生物技术制药实验大纲
生物技术制药教学大纲
第一章绪论(2学时)第一节生物技术概述1 生物技术的概念2 生物技术发展史第二节生物技术制药1 生物技术制药的概念2 生物技术在制药中的应用3 我国生物技术制药现状和发展前景4 医药生物技术发展展望第二章生物药物(10学时)1.生物药物的来源、特性、分类与制备。
(2学时)2.氨基酸类药物:氨基酸类药物研究概况;在医药中的应用;氨基酸生产。
(2学时)3.多肽、蛋白质类药物:多肽、蛋白质类药物的特点、分离纯化方法、工业生产制备过程。
(2学时)4.核酸类药物:概述(分类、应用);生产方法;核酸类药物的制备。
(2学时)5.糖类药物:制备;纯化。
(2学时)第三章基因工程制药(8学时)通过本章学习,了解基因工程药物研制的意义,掌握基因工程药物的研制过程、研制方法。
1概述。
2基因工程药物生产的基本过程。
(2)3目的基因的获得:直接分离法;从基因文库中筛选;逆转录法;人工合成法。
4目的基因与运载体的体外重组:常用载体;目的基因与运载体的体外重组。
5重组分子导入受体细胞;导入方法;影响转化的因素;阳性重组体的筛选。
(2)6基因表达:大肠杆菌中的基因表达;真核基因在原核生物中的表达方式;真核基因在真核生物中的表达;真核基因在动物细胞中的表达。
(2)7基因工程下游技术;下游技术的要求;基因工程菌的稳定性;基因工程菌发酵。
8基因工程药物的分离、纯化:分离纯化的基本过程;分离纯化的技术。
9基因工程药物的质量控制:材料的质量控制;培养过程的质量控制;纯化工艺工程的质量控制。
(2)第四章动物细胞工程制药(8学时)1 概述:2 形态及生理特性。
(2)3 生产用的动物细胞:生产用动物细胞的要求;生产用动物细胞的获取。
4 基因工程细胞的构建和筛选;真核细胞基因表达载体的构建;基因载体的导入和高效表达工程细胞株的筛选。
(2)5 动物细胞的培养条件和培养基6 动物细胞培养的基本方法(2)7 动物细胞大量培养的方法和操作方式8 动物细胞生物反应器及检测控制系统:搅拌式生物反应器;气升式生物反应器;流化床生物反应器。
《生物技术制药》课程实习提纲
单克隆抗体制备技术流程梳理
杂交瘤技术
将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,形成既能 分泌特异性抗体又能无限增殖的杂交瘤细胞 。
抗体筛选与鉴定
通过酶联免疫吸附试验(ELISA)等技术筛选阳性杂 交瘤细胞,进一步鉴定抗体的特异性和亲和力。
抗体生产与纯化
将筛选出的杂交瘤细胞进行大规模培养,收 集上清液或腹水,通过蛋白纯化技术获得高 纯度的单克隆抗体。
下游加工技术简介及产品回收策略
下游加工技术概述
了解细胞破碎、固液分离、萃取、纯化等下游加工技术的基本原 理和应用范围。
产品回收策略
根据目标产物的理化性质和市场需求,选择合适的回收方法和工 艺路线,如结晶、沉淀、膜分离等。
产品质量控制
建立严格的产品质量标准和检测体系,确保回收产品的安全性、 有效性和稳定性。
常见的基因克隆与表达载体
如质粒、噬菌体、病毒载体等,各种载体的特点和使用范围需详细 了解。
细胞培养条件优化方法探讨
细胞培养条件的影响因素
包括温度、湿度、pH值、渗透压、营养成分、生长因子等,这些 因素对细胞生长和产物表达有重要影响。
细胞培养条件的优化方法
通过实验设计,对不同的培养条件进行组合和优化,找到最适合细 胞生长和产物表达的条件。
质量控制的重要性
强调质量控制在生物技术制药过 程中的重要性,确保最终产品的 质量和安全性。
04 发酵工程在生物技术制药 中应用
发酵过程控制关键因素分析
菌种选育与培养基优化
选择高产、稳定、抗逆性强的菌种,并通过培养基成分和条件的优化,提高菌体生长和产 物合成的效率。
发酵条件控制
包括温度、pH、溶氧、搅拌速度等关键参数的控制,以维持菌体生长和代谢所需的最佳 环境。
《生物制药》课程实验大纲
《生物制药》课程实验大纲编号:1300901课程名称:生物技术制药英文名称:Biological Pharmaceutical Technology实验指导书名称:生物制药实验指导书一、学时学分总学时:32 学分:2 实验学时:8二、实验目的本课程实验的目的是使学生掌握生物技术制药中的基因工程制药、抗体制药、细胞工程制药、酶工程制药、微生物工程制药的基本原理、主要方法和技术,从而使学生能够将理性知识与感性认识有机地结合起来,在实验中更深地理解基础理论,提高学生的综合能力与创新意识以及分析问题和解决问题的能力。
同时通过实验,培养学生观察、思考、分析问题和解决问题的能力,实事求是,严肃认真的科学态度,以及勤俭节约、爱护公物的良好作风。
三、实验基本原理纯培养技术、无菌操作技术、分子生物学基本原理及技术、免疫学原理及技术、细胞工程原理及技术、蛋白质工程原理。
四、实验基本要求在实验内容的安排上,注意使学生加深对生物制药工艺基本理论的理解。
实验的难易程度适中,严谨全面。
根据实验指导书完成课内实验任务,客观认真填写实验数据并进行结果分析、每次实验及时上交实验报告。
五、考核与报告实验考核以平时实验预习报告、实验态度、实验操作及实验处理几部分组成,占该门课程成绩30%,实验报告按实验指导书提供的统一格式进行书写。
六、主要仪器设备CO2培养箱、20W紫外灯、红灯、血球记数板、搅拌器、高速冷冻离心机、冷冻干燥箱、真空干燥箱、高压灭菌装置、超净工作台、倒置显微镜、冰箱、液氮罐、精密天平、微量加样器、烤箱、细菌过滤器、10L气升式发酵罐、摇床、显微镜(带油镜)、紫外及可见光分光光度计、电泳仪、pH计等。
七、实验项目与内容提要八、适用专业生物技术九、实验地点生物与食品工程学院实验室实验一甲壳质、壳聚糖的制备【实验目的】了解制备甲壳质、壳聚糖的工艺流程;掌握甲壳质的提取、制备原理及壳聚糖的检测方法。
【实验原理】甲壳质存在于甲壳类动物(如虾、蟹)的外壳,昆虫表皮,软体动物(如贝类、乌贼)的器官、菌类(如菇类、霉菌)的细胞壁。
07生物生物技术制药大纲新
课程名称:生物技术制药(Biochnological Pharmaceutics)本科生物技术专业专业选修课《生物技术制药》教学大纲一、课程说明本课程的教学时间安排是:每周2学时,计划教学周数13周,总课时数26学时。
本课程总学分数:1.5学分。
二、学时分配表教学内容第一章第二章第三章第四章第五章第六章第七章第八章机动绪论生物技术制药和单元操作过程基因工程制药动植物细胞工程制药抗体工程制药酶工程制药疫苗生物技术药物生物药物生产规范及质量控制合计授课学时2 3 5 3 3 3 4 3 0 26实验学时0 0 0 0 0 0 0 0 0 0三、教学目的与要求了解本学科的发展趋势,并能掌握主要的研究方法和相关生物技术。
本课程各章的教学要求和知识考核点如下:第1章绪论基本要求: 1.了解国内外生物技术药物研究开发的现状和发展趋势、本学科的主要研究内容及与其他学科的交叉渗透关系。
2.熟悉DNA重组技术、基因组学、蛋白质组学、生物信息学、生物芯片技术等5个方面生物技术的进展对新药研究和开发的重要促进作用。
第2章生物制药技术与单元操作过程基本要求:1.掌握基因工程原理及操作技术,重点工程菌的构建、分离、目的基因的鉴定及基因工程菌的高密度培养和高表达技术。
2.熟悉微生物、动物、植物细胞的培养所涉及工程放大问题,即从实验室技术到规模制备技术的放大效应及大规模制备过程的优化问题。
难点是:各生物制药技术原理及操作技术。
第3章基因工程药物基本要求:1.了解重组细胞因子与其他重组药物(重组激素类药物、重组溶血栓药物、基因工程血液代用品)。
2.掌握干扰素的研发和制备,以点带面,使学生了解基因工程药物研发及规模制备的关键性技术。
3.了解反义核酸药物和RNAi药物。
难点是:各种基因工程药物的研发及反义核酸药物和RNAi药物第4章动植物细胞细胞工程药物基本要求:1. 掌握重要的天然植物药物活性成份(多糖、皂苷、黄酮、生物碱、萜类物质)和重要的几类天然动物药物(氨基酸类、蛋白质及多肽类、酶及辅酶类、核酸类)的制备技术。
生物技术制药课程教学大纲
十堰职业技术学院生物化工专业生物技术制药课程教学大纲(60-70学时)邓斌编一、课程的任务性质《生物技术制药》是生物化工专业生物制药方向的一门重要的专业课程。
它是将现代生物技术应用于药物的制取,内容包括基因工程制药、抗体工程制药、酶工程制药等。
既阐述了各种制药技术的原理方法和影响因素,又用实例说明了将这些新技术应用于新型药物的生产和开发。
在教学中应以各种技术的原理和方法为基础,以应用为重点,着力培养学生应用主要生物技术进行药物制备的能力。
教学中应注意理论和实践的紧密结合,以提高学生的动手能力和分析解决问题的能力。
二、课程的基本要求1、了解生物技术制药的发展方向。
2、掌握基因技术、酶工程技术在生物技术制药中的应用原理和方法。
3、熟练掌握传统生物制药技术。
三、课程内容1、绪论教学内容:生物技术的发展简史;医药生物技术的新进展;我国的医药生物技术;医药生物技术发展展望。
教学要求:了解医药生物技术的新近展和展望2、生物药物概述教学内容:生物药物的来源、特性、分类与制备;人体来源的药物;动物来源的药物;植物来源的药物;海洋生物药物。
教学要求:掌握生物药物的来源、特性、分类。
3、基因工程制药教学内容:基因工程药物生产的基本过程;目的基因的获得;基因表达;基因工程菌的稳定性;基因工程菌生长代谢的特点;基因工程发酵;基因工程药物的分离纯化;基因工程药物的质量控制;基因工程药物制造实例。
教学要求:掌握基因工教学内容:教学内容:程菌的稳定性和生长代谢特点。
教学重点:基因工程药物的分离纯化。
教学难点:基因工程药物的质量控制。
4、抗体制药教学内容:单克隆抗体;鼠源性单克隆抗体的改造;基因工程抗体和抗体工程;抗体诊断试剂;抗体治疗药物。
教学要求:掌握抗体制药的整个生产过程。
教学重点:单克隆抗体。
教学难点:基因工程抗体和抗体工程。
5、酶工程制药;教学内容:酶工程简介;酶的来源和生产;酶和细胞的固定化;固定化酶和固定化细胞的反应器;酶工程在医药工业中的应用;酶工程研究的进展。
生物制药技术教学大纲
生物制药技术教学大纲一、前言生物制药技术作为一门涉及生物、化学、医学等多个学科知识的综合性专业,对培养学生的实践能力和创新能力具有重要意义。
本教学大纲旨在明确生物制药技术专业的培养目标、教学内容、教学方法及考核方式,以期为学生提供系统全面的学习指导,培养他们成为具备扎实理论基础和实践技能的生物制药技术人才。
二、培养目标本教学大纲的培养目标旨在培养学生具备以下能力和素质:1.掌握生物制药技术的基本原理和核心技术;2.具备较强的实验操作能力和数据分析能力;3.具有良好的团队合作意识和沟通能力;4.具备独立思考和解决问题的能力;5.具有正确的职业道德和社会责任感。
三、教学内容1.生物制药技术概论-生物制药技术的发展历史及现状-生物制药技术的概念和特点-生物制药技术在医药领域中的应用及前景2.生物制药技术的基础知识-细胞生物学基础知识-分子生物学基础知识-基因工程技术及应用3.生物制药工艺学-发酵工艺的基本原理-蛋白质表达与纯化技术-细胞培养技术4.生物制药检测技术-生物制品的质量控制-免疫学检测技术-生物制药产品的稳定性评价5.生物制药技术的伦理和法规-生物制药技术的伦理道德-生物制药技术的法规要求-生物制药技术的风险评估四、教学方法1.理论教学采用讲授、互动讨论、案例分析等教学方法,引导学生深入理解生物制药技术的基本原理和核心技术。
2.实验教学开展生物制药技术相关的实验教学,培养学生的实验操作能力和数据分析能力。
3.课外拓展组织学生参加相关学术交流活动、实习实践等,拓展学生的视野,提高他们的综合素质。
五、考核方式1.平时表现包括课堂表现、作业完成情况等。
2.实验报告对学生的实验操作能力和数据分析能力进行评估。
3.期末考核结合笔试、实践操作等形式,全面考核学生对生物制药技术的掌握程度。
六、总结本教学大纲明确了生物制药技术专业的培养目标、教学内容、教学方法及考核方式,旨在为学生提供系统全面的学习指导,培养他们成为具备扎实理论基础和实践技能的生物制药技术人才。
生物制药学教学大纲
生物制药学教学大纲生物制药学教学大纲生物制药学是一门综合性学科,涉及生物学、化学、医学等多个领域,旨在培养学生掌握基础的生物制药理论和实践技能。
本文将探讨生物制药学教学大纲的设计和重要内容。
一、引言生物制药学是一门新兴的学科,随着生物技术的迅猛发展,对于药物的研发和生产提出了新的要求。
因此,设计一份全面且合理的生物制药学教学大纲至关重要。
二、课程目标生物制药学教学大纲的首要任务是明确课程目标。
通过学习,学生应具备以下能力:1. 理解生物制药学的基本原理和概念;2. 掌握生物制药学的实验技术和操作方法;3. 熟悉药物研发和生产的流程;4. 了解生物制药行业的发展趋势和挑战。
三、课程内容1. 基础知识生物制药学的基础知识包括细胞生物学、分子生物学、生物化学等。
学生需要了解细胞的结构和功能,理解基因的表达与调控,掌握蛋白质的结构和功能等。
2. 药物研发药物研发是生物制药学的核心内容之一。
学生需要学习药物的发现、设计和筛选方法,了解药物代谢和药效学原理。
此外,还需要了解临床试验的过程和安全性评估方法。
3. 生物制药工艺生物制药工艺是将药物从实验室生产扩大到工业生产的过程。
学生需要学习发酵工艺、细胞培养技术、纯化技术等,掌握生物制药的生产流程和操作技巧。
4. 质量控制质量控制是生物制药学的重要环节。
学生需要学习药物的质量标准和检测方法,了解药物的稳定性和纯度要求。
同时,还需要了解质量管理体系和合规要求。
四、教学方法生物制药学教学应注重理论与实践相结合。
除了传授知识,还应鼓励学生进行实验操作、案例分析和小组讨论。
教师可以引入真实的案例和行业经验,培养学生的实际应用能力。
五、教学评价生物制药学教学评价应综合考察学生的理论知识和实践能力。
评价方式可以包括考试、实验报告、小组项目等。
此外,还可以引入行业实习和毕业设计,检验学生的综合素质。
六、教材和参考资料生物制药学教学大纲需要明确推荐的教材和参考资料。
教材应具备权威性和全面性,能够满足学生的学习需求。
生物制药学大实验教学大纲
生物制药学大实验教学大纲课程编号:06003012学时:54学分:3开课对象:生物科学专业本科生课程类别:专业选修课课程英文名称:practice of pharmacology生物制药学大实验主要内容包括药理学基础知识介绍,基本实验操作技术和基本实验方法。
本课程要求学生掌握基本实验操作技术和基本实验方法。
了解获得药理学知识的科学途径,验证药理学的基本概念,培养科学思维的方法,严肃的科学态度,根据客观实际分析和解决问题的能力。
总学时为54。
教材选用付守廷等编《药理学实验》,沈阳药科大学1997年出版。
二、课程内容与要求实验一实验动物捉拿和给药方法[目的] 掌握常用不同实验动物的捉拿和给药方法。
[观察] 实验带教老师正确捉拿动物和给药的方法。
[掌握] 大鼠、小鼠、家兔的正确捉拿方法。
大鼠、小鼠灌胃、肌肉注射、皮下注射、腹腔注射的方法。
家兔灌胃、肌肉注射、皮下注射、腹腔注射、耳缘静脉注射的方法。
[了解] 大鼠、小鼠、家兔各给药途径的常用给药容量。
大鼠、小鼠、家兔与人之间的剂量换算方法。
实验二不同给药途径对药物作用的影响[目的] 观察不同给药途径对硫酸镁作用的影响。
[观察记录] 小鼠腹腔注射硫酸镁的症状。
小鼠灌胃给予硫酸镁的症状。
[掌握] 硫酸镁的作用。
小鼠灌胃、腹腔注射方法。
[了解] 硫酸镁不同给药途径产生不同作用的原因。
实验三药物的基本作用[目的] 了解药物的兴奋作用和抑制作用,局部作用和吸收作用等。
观察硫喷妥钠的抗惊厥作用。
[观察记录] 普鲁卡因局部、全身作用出现的潜伏期及症状(普鲁卡因的中毒反应—惊厥)。
硫喷妥钠的抗惊厥表现。
[掌握] 药物的兴奋、抑制、局部和吸收作用。
普鲁卡因、硫喷妥钠的作用。
兔坐骨神经周围注射的方法。
[了解] 普鲁卡因治疗作用和不良反应。
其他抗惊厥药物。
实验四不同剂量对药物作用的影响[目的] 观察不同剂量戊巴比妥钠对小鼠作用的差异。
[观察记录] 3种不同剂量的戊巴比妥钠对小鼠的作用表现。
《生物技术制药》教学大纲
《生物技术制药》教学大纲一、基本信息课程名称生物技术制药课程编号VET4228英文名称Biotechnology Pharmacy课程类型本专业推荐选修课总学时36理论学时36实验学时实践学时学分2预修课程生物化学、分子生物学、兽医生物技术适用对象动物药学、动物医学专业课程简介生物技术制药是兽医临床应用的一个重要方面,是现代生物技术发展的一门新兴学科。
本学科的特点是不断引进现代生物化学、分子生物学、细胞生物学、微生物学和制剂学及现代基因工程等多学科的先进技术,应用到兽医领域,为动物健康和控制疾病提供有力武器的学科。
主要内容包括现代生物制药技术的基础理论和基本技术,生物药物的特点及分类,生物原料的保存和处理,生物药物的分离、纯化技术的原理及设备,生物药物的鉴定,基因工程制药、抗体制药、酶工程制药、植物细胞制药、动物细胞制药、海洋生物制药以及药物在体内和体外相互作用、药物筛选等。
二、教学目标及任务本课程是应用现在生物技术(基因工程、发酵工程、细胞工程、酶工程等)来研制蛋白质或者核酸类药物。
在国内外兽医生物技术相关研究和应用的发展推动下,本学科在动物疫病的预防和控制方面起着重要作用。
本课程着重讨论生物技术新药设计思路、基因工程等技术研制新药的基本原理和方法,突出生物技术与药物的有机结合,为培养富有创造、创新、创业精神和实践能力的高素质的生物技术复合人才提供重要保障。
三、学时分配教学课时分配章节章节内容讲课实验实践合计第一章绪论22第二章动物生物药物概论44第三章基因工程制药66第四章抗体制药46第五章动物细胞制药46第六章植物细胞制药44第七章发酵工程制药44第八章酶工程制药44第九章现代生物技术在传统制药的应用44第十章第十一章第十二章第十三章合计3636四、教学内容及教学要求第一章绪论2学时医药生物技术的新进展;我国医药生物技术;生物技术制药、生物技术的概念;兽医生物技术的概念。
本章重点:生物技术制药、生物技术的概念;兽医生物技术的概念。
生物技术制药 教学大纲
生物技术制药教学大纲温州医学院生物技术药物教研室二零一二年九月理论课教学大纲《生物技术制药》教学大纲一、课程基本信息课程名称:生物技术制药Biotechnological Pharmaceutics课程号(代码):04000006课程类别:必修学时:32 学分:2.0二、前言生物技术制药课程是建立在微生物学、生物化学、遗传学、分子免疫学、分子生物学、生物技术原理等课程基础上的一门专业应用性课程。
通过本课程的教学,将使学生全面系统掌握生物技术药物制备和生产的一般规律、基本方法、制造工艺及其控制原理,使学生掌握现代生物制药的基本知识、基本理论和基本技能,了解21世纪生物制药工业的发展及药物生物技术的新进展,为学生应用现代生物技术研究新药和从事生物药物的研究开发及生产奠定基础。
三、课程的内容和要求第一章绪论[基本内容]生物技术发展简史,生物技术与医药工业的关系,生物技术药物的分类和特性,生物技术在制药工业中的应用。
[基本要求]掌握生物技术药物的分类和特性,熟悉生物技术的涵义和任务,明确生物技术在医药工业中的地位与重要性。
第二章基因工程制药[基本内容]基因工程技术在药品生产中的应用。
基因工程制药的基本过程。
目的基因获得的方法,基因表达体系,不同表达体系的特点及高效表达的措施。
基因工程菌生长代谢的特点。
基因工程菌的稳定性,不稳定的表现及提高稳定性的方法。
基因工程菌培养培养方式和设备,高密度发酵的影响因素及控制方法。
基因工程药物的分离纯化的基本过程,分离纯化技术。
基因工程药物的质量控制及产品质量分析,产品保存方法。
基因工程药物干扰素、集落刺激因子和白介素-2的生产。
[基本要求]掌握基因工程菌构建的过程,基因工程菌发酵影响因素及控制方法,基因工程药物分离纯化方法和质量分析方法。
熟悉不同表达体系的特点和基因工程菌生长代谢的特点。
了解基因工程制药的基本过程。
第三章动物细胞工程制药[基本内容]动物细胞的形态、细胞的结构和功能、细胞的化学组成和代谢、细胞的分裂和周期生产用动物细胞的要求和获得,常用细胞的特性。
生物技术制药实习提纲
• 1、要求学生注意实习安全,实习期间学生 应服从指导教师、企业管理人员的指挥。
• 2、遵守各单位的规章制度,注意学生形象, 维护学校声誉。
• 3、遵守各实习单位的各项保密规定,不得 做任何有碍单位利益、国家利益的事情。
• 4、尊重工人师傅和工程技术人员,虚心求 教。服从实习单位工作安排,顾全大局。
1、在本次实习中自己是看到了自己的长处还 是发现了自己的不足,以便侧重自己的学 习方向?
2、在本次实习中是否能找到了自己擅长的部 门或机构,明确自己的兴趣所在?
3、自己在本次实习中想对生物技术制药技术 有一个更加深入的了解,想投身于这个行 业,还是想通过本次实习,更加明确自己 的就业方向?
要注意什么?
8、了解原料药和制剂产品贮存中的注意事项。 2、在本次实习中是否能找到了自己擅长的部门或机构,明确自己的兴趣所在? 2、掌握生产车间的生产工艺流程、控制点、主要工序操作和控制方法。 4、尊重工人师傅和工程技术人员,虚心求教。
• 1、掌握该企业现有产品的质量标准、用途、 包装规格等。
• 2、掌握生产车间的生产工艺流程、控制点、 主要工序操作和控制ห้องสมุดไป่ตู้法。
2、遵守各单位的规章制度,注意学生形象,维护学校声誉。
生物技术制药不是一门单一的学科,它结合了微生物、发酵工程、细胞工程、酶工程、基因工程、下游技术等多门学科构成了生物制 药这个系统。
2、遵守各单位的规章制度,注意学生形象,维护学校声誉。 7、熟悉原料、半成品、成品的分析检验。 服从实习单位工作安排,顾全大局。
2、在本次实习中是否能找到了自己擅长的部门或机构,明确自己的兴趣所在? 2、回顾以往学到的相关知识,便于我们更加系统的把理论和实践相结合。 1、要求学生注意实习安全,实习期间学生应服从指导教师、企业管理人员的指挥。 2、回顾以往学到的相关知识,便于我们更加系统的把理论和实践相结合。 6、熟悉各主要设备的结构、尺寸和性能及工作原理。 2、回顾以往学到的相关知识,便于我们更加系统的把理论和实践相结合。 3、遵守各实习单位的各项保密规定,不得做任何有碍单位利益、国家利益的事情。 5、熟悉生产车间的布置、技术安全、防火及卫生描述。 1、掌握该企业现有产品的质量标准、用途、包装规格等。 服从实习单位工作安排,顾全大局。
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《生物技术制药实验》教学大纲
一、前言
生物技术制药课是一门实践性很强的学科,包括基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术以及发酵工程技术等。
通过本实验课程的教学,旨在为学生提供基本的生物技术制药操作实验,同时,注重对反映当前生物技术制药技术发展方向的新技术、新方法的介绍,激发学生的学习热情,使学生全面掌握生物技术制药实验基本原理和技术,为培养基础扎实、适应性强的生物技术制药人才奠定基础。
二、基因工程实验
实验一大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒DNA的转化(4学时)
[基本内容]
培养基的配制,培养大肠杆菌DH5α,CaCl2法制备大肠杆菌DH5α感受态细胞、pUC118等质粒大肠杆菌DH5α感受态细胞,转化子挑选。
[基本要求]
掌握大肠杆菌感受态细胞的制备方法,DNA转化的最基本操作以及提高转化效率的思路。
实验二质粒DNA的提取及其定性定量分析(4学时)
[基本内容]
碱裂解法提取载体质粒pUC118并对其进行定性定量分析
[基本要求]
掌握碱裂解法提取质粒的原理方法和各项基本技术;了解碱裂解法质粒提取过程中各种纯化步骤的设计思想和保证质粒的序列、产率和纯度,去除Dnase、机械、物理、化学因素的影响。
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实验三琼脂糖凝胶电泳检测DNA (4学时)
[基本内容]
配制电泳缓冲液,制备琼脂糖凝胶,点样,电泳。
电泳检测提取得质粒pUC118的纯度和构型,pUC118酶切后DNA分
子量。
[基本要求]
掌握水平式琼脂糖凝胶电泳技术,检测DNA的纯度、DNA的构型、含量以及分子量的大小的方法。
实验四 PCR基因扩增及扩增产物的回收(4学时)
[基本内容]
学习引物的设计;利用PCR技术扩增一已知的基因片段;电泳检测PCR产物;回收扩增的PCR产物。
[基本要求]
掌握PCR基因扩增及扩增产物的回收的基本原理和实验技术方法。
实验五外源基因在大肠杆菌中的诱导表达和检测、蛋白质印迹(4学时)
[基本内容]
外源基因在大肠杆菌中的诱导表达,活性分析检测表达蛋白,SDS-PAGE检测表达蛋白,电转移和印迹分析。
[基本要求]
了解IPTG诱导的外源基因在大肠杆菌中的表达的原理,掌握外源基因在大肠杆菌中的表达及其检测技术,掌握蛋白质印迹分析技术的基本操作过程。
三、酶工程实验
实验六溶菌酶的提取实验(4学时)
[基本内容]
蛋清样品的准备;阳离子交换层析( D152树脂处理,装柱,上柱吸附,洗脱和聚乙二醇浓缩);硫酸铵沉淀。
[基本要求]
了解酶的基本提取过程,掌握溶菌酶提取和性质测定中的实验方法,熟悉有关生化技术的基本原理和基本操作.
实验七溶菌酶活力、蛋白浓度测定(4学时)
[基本内容]
试剂配置,蛋白浓度的测定,酶活力的测定
[基本要求]
掌握溶菌酶活力、蛋白浓度测定方法。
四、发酵工程实验
实验八基因工程菌发酵及其蛋白药物的表达检测(4学时)
[基本内容]
发酵过程参数变化的检测,发酵过程中质粒稳定性变化的监测,检测诱导前后蛋白药物表达量的变化及其存在形式。
[基本要求]
了解搅拌发酵罐的结构与工作原理,熟悉发酵培养过程。
掌握发酵过程的实验方法。
五、细胞工程实验
实验九动物细胞的原代培养(4学时)
[基本内容]
从健康动物体内无菌条件下取出适量组织,用胰蛋白酶进行消化使细胞分散。
洗涤纯化后进行原代培养。
[基本要求]
学习掌握哺乳动物细胞的原代培养方法,同时进一步练习细胞培养过程中的操作技术。