缺氧动物模型复制及中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响

实验13 缺氧动物模型复制及中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的

影响

摘要目的学习复制乏氧性缺氧和血液性缺氧的动物模型方法；观察缺氧过程中呼吸的反应及血液色泽和全身一般情况的变化；了解温度和中枢神经系统机能状态对缺氧耐受的影响以及对照实验和控制实验条件重要性。方法对小白鼠注射氯丙嗪和放在冰浴的纱布上模拟中枢神经系统功能抑制和体温。在密闭瓶、吸入CO、注射亚硝酸钠来复制不同的缺氧动物模型。结果在氯丙嗪、冰浴对小鼠缺氧耐受性的影响实验中，实验组小鼠（经过注射0.25%氯丙嗪，0.1mL/10g，并放在冰浴纱布上10~15min）的体重为：21.6±0.7g，对照组小鼠（经过0.9%生理盐水，0.1mL/10g，并常温放置10~15min）的体重为21.6±0.7g，两者比较无显著性差异（p>0.05）,所以在实验中可以不考虑小鼠之间的差异；对照组的存活时间T 为14.0±2.7min，对照组的存活时间T为26.7±6.5min，两者比较有显著性差异（p<0.05）;对照组的总耗氧率R为0.07±0.02 %,实验组的总耗氧率R为0.03±0.01 %，两者比较有显著性差异（p<0.05）. 在小鼠乏氧性缺氧模型（密闭瓶中实验），以及在小鼠CO中毒性缺氧模型，后者存活时间明显更短；在亚硝酸盐中毒性小鼠缺氧模型实验中，对照组（先注射亚硝酸盐0.2 m L,后注射生理盐水0.2 m L）存活时间为10.5±5.2 min，实验组（先注射亚硝酸盐0.2 m L，后立即注射美兰0.2 m L）存活时间为21.0±10.4 min，两者比较有显著性差异（p<0.05）。结论中枢神经系统功能抑制和低温可以增加动物的耐受缺氧；氧气缺乏或者血红蛋白性质发生变化都会导致缺氧；美兰可以抑制氧化剂亚硝酸盐的中毒反应。

一、1. 材料和方法

1.1 实验动物: 小鼠(mouse)

1.2 药品和试剂: 0.25%氯丙嗪(chlorpromazine) 、钠石灰（soda Lime）

1.3 器械: 密闭瓶、注射器，测耗氧装置（oxygen consumption gauge）

1.4小鼠捉拿方法右手抓鼠尾 鼠尾略向后拉 左手的拇指和食指抓住小鼠两耳后项背部皮毛 以无名指及小指夹住鼠尾 左手翻转使鼠腹部朝上,头略朝下。

1.5小鼠腹腔注射右手持注射器 45度角刺入腹白线偏左的下腹部，进针3mm左右有落空感时表示已进入腹腔，回抽无肠液、尿液（有空气）即可注射（注意：切误使针头向上注射，以防针头刺伤内脏） 1.6实验动物分组、处理

1.7总耗氧率计算公式：总耗氧率=总耗氧量(mL)÷鼠重(g)÷存活时间(min) 1.8 数据处理数据以 x±s表示，显著性差异采用t检验。

2.观察项目

2.1存活时间记录密闭测耗氧装置开始至小鼠死亡的时间。

2.2 耗氧量量筒中水位下降的量，即为总耗氧量

2.3观察不同类型缺氧在缺氧过程中呼吸、皮肤和粘膜、血液及肝脏色泽的变化。

二、实验结果

1、缺氧动物模型复制及中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响

根据表1，我们可以看到试验组与对照组有显著差异，故而可以初步判定低温以及中枢神经系统功能抑制对缺氧有一定影响。

表1 氯丙嗪、冰浴对小鼠缺氧耐受性的影响

样本

小鼠体重（g）存活时间（min）总耗氧量（mL）总耗氧率（%）对照组实验组对照组实验组对照组实验组对照组实验组

1 21.6 20.8 12.4 21.

2 19.9 14.8 0.07 0.03

2 21.4 21.8 15.1 31.

3 19.0 10.0 0.06 0.01

3 22.2 21.9 7.5 25.5 17.8 16.5 0.11 0.03

4 21.3 21.3 17.0 38.

5 22.2 21.8 0.0

6 0.03

5 20.3 22.3 14.5 32.2 16.7 17.0 0.0

6 0.02

6 22.4 22.6 14.9 28.0 17.2 19.3 0.05 0.03

7 22.3 22.2 13.0 19.5 18.5 12.8 0.06 0.03

8 21.9 20.6 14.6 17.2 16.5 16.6 0.05 0.05

9 21.0 21.8 14.0 29.5 29.0 29.5 0.10 0.05

10 21.1 21.0 17.0 24.4 13.5 17.8 0.04 0.03

x±s 21.6+0

.7

21.6+0.

7

14+2.7

26.7+6

.5

19.0+4

.2

17.6+5

.3

0.07+0.02

0.03+0.0

1

P(t-test

)/ 0.000 / 0.001 表2 亚硝酸盐中毒及美兰的治疗效果

样本亚硝酸盐中毒性缺氧亚硝酸盐中毒性+美兰存活时间（min）存活时间（min）

1.0 10.2 20.4

2.0 18.4 36.8

3.0 5.5 11.0

4.0 8.6 17.2

5.0 10.4 20.8

6.0 8.8 1

7.0

7.0 7.0 14.0

8.0 5.9 11.8

9.0 20.0 40.0

10.0 7.7 40.0 x±s 10.5+5.2 21.0+10.4 P(t-test)/ 0.000

表3 不同原因缺氧小鼠皮肤及肝脏颜色的特征变化

肝血颜色

缺氧类型耳、尾、口唇颜色

乏氧性缺氧青紫色暗红色

樱桃红

CO中毒性缺氧樱桃红

深咖啡色

亚硝酸盐中毒性缺氧青紫色

亚硝酸盐中毒性+美兰青紫色深咖啡色

三、讨论

4.1在中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响实验中，从表1可知，实验组和对照组的存货时间有显著性差异（p<0.05）,实验组和对照组的耗氧率也有显著性差异（p<0.05）。

氯丙嗪为中枢多巴胺受体的阻断剂，具有抗精神病、镇吐、能增强催眠、麻醉、镇静作用、阻断外周α-肾上腺素受体，抑制体温调节中枢，使体温调节失灵，体温可随外环境变化而变化。在试验中我们还要提一个“人工冬眠”概念：用较