金银花中绿原酸的提取及检测_乌兰.
金银花中绿原酸类物质的提取、抗氧化及抑菌特性研究的开题报告
金银花中绿原酸类物质的提取、抗氧化及抑菌特性
研究的开题报告
一、课题背景
金银花是一种常见的中药材，被广泛应用于中医临床，具有清热解毒、解表散风、祛湿、止痛等功效。
研究表明，金银花中含有多种活性
成分，其中绿原酸类物质是一种重要的成分。
绿原酸具有抗氧化、抗菌、抗病毒、降血压、降血糖等多种生物活性，因此具有广泛的应用价值。
本课题旨在探究金银花中绿原酸的提取方法、抗氧化及抑菌特性的研究，为金银花的深入开发利用提供理论依据和实验数据。
二、研究内容
1. 绿原酸的提取方法
金银花中绿原酸的提取方法有多种，常用的方法有超声波法、微波
辅助提取法、超临界流体提取法等。
本课题将比较不同提取方法的优缺点，选择最优提取方法进行提取。
2. 绿原酸的抗氧化特性
绿原酸具有较强的抗氧化能力，可以清除自由基，保护细胞免受氧
化损伤。
本课题将通过不同实验方法，如DPPH自由基清除能力、铁还原能力等，研究绿原酸的抗氧化特性。
3. 绿原酸的抑菌特性
绿原酸具有一定的抗菌能力，可以抑制多种细菌的生长繁殖。
本课
题将通过不同实验方法，如纸片扩散法、微量育菌法等，研究绿原酸的
抑菌特性。
三、研究意义
本课题的研究结果将有助于深入了解金银花中绿原酸的提取、抗氧化及抑菌特性，为该中药材的进一步研究开发提供理论和实验基础。
同时，本课题的研究结果也能够为相关领域的研究提供参考和支持，有助于推动中药材在现代医药领域的应用。
金银花中绿原酸成份的提取方法分析研究
金银花中绿原酸成份的提取方法分析研究陈茜【摘要】目的对金银花中绿原酸的提取方法进行分析研究.方法针对绿原酸的性质,设计了纯乙醇提取、50％乙醇提取、水提取与超声波提取方法对比实验、醇提法与超声波提取方法对比实验,并对每种提取方法的优缺点进行了分析.结果50％的乙醇水溶液比纯乙醇提取效果好.与传统的醇提取法相比较,超声波法提取绿原酸的提取效果更好.研究亦表明,增加乙醇的浓度,提取绿原酸的浓度会增加,但是当绿原酸浓度到达最高峰后,随着乙醇浓度的增加,绿原酸的含量却呈降低趋势.传统醇提法乙醇的最佳浓度是70％,超声波醇提法乙醇的最佳浓度是60％.结论与水提法相比较,醇提法提取效果较好,绿原酸的提取效率也较高,加入超声波后提取效率变得更高,提取物绿原酸的含量也会增加.【期刊名称】《中国中医药现代远程教育》【年(卷),期】2018(016)005【总页数】3页(P88-90)【关键词】金银花;绿原酸;超声波;乙醇提取;中药化学【作者】陈茜【作者单位】锦州市妇婴医院中药局,辽宁锦州121000【正文语种】中文金银花为常用中药，具有清热解毒，保肝利胆、凉风散热，抗病毒等功能[1]。
近年来研究表明，金银花还具有抗人类免疫缺陷病毒、抗肿瘤的功效，具有广阔的临床应用前景。
金银花的主要成分包括绿原酸、肌醇、木犀草素、异绿原酸以及三萜皂苷等，其中，绿原酸是金银花的抗菌有效成分，一般常用绿原酸的含量高低来评价金银花质量的好坏[2]。
绿原酸是一种有机酸，同时含有羧基和邻二酚羟基，易溶于醇溶液、丙酮和水等溶剂。
当前，从金银花当中提取出绿原酸的常用提取方法包括传统的水提法、乙醇提取法、酶提取法等。
本文将对绿原酸的常用提取方法进行实验和分析总结，并根据绿原酸的性质，设计出了水提取、纯乙醇提取、50%乙醇提取、超声波提取方法与醇提法对比实验、水提法与超声波提取方法对比实验，对每种提取方法的优缺点进行了分析。
1 材料与方法1.1 仪器和试药电子天平、烧杯若干、量筒、锥形瓶、漏斗、超声波发生器（郑州予华仪器制造有限公司）、离心机（江苏天瑞仪器股份有限公司）、高效液相色谱仪（上海仪电分析仪器有限公司）。
高效液相色谱法测定金银花提取物中绿原酸的含量
高效液相色谱法测定金银花提取物中绿原酸的含量【摘要】目的建立金银花提取物中绿原酸含量的HPLC测定方法。
方法国产C18柱（4.6 mm×250 mm，7 μm）;流动相为乙腈：0.4%磷酸（12∶88）；检测波长为327 nm；流速1 ml・min-1；进样量10 μl；柱温25℃。
结果绿原酸在0.071 6～0.644 4 μg范围内线性关系良好，r=0.999 6；平均回收率99.99%，RSD=1.61%（n=6）。
结论该方法简便、快速、准确，可用于金银花提取物的含量测定及质量控制。
【关键词】金银花提取物；绿原酸；高效液相色谱法AbstractObjectiveTo establish a method for the determination of Chlorogenic acid in the extract of Flos Lonicerae.MethodsThe chromatographic conditions were as follows: C18 chromatographic column (4.6 mm×250 mm，7 μm)，a mobile phase of acetonitrile and 0.4%H3PO4(12:88)，the detection wavelength at 327 nm and the flow rate being 1 ml・min-1. ResultsA linearity of Chlorogenic acid in the extract was obtained in the range of 0.071 6～0.644 4 μg r=0.999 6(n=6).The average recovery was 99.99% and RSD=1.61%(n=6). ConclusionThis method is easy，sensitive and accurate for the determination of Chlorogenic acid in the extract of Flos Lonicerae.Key wordsChlorogenic acid; HPLC; Determination金银花Flos Lonicerae又名忍冬、双花，为临床常用中药，具有清热解毒、凉散风热之功效，主治痈肿疔疮、喉痹、丹毒、热毒血痢、风热感冒、温病发热等［1］。
金银花绿原酸提取物的抑菌作用研究
金银花绿原酸提取物的抑菌作用研究
金银花（Lonicera japonica）是一种常见的传统中药材，具有广泛的药用价值。
金银花中的绿原酸是一种有效的抗氧化物质，具有抑菌作用。
本文通过研究金银花绿原酸提取物的抑菌作用，探讨其在临床应用中的潜在价值。
实验方法：
1. 实验材料准备：收集新鲜金银花植物，剪取其茎叶，进行干燥和研磨，制备成粉末状；购买绿原酸提取物。
2. 抗菌试验：采用平板扩散法，将不同浓度的金银花绿原酸提取物（0.1 g/mL，0.2 g/mL，0.3 g/mL，0.4 g/mL，0.5 g/mL）分别涂布在含有不同菌株（大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌）的琼脂平板上。
培养24小时后，观察并计算菌落数目。
3. 实验控制：设立阳性对照组和阴性对照组，以及仅含金银花绿原酸的组别，以评估提取物的抑菌作用。
结果和讨论：
1. 抑菌圈直径对比分析：根据实验结果观察到，随着金银花绿原酸提取物浓度的增加，抑菌圈直径呈现出增大的趋势，说明绿原酸有较强的抑菌活性。
2. 菌落数目计数对比分析：实验结果表明，金银花绿原酸提取物可以显著抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的生长，且随着提取物浓度的增加，菌落数目减少的程度逐渐增加。
结论：
金银花绿原酸提取物具有明显的抑菌作用，可以抑制多种细菌的生长。
这一研究结果表明，金银花绿原酸提取物具有潜在的临床应用价值，可作为抗菌药物的候选物质。
未来的研究可以进一步探索金银花绿原酸的抗菌机制，并评估其在临床治疗中的应用前景。
超声回流法提取金银花中绿原酸最佳工艺条件探究
超声回流法提取金银花中绿原酸最佳工艺条件探究【摘要】金银花中的绿原酸是一种具有多种药理活性的重要成分，其提取工艺条件的优化对于提高金银花的药用价值具有重要意义。
本研究使用超声回流法提取金银花中的绿原酸，并探究了影响提取效果的因素。
通过实验设计和方法的优化，得到了一组较为理想的实验结果，对实验结果进行了深入分析和讨论。
确定了绿原酸提取的最佳工艺条件，为金银花的高效提取提供了参考。
本研究的结果具有一定的实用价值和研究意义，也为进一步的研究提供了展望。
通过本次研究，有望提高金银花中绿原酸的提取效率，为金银花的开发利用提供科学依据。
【关键词】关键词：超声回流法、金银花、绿原酸、提取、最佳工艺条件、实验设计、实验结果、影响因素、研究意义、展望。
1. 引言1.1 背景介绍金银花，又名金银花、忍冬藤等，是一种具有较高药用价值的中草药材。
金银花含有丰富的生物活性成分，其中绿原酸是一种具有明显药理作用的化合物。
绿原酸具有抗氧化、抗炎、抗菌等多种生物活性，对人体健康具有重要作用。
本研究旨在探究超声回流法提取金银花中绿原酸的最佳工艺条件，以提高提取效率，降低成本，为金银花的深加工和利用提供科学依据。
通过实验设计和结果分析，探讨影响绿原酸提取效果的因素，并最终确定最佳工艺条件，为金银花的开发利用提供技术支撑。
1.2 研究意义目前，传统的金银花提取绿原酸的方法主要是采用水提取、乙醇提取等传统工艺，但存在提取效率低、设备复杂、耗时耗能等问题。
采用超声回流法进行绿原酸的提取，不仅可以减少提取时间，提高提取效率，还能保持绿原酸活性，提高产品质量。
本研究旨在探究超声回流法提取金银花中绿原酸的最佳工艺条件，为金银花的深加工利用提供科学依据，实现对金银花资源的充分利用和价值挖掘。
通过本研究的开展，有望为金银花的进一步开发和推广提供技术支持，促进金银花产业的健康发展。
1.3 研究目的研究目的是对超声回流法提取金银花中绿原酸的最佳工艺条件进行探究，以优化绿原酸的提取效果。
金银花提取物中绿原酸含量测定方法(H)
编号:FZD0166 金银花提取物中绿原酸（Chlorogenic acid）含量测定方法
一、色谱条件
色谱柱：Inertsil ODS-3 150mm×4.6mm 5μm
流动相：乙腈：水：0.4%磷酸水溶液（13：87，V/V）
流速：1mL/min
检测波长：327nm
柱温：25℃
进样量：10μL
二、溶液制备
1. 对照品溶液制备精密称取绿原酸对照品约5mg于50mL容量瓶中，加入50%甲醇溶解定容。
2. 样品溶液制备精密称取金银花提取物样品适量，于50mL容量瓶中，加入50%甲醇超声振荡20min后，冷却至室温定容，用0.45μm微孔滤膜过滤即得。
三、样品测定
在上述色谱条件下，待仪器稳定基线平稳后进样测定，绿原酸保留时间约为12min，用外标法计算含量。
金银花中绿原酸的提取与分离
现代分离技术实验安排一、实验说明1、本课程实验为一次性综合大实验，采取分班进行，每班实验必须在连续两天内完成，各组的实验安排均为周六和周日的上午8点到晚上的8点。
每次实验1个班，每个实验由两个人共同完成，即两人一组，每组一套实验仪器和一张实验台。
每班的班长负责实验室的卫生和安全。
2、课程考核方法采用实验考察形式进行，每人只安排一次实验机会，过期不补，希望各位同学能够按时参加。
若有冲突，学生之间可相互对调。
3、进入实验室后，各组同学首先按照仪器清单检查仪器的数量和完好情况。
若有仪器短缺或破损等问题，请在上课后20分钟内与实验室工作人员及时联系，并要求实验人员进行补充或更换。
4、实验结束后，各组同学应对照仪器清单检查，分别洗净后交实验人员验收。
如有损坏或缺少，应按规定缴纳赔偿金。
因此，希望同学们爱惜仪器，认真操作。
实验期间，应注意保持实验室台面、地面和水槽的卫生，尤其是自己的工作区域。
同时应注意实验室的财产安全和自身安全，不可在实验室喧哗吵闹。
二、实验内容题目：金银花中绿原酸的提取与分离学习内容：固体中有效成分的提取（索氏法）技术；减压浓缩（旋转蒸发）技术；硅胶吸附柱层析；硅胶吸附TLC技术；薄层色谱对产品纯度检测金银花为忍冬科忍冬属植物忍冬及同属多种植物的干燥花蕾，它是一种“药食同源”的绿色植物，是临床常用的中药之一。
具有清热解毒、凉风散热、抗病毒、保肝利胆的功能，主治痈肿疗疮、喉痹、丹毒、热血毒痢、风热感冒、瘟病发热、急性支气管炎、肺炎、腮腺炎、胆道感染、关节炎等，能改善放、化疗所致的白细胞降低，有“中药中的青霉素”的美誉。
另外，金银花还被广泛地应用于保健品、化妆品、卷烟、食品等行业。
近代研究一般认为金银花的主要生物活性有效成分为绿原酸类化合物，并且常以绿原酸含量的高低来评价金银花质量的优劣。
绿原酸结构式HO HOOO2'3'4'5'6'8'9'OHHO OH OHO 1234567'1'三、实验方案 四、方法1、TLC 板的制备与活化在干净的研钵内加入约6g 硅胶GF254，在轻轻研磨的同时缓慢加入15ml 0.5%羧甲基纤维素钠水溶液。
金银花中绿原酸的分离与测定新方法
金银花中绿原酸的分离与测定新方法蔡霄英刘永乐（长沙电力学院食品生物工程系长沙〃410015）摘要：对湖南益阳县黄蜂山所采金银花进行了提取、分离及组分鉴定，解决了绿原酸易分解的问题，得到纯度较高的绿原酸。
关键词：金银花；绿原酸；分解中图分类号：TS201.4 文献标识码：A 文章编号：1005-9989（2003）05-0104-03Separation and identify of the chlorogenicacid in Lonicera japonica thunbCAI Xiao-ying LIU Yong-le(Changsha University of Electric Power,Changsha,410015)Abstract: Carry thr ough separ ation, pur ification and identify. Chlorogenic acid w as isolated from lonicer a japonica thunb. It is collected from vespidhill in yiyang country, hunan prov ince.The problems of oxygenation and disassembly of chlorogenic acid is solved.Key words: lonicera japonica thunb; chlorogenic acid; disassembly0 前言金银花又名忍冬花、银花、双花、茶叶花等，为忍冬科植物忍冬(lonicera japonica tumb) 的花蕾。
金银花中含有绿原酸、异绿原酸、肌醇、黄酮、皂素及多酚类物质等，具有抗菌、抗病毒、消除体内有毒物质、降血压、改善机体免疫功能等多种保健作用。
我国对金银花这一清热解毒中药的研究处于世界领先地位。
我国作为金银花产地，从原料着手，在金银花炮制、有效成分分析、含量测定等方面都有了一定研究。
金银花中绿原酸提取法
金银花中绿原酸提取法(索氏提取法为最佳提取方法)1 . 1 主要材料与仪器金银花( 购自药房) , 无水乙醇( AR ), 甲醇( A R 厂) , 乙酸乙酯( AR )。
索氏提取器(上海洪纪仪器设备有限公司),ESJ2 05 4型电子天平( 沈阳龙腾电子有限公司),UV 22 50 型紫外分光度计( 日本岛津) , 水式真空泵(巩义市英峪予华仪器厂) , KD M 型可调控温度电热套(山东鄄城华鲁电热仪器有限公司), 800 1 离心机(江苏金坛市荣华仪器制造有限公司), K Q 50 B型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司) 。
1 .2 标准曲线的绘制准确称取绿原酸对照品1 0 m g , 用60 %乙醇溶解并定容至50 m L ,备用.然后分别取0 . 0 、0 . 5 、1 . 0 、2 . 0 、3 . 0 、4 . 0 、5 . 0 mL , 再用60 %乙醇定容至50 mL以4号标准样在200 ~ 600 n m 波长范围内进行波长扫描, 测出绿原酸的最大吸收波长为326 n m。
然后以60 % 乙醇作空白对照,测定每个标准样的吸光度( A ) 值。
再以吸光度( A )值为纵坐标, 以标准样品质量浓度为横坐标绘制标准曲线。
得到回归方程y = 9 . 8019 x+ 0 . 0186R2= 0 . 999 3 。
1 ) 索氏提取法干燥的金银花用研钵研碎, 称取10 g , 用滤纸包好, 置于索氏提取器中, 取有机溶剂80 mL , 先往索氏提取器中加70 % 的甲醇至与虹吸管相平, 剩余液体加入圆底烧瓶中, 对样品浸泡2 h , 然后在水浴锅上加热回流, 控制温度在70 左右, 虹吸5 次。
把回流液倒于蒸馏瓶中进行减压蒸馏至30 mL , 超声溶解, 用0 . 25 u m 滤膜过滤, 测定其吸光度。
2 ) 超声波法干燥的金银花用研钵研碎, 称取6 g , 置于锥形瓶中, 加入准确量取的100 mL 蒸馏水, 超声溶解,一段时间后过滤, 向滤渣中再加100 mL 蒸馏水,重复上述步骤, 把所得的滤液在离心机以3 000 r /m i n离心10 m i n .在把溶液进行减压蒸馏至30 mL ,得待测液, 测定其吸光度。
金银花中绿原酸的提取及检测_乌兰.
下,随着球磨时间的增加,其剪切应力显著下降。
用幂方程τ=k γm (其中k 为稠度系数;m 为流动特征指数对曲线进行拟合,结果如表2所示。
由拟合结果可知,在不同温度下,相关系数R 2在0.9850~0.9993之间,这说明方程与曲线有较好的相关性。
同一样品的稠度系数k 随着温度的升高而减小,说明温度升高可以减小体系的稠度,增强淀粉糊的流动性。
在同一温度下随着球磨时间的增加,稠度系数k 显著下降,流动指数m 则是呈现增加的趋势,说明球磨后的绿豆淀粉更趋近于牛顿流体。
3结论上述实验结果表明,机械球磨方法可以有效地将绿豆淀粉非晶化,球磨一定时间后淀粉颗粒的偏光十字消失,X -射线衍射曲线的尖峰衍射特征逐渐减弱,绿豆淀粉颗粒的结晶结构受到严重破坏。
球磨处理后绿豆淀粉糊的流变特性在不同浓度和温度下发生了变化,绿豆淀粉糊随着球磨时间的延长稠度系数k 不断减小,而流动特征指数m 则不断增大,说明球磨处理后绿豆淀粉糊趋向于牛顿流体的特征。
参考文献:[1]Shinji Tamaki,Makoto Hismatsu,Katsunori Teranishi,et al.Structural change of maize starch granules by ball-mill treatment[J].S tarch,1998, 50(8:342-348.[2]Shinji Tamaki,Makoto Hisamatsu,Katsunori Teranishi,et al. Structural change of potato starch granules by ball-mill treatment[J].S tarch,1997,49(11:431-438.[3]胡飞,陈玲,李琳.马铃薯淀粉颗粒在微细化过程中结晶结构的变化[J].精细化工,2002,19(2:114-117.[4]Sherman P.Food texture and rheology[M].New York:Aca-demic Press,1979.[5]Prentice J H.Measurements in the rheology of foodstuffs [M].London:Elsevier Applied Science Publishers,1984.[6]胡飞,李平凡,陈玲.微细化马铃薯淀粉流变性质的研究[J].粮食与饲料工业,2002,(7:41-43.[7]二国二郎.淀粉科学手册[M].王微青,等,译.北京:轻工业出版社, 1990.31-43,163-167.[8]Mohd Nurul I Muhd,Azemi B M N,Manan D M A.Rheo-logical b ehaviour o f s ago(Metroxylon s agu s tarch p aste[J].Food Chemistry,1999,64:501-505.收稿日期:2004-07-14*通讯作者基金项目:天津市教委科研项目(20039902作者简介:乌兰(1976-,女,硕士研究生,研究方向为食品科学、天然产物开发。
从金银花中提出绿原酸
从金银花中提取绿原酸的前处理及提取过程中的“三废”问题制药工程专业2011年10月目录一.金银花简介 (1)二.绿原酸的理化性质 (2)三.金银花中提取绿原酸的前处理 (2)四.绿原酸提取工艺 (2)（一）绿原酸的水浸出方法 (2)（二）浸出液的减压浓缩 (3)（三）调PH离心分离水不溶物 (3)（四）以异戊醇萃取 (3)（五）绿原酸的精制 (4)五.废水来源总结 (4)六.废水的处理 (4)（一）分析 (4)（二）酸水的处理方法 (4)七.废固成分分析及处理方法 (5)八.废气来源及处理 (6)（一）废气来源 (6)（二）废气处理方法 (6)九.锅炉废气治理工程工艺流程图 (6)一、金银花简介金银花为忍冬科忍冬属半常绿缠绕藤本植物，是临床常用的中药材之一。
绿原酸是其中主要有效成分，具有显著的清热解毒、抗菌消炎作用，同时还具有增香和护色功能，可用于食品和果品的保鲜防腐。
另外绿原酸还是一种新型高效的酚型天然抗氧化剂，在某些食品中可取代目前常用的人工合成抗氧化剂，为其在食品及其它领域的应用开辟了广阔前景。
盛产期的金银花金银花的干花丝二、绿原酸的理化性质绿原酸半水合物为白色或微黄色针状结晶，在110℃时变为无水物，与稀盐酸共热产生咖啡酸，熔点208℃，比旋光度[α]D=35 2°(C=28)。
绿原酸在25℃时水中溶解度约为4%，易溶于乙醇、丙酮、甲醇等极性溶剂，微溶于乙酸乙酯，难溶于三氯甲烷、乙醚、苯等亲脂性有机溶剂。
绿原酸是由咖啡酸与奎尼酸形成的酯，其分子结构中有酯键、不饱和双键及多元酚三个不稳定部分。
在从植物提取过程中，往往通过水解和分子内酯基迁移而发生异构化。
由于绿原酸的特殊结构，决定了其可以利用乙醇、丙酮、甲醇等极性溶剂从植物中提取出来，但是由于绿原酸本身的不稳定性，提取时不能高温、强光及长时间加热。
绿原酸的供试液放置于棕色瓶、冰箱（2℃）保存时最为稳定。
三、金银花中提取绿原酸的前处理金银花→清洗(废水来源1)→风干→干金银花→ 研成粗粉四、绿原酸提取工艺（一）绿原酸的水浸出方法取风干的金银花粉碎成粗粉。
金银花绿原酸的提取与检测实验报告
金银花绿原酸的提取与检测实验报告传统的金银花中有效成分绿原酸的提取工艺大多采用水提取或有机溶剂提取,这些工艺存在提取能耗大、效率低、杂质多、收率少,资源不能得到充分利用等问题。
绿原酸为热敏性物质,温度过高,会造成绿原酸的分解，这就要求提取温度不能过高。
超声波提取作为一种新型的提取技术,在天然产物提取方面得到广泛的应用,具有被提取活性物质不被破坏,提取时间短、提取效率高等优点,特别适合于热敏性物质的提取;微波提取技术具有短时、快速等特性,从而在活性物质成分的萃取中可有效地保护功能成分和风味物质,并能保护有效物质的充分溶出,微波萃取应用于金银花中绿原酸的提取具有选择性高、重现性好、省时节物、节能环保、萃取效率高、被提取成分的生物活性和化学结构不会被破坏等众多优点,近年来,超声波萃取、微波提取技术在工业上提取金银花中绿原酸的应用越来越普遍。
金银花中绿原酸的提取工艺研究
金银花中绿原酸的提取工艺研究摘要：近年来，社会发展迅速，各行各业的发展也有了提高。
研究了金银花中绿原酸的提取工艺，利用乙醇溶液为提取剂，以不同的提取方式提取金银花中的绿原酸，研究不同因素对金银花中绿原酸提取率的影响。
结果显示，两种提取方式中的回流法提取效果较好。
回流法的最佳提取条件：乙醇体积分数55%，料液比（g∶mL）1∶40，时间60min，温度60℃，绿原酸得率11.0%；超声法的最佳提取条件：乙醇体积分数55%，料液比（g∶mL）1∶40、时间120min、温度60℃，绿原酸得率为6.23%关键词：金银花；绿原酸；提取工艺研究引言金银花为忍冬科植物忍冬（ＬｏｎｉｃｅｒａｊａｐｏｎｉｃａＴｈｕｎｂ．）干燥的花蕾或者初开的花。
研究表明，金银花含有挥发油、有机酸、黄酮类、三萜皂苷和微量元素等成分，具有广谱抗菌、抗炎及解热作用。
作为有机酸主要成分的绿原酸，具有抗菌、抗病毒、保肝利胆、抗肿瘤、降血压及兴奋中枢神经系统等多种药理作用，因此绿原酸常被作为金银花质量控制的指标之一。
从金银花中提取绿原酸常用回流提取法、超声波提取法、微波提取法、酶解醇提法等，其中超声提取法提取时间短、提取效率高，但是应用超声提取结合ＨＰＬＣ对金银花中绿原酸含量测定的研究较少，并且研究不够全面。
作者拟在考察影响绿原酸提取率单因素实验的基础上，采用正交设计进一步优化提取工艺，为金银花的综合利用提供依据。
1材料与方法1.1材料与试剂金银花药材，购于黑龙江省药材公司；绿原酸标准品（≥98%），购于上海阿拉丁生化科技股份有限公司；乙腈（色谱纯99.9%），购于美国Tedia公司；无水乙醇（分析纯）、甲醇（色谱纯），购于赛默飞世尔科技（中国）有限公司。
1.2仪器LC-10AT高效液相色谱仪（岛津，日本）；C18色谱柱（岛津，LC-C18150×4.6mm）；HWS24电热恒温水浴锅（上海一恒科学仪器有限公司）。
1.3方法1.3.1金银花提取液的制备称取0.500g金银花粉末于圆底烧瓶中，加入一定体积分数的乙醇溶液（按照乙醇与水的体积比配制），80℃回流2h，过滤并转移至离心管中，4000r/min离心15min，收集上清液，用乙醇定容至50mL容量瓶；再取4mL，定容至10mL容量瓶，取适量溶液超声、脱气、过膜后，用高效液相色谱测其浓度。
金银花中绿原酸的提取及含量测定
经验交流96 2015年19期金银花中绿原酸的提取及含量测定陆美斐1张立康21.浙江大学医学院附属儿童医院，浙江杭州 3100032.温州医科大学第一临床医学院，浙江温州 325035摘要：目的：提取纯化金银花中的绿原酸，并进行含量测定。
方法：采用大孔吸附树脂，对金银花提取物中的绿原酸进行分离纯化，采用高效液相色谱法对金银花中绿原酸进行含量测定。
结果金银花中绿原酸的平均含量为4.31 %，纯化物中绿原酸的平均含量达16.26 %，绿原酸在0.56～2.32 μg/mL范围内线性关系良好，平均回收率为99.8 %。
结论：运用大孔树脂分离纯化绿原酸，简单易行；采用高效液相色谱法对金银花中绿原酸进行含量测定方法精确，重复性好。
关键词：金银花；绿原酸；提取；含量测定中图分类号：R284 文献标识码：A 文章编号：1671-5837（2015）19-0096-01金银花是临床应用十分广泛的一种中药材，其具有凉散风热、清热解毒之功效，也是民间的常用药物。
金银花的主要药物成分包括黄酮化合物、双花醇、异绿原酸、绿原酸、芳樟醇等，其在病毒感染、细菌感染、肿瘤疾病方面，均具有较高的药用价值，同时也对生殖系统、血液系统、消化系统疾病具有一定的疗效。
金银花含有的绿原酸在纯度、含量方面均较高，绿原酸也是衡量金银花质量高低的一个重要标准。
绿原酸具有广泛的用途，不仅作医用，还用作食品保鲜剂，以及化妆品的抗衰老剂。
因此，从植物中提取分离绿原酸具有重要的意义。
本文采用大孔吸附树脂，对金银花提取物中的绿原酸进行分离纯化，采用高效液相色谱法对金银花中绿原酸进行含量测定。
1 仪器与方法1.1 仪器与试药德国Heidolph LABOROTA4000型旋转蒸发仪，德国Heidolph RH-KT/C型磁力搅拌器，HITACHI L-2130型高效液相色谱仪，Kromasil C18色谱柱，Diamonsil ODS-C18，LD4-2型低速离心机；干燥金银花（购于本市药房），绿原酸对照品（中国药品生物制品检定所），D001大孔树脂（上海树脂厂），乙腈为色谱纯，甲醇、乙酸、盐酸、乙醇均为国产分析纯；水为双蒸水。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
下,随着球磨时间的增加,其剪切应力显著下降。
用幂方程τ=k γm (其中k 为稠度系数;m 为流动特征指数对曲线进行拟合,结果如表2所示。
由拟合结果可知,在不同温度下,相关系数R 2在0.9850~0.9993之间,这说明方程与曲线有较好的相关性。
同一样品的稠度系数k 随着温度的升高而减小,说明温度升高可以减小体系的稠度,增强淀粉糊的流动性。
在同一温度下随着球磨时间的增加,稠度系数k 显著下降,流动指数m 则是呈现增加的趋势,说明球磨后的绿豆淀粉更趋近于牛顿流体。
3结论上述实验结果表明,机械球磨方法可以有效地将绿豆淀粉非晶化,球磨一定时间后淀粉颗粒的偏光十字消失,X -射线衍射曲线的尖峰衍射特征逐渐减弱,绿豆淀粉颗粒的结晶结构受到严重破坏。
球磨处理后绿豆淀粉糊的流变特性在不同浓度和温度下发生了变化,绿豆淀粉糊随着球磨时间的延长稠度系数k 不断减小,而流动特征指数m 则不断增大,说明球磨处理后绿豆淀粉糊趋向于牛顿流体的特征。
参考文献:[1]Shinji Tamaki,Makoto Hismatsu,Katsunori Teranishi,et al.Structural change of maize starch granules by ball-mill treatment[J].S tarch,1998, 50(8:342-348.[2]Shinji Tamaki,Makoto Hisamatsu,Katsunori Teranishi,et al. Structural change of potato starch granules by ball-mill treatment[J].S tarch,1997,49(11:431-438.[3]胡飞,陈玲,李琳.马铃薯淀粉颗粒在微细化过程中结晶结构的变化[J].精细化工,2002,19(2:114-117.[4]Sherman P.Food texture and rheology[M].New York:Aca-demic Press,1979.[5]Prentice J H.Measurements in the rheology of foodstuffs [M].London:Elsevier Applied Science Publishers,1984.[6]胡飞,李平凡,陈玲.微细化马铃薯淀粉流变性质的研究[J].粮食与饲料工业,2002,(7:41-43.[7]二国二郎.淀粉科学手册[M].王微青,等,译.北京:轻工业出版社, 1990.31-43,163-167.[8]Mohd Nurul I Muhd,Azemi B M N,Manan D M A.Rheo-logical b ehaviour o f s ago(Metroxylon s agu s tarch p aste[J].Food Chemistry,1999,64:501-505.收稿日期:2004-07-14*通讯作者基金项目:天津市教委科研项目(20039902作者简介:乌兰(1976-,女,硕士研究生,研究方向为食品科学、天然产物开发。
金银花中绿原酸的提取及检测乌兰,张泽生*(天津科技大学食品工程与生物技术学院,天津300222摘要:采用多种方法分别从金银花中提取绿原酸,用紫外光谱法和高效液相色谱法对其进行定性定量分析。
同时用金银花乙醇提取物对大肠杆菌进行抗菌试验。
绿原酸提取试验结果表明:用70%乙醇热回流提取是金银花中绿原酸提取的最佳方法,获得绿原酸的提取率高于其他方法,提取终产物与标准品的最高吸收峰均在324nm 处,终产物中绿原酸的含量为43.35%。
抗菌试验结果表明:金银花提取物具有较强的抑菌活性。
关键词:金银花;绿原酸;提取;检测;抗菌活性Extraction and Examination of Chlorogenic Acid from Flos LoniceraeWU Lan,ZHANG Ze-sheng*(Food Engineering and Biology Technology,Tianjin University of Science and Technology,Tianjin300222,ChinaAbstract:Optimization of the extracting method of chlorogenic acid from Flos Lonicerae was studied by several differentmethods.Two different ways of Ultraviolet(UV and Visible Spectrophotometr and High Performance Liquid Chromatography (HPLC have been carried out for the quantitative and qualitative determination of chlorogenic acid in Flos Lonicerae.Inhibition test against pathogenic bacteria has been done with Flos Lonicerae ethanol and chlorogenic acid.The results of chlorogenic acid extraction showed that chlorogenic acid tiptop absorb-apex was324nm,with ethanol of70%concentration extraction was remarkably superior to other methods.The content of chlorogenic acid with70%ethanol extraction was43.35%,so the ethanol with70%concentration extraction was the optimum condition. The antibacterial action of chlorogenic acidin vitro o n E scherichia Coliand extracted with70%ethanol from Flos Lonicerae showed that F los Lonicerae had strong antimicrobial activity.Key words:Flos Lonicerae;chlorogenicacid;extraction;examination;antimicrobial activity中图分类号:TS207.3文献标识码:A文章编号:1002-6630(200505-0130-05金银花为忍冬科(Caprifoliaceae忍冬属(Lonicera植物忍冬(Lonicera japonica thunb及同属多种植物的干燥花蕾,它是一种“药食同源”的绿色植物,是临床常用的中药之一。
近代研究一般认为金银花的生物活性有效成分为绿原酸类化合物,并且常以绿原酸含量的高低来评价金银花质量的优劣[1]。
绿原酸具有显著的清热解毒、抗菌消炎和抗衰老作用;对消化道的癌症有明显的抑制作用;还具有抗生育作用及对免疫系统的调节作用;绿原酸还具有增香和护色作用,可用于食品和果品保鲜。
绿原酸是含有羧基和邻二酚羟基的有机酸,易溶于水、醇溶液和丙酮等溶剂。
目前,从金银花中提取绿原酸多采用水煎法、水提醇沉、稀醇回流法、动态浸提法、超声波法和渗漉法等,国内学者对绿原酸不同提取工艺的评价仍存在分歧,但多数认为乙醇回流法较好。
为进一步优化乙醇回流法的提取工艺,本文进行了金银花中绿原酸的提取试验,并采用紫外分光光度法及《中华人民共和国药典》(2000年版要求采用高效液相色谱法(HPLC等作了相应的含量测定,以及经典的生物检测法[2,3]对金银花提取物的生物活性进行检测。
1材料与方法1.1材料1.1.1试验材料河南金银花。
1.1.2试验菌株大肠埃希氏菌(Escherichia Coil,G-,购自湖北武汉大学中国典型培养物保藏中心。
1.1.3培养基固体肉汤培养基g/L:蛋白胨10.0,牛肉浸膏5.0,NaCl 5.0,琼脂20.0,pH7.2,121℃灭菌20min;半固体肉汤培养基g/L:蛋白胨10.0,牛肉浸膏5.0,NaCl 5.0,琼脂8.0,pH7.2,121℃灭菌20min;琼脂培养基g/L:琼脂20.0,121℃灭菌20min。
1.1.4实验仪器KDF-2116康达多功能食品粉碎机(天津市达康电器公司,微量进样器(基因公司,O R I O N 818型pH计(美国,RE-3000旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器,SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸,调温加热套(河北省黄骅市中兴,超净工作台(苏净集团,H P S-250生化培养箱(哈尔滨市东明医疗仪器,AB204-N分析天平(美国Mettler-Toledo Group,Uvmini-1240紫外可见分光光度计(日本岛津有限公司,高效液相色谱仪(美国Lab,数码相机CASIO(日本,游标卡尺。
1.1.5主要试剂无水乙醇、甲醇、氯化钠、柠檬酸、三乙胺(分析纯、乙腈(色谱纯,绿原酸标准品(S i g m a公司,庆大霉素(华北制药厂,生产批号: 20040218,80万单位/2ml。
1.2实验方法1.2.1绿原酸的基本提取工艺1.2.1.1破碎水提取时将金银花低温烘干后切至0.6~ 0.8cm;乙醇提取时将烘干后的金银花用粉碎机破碎至约20目;1.2.1.2热回流浸提破碎后将金银花置于磨口圆底烧瓶中,加入适量的水或乙醇溶液,用调温电热套加热至微沸状态,热回流2次,第一次1h,第二次0.5h;1.2.1.3抽滤用布氏抽滤器减压处理浸提液;1.2.1.4浓缩合并浸提液,用薄膜旋转蒸发器减压浓缩(40℃至无乙醇味,回收的乙醇待用;1.2.1.5冷沉离心将浓缩液置于4℃冷藏24h后10000r/ min离心30min,取上清,同时将沉淀用少量蒸馏水再洗脱一次,离心后合并两次上清液,定容。
1.2.1.6真空冷冻干燥将提取液先于超低温冰箱中冷冻0.5h,然后至于真空冷冻干燥剂中干燥成粉末。
1.2.2绿原酸的检测对金银花中绿原酸定性定量的测定有颜色反应法、容量法、极谱法、比色法、紫外分光光度法、三波长分光光度法、导数光谱法、纸层析—比色法、纸层析—紫外分光光度法、薄层光密度法、薄层层析—紫外分光光度法、薄层扫描法、气相层析法、G C-M C法、高效液相色谱法(HPLC及生物检测法。