离体蟾蜍心脏灌流实验数据处理与分析
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离体蟾蜍心脏灌流实验数据处理与分析
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实验四 离体蟾蜍心脏灌流实验数据处理与分析
E ｆfects of adr ｅnali ｎe,ａc ｅytlcholin ｅ, potassiu ｍ and ｃa ｌｃium ions on iso ｌated toad heart Gr ｏups heart rate
振幅(g)
基线变化
control per ｆusio ｎ c ｏn ｔrol per ｆusio
ｎ control
p ｅrf ｕｓion 5%Na+
1１ 11 ３.55 ３．44 正常 峰略降低 ２％Ca2＋ 1４ 15 3.7 4.０1 正常 峰略增高 1%K+
2１ 19 3.52 3.31 正常 峰较多降低 1：１00０00 Adr
１6 ３0 4.26 ５.3５ 正常 峰急剧增高
1:1０0０0００ Ａch
２5
18
３.５5
3．39
正常
频率急剧下降，峰急剧降低
/通用格式
/通用格式
/通用格式
/通用格式
/通用格式
/通用格式
/通用格式
/通用格式
/通用格式
5%Na+
2%Ca2+
1%K+
1:100000 Adr 1:1000000 Ach
control perfusion
步骤一：向插管中加入1mｌ任氏液,心搏曲线稳定后记录正常的心搏曲线45s。
16加入试剂无心率(次/
分)
4.２６
平均收缩
张力(g)
心脏表现正常跳动
现象分析
步骤二：在任氏液中加入1：100000肾上腺素溶液1-２滴,心搏曲线稳定后记录45s。
30
加入试剂肾上腺素心率（次/
分)
平均收缩
5．３5
张力（g）
心脏表现剧烈加速跳动,现象十分明显
现象分析加肾上腺素心肌收缩能力增强，是
因为肾上腺素与心肌细胞膜上的β1
受体结合，心肌细胞和肌浆网膜C
ａ通透性增强,肌浆中Ca浓度增加，
心肌收缩能力增强。
步骤三:用任氏液洗脱3次，加入1-２mｌ任氏液，待曲线稳定45s后，向灌流液中加5% NaCl 溶液２－６滴，心搏曲线稳定后记录４5s 。
加入试剂５% NaCl心率(次／
１1
分)
３．４４
平均收缩
张力（g)
心脏表现心脏跳动微弱缓慢
现象分析加入NaCl后心跳减弱是由于心肌收
缩活力是由Ca离子触发的,心肌收
缩的强弱与细胞外Ca离子的浓度成
正比,当Na＋明显增高时,膜内外钠
的浓度差梯度增大，因此,快反应细
胞Na＋内流加快，０期去极速度和
幅度均增加，导致传导性和自律性
增高。同时Ｎa＋内流的增多促进细
胞内Ca２+的外运使细胞内Cａ2＋
浓度降低,因此,心肌收缩能力减弱。
步骤四:用任氏液洗脱数次,曲线基本恢复后，加入1－2ｍｌ任氏液，待曲线稳定45s后，在任氏液中加1％KＣl溶液１-2滴，心搏曲线稳定后记录45ｓ。
19加入试剂1% KCｌ心率(次/
分）
3.３1
平均收缩
张力(g）
心脏表现心脏跳动微弱
现象分析加入ＫＣl后细胞外K升高，K与Ｃ
ａ在细胞膜上有竞争性抑制，Ｋ抑
制细胞膜对Ｃa转运所以进入细胞
内Cａ减少，所以心肌的兴奋收缩联
过程减弱，因此心肌收缩力降低。
步骤五：用任氏液洗脱数次,曲线基本恢复后,加入1-２ml任氏液，待曲线稳定４5s后,在任氏液中加2%CaCｌ21-2滴,心搏曲线稳定后记录45s。
15
加入试剂2%ＣaCl2心率（次/
分)
4.01
平均收缩
张力（ｇ)
心脏表现心脏跳动收缩力加强
现象分析加入ＣａＣl后，心肌收缩增强,因此
心肌的收缩活性与心肌肌浆中Cａ
离子浓度的高低有关,当Cａ离子浓
度升高至10-5Ｍ水平时，作为钙受
体的肌钙蛋白结合了足够的Ca离
子,引起肌钙蛋白分子构型的改变，
从而触发肌丝滑行，肌纤维收缩，
当肌浆中Cａ离子浓度降至10－７
Ｍ时,Ca离子与肌钙蛋白解离,心肌
随之舒张，用高Ｃa离子灌注心脏,
使肌浆中Ｃa离子浓度不断升高,Ca
离子与肌钙蛋白结合数量不断增加,
于是心肌持续收缩。
步骤六:将上述溶液吸出,用新鲜任氏液换洗数次，加入1-２ｍｌ任氏液,待曲线稳定后记录４5ｓ，在任氏液中加1:10000０0的ＡCh溶液1-2滴，心搏曲线稳定后记录45s 。
加入试剂ＡCh心率(次/
１８
分）
３.39
平均收缩
张力（g）
心脏表现心脏几乎停止跳动
现象分析加乙酰胆碱心脏收缩能力减弱,是因
为乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M受
体结合使心肌细胞膜K通道的通透
性增强,促使K外流，最大复极电位
水平升高,自律性降低,并且乙酰胆
碱可直接抑制Ｃａ通道使Cａ内流
减弱,心肌收缩能力降低。