年，证明了体外细胞不但可以存活而且能传代增殖。
细胞培养法评价生物材料生物相容性研究进展
细胞培养法评价生物材料生物相容性研究进展细胞培养法检测材料生物相容性是一种快速、简便、重复性好又价廉的方法，在材料生物相容性评价中起着越来越重要的作用。
由于新材料不断涌现、材料植入体内的部位及使用目的日趋繁杂、材料毒性作用的强弱以及与机体反应的复杂性等因素决定了细胞毒性试验中实验方法及实验细胞的多样性。
根据生物材料本身的理化特性、植入体内的部位及使用目的选择适当的实验方法和实验细胞至关重要。
以往对材料生物相容性的评价往往着眼于细胞的形态与数量的变化，近几年来研究材料对细胞生长、附着、增殖及代谢方面影响的报道日趋增多，并提出了以有活力的细胞数和细胞生长作为材料生物相容性评价标准的观点。
通过结合免疫、化学、放射及影像学等多学科的技术发展，使人们进一步深入了解细胞结构和功能的变化关系，进而阐明材料对细胞的作用机制，是今后细胞培养法评价材料生物相容性的发展方向。
Abstract It is quick convient good-repeating and cheap that examining the biotic materials compatibility through cell-culturing method,and it is more and more important in evaluating the compatibility of biotic material.The new material appeating continously complicating of the part and aim material be planted in the intensity of materials toxic effectthe reactions complication of material and biotic body,all of these decide the variety of experiment method and cells in cell toxicity experiment.It is very important that choices the right experiment method and cells according to the materials character the part and aim the material be planted in .The evaluation of biotic materials compatibility stressed on the changing of cells form and quantity before.Inrecent years,more and more reports appear about material influeances the growth.adhesion proliferation and metabolizing of cell.and presents the point that the evaluation standard of biotic materials compatibility should be set according to the active cells quantity and their bining many subjects technological development,such as immunology, chemistry,radiation and shadowgraphy,thoroughly inquires the changeing relation of cells structure and funtion,furtherly clarifes the materials effect on cell,It is the developing direction in the future that evaluates the biotic materials compatibility in cedd-culturing method.Key words Biotic material Cell-culturing Compatibility Toxicity experiment生物材料的临床应用已有较长的历史，广泛应用于牙科、眼科、整形外科及心血管外科领域。
两种牙科材料对人胚胎干细胞来源成纤维细胞的细胞毒性研究
Ｃｙ ｏ ｏ ｉｉ ｆ ｔ ｅ ｔ ｌｍ ａｅ ｉｌ ｎ ｆｂ ｏ ｌｓｓ ｄ ｒｖ ｄ ｆｏ ｈ ｍ ａ ｍ ｂ ｙ ｎ ｃ ｔ ｔ ｘｃｔ ｏ ｗｏ ｄ ｎ ａ ｔｒａｓ ｏ ｒ ｂ ａ ｔ ｅ ｉｅ ｒ ｍ ｕ ｙ ｉ ｎ ｅ ｒ ｏ ｉ
ｓ ｅ ｅ ｌ ｔｍ ｃ ｌ ｓ
Ｚ ＨＡＮ ａ Ｙｕ ｎ ，Ｗ ＡＮＧ Ｘｉ ｏ ｙｎ ２ Ｌ ｈ ｎ － ｎ ，ＦＵ Ｘｉ ，ＹＵ Ｇ ａ ｇ ｙ ，Ｃ ｏ ｇ ，Ｌ Ｕ ａ — ｉｇ ， ＩＳ ｅ ｇ ｌ ｉ ｎ ｕ ｎ —ａ ｎ ＡＯ Ｔ ｎ Ｉ Ｈｅ △
ｏ ｂ ｏ ｌｓｓ ｄ ｒ ｅ ｒｍ ｕ ｎ ｅ ｒｏ ｂ ｄ ｉｒｂａ ｔ． ｎｆ ｒ ｂａｔ ｅ ｖ ｄ ｆｏ ｈ ｍａ ｍｂｙ ｏ ｙ ｆ ｏ ｌｓ Ｈ９ （Ｅ ｆＨ９） ｕ ｎ ｅ ｔ ｕｐ ｃ ｌ ｉ ｉ ｂ ｓ Ｂ－ ．ｈ ｍａ ｄ ｎａ ｐ ｌ ｅｌ ｌ ｓ （ Ｄ Ｃ ）ａ ｄｉ ｍｏｔ ｉ ｄｆ ｒｂａｔ Ｌ ２ ａ ｄｔ ｅａ ａ ｈ ｓ ｆ Ｂ ＿ ９ ａ ｅ ｕａ ｄ ｌ ｏ ｈＰｓ ｎ ｍ ｒ ｚ ｂｏ ｌ ｓ ９ ９： ｎ ｏ ｖｌ ｔ ｔｅｕｅｏ ｆ ｓａｃｌ ｌ ｍｏｅ ｆ ｌ ａ ｅ ｉ ｓ ｕ ｅ Ｅ Ｈ ｌ ｒ ｒ
战 园 ， 王晓颖 李盛林 傅 ， ， 歆 俞光岩 ，曹 彤。 刘 鹤 一， ，
（ 北京 大学 口腔医学院 ・口腔 医院 １ 儿 童 口腔 科 ， ． ． ２ 口腔颌 面外科 ， 北京 １０ ８ ； ．Ｆ ｃｌ ｆＤ ｎ ｓｙ ａｏａ ０ ０ １ ３ ａｕｔ ｏ ｅｔｔ ，Ｎ ｔ ｎｌ ｙ ｉｒ ｉ Ｕ ｉ ｒｔ ｆ ｉｇｐｒ， ｉｇｐ ｒ １７ １ ；．中国医学 科学院整形外科 医院研究 中心 ， ｎｖ ｓｙｏ ｎ ａｏｅ Ｓｎ ａｏｅ １５ ０ ４ ｅｉ Ｓ 北京 １０ ４ ） ０ １４
3D打印钛合金牙种植体的细胞毒性的研究
3D打印钛合金牙种植体的细胞毒性的研究王骅王鹞张彪【摘要】目的：利用MTT比色实验，检测以3D打印技术铸造出的钛合金牙种植体的细胞毒性，评测新型铸造工艺的可行性，为下一步的临床应用提供理论依据。
方法：我们以专业软件设计建立计算机模型，选取Ti-6Al-4V、Ti-6Al-7Nb两种不同的钛合金作为铸造原材料，以3D打印技术铸造出同样规格的三种实验标准片。
实验主要分为3组，即Ti-6Al-4V组、Ti-6Al-7Nb组、空白对照组。
通过MTT比色实验方法，我们分别检测了这三种标准件对于成骨细胞MG63增殖率的影响，来完成对于3D打印技术的评价。
结果：在倒置相差显微镜下我们观察到：三组细胞的生长状态均良好，实验组与空白对照组相比，细胞形态无显著区别。
MTT比色结果显示，两组钛片的细胞毒性分级均为0级，同时，Ti-6Al-7Nb钛合金片增殖率略高于Ti-6Al-4V钛合金片浸提液组。
结论：通过3D打印技术铸造出的的钛合金种植体，其细胞毒性水平满足口腔种植材料临床应用的要求，且Ti-6Al-7Nb 的细胞毒性水平略低于Ti-6Al-4V。
【关键词】3D打印；TC4；牙种植体；细胞毒性中图分类号：R781文献标识码：A文章编号：1007-3957（2019）01-10-4Study of the cytotoxicity for3D printed titanium alloy dental implantsWANG Hua,WANG Yao,ZHANG BiaoHospital of Stomatology Wuhu,Wuhu241000,Anhui Province,ChinaAbstractObjective:MTT colorimetric assay was used to detect the cytotoxicity of titanium alloy dental im-plant cast by3D printing technology,and to evaluate the feasibility of the new casting process,so as to provide theoretical basis for further clinical application.Methods:We used professional software design to build the computer model,selected two different titanium alloys Ti-6Al-4V and Ti-6Al-7Nb as the casting raw materials,and cast three kinds of experimental standard plates of the same specification by 3D printing technology.The experiment was mainly divided into three groups,namely Ti-6Al-4V group,Ti-6Al-7Nb group and blank control group.By MTT colorimetric assay,we tested the effects of these three standard components on the proliferation rate of osteoblast MG63to complete the evaluation of3D printing technology.Results:Under the inverted phase contrast microscope,we observed that the growth status of cells in the three groups were all good,and there was no significant difference in cell morphology between the experimental group and the blank control group.MTT colorimetric results showed that the cytotoxicity level of the two groups of titanium sheets was0.Meanwhile,the prolifera-tion rate of Ti-6Al-7Nb titanium alloy sheets was slightly higher than that of Ti-6Al-4V titanium alloy sheet extraction solution group.Conclusion:The cytotoxicity level of titanium alloy implants cast by3D printing technology meets the requirements of clinical application of oral implant materials,and the cy-totoxicity level of Ti-6Al-7Nb is slightly lower than that of Ti-6Al-4VKey words:3D printing,TC4,implant,cytotoxicity作者单位：241000芜湖市口腔医院（王骅，张彪）；长春吉林大学口腔医院种植中心（王鹞）。
口腔材料细胞毒性评价方法的研究进展
口腔材料细胞毒性评价方法的研究进展随着科学技术的进步，每年都有大量的口腔材料出现，而材料的生物相容性评价是确保材料能否用于人体的最重要因素，在细胞培养基础上的细胞毒性试验作为检测生物材料毒性的手段目前已广泛应用于口腔材料的生物相容性评价。
细胞毒性试验[1]是运用体外细胞培养技术检测医疗器械和（或）其浸提液可能造成的细胞生长抑制、细胞变异、细胞溶解、细胞死亡等影响细胞正常功能和生物学行为的作用。
该实验是各种医疗器械临床应用前安全性评价的必选项目和重要指标，其特点是能在短期内检出供试品对细胞新陈代谢的影响，对毒性物质具有较大的敏感性，试验重复性好，可以减少不必要的动物体内实验。
本文就细胞培养及两种细胞毒性的评价方法综述如下。
1 细胞培养的历史沿革细胞生物学是生命科学的理论基础，也是现代生命科学的前沿科学，而细胞培养是其中的重要部分。
细胞培养分为原代培养和传代培养[2]，目前细胞培养技术广泛应用于生物医学各个领域，是分子生物学和实验室生物技术等的核心实验室技术[3]。
细胞培养始于20世纪初，1907年，Harrison利用悬滴法将分离自青蛙胚胎的神经细胞种植在青蛙的淋巴液中，首次在体外模拟了细胞的生长活动，为后来开展体外细胞研究开辟了新途径，Harrison也因此被誉为“细胞培养之父”[4]。
1910年，Burrows在从Harrison实验室学习了这种技术以后尝试用鸡血浆代替淋巴液培养细胞并获成功。
此后，Burrows与其外科医生出身的同事Alexis Carrel进一步致力于哺乳动物组织的培养技术研究。
1912年，Alexis Carrel[4]将外科手术严格的无菌技术引入细胞培养并发明了专门的细胞培瓶（Carr-el flask，卡氏培养瓶），显著改良了Harrison所建立的培养技术并将其应用于成年组织细胞和肿瘤细胞的体外培养实践中，由于此研究成果的重大贡献，1912年，Alexis Carrel被授予诺贝尔医学与生理学奖，此后Alexis Carrel在体外成功培养了分离自鸡胚心脏的心肌细胞，并将其一直培养到了1946年，证明了体外细胞不但可以存活而且能传代增殖。
壳聚糖温敏凝胶对人牙龈成纤维细胞的毒性研究
壳聚糖温敏凝胶是一种使用方便、应用优异的载药材料，近年来受到高度关注[1-4]。
其主要成分是天然高分子材料壳聚糖，室温条件下呈生理中性的溶液，当温度升高到37℃时可以迅速转变为半固态的水凝胶。
该载体材料已经被用于关节修复、肿瘤治疗、长效镇痛等研究。
但能否用于及如何用于牙周病治疗未见报道。
成纤维细胞是牙周组织中最主要的功能细胞，任何原因所造成的成纤维细胞功能破坏，都能导致牙周支持组织的丧失。
理想的牙周病治疗药物，既要达到良好的抑菌效果，又要对成纤维细胞具有较小的细胞毒性作用。
本研究自制壳聚糖温敏凝胶，采用体外细胞培养技术和四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法研究自制壳聚糖温敏凝胶对人牙龈成纤维细胞的毒性作用，为其在临床上的开发应用提供依据。
材料和方法1 主要试剂与仪器 壳聚糖、β-甘油磷酸钠(Sigma-Aldrich公司，美国)，DMEM细胞培养基、胎牛血清和胰蛋白酶(北京海克隆生物化学制品有限公司);四甲基偶氮唑盐(MTT，美国Sigma);二甲基亚砜(DMSO，分析纯，北京化工厂产品)。
标准型细胞培养板(美国Corning);二氧化碳细胞培养箱，型号: BBGP系列(上海仕博生物技术有限公司北京分公司);倒置相差显微镜CK型(日本Olympus);高速低温离心机，型号: 1-15K(德国Sigma);超净工作台，型号: YJ900(苏州工业园区三兴净化科技有限公司);酶标仪，型号: 550(Bio-Rad)。
壳聚糖温敏凝胶对人牙龈成纤维细胞的毒性研究王立妍1，彭 伟2，穆 玉21唐山市开滦医疗集团医院，河北唐山 063000；2华北煤炭医学院 口腔系，河北唐山 063000摘要:目的了解壳聚糖温敏凝胶对人牙龈成纤维细胞的毒性作用，为其治疗牙周病提供依据。
方法 人牙龈成纤维细胞在不同浓度的壳聚糖温敏凝胶中体外培养24h、48h、72h、96h，用MTT法测定细胞相对增殖率(RGR)， 判断细胞毒性的级别。
齿科植入材料的生物力学性能评估与测试方法
齿科植入材料的生物力学性能评估与测试方法绪论在现代齿科领域，植入材料的生物力学性能评估与测试方法对于确保植入修复件的长期稳定性和可靠性至关重要。
牙齿的功能主要包括咀嚼、咽喉以及与周围牙齿的相互配合等方面。
因此，植入修复件必须具备足够的生物力学性能，以承受来自口腔环境、咬合力和颌骨承载的力量。
本文将介绍齿科植入材料生物力学性能评估的基本原则和常用测试方法。
一、生物力学性能评估的基本原则1. 力学性能：植入材料的力学性能是评估其生物力学性能的重要指标之一。
常见的力学性能指标包括弹性模量、抗弯强度、断裂韧性和硬度等。
这些指标可以通过拉伸、压缩、弯曲和冲击等试验方法来进行评估。
2. 生物相容性：植入材料的生物相容性是指材料在体内时是否引发不良反应，如炎症、感染或毒性。
生物相容性评估可以通过体内和体外试验方法来进行，常用的方法包括细胞毒性测试、组织刺激性测试和动物实验。
3. 磨损性能：植入修复件在长期使用过程中会受到摩擦和磨损的影响，因此评估其磨损性能对于保证修复件的长期稳定性至关重要。
磨损性能评估方法主要包括摩擦学和磨损试验等。
4. 疲劳性能：植入修复件在咬合力的作用下会受到循环应力的影响，如果材料的疲劳性能不足，可能导致修复件的疲劳断裂。
评估材料的疲劳性能可以通过循环加载试验来进行。
二、齿科植入材料生物力学性能测试方法1. 拉伸试验：拉伸试验用于评估材料的弹性模量、抗拉强度和断裂韧性等力学性能指标。
在拉伸试验中，材料样品被施加拉力，直至断裂。
通过测量材料在断裂前的变形和断裂点位置来确定其力学性能。
2. 弯曲试验：弯曲试验广泛用于评估材料的弯曲强度和刚度。
材料样品在两个支撑点上施加负载，通过测量样品的挠度和负载来评估其弯曲性能。
弯曲试验还可以评估材料的疲劳性能，通过施加循环加载来模拟修复件在咬合过程中的循环应力。
3. 压缩试验：压缩试验用于评估材料的抗压强度和刚度。
材料样品被施加压力，通过测量压缩载荷和变形来确定其力学性能。
6种根管封闭剂的体外细胞毒性比较研究
6种根管封闭剂的体外细胞毒性比较研究随着牙髓病学和材料学的发展，近年来国内出现了许多新型的成品根管封闭剂，其良好的流动性是保证根管严密充填的因素之一。
临床中常见到一些接受了规范的根管治疗却治疗失败的病例，这种情况除了和根管系统的复杂性有关外，还和根管封闭剂的溶解产物可能成为半抗原对根尖周组织产生影响有关。
目前临床应用的根管封闭剂种类繁多，但医生对其生物安全性不甚了解。
因此，本实验选取了6种具有代表性新型的根管封闭剂进行体外细胞毒性比较实验，以期选择出生物安全性更优的材料，指导临床应用。
目的：通过体外细胞毒性比较实验，评价6种根管封闭剂的生物安全性。
方法：选取6种根管封闭剂（AHplus、Adseal、2Seal、RoekoSeal、EZ-fill和iRootSP）按各自操作要求制作固化标准模块，无菌处理后分组浸泡于DMEM高糖培养液，分别制得1d、7d、15d、30d的浸提液。
将浸提液（n=6）配置成材料细胞培养液后与铺板24h的L929细胞共培养，采用MTT法检测培养24h、48h、72h后各材料浸提液对L929的细胞毒性。
阴性对照组为高密度聚乙烯浸提液，阳性对照组为二甲基亚砜。
结果：同一培养时间组内，各根管封闭剂浸提液的OD值随浸提时间的延长呈下降趋势（P<0.05）。
同一浸提时间组内，各浸提液的OD峰值均出现在共培养48h，24h与48hOD值的差异有统计学意义（P<0.05）；72h时OD值略有降低，与48h的OD值差异没有统计学意义（P>0.05）。
结论：根管封闭剂的细胞毒性随浸提时间的延长而增加；6种根管封闭剂比较：RoekoSeal没有细胞毒性，EZ-fill和2Seal居中，AHplus、Adseal和iRootSP 相对次之。
因受到实验条件的影响，本实验对iRootSP细胞毒性的评价意义不大。
牙髓病治疗领域生物材料的研究进展
牙髓病治疗领域生物材料的研究进展口腔生物材料是指用于替代或修复各种原因造成外形及生物功能丧失的口腔内组织器官的天然或人造材料。
1984年，ISO/TC106制定ISO/TR7405-1997“牙科学-用于牙科的医疗器械生物相容性临床前评价-牙科材料试验方法”国际标准。
要求口腔生物材料需符合：①生物安全性；②生物相容性；③生物功能性。
安全性和相容性是口腔材料的生物学性能的基本要求，在此基础上，生物功能性要求植入的牙科材料与宿主局部组织的成分有很好的吻合，不损伤和破坏机体生长，能够承受各种力学作用，具备口腔器官所具有的基本功能。
世界各国对口腔材料的生物学性能研究越来越重视。
牙髓病和根尖周病是牙体牙髓科临床中常见疾病，通常主要由龋病进一步发展或外伤所致，治疗方法包括活髓保存治疗和患牙保存治疗两类。
目前，活髓保存治疗的方法包括：盖髓术、根尖诱导术等，患牙保存治疗的方法主要包括根管治疗、根管再治疗及根尖手术后倒充填等[1]。
植入口腔的材料能够融入宿主的生命体系，最终成为宿主的一部分并能够承担宿主的生理功能。
要求材料具有良好的封闭性能，防止微渗漏，可用于盖髓治疗；良好的生物相容性能引导牙骨质、牙槽骨再生，可用于根尖诱导成形、穿孔修补治疗；较强的抗菌抑菌性防止再感染，可用于倒充填根尖封闭治疗等。
牙髓病治疗领域的生物材料，即研究与牙髓相关疾病的生物材料，主要包括：矿物三氧化物凝聚体（mineral trioxide aggregate ，MTA）。
MTA因其具有良好的生物相容性、持久的封闭性及诱导软硬组织再生等能力而备受关注。
2014年被《牙科顾问》（《Dental Advisor》）评为年度最佳牙髓修复材料。
此外，还有Ceramicrete，Bioaggregate（BA），Biodentine，EndoSequence（ERRM）等。
1 矿物三氧化物凝聚体（MTA）1993年，美国加州Loma Linda大学的Torabinejad教授和同事发明了一种用于牙髓病治疗的新材料—矿物三氧化物凝聚体（MTA）[2]。
生物医学材料的细胞毒性评估技术研究
生物医学材料的细胞毒性评估技术研究近年来，生物医学材料在医学领域的应用越来越广泛。
它们的广泛应用范围包括生命科学、医疗诊断、医疗治疗、药物输送、组织工程和再生医学。
人们对生物医学材料的要求也越来越高，其中之一就是要求它不对人体产生任何的细胞毒性反应。
因此，对生物医学材料的细胞毒性评估技术的研究具有重要意义，本文就这方面的研究做一些探讨。
一、生物医学材料的细胞毒性评估技术的研究现状随着医学技术的进步和科技的飞速发展，越来越多的生物医学材料进入人们的生活和医学应用中。
生物医学材料作为一种创新型的医疗材料，它的种类繁多，功能各异，能够在医疗领域发挥重要的作用。
但是，生物医学材料的应用却遭遇了许多挑战，其中之一就是细胞毒性问题。
生物医学材料直接接触人体，它可能与人体的生物系统产生一系列的作用，其中可能包括细胞毒性，细胞毒性会直接影响细胞的正常生长、发育和功能，甚至产生严重的毒性反应。
因此，对生物医学材料的细胞毒性评估技术的研究具有重要意义。
目前，生物医学材料的细胞毒性评估技术主要是通过体外标准化方法和体内无机铬化合物试验方法进行评估。
体外标准化方法包括MTT法、细胞存活/膜完整性测定法、流式细胞术、透射电子显微镜法、酶连免疫吸附试验法等。
这些方法可以快速、准确、可靠地测定细胞生长、细胞膜完整性、凋亡和细胞内毒素等重要参数，并能够评价各种生物医学材料对细胞的毒性影响。
但是这些方法也存在一些问题，例如:不能确定材料与人体之间的相互作用本质；无法反映材料的最终毒性特性等。
体内无机铬化合物试验方法是以动物体内为模型，检测各种生物医学材料的毒性水平。
通过动物试验得出的结论，可以更加准确地反映材料的毒性，但是动物实验的使用面临着伦理和价格等问题。
并且，动物的生物环境和人体环境之间不同，因此结果不一定能代表人体情况。
二、生物医学材料的细胞毒性评估技术的研究进展为了更好地进行生物医学材料的细胞毒性评估，近年来，科学家们也开始深入研究细胞毒性评估技术，并且不断提出新的方法来提高细胞毒性评估的准确性和可靠性。
义齿基托表面新型涂层材料对L929细胞的体外细胞毒性的研究
义齿基托表面新型涂层材料对L929细胞的体外细胞毒性的研究目的:利用噻唑盐比色法(MTT法),检测新型义齿基托表面新型涂层材料对小鼠成纤维细胞L929的细胞毒性。
方法:实验分为两部分。
第一部分,对浸提液的细胞毒性检测:采用Heraeus-kulzer基托树脂热凝粉和单体液常规包埋,失蜡,热压水浴固化制成两个40mm×40mm×2mm的试片。
在其中一个试片双面均涂该涂料,光固化。
对这两组试片用RPMI-1640细胞培养液浸提,取第一个24小时,第二个24小时,第三个24小时三个时间段的浸提液,采用MTT法检测对L929的细胞毒性,同时设立空白组及阴性对照组,统计各组的D490值。
第二部分,对合成涂料的主要单体的毒性检测:单体MMA以及合成涂料的三个主要单体HEMA,PDDA,TMPTA用RPMI-1640细胞培养液配制成4096μmol/L的溶液,然后倍比稀释至2μmol/L,共十二组浓度,采用MTT法检测对L929的细胞毒性,同时设立空白组及阴性对照组。
绘制各单体的剂量反应曲线,比较各自的TC50值。
结果:与阴性对照组相比较,表面涂涂料的试片浸提首个24小时后,其D490值﹤阴性对照组D490值(P﹤0.05);浸提第二个24小时及第三个24小时后,其D490值与阴性对照组无显著差别(P﹥0.05)。
与没有涂料的试片比较,表面涂有涂料的试片在三个时间段的浸提液的
D490值均无显著差别(P﹥0.05)。
在2μmol/L-4096μmol/L浓度范围内,毒性TMPTA﹥PDDA﹥HEMA=MMA。
结论:义齿基托表面新型涂层材料对小鼠成纤维细胞L929的细胞毒性与临床常用的义齿基托材料没有显著差别。
牙科材料的细胞毒性试验
牙科材料的细胞毒性试验
郝建军
【期刊名称】《牙体牙髓牙周病学杂志》
【年(卷),期】1997(007)002
【摘要】牙科材料的细胞毒性试验郝建军综述史俊南审校标准化的离体试验是评价牙科材料生物相容性的重要方法，新材料应用于临床之前也必须经过细胞毒性评价。
美国牙科协会（ＡＤＡ，１９８０）［１］和国际标准组织（ＩＳＯ，１９９３，）［２］分别颁布了各自的评价标准，并推荐...
【总页数】3页(P135-137)
【作者】郝建军
【作者单位】西安第四军医大学口腔医学院
【正文语种】中文
【中图分类】R783.1
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现行体外试验评价牙齿修复材料细胞毒性的优势与不足
现行体外试验评价牙齿修复材料细胞毒性的优势与不足
赵信义
【期刊名称】《口腔材料器械杂志》
【年(卷),期】2009(018)004
【摘要】本文综述了用现有的体外细胞毒性标准试验方法评价牙齿修复材料细胞毒性的优势与不足,指出体外细胞毒性标准试验所得结果与动物试验和临床试验结果相关性很差的原因之一是试验细胞与试验材料之间缺乏在体牙本质屏障.介绍了牙本质屏障细胞毒性试验的进步及推广的难度,提出了用人工羟基磷灰石陶瓷片模拟牙本质屏障片的新思路.
【总页数】3页(P173-175)
【作者】赵信义
【作者单位】第四军医大学口腔医学院,陕西,西安,710032
【正文语种】中文
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第26卷第3期2009年6月生物医学工程学杂志J ournal of Biomedical EngineeringVol.26No.3June2009牙科生物材料细胞毒性试验方法的研究进展*袁艳波综述张文云$审校(解放军昆明总医院口腔科昆明医学院教学医院,昆明650032)摘要良好的生物相容性是保证牙科生物材料临床应用安全有效的重要标准,细胞毒性试验作为生物学评价筛选试验最常用的项目之一,也是评价其生物相容性是否优良的一个重要方面,本文就此作一综述。
关键词牙科生物材料细胞毒性试验方法中图分类号R783.1文献标识码A文章编号1001-5515(2009)03-0688-04Progress in the S tud ies of Method s for T esting Cytotoxicity of Dental BiomaterialYuan Yanbo Zhang Wenyun(K unming G enera l H osp ita l of PL A,K unming650032,Ch ina)Abstract T he favo rable biocompatibility o f dental bio material is v ery impo rtant,w hich g uar antees the safety and effect iveness of its clinical application.T he cy toto xicity test,as o ne o f the bio log ical ev aluatio n screening tests, is kno wn to be an impo rtant and frequently used method t o evaluate biocompatibility o f bio materials.T his tex t is de-v oted to an over view of the cyto tox icit y test for dental mat er ials.Key words Dental bio materia l Cyto tox icity T est methods1引言生物相容性(Bioco mpatibility)是指材料在宿主的特定环境和部位,与宿主直接或间接接触时产生相互反应的能力。
是材料在生物体内处于静动态变化过程中,能耐受宿主各系统作用而保持相对稳定,不被排斥和破坏的生物学性质。
体外细胞毒性试验(Cytotox icity test)是牙科材料生物学评价筛选试验之一,采用体外组织细胞培养的方法,观察材料对细胞生长繁殖及形态的影响,评价材料的体外细胞毒性。
本文对此作一综述。
与人体相接触的任何材料,无论其机械性能、物化性能如何优良,在应用于人体之前,均必须按国际标准化组织(International Standards Org anizatio n, ISO)和各国规定的相应标准经过科学、严格的检验以测定其生物相容性。
1997年国际标准化组织牙科技术委员会(ISO/TC106-Dentistry)和国际牙科联盟(Federation Dental International,FDI)共同制定了ISO7405-1997/牙科学$用于牙科的医疗器械*云南省自然科学基金资助项目(2004C0057M)$通讯作者。
E-mail:w enyunzh88@ 生物相容性临床前评价$牙科材料试验方法0国际标准,该标准将口腔材料生物学评价试验分为三组:第一组为体外细胞毒性试验;第二组主要检测材料对机体的全身毒性作用及对局部植入区组织的反应;第三组为临床应用前试验[1]。
体外细胞毒性试验是大多数试验最常用的筛选试验之一。
ISO 10993-5-19995医疗器械的生物学评价第5部分:体外细胞毒性试验6对其进行了相关规定,各国也根据各自实际情况制定出相应细胞毒性试验的有关规定。
GB/T168865医疗器械生物学评价6系列标准为等同转化ISO10993系列标准,是我国医疗器械生物学评价与试验的完整的标准体系,由17个部分组成,其中,GB/T16886.5-20035医疗器械生物学评价第5部分:体外细胞毒性试验6即对各试验进行了相关规定。
2细胞毒性试验的概述2.1概念体外细胞毒性试验是用来评价齿科材料致细胞损伤的潜在性,并预测其最终生物体应用时的组织细胞反应,通过体外细胞培养技术,可检测材料或材料的某一成分与细胞、酶或一些其他隔离的生物系第3期袁艳波等。
牙科生物材料细胞毒性试验方法的研究进展统接触后细胞发生生长抑制、功能改变、溶解、死亡或其它毒性反应。
2.2类型GB/T16886.55体外细胞毒性试验6中给出了3种类型细胞毒性试验:浸提液试验、直接接触试验、间接接触试验(包括琼脂覆盖法和滤膜扩散法)。
一般来说,浸提液试验适合检测材料溶出物毒性,并与动物毒性试验结果相符合;直接接触试验对材料的细胞毒性敏感性最高,可测出材料微弱的细胞毒性;琼脂法适合对毒性大的大批量材料进行筛选;分子滤过法适合对毒性成分分子量小的材料进行生物相容性评价。
Cao等[2]在直接和间接接触试验中发现二者间相关性较好,而浸提液试验与另两种试验的关联较少。
牙科材料在口腔唾液作用下会有部分成分从中溶解释出,已有实验证明光固化材料的释出成分可造成人牙髓细胞的损伤[3],因此多数学者用浸提液来反映牙科树脂类材料的细胞毒性。
该试验是将试样投入培养液或蒸馏水中于适当条件下浸泡,制备出含有溶出物的浸泡液,再将浸出液加在含有细胞的培养皿或试管中继续培养,观察溶出物对细胞的影响。
2.3试验细胞两种类型的细胞可用于体外细胞毒性试验,即原代细胞系(如牙髓组织纤维细胞和牙龈组织纤维细胞)和已建株细胞系(如L929、3T3及癌细胞等)。
Franz等[4]报导原代牙龈组织纤维细胞和L-929细胞用于细胞毒性试验,其结果并无较大差异。
Bo-landa等[5]报导在体外细胞毒性试验中,牙髓细胞对于二甲基丙烯酸树脂较成牙本质细胞更敏感。
根据国际标准化组织的要求,已建株细胞作为材料毒性测试的靶细胞,简单易得、重复性好,且较原代细胞稍敏感,更适合于齿科材料的细胞毒性试验,但二者差异对最终材料的毒性分级并无影响。
2.4特点细胞毒性试验是检测材料浸出或扩散成分毒性的一种简便快速灵敏的方法,重现性好、费用较低、可标准化,适合大规模筛选,可严格控制,极适合相互反应的机制研究,还可减少动物实验,结果亦有一定的临床相关性,被广泛地应用于口腔材料的生物学评价,是新材料筛选时的必做试验。
3细胞毒性试验的种类3.1同位素标记法有铬释放法、3H-leucine掺入法、125I-U dR-释放法、放射性核苷酸前体物掺入法等。
铬释放法以膜通透性为生物学终点,先将培养细胞进行51Gr标记,细胞经材料毒性作用后,因细胞膜通透性改变而释放51Gr,经测定51Gr释放量评价细胞增殖率和死亡率。
125I-UdR-释放法是把材料直接加入靶细胞悬液中,使二者接触一定时间后,测定从受损细胞中释放的125I-U dR-脉冲数,进行定量分析。
放射性核苷酸前体物掺入法(如3H-thym idine掺入法、14C-thym-i dine掺入法等)可被培养细胞摄取进行脱氧核糖核酸(Deoxy ribo nucleic acid,DNA)合成,通过液相闪烁仪定量DNA合成率。
此法可较深入细致地了解细胞受材料毒性影响而产生的分子水平变化,但方法复杂、结果受较多因素影响,且与其他体外法无明显相关性,同时同位素易造成放射性污染且对操作人员健康不利,建立同位素室亦需昂贵的费用。
3.2分子滤过法通过评价材料对单层细胞琥珀酸脱氢酶活性的影响来检测细胞毒性。
先在纤维素酯滤膜上培养单层细胞,然后用含有琼脂的培养基介质代替原有培养基,并让新培养基在细胞上凝胶。
最后,滤膜-单层细胞-凝胶被分开并反转,使滤膜朝上。
暴露于试样后,去除滤膜,测定试样对细胞代谢活性的影响。
该法可同时观察材料的原发性及继发性细胞毒性,快速简便、敏感可靠,易推广,用于短期内评价有轻度毒性的材料,但它存在强行影响析出产物从材料中扩散的缺点。
3.3琼脂覆盖法此法用于评价材料可浸出的有毒生物物质,用材料或其提取物进行均可。
试验中,在加入1%含活细胞染料(如中性红)的琼脂或琼脂糖(低熔点)更新培养基前,先培养单层细胞。
琼脂在细胞和放在琼脂上面的材料之间形成一屏障,营养、气体及可溶性毒性物质可扩散穿透琼脂。
它是一种半定量的测试方法,通过肉眼或电镜观察细胞溶解区和脱色区范围来直接评价材料对细胞膜的破坏程度,快速简便、价廉、易推广,适合筛选毒性大的大批量材料,适用于多种类型的材料。
吕晓迎等[6]用该法对11种医用生物材料进行评价,结果满意,并首次提出此实验成功的技术关键是正确使用中性红染料和掌握好琼脂培养基的温度。
但琼脂不能充分代表在体存在屏障,敏感性亦受试样溶出物扩散程度的影响,而且很难使材料周围的颜色密度或色带宽度与材料可释毒性产物的浓度相关联。
3.4色度法689生物医学工程学杂志第26卷3.4.1线粒体脱氢酶(Mitocho ndrial dehydro gen-ase)效能测定又称M TT法,是一种快速评定细胞增殖和细胞毒性的比色分析法,用于细胞代谢或功能的测定。
主要原理是:活细胞中处于细胞色素b 和c位点的细胞线粒体脱氢酶能裂解四氮唑的环,可把淡黄色、水溶性的溴化-3(4,5-二甲基噻唑基-2)-2,5-二苯基四唑(M ethyl thiazo lyl tetrazolium, MT T)分子还原,产生紫色结晶物即甲瓒颗粒,该结晶物可溶解于二甲亚基亚砜(Dim ethyl sulfo xide, DM SO)等有机溶剂,但不溶于水。
由于结晶物形成量与细胞数量及其活性成正相关,通过比色测定吸光度(Optical density,OD)值,其大小可反映存活细胞数量的多少及细胞代谢活性的强弱,因而OD 值降低程度即反映材料析出液的细胞毒性大小。
生物学终点及可重复性是目前国际上评价一种细胞毒性试验方法优劣的指标之一。
该法的生物学终点是线粒体,其病变是细胞受损最灵敏的指征,因此能十分灵敏地反映被测材料对细胞造成的毒性损害程度,操作简便快速,适合大批量测试,结果精确、定量、客观。
其主要不足之处是必须使用材料浸提液且有色沉淀物较短时间内会褪色。
3.4.2乳酸盐脱氢酶(Lactate dehy dro genase, LDH)效能测定LDH是存在于活细胞中稳定的胞质酶,其渗出增加提示细胞膜稳定性破坏。
既定的细胞类型在既定的培养环境下,每个细胞LDH 的含量是恒定的。