樱桃组培快繁技术研究

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甜樱桃种间杂交胚培养及快繁研究

甜樱￣（ｒｎｓｖｕ）于蔷薇科、ＰｕｕｉｍＬ属ａ李属、桃樱亚属乔木［，】具有很高的营养价值和医药价值＿。作为］２］
５周统计各组合坐果率分别为ｌ．８、２３、３７３．４
８４、３０、．３、７９。最终获得果实数量．６３．１５３２．１
获得杂种后代是解决这一问题的唯一途径。该试验对甜樱桃杂种胚进行了培养研究，建立了完善的胚培养技
液灭菌８ｍｎ去内种皮后用０１升汞灭菌６ｍｎ最后ｉ，．ｉ，用无菌水冲洗３～５次，种至不同培养基中（表１。接见）培养基中蔗糖３，琼脂０６，Ｈ．。３．ｐ５８０ｄ后统计不同培养基对胚成活率的影响。培养条件：照强度光２００ｌ，０光照时间１／，ｘ６ｈｄ温度２ ℃。胚成活率（）５一形成植株数／接种总胚数Ｘ１０。０１２２增殖培养将试验获得的种胚新梢切成约．．１５ｃ长的茎段，．ｍ接种在不同继代培养基中（见表２，）培
植物生长调节剂选用ＩＡ、Ａ和ＮＡ见表３。培养ＡＩＢＡ（）
条件：光照强度２００ｌ，０ｘ光照时间１／，６ｈｄ温度２ ℃。５生根率一生根茎段数／种茎段数Ｎ１０。平均根接０
数一（生根总数／株总数）０。植Ｘ１０
展，因此迫切需要选育新的优良品种，以满足消费者的

樱桃组织培养及微型嫁接技术研究

樱桃组织培养及微型嫁接技术研究樱桃玲珑晶莹,果肉柔嫩多汁,甜酸可口,营养丰富,外观和内在品质皆佳,被誉为“果中珍品”,樱桃果实生长发育期短,病虫害相对较少,果园管理比较省时省工,具有很高经济效益和很广阔的市场前景。

但目前传统的繁殖方式除存在个体差异甚大,树体高矮不齐,适应性和抗逆性差等问题外还使樱桃苗木感染并积累了多种病毒、类病毒,而利用组织培养技术和微型嫁接技术不但可以快速繁殖苗木满足市场大量需求而且还可以对苗木进行有效的脱毒。

因此进行樱桃组培快繁及微型嫁接技术研究具有很重要的实践意义。

本文以四个樱桃矮化砧和五个欧洲甜樱桃品种为试验材料,研究其组培快繁和微型嫁接技术。

其主要研究结果如下:(1)樱桃矮的组培快繁,以早春在实验室水培萌发的芽为外植体,污染最小;对外植体进行低温处理有助于克服褐变现象。

(2)初代培养基中华矮樱以MS+6-BA 1.0+ NAA 0.1为佳;Gisela-5和Gisela-7以MS+6-BA 0.8+ NAA 0.1为佳;ZY-1以MS+6-BA 1.5+ NAA 0.1为佳;红灯以MS+6-BA 0.5+NAA 0.05为佳;莫利以MS+6-BA 0.8+NAA 0.1为佳;红鲁比以MS+6-BA 0.8+NAA 0.1和MS+6-BA 1.0+NAA 0.1为佳。

分化率高且生长正常。

(3)增殖培养基中华矮樱以MS+6-BA 1.0+NAA 0.2为佳;Gisela5以MS+6-BA 0.8+NAA 0.2为佳;Gisela7以MS+6-BA 0.8+NAA 0.1为佳;ZY-1以MS+6-BA 1.5+NAA 0.2为佳;红灯以MS+6-BA 0.5+NAA 0.1为佳;莫利以MS+6-BA 0.8+NAA 0.1为佳;红鲁比以MS+6-BA 0.8+NAA 0.2为佳。

增殖倍数高,且叶片浓绿,生长健壮。

(4)生根培养基中华矮樱桃以/2MS+NAA 0.8为最佳;Gisela5号和Gisela7号以1/2MS+NAA 0.5为最佳;ZY-1以1/2MS+NAA0.8为最佳。

甜樱桃新品种红宝组培快繁技术

（．１三门峡市林业Ｔ作总站，河南门峡４２０；．７００２灵宝市鼎原樱合作社，ｉ河南灵宝４２０；．７５０３国有门峡河西林场，
河南灵宝４２０）７５０
摘要：介绍了 “ 宝 ” 樱桃的主要性状，简述了红宝樱桃用吉塞拉５号矮化砧木组培快繁的育苗技术。红关键词：甜樱桃；红宝；组织培育；育苗技术中图分类号：￥６．６２５文献标识码：Ｂ文章编号：１０－６１（００）０－０８２０８１３２１７０４－０
树冠中大，树枝半开张，树势生长势中等，干性
强，多年生枝浅灰色，光滑，１生枝为褐红色，皮孔ａ较小。红宝叶片长ｌ．ｌ，叶宽８１ｍ，长卵圆形、５３ｎＣ．ｃ大而厚，先端稍尖，叶色绿，有光泽；蜜腺大、红色、肾形，２个不规则着生；叶缘锯齿稍尖、粗、浅；叶柄中短，长３１ｍ红宝樱桃在灵宝市３月中旬萌芽，．。ｃ３月２２６— ８日始花，３月３日～０４月２日盛花，４月４～６日末花期，５月６日果实成熟，果实发育期３３，３～５ｄ成熟期比早大果早１～２ｄ比红灯早４。１、ｄ１月下旬落叶。
４２０７５０，Ｃｉａ．ｘＳａｅＦｒｓｒａｍｆＳｎｎｉ，Ｌｎｂｏ７５０，Ｃｉａｈｎ；３ＨｅｉｔｔｏｅｔＦｒｏａｍｅｘａｉｇａ４２０ｙｈｎ）

樱桃组织培养和快速繁殖技术体系的研究

樱桃组织培养和快速繁殖技术体系的研究下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。

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樱桃砧木吉塞拉6号组培快繁技术研究

山东农业科学２０１４，４６（１）：２６～２８
ห้องสมุดไป่ตู้
ＳｈａｎｄｏｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ
樱桃砧木吉塞拉６号组培快繁技术研究
沙玉芬，王建萍，李公存，顾亮，苏佳明
ｏｖｅｒ９０％．ＫｅｙｗｏｒｄｓＣｈｅｒｒｙｓｔｏｃｋ；Ｇｉｓｅｌａ６；Ｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅ
樱桃砧木吉塞拉６号为半矮化砧，对不同品种的矮化效果为８０％～９０％，适应各种类型土壤，在粘土地上生长良好，萌蘖少，抗病毒病。
ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｅａｖｅｓｗｅｒｅｔｒａｎｓｐｌａｎｔｅｄｉｎｔｏｍｅｄｉｕｍｗｉｔｈ１／２ｖｅｒｍｉｃｕｌｉｔｅａｎｄ１／２ｐｅｒｌｉｔｅ，ａｎｄｔｈｅｓｕｒｖｉｖａｌｒａｔｉｏｗａｓ
ＡｂｓｔｒａｃｔＵｓｉｎｇｃｈｅｒｒｙｓｔｏｃｋＧｉｓｅｌａ６ａｓｍａｔｅｒｉａｌ，ｔｈｅａｎｎｕａｌｎｅｗｓｈｏｏｔｓｗｅｒｅｃｈｏｓｅｎｆｏｒｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅ
６一ＢＡ：ｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｍｅｄｉｕｍｗａｓＭＳ＋０．１ｍｇ／ＬＩＢＡ＋０．３ｍｇ／Ｌ６一ＢＡ＋０．０５ｍｇ／ＬＴＤＺｗｉｔｈｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｃｏｅｉｃｆｉｅｎｔａｓ６．８：ｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｒｏｏｔｉｎｇｍｅｄｉｕｍｗａｓ１／２ＭＳ＋０．５ｍｇ／ＬＩＢＡ＋０．５ｍｇ／ＬＮＡＡ

高盆樱桃的组培快繁研究

第４２卷㊀第３期２０１８年５月南京林业大学学报（自然科学版）ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮａｎｊｉｎｇＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓＥｄｉｔｉｏｎ）Ｖｏｌ．４２，Ｎｏ．３Ｍａｙ，２０１８ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－２００６．２０１７０６０４７㊀收稿日期：２０１７－０６－２１㊀㊀㊀㊀修回日期：２０１８－０１－１０㊀基金项目：四川省科技厅十三五育种攻关项目（２０１６ＹＺＧＧ）㊀第一作者：张帆（２４９０７６６６８＠ｑｑ．ｃｏｍ）㊂∗通信作者：万雪琴（ｎｏｌａｄｙ＠１６３．ｃｏｍ），教授㊂㊀引文格式：张帆，叶露，董姬妃，等．高盆樱桃的组培快繁研究［Ｊ］．南京林业大学学报（自然科学版），２０１８，４２（３）：１１１－１１６．高盆樱桃的组培快繁研究张㊀帆１，叶㊀露１，董姬妃１，万雪琴２∗，钟㊀宇２（１．四川农业大学风景园林学院，四川㊀成都㊀６１１１３０；２．四川农业大学林学院，四川㊀成都㊀６１１１３０）摘要：ʌ目的ɔ通过对高盆樱桃外植体灭菌方法的筛选和培养条件的优化，解决高盆樱桃在快速繁殖中存在的丛生芽诱导率低㊁增殖率低㊁生根难等问题，为建立高盆樱桃组培快繁体系奠定基础㊂ʌ方法ɔ以高盆樱桃带芽茎段为外植体，探讨了外植体的灭菌方法㊁基本培养基类型（ＭＳ㊁１／２ＭＳ和１／４ＭＳ）以及不同外源激素（６⁃ＢＡ㊁ＮＡＡ和ＩＢＡ）对丛生芽诱导㊁丛生芽增殖㊁生根等过程的影响㊂ʌ结果ɔ高盆樱桃茎段在７５％乙醇灭菌２０ｓ，０１％升汞灭菌３００ｓ时，污染率最低㊂在ＭＳ培养基中添加１．２ｍｇ／Ｌ６⁃ＢＡ和０．１ｍｇ／ＬＩＢＡ时，丛生芽诱导率最高（８２２２％）㊂在ＭＳ培养基中同时添加０８ｍｇ／Ｌ６⁃ＢＡ㊁００６ｍｇ／ＬＩＢＡ㊁００８ｍｇ／ＬＮＡＡ时丛生芽增殖效果最好，增殖率为７３２㊂１／２ＭＳ＋ＩＢＡ（０５ｍｇ／Ｌ）培养基有利于生根，生根率达９２２２％㊂ʌ结论ɔ高盆樱桃带芽茎段适宜的灭菌方法为７５％酒精处理２０ｓ后，再以０１％升汞处理３００ｓ；丛生芽诱导的适宜培养基为ＭＳ＋６⁃ＢＡ（１２ｍｇ／Ｌ）＋ＩＢＡ（０１ｍｇ／Ｌ）；丛生芽增殖的适宜培养基为ＭＳ＋６⁃ＢＡ（０８ｍｇ／Ｌ）＋ＩＢＡ（００６ｍｇ／Ｌ）＋ＮＡＡ（００８ｍｇ／Ｌ）；适宜高盆樱桃生根的培养基为１／２ＭＳ＋ＩＢＡ（０５ｍｇ／Ｌ）㊂以体积比为１（河沙）ʒ１（腐殖质）ʒ２（蛭石）的混合基质为移栽基质时，试管苗移栽成活率可达７２２％㊂该试验结果可为高盆樱桃的规模化生产提供一定的理论基础和技术支撑㊂关键词：高盆樱桃；组织培养；丛生芽；快速繁殖中图分类号：Ｓ６８８㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀文献标志码：Ａ文章编号：１０００－２００６（２０１８）０３－０１１１－０７ＳｔｕｄｙｏｎｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅａｎｄｒａｐｉｄｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎｏｆＣｅｒａｓｕｓｃｅｒａｓｏｉｄｅｓｖａｒ．ｃｅｒａｓｏｉｄｅｓＺＨＡＮＧＦａｎ１，ＹＥＬｕ１，ＤＯＮＧＪｉｆｅｉ１，ＷＡＮＸｕｅｑｉｎ２∗，ＺＨＯＮＧＹｕ２（１．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬａｎｄｓｃａｐｅＡｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ，ＳｉｃｈｕａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｅｎｇｄｕ６１１１３０，Ｃｈｉｎａ；２．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＦｏｒｅｓｔｒｙ，ＳｉｃｈｕａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｅｎｇｄｕ６１１１３０，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ʌＯｂｊｅｃｔɔＴｈｅａｉｍｏｆｔｈｉｓｓｔｕｄｙｗａｓｔｏｒｅｓｏｌｖｅｔｈｅｐｒｏｂｌｅｍｓｏｆｌｏｗｉｎｄｕｃｔｉｏｎｒａｔｅｓ，ｌｏｗｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｒａｔｅ，ａｎｄｔｈｅｄｉｆｆｉｃｕｌｔｙｏｆｐｌａｎｔｌｅｔｒｏｏｔｉｎｇｉｎＣｅｒａｓｕｓｃｅｒａｓｏｉｄｅｓｖａｒ．ｃｅｒａｓｏｉｄｅｓ，ａｎｄｔｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｒａｐｉｄｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍｔｈｒｏｕｇｈｓｅｌｅｃｔｉｎｇｔｈｅｓｕｉｔａｂｌｅｍｅｔｈｏｄｆｏｒｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎｏｆＣ．ｃｅｒａｓｏｉｄｅｓｖａｒ．ｃｅｒａｓｏｉｄｅｓａｎｄｏｐｔｉｍｉｚｉｎｇｃｕｌｔｕｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ．ʌＭｅｔｈｏｄｓɔＴｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｓｔｅｒｉｌｉｚａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓ，ｔｙｐｅｓｏｆｂａｓｉｃｍｅｄｉａｓ（ＭＳ，１／２ＭＳａｎｄ１／４ＭＳ）ａｎｄｔｈｅｐｌａｎｔｈｏｒ⁃ｍｏｎｅｓ（６⁃ＢＡ，ＮＡＡａｎｄＩＢＡ）ｏｎｓｉｎｇｌｅｂｕｄ，ｃｌｕｓｔｅｒｂｕｄｓａｎｄｒｏｏｔｉｎｇｗｅｒｅｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄｕｓｉｎｇｓｔｅｍｓｗｉｔｈａｘｉｌｌａｒｙｂｕｄｓｏｆＣｅｒａｓｕｓｃｅｒａｓｏｉｄｅｓｖａｒ．ｃｅｒａｓｏｉｄｅｓａｓｅｘｐｌａｎｔｓ．ʌＲｅｓｕｌｔｓɔＷｈｅｎｔｈｅｓｔｅｍｗｉｔｈａｘｉｌｌａｒｙｂｕｄｓｗａｓｓｔｅｒｉｌｉｚｅｄｗｉｔｈ７５％ａｌ⁃ｃｏｈｏｌｆｏｒ２０ｓａｎｄ０．１％ＨｇＣｌ２ｆｏｒ３００ｓ，ｔｈｅｃｏｎｔａｍｉｎａｔｉｏｎｒａｔｅｗａｓｔｈｅｌｏｗｅｓｔ．ＭＳｍｅｄｉｕｍｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄｗｉｔｈ１．２ｍｇ／Ｌ６⁃ＢＡａｎｄ０．１ｍｇ／ＬＩＢＡｓｈｏｗｅｄｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔｃｌｕｓｔｅｒｅｄｂｕｄｉｎｄｕｃｔｉｏｎｒａｔｅ（８２．２２％）．ＭＳｍｅｄｉｕｍｗｉｔｈ０．８ｍｇ／Ｌ６⁃ＢＡ，０．０６ｍｇ／ＬＩＢＡａｎｄ０．０８ｍｇ／ＬＮＡＡｅｘｈｉｂｉｔｅｄｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔｃｌｕｓｔｅｒｅｄｂｕｄｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｒａｔｅ（７．３２）．ＨａｌｆＭＳｍｅ⁃ｄｉｕｍｗｉｔｈ０．５ｍｇ／ＬＩＢＡｗａｓｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｐｌａｎｔｌｅｔｒｏｏｔｉｎｇ，ａｎｄｔｈｅｒｏｏｔｉｎｇｒａｔｅｗａｓ９２２２％．ʌＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓɔＴｈｅｏｐｔｉｍａｌｓｔｅｒｉｌｉｚａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｆｏｒｓｔｅｍｓｅｇｍｅｎｔｓｏｆＣ．ｃｅｒａｓｏｉｄｅｓｖａｒ．ｃｅｒａｓｏｉｄｅｓｗｉｔｈａｘｉｌｌａｒｙｂｕｄｓｗａｓｔｈｅｕｓｅｏｆ７５％ａｌｃｏｈｏｌｆｏｒ２０ｓａｎｄ０．１％ＨｇＣｌ２ｆｏｒ３００ｓ．ＴｈｅｏｐｔｉｍａｌｍｅｄｉｕｍｆｏｒｃｌｕｓｔｅｒｅｄｂｕｄｉｎｄｕｃｔｉｏｎｗａｓＭＳｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ１．２ｍｇ／Ｌ６⁃ＢＡａｎｄ０．１ｍｇ／ＬＩＢＡ．ＴｈｅｏｐｔｉｍａｌｍｅｄｉｕｍｆｏｒｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｃｌｕｓｔｅｒｅｄｂｕｄｓｗａｓＭＳｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄｗｉｔｈ０．８ｍｇ／Ｌ６⁃ＢＡ，００６ｍｇ／ＬＩＢＡ，ａｎｄ０．０８ｍｇ／ＬＮＡＡ，ｗｈｉｌｅｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｒｏｏｔｉｎｇｍｅｄｉｕｍｗａｓ１／２ＭＳｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ０．５ｍｇ／ＬＩＢＡ．Ｔｈｅｓｕｒｖｉｖｅｒａｔｅｗａｓａｂｏｖｅ７２２％ｗｈｅｎｔｈｅｐｌａｎｔｌｅｔｓｗｅｒｅｄｕｅｔｏｂｅｍｏｖｅｄｔｏｔｈｅｎｕｒｓｅｒｙ．Ｔｈｅｍｅｄｉｕｍｗｉｔｈ２５％ｓａｎｄ，２５％ｈｕｍｕｓａｎｄ５０％ｒｏｓｅｉｔｅｗａｓｅｆｆｅｃｔｉｖｅｆｏｒｒｏｏｔｉｎｇ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆｔｈｉｓｓｔｕｄｙｃａｎｐｒｏｖｉｄｅａｂａｓｉｓｆｏｒｌａｒｇｅ⁃ｓｃａｌｅｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎｏｆＣ．ｃｅｒａｓｏｉｄｅｓｖａｒ．ｃｅｒａｓｏｉｄｅｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｃｅｒａｓｕｓｃｅｒａｓｏｉｄｅｓｖａｒ．ｃｅｒａｓｏｉｄｅｓ；ｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅ；ｃｌｕｓｔｅｒｅｄｂｕｄｓ；ｒａｐｉｄｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ南京林业大学学报（自然科学版）第４２卷㊀㊀高盆樱桃（原变种）（Ｃｅｒａｓｕｓｃｅｒａｓｏｉｄｅｓｖａｒ．ｃｅｒａｓｏｉｄｅｓ）属蔷薇科（Ｒｏｓａｃｅａｅ）樱属（ＣｅｒａｓｕｓＭｉｌｌ．）植物中细齿组，是樱属植物中的原始种类㊂广泛分布于云南以及西藏南部，以云南为现代分布中心，天然分布范围为２１ʎ４３ᶄ ２６ʎ００ᶄＮ，９６ʎ１２ᶄ １０４ʎ４１ᶄＥ［１－２］㊂高盆樱桃是野生樱花资源中极为特殊的一个类群，形态类似于冬樱花，但与冬樱花有区别㊂高盆樱桃有长筒状的花托，花期一般从１１月到翌年１月㊂高盆樱桃株型优美㊁花色艳丽，是唯一在冬季开花的原始种类［３］，花期延续期长，具有极高的园林观赏价值㊂尽管高盆樱桃的观赏价值极高，但对高盆樱桃的相关研究很少㊂已有的研究主要集中在与高盆樱桃相近的冬樱花上㊂目前对冬樱花的研究主要包括冬樱花的扦插育苗［４－５］㊁嫁接繁殖［６］和种子育苗［７］等方面，而很少有关组培成苗的报道［８］㊂高盆樱桃可以进行种子繁殖，也可以扦插㊁嫁接等无性繁殖［９］㊂但高盆樱桃种子产量低㊁寿命短㊁含水量大㊁发芽率低㊂因此，依靠高盆樱桃种子繁殖并不能满足其生产推广的需求［７］㊂另一方面，高盆樱桃的资源稀少㊁母株数量不足，扦插嫁接等无性繁殖也不能满足园林生产的需求［１０］㊂而组培快繁技术能在短时间内快速成苗，满足生产的需求㊂因此，此次研究以高盆樱桃茎段为试验材料，筛选高盆樱桃离体培养各阶段的最适配方，使其在短时间内能够快速繁殖，为这一野生资源的进一步开发利用奠定基础㊂１㊀材料与方法１．１㊀试验材料及外植体处理材料为野生高盆樱桃（Ｃｅｒａｓｕｓｃｅｒａｓｏｉｄｅｓｖａｒ．ｃｅｒａｓｏｉｄｅｓ），采自四川农业大学雅安校区老板山㊂外植体为幼嫩的带芽茎段㊂选择健壮㊁无病虫害的优良植株，剪取１．５ｃｍ长的带芽茎段，用１％的洗衣粉水浸泡２０ｍｉｎ后刷洗，再用流水冲洗３ｈ，无菌室灭菌前用０．１％的多菌灵浸泡，置于摇床振荡３０ｍｉｎ㊂以不同时间组合下的７５％酒精（处理时间１０㊁２０㊁３０ｓ）和０．１％升汞（处理时间１８０㊁３００㊁４２０ｓ）进行灭菌，用无菌水冲洗５次，再用无菌纱布吸干其表面水分，将完成灭菌的外植体接种于空白ＭＳ培养基中㊂所有培养基的ｐＨ均为５．７，培养温度为（２５ʃ２）ħ，光照度为２０００ｌｘ，每天光照１２ｈ㊂１．２㊀丛生芽的诱导培养和增殖培养选取经过灭菌处理后长势一致的茎段接入丛生芽诱导培养基㊂诱导试验采用３因素３水平的正交试验设计，设置基本培养基（ＭＳ㊁１／２ＭＳ㊁１／４ＭＳ）㊁６⁃ＢＡ（０．８㊁１．２㊁１．５ｍｇ／Ｌ）㊁ＮＡＡ（００５㊁０１㊁０２ｍｇ／Ｌ）各３个水平，共９个处理㊂每处理接种３０个带芽茎段，重复３次，４０ｄ后统计从生芽诱导情况㊂当初代培养获得的无菌芽苗长到约２ｃｍ时，将其切下转入增殖培养基，在ＭＳ培养基中分别添加不同质量浓度的ＩＢＡ（０．０２㊁０．０６㊁０１０ｍｇ／Ｌ）㊁ＮＡＡ（０．０１㊁０．０５㊁０．０８ｍｇ／Ｌ）和６⁃ＢＡ（０．４㊁０８㊁１２ｍｇ／Ｌ）㊂采取３因素３水平正交试验设计，每个处理接种３０个，３次重复㊂４５ｄ后统计芽增殖率，并观察丛芽生长和增殖情况㊂１．３㊀有效苗培育和生根培养继代培养所得的芽苗一般都比较矮小纤弱，直接进行生根，苗利用率低㊂因此，为了提高苗的利用率，需要进行有效苗培养㊂将继代增殖的芽苗接种到不添加任何外源激素的ＭＳ培养基中，观察并统计有效苗的生长情况及有效苗率㊂有效苗是指生长良好且高度大于４ｃｍ的单苗㊂选择生长健壮㊁高４ｃｍ左右的单苗接种到生根培养基中，试验采用两因素３水平完全随机试验，分别以ＭＳ㊁１／２ＭＳ㊁１／４ＭＳ为基本培养基附加不同质量浓度的ＩＢＡ（０．２㊁０．５㊁０．８ｍｇ／Ｌ）㊂每个处理３０瓶，３次重复㊂４０ｄ后统计生根率㊁平均根数和平均根长㊂＋＋＋为长势最好；＋＋为长势一般；＋为长热稍差㊂１．４㊀炼苗及移栽选取根长约３ｃｍ，高５６ｃｍ的试管苗，在封口膜上密刺小孔，置于培养室的散射光下进行炼苗，７ｄ后打开封口膜，期间保持空气湿度，经常向嫩苗叶片喷洒无菌水，１０ｄ后取出单苗，洗净根部所带的培养基移栽至河沙ʒ腐殖质ʒ蛭石体积比为１ʒ１ʒ２的基质中，进行常规管理㊂１．５㊀统计分析方法数据采用Ｅｘｃｅｌ２００３和ＳＰＳＳ１７．０进行方差分析和显著性分析㊂２㊀结果与分析２．１㊀不同处理方法对外植体灭菌效果的影响将灭菌处理后的幼嫩带芽茎段接入培养基，约７ｄ后，部分茎段污染并脱水死亡，其结果见表１㊂不同组合灭菌时间对高盆樱桃茎段的污染和死亡造成了明显的影响，其中处理１的污染率（９４４４％）极显著高于其他处理（Ｐ＜０．０１），而成活２１１㊀第３期张㊀帆，等：高盆樱桃的组培快繁研究率只有２．２２％，显著低于其他处理㊂随着灭菌时间的增加，高盆樱桃茎段的污染率明显降低，成活率有所提高㊂其中，７５％乙醇灭菌２０ｓ，０．１％升汞灭菌３００ｓ以及７５％乙醇灭菌３０ｓ和０．１％升汞灭菌３００ｓ的灭菌效果最佳㊂可以看出，随着升汞灭菌时间的增加，高盆樱桃茎段的成活率逐渐降低，说明过长时间的升汞处理，对茎段的细胞组织产生了一定的毒害，影响其正常生长，导致植物死亡［１１］㊂综合数据分析，高盆樱桃茎段以７５％乙醇灭菌２０ｓ，０１％升汞灭菌３００ｓ为最佳灭菌方法，其污染率为１６６７％，成活率为７７７８％㊂表１㊀不同处理对外植体灭菌效果的影响Ｔａｂｌｅ１㊀Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓｏｎｅｘｐｌａｎｔｓ处理ｔｒｅａｔｍｅｎｔ处理时间／ｓｔｒｅａｔｍｅｎｔｔｉｍｅ７５％Ｃ２Ｈ５ＯＨ０．１％ＨｇＣｌ２ＨＧＣ污染率／％ｐｏｌｌｕｔｉｏｎｒａｔｉｏ成活率／％ｓｕｒｖｉｖａｌｒａｔｉｏ１１０１８０９４．４４ʃ１．０５ａＡ２．２２ʃ０．１７ｇＦ２１０３００６２．２２ʃ１．２１ｂＢ３２．２０ʃ１．１５ｅｆＤ３１０４２０４７．７８ʃ０．８２ｃＣ４２．２０ʃ１．３２ｃｄＣＤ４２０１８０５３．３３ʃ１．０３ｃＢＣ３６．６７ʃ０．９６ｄｅＤ５２０３００１６．６７ʃ０．２１ｅＤ７７．７８ʃ２．０７ａＡ６２０４２０２６．６７ʃ１．１２ｄＤ６１．１１ʃ１．３２ｂＢ７３０１８０４５．５６ʃ０．７８ｃＣ５０．００ʃ１．０９ｃＣ８３０３００１５．５６ʃ０．２３ｅＤ２７．７８ʃ０．５９ｆＥ９３０４２０２５．５６ʃ１．３１ｄＤ２４．４４ʃ０．７５ｆＥ㊀㊀注：表中每列的值是平均值ʃ标准误㊂同列不同小写字母表示差异显著（Ｐ＜０．０５）；不同大写字母代表差异极显著（Ｐ＜０．０１）㊂下同㊂ＥａｃｈｖａｌｕｅｉｓｔｈｅｍｅａｎʃＳＥｏｆｓｉｘｒｅｐｌｉｃａｔｅｓ，ａｎｄｔｈｅｓｍａｌｌｌｅｔｔｅｒａ，ｂ，ｃａｎｄｄｗｉｔｈｉｎｅａｃｈｃｏｌｕｍｎｉｎｄｉｃａｔｅｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔａｔｔｈｅ０．０５ｌｅｖｅｌ；ｔｈｅｃａｐｉｔａｌｌｅｔｔｅｒＡ，Ｂ，ＣａｎｄＤｉｎｄｉｃａｔｅｔｈｅｄｉｆｆｅｒ⁃ｅｎｃｅｉｓｅｘｔｒｅｍｅｌｙｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔａｔｔｈｅ０．０１ｌｅｖｅｌ．Ｔｈｅｓａｍｅｂｅｌｏｗ．Ａ．野生高盆樱桃；Ｂ－Ｃ．丛生芽的诱导；Ｄ－Ｅ．丛生芽的增殖；Ｆ－Ｇ．生根的试管苗；Ｈ．移栽成活的组培苗㊂Ａ．Ｃｅｒａｓｕｓｃｅｒａｓｏｉｄｅｓｖａｒ．ｃｅｒａｓｏｉｄｅｓ；Ｂ－Ｃ．ｃｌｕｓｔｅｒｂｕｄｓｉｎｄｕｃｔｉｏｎ；Ｄ－Ｅ．ｃｌｕｓｔｅｒｂｕｄｓｐｒｏｌｉｆｅｒａ⁃ｔｉｏｎ；Ｆ－Ｇ．ｔｕｂｅｓｅｅｄｌｉｎｇｓ；Ｈ．ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｅｄｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅｓｅｅｄｌｉｎｇ图１㊀高盆樱桃丛生芽诱导和生根Ｆｉｇ．１㊀ＣｌｕｓｔｅｒｂｕｄｓｉｎｄｕｃｔｉｏｎａｎｄｐｌａｎｔｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｏｆＣｅｒａｓｕｓｃｅｒａｓｏｉｄｅｓｖａｒ．ｃｅｒａｓｏｉｄｅｓ２．２㊀基本培养基和外源激素对丛生芽诱导的影响在添加了不同外源激素浓度的初代培养基中接入无菌高盆樱桃茎段，以研究大量元素及外源激素对丛生芽诱导的影响，结果见图１和表２㊂茎段的基部在约７ｄ后开始膨大（图１Ｂ），然后逐渐萌发出芽㊂表２表明，基本培养基和外源激素浓度对丛生芽诱导有显著影响（Ｐ＜０．０５）㊂２㊁３号处理的芽诱导率较高，分别为８２２２％和６３３３％，不定芽生长良好，３０ｄ后看到４５片翠绿叶片（图１Ｃ），不同基本培养基诱导结果差异显著，ＭＳ培养基效果最优，而降低大量元素的浓度，对丛生芽的诱导产生了抑制作用，完全的ＭＳ培养基能够对高盆樱桃丛生芽的诱导提供充分的营养元素㊂当６⁃ＢＡ质量浓度为１２ｍｇ／Ｌ时，诱导率明显高于０８和１５ｍｇ／Ｌ，且诱导率随着６⁃ＢＡ浓度的增大，呈现先上升后降低的趋势，说明６⁃ＢＡ的浓度过高或者过低均对诱导芽有抑制作用㊂当ＩＢＡ质量浓度为０１ｍｇ／Ｌ时，丛生芽诱导效果最好㊂在９个处理中，２号处理（１２ｍｇ／Ｌ６⁃ＢＡ㊁０１ｍｇ／ＬＩＢＡ）中，丛生芽出芽率最高，达到８２２２％㊂综合数据分析，有利于诱导高盆樱桃带芽茎段产生丛生芽的培养基为：ＭＳ＋６⁃ＢＡ（１２ｍｇ／Ｌ）＋ＩＢＡ（０１ｍｇ／Ｌ）㊂表２㊀基本培养基和外源激素对不定芽诱导的影响Ｔａｂｌｅ２㊀Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｔｈｅｂａｓｉｃｃｕｌｔｕｒｅｍｅｄｉｕｍｓａｎｄｅｘｏｇｅｎｏｕｓｈｏｒｍｏｎｅｓｏｎａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓｂｕｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ处理ｔｒｅａｔｍｅｎｔ基本培养基ｂａｓｉｃｍｅｄｉｕｍ６⁃ＢＡ／（ｍｇ㊃Ｌ－１）ＩＢＡ／（ｍｇ㊃Ｌ－１）出芽率／％ｉｎｄｕｃｔｉｏｎｒａｔｅ１ＭＳ０．８０．０５５１．１１ʃ１．０４ｂｃｄＣ２ＭＳ１．２０．１０８２．２２ʃ１．２１ａＡ３ＭＳ１．５０．２０６３．３３ʃ０．７６ｂＢ４１／２ＭＳ０．８０．１０４２．２２ʃ０．８１ｃｄｅＤ５１／２ＭＳ１．２０．２０５４．４４ʃ０．２４ｂｃＣ６１／２ＭＳ１．５０．０５３６．６７ʃ０．４３ｄｅｆＤＥ７１／４ＭＳ０．８０．２０２４．４４ʃ０．３２ｆＦ８１／４ＭＳ１．２０．０５３０．００ʃ０．８２ｅｆＥ９１／４ＭＳ１．５０．１０４１．１１ʃ０．３１ｃｄｅＤ２．３㊀不同浓度的外源激素组合对丛生芽增殖的影响㊀㊀将初代诱导产生的无菌芽苗接入增殖培养基，２０ｄ后，发现单芽基部冒出嫩绿色小芽（图１Ｄ），各处理增殖率均达到１００％㊂由试验结果（表３）看出，５号处理（６⁃ＢＡ０．８ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．０６ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．０８ｍｇ／Ｌ）的不定芽增殖生长表现最好，苗绿㊁健壮（图１Ｅ），增殖率达到７．３２㊂在６号培养基上不定芽增殖生长表现次之，增殖率为５．７３㊂不定芽增殖培养中，其增殖倍数随６⁃ＢＡ浓度的增加先增大后减小，０．８ｍｇ／Ｌ６⁃ＢＡ处理下的增殖倍数显著大于０．４和１．２ｍｇ／Ｌ㊂一般来说，外源激素浓度适当提高有利于促进芽的３１１南京林业大学学报（自然科学版）第４２卷增殖，但是浓度过高会造成激素积累，对外植体产生毒害作用［１２］㊂因此，高盆樱桃不定芽增殖的最适培养基为ＭＳ＋６⁃ＢＡ０．８ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ００６ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．０８ｍｇ／Ｌ㊂表３㊀不同外源激素对丛生芽增殖的影响Ｔａｂｌｅ３㊀Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｅｘｏｇｅｎｏｕｓｈｏｒｍｏｎｅｓｏｎｔｈｅｃｌｕｓｔｅｒｂｕｄｓｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ处理ｔｒｅａｔｍｅｎｔ激素／（ｍｇ㊃Ｌ－１）ｈｏｒｍｏｎｅｓ６⁃ＢＡＩＢＡＮＡＡ增殖倍数ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎｒａｔｅ生长情况ｇｒｏｗｔｈｃｏｎｄｉｔｉｏｎ１０．４０．０２０．０１２．５７ｃｄＤ芽少，细且短２０．８０．０６０．０５２．６４ｄＤ芽生长缓慢３１．２０．１００．０８２．９４ｃｄＤ芽少，叶色翠绿４０．４０．０２０．０５３．４７ｃｄＣＤ芽生长较快５０．８０．０６０．０８７．３２ａＡ芽长势较好６１．２０．１００．０１５．７３ｂＢ芽多，叶色黄绿７０．４０．０２０．０８３．７２ｃｄＣ芽有玻璃化现象８０．８０．０６０．０１４．１５ｃＣ芽多，叶色黄绿９１．２０．１００．０５３．８５ｃｄＣ叶色黄绿２．４㊀基本培养基种类和外源激素对生根的影响在不添加任何外源激素的ＭＳ培养基中对继代增殖的芽苗进行壮苗培养，待茎段加粗㊁苗高增加㊁叶面积增大㊁植株生长健壮后再进行生根培养㊂将芽苗高于４ｃｍ，且粗壮的单苗接入到生根培养基中，接种２０ｄ后，多数幼苗开始长出黄白色的小根（图１Ｆ），４０ｄ后，芽苗生长良好并且长出主㊁侧根（图１Ｇ）㊂试验结果（表４）表明：芽苗在不同的生根培养基中都可诱导生根，但是其生根率㊁平均根数和平均根长在不同的培养基中表现出明显差异㊂随着ＩＢＡ浓度升高，生根率先升高后降低，当ＩＢＡ为０．８ｍｇ／Ｌ时，芽苗基部出现大量愈伤组织，生根受到抑制；当减少培养基中大量元素的含量时，能够促进不定根的产生，但是大量元素含量过低，则抑制生根㊂因此，基于生根率㊁平均生根数和平均根长三者的综合分析表明，基本培养基的种类是诱导高盆樱桃生根的重要因素㊂而一定浓度的ＩＢＡ对生根也有促进作用㊂由试验结果可知，５号处理：１／２ＭＳ＋ＩＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ是诱导高盆樱桃生根的适宜配方组合㊂表４㊀培养基种类和外源激素对生根的影响Ｔａｂｌｅ４㊀Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｔｈｅｂａｓｉｃｃｕｌｔｕｒｅｍｅｄｉｕｍｓａｎｄｈｏｒｍｏｎｅｓｏｎｒｏｏｔｉｎｇ处理ｔｒｅａｔｍｅｎｔ基本培养基ｂａｓｉｃｍｅｄｉｕｍＩＢＡ／（ｍｇ㊃Ｌ－１）生根率／％ｒｏｏｔｉｎｇｒａｔｅ根数／条ｒｏｏｔｓｎｕｍｂｅｒ根长／ｃｍｒｏｏｔｌｅｎｇｔｈ长势ｇｒｏｗｔｈｃｏｎｄｉｔｉｏｎ１ＭＳ０．２４８．８９ʃ０．２１ｄｅＣＤ２．５８ʃ０．０１ｃＤ３．３５ʃ０．０２ｃｄＣＤ＋２ＭＳ０．５５８．８９ʃ０．３４ｂｃｄＢＣＤ４．９８ʃ０．０１ｂＡＢＣ２．９３ʃ０．１３ｄｅＣＤ＋３ＭＳ０．８４４．４４ʃ０．２５ｄｅＣＤ３．２０ʃ０．０２ｃＣＤ３．４１ʃ０．１５ｃｄＣＤ＋４１／２ＭＳ０．２６７．７８ʃ０．８３ｂｃＢＣ３．３８ʃ０．０１ｃＢＣＤ４．１２ʃ０．０４ｃＢＣ＋５１／２ＭＳ０．５９２．２２ʃ１．０１ａＡ６．７４ʃ０．０３ａＡ５．４５ʃ０．１６ｂＡＢ＋＋＋６１／２ＭＳ０．８７４．４４ʃ０．７２ｂＡＢ４．８７ʃ０．１１ｂＡＢＣ６．４７ʃ０．２１ａＡ＋＋＋７１／４ＭＳ０．２３５．５６ʃ０．１６ｅＤ５．３２ʃ０．０３ｂＡＢ２．２１ʃ０．０７ｅＤ＋８１／４ＭＳ０．５５４．４４ʃ０．４９ｃｄＢＣＤ１．９９ʃ０．０１ｃＤ３．９９ʃ０．０５ｃｄＢＣ＋＋９１／４ＭＳ０．８４２．２２ʃ０．５４ｄｅＤ２．５３ʃ０．０１ｃＤ３．２１ʃ０．１２ｃｄｅＣＤ＋２．５㊀炼苗与移栽试管苗经炼苗移栽，约３０ｄ后发现根部有新根长出即移栽成活，移栽成活率为７２．２％，成活植株生长较好且长势一致（图１Ｈ）㊂３㊀讨㊀论樱花资源丰富，其野生资源和栽培种类全世界有１５０余种［１３－１４］㊂随着樱花的广泛应用，研究樱花的快速繁殖技术显得尤为重要㊂迄今，已有很多学者对观赏樱花组织培养技术进行了研究，研究内容主要集中在外植体材料㊁基因型㊁培养基㊁植物激素等对启动培养㊁增殖培养㊁生根培养的影响［１５］㊂目前，有关观赏樱花的组培快繁获得成功的只有５种：樱花（Ｐｒｕｎｕｓｓｅｒｒｕｌａｔａ）［１６］㊁福建山樱花（Ｃ．ｃａｍｐａｎｕｌａｔａＭａｘｉｍ）［１７］㊁垂枝樱花（Ｃ．ｓｕｂｈｉｒｔｅｌｌａＭｉｑ．ｖａｒ．ｐｅｎｄｕｌａＴａｎａｋａ）［１８］㊁东京樱花（Ｐｒｕｎｕｓｙｅ⁃ｄｏｅｎｓｉｓ）［１５］和日本晚樱（Ｐ．ｌａｎｎｅｓｉａｎａＷｉｌｓ）［１９］等㊂尽管观赏樱花的组培快繁获得了初步成功，但是对冬天开花的樱花如冬樱花和高盆樱桃等的组培技术的研究还比较滞后㊂目前只获得了冬樱花组培愈伤组织［８］，还未见组培成苗的报道㊂高盆樱桃（原变种）组培快繁的研究更少，仅见叶露等［２０］的４１１㊀第３期张㊀帆，等：高盆樱桃的组培快繁研究研究报道㊂而高盆樱桃（原变种）是观赏樱花中冬季至早春开花的珍品，目前仅见昆明等地有少量栽培㊂因此，此次研究以高盆樱桃茎段为试验材料，筛选高盆樱桃离体培养各阶段的适宜配方，可使高盆樱桃能在短时间内快速成苗，满足园林生产的需求，而影响高盆樱桃的组培快繁效率的因子有很多，包括外植体的选择和灭菌效果㊁培养基及外源激素种类及相对浓度等㊂３．１㊀高盆樱桃外植体取材时间此次试验所用的高盆樱桃为野生树种，所处生境杂草丛生，环境复杂㊁潮湿，因此其茎段㊁叶腋处附着有真菌㊁细菌和灰尘，这些污染菌容易通过皮孔㊁伤口进入到植物体内部［２１－２２］，造成内生菌大量寄生，给高盆樱桃的丛芽诱导带来阻碍㊂通过试验发现，高盆樱桃在２月上旬，即生长开始季节取材效果最好［２３］，高盆樱桃树液流动活跃，新梢刚抽出，其表面带菌较少，茎段幼嫩，体内多酚氧化酶和酚类物质积累较少，褐化率低，萌芽率高［２４－２５］，且污染较小㊂另外，垂枝樱花带芽茎段外植体的取材时间在江苏是３月初［１８］；日本晚樱带芽茎段外植体的取材时间在河南是１月［１９］㊂这些观赏樱花带芽茎段外植体取材时间与此次研究中外植体取材时间基本相同，都在冬季或初春，说明观赏樱花带芽茎段在其生长萌动开始季节取材，材料带菌少，有利于丛生芽的诱导和增殖㊂３．２㊀基本培养基对高盆樱桃组织培养的影响在丛生芽初代诱导试验中发现在１／２ＭＳ和ＭＳ培养基中的出芽率明显高于１／４ＭＳ，且随着大量元素的减少，其出芽率也呈现逐渐降低的趋势，这表明高盆樱桃在高无机盐水平下的出芽速度比在低无机盐下更快，低无机盐水平对其茎段的出芽有一定的抑制作用，对高盆樱桃外植体的生长不利㊂３．３㊀外源激素对高盆樱桃组培的影响增殖培养中，当６⁃ＢＡ从０．８ｍｇ／Ｌ增加到１．２ｍｇ／Ｌ时，芽苗出现黄化和纤细皱缩的现象，这可能与外源激素的积累有关，一般在丛芽的诱导和增殖阶段，增殖率会随着细胞分裂素浓度的增大而提高［２６］，但当外源细胞分裂素的浓度过大时，植物经过多次继代会造成激素的积累，从而产生毒害作用，影响芽苗质量［２７－２９］㊂在继代２３次后，可以将丛生芽接入空白的ＭＳ培养基上进行激素释放，以减轻毒害㊂在此次试验生根培养阶段，ＩＢＡ浓度的增加，造成根基部愈伤化较为严重，且主根粗壮，无侧根和根毛，影响了根的发生，这也符合生长素低浓度促进生根，高浓度抑制的规律［３０－３３］㊂试验结果表明生根率和平均生根数都是在０．５ｍｇ／ＬＩＢＡ的水平上表现最佳㊂参考文献（ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ）：［１］段晓梅，王自辉，樊国盛．云南冬樱花的群落特征及地理分布［Ｊ］．南京林业大学学报（自然科学版），２００４（６）：８３－８６．ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－２００６．２００４．０６．０２２．ＤＵＡＮＸＭ，ＷＡＮＧＺＨ，ＦＡＮＧＳ．ＣｏｍｍｕｎｉｔｙｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓａｎｄｐｈｙｔｏｇｅｏｇｒａｐｈｉｃａｌｍｅａｎｉｎｇｏｆＣｅｒａｓｕｓｃｅｒａｓｏｉｄｅｓｉｎＹｕｎｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｅ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮａｎｊｉｎｇＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓＥｄｉｔｉｏｎ），２００４，２８（６）：８３－８６．［２］何立平，王志龙，祝志勇．国内樱属植物研究进展综述［Ｊ］．农业科技与信息：现代园林，２０１３（７）：４８－５２．ＨＥＬＰ，ＷＡＮＧＺＬ，ＺＨＵＺＹ．ＰｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓｏｆｒｅｓｅａｒｃｈｅｓｏｎＣｅｒａｓｕｅｉｎＣｈｉｎａ［Ｊ］．ＭｏｄｅｒｎＬａｎｄｓｃａｐｅＡｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ，２０１３（７）：４８－５２．［３］杨曦坤，刘正先，胡佐胜，等．中国野生樱花史考［Ｊ］．中国园艺文摘，２０１３（１０）：１３４－１３５．ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２－０８７３．２０１３．１０．０６０．ＹＡＮＧＸＫ，ＬＩＵＺＸ，ＨＵＺＳ，ｅｔａｌ．Ｉｎｔｈｅｈｉｓｔｏｒｙｏｆｔｈｅｗｉｌｄｃｈｅｒｒｙｆｌｏｗｅｒｓ［Ｊ］．ＣｈｉｎｅｓｅＨｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅＡｂｓｔｒａｃｔｓ，２０１３（１０）：１３４－１３５．［４］杨明艳，李兴明，杨发军，等．冬樱花扦插生根处理研究［Ｊ］．热带农业科学，２０１１，３１（１２）：２０－２５．ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００９－２１９６．２０１１．１２．００６．ＹＡＮＧＭＹ，ＬＩＸＭ，ＹＡＮＧＦＪ，ｅｔａｌ．ＲｏｏｔｉｎｇｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆＰｒｕｎｕｓｍａｊｉｅｓｔｉｃａｋｏｅｈｎｅ［Ｊ］．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＴｒｏｐｉｃａｌＡｇｒｉ⁃ｃｕｌｔｕｒｅ，２０１１，３１（１２）：２０－２５．［５］段晓梅．冬樱花扦插繁殖研究［Ｊ］．西南林学院学报，２００３，２３（１）：４３－４５．ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．２０９５－１９１４．２００３．０１．０１２ＤＵＡＮＸＭ．ＡｓｔｕｄｙｏｎｓｏｆｔｃｕｔｔｉｎｇｏｆＣｅｒａｓｕｓｃｅｒａｓｏｉｄｅｓ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＳｏｕｔｈｗｅｓｔＦｏｒｅｓｔｒｙＣｏｌｌｅｇｅ，２００３，２３（１）：４３－４５．［６］杨明艳，李兴明，杨发军，等．冬樱花嫁接繁殖试验［Ｊ］．农业研究与应用，２０１２，２：１７－１９．ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．２０９５－０７６４．２０１２．０２．００６．［７］王宇萍，王朝文，杨洪涛，等．冬樱花种子育苗技术研究［Ｊ］．种子，２０１５，３４（３）：１１７－１１９．ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－４７０５．２０１５．０３．０３４．ＷＡＮＧＹＰ，ＷＡＮＧＣＷ，ＹＡＮＧＨＴ，ｅｔａｌ．Ｓｔｕｄｙｏｎｔｈｅｓｅｅｄｓｓｅｅｄｌｉｎｇ⁃ｒａｉｓｉｎｇｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆｗｉｎｔｅｒｃｈｅｒｒｙ［Ｊ］．Ｓｅｅｄ，２０１５，３４（３）：１１７－１１９．［８］和凤美，朱永平，杨晓红，等．冬樱花愈伤组织诱导和抑制褐化初探［Ｊ］．中国农学通报，２０１０，２６（１２）：１３０－１３４．ＨＥＦＭ，ＺＨＵＹＰ，ＹＡＮＧＸＨ，ｅｔａｌ．ＴｈｅｐｒｉｍａｒｙｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｏｎｃａｌｌｕｓｉｎｄｕｃｔｉｏｎａｎｄｂｒｏｗｎｉｎｇｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎｏｆＣｅｒａｓｕｓｃｅｒａｓｓｏｉｄｅｓ［Ｊ］．ＣｈｉｎｅｓｅＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＢｕｌｌｅｔｉｎ，２０１０，２６（１２）：１３０－１３４．［９］谭秀梅．昆明市区樱花种质资源及园林应用研究［Ｄ］．昆明：西南林学院，２００８．ＴＡＮＸＭ．Ｓｔｕｄｙｏｎｃｈｅｒｒｙｇｅｒｍｐｌａｓｍｒｅｓｏｕｒｃｅｓａｎｄｌａｎｄｓｃａｐｅａｐ⁃ｐｌｉｃａｔｉｏｎｉｎＫｕｎｍｉｎｇＣｉｔｙ［Ｄ］．Ｋｕｎｍｉｎｇ：ＳｏｕｔｈｗｅｓｔＦｏｒｅｓｔｒｙＵ⁃ｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２００８．［１０］段晓梅．红花高盆樱桃扦插繁殖研究［Ｊ］．思茅师范高等专科学校学报，２００３，１９（３）：４－７．ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００８－８０５９．２００３．０３．００２．ＤＵＡＮＸＭ．ＳｏｆｔｗｏｏｄｃｕｔｔｉｎｇｓｏｆＣｅｒａｓｕｓｃｅｒａｓｏｉｄｅｓｖａｒ．ｒｕｂｅａ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＳｉｍａｏＴｅａｃｈｅｒｓＣｏｌｌｅｇｅ，２００３，１９（３）：４－７．５１１南京林业大学学报（自然科学版）第４２卷［１１］张小单，赵恒田，李晶，等．钻天柳茎段腋芽诱导消毒方法与培养基的筛选［Ｊ］．安徽农业科学，２０１３，４１（３３）：１２８９４－１２８９７，１２９３２．ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．０５１７－６６１１．２０１３．３３．０３３．ＺＨＡＮＧＸＤ，ＺＨＡＯＨＴ，ＬＩＪ，ｅｔａｌ．ＳｅｃｌｅｃｔｉｏｎｏｆｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓａｎｄｃｕｌｔｕｒｅｍｅｄｉｕｍｏｎｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆａｘｉｌｌａｒｙｂｕｄｓｆｒｏｍｓｅｇｍｅｎｔｓｏｆＣｈｏｓｅｎｉａａｒｂｕｔｉｆｏｌｉａ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｈｕｉＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ，２０１３，４１（３３）：１２８９４－１２８９７，１２９３２．［１２］黄颖，胡磊，谷晴，等．大马士革玫瑰茎尖组培快繁技术研究［Ｊ］．北方园艺，２０１４（３）：１０４－１０６．ＨＵＡＮＧＹ，ＨＵＬ，ＧＵＱ，ｅｔａｌ．ＳｔｕｄｙｏｎｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅａｎｄｒａｐｉｄｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎｏｎｓｔｅｍｔｉｐｏｆＲｏｓａ，Ｄａｍａｓｃｕｓ［Ｊ］．ＮｏｒｔｈｅｒｎＨｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅ，２０１４（３）：１０４－１０６．［１３］王贤荣．中国樱花品种图鉴［Ｍ］．北京：科技出版社，２０１４．［１４］ＬＩＣＬ，ＢＲＵＣＥＢ．Ｃｅｒａｓｕｓ［Ｍ］／／ＷＵＺＹ，ＲＡＶＥＮＰＨ．ＦｌｏｒａｏｆＣｈｉｎａ．Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ：ＭｉｓｓｏｕｒｉＢｏｔａｎｉｃａｌＧａｒｄｅｎＰｒｅｓｓ，２００３：４０４－４２０．［１５］邹娜，曹光球，林思祖．观赏樱花繁殖技术研究进展［Ｊ］．西南林学院学报，２００７，２７（６）：４２－４６．ＤＯＩ：１０．１１９２９／ｊ．ｉｓｓｎ．２０９５－１９１４．２００７．０６．０１０．ＺＯＵＮ，ＣＡＯＧＱ，ＬＩＮＳＺ．Ａｒｅｖｉｅｗｏｆｒｅｓｅａｒｃｈａｄｖａｎｃｅｓｉｎｏｒｎａｍｅｎｔａｌｃｈｅｒｒｙｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＳｏｕｔｈｗｅｓｔＦｏｒｅｓｔｒｙＣｏｌｌｅｇｅ，２００７，２７（６）：４２－４６．［１６］王文房，李修岭．樱花花柄的组织培养［Ｊ］．安徽农业科学，２００６，３４（２２）：５８３９－５８４１．ＷＡＮＧＷＦ，ＬＩＸＬ．Ｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅｏｆｏｒｎａｍｅｎｔａｌｃｈｅｒｒｉｅｓｆｌｏｗ⁃ｅｒｓｔｅｍｓ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｈｕｉＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，２００６，３４（２２）：５８３９－５８４１．［１７］邹娜，陈璋，林思祖，等．福建山樱花愈伤组织的诱导及植株再生［Ｊ］．核农学报，２０１３，２７（１０）：１４１７－１４２３．ＤＯＩ：１０．１１８６９／ｈｎｘｂ．２０１３．１０．１４１７．ＺＯＵＮ，ＣＨＥＮＺ，ＬＩＮＳＺ，ｅｔａｌ．Ｃａｌｌｕｓｉｎｄｕｃｔｉｏｎａｎｄｐｌａｎｔｒｅ⁃ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｏｆＰｒｕｎｕｓｃａｍｐａｎｕｌａｔａ［Ｊ］．ＡｃｔａＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｅＮｕｃｌｅａｔａｅＳｉｎｉｃａ，２０１３，２７（１０）：１４１７－１４２３．［１８］王红梅，李西莉，李洪光，等．垂枝樱花组培技术研究［Ｊ］．黑龙江农业科学，２０１６，９：１－６．ＤＯＩ：１０．１１９４２／ｊ．ｉｓｓｎ１００２－２７６７．２０１６．０９．０００１．ＷＡＮＧＨＭ，ＬＩＸＬ，ＬＩＨＧ，ｅｔａｌ．ＳｔｕｄｙｏｎｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅｏｆＣｅｒａｓｕｓｓｕｂｈｉｒｔｅｌｌａＭｉｑ．ｖａｒ．ｐｅｎｄｕｌａＴａｎａｋａ［Ｊ］．ＨｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ，２０１６，９：１－６．［１９］孟月娥，李艳敏，赵秀山，等．日本晚樱组培快繁技术研究［Ｊ］．中国农学通报，２００６，２２（１０）：２６４－２６６．ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－６８５０．２００６．１０．０６３．ＭＥＮＧＹＥ，ＬＩＹＭ，ＺＨＡＯＸＳ，ｅｔａｌ．ＴｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅａｎｄｒａｐｉｄｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎｏｆＰｒｕｎｕｓｌａｎｎｅｓｉａｎａＷｉｌｓ［Ｊ］．ＣｈｉｎｅｓｅＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓＢｕｌｌｅｔｉｎ，２００６，２２（１０）：２６４－２６６．［２０］叶露．高盆樱桃的组织培养及再生体系研究［Ｄ］．雅安：四川农业大学，２０１５．ＹＥＬ．ＳｔｕｄｙｏｎｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅａｎｄｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍｏｆＣｅｒａｓｕｓｃｅｒａｓｏｉｄｅｓｖａｒ．ｃｅｒａｓｏｉｄｅｓ［Ｄ］．Ｙａᶄａｎ：ＳｉｃｈｕａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉ⁃ｖｅｒｓｉｔｙ，２０１５．［２１］周俊辉，李宏彬，杨耀强，等．植物组织培养中污染的鉴定与防止初步研究［Ｊ］．微生物学杂志，２００２，２２（２）：５３－５５．ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００５－７０２１．２００２．０２．０２１．ＺＨＯＵＪＨ，ＬＩＨＢ，ＹＡＮＧＹＱ，ｅｔａｌ．Ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙｓｔｕｄｙｏｎｔｈｅｃｏｎｔａｍｉｎａｔｉｏｎｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇａｎｄｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎｉｎｐｌａｎｔｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙＭａｒ，２００２，２２（２）：５３－５５．［２２］李广旭，高艳敏，杨华，等．轮纹病菌在苹果枝干上侵入途径的扫描电镜观察［Ｊ］．果树学报，２００５，２２（２）：１６９－１７１．ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００９－９９８０．２００５．０２．０１７．ＬＩＧＸ，ＧＡＯＹＭ，ＹＡＮＧＨ．ＯｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｏｆｉｎｆｅｃｔｉｏｎａｐｐｒｏａｃｈｏｆＢｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａｂｅｒｅｎｇｒｉａｎａｆ．ｐｉｒｉｃｏｌａｏｎａｐｐｌｅｓｔｅｍｕｎｄｅｒｓｃａｎ⁃ｎｉｎｇｅｌｅｃｔｒｏｎｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｒｕｉｔＳｃｉｅｎｃｅ，２００５，２２（２）：１６９－１７１．［２３］林顺权．园艺植物生物技术［Ｍ］．北京：中国农业出版社，２００３．［２４］王非，成璐．褐毛铁线莲茎段诱导丛生芽的研究［Ｊ］．北方园艺，２０１４（７）：８６－９０．ＷＡＮＧＦ，ＣＨＥＮＧＬ．ＳｔｕｄｙｏｎｃｌｕｓｔｅｒｓｈｏｏｔｓｉｎｄｕｃｔｉｏｎｆｒｏｍｔｈｅｓｔｅｍｓｏｆＣｌｅｍａｔｉｓｆｕｓｃａ［Ｊ］．ＮｏｒｔｈｅｒｎＨｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅ，２０１４（７）：８６－９０．［２５］ＨＡＢＩＢＡＵ，ＲＥＺＡＳ，ＳＡＨＡＭＬ，ｅｔａｌ．ＥｎｄｏｇｅｎｏｕｓｂａｃｔｅｒｉａｌｃｏｎｔａｍｉｎａｔｉｏｎｄｕｒｉｎｇｉｎｖｉｔｒｏｃｕｌｔｕｒｅｏｆＴａｂｌｅＢａｎａｎａ：ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａ⁃ｔｉｏｎａｎｄｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＴｉｓｓｕｅＣｕｌｔｕｒｅ＆Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００２，１２（２）：１１７－１２４．［２６］刘晓芹，冯美，王振平，等．葡萄砧木组培快繁研究［Ｊ］．安徽农业科学，２０１０，３８（１７）：８８６６－８８６８．ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．０５１７－６６１１．２０１０．１７．０１４．ＬＩＵＸＱ，ＦＥＮＧＭ，ＷＡＮＧＺＰ，ｅｔａｌ．Ｓｔｕｄｙｏｎｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅａｎｄｒａｐｉｄｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎｏｆｇｒａｐｅｒｏｏｔｓｔｏｃｋ．［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｈｕｉＡｇ⁃ｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，２０１０，３８（１７）：８８６６－８８６８．［２７］杨艳，李志辉，杨模华．红冠桉茎段离体培养再生植株的研究［Ｊ］．中南林业科技大学学报，２０１１，３１（３）：１７８－１８２．ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３－９２３Ｘ．２０１１．０３．０３７．ＹＡＮＧＹ，ＬＩＺＨ，ＹＡＮＧＭＨ．Ｉｎｖｉｔｒｏｃｕｌｔｕｒｅａｎｄｐｌａｎｔｒｅｇｅｎ⁃ｅｒａｔｉｏｎｆｒｏｍｓｔｅｍｓｅｇｍｅｎｔｏｆＣｏｒｙｍｂｉａｐｔｙｃｈｏｃａｒｐａ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｅｎｔｒａｌＳｏｕｔｈＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＦｏｒｅｓｔｒｙａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１１，３１（３）：１７８－１８２．［２８］曹昆，李霞．木本植物组织培养不定芽诱导研究进展［Ｊ］．江苏林业科技，２００８（５）：４３－４８．ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－７３８０．２００８．０５．０１３．ＣＡＯＫ，ＬＩＸ．Ｐｒｏｇｒｅｓｓｏｎｉｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓｂｕｄｉｎｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅｏｆｗｏｏｄｙｐｌａｎｔｓ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＪｉａｎｇｓｕＦｏｒｅｓｔｒｙＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００８（５）：４３－４８．［２９］王开冻，魏跃．西瓜花药培养中不定芽的诱导与增殖［Ｊ］．安徽农业科学，２００８，３６（１６）：６８２６－６８２７．ＷＡＮＧＫＤ，ＷＥＩＹ．Ｓｔｕｄｙｏｎｔｈｅｉｎｄｕｃｔｉｏｎａｎｄｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓｂｕｄｓｉｎｔｈｅａｎｔｈｅｒｃｕｌｔｕｒｅｏｆｗａｔｅｒｍｅｌｏｎ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｈｕｉＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，２００８，３６（１６）：６８２６－６８２７．［３０］高雪芹，王俊杰，云锦凤，等．红三叶新品系组织培养和植株再生［Ｊ］．草地学报，２０１２，２０（１）：１５９－１６５．ＤＯＩ：１０．１１７３３／ｊ．ｉｓｓｎ．１００７－０４３５．２０１２．０１．０２５．ＧＡＯＸＱ，ＷＡＮＧＪＪ，ＹＵＮＪＦ，ｅｔａｌ．Ｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅａｎｄｒｅｇｅｎ⁃ｅｒａｔｉｏｎｏｆｒｅｄｃｌｏｖｅｒｎｅｗｌｉｎｅ［Ｊ］．ＡｃｔａＡｇｒｅｓｔｉａＳｉｎｉｃａ，２０１２，２０（１）：１５９－１６５．［３１］冯晓英．勿忘我组织培养快速繁殖研究［Ｊ］．贵州农业科学，２００２，３０（１）：９－１３．ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－３６０１．２００２．０１．００３．ＦＥＮＧＸＹ．ＲａｐｉｄｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎｏｆＬ．ｓｉｎｕａｔｕｍｂｙｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅ［Ｊ］．ＧｕｉｚｈｏｕＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，２００２，３０（１）：９－１３．［３２］杜盛，同美杰．脱皮榆离件培养再生植株的研究［Ｊ］．内蒙古林学院学报（自然科学版），１９９６，１８（４）：１５－１７．ＤＵＳ，ＴＯＮＧＭＪ．ＰｌａｎｔｌｅｔｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆＵｌｍｕｓｌａｍｅｌｌｏｓｅｃｕｌｔｕｒｅｄｉｎｖｉｔｒｏ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮｅｉｍｅｎｇｇｕＦｏｒｅｓｔｒｙＣｏｌｌｅｇｅ，１９９６，１８（４）：１５－１７．［３３］周亮．ＮＡＡ和ＩＢＡ生根剂对柳叶马鞭草插条生根的影响［Ｊ］．西北林学院学报，２０１５，３０（５）：１６１－１６４．ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－７４６１．２０１５．０５．２６．ＺＨＯＵＬ．ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＮＡＡａｎｄＩＢＡｏｎｔｈｅｒｏｏｔｉｎｇｏｆＶｅｒｂｅｎａｂｏａｒ⁃ｉｅｎｓｉｓ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮｏｒｔｈｗｅｓｔＦｏｒｅｓｔｒｙＣｏｌｌｅｇｅ，２０１５，３０（５）：１６１－１６４．（责任编辑㊀刘昌来）６１１。

中国樱桃与甜樱桃杂交后代植株的组培快繁及鉴定的开题报告

中国樱桃与甜樱桃杂交后代植株的组培快繁及鉴定的开题报告【选题背景】樱桃是我国重要的果树之一，品种繁多，有甜樱桃和酸樱桃两种类型。

甜樱桃具有香甜可口的果肉和浓郁的芳香，深受消费者喜爱。

然而，甜樱桃在我国的种植面积和产量相对较小，主要原因是其生长环境限制较大，栽培技术要求较高，且抗病性和逆境耐受性相对不足。

因此，通过杂交育种获得适应于我国生长环境的新品种，对于提高我国甜樱桃的生产效益和扩大种植面积具有重要意义。

目前，樱桃的育种工作主要依靠传统的认证杂交和选择繁育，这种方法时间长、成本高、成功率低、生产效益不高。

因此，利用组培技术进行樱桃杂交育种已成为目前的研究热点。

组培技术可以实现体细胞的大量繁殖和观察，提高杂种组合的筛选效率和催化机会，为樱桃新品种的培育提供了强有力的技术支持。

【研究内容】本研究旨在通过中国樱桃和甜樱桃的杂交，利用组培技术进行快速繁殖和筛选，获得新型甜樱桃品种。

具体研究内容如下：1.实验设计：采用组培技术对杂交后代进行体细胞繁殖和快速筛选，分为以下几个步骤：（1）采集两种樱桃花药和子房，培养基组成和培养条件的优化；（2）利用杂交得到杂种组合，在体外培育杂种胚珠和原生质体；（3）观察胚珠和植株的生长状态，筛选适宜的杂交组合；（4）选择优异的组合进行组织快速繁殖，完成杂交后代的体细胞繁殖。

2.目标与意义：通过本研究的实施，预期能够获得适应我国生长环境的新型甜樱桃品种，并为组培育种技术在果树育种中的应用提供一定的理论和实践基础。

同时，本研究结果可以为我国甜樱桃生产的提高和甜樱桃品种的培育奠定坚实的基础。

【研究进展】目前，本研究已完成组培技术的优化和杂交后代实验的初步观测。

组培条件和培养基的选择对植株的生长和繁殖具有较大影响，已经初步确定了较优的培养基组成和培养条件。

同时，利用杂交后的胚珠和原生质体成功地获得了杂交后代植株的初代组织培养，证明了组培技术在杂交后代快速繁殖中的重要作用。

【论文结构】本研究论文将分为以下几个部分：第一部分，绪论。

甜樱桃新品种玲珑脆的组织培养和离体快繁技术

河北果树HEBEI FRUITS 2019(1)试验研究甜樱桃新品种玲珑脆的组织培养和离体快繁技术吴雅琴^程和禾\陈龙\李玉生^吴永杰\徐建萍％赵艳华”(1河北省农林科学院昌黎果树研究所河北昌黎066600:2山东省五莲县中至镇林业站）摘要：试验对河北省农林科学院昌黎果树研究所培育的新品种玲珑脆进行了组培快繁研究。

结果表明：适宜的芽萌发培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+ NAA 0.05 mg/L ;增殖培养基为MS + 6-BA 0.6 mg/L+ NAA 0.05 mg/L，增殖系数平均3.2;生根培养基为l/2MS+ffiA0.5mg/L+IAA0.5mg/L，移栽成活率达到85%以上，建立了一套较为简单、有效的甜樱桃组织培养和离体快繁技术程序。

关键词：甜樱桃；离体快繁中图分类号：S662.5 文献标识码：A DOI编码:甜櫻桃是近十年来在我国发展最快的果树之一，由于其具有上市早、单位面积产值高、市场需求量大的优势，各适栽地区均把甜櫻桃列为果树生产的重要树种。

随着苗木市场的混乱引种和果园栽培年限的增长，一些危害较大的果树病毒病已在栽培产区普遍发生和蔓延，给果业生产造成了巨大的潜在危害，已成为阻碍果业发展的主要因素。

为了提高苗木质量，开展甜櫻桃茎尖培养和快速繁殖研宄，保证苗木健康、健壮，是获得櫻桃高产量、高品种的基础[1~3]。

本试验以我所培育的甜櫻桃新品种玲珑脆为对象[4]，研宄了甜櫻桃的培养基配比及组织培养与快速繁殖技术，旨在建立一套完整、通用、简易、有效的组培快繁、生根、驯化移栽技术体系，探索出一条组培工厂化育苗的途径。

1材料与方法试材为昌黎果树研宄所旺盛生长的“玲珑脆”8年生树，3月中旬剪取无病虫害、叶芽饱满的枝条备用。

1.1外植体接入将备用枝条插入自来水中，放置于培养室，约1周后叶芽萌发，选择刚萌发的茎尖或腋芽为外植体，剥去鳞片，露出绿色叶片，取下的芽带少10.19440/ki.1006-9402.2019.01.008量木质部，用自来水冲洗干净后，在无菌条件下，用70%酒精处理30 s，无菌水冲洗3次，0.1%HgCl2表面消毒8〜10 min，无菌水冲洗3-5次，再剥掉叶片1〜2 层，切除木质部，将消毒好的芽接种到萌发培养基上，放入培养室光照培养。

脱毒樱桃矮化砧木组培快繁关键技术研究

脱毒樱桃矮化砧木组培快繁关键技术研究本文综述了樱桃组织培养研究进展，重点对脱毒樱桃矮化砧木GD-1、GD-2外植体的增殖培养、生根条件、试管苗驯化移栽等关键环节进行了系统的研究，对樱桃微体嫁接技术作了初步探讨。

结果表明： 1．樱桃矮化砧木GD-1、GD-2和半矮化砧木ZY-1外植体在培养基MS+BA0.5mg/L+IBA0.1mg/L+GA0.1mg/L上分化率最高，分别为92％、89％、95％，增殖倍数最大，分别为3.4、3.2、4.0倍。

2．樱桃矮化砧GD-1和GD-2外植体比半矮化砧ZY-1生根难。

矮化砧木GD-1、GD-2在1/2MS+NAA0.3mg/L/1AA1.0mg/L培养基中生根效果较好，生根率分别为59％、57％，而ZY-1外植体生根率为100％。

3．在生根培养基中附加1/2MS的维生素B<sub>6</sub>、外植体暗培养和老化外植体幼嫩化处理都能明显提高其生根率，两步生根法是促使樱桃矮砧GD-1、GD-2生根的有效措施，生根率达到了100％。

4．试管苗移栽最佳发育状态是根长约0.5-2.0cm，主根数目多于3条、须根发达的Ⅰ级苗。

炼苗移栽的最佳程序是：在室外强光下闭瓶炼苗2周→试管苗移栽前在
600-800倍的杀菌剂中浸泡3-5分钟→移栽到经过高压灭菌的蛭石+草炭（1：2）中→一次性浇透无菌的1/2MS营养液，并扣膜保湿→扣棚驯化1周后开始放风降湿，3周后完全掀棚。

移栽成活率均在90％以上，而且栽后苗木生长健壮。

5．试管苗微体嫁接影响因素较多，本研究未取得理想结果，有待进一步探讨。

大樱桃砧木吉塞拉5号组培快繁技术研究

树研究所生物技术重点实验室引进。该品种为三倍１０ｄ幼苗成活后去掉薄膜进行正常管理，７ｄ喷１每
体杂种．本为酸樱桃 × 亲灰毛叶樱桃。在欧洲应用广次营养液。幼苗移栽到不同的基质中，而找出最佳从
泛，在北美Ｎ一４Ｃ１０的所有测试点表现丰产、早实。吉的栽培基质。
５．７５％。蓝莓试管苗驯化以泥炭：泥＝：黄３２的混合物作为基质，驯化苗成活率可高达７．９％。９
关键词：莓；导；蓝诱驯化；激素；基质
蓝莓（ｌｅｅｒ）杜鹃花科越桔属多年生浆果种植的产业化发展．别是种苗繁殖难、应短缺，Ｂｕｂｒ属ｙ特供
灭蚜，同时将栽培基质灭菌，然后将幼苗取出，净洗
一
３一８
试研究２１验０．１３
舭础挝瓤
蓝莓芽诱导、生与驯化技术研究再
来文国王淑珍马华升郑桂珍
（浙江省杭州市农业科学研究院杭州３０２１０４）
塞拉５砧甜樱桃树体大小仅为马扎德砧甜樱桃的２结果与分析４％，体开张，枝基角大，５树分抗樱属坏死环斑病毒２１不同激素浓度对诱导丛生芽的影晌．
ｆＮＳ）洋李矮缩病毒（Ｄ）在黏土地上表现良ＰＲＶ和ＰＶ，
摘要：以免眼蓝莓当年生枝条为外植体，对灭菌剂种类与处理时间的选择、同激素处理对芽诱导不的影响、Ｂ浓度对试管苗生根的影响、同基质对蓝莓试管苗驯化成活率的影响等多种因素进行ＩＡ不试验，立了蓝莓组培体系。建试验结果表明，外植体以０１．％升汞处理１ｎ污染率为２％，０ｍｉ，０同时萌发的正常芽率也达８．为适宜的灭菌方法。４４％，蓝莓芽诱导受细胞分裂素的影响，中附加Ｚ — 其Ｔ１２ｍｇＬ效果较好，增殖倍率可达４５倍。蓝莓试管苗附加ＩＡ０２／／～Ｂ．ｍｇＬ效果最佳，有效生根率达

樱桃组织培养和快速繁殖技术体系的研究

樱桃组织培养和快速繁殖技术体系的研究
吴霞;上官小霞;李燕娥
【期刊名称】《山西农业科学》
【年(卷),期】2002(030)002
【摘要】樱桃采用试管苗组织培养快繁，在MS培养基内附加10.mg／L 6-BA，茎芽繁殖系数较高；附加0.5mg／L IBA和0.1mg／L NAA，生根效果最好。

【总页数】3页(P49-51)
【作者】吴霞;上官小霞;李燕娥
【作者单位】山西省农业科学院棉花研究所，山西运城 044000;山西省农业科学院棉花研究所，山西运城 044000;山西省农业科学院棉花研究所，山西运城044000
【正文语种】中文
【中图分类】S662.504+.3
【相关文献】
1.樱桃组织培养及快速繁殖技术研究 [J], 李竹莹;郑晓峰;孙光英;黄刚
2.酸樱桃组织培养及快速繁殖技术研究 [J], 唐晓杰;孟庆繁;杨振国;高文韬
3.欧洲甜樱桃的组织培养与快速繁殖技术 [J], 兰士波;田新华;李红艳
4.樱桃李组织培养快速繁殖技术研究 [J], 贺祥素; 柴慈江; 郭静; 朱霖; 王雪彤; 冯涛
5.中华矮樱桃的组织培养与快速繁殖技术 [J], 韩文璞;袁明莲
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“吉塞拉6号”大樱桃砧木组培快繁技术研究

第49卷第1期2021年2月陕西林业科技Shaanxi Forest Science and TechnologyVol49No1Feb2021“吉塞拉6号”大樱桃砧木组培快繁技术研究高小霞，张森，童耀宏(陕西果业集团杨凌种苗科技有限公司，陕西杨凌712100)摘要：以吉塞拉6号茎段为材料进行大樱桃砧木组培快繁技术研究，结果表明：适宜吉塞拉6号的初代培养基是改良MS+6—BA0.6mg•L—1+IBA0.1mg•L—1,诱导率为92.5%;继代培养基是改良MS+6—BA0.8mg•L—1+IBA0.1mg•L—1，增殖系数为5.6；生根培养基是1/2MS+NAA1m g•L-1+IBA0.5mg•L-1，生根率为98%;生根瓶苗移栽成活率在95%以上。

关键词：吉塞拉6号；矮化砧木；组织培养中图分类号:S662.5文献标志码:A文章编号：1001-2117(2021)01-0040-05Tissue Culture and Rapid Propagation of Cherry Rootstock'Gisela6'GAO Xiao-xia,ZHANG Sen,TONG Yao-hong(Yangling Seedling Sei—tech Company,Ltd.,Shaanxi Fruit Industry Group,Yangling,Shaanxi712100)Abstract:Tissue culture with'Gisela6'as propagation material was conducted.The result showed that medium suitable for primary generation of'Gisela6'was MS+6—BA0.6mg・L—1+IBA 0.1mg・L—1,induction rate reaching92.5%.Medium suitable for second generation of'Gisela6' was MS+6—BA0.8mg・L—1+IBA0.1mg・L—1,multiplication coefficient reaching5.6.The medium for rooting was1/2MS+NAA1mg・L—1+IBA0.5mg・L—1,with rooting rate at98%.The bottled rooting seedlings after transplanted could survive over95%.Key words:'Gisela6'；dwarf rootstock；tissue culture生产上利用樱桃矮化砧木进行密集栽培可以实现早挂果、早丰产，达到经济效益最大化。

中国樱桃泰小红樱的组培快繁研究

ｒｏｓｗｅｅｌｎｅｎｒｏｔｒｏｇｒａｄｍｏｅ．ＫｅｙｗｏｒｓＣｈｎｓｈｒｙ；Ｔｉｉｏｏｇｉｇ；ＴｉｓｄｉｅｅｃｅｒａｘａｈｎｙｎｓｕｅＣｕｌｒｔｅ；Ｍｕｔｌｃｔｏｕｔｅｕｌｐｉａｉｎｃｌｉｕｒ
ｔｅ；ｈｅｅｅａｄｓｏｔｇｅｉｒｕｌａｄｈｄｄｒｒｅｅｖｓ３ｈｅｔｏｔｇｍｅｉｍｗｓｉｓｔｅｒｇｎｒｔｏｓｒｗｖｏｏｓｎａａｋｇｅｎｌａｅ．（）Ｔｅｂｓｒｏｉｄｕａｍｅｈｇｙｎ
ｔｅｒｓｌｅｅａｌｗ．（）ＴｅｂｓｃｈｒｅｉｍｆｒｈｏａＳ＋１０ｍｇＬ６一Ｂｈｅｕｔｗｒｓｆｌｓ１ｈｅｔｕｕｅｍｄｕｏｔｗｓＭｓｏｏｏｓｓ．／Ａ＋．ｇＬ０１ｍ／
ＮＡＡ．Ｏｉｍｅｉｍ，ｔｅａｉａｕｓｓｒｕｅａｉｎｒｗｖｇｒｕｌ．（）Ｔｅｂｓｍｕｔｌａｏｎｔｓｄｕｈｈｘｌｙｂｄｐｏｔｄｅｓｙａｄｇｅｉｏｓｌｒｌｏｙ２ｈｅｔｌｐｉｔｎｉｃｉ
１２／ＭＳ＋０５ｍｇＬＩＡ＋２Ｌｓｃｏｅ＋５ｇＬａａ．Ｏｎｔｉｍｅｉｍ，ｈｏｔｇｒｔａｉｈｒｎｅ．／Ｂ０ｕｒｓ／ｇｒｓｄｕｈｔｅｒｏｉａｅｗｓｈｇｅ，ａｄｔｎｈ
山东农业科学
２１，２２０１６：０～３
ＳａｄｎｇｉｌｒｌｃｎｅｈｎｏｇＡｒｕｔａＳｉｃｓｃｕｅ

樱桃矮化砧木—莱阳矮樱桃组培快繁技术研究

芽数，速扩大繁殖规模。迅
关键词莱阳矮樱桃
组培快繁分化率生根率
莱阳矮樱桃因其根系发达，须根较多，固地性强，期矮化效果好，癌发病率低，甜樱桃接穗前根与
ＧＡ．５ ② Ｏ２；＋ＩＡＡ０１＋Ｇ．．Ａ０５； ⑨ ＭＳ＋ＩＡ０１Ａ０７； ④ ＭＡ．＋Ｇ．５Ｓ＋ＩＡ．Ａ０２＋Ｇ０２Ａ，５；
Ｉ０１＋Ｂ０３ ② ＭＳ＋Ｉ０１＋Ｂ．：３ＡＡ．Ａ．；ＡＡ．Ａ０５（）ＭＳ＋
ＩＡＡ０．１＋ＢＡ１０；．ＩＡＡ０２＋ＢＡ０５；．．ＭＳ＋ＩＡＡ０．＋ＢＡ０３：２．ＭＳ＋ＩＡＡ０．＋ＢＡ１０；２．ＭＳ＋ＭＳ＋
２结果与分析
２１不同类型培养基对外植体萌发的影响将灭．菌待萌发的芽接种于培养基ＭＳ１、Ｆ４和ＱＬ中培养
３０天，果表明：结ＭＳ培养基中芽１０天后开始萌动，萌动率达６％，生芽平均数为４；１７丛Ｆ４培养基芽萌动时间为ｌ２天，萌动率为１％，未能分化；培养２芽基ＱＬ中芽并未萌动。明ＭＳ培养基对外殖体的萌表发和分化最为有利。
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２０年第５０２期
奄北国艺
试验研究
樱桃矮化砧木 — — 莱阳矮樱桃组培，繁技术研究陕

樱桃实验室组培实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的本实验旨在通过植物组织培养技术，实现对樱桃树苗的快速繁殖和优良品种的培育。

通过无菌操作，观察和记录樱桃组培过程中的生长情况，分析影响组培效果的因素，为樱桃树苗的产业化生产提供技术支持。

二、实验原理植物组织培养技术是利用植物体细胞的全能性，通过离体培养的方式，使植物组织在适宜的培养基和条件下生长、分化，最终形成完整的植株。

本实验采用外植体（樱桃茎段）进行组培，通过调节培养基成分、激素比例和环境条件，诱导外植体脱分化、再分化，形成植株。

三、实验材料与方法1. 实验材料- 樱桃茎段：选择生长健壮、无病虫害的樱桃枝条，剪成长约2-3cm的小段。

- 培养基：MS培养基（添加植物生长激素：NAA 0.5mg/L、BA 1.0mg/L）。

- 消毒剂：70%酒精、无菌水、氯化汞。

- 其他试剂：琼脂、葡萄糖、维生素等。

2. 实验方法（1）外植体消毒：将樱桃茎段剪成约2-3cm的小段，用70%酒精消毒30秒，再用氯化汞消毒5分钟，最后用无菌水冲洗5-10分钟。

（2）接种：将消毒后的樱桃茎段接种到MS培养基中，每个培养基接种3个茎段。

（3）培养条件：将接种后的培养基放入恒温培养箱中，温度控制在25±2℃，光照强度为2000-3000lx，光照时间为12小时/天。

（4）观察记录：每隔一周观察并记录外植体的生长情况，包括愈伤组织形成、芽苗生长、生根等。

四、实验结果与分析1. 外植体生长情况在实验过程中，外植体表现出不同的生长情况。

部分外植体在培养基中形成了愈伤组织，并逐渐分化出芽苗；部分外植体则生长缓慢，甚至死亡。

2. 愈伤组织形成愈伤组织形成是组培成功的关键。

实验结果显示，添加NAA和BA的MS培养基有利于愈伤组织的形成。

3. 芽苗生长芽苗的生长速度与培养基成分、激素比例和环境条件密切相关。

实验结果表明，适宜的培养基成分、激素比例和环境条件有利于芽苗的生长。

4. 生根生根是组培过程中另一个重要的环节。

樱桃的组织培养

樱桃矮化砧木组培快繁技术及脱毒研究陶波（甘肃农业大学生命科学技术学院09级）摘要：本文综述了大樱桃矮化砧木组织培养及脱毒技术研究进展，重点对樱桃矮化砧木GD-1、GD-2外植体的初代培养、增殖培养、生根培养等环节进行了研究，也对樱桃茎尖脱毒技术进行了研究。

以大樱桃嫩梢芽为外植体进行茎尖组培脱毒研究，结果表明：(1)筛选出的增殖培养基为MS +6–B A1.0 mg/L +NAA0.2mg/L+GA30.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L，丛生芽增殖数达到6个以上。

确定良好的生根培养基为1/2MS+IBA0.7mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖20g/L+琼脂3.5g/L，生根率可达75.1%。

(2)外植体进行暗培养能提高生根率，生根率达到了73%，而对照仅有57%，单株根数也从1.2条增加到了1.7条。

(3)采用特异引物的RT-PCR扩增方法，对3个大樱桃品种进行了李坏死环斑病毒(PNRSV)的检测。

结果表明，0.5～0.8mm 茎尖培养对李坏死环斑病毒(PNRSV)的脱毒率达78.5％；0.5mm 以下茎尖培养对PNRSV 的脱毒率达 93.3％，证明大樱桃试管苗0.5mm 以下的小茎尖培养能有效脱除 PNRSV病毒。

关键词：大樱桃；矮化砧木；组培快繁；脱毒技术Rearch On Tissue Culture Rapid Propation Technology And Virus-free Of Sweet CherryDwarfing RootstocksAbstract: The paper summarized research progress on tissue culture rapid propagation and virus-free of sweet cherry dwarfing rootstocks, mainly studied crucial technology of propagating, rooting, acclimatizating and transplanting on tissue culture of the sweet cherry dwarfing rootstocks GD-1.GD-2, elementarily discussed on virus-free of cherry. The results indicated：(1)The culture medium of MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.2 mg/L +sucrose 30g/L+agar 6.5g/L was screened out used to differentiate and multiply and differentiating quantities of buds up to more 6. Meanwhile, the inducing rate on culture medium of 1/2 MS +IBA 0.7mg /L +NAA0.2 mg/L+sucrose20g/L+agar3.5g/L being responsible for root growth up to 75.1% was accounted for the optim- umone.(2) The root percentage of shoots of GD-1,GD-2 was improbed by a dark treatment of explants.(3) Total RNA, isolated from three sweet cherry cultivars, was used as template to amplify PNRSV by polymerase chain reaction (PCR). The results showed the virus-free rate of PNRSV is 78.5% on 0.5～0.8mm shoot tip; The virus-free rate of PNRSV is 93.3% less than 0.5mm shoot tip, it was proved that PNRSV could be elimin -ated effectively from sweet cherry plantlets in vitro by culture of shoot tip less than 0.5mm.Key word: Sweet cherry; Dwarfing rootstocks; Tissue culture rapid propagation; Virus-free樱桃（Prunus）为蔷薇科樱属（Cerasus Mill.）的落叶乔木。

樱桃矮化砧的组培快繁技术研究

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西北林学院学报２０，１１：２４０６２（）８￣８
ＪｕｎｆｒｈｅｔＦｒｓｒｉｒｉｏｒＭｏｔｗｓｏｅｔＵｎｖｓｙＮｏｙｅｔ
樱桃矮化砧的组培快繁技术研究
成密红郭军战，成鸿飞，
ＣＨＥＮＧｉｈｎＧＵｏｕ — ｈｎ，ＣＨＥＮＧｎ —ｅＭ —ｏｇ，Ｊｎｚａ ¨ Ｈｏｇｆｉ
（．ｏｌｅｏＦｒｓｙＮｏｔｗｅｔ＆ＦＵｎｖｒｉ，ａｇｉｇｅｆｏｅｒ，ｒｈｓＡｔｉｅｓｙＹｎｌＳａｎｔｎ１１０Ｃｉａ
ｔｎｃｌｒｄｕＭＳ一Ａ０８ｍｇ・＋ＮＡＡ０２ｍｇ・～，ｏｔｕｔｒｓ１２ｉｕｔｅｍｅｉｍ＋６Ｂ．ｏｕＬ．Ｌｒｏｌｅｗａ／ＭＳ＋ＮＡＡ．ｃｕ０５
ｍｇ・Ｌ；ｆｒＧｉｅａ７ｃｅｒｏｓｌ一ｈｒｙ，ｐｉｒｕｔｒｓＭＳ＋６ＢＡ．ｒｍａｙｃｌｕｅｗａ一Ｏ８ｍｇ・Ｌ一＋ＮＡＡｍｇ・Ｌ～０１．ｍｇ・
（．１西北农林科技大学林学院，陕西杨陵７２０；．１１０２陕西省龙草坪林业局，陕西佛坪７３０）２４１
摘要：以中华矮樱、ｉｌ５Ｇｓｌ一为供试材料，Ｇｓａ、ｉａ７ｅ一ｅ进行组培快繁技术研究，结果表明中华矮樱适宜的初代培养基为ＭＳ一Ａ１０ｍＬ＋６Ｂ．ｇ・＋ＮＡ０１Ａ．ｍｇ・＿，Ｌ。增殖培养基为ＭＳ一Ａ＋６Ｂ１０ｍＬ．ｇ・＋Ｎ．ＡＡ０２ｍｇ・＿，Ｌ。生根培养基为１２＋ＮＡ０８ｇ・＿￣ｉｌ５／ＭＳＡ．ｍＬ。ｓａ号适宜Ｇｅ一