实验二_温度、PH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响_预习
温度、pH、激活剂与抑制剂对酶促作用的影响
温度、pH、激活剂与抑制剂对酶促作用的影响【目的】通过本实验，观察影响酶促作用的一些因素。
【原理】唾液淀粉酶可催化淀粉逐步水解，生成分子大小不同的糊精及最后水解成麦芽糖。
淀粉及糊精遇碘各呈不同的颜色反应。
直链淀粉(即可溶性淀粉)遇碘呈蓝色，糊精按分子的大小遇碘可呈蓝色、紫色，睛褐色和红色。
最小的糊精和麦芽糖遇碘不显色。
根据颜色反应，可以了解淀粉被水解的程度。
由于在不同温度、不同酸碱度下，唾液淀粉酶的活性高低不同，所以淀粉被水解的程度也不一样。
另外，有些物质可作为激活剂，能提高酶活性，有些物质可作为抑制剂，能降低酶活性，也能影响淀粉被水解的程度。
因此、通过与碘产生的颜色反应判断淀粉被水解的程度，了解温度、pH，激活剂和抑制剂对酶促作用的影响。
【试剂】1、1％淀粉溶液配制取可溶性淀粉1克，加5毫升蒸馏水，调成糊状，再加蒸馏水80毫升，加热，使其溶解，最后用蒸馏水稀释至100毫升。
2、稀释唾液制备将痰咳尽，用水漱口，再含蒸馏水30毫升，作咀嚼运动，2分钟后吐入烧杯中，再用滤纸过滤后待用。
3、不同PH缓冲液（1）PH6.8缓冲液用0.2M磷酸二氢钠溶液772毫升，0.1M柠檬酸溶液485亳升，混合即得。
（2）pH5.0缓冲液取0.2M磷酸氢二钠溶液515毫升，0.1M柠檬酸溶液485毫升，混合即成。
（3）pH8.0缓冲液取0.2M磷酸氢二钠溶液972毫升，0.1M柠檬酸溶液28毫升，混合即成。
4、0.9％NaCl溶液。
5、0.1％CuSO4溶液。
6、0.1％Na2SO4溶液。
【器材】10×100毫米试管、恒温水浴、沸水浴、水浴、蜡笔。
【操作】一、温度对酶促作用的影响1、取试管三支，用蜡笔编号，每管各加入pH6.8缓冲液20滴，1％淀粉10滴。
2、将第一管放入37℃恒温水浴，将第二管放入沸水浴，将第三管放入冰浴。
3、放置5分钟后，分别向各管加入稀唾液5滴，再放回原处。
4、10分钟后，分别向各管滴加碘液1滴，观察三管中颜色的区别，说明温度对酶促作用的影响。
激活剂和抑制剂对酶活性影响实验报告
激活剂和抑制剂对酶活性影响实验报告
影响酶作用的因素：影响酶促反应的因素常有酶的浓度、底物浓度、pH值、温度、抑制剂、激活剂等。
其变化规律有以下特点：
1、酶浓度对酶促反应的影响：在底物足够，其它条件固定的条件下，反应系统中不含有抑制酶活性的物质及其它不利于酶发挥作用的因素时，酶促反应的速度与酶浓度成正比。
2、底物浓度对酶促反应的影响：在底物浓度较低时，反应速度随底物浓度增加而加快，反应速度与底物浓度近乎成正比，在底物浓度较高时，底物浓度增加，反应速度也随之加快，但不显著，当底物浓度很大且达到一定限度时，反应速度就达到一个最大值，此时即使再增加底物浓度，反应也几乎不再改变。
3、酶的活性受激活剂或抑制剂的影响。
氯离子为唾液淀粉酶的激活剂，铜离子为其抑制剂，激活剂使酶的活性升高，抑制剂使酶活性降低。
注意事项：
激活剂和抑制剂对于酶活性的影响，常常分不清激活剂，因为加入蒸馏水、NaCl、Na2SO4这3支试管的颜色一致，都是黄色。
出现这种现象的原因是酶活性太高了，需要稀释唾液，唾液稀释至加入蒸馏水的试管呈浅红色即可。
这样一来，这3支试管的颜色分别是浅红、黄、浅红，就可以断定Cl-是激活剂。
偶尔也有分不清抑制剂的就是加入蒸馏水、CuSO4、
Na2SO4这三支试管的颜色一致，都是蓝色。
因为酶活性太低，需要提高酶活性，只要重新制备唾液淀粉酶就行（但是新酶的活性不可太高，否则又分不清激活剂）。
最后3支试管的颜色应该是浅红、蓝、浅红，可以断定Cu2+是抑制剂。
影响酶促反应的因素——温度,ph,激活剂及抑制剂,生化实验报告(共8篇)
影响酶促反应的因素——温度,ph,激活剂及抑制剂,生化实验报告(共8篇) 影响酶促反应速度的因素生化实验实验二影响酶促反应速度的因素【目的】观察温度、PH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。
【原理】唾液淀粉酶催化淀粉水解，生成一系列水解产物，即糊精、麦芽糖和葡萄糖等。
淀粉及其水解产物遇碘会呈现不同的颜色。
在不同温度，不同PH值下，唾液淀粉酶活性不同，催化淀粉水解程度不一，生成的产物也就不同。
此外，激活剂、抑制剂也能影响淀粉酶活性，影响淀粉的水解。
因此可根据在不同反应条件下，溶液加碘呈现的不同颜色来判断淀粉的水解程度，从而验证了温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。
淀粉I2 【操作】1. 温度对酶促反应速度的影响取3支试管，编号，按下表操作：2. PH对酶促反应速度的影响取3支试管，编号，按下表操作：3．激活剂与抑制剂对酶促反应速度的影响取4支试管，编号，按下表操作：【结果及分析】观察各管颜色变化，说明温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应的影响。
【实验注意事项】篇二：生化实验思考题参考答案生化实验讲义思考题参考答案实验一淀粉的提取和水解1、实验材料的选择依据是什么？答：生化实验的材料选择原则是含量高、来源丰富、制备工艺简单、成本低。
从科研工作的角度选材，还应当注意具体的情况，如植物的季节性、地理位置和生长环境等，动物材料要注意其年龄、性别、营养状况、遗传素质和生理状态等，微生物材料要注意菌种的代数和培养基成分的差异等。
2、材料的破碎方法有哪些？答：(1) 机械的方法：包括研磨法、组织捣碎法；(2) 物理法：包括冻融法、超声波处理法、压榨法、冷然交替法等；(3) 化学与生物化学方法：包括溶胀法、酶解法、有机溶剂处理法等。
实验二总糖与还原糖的测定1、碱性铜试剂法测定还原糖是直接滴定还是间接滴定？两种滴定方法各有何优缺点？答: 我们采用的是碱性铜试剂法中的间接法测定还原糖的含量。
间接法的优点是操作简便、反应条件温和，缺点是在生成单质碘和转移反应产物的过程中容易引入误差；直接法的优点是反应原理直观易懂，缺点是操作较复杂，条件剧烈，不易控制。
实验22 影响酶促反应因素——温度、
1.实验目的
（1）通过本实验了解pH、温度、抑制剂对 酶活力的影响。 （2）通过实验掌握控制变量法，并能使用控 制变量法设计实验。
2.实验原理
本实验通过对胰蛋白酶的测试，考察温 度、pH、抑制剂对酶活性的影响。 （1）温度的影响：酶是生物体内一类具 有催化活性的蛋白质，与一般催化剂一样 存在温度效应。开始时，酶促反应的速率 随温度的增加而增加，达到最大反应速率 时的温度为酶的最适温度，而超过最适温 度，会引起蛋白质变性，使酶促反应速率 降低直至停止。
（2）pH组 设置空白组：取一支试管，加入1.0mL1%酪 蛋白溶液和3.0mL5%三氯乙酸溶液，摇匀后加入 0.2mL酶液和0.8mL蒸馏水，在37oC下恒温10min。 对pH的测试：取3支试管，依次编号1、2、3， 向3支试管中分别加入0.2mL胰蛋白酶溶液，向1 号试管中加入0.8mLpH=7.4的硼酸缓冲液，向2号 试管中加入0.8mLpH=8.0的硼酸缓冲液，向3号试 管中加入0.8mLpH=9.0的硼酸缓冲液，上述试管 置于37oC水浴中恒温2min，然后加入各加入 1.0mL1%酪蛋白溶液，在37oC水浴中继续恒温 10min后加入三氯乙酸切断反应。将上述试管以 3000r/min离心5min，取上清液在280nm波长测定 吸光度。
（3）抑制剂组 设置空白组：取一支试管，加入1.0mL1%酪蛋 白溶液和3.0mL5%三氯乙酸溶液，摇匀后加入 0.2mL酶液和0.8mL蒸馏水，在37oC下恒温10min。 对抑制剂作用的测试：取两支试管，编号1、2， 在两支试管中分别加1.0mL1%酪蛋白溶液，然后 在1号试管中加入0.8mL蒸馏水，在2号试管中加 入0.1mL1mmol/mL苯甲脒溶液和0.7mL蒸馏水， 在37oC水浴中恒温2min，然后向两支试管中各加 入0.2mL的胰蛋白酶溶液，在37oC水浴中继续恒 温反应10min，最后加入三氯乙酸终止反应。将 上述试管以3000r/min离心5min，取上清液在 280nm波长测吸光度。
实验二、外界因素对唾液淀粉酶活性影响
唾液 现象 解释
1 2
3
2ml 2ml
2ml
1ml 0
0
0 1m l
0
0 0
1ml
1ml 1ml
1ml
2、将3支试管放入370C水浴中，并在白色 比色盘上用碘液检查第二管，待碘液不变 色时，向各管加碘液一滴，观察水解情况。
四、分析讨论
1 2 3
2ml 2ml 2ml
1ml 1ml 1ml
0 0C 370C
沸水浴
(3) 在比色盘上加 I2 液2滴于各孔中，每
隔一分钟，从第二管中取反映液1 滴与I2 液混合，观察颜色反应。 (4)待第二管中反应液遇I2，不发生颜色 变化，（即只呈碘的颜色），各管 中加入I2 液1滴，摇匀，观察并记录 各管颜色。
麦芽糖
加 碘
葡萄糖
变蓝
蓝、紫、褐、红
不变色
三、实验步骤
1、温度对酶活性的影响 （1）唾液淀粉酶制备：
每人用自来水漱口3次，然后取20ml 蒸馏水含于口中，半分钟后吐入烧杯 中，棉花过滤，取滤液供实验用 。 （2）取3支试管编号按表中数据加液，操 作按（表一）表一试管号源自0.5%淀唾液温度
现象
解释
粉
2.pH对酶活性的影响 表二
试管号
1
2 3
pH缓 0.5%淀 冲液 粉液 370 C PH5. 2ml 0 2ml 保 PH6. 82ml PH8. 0 2ml
唾液
现象
解释
2ml
2ml 2ml
2ml 2ml
温 3 分 钟
3.酶的激活剂及抑制剂对酶活性的影响 表三
试管号 0.5%淀 1%CuSO4 0.5 蒸馏水 %Na 粉液 Cl
温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响
[目的] 1.掌握温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性影响 的基本原理； 2.熟悉唾液淀粉酶所催化的酶促反应过程；
[原理] 1. 温度：对酶的活性的影响为双效性，当酶促反应 的温度为最适温度时，最有利于酶促反应的进行。 温度过低，酶的活性减弱，温度太高，会使酶变性、 失活； 2.pH ：酶活性最大时的环境 pH 为最适 pH 。 pH 不仅 会影响酶的活性，还会影响底物的解离状态，从而 影响酶与底物的结合。过酸或过碱性的环境可使酶 变性、失活。
3、激活剂和抑制剂对酶活性的影响
C．激活剂、 抑制剂组 1%淀粉 试剂 （2滴） 唾液
C1管
1ml 1%NaCl 10d
C2管
1ml 1%CuSO4 10d
C3管
1ml
C4管
1ml
1%Na2SO4 蒸馏水 10d 10d
摇匀， 37℃保温,每隔30秒从1号管中吸取溶液1d加到白瓷 盘小池中（小池预先加好0.1%碘液） 。当碘液不变色时， 分别向4管中加入1%碘液2滴，观察颜色变化。
收集唾液 ( 自来水漱口、收集唾液约 2-3ml 于小烧杯 中，蒸馏水稀释10倍,备用) 1、温度对酶活性的影响 A．温度组 唾液 （2ml） 1%淀粉 （1ml） 1%碘液 A1管 冰水浴 5分钟 冰水浴 15分钟 2d A2管 37 ℃水 浴5分钟 37℃水浴 15分钟 2d A3管 沸水浴 5分钟 沸水浴 15分钟 2d
2、pH对酶活性的影响 B．PH值组 B1管 PH5.0 2ml 10d B2管 PH6.8 2ml 10d B3管 PH8.6 2ml 10d
磷酸盐缓冲液 （2ml） 1%淀粉 唾液
摇匀，立即置37℃保温，每隔30秒从2号管中吸取溶液1滴 加到白瓷盘小池中（小池预先加好0.1%碘液）。当碘液不 变色时，分别向3管中加入1%碘液2滴，观察颜色变化。
酶活性的实验报告
一、实验目的1. 了解酶活性测定的基本原理和方法。
2. 探究温度、pH值、底物浓度、酶浓度以及抑制剂和激活剂对酶活性的影响。
二、实验原理酶是一种生物催化剂，具有高效、专一和可调节的特性。
酶活性是指酶催化反应的能力，通常用酶活力单位（U）表示。
在一定条件下，酶活力与反应速率成正比，即反应速率越快，酶活力越高。
本实验采用比色法测定酶活性。
在酶催化反应中，底物被转化为产物，同时产生一定量的有色物质。
通过测定有色物质的吸光度，可以计算出酶活力。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 酶：淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等。
- 底物：淀粉、蛋白质、脂肪等。
- 抑制剂：碘化钠、氟化钠、氯化钠等。
- 激活剂：硫酸铵、氯化钙等。
- pH缓冲液：磷酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液等。
2. 实验仪器：- 紫外-可见分光光度计- 恒温水浴锅- 移液器- 试管- 试管架- 秒表四、实验方法1. 酶活力测定：- 将酶和底物混合，置于恒温水浴锅中。
- 在一定时间内，每隔一段时间取出一定体积的反应液，用紫外-可见分光光度计测定吸光度。
- 根据吸光度计算酶活力。
2. 温度对酶活性的影响：- 将酶和底物混合，分别置于不同温度的水浴锅中。
- 在一定时间内，每隔一段时间取出一定体积的反应液，用紫外-可见分光光度计测定吸光度。
- 分析不同温度下酶活性的变化。
3. pH值对酶活性的影响：- 将酶和底物混合，分别置于不同pH值的缓冲液中。
- 在一定时间内，每隔一段时间取出一定体积的反应液，用紫外-可见分光光度计测定吸光度。
- 分析不同pH值下酶活性的变化。
4. 底物浓度对酶活性的影响：- 将酶和不同浓度的底物混合，置于恒温水浴锅中。
- 在一定时间内，每隔一段时间取出一定体积的反应液，用紫外-可见分光光度计测定吸光度。
- 分析不同底物浓度下酶活性的变化。
5. 酶浓度对酶活性的影响：- 将不同浓度的酶与底物混合，置于恒温水浴锅中。
- 在一定时间内，每隔一段时间取出一定体积的反应液，用紫外-可见分光光度计测定吸光度。
酶特性实验报告
一、实验目的1. 了解酶的催化作用及其特性。
2. 掌握酶的专一性、温度、pH值、激活剂和抑制剂对酶活力的影响。
3. 学会使用实验方法检测酶的活性。
二、实验原理酶是一种具有催化功能的蛋白质，它能够加速生物体内的化学反应。
酶的催化作用具有以下特性：1. 专一性：酶对底物具有高度选择性，只催化特定的反应。
2. 温度依赖性：酶的活性随温度变化而变化，在一定温度范围内酶活性较高。
3. pH值依赖性：酶的活性受pH值影响，最适pH值下酶活性最高。
4. 激活剂和抑制剂：激活剂能够提高酶的活性，抑制剂则降低酶的活性。
本实验通过观察酶的专一性、温度、pH值、激活剂和抑制剂对酶活力的影响，进一步了解酶的特性。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 唾液淀粉酶- 淀粉溶液- 蔗糖溶液- 碘液- 班氏试剂- 恒温水浴- 试管- 试管架- 滴管2. 实验仪器：- 电子天平- 烧杯- 移液器- 比色计四、实验方法1. 酶的专一性实验- 将淀粉溶液和蔗糖溶液分别加入试管中，分别加入唾液淀粉酶，观察淀粉溶液变蓝的时间。
- 加入碘液，观察蔗糖溶液是否变蓝。
2. 温度对酶活力的影响实验- 将淀粉溶液和唾液淀粉酶分别加入试管中，分别放入不同温度的水浴中，观察酶活性随温度变化的情况。
3. pH值对酶活力的影响实验- 将淀粉溶液和唾液淀粉酶分别加入试管中，分别加入不同pH值的缓冲液，观察酶活性随pH值变化的情况。
4. 激活剂和抑制剂对酶活力的影响实验- 在淀粉溶液中加入激活剂和抑制剂，观察酶活性随激活剂和抑制剂加入量的变化。
五、实验结果与分析1. 酶的专一性实验- 淀粉溶液加入唾液淀粉酶后，变蓝时间明显缩短，说明唾液淀粉酶对淀粉具有催化作用。
- 蔗糖溶液加入唾液淀粉酶后，未观察到变蓝现象，说明唾液淀粉酶对蔗糖无催化作用。
2. 温度对酶活力的影响实验- 随着温度的升高，酶活性逐渐增强，在40℃时酶活性达到最高。
- 温度超过40℃后，酶活性开始下降，说明高温抑制了酶的活性。
pH、激活剂、抑制剂对酶活性的影响 - 实验教学中心
温度、pH、激活剂、抑制剂对酶活性的影响（间接碘量法）（effects of temperature pH activitor and inhibitor to activity of enzyme）一、目的1.了解温度、pH、激活剂、抑制剂对酶活性的影响2.学习酶活性的判定二、原理酶活性大小可以用反应速度来表示，即在单位时间内，酶所催化底物的消耗量或产物的生成量来衡量。
酶活性大，反应速度就快。
反之则慢。
酶促反应速度受多种因素的影响。
如温度、pH、激活剂、抑制剂等。
本实验是观察在不同温度，pH，以及缺乏激活剂或有抑制剂的条件下唾液淀粉酶的活性大小。
借以验证各种因素对酶活性的影响。
唾液中含有唾液淀粉酶，此酶可以使淀粉逐步水解，最后生成麦芽糖。
麦芽糖具有还原性。
根据淀粉被唾液淀粉酶水解后产物的生成量（即还原性麦芽糖的多少）判定酶活性的大小。
用碘的反滴定法测定还原物的量，还原物多，酶活性大。
具体反应如下：1、试剂成分（S、H、S试剂）：CuSO4、Na2CO3、NaHCO3、KI、KIO3、酒石酸钾钠、草酸钾。
2、判定酶活性大小的化学反应过程：Na2CO3 ＋2H2O —→2NaOH ＋ H2CO3CuSO4＋2NaOH —→Cu(OH)2↓＋Na2SO45KI ＋KIO3 ＋ 3H2SO4—→3I2＋3K2SO4 ＋3H2O酶淀粉———→麦芽糖麦芽糖＋Cu++—→麦芽糖氧化产物＋Cu+Cu+＋ I2—→Cu++ ＋ 2I-COO- 草酸钾COO-Cu++＋|—————→| >CuCOO- 防止逆反应COO-剩余I2＋Na2S2O3—→2I- ＋Na2S4O6（与淀粉呈兰色) （与淀粉无色)3、判定酶活性大小的标志酶活性大→麦芽糖多→Cu+ 生成量多→I2消耗量多→剩余I2少→Na2S2O3消耗量少酶活性越大，Na2S2O3消耗量越少。
空白实验无酶活性，因此Na2S2O3消耗量最多。
与空白实验进行对比，差值越大，说明此条件下酶活性越大。
实验二_温度、PH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响_预习
实验二温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响温度、p H 对酶活性的影响一、实验目的了解温度对酶活性的影响。
了解酶活性的最适pH 及掌握种检测最适pH 的方法。
二、实验原理（请同学们自已补充）三、实验步骤1、温度对酶活性的影响取 3 支试管，编号后按下表加入试剂试管编号试剂1230.2%淀粉溶液（d） 1.5 1.5 1.5稀释唾液/ml11无煮沸过的稀释唾液/ml无无1摇匀后，将1、3号两试管放入37摄氏度恒温水浴中，2号试管放入冰水中。
10min 后取出，将 2 号试管内的液体分为两半，用碘化钾-碘溶液来检验1、2、3 号试管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。
将 2 号试管剩下的一半溶液放入37摄氏度水浴中继续保温10min 后，再用碘液检验，结果如何？记录并解释结果。
注意事项：唾液制备时，先用蒸馏水漱口，以清除食物残渣，再含一小口蒸馏水，0.5~1min 后，使其流入量筒，并稀释到50ml。
2、pH对酶活性的影响取 4 个标有号码的20ml 试管。
用吸管按下表添加0.2mol/L 磷酸氢二钠溶液和0.1mol/L 柠檬酸溶液以制备pH=5.0~8.0 的 4 种缓冲液试管编号试剂12345.16.07.79.70.2mol/L 磷酸氢二钠/ml55224.8 3.9 2.20.20.1mol/L 柠檬酸/ml5588pH5 5.8 6.88从 4 个试管中各取缓3ml，分别注入 4 支带有号码的试管中，每个试管中添加0.5%淀粉溶液2ml 和稀释唾液2ml。
向各试管中加入稀释唾液的时间间隔分别为1min。
将各试管内容物混匀，并依次置于37 摄氏度恒温水浴中保温。
第 4 管加入唾液2min 后，每隔1min 由第 2 管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加 1 滴碘化钾-碘溶液，检验淀粉的水解程度。
待混合液变为棕黄色时，向所有试管中依次添加1或2滴碘化钾-碘溶液。
添加碘化钾-碘溶液的时间间隔从第 1 管起，均为1min。
温度、pH、激活剂、抑制剂对酶活性的影响
温度、pH、激活剂、抑制剂对酶活性的影响（间接碘量法）（effects of temperature pH activitor and inhibitor to activity of enzyme）一、目的1.了解温度、pH、激活剂、抑制剂对酶活性的影响2.学习酶活性的判定二、原理酶活性大小可以用反应速度来表示，即在单位时间内，酶所催化底物的消耗量或产物的生成量来衡量。
酶活性大，反应速度就快。
反之则慢。
酶促反应速度受多种因素的影响。
如温度、pH、激活剂、抑制剂等。
本实验是观察在不同温度，pH，以及缺乏激活剂或有抑制剂的条件下唾液淀粉酶的活性大小。
借以验证各种因素对酶活性的影响。
唾液中含有唾液淀粉酶，此酶可以使淀粉逐步水解，最后生成麦芽糖。
麦芽糖具有还原性。
根据淀粉被唾液淀粉酶水解后产物的生成量（即还原性麦芽糖的多少）判定酶活性的大小。
用碘的反滴定法测定还原物的量，还原物多，酶活性大。
具体反应如下：1、试剂成分（S、H、S试剂）：CuSO4、Na2CO3、NaHCO3、KI、KIO3、酒石酸钾钠、草酸钾。
2、判定酶活性大小的化学反应过程：Na2CO3 ＋2H2O —→2NaOH ＋ H2CO3CuSO4＋2NaOH —→Cu(OH)2↓＋Na2SO45KI ＋KIO3 ＋ 3H2SO4—→3I2＋3K2SO4 ＋3H2O酶淀粉———→麦芽糖麦芽糖＋Cu++—→麦芽糖氧化产物＋Cu+Cu+＋ I2—→Cu++ ＋ 2I-COO- 草酸钾COO-Cu++＋|—————→| >CuCOO- 防止逆反应COO-剩余I2＋Na2S2O3—→2I- ＋Na2S4O6（与淀粉呈兰色) （与淀粉无色)3、判定酶活性大小的标志酶活性大→麦芽糖多→Cu+ 生成量多→I2消耗量多→剩余I2少→Na2S2O3消耗量少酶活性越大，Na2S2O3消耗量越少。
空白实验无酶活性，因此Na2S2O3消耗量最多。
与空白实验进行对比，差值越大，说明此条件下酶活性越大。
影响酶活性实验报告
影响酶活性实验报告影响酶活性实验报告引言：酶是生物体内一类重要的蛋白质，能够催化生物体内的化学反应。
酶活性的研究对于理解生物体内的代谢过程和疾病的发生机制具有重要意义。
本实验旨在探究影响酶活性的因素，并通过实验结果分析酶活性的变化规律。
实验材料与方法：1. 实验材料：酶溶液、底物溶液、酶抑制剂、pH缓冲液、实验器材等。
2. 实验方法：首先，准备不同浓度的酶溶液和底物溶液，并将它们分别加入试管中。
然后，在不同条件下，如温度、pH值等，将酶溶液与底物溶液混合，观察反应时间并记录结果。
实验结果与分析：1. 温度对酶活性的影响：将酶溶液与底物溶液在不同温度下混合，观察反应时间。
实验结果显示，在适宜的温度范围内，酶活性较高，反应时间较短；而在过高或过低的温度下，酶活性明显下降，反应时间延长。
这表明温度是影响酶活性的重要因素，过高或过低的温度都会导致酶蛋白结构的变性，从而影响酶的催化活性。
2. pH值对酶活性的影响：将酶溶液与底物溶液在不同pH值的缓冲液中混合，观察反应时间。
实验结果显示，在适宜的pH值范围内，酶活性较高，反应时间较短；而在过高或过低的pH值下，酶活性明显下降，反应时间延长。
这表明pH值是影响酶活性的重要因素，过高或过低的pH值都会改变酶蛋白的电荷状态，从而影响酶与底物的结合能力。
3. 酶抑制剂对酶活性的影响：将酶抑制剂加入酶溶液中，观察反应时间。
实验结果显示，酶抑制剂能够显著降低酶活性，使反应时间延长。
这表明酶抑制剂能够与酶结合，阻断酶与底物的结合，从而抑制酶的催化活性。
结论：通过本实验的研究，我们得出了以下结论：温度、pH值和酶抑制剂是影响酶活性的重要因素。
适宜的温度和pH值能够维持酶蛋白的结构稳定，促进酶与底物的结合，从而提高酶活性；而过高或过低的温度和pH值会导致酶蛋白的变性，降低酶活性。
此外，酶抑制剂能够与酶结合，阻断酶与底物的结合，从而抑制酶的催化活性。
实验的局限性与改进方向：本实验只考察了温度、pH值和酶抑制剂对酶活性的影响，而实际生物体内还有许多其他因素可能会影响酶活性，如金属离子、共价修饰等。
温度、pH、激活剂、抑制剂对酶活性的影响
温度、pH、激活剂、抑制剂对酶活性的影响（间接碘量法）（effects of temperature pH activitor and inhibitor to activity of enzyme）一、目的1.了解温度、pH、激活剂、抑制剂对酶活性的影响2.学习酶活性的判定二、原理酶活性大小可以用反应速度来表示，即在单位时间内，酶所催化底物的消耗量或产物的生成量来衡量。
酶活性大，反应速度就快。
反之则慢。
酶促反应速度受多种因素的影响。
如温度、pH、激活剂、抑制剂等。
本实验是观察在不同温度，pH，以及缺乏激活剂或有抑制剂的条件下唾液淀粉酶的活性大小。
借以验证各种因素对酶活性的影响。
唾液中含有唾液淀粉酶，此酶可以使淀粉逐步水解，最后生成麦芽糖。
麦芽糖具有还原性。
根据淀粉被唾液淀粉酶水解后产物的生成量（即还原性麦芽糖的多少）判定酶活性的大小。
用碘的反滴定法测定还原物的量，还原物多，酶活性大。
具体反应如下：1、试剂成分（S、H、S试剂）：CuSO4、Na2CO3、NaHCO3、KI、KIO3、酒石酸钾钠、草酸钾。
2、判定酶活性大小的化学反应过程：Na2CO3 ＋2H2O —→2NaOH ＋ H2CO3CuSO4＋2NaOH —→Cu(OH)2↓＋Na2SO45KI ＋KIO3 ＋ 3H2SO4—→3I2＋3K2SO4 ＋3H2O酶淀粉———→麦芽糖麦芽糖＋Cu++—→麦芽糖氧化产物＋Cu+Cu+＋ I2—→Cu++ ＋ 2I-COO- 草酸钾COO-Cu++＋|—————→| >CuCOO- 防止逆反应COO-剩余I2＋Na2S2O3—→2I- ＋Na2S4O6（与淀粉呈兰色) （与淀粉无色)3、判定酶活性大小的标志酶活性大→麦芽糖多→Cu+ 生成量多→I2消耗量多→剩余I2少→Na2S2O3消耗量少酶活性越大，Na2S2O3消耗量越少。
空白实验无酶活性，因此Na2S2O3消耗量最多。
与空白实验进行对比，差值越大，说明此条件下酶活性越大。
影响酶促反应的因素
氯离子对唾液淀粉酶有激活作用；铜离子对唾液 淀粉酶有抑制作用。
整理课件
4
三、实验材料
1.1%淀粉溶液 取可溶性淀粉1g, 加5ml蒸馏水, 调成糊状, 再加80ml蒸馏水, 加热并不断搅拌, 使其充分溶解, 放冷, 最后用蒸馏水稀释至100ml。
整理课件
10
（二）pH对酶促反应速度的影响
管号
1
2
3
1%淀粉溶液
10滴 10滴 10滴
pH5.0缓冲液
10滴
—
—
pH6.8缓冲液
10滴
—
pH8.0缓冲液
பைடு நூலகம்
—
—
10滴
稀释唾液
5滴
5滴
5滴
把三支管摇匀，然后放至 37℃水浴10分钟，加碘2滴摇匀
结果与分析
整理课件
11
• 将各管混匀，放进37℃水浴 箱中保温。
↓
无色
• 利用淀粉及其水解产物的颜色反应，来比较唾液淀粉酶在
不同条件下催化淀粉水解的程度，从而判断温度、pH、
激动剂和抑制剂对酶的活性影响。
整理课件
3
二、实验原理
在低温时，酶活性降低，酶促反应速度较慢，甚 至停止；随着温度升高，酶的活性恢复，反应速 度加快；当达到最适温度时，酶的活性最大，酶 促反应速度达到最大。人体内大多数的酶的最适 温度在37℃左右。温度过高，酶变性失活，酶促 反应速度下降，甚至停止。
• 取白瓷板一块，向各凹分别加 1滴碘液，每隔半分钟用滴管 或玻棒从2号管取溶液1滴， 加到已加有碘液的小凹中，观 察颜色变化，直至与碘不呈色 时（即只显棕黄色时），向各 管加碘液1滴，摇匀观察颜色 变化。
酶性质测定实验报告
一、摘要本实验旨在探究酶的催化活性、温度、pH值以及激活剂和抑制剂对酶活性的影响。
通过一系列实验，我们成功测定了酶在不同条件下的活性变化，分析了温度、pH 值、激活剂和抑制剂对酶活性的影响，并探讨了酶的性质。
二、实验目的1. 探究酶的催化活性；2. 分析温度、pH值对酶活性的影响；3. 研究激活剂和抑制剂对酶活性的影响；4. 了解酶的性质。
三、实验原理酶是一种生物催化剂，具有高效、专一、温和的特点。
酶的催化活性受多种因素影响，如温度、pH值、激活剂和抑制剂等。
本实验采用紫外分光光度法测定酶活性，通过观察反应体系中产物浓度的变化，分析不同条件对酶活性的影响。
四、实验材料与仪器1. 实验材料：- 酶样品- 底物- 磷酸盐缓冲液- 激活剂- 抑制剂- 紫外分光光度计- 烧杯- 移液器- 秒表2. 实验仪器：- 紫外分光光度计- 烧杯- 移液器- 秒表五、实验方法1. 酶活性测定：- 将酶样品与底物混合，置于37℃恒温水浴中；- 在特定时间间隔内，用紫外分光光度计测定反应体系中产物浓度的变化；- 计算酶活性。
2. 温度对酶活性的影响：- 在不同温度条件下（如20℃、30℃、40℃、50℃、60℃），重复上述酶活性测定实验；- 分析温度对酶活性的影响。
3. pH值对酶活性的影响：- 在不同pH值条件下（如pH 4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0），重复上述酶活性测定实验；- 分析pH值对酶活性的影响。
4. 激活剂和抑制剂对酶活性的影响：- 在酶样品中加入适量的激活剂或抑制剂，重复上述酶活性测定实验；- 分析激活剂和抑制剂对酶活性的影响。
六、实验结果与分析1. 酶活性测定结果：- 通过紫外分光光度法测定，得到酶在不同条件下的活性变化数据。
2. 温度对酶活性的影响：- 随着温度升高，酶活性先增加后降低，表明酶活性受温度影响较大。
在适宜的温度范围内，酶活性随着温度升高而增加，超过适宜温度后，酶活性逐渐降低。
实验教案-温度pH值激活剂和抑制剂对酶活性的影响
实验三温度、pH值、激活剂和抑制剂对酶活性的影响一、目的验证温度、pH值、激活剂和抑制剂对酶活性的影响二、原理酶的化学本质是蛋白质，凡是能够影响蛋白质变性的因素，都可以使酶失活。
此外，温度、pH、激活剂和抑制剂对酶的活性均有显著影响。
酶的活性通常是通过测定酶所作用的底物在作用前后的变化来研究的。
本实验是唾液淀粉酶作用的底物-淀粉，被唾液淀粉酶分解成糊精、麦芽糖等产物的变化来观察该酶在各种环境(温度、pH值、激活剂和抑制剂)条件下的活性.淀粉被酶水解的变化，可以借遇碘呈不同颜色来观察，淀粉遇碘呈蓝色；糊精按分子从大到小的顺序，遇碘呈蓝、紫、红等不同颜色；最小的糊精和麦芽糖遇碘不呈现颜色反应。
三、主要仪器、材料和试剂器材电热恒温水浴锅、电炉、比色盘、吸管、试管、漏斗、烧杯等试剂0.5%淀粉溶液、碘化钾-碘溶液、1%CuSO4、0.5%NaCl溶液、pH5缓冲液、pH6.8缓冲液、pH8缓冲液、四、操作步骤（一）制备唾液淀粉酶每人用自来水漱口3次，然后取20ml蒸馏水你含于口中，半分钟后吐入烧杯内，4层纱布过滤。
以此酶液作如下实验（二）温度对酶活性的影响1.取3支试管，编号后按下表操作：2. 各管加入0.5%淀粉溶液后，放入各自温度的水浴，待管内温度一致时，3支试管同时迅速加入酶液，摇匀及时放回水浴中。
3. 在比色盘中，各孔中置碘液2滴，每隔1分钟从2号管中取反应液1滴与比色盘中的碘液混合，观察颜色变化。
4.待第二管反应液遇碘不发生颜色变化（即只有碘液的颜色）时，从水浴中取出各管，向管中加入1-2滴碘液，摇匀后，观察各管颜色，说明温度对酶活性的影响。
三、pH对酶活性的影响1.取3支试管，编号后按下表操作：2.将以上3支试管摇匀，放入37℃水浴中保温。
每隔1分钟从2号管中取1滴反应液与碘液混合观察，待遇碘不发生颜色变化时，向各管中加入碘液1-2滴，充分混匀，观察并记录各管颜色，解释pH对酶活性的影响。
四、激活剂和抑制剂对酶活性的影响1.取3支试管，编号后按下表操作：2.将以上3支试管摇匀，放入37℃水浴中，每隔1-2分钟在比色盘上用碘液检查2号管，待碘液不变色时，再向各管内加入碘液1-2滴，观察、记录结果，并解释原因。
实验二 影响酶促反应的因素
• 煮沸唾液的制备 取上述唾液约5ml，放入沸水中 煮沸5分钟，取出备用。
实验二 温度、pH 值、激活 剂和抑制 剂对酶活 性的影响 及特异性
A
1
一、实验目的
➢1．通过实验，观察温度、pH值、激活剂 与抑制剂对酶促反应速度的影响。
➢2．能运用所学的生化知识对实验结果进行 正确的分析。
A
2
二、实验原理
淀粉
＋
碘
↓
蓝 色
糊精
麦芽糖和葡萄糖
＋
＋
碘
碘
↓
紫色→红色→无色
↓
无色
• 利用淀粉及其水解产物的颜色反应，来比较唾液淀粉酶在
A
5
பைடு நூலகம்
➢5.0.9%NaCl溶液 ➢6.1% CuSO4溶液 ➢7.碘液 9.试管架 ➢11.试管夹 ➢12.滴管 ➢13.白瓷板 ➢14.恒温水浴箱 ➢15.电炉 ➢16.烧杯
A
6
【注意事项】 1.注意实验器材的干净，避免杂质影响反应
结果 2.各管反应时间应严格控制，保证一致。
A
7
四、实验方法
管号
1
2
3
1%淀粉溶液
10滴 10滴 10滴
pH5.0缓冲液
10滴
—
—
pH6.8缓冲液
10滴
—
pH8.0缓冲液
—
实验二--温度和pH对酶活性的影响
试验器材
1、试管及试管架 3、冰浴
2、恒温水浴 4、沸水浴
1、温度对酶活性旳影响
取 3支试管，编号后按下表加入试剂:
管号
淀粉溶液 （ml）
煮 淀粉酶
（ml）
❖
沸
旳
淀
粉
酶
（m
l）
1
1.5
1
2、pH对酶活性旳影响
取4个50ml锥形瓶，并编号。用移液管 按下表添加0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和 0.1mol/L柠檬酸溶液制备pH5.0～8.0旳四种 缓冲液。
思索题
1、唾液淀粉酶旳最适温度是多少? 2、低温对酶有什么影响? 3、什么是酶旳最适温度及其应用意义？ 4、什么是酶反应旳最适pH？对酶活性有何
影响？
酶旳活力受环境pH旳影响极为明显。不同酶旳最适pH值不同。本试验 观察pH对唾液淀粉酶活性旳影响，唾液淀粉酶旳最适pH约为6.8。
试验试剂
1、0.2%淀粉旳0.3%氯化钠溶液
2、淀粉酶或稀释50～100倍旳唾液
用蒸馏水漱口，以清除食物残渣，再含一口蒸馏水，半分钟 后使其流入量筒并稀释50-100倍，(稀释倍数可根据各人唾液淀粉 酶活性调整)混匀备用。
锥形瓶号 0.2mol/L磷 0.1mol/L pH
酸氢二钠 柠檬酸
（ml）
（ml）
1
5.15
3.95
5.8
3
7.72
2.28
6.8
4
9.72
0.28
8.0
各取不同pH旳缓冲液3ml，分注 入4支带有编号码旳试管中，随即于每 个试管中添加0.5%淀粉溶液2ml和淀粉 酶2ml。将各试管内容物混匀，并依次 置于37℃恒温水浴中保温。
温度、激活剂和抑制剂对酶活力的影响
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4
（二）激活剂和抑制剂对酶反应的影响
酶活力常受到有些物质的影响,有些物质
剂
能使酶活力增i] 强,称为酶的激活剂； 另一些物 质则能使酶活力降低，称为酶的抑制剂。
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5
三、试剂和器材
1、实验器材 (1)恒温水浴锅 (2)试管 (3)烧杯 (4)量筒 (5)玻璃 棒 (6)白磁板 (7)铁三角架 (8)酒精灯 (10 )试 管夹 (11)试管架 (12)秒表
因此大多数酶都有一个最适 温度(即酶促反应速度最快 时的环境温度)
酶的最适温度不是一个常数， 它与作用时间长短有关。
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3
人唾液中淀粉酶为α-为淀粉酶，在唾液腺细 胞内合成。在唾液淀粉酶的作用下，淀粉被 水解，经过一系列被称为糊精的中间产物， 最后生成麦芽糖。不同阶段的糊精遇碘有 不同颜色反应，分别呈现为：
思考题
1、 高温导致酶活性丧失的分子机理是什么？如何在酶 的分离纯化中克服这种影响？
2、 哪些因素可以导致酶活医性学pp的t 降低？
10
实验二 温度、激活剂和抑制剂对 酶活力的影响
医学ppt
1
一、实验目的
1、了解温度对酶活性的影响，学会检测酶最 适温度的方法。
2、了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。 3、学习检测激活剂和抑制剂影响酶促反应速
度的原理和方法。
医学ppt
2
二、实验原理 （一）温度对酶活性的影响
一方面是温度升高,酶促反 应速度加快。 另一方面,温度升高,也将导 致酶活性降低甚至丧失。
医学ppt
7
管号
1
2
影响酶活性的条件实验报告
一、实验目的本实验旨在探究影响酶活性的条件，包括温度、pH值、底物浓度、酶浓度以及抑制剂和激活剂等因素，并通过实验验证这些因素对酶活性的影响。
二、实验原理酶是一种生物催化剂，其活性受多种因素影响。
温度、pH值、底物浓度、酶浓度、抑制剂和激活剂等都是影响酶活性的重要因素。
本实验主要探究这些因素对酶活性的影响，并通过观察实验现象，分析实验结果。
三、实验材料与仪器材料：1. 酶制剂（如淀粉酶、蛋白酶等）2. 底物（如淀粉、蛋白质等）3. 抑制剂（如重金属盐、酸、碱等）4. 激活剂（如某些金属离子等）5. pH试纸、pH计6. 温度计7. 移液器8. 试管9. 水浴锅仪器：1. 紫外可见分光光度计2. 热水浴锅3. 冷水浴锅4. pH计四、实验方法与步骤1. 温度对酶活性的影响- 将酶制剂和底物分别置于不同温度的水浴锅中预热。
- 将预热好的酶制剂和底物按一定比例混合，记录混合时间。
- 使用紫外可见分光光度计测定反应体系中底物的浓度变化，计算酶活性。
2. pH值对酶活性的影响- 使用pH试纸或pH计测定不同pH值下酶的活性。
- 将酶制剂和底物分别置于不同pH值的溶液中，记录混合时间。
- 使用紫外可见分光光度计测定反应体系中底物的浓度变化，计算酶活性。
3. 底物浓度对酶活性的影响- 将酶制剂和不同浓度的底物按一定比例混合，记录混合时间。
- 使用紫外可见分光光度计测定反应体系中底物的浓度变化，计算酶活性。
4. 酶浓度对酶活性的影响- 将不同浓度的酶制剂与底物按一定比例混合，记录混合时间。
- 使用紫外可见分光光度计测定反应体系中底物的浓度变化，计算酶活性。
5. 抑制剂和激活剂对酶活性的影响- 将抑制剂和激活剂分别加入酶制剂和底物中，观察酶活性的变化。
五、实验结果与分析1. 温度对酶活性的影响- 随着温度升高，酶活性逐渐增强，在一定温度范围内达到最大值，随后逐渐下降。
2. pH值对酶活性的影响- 酶活性在不同pH值下表现出不同的活性，存在一个最适pH值，酶活性在此pH值下达到最大值。
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实验二温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响
温度、p H对酶活性的影响
一、实验目的
了解温度对酶活性的影响。
了解酶活性的最适pH及掌握一种检测最适pH的方法。
二、实验原理（请同学们自已补充）
三、实验步骤
1、温度对酶活性的影响
取3支试管，编号后按下表加入试剂
试管编号
试剂
1 2 3
0.2%淀粉溶液（d） 1.5 1.5 1.5
稀释唾液/ml 1 1 无
煮沸过的稀释唾液/ml 无无 1
摇匀后，将1、3号两试管放入37摄氏度恒温水浴中，2号试管放入冰水中。
10min后取出，将2号试管内的液体分为两半，用碘化钾-碘溶液来检验1、2、3
号试管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。
将2号试管剩下的一半溶液放入37摄氏度水浴中继续保温10min后，再用碘液检验，结果如何？记录并解释结果。
注意事项：
唾液制备时，先用蒸馏水漱口，以清除食物残渣，再含一小口蒸馏水，0.5~1min后，使其流入量筒，并稀释到50ml。
2、pH对酶活性的影响
取4个标有号码的20ml试管。
用吸管按下表添加0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和0.1mol/L柠檬酸溶液以制备pH=5.0~8.0的4种缓冲液。
试剂
试管编号
1 2 3 4
0.2mol/L磷酸氢二钠/ml 5.1
5
6.0
5
7.7
2
9.7
2
0.1mol/L柠檬酸/ml 4.8
5
3.9
5
2.2
8
0.2
8
pH 5 5.8 6.8 8 从4个试管中各取缓冲液3ml，分别注入到4支带有号码的试管中，随后于每个试管中添加0.5%淀粉溶液2ml和稀释唾液2ml。
向各试管中加入稀释唾液的时间间隔分别为1min。
将各试管内容物混匀，并依次置于37摄氏度恒温水浴中保温。
第4管加入唾液2min后，每隔1min由第2管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加1滴碘化钾-碘溶液，检验淀粉的水解程度。
待混合液变为棕黄色时，向所有试管中依次添加1或2滴碘化钾-碘溶液。
添加碘化钾-碘溶液的时间间隔从第1管起，均为1min。
观察各试管内容物呈现的颜色，分析pH对唾液淀粉酶活性的影响。
注意事项：
1）从第三管中取混合液，是因为它的pH接近唾液淀粉酶的最适pH。
2）间隔1min，是为了有足够的时间去加稀释唾液和足够时间观察颜色，保证各试管反应时间相同。
四、实验结果
1、温度
管号1 2 3
2、pH
1 2 3 4
原因分析：
激活剂和抑制剂对酶活性的影响
一、实验目的
了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。
二、实验原理
三、实验步骤
取4支试管按下表加入试剂，观察现象并记录。
试剂
试管编号
1 2 3 4 0.1%淀粉溶液/ml 1.5 1.5 1.5 1.5
1%CuSO
4
溶液/ml 0.5 无无无1%NaCl溶液/ml 无0.5 无无
1%Na
2SO
4
溶液/ml 无无0.5 无
蒸馏水/ml 无无无0.5 稀释唾液/ml 0.5 0.5 0.5 0.5
37摄氏度恒温水浴5min
碘化钾-碘溶液/滴 2 2 2 2
四、实验结果
1 2 3 4
原因分析：。