离体蟾蜍心脏灌流实验数据处理与分析
生理学实验报告蛙心灌流
生理学实验报告-蛙心灌流————————————————————————————————作者: ————————————————————————————————日期:ﻩ蛙类离体心脏灌流一、【目的要求】1、学习离体蛙心灌流法。
2、观察Nａ＋,K+,Ｃa2+及肾上腺素(Adｒ),乙酰胆碱（ＡCｈ)，乳酸对离体心脏活动的影响。
二、【原理】将离体蛙心（失去神经支配的蛙心）保持在适宜的环境中，在一定的时间内仍然能够保持节律性收缩,心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境，离体心脏也是如此，离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响，可以通过改变灌流液的某些成分,观察其对心脏活动的作用。
心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性，都与钠、钾及钙等离子有关。
外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。
三、【实验仪器】青蛙、常用手术器械、蛙板（或蜡盘)、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、任氏液。
套管夹、0．６5％ＮaＣl、２％ＣａＣl2、1%KCl、１：1０000肾上腺素、1：10000乙酰肌碱、3%乳酸。
四、【方法与步骤】１、斯氏蛙心插管法(１)一只青蛙,双毁髓后背位置于蜡盘中,按前面的方法暴露心脏。
仔细识别心脏周围的大血管(见右图)。
在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎(动物个体小时,结扎位置可靠上些)。
再从左右两主动脉下方穿一线，并打一活结备用。
左手提起主动脉上的结扎线,右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口。
选择大小适宜的蛙心套管，然后将盛有少量(套管内2～3cm高度)任氏液(内加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管，山开口处插入动脉圆锥(见右图)。
当套管尖端到达动脉圆锥基部时,应将套管稍稍后退,使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进,经主动脉瓣插入心室腔内（于心室收缩时插入,但不可插得过深,以免心室壁堵住套管下口)。
离体蛙心实验实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 观察离体蛙心的生理特性，了解心脏在离体条件下的收缩和舒张规律。
2. 探讨神经递质、激素等对离体蛙心功能的影响。
3. 掌握离体蛙心灌流实验的操作方法。
二、实验原理离体蛙心灌流实验是研究心脏生理学的重要方法之一。
在实验过程中，通过灌流装置向蛙心提供氧气和营养物质，同时可以观察心脏的收缩和舒张情况。
实验中，可以通过改变灌流液成分、温度、pH值等条件，观察心脏功能的改变，从而了解心脏生理特性及影响因素。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：蟾蜍、蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、氯化钙、肾上腺素、乙酰胆碱等。
2. 实验仪器：手术显微镜、蛙心灌流装置、注射器、秒表、滴管等。
四、实验方法与步骤1. 准备工作：将蟾蜍置于蛙板上，用手术剪剪开胸腔，暴露心脏。
用蛙心夹固定心脏，并连接灌流装置。
2. 灌流液准备：配制任氏液、氯化钙溶液、肾上腺素溶液、乙酰胆碱溶液等。
3. 实验分组：将实验分为对照组、氯化钙组、肾上腺素组、乙酰胆碱组。
4. 实验步骤：a. 对照组：灌流任氏液，观察心脏的收缩和舒张情况。
b. 氯化钙组：灌流氯化钙溶液，观察心脏功能的改变。
c. 肾上腺素组：灌流肾上腺素溶液，观察心脏功能的改变。
d. 乙酰胆碱组：灌流乙酰胆碱溶液，观察心脏功能的改变。
5. 记录数据：观察心脏的收缩和舒张频率、收缩幅度等，并记录数据。
五、实验结果与分析1. 对照组：心脏呈现规律的收缩和舒张，收缩幅度适中，频率约为60次/分钟。
2. 氯化钙组：心脏收缩幅度明显增大，频率加快，收缩时间延长，舒张时间缩短。
3. 肾上腺素组：心脏收缩幅度增大，频率加快，收缩时间延长，舒张时间缩短。
4. 乙酰胆碱组：心脏收缩幅度减小，频率减慢，收缩时间缩短，舒张时间延长。
六、实验结论1. 离体蛙心在灌流条件下可以维持一定时间的收缩和舒张功能。
2. 氯化钙和肾上腺素可以增强离体蛙心的收缩功能，使收缩幅度增大、频率加快。
离体蟾蜍心脏灌流实验数据处理与分析
离体蟾蜍心脏灌流实验数据处理与分析
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步骤二：在任氏液中加入1：100000肾上腺素溶液1-2滴，心搏曲线稳定后记录45s。
步骤三：用任氏液洗脱3次，加入1-2ml任氏液，待曲线稳定45s后，向灌流液中加5% NaCl溶液2-6滴，心搏曲线稳定后记录45s 。
步骤四：用任氏液洗脱数次，曲线基本恢复后，加入1-2ml任氏液，待曲线稳定45s后，在任氏液中加1% KCl溶液1-2滴，心搏曲线稳定后记录45s 。
步骤五：用任氏液洗脱数次，曲线基本恢复后，加入1-2ml任氏液，待曲线稳定45s后，在任氏
1-2滴，心搏曲线稳定后记录液中加2%CaCl
2
45s 。
步骤六：将上述溶液吸出，用新鲜任氏液换洗数次，加入1-2ml任氏液，待曲线稳定后记录45s ，在任氏液中加1:1000000 的 ACh溶液1-2滴，心搏曲线稳定后记录45s 。
离体心脏实验报告
一、实验目的1. 掌握离体心脏灌流技术的操作方法。
2. 观察和分析不同理化因素对离体心脏活动的影响。
3. 理解心脏生理学的基本原理，如离子浓度、温度、酸碱度、激素等对心脏功能的影响。
二、实验原理心脏的正常节律性活动依赖于内环境的相对稳定。
改变离体心脏灌流液的理化成分，会影响心肌细胞的兴奋性、自律性、传导性和收缩性，从而影响心脏的舒缩活动。
本实验通过改变灌流液中的离子浓度、温度、酸碱度、激素等，观察对离体心脏活动的影响，进一步理解心脏生理学的基本原理。
三、实验材料与仪器1. 实验动物：蟾蜍2. 实验药品：任氏液、NaCl溶液、CaCl2溶液、KCl溶液、乙酰胆碱溶液、肾上腺素溶液、乳酸溶液、NaHCO3溶液3. 实验仪器：BL-420生物信号分析系统、张力换能器、铁支台、试管夹、蛙类手术器械、蛙心插管、滴管、大烧杯、棉线、双凹夹、滑轮四、实验步骤1. 暴露心脏：取蟾蜍一只，用蛙类手术器械暴露心脏。
2. 心脏插管：将蛙心插管插入心脏，用棉线固定。
3. 摘取心脏：用镊子将心脏从蟾蜍体内取出，置于装有任氏液的培养皿中。
4. 连接仪器：将张力换能器连接到心脏插管，并通过BL-420生物信号分析系统进行数据采集。
5. 实验分组：将实验分为以下几组：空白对照组：用任氏液灌流心脏。
Na+浓度改变组：用不同浓度的NaCl溶液灌流心脏。
K+浓度改变组：用不同浓度的KCl溶液灌流心脏。
Ca2+浓度改变组：用不同浓度的CaCl2溶液灌流心脏。
乙酰胆碱组：用乙酰胆碱溶液灌流心脏。
肾上腺素组：用肾上腺素溶液灌流心脏。
乳酸组：用乳酸溶液灌流心脏。
NaHCO3组：用NaHCO3溶液灌流心脏。
6. 数据采集：观察并记录每组心脏的舒缩节律、幅度和持续时间。
7. 结果分析：分析不同理化因素对离体心脏活动的影响。
五、实验结果1. Na+浓度改变组：随着Na+浓度的增加，心脏的舒缩幅度和持续时间逐渐增加，但超过一定浓度后，心脏活动减弱。
机能实验蛙心实验报告
一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响，如离子浓度、药物等。
3. 掌握实验记录和分析方法。
二、实验原理蛙心灌流实验是生理学中常用的一种实验方法，通过将蛙心置于人工灌流系统中，模拟心脏在体内的生理环境，研究各种因素对心脏活动的影响。
蛙心无营养性血管，离体后采用人工灌流的方法，仍可保持其新陈代谢，心脏仍能有节律的自动收缩、舒张，并维持较长时间。
三、实验材料1. 实验动物：蟾蜍2. 实验器材：蛙心夹、常用手术器械、蛙板（或蜡盘）、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿（或小烧杯）、棉线、任氏液、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸。
四、实验方法与步骤1. 蛙心制备：- 使用手术刀将蛙麻醉，然后破坏蛙的中枢神经系统。
- 暴露心脏，固定蛙心，将动脉圆锥下方穿一线，用于连接灌流装置。
- 游离心脏，将心脏的主动脉和肺动脉分别插入蛙心夹。
2. 连接实验装置：- 将蛙心夹固定在支架上，连接张力传感器。
- 将灌流液（任氏液）置于培养皿中，通过滴管控制灌流液的流速。
- 将灌流液通过动脉圆锥下方的线，连接到蛙心夹的主动脉。
3. 观察记录：- 观察蛙心的收缩和舒张情况，记录心脏跳动频率和幅度。
- 分别进行以下实验：- 以0.65%NaCl溶液替换任氏液，观察心脏跳动频率和幅度变化。
- 在灌流液中加入2%CaCl2（50ul）溶液，观察心脏跳动频率和幅度变化。
- 在灌流液中加入1%KCl（50ul）溶液，观察心脏跳动频率和幅度变化。
- 在灌流液中加入1:10000肾上腺素（50ul）溶液，观察心脏跳动频率和幅度变化。
- 在灌流液中加入1:10000乙酰胆碱（50ul）溶液，观察心脏跳动频率和幅度变化。
4. 数据分析：- 对实验数据进行统计分析，比较不同处理组之间的差异。
五、实验结果与分析1. 正常蛙心收缩活动：- 在任氏液中，蛙心以正常节律收缩和舒张，跳动频率和幅度适中。
离体心脏灌流实验报告
一、实验目的1. 熟悉离体心脏灌流技术的基本操作。
2. 观察和分析不同生理、病理因素对离体心脏功能的影响。
3. 掌握记录和分析心脏功能指标的方法。
二、实验原理离体心脏灌流实验是生理学研究中常用的一种方法，通过将心脏从机体中取出，在体外模拟生理环境条件下进行灌流，观察和分析心脏功能的变化。
实验中，通过改变灌流液的成分、温度、pH值等条件，可以研究不同因素对心脏功能的影响。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：青蛙、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、长滴管、铁支架、玻璃管、量筒、秒表等。
2. 实验仪器：显微镜、电子天平、恒温器、恒温水浴箱、高压消毒锅等。
四、实验方法与步骤1. 实验准备（1）取一只青蛙，用蛙类手术器械进行解剖，暴露心脏。
（2）将心脏夹在蛙心夹上，用线固定在蛙板上。
（3）在心脏主动脉下方穿一线，结扎并留出一段备用。
（4）将心脏主动脉左支结扎，于动脉圆锥处剪一向心斜切口，插入灌流管。
2. 灌流实验（1）将灌流管一端插入恒温器中的任氏液中，另一端与心脏主动脉相连。
（2）调整恒温器，使任氏液温度保持恒定。
（3）开启灌流泵，使任氏液以恒定速度灌流心脏。
（4）观察心脏收缩情况，记录心率、收缩幅度等指标。
（5）依次改变灌流液的成分、温度、pH值等条件，观察心脏功能的变化。
3. 实验数据记录与分析（1）记录不同灌流条件下心脏的心率、收缩幅度等指标。
（2）分析不同生理、病理因素对离体心脏功能的影响。
（3）绘制心脏功能曲线，分析实验结果。
五、实验结果与分析1. 灌流液中加入肾上腺素后，离体心脏心率加快，收缩幅度增强。
2. 灌流液中加入乙酰胆碱后，离体心脏心率减慢，收缩幅度减弱。
3. 降低灌流液温度后，离体心脏心率减慢，收缩幅度减弱。
4. 提高灌流液pH值后，离体心脏心率加快，收缩幅度增强。
六、实验结论1. 肾上腺素和乙酰胆碱对离体心脏功能具有调节作用，肾上腺素使心脏兴奋，乙酰胆碱使心脏抑制。
2. 温度和pH值对离体心脏功能有显著影响，低温和碱性环境有利于心脏功能的维持。
蛙心灌流实验实验报告
一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。
3. 掌握实验操作技能，提高实验观察和分析能力。
二、实验原理蛙心灌流实验是研究心肌细胞生理特性的常用方法。
通过离体蛙心灌流，可以观察和比较不同理化因素对心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的影响。
实验中，利用任氏液作为灌流液，维持蛙心的正常生理活动。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：蟾蜍、蛙心夹、任氏液、0.65%NaCl溶液、2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸等。
2. 实验仪器：手术显微镜、蛙板、蛙心夹、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿、棉线、套管夹等。
四、实验步骤1. 制备蛙心标本：将蟾蜍放入装有冰块的容器中，使其昏迷。
在蟾蜍背部剪一小口，暴露心脏。
在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎。
将心脏与动脉分离，用任氏液冲洗，置于蛙心夹上。
2. 连接实验装置：将蛙心夹固定于支架上，连接张力传感器和计算机采集系统。
将任氏液滴入培养皿中，用滴管控制液面高度。
3. 观察正常蛙心活动：打开计算机采集系统，观察蛙心在任氏液中的正常收缩和舒张活动。
4. 改变灌流液成分，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化：a. 以0.65%NaCl溶液替换任氏液，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
b. 在灌流液中加入2%CaCl2溶液，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
c. 在灌流液中加入1%KCl溶液，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
d. 在灌流液中加入1:10000肾上腺素，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
e. 在灌流液中加入1:10000乙酰胆碱，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
f. 在灌流液中加入3%乳酸，观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。
5. 记录观察结果，分析实验现象。
五、实验结果与分析1. 以0.65%NaCl溶液替换任氏液后，心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性稍微减小，表现为心跳频率和幅度降低。
蟾蜍心脏灌流实验报告
一、实验目的1. 熟悉离体蟾蜍心脏灌流实验的操作方法。
2. 通过观察灌流液中离子浓度的改变，了解相应受体的激动剂和阻断剂对心脏收缩活动的影响。
3. 掌握离体心脏标本的制备方法。
二、实验原理蟾蜍心脏离体后，若使用与其内环境相似的任氏液进行灌流，在一定时间内，心脏仍能维持节律性收缩和舒张。
通过改变任氏液的组成成分，如Na、K、Ca2+的浓度和pH值等，可以观察到心脏跳动频率和幅度的变化。
三、实验材料1. 实验动物：蟾蜍一只2. 实验器材：解剖盘、剪刀、镊子、针筒、灌流管、任氏液、生理盐水、CaCl2溶液、KCl溶液、滴管、记录仪等3. 实验试剂：任氏液、生理盐水、CaCl2溶液、KCl溶液四、实验步骤1. 蟾蜍心脏标本的制备（1）取蟾蜍一只，破坏脑和脊髓。
（2）打开胸腔，暴露心脏。
（3）用镊子轻轻提起心脏，用剪刀剪断心包膜，游离心脏。
（4）将心脏放入任氏液中，以保持其活性。
2. 动脉插管（1）在A圆锥和左主A根部剪一小口。
（2）将灌流管插入心室内，直至血液涌入灌流管，并随心跳上下波动。
3. 灌流实验（1）将灌流管固定在灌流装置上，确保灌流液顺畅流入心脏。
（2）开始灌流，观察心脏跳动频率和幅度。
（3）依次进行以下实验：a. 以0.65%NaCl溶液替换任氏液，观察心脏跳动频率和幅度变化。
b. 在灌流液中加入2%CaCl2溶液（50μl），观察心脏跳动频率和幅度变化。
c. 在灌流液中加入1%KCl溶液（50μl），观察心脏跳动频率和幅度变化。
d. 向离体蟾蜍心脏的灌流液中滴加1% KCl溶液2-3滴，观察心脏跳动情况。
4. 实验结果记录与分析（1）记录每次实验前后的心脏跳动频率和幅度。
（2）分析不同实验条件下心脏跳动频率和幅度的变化，探讨离子浓度对心脏收缩活动的影响。
五、实验结果1. 以0.65%NaCl溶液替换任氏液后，心脏跳动频率和幅度稍微减小。
2. 在灌流液中加入2%CaCl2溶液后，心脏跳动频率和幅度稍微加大。
蟾蜍离体心脏灌流.doc
蟾蜍离体心脏灌流一：实验目的1、掌握两栖类动物离体心脏灌流的方法，掌握斯氏插管法2、了解心肌的生理特性，证明心脏具有自动节律性收缩的能力+ K+ C a2+ 对心脏活动的影响。
3、观察Na4、理解内环境各种理化因素的相对恒定对于细胞进行正常生命活动的重要意义。
二：实验原理1、正常蛙心能按静脉窦的节律性自动产生兴奋，心脏的自动节律性活动需要有一个合适的理化环境。
蟾蜍心脏离体后，用任氏液灌流，在一定时间内仍能保持节律性兴奋和收缩活动。
由于心脏的正常活动还要依赖于内环境因素的相对稳定，改变灌流液的成分可引起心脏活动的改变。
心肌细胞外离子浓度的变化和因体内生物活性物质（如激素）引起的细胞膜离子通透性的改变，对心肌细胞的生物电活动和生理特性必然会产生明显的影响。
2、影响心肌细胞电生理特征的原因：（1）心肌的自动节律性：①最大复极电位与阈电位的差异；② 4 期自动除极速度（2）心肌的兴奋性：①静息电位的水+浓度②Na+通道的性状（3）心肌的传导性：主要平：依赖于细胞外的K取决于动作电位0 期除极速度和幅度（4）心肌的收缩性：依赖于细胞外钙离子的浓度+3、涉及到的几种离子对心脏活动的影响：①钾离子：K 参与心肌细胞的复极化+和自律细胞的 4 期自动去极化过程，其改变不仅取决于细胞内外K浓度梯度，+通透性有关，因此其影响是多方面的；②钙离子：Ca2+对Na+ 还与细胞膜对K内流存在竞争抑制作用，称作膜屏障作用，对静息电位无影响。
其浓度升高可使心肌细胞的兴奋性降低，传导减慢，收缩力增强。
三：实验器材动物：蟾蜍（尽量选择体型大的蟾蜍）试剂：5% NaCl、2%CaCl2、1%KCl 溶液，任氏液器材：常用手术器械，张力换能器，蛙心套管，套管夹，滑轮，双凹夹，支架，烧杯四：实验方法与步骤1、离体蛙心的制备取一只蟾蜍，进行双毁髓，按照上次实验的方法进行暴露心脏并仔细识别心脏周围的大血管。
在左主动脉的下方穿一线，于动脉圆锥处结扎（动物个体小时，结扎位置可靠上些）。
离体蛙心灌流实验
实验五离体蛙心灌流实验一实验目的1、了解蟾蜍离体心脏的灌流的方法。
2、观察细胞外液钾离子、钙离子浓度变化对心脏活动的影响。
二实验原理心脏离体后，如用人工灌流的方法，保持其新陈代谢的顺利进行，则心脏仍能有节律的自动收缩和舒张，并可维持较长的时间。
离体心脏所需的条件应与动物内环境的理化性质基本相近，因此改变灌流液的理化因素，则可引起心脏活动的变化。
1、任氏液：正常对照含有NaCl、CaCl2、KCl、NaH2PO4、 Na2HPO4和蒸馏水，其电解质、晶体渗透压、pH值与蛙的组织液相近。
2、0.65%NaCl灌流：3、2%CaCl2灌流4、 1%KCl灌流5、1:10000 E 灌流6、1:10000 Ach灌流7、心得安β1受体阻断剂，抑制肾上腺素与β1受体结合，使E不能发挥作用。
8.、阿托品M受体阻断剂，抑制Ach减慢心率，加速房室传导，增加心房收缩力。
三实验器材微机生物信号处理系统， physiology系统，学校服务器系统，蟾蜍离体蛙心，任氏液，1%KCl，3%CaCl2，65%NaCl，1/10000 E，心得安+1/10000,1/10000 Ach，阿托品+1/10000 Ach。
四实验步骤1、标本制备（观看视频）2、仪器及标本的连接3、具体软件操作：1）离子试剂：任氏液→0.65%NaCl溶液→任氏液清洗→1%KCl溶液→任溶液→任氏液清洗氏液清洗→2%CaCl22）药物试剂：肾上腺素（E）→任氏液清洗→心得安→任氏液清洗→Ach，任氏液清洗→阿托品→任氏液清洗。
五实验结果图1 离体蛙心灌流表1 离体蛙心灌流数据记录六结果分析此实验说明心脏具有自律性，兴奋性，传导性，收缩性，离体心脏静脉窦还能产生兴奋并传导到心房和心室，引起心脏有节律的兴奋和收缩。
体内细胞所直接生存的环境较为稳定，内环境的稳态是细胞、器官维持正常生存和活动的必要条件，所以改变灌流的溶液，会引起心脏收缩的改变。
蛙类离体心脏灌流及药物影响
一．实验课题名称：蛙类离体心脏灌流及药物影响二．文献综述：作为蛙心起搏点的静脉窦能按一定节律自动产生兴奋，因此，只要将离体的蛙心保持在适宜的环境中，在一定时间内仍能产生节律性兴奋和收缩活动。
心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境，离体心脏也是如此，离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响，可以通过改变灌流液的某些成分，观察其对心脏活动的作用。
心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性和收缩性，都与钠、钾及钙等离子有关。
血钾浓度过高时(高于7.9mmol/L)，心肌兴奋性、自律性、传导性、收缩性都下降，表现为收缩力减弱、心动过缓和传导阻滞，严重时心脏可停搏于舒张期。
血钙浓度升高时，心肌收缩力增强，过高可使心室停搏于收缩期。
血钙浓度降低，心肌收缩力减弱。
血中钠离子浓度的轻微变化，对心肌影响不明显，只有发生明显变化时，才会影响心肌的生理特性。
肾上腺素可使心率加快、传导加快和心肌收缩力增强，乙酰胆碱则与肾上腺素的作用相反。
心脏的正常节律性活动需要一个适宜的内环境，内环境的变化直接影响着心脏的正常活动K＋对心脏活动的影响心肌对细胞外K＋浓度变化比较敏感，其中心房肌最敏感，房室束－浦肯野纤维系统次之，窦房结敏感性较低。
细胞外液钾浓度增高时，对兴奋性的影响与其浓度增高的程度有关。
当K＋浓度轻度或者中度升高时，细胞内外K＋的浓度梯度减小，K＋外流的力量减弱,静息电位（RP）的绝对值减小,和阈电位(TP)差值减小,细胞的兴奋性增高；当K＋的浓度大幅度的升高，RP的绝对值减小（膜内－55mv左右）时，钠通道的开放效率降低，钠通道逐渐失活，兴奋性降低或者丧失，严重时，可导致心肌停搏于舒张状态。
此时，仅由Ca2＋的内流来构成动作电位，故上升支小而缓慢，使兴奋传导速度减慢，传导性降低。
当细胞外K＋的浓度升高时，细胞膜对钾的通透性增高，心室肌细胞复极过程加速，平台期缩短，不应期也缩短。
4期自动除极速度减慢，导致窦房结自律性降低，心率减慢。
生理学实验报告-蛙心灌流
蛙类离体心脏灌流一、【目的要求】1、学习离体蛙心灌流法。
2、观察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素(Adr),乙酰胆碱(ACh),乳酸对离体心脏活动的影响。
二、【原理】将离体蛙心（失去神经支配的蛙心）保持在适宜的环境中，在一定的时间内仍然能够保持节律性收缩，心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境，离体心脏也是如此，离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响，可以通过改变灌流液的某些成分，观察其对心脏活动的作用。
心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性，都与钠、钾及钙等离子有关。
外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。
三、【实验仪器】青蛙、常用手术器械、蛙板(或蜡盘)、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、任氏液。
套管夹、0．65％NaCl、2％CaCl2、1％KCl、1：10000肾上腺素、1：10000乙酰肌碱、3%乳酸。
四、【方法与步骤】1、斯氏蛙心插管法（1）一只青蛙，双毁髓后背位置于蜡盘中，按前面的方法暴露心脏。
仔细识别心脏周围的大血管(见右图)。
在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎(动物个体小时，结扎位置可靠上些)。
再从左右两主动脉下方穿一线，并打一活结备用。
左手提起主动脉上的结扎线，右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口。
选择大小适宜的蛙心套管，然后将盛有少量(套管内2～3 cm高度)任氏液(内加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管，山开口处插入动脉圆锥(见右图)。
当套管尖端到达动脉圆锥基部时，应将套管稍稍后退，使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进，经主动脉瓣插入心室腔内(于心室收缩时插入，但不可插得过深，以免心室壁堵住套管下口)。
此时可见套管中血液冲人套管，并使液面随心脏搏动而亡下移动，表明操作成功(否则需退回并重新插入)。
用滴管吸去套管中的血液，更换新鲜任氏液。
某些因素对离体蛙心心脏活动的影响实验报告
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正常的蛙心能按静脉窦的节律性自动产生兴奋，心脏的自动节律性活动，需要有一个合适的理化环境。 蟾蜍心脏离体后，用任氏液灌流，在一定时间内仍能保持节律性兴奋和收缩活动。由于心脏的正常活动还有赖于内环境因素的相对稳定，改变灌流液的成分可引起心脏活动的改变。
负性变时等效应。
心交感神经与去甲肾上腺素
心交感神经节后纤维释放的递质是去甲肾上
腺素，激动心肌细胞膜上的ß受体，产生正性变
力、正性传导、正性变时等效应。
相关理论知识
实验目的 1.本实验的目的是学习离体蛙心的灌流方法。 2.用离体蛙心灌流的方法观察：
① K+、Ca2+ ② 酸、碱度 ③ 肾上腺素（E） 乙酰胆碱（Ach）
破坏脑和脊髓 暴露心脏
实验步骤
一、离体蟾蜍心脏标本制备 1.观察心脏的解剖结构 （腹面） （背面）
实验步骤 一、离体蟾蜍心脏标本制备 蛙心插管 1.1 在主A干下穿一线打一松结；在左主A下再穿一线结扎。
”
实验步骤 一、离体蟾蜍心脏标本制备 1.蛙心插管 1.2 在主动脉根部剪一 斜口，将插管插入动脉 圆锥， 在心室收缩时 将插管插入心室，结扎 固定。
兴奋-收缩耦联↑
收缩力↑
cAMP
结果分析与讨论
5. 1:10000 Ach灌流
与心肌M受体结合
K+外流↑, Ca2+内流↓
E-C耦联↓
收缩力↓
最大复极电位↑ 4期K+外流↑
自律性↓
心率↓
[Ca2+]i↓
生理学实验报告_蛙心灌流_(2)
蛙类离体心脏灌流一、【目的要求】1、学习离体蛙心灌流法。
2、观察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素(Adr),乙酰胆碱(ACh),乳酸对离体心脏活动的影响。
二、【原理】将离体蛙心（失去神经支配的蛙心）保持在适宜的环境中，在一定的时间内仍然能够保持节律性收缩，心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境，离体心脏也是如此，离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响，可以通过改变灌流液的某些成分，观察其对心脏活动的作用。
心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性，都与钠、钾及钙等离子有关。
外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。
三、【实验仪器】青蛙、常用手术器械、蛙板(或蜡盘)、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、任氏液。
套管夹、0．65％NaCl、2％CaCl2、1％KCl、1：10000肾上腺素、1：10000乙酰肌碱、3%乳酸。
四、【方法与步骤】1、斯氏蛙心插管法（1）一只青蛙，双毁髓后背位置于蜡盘中，按前面的方法暴露心脏。
仔细识别心脏周围的大血管(见右图)。
在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎(动物个体小时，结扎位置可靠上些)。
再从左右两主动脉下方穿一线，并打一活结备用。
左手提起主动脉上的结扎线，右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口。
选择大小适宜的蛙心套管，然后将盛有少量(套管内2～3 cm高度)任氏液(内加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管，山开口处插入动脉圆锥(见右图)。
当套管尖端到达动脉圆锥基部时，应将套管稍稍后退，使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进，经主动脉瓣插入心室腔内(于心室收缩时插入，但不可插得过深，以免心室壁堵住套管下口)。
此时可见套管中血液冲人套管，并使液面随心脏搏动而亡下移动，表明操作成功(否则需退回并重新插入)。
用滴管吸去套管中的血液，更换新鲜任氏液。
娃心灌流实验报告
一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。
3. 掌握心脏生理学基本知识，提高实验操作技能。
二、实验原理蛙心灌流实验是一种常用的生物学实验方法，通过将蛙心取离体后，采用人工灌流的方法，模拟心脏在体内的血液供应，观察灌流液中理化因素对心脏活动的影响。
蛙心灌流实验中，常用的灌流液为任氏液，其中含有与心脏内环境相似的离子成分，如Na+、K+、Ca2+等。
改变灌流液中这些离子的浓度，可以观察到心脏活动的变化。
三、实验材料与方法1. 实验材料：蟾蜍、任氏液、生理盐水、CaCl2、KCl、注射器、灌流管、蛙心夹、显微镜等。
2. 实验方法：（1）将蟾蜍处死，剥皮，暴露心脏，用蛙心夹固定心脏。
（2）将心脏的动脉插管，连接灌流管，并调整灌流速度。
（3）用生理盐水冲洗灌流管，使灌流液充满管内。
（4）观察心脏在任氏液中的正常活动，记录心率、振幅等指标。
（5）分别改变灌流液中Na+、K+、Ca2+的浓度，观察心脏活动的变化，记录心率、振幅等指标。
（6）对实验结果进行分析和讨论。
四、实验结果与分析1. 正常蛙心在任氏液中的活动：心率适中，振幅适中，处于与内环境相似的任氏液中，蛙心以正常节律收缩和舒张。
2. 改变灌流液中Na+浓度：当灌流液中Na+浓度降低时，心率减慢，振幅减小；当灌流液中Na+浓度升高时，心率加快，振幅增大。
3. 改变灌流液中K+浓度：当灌流液中K+浓度升高时，心率加快，振幅增大；当灌流液中K+浓度降低时，心率减慢，振幅减小。
4. 改变灌流液中Ca2+浓度：当灌流液中Ca2+浓度升高时，心率加快，振幅增大；当灌流液中Ca2+浓度降低时，心率减慢，振幅减小。
五、结论与展望1. 结论：通过本实验，我们掌握了离体蛙心灌流的方法，观察到理化因素对蛙心活动的影响，进一步了解了心脏生理学的基本知识。
2. 展望：本实验为后续心脏生理学实验奠定了基础。
在今后的实验中，我们可以进一步研究其他因素对心脏活动的影响，如pH值、温度等，以深入了解心脏生理学的基本原理。
蟾蜍水肿灌流实验报告
一、实验目的1. 了解蟾蜍水肿灌流实验的基本原理和操作步骤。
2. 观察蟾蜍心脏在不同灌流条件下的变化，分析水肿对心脏功能的影响。
3. 掌握蟾蜍心脏灌流实验的技术和方法。
二、实验材料1. 实验动物：蟾蜍1只2. 实验仪器：解剖显微镜、灌流装置、注射器、剪刀、镊子、针筒、生理盐水、酚红指示剂、蒸馏水、酒精、甘油、碘酒、酒精灯等。
三、实验方法1. 实验动物处死：将蟾蜍放入装有酒精的容器中，使其失去意识后处死。
2. 剖取心脏：打开蟾蜍胸腔，取出心脏，置于解剖显微镜下观察。
3. 灌流实验：（1）准备工作：将灌流装置固定好，连接好注射器和灌流管道，确保无泄漏。
（2）灌流：将酚红指示剂加入生理盐水中，使溶液呈粉红色。
用注射器将溶液注入灌流装置，打开灌流开关，使溶液通过心脏。
（3）观察：在解剖显微镜下观察心脏在不同灌流条件下的变化，如心脏搏动、颜色、形态等。
（4）实验分组：a. 对照组：正常灌流条件下观察心脏变化。
b. 水肿组：在正常灌流条件下，加入甘油，使溶液浓度为0.5%，观察心脏变化。
c. 酚红组：在正常灌流条件下，加入酚红指示剂，观察心脏变化。
四、实验结果1. 对照组：心脏搏动有力，颜色鲜红，形态正常。
2. 水肿组：心脏搏动减弱，颜色暗红，形态增大，出现水肿现象。
3. 酚红组：心脏搏动无明显变化，颜色呈粉红色，酚红指示剂通过心脏。
五、实验分析1. 通过观察心脏在不同灌流条件下的变化，发现水肿对心脏功能有显著影响。
水肿组心脏搏动减弱，颜色暗红，形态增大，说明水肿导致心脏负担加重，影响心脏功能。
2. 酚红组心脏搏动无明显变化，说明酚红指示剂对心脏功能无显著影响。
3. 本实验结果表明，蟾蜍水肿灌流实验是一种有效的研究水肿对心脏功能影响的实验方法。
六、实验结论1. 水肿对蟾蜍心脏功能有显著影响，导致心脏负担加重，影响心脏搏动和形态。
2. 蟾蜍水肿灌流实验是一种有效的研究水肿对心脏功能影响的实验方法。
七、实验讨论1. 本实验结果表明，水肿对蟾蜍心脏功能有显著影响，这与临床实际情况相符。
实验6 蟾蜍离体心脏灌流
注意：
① 每种试剂使用后，都要用新鲜任氏液冲洗2～3次尽量控制在一定高度，约2cm左右。
③每项实验都要有对照。
④滴加试剂的滴管要专用，每次滴加试剂时，要垂直直接滴到液面上。
目的要求
基本原理
实验步骤
目的要求
基本原理
实验步骤
1、学习两栖类动物离体心脏灌流的方法，掌 握斯氏插管法。 2、了解心肌的生理特性，证明心脏具有自动 节律性收缩的能力。 3、观察Na+、K+、Ca2+、肾上腺素、乙酰胆碱 (ACh)对心脏活动的影响。 4、理解内环境各种理化因素的相对恒定对于 细胞进行正常生命活动的重要意义。
心肌 兴奋性 具较长的有效不应期，时间上相当 于收缩期及舒张早期 自律性 部分心肌细胞具自律性 传导性 肌细胞间以闰盘相接，具合胞体性 质，故传导速度快 收缩性 具“全或无”式收缩；其收缩幅度 和刺激强度无关；在正常生理状态 下不发生强直收缩，但有期前收缩 和代偿间歇；依赖于外源性Ca2+ 腓肠肌（骨骼肌） 绝对不应期远远小于收缩期 无 细胞内可进行信息的传导，但 细胞与细胞间不能传递信息 收缩速度快而收缩力大，其收 缩幅度与刺激强度及频率有关， 收缩形式会发生改变；依赖于 内源性Ca2+
目的要求
基本原理
1、蟾蜍离体心脏的灌流方法
实验步骤
2、不同离子溶液对蟾蜍心脏的影响
蟾蜍离体心脏的灌流方法
目的要求
基本原理
实验步骤
1、双毁髓—离体心脏制备
蟾蜍离体心脏的灌流方法
目的要求
基本原理
实验步骤
注意：①剪开动脉管壁时，使切口呈“V”字形，但勿剪断血管。
离体蛙心灌流及药物对心脏的影响
离体蛙心灌流及药物对心脏的影响离体蛙心灌流及药物对心脏的影响一、实验目的：1、学习蛙心灌流方法。
2、了解离体心脏的自律性与环境中各因素变化的关系，观察理化因素对蛙心活动的影响。
二、实验对象：蟾蜍三、实验方法：1、标本制备：取蟾蜍→破坏CNS→固定→剪皮→打开胸腔（暴露胸骨柄，用镊子把胸骨柄捏起来，用粗剪刀剪断，沿胸骨将锁骨剪断，去除多余的骨头，注意勿将心脏剪破）→用眼科剪小心剪开心包膜→暴露心脏→在主动脉叉下方穿一根丝线备用→用蛙心夹在心舒张期夹住心尖部→在左侧主动脉分叉处2-3mm处剪一剪口→将盛有一定量任氏液的蛙心插管插入到主动脉球→将插入到主动脉球的套管稍向后退，再向左下逆时针旋转90°，插入心室→结扎固定→剪断血管和背面静脉窦以下组织，游离标本2、连接装置：蛙心管内保持2ml灌流液，用木夹夹住蛙心套管，蛙心夹的线与张力换能器相连，换能器与电脑的相应通道相连。
3、运行电脑：打开电脑→Medlab→实验/常用生理实验→离体蛙心灌流四、实验结果：分别观察正常心脏活动曲线及加入不同溶液后的心脏活动曲线的变化。
曲线规律：心脏节律；曲线疏密：心率曲线幅度：心室收缩强度；曲线顶点：心室收缩最大强度；曲线基线：心室舒张最大程度顺序观察项目药量心肌(率、力)变化正常任氏液灌流正常1 0.65%NaCl 灌流1~2d2 2% CaCl23 1%KCl 1~2d4 1:10000 NA 1~2d5 1:100000 ACh 1~2d6 3% LH 1~2d2.5% NaHCO3 2~4d7 1:100000 Isop 1ml +任氏液1ml8 1:1000 prop 0.2ml+任氏液1.8ml出现效应后，抽出一半液体后立即加入Isop1ml五、实验讨论：心肌细胞兴奋时，通过兴奋-收缩耦联机制，触发心肌细胞收缩。
心肌收缩的特点是：1.对细胞外Ca2+浓度的依赖性高；2.“全或无”式收缩1、 0.65%NaCl灌流与正常任氏液相比[Ca2+]↓→ Ca2+内流↓→兴奋-收缩耦联↓→收缩力↓（1～2滴）→[Ca2+]↑→Ca2+内流↑→兴奋-收缩耦联↑→收缩力↑2、2%CaCl2舒张期Ca2+与肌钙蛋白不完全解离，产生Ca2+强直，基线上移。
离体蛙心灌流实验报告
离体蛙心灌流实验报告
实验目的，通过离体蛙心灌流实验，观察心脏在不同药物作用下的生理变化，
为心脏药理学研究提供实验数据。
实验材料与方法，取新鲜的蛙心，进行离体灌流实验。
首先，将蛙心置于离体
心脏灌流装置中，通过主动脉插管进行心脏灌流。
然后，分别加入不同药物溶液，如肾上腺素、乙酰胆碱等，观察心脏的生理变化。
实验过程中，记录心脏的心率、收缩力、舒张力等指标，并进行统计分析。
实验结果，在加入肾上腺素后，观察到蛙心的心率明显增加，心脏收缩力增强，舒张力减弱；而在加入乙酰胆碱后，心率明显减慢，心脏收缩力减弱，舒张力增强。
这些结果表明，肾上腺素具有增强心脏收缩力和加快心率的作用，而乙酰胆碱则具有减慢心率和减弱心脏收缩力的作用。
实验讨论，离体蛙心灌流实验是一种常用的心脏药理学研究方法，通过模拟体
内环境，观察心脏在不同药物作用下的生理变化。
本实验结果与心脏药理学理论相符，说明离体蛙心灌流实验是一种可靠的实验方法，能够为心脏药理学研究提供重要数据。
结论，通过离体蛙心灌流实验，我们观察到了心脏在不同药物作用下的生理变化，验证了心脏药理学理论。
这为心脏药物的研发和临床应用提供了重要参考，也为心脏疾病的治疗提供了新的思路和方法。
在今后的研究中，我们将进一步探索心脏药物的作用机制，寻找更多有效的心
脏药物，并将离体蛙心灌流实验应用于心脏药理学研究的更多领域，为心脏疾病的治疗和预防做出更大的贡献。
通过本次实验，我们对离体蛙心灌流实验有了更深入的了解，并对心脏药理学
研究有了更加清晰的认识。
希望本实验能为相关领域的研究工作提供一定的参考和帮助。
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离体蟾蜍心脏灌流实验数据处理与分析
————————————————————————————————作者：————————————————————————————————日期:
ﻩ
实验四 离体蟾蜍心脏灌流实验数据处理与分析
E ｆfects of adr ｅnali ｎe,ａc ｅytlcholin ｅ, potassiu ｍ and ｃa ｌｃium ions on iso ｌated toad heart Gr ｏups heart rate
振幅(g)
基线变化
control per ｆusio ｎ c ｏn ｔrol per ｆusio
ｎ control
p ｅrf ｕｓion 5%Na+
1１ 11 ３.55 ３．44 正常 峰略降低 ２％Ca2＋ 1４ 15 3.7 4.０1 正常 峰略增高 1%K+
2１ 19 3.52 3.31 正常 峰较多降低 1：１00０00 Adr
１6 ３0 4.26 ５.3５ 正常 峰急剧增高
1:1０0０0００ Ａch
２5
18
３.５5
3．39
正常
频率急剧下降，峰急剧降低
/通用格式
/通用格式
/通用格式
/通用格式
/通用格式
/通用格式
/通用格式
/通用格式
/通用格式
5%Na+
2%Ca2+
1%K+
1:100000 Adr 1:1000000 Ach
control perfusion
步骤一：向插管中加入1mｌ任氏液,心搏曲线稳定后记录正常的心搏曲线45s。
16加入试剂无心率(次/
分)
4.２６
平均收缩
张力(g)
心脏表现正常跳动
现象分析
步骤二：在任氏液中加入1：100000肾上腺素溶液1-２滴,心搏曲线稳定后记录45s。
30
加入试剂肾上腺素心率（次/
分)
平均收缩
5．３5
张力（g）
心脏表现剧烈加速跳动,现象十分明显
现象分析加肾上腺素心肌收缩能力增强，是
因为肾上腺素与心肌细胞膜上的β1
受体结合，心肌细胞和肌浆网膜C
ａ通透性增强,肌浆中Ca浓度增加，
心肌收缩能力增强。
步骤三:用任氏液洗脱3次，加入1-２mｌ任氏液，待曲线稳定45s后，向灌流液中加5% NaCl 溶液２－６滴，心搏曲线稳定后记录４5s 。
加入试剂５% NaCl心率(次／
１1
分)
３．４４
平均收缩
张力（g)
心脏表现心脏跳动微弱缓慢
现象分析加入NaCl后心跳减弱是由于心肌收
缩活力是由Ca离子触发的,心肌收
缩的强弱与细胞外Ca离子的浓度成
正比,当Na＋明显增高时,膜内外钠
的浓度差梯度增大，因此,快反应细
胞Na＋内流加快，０期去极速度和
幅度均增加，导致传导性和自律性
增高。
同时Ｎa＋内流的增多促进细
胞内Ca２+的外运使细胞内Cａ2＋
浓度降低,因此,心肌收缩能力减弱。
步骤四:用任氏液洗脱数次,曲线基本恢复后，加入1－2ｍｌ任氏液，待曲线稳定45s后，在任氏液中加1％KＣl溶液１-2滴，心搏曲线稳定后记录45ｓ。
19加入试剂1% KCｌ心率(次/
分）
3.３1
平均收缩
张力(g）
心脏表现心脏跳动微弱
现象分析加入ＫＣl后细胞外K升高，K与Ｃ
ａ在细胞膜上有竞争性抑制，Ｋ抑
制细胞膜对Ｃa转运所以进入细胞
内Cａ减少，所以心肌的兴奋收缩联
过程减弱，因此心肌收缩力降低。
步骤五：用任氏液洗脱数次,曲线基本恢复后,加入1-２ml任氏液，待曲线稳定４5s后,在任氏液中加2%CaCｌ21-2滴,心搏曲线稳定后记录45s。
15
加入试剂2%ＣaCl2心率（次/
分)
4.01
平均收缩
张力（ｇ)
心脏表现心脏跳动收缩力加强
现象分析加入ＣａＣl后，心肌收缩增强,因此
心肌的收缩活性与心肌肌浆中Cａ
离子浓度的高低有关,当Cａ离子浓
度升高至10-5Ｍ水平时，作为钙受
体的肌钙蛋白结合了足够的Ca离
子,引起肌钙蛋白分子构型的改变，
从而触发肌丝滑行，肌纤维收缩，
当肌浆中Cａ离子浓度降至10－７
Ｍ时,Ca离子与肌钙蛋白解离,心肌
随之舒张，用高Ｃa离子灌注心脏,
使肌浆中Ｃa离子浓度不断升高,Ca
离子与肌钙蛋白结合数量不断增加,
于是心肌持续收缩。
步骤六:将上述溶液吸出,用新鲜任氏液换洗数次，加入1-２ｍｌ任氏液,待曲线稳定后记录４5ｓ，在任氏液中加1:10000０0的ＡCh溶液1-2滴，心搏曲线稳定后记录45s 。
加入试剂ＡCh心率(次/
１８
分）
３.39
平均收缩
张力（g）
心脏表现心脏几乎停止跳动
现象分析加乙酰胆碱心脏收缩能力减弱,是因
为乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M受
体结合使心肌细胞膜K通道的通透
性增强,促使K外流，最大复极电位
水平升高,自律性降低,并且乙酰胆
碱可直接抑制Ｃａ通道使Cａ内流
减弱,心肌收缩能力降低。