新版第四章、定量分析样品.
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第四章 药物定量分析与分析方法验证
1、含卤素有机药物
含卤素有机药物是指分子结构中所含卤素直接与芳环
如果测得理论板数低于规定的最小理论板数， 应改变色谱柱的某些条件（如柱长、载体性能、色 谱柱填充的优劣等），使理论板数达到要求。
(2)分离度(R)
在定量分析时，要求定量峰与其他峰 或内标峰之间有较好的分离度。除另有规定 外，分离度应大于1.5。
分离度（R）的计算公式见下式：
R 2 t R2 t R1
含量（CX）= f
AX AS / CS
式中，AX为供试品峰面积或峰高；CX为供
试品的浓度 。
丙酸睾酮含量测定采用高效液相法：取本品 对照品适量，精密称定，加甲醇定量稀释成 每lmL中约含1mg的溶液。精密量取该溶液 和内标溶液（1．6mg/ml苯丙酸诺龙甲醇溶 液）各5ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至 刻度，摇匀，取10μl注入液相色谱仪，记录
例
取盐酸麻黄碱0.1532g，精密称定， 加冰醋酸10ml溶解后，加醋酸汞试液 2ml与结晶紫指示液1滴，用HClO4滴 定至绿色，用去0.1022mol/L的高氯 酸滴定液7.50m1，空白试验消耗高氯 酸滴定液0.08ml。已知每1ml高氯酸 滴定液（0.1mol/L）当于20.17mg的 C10H15ON·HCl。试计算盐酸麻黄碱 的百分含量？（99.80％）
1.分离原理
吸附色谱 分配色谱 离子交换色谱 排阻色谱
吸附色谱
根据填充剂吸附活性 对样品的吸收系数不 同而分离
充填剂：硅胶
分配色谱
根据固定相与流动相的极性不同而分为 正相分配色谱和反相分配色谱 两者的区别如下图所示：
固定相
流动相
正相分配
极性
药物分析课件第4章药物定量分析与分析方法验证
○ A．做空白试验 B．做对照实验 ○ C．做回收试验 D．增加平行测定次数 ○ E．选用多种测定方法
[B型题]
HPLC。
按分离方法分为：PC；TLC；柱色谱；GC；
（一）HPLC法
1. 对HPLC仪器一般要求 色谱柱、流动相按品种项下要求。
色谱柱的理论板数：n = 5.54(tR /Wh/2)2
2. 系统性试验 于1.5
分离度：R = 2（tR1 – tR2)/(W1 + W2); 要大
拖尾因子：T = W /2d 应在0.9 ～
1. 原料药 可用已知纯度对照品或样品进行测定；或与已建准 确
度的另一方法测定的结果进行比较。 2. 制剂 要考察辅料对回收率的影响。采用在空白辅料中加入 原
料对照品的方法作回收率试验，然后计算RSD。 具体做法：测定高、中、低三个浓度，n=3, 共9个数据来评价
回收率的RSD＜2%；用UV和HPLC发时，一般
三．含量测定 常用的方法对照品比较
法:Ci = (Ri-Rib)/(Rr-Rrb) ×Cr
Ch.P收载地高辛片、利血平片、洋地黄毒苷片。
二．荧光分析仪 有二个单
色光器—激发单色光器与
发射单色光
器；且激发光源、样品池和检测器成直 角。
三、色谱分析法
按分离原理分为：吸附；分配；离子交换；排阻色 谱
方法分类
2. 用硫酸水解后测定法 例如：硬脂酸镁的含量测定
Mg(C17H35COO)2 + H2SO4
H2SO4 + 2NaOH
MgSO4 + 2C17H35COOH Na2SO4 + 2H2O
（三）经氧化还原后测定法
COOH
I
I
[B型题]
HPLC。
按分离方法分为：PC；TLC；柱色谱；GC；
（一）HPLC法
1. 对HPLC仪器一般要求 色谱柱、流动相按品种项下要求。
色谱柱的理论板数：n = 5.54(tR /Wh/2)2
2. 系统性试验 于1.5
分离度：R = 2（tR1 – tR2)/(W1 + W2); 要大
拖尾因子：T = W /2d 应在0.9 ～
1. 原料药 可用已知纯度对照品或样品进行测定；或与已建准 确
度的另一方法测定的结果进行比较。 2. 制剂 要考察辅料对回收率的影响。采用在空白辅料中加入 原
料对照品的方法作回收率试验，然后计算RSD。 具体做法：测定高、中、低三个浓度，n=3, 共9个数据来评价
回收率的RSD＜2%；用UV和HPLC发时，一般
三．含量测定 常用的方法对照品比较
法:Ci = (Ri-Rib)/(Rr-Rrb) ×Cr
Ch.P收载地高辛片、利血平片、洋地黄毒苷片。
二．荧光分析仪 有二个单
色光器—激发单色光器与
发射单色光
器；且激发光源、样品池和检测器成直 角。
三、色谱分析法
按分离原理分为：吸附；分配；离子交换；排阻色 谱
方法分类
2. 用硫酸水解后测定法 例如：硬脂酸镁的含量测定
Mg(C17H35COO)2 + H2SO4
H2SO4 + 2NaOH
MgSO4 + 2C17H35COOH Na2SO4 + 2H2O
（三）经氧化还原后测定法
COOH
I
I
第4章 定量分析概论二、三节
分 准确度高低的尺度。 析 误差的表示方式分为绝对误差和相对误差两种。
概 绝对误差：测量值与真实值之差。 Ea x xT
论 相对误差：绝对误差占真实值的百分比。
1
Er
Ea xT
100 %
郑工学院
例：用分析天平直接称量铁粉，其质量分别为5.0000g和
0.5000g，试问哪一个称量值会较准确？
章
溶液溅失；
定 量 分 析 概 论
加错试剂； 读错刻度； 记录和计算错误等。
注意：过失误差必须给予删除。
1
郑工学院
减小误差的方法
第 四 ☆尽可能地减小系统误差和偶然误差 章
减小和消除系统误差
定 量
①选择合适的分析方法 在相同的条件下，对已知准确含量的标
②对照试验：
准样品进行多次测定，将测定值和准确 值进行比较，求出校正系数，用校正系
分
n
4
析
概
论
dr
d x
100 %
0.14 15.82
100 %
0.89%
1
郑工学院
（三）准确度与精密度的关系
第 四 章
定
量
分
析
概 结 论：
论 1. 准确度高，要求精密度一定高，精密度是保证准确度的
前提，但精密度高，准确度不一定高；
2. 准确度反映了测量结果的正确性，精密度反映了测量结
1
果的重现性。
分 ③空白试验（空白值） 数来校正试样的分析结果。
析 分析结果－空白值＝较准确的分析结果
概 指不加待测试样，在相同的条件下，按分析试样所采用的方法进行测 论 定，其测定结果为空白值。
药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证
22
例1 三氯叔丁醇的测定
原理 三氯叔丁醇在氢氧化钠溶液中加热回流水解， 氯元素全部转变成氯化钠，然后用剩余滴定法，即于 水解液中加硝酸酸化，再加入定量过量的硝酸银滴定 液，使Cl-生成AgCl沉淀，过量的硝酸银，以Fe3+为指 示剂，用硫氰酸铵液回滴定。
23
例1 三氯叔丁醇
CCl3—C(CH3 ) 2— OH + NaOH (CH3 ) 2 CO+NaCl + HCOONa
Sb5 2KI H Sb3 I2 2K I2 2Na 2S2O3 2NaI Na 2S4O6
21
（二） 经水解后测定法
1.碱水解测定法
将含卤素的有机药物溶于适当溶剂（如乙 醇）中,加氢氧化钠溶液或硝酸银溶液后,加热回 流使其水解,将有机结合的卤素,经水解作用转变 为无机的卤素离子,然后选用间接银量法进行测 定。
为终点。
43
实例- 碘苯酯的含量测定
I
CH3
C (CH2)8 COOC2H5
样品 O2/Pt NaOH-H2O Br2-HAc 甲酸 空气 燃烧 吸收 KI 0.02mol/L Na2S2O3 淀粉作指示剂 终点：蓝色消失
44
溴-醋酸的作用：将碘化物全部转为碘酸盐。 甲酸的作用：除去过量的溴
Br2 HCOOH HBr CO2
CHO COO-
OCH -OOC
葡萄糖酸锑钠
14
含金属或卤素有机药物定量分析 前的处理方法有两大类：
➢1.不经有机破坏的分析方法(3种方法) 直接测定法;经水解后测定法;经还原后测定
法；
➢2.经有机破坏的分析方法(2种方法) 湿法破坏(硝酸-高氯酸法;硝酸-硫酸法;硫酸-
硫酸盐法等);干法破坏。
例1 三氯叔丁醇的测定
原理 三氯叔丁醇在氢氧化钠溶液中加热回流水解， 氯元素全部转变成氯化钠，然后用剩余滴定法，即于 水解液中加硝酸酸化，再加入定量过量的硝酸银滴定 液，使Cl-生成AgCl沉淀，过量的硝酸银，以Fe3+为指 示剂，用硫氰酸铵液回滴定。
23
例1 三氯叔丁醇
CCl3—C(CH3 ) 2— OH + NaOH (CH3 ) 2 CO+NaCl + HCOONa
Sb5 2KI H Sb3 I2 2K I2 2Na 2S2O3 2NaI Na 2S4O6
21
（二） 经水解后测定法
1.碱水解测定法
将含卤素的有机药物溶于适当溶剂（如乙 醇）中,加氢氧化钠溶液或硝酸银溶液后,加热回 流使其水解,将有机结合的卤素,经水解作用转变 为无机的卤素离子,然后选用间接银量法进行测 定。
为终点。
43
实例- 碘苯酯的含量测定
I
CH3
C (CH2)8 COOC2H5
样品 O2/Pt NaOH-H2O Br2-HAc 甲酸 空气 燃烧 吸收 KI 0.02mol/L Na2S2O3 淀粉作指示剂 终点：蓝色消失
44
溴-醋酸的作用：将碘化物全部转为碘酸盐。 甲酸的作用：除去过量的溴
Br2 HCOOH HBr CO2
CHO COO-
OCH -OOC
葡萄糖酸锑钠
14
含金属或卤素有机药物定量分析 前的处理方法有两大类：
➢1.不经有机破坏的分析方法(3种方法) 直接测定法;经水解后测定法;经还原后测定
法；
➢2.经有机破坏的分析方法(2种方法) 湿法破坏(硝酸-高氯酸法;硝酸-硫酸法;硫酸-
硫酸盐法等);干法破坏。
第四章 定量化学分析基础知识
无机分析 Inorganic analysis （元素、离子、化合物等） 有机分析 Organic analysis （元素、官能团、结构） 生化分析 Biochemical analysis （蛋白质分析、氨基酸分析、核 酸分析、糖类分析等）
3. 按测定原理(分析方法)分类
化 学 分 析
重量分析
误差E越小，表示测定结果越接近真值，准确度越高；反之，误 差E越大，准确度越低。误差有正负之分，正误差表示测定结果 偏高，负误差表示测定结果偏低。
通常用相对误差RE来衡量测定的准确度，原因是相对误差可反 映测定值与真值之差在测定结果中所占分数，能更合理地反映测 定准确度。举例如下：
[例1] 已知两试样的真实质量分别为：0.5126g和5.1251g。用分析天平称量两试 样，质量分别为：0.5125g和5.1250g。求两者称量的绝对误差和相对误差。
| X1 X 2 | 相对相差= X 1, 2
5）极差和相对极差
极差指一组平行测定结果中最大者与最小者之差。
极差R=Xmax — Xmin；
相对极差=R/X
此法适于说明少数几次测定结果的离散程度。
第四章 定量化学分析基础知识
4.1 分析化学概述
• 4.1.1 分析化学的任务和作用 任务 分析化学是研究获得物质化学组成，结构 信息，分析方法及相关理论的科学，它所 要解决的问题是确定物质中含有哪些组分， 这些组分在物质中是如何存在的，以及各 个组分的相对含量是多少，以及如何表征 物质的化学结构。
( 2) 产生的原因
a.偶然因素 b.滴定管读数
3. 过失误差
4、误差的减免 1）. 系统误差的减免
(1) 方法误差—— 采用标准方法,对比实验 (2) 仪器误差—— 校正仪器
3. 按测定原理(分析方法)分类
化 学 分 析
重量分析
误差E越小，表示测定结果越接近真值，准确度越高；反之，误 差E越大，准确度越低。误差有正负之分，正误差表示测定结果 偏高，负误差表示测定结果偏低。
通常用相对误差RE来衡量测定的准确度，原因是相对误差可反 映测定值与真值之差在测定结果中所占分数，能更合理地反映测 定准确度。举例如下：
[例1] 已知两试样的真实质量分别为：0.5126g和5.1251g。用分析天平称量两试 样，质量分别为：0.5125g和5.1250g。求两者称量的绝对误差和相对误差。
| X1 X 2 | 相对相差= X 1, 2
5）极差和相对极差
极差指一组平行测定结果中最大者与最小者之差。
极差R=Xmax — Xmin；
相对极差=R/X
此法适于说明少数几次测定结果的离散程度。
第四章 定量化学分析基础知识
4.1 分析化学概述
• 4.1.1 分析化学的任务和作用 任务 分析化学是研究获得物质化学组成，结构 信息，分析方法及相关理论的科学，它所 要解决的问题是确定物质中含有哪些组分， 这些组分在物质中是如何存在的，以及各 个组分的相对含量是多少，以及如何表征 物质的化学结构。
( 2) 产生的原因
a.偶然因素 b.滴定管读数
3. 过失误差
4、误差的减免 1）. 系统误差的减免
(1) 方法误差—— 采用标准方法,对比实验 (2) 仪器误差—— 校正仪器
第04章定量分析样品前处理
适用于含卤素、硫、氮、硒等 有机药物的分析
本法特点是简便、快速、破坏完 全，尤其适用于微量样品的分析
（ 2） 仪器与材料
①仪器装置 燃烧瓶为500、1000或
2000ml无色、磨口、厚壁、 硬质玻璃锥型瓶；瓶塞空 心，底部熔封铂丝一根， 下端呈螺旋状或网状
②称样用材料及称样 A. 固体样品 无灰滤纸 B. 液体样品 纸袋 C. 软膏类样品：将适量样品置不含 被测成分的蜡油纸中包裹严密，外层 再用无灰滤纸包裹
第四章 药物定量分析与分析方 法验证
第一节 定量分析样品的前处理方法
一、含卤素有机药物的分析
含卤素有机药物系指药物分子结 构中所含卤素直接与芳环或脂肪链相 连者，而不包括某些有机药物的卤酸 盐或氢卤酸盐
结构特点：C—X
（一）卤原子的活泼性
1. 卤原子与碳原子直接相连，卤原 子的活泼性和它直接相连的烃基的结 构有很大关系
1000ml
2000ml或特殊结 构的燃烧瓶
正确选用燃烧瓶的目的在于： 样品能在足够的氧气中燃烧分解完 全；有利于将燃烧分解产物较快地 吸收到吸收液中；防止爆炸的可能 性。
②测定含氟有机药物时，用石英制 燃烧瓶 ③铂丝燃烧时起催化作用 ④应同时做空白试验 ⑤燃烧时要注意防爆
⑥燃烧要完全 ⑦燃烧产生的烟雾完全被吸收
2. 碱性或酸性还原后测定法
本法是将含卤素有机药物在碱性或 酸性下，加还原剂（如锌粉）加热回 流，药物产生还原裂解反应，使有机 结合的卤素转变为无机的卤素离子， 然后采用银量法（Fajans法）测定。
本法适用于测定结构中碘与苯环直 接相连，且一个苯环上含多个碘原子 的含卤素有机药物。
（1） 碱性还原后测定法
（3）操作方法
①燃烧瓶燃烧前的准备 用洗液洗净后，按各药品项下的规定加
本法特点是简便、快速、破坏完 全，尤其适用于微量样品的分析
（ 2） 仪器与材料
①仪器装置 燃烧瓶为500、1000或
2000ml无色、磨口、厚壁、 硬质玻璃锥型瓶；瓶塞空 心，底部熔封铂丝一根， 下端呈螺旋状或网状
②称样用材料及称样 A. 固体样品 无灰滤纸 B. 液体样品 纸袋 C. 软膏类样品：将适量样品置不含 被测成分的蜡油纸中包裹严密，外层 再用无灰滤纸包裹
第四章 药物定量分析与分析方 法验证
第一节 定量分析样品的前处理方法
一、含卤素有机药物的分析
含卤素有机药物系指药物分子结 构中所含卤素直接与芳环或脂肪链相 连者，而不包括某些有机药物的卤酸 盐或氢卤酸盐
结构特点：C—X
（一）卤原子的活泼性
1. 卤原子与碳原子直接相连，卤原 子的活泼性和它直接相连的烃基的结 构有很大关系
1000ml
2000ml或特殊结 构的燃烧瓶
正确选用燃烧瓶的目的在于： 样品能在足够的氧气中燃烧分解完 全；有利于将燃烧分解产物较快地 吸收到吸收液中；防止爆炸的可能 性。
②测定含氟有机药物时，用石英制 燃烧瓶 ③铂丝燃烧时起催化作用 ④应同时做空白试验 ⑤燃烧时要注意防爆
⑥燃烧要完全 ⑦燃烧产生的烟雾完全被吸收
2. 碱性或酸性还原后测定法
本法是将含卤素有机药物在碱性或 酸性下，加还原剂（如锌粉）加热回 流，药物产生还原裂解反应，使有机 结合的卤素转变为无机的卤素离子， 然后采用银量法（Fajans法）测定。
本法适用于测定结构中碘与苯环直 接相连，且一个苯环上含多个碘原子 的含卤素有机药物。
（1） 碱性还原后测定法
（3）操作方法
①燃烧瓶燃烧前的准备 用洗液洗净后，按各药品项下的规定加
药物分析课件 第四章 药物定量分析与分析方法验证_OK
样品能在足够的氧气中燃烧分解完全样品能在足够的氧气中燃烧分解完全有利于将燃烧分解产物较快地吸收到吸有利于将燃烧分解产物较快地吸收到吸防止爆炸的可能性防止爆炸的可能性26燃烧瓶要洁净不能残留有机溶剂不能用有机润滑剂涂抹瓶塞要有防爆措施氧气要充足确保燃烧完全产物不能有黑色炭化物燃烧产生的烟雾要被完全吸收充分振摇和放置都是为了保证吸收完全例
③要有防爆措施 ④氧气要充足，确保燃烧完全，产物不能有黑色
炭化物 ⑤燃烧产生的烟雾要被完全吸收
充分振摇和放置都是为了保证吸收完全 例：碘产生紫色烟雾；氯、氟产生白色烟雾，烟
雾颜色完全消失后，即表示吸收完全 ⑥测定含氟有机化合物时要用石英燃烧瓶
26
4、应用
含卤素、硫、磷、氟及硒等有机药物的鉴别、杂 质的检查及含量测定
100%
注射剂：标示量％＝
V0
V T 标示量
100%
V VO
T F 标示量
100%
VO : 量取注射剂的体积， ml
36
(2)间接滴定法 1）生成物滴定法
供试品＋试剂 A 化合物 B
化合物 B＋滴定液 C 化合物 D
计量滴定液消耗的量，计算供试品的含量 计算同直接滴定法
37
2）回滴定法（剩余滴定法） 原理：先在待测样品溶液中加定量、过量的滴定
10
（一）湿法破坏
（1） 硝酸-高氯酸法 适用于血、尿、组织等生物样品的破坏，有
机金属药物经破坏后，得到的无机金属离子一 般呈高价态。
本法不能用于含氮杂环药物的破坏
干法灼烧法 11
（2） 硝酸-硫酸法 适用于大多数有机物质的破坏，破坏得到的
无机金属离子均为高价态。 不能用于含碱土金属有机药物的破坏
27
氧瓶燃烧
③要有防爆措施 ④氧气要充足，确保燃烧完全，产物不能有黑色
炭化物 ⑤燃烧产生的烟雾要被完全吸收
充分振摇和放置都是为了保证吸收完全 例：碘产生紫色烟雾；氯、氟产生白色烟雾，烟
雾颜色完全消失后，即表示吸收完全 ⑥测定含氟有机化合物时要用石英燃烧瓶
26
4、应用
含卤素、硫、磷、氟及硒等有机药物的鉴别、杂 质的检查及含量测定
100%
注射剂：标示量％＝
V0
V T 标示量
100%
V VO
T F 标示量
100%
VO : 量取注射剂的体积， ml
36
(2)间接滴定法 1）生成物滴定法
供试品＋试剂 A 化合物 B
化合物 B＋滴定液 C 化合物 D
计量滴定液消耗的量，计算供试品的含量 计算同直接滴定法
37
2）回滴定法（剩余滴定法） 原理：先在待测样品溶液中加定量、过量的滴定
10
（一）湿法破坏
（1） 硝酸-高氯酸法 适用于血、尿、组织等生物样品的破坏，有
机金属药物经破坏后，得到的无机金属离子一 般呈高价态。
本法不能用于含氮杂环药物的破坏
干法灼烧法 11
（2） 硝酸-硫酸法 适用于大多数有机物质的破坏，破坏得到的
无机金属离子均为高价态。 不能用于含碱土金属有机药物的破坏
27
氧瓶燃烧
5第四章 定量分析基础
Na2S2O3 标液
第五节 标准溶液
一、 标准溶液浓度的表示方法
1. 物质的量浓度（简称浓度） 单位体积溶液所含溶质的物质的量（nB）。
nB cB V
单位为 mol· L-1。 V ：溶液的体积。 应指明基本单元：原子、分子、离子、电子或它们
的组合。
2.滴定度 指每毫升标准溶液相当于被测物质的质量。 以符号TX/S表示，单位：g · mL-1 例：测定铁含量的KMnO4标准溶液，其浓度可表示
一、 计算原理 滴定分析是用标准溶液滴定被测物质的溶液。如 果根据滴定反应所选取的特定组合作为反应物的基本 单元，则滴定到化学计量点时，标准物质和被测物质 的物质的量相等。这就是“等物质的量反应规则”，
这也是定量计算的基础。
二、基本单元的选择：
1．酸碱反应：以得失一个H＋的粒子或粒子的特 定组合作为反应物的化学计量基本单元。
2．氧化还原反应：以得失１个电子的粒子或粒子的 特定组合作为反应物的化学计量基本单元。 反应
2MnO4－＋5C2O42－＋16H＋＝
2Mn2＋ ＋1 0CO2＋8H2O Cr2O72－＋6Fe2＋＋14H＋＝ 2Cr3＋ ＋Fe3＋＋7H2O I2＋2S2O32－＝2I－＋S4O62－ 1/2I2 、 Na2S2O3 1/6 K2Cr2O7、 Fe
溶液的稀释 C浓V浓 ＝ C稀V稀
• 2、固体物质A与溶液B之间反应的计算
•n •n
A
＝mA/MA ＝ CBVB
B
• CBVB＝mA/MA
• 3、求待测组分的质量分数和质量浓度
• 4、有关滴定度的计算
补充题
1.准确量取H2O2样品溶液25.00mL,置于 250mL容量瓶中，加水至刻度，混匀。 再准确吸出25.00ml，加硫酸酸化， 用C(1/5KMnO4)=0.1366mol/L的高锰 酸钾标准溶液滴定，消耗35.86mL， 试计算样品中H2O2的百分含量。 （3.33g/100ml)
第四章 定量分析基础PPT讲解
知识小结：
计算测定值的极差： x最大 x最小
Q （5）可疑值取舍常用方法
步骤：1. 数据从小至大排列
2. 按下式计算Q计邻 x最小
3.将Q计与Q表（如Q 0.90）相比
结论:如Q计≥Q表，将可疑值舍去，否则应当保留。
（二）G-检验法
该法是目前应用最多的检验方法，其检验步骤如下：
1．计算包括可疑值在内的平均值。
2．计算包括可疑值在内的标准偏差。
3
0.3950 0.3951 0.3954 0.3951 0.3948 0.3951
d
0.0002
3
Rd 0.0002 100% 0.05% 0.3951
S (0.0001)2 (0.0003)2 (0.0003)2 0.0003 31
RSD 0.0003100% 0.08% 0.3951
（三）准确度与精密度的关系
准确度表示测量的正确性，精密度表示测量的重复性。
以甲、乙、丙三人打靶为例，说明准确度与精密度的关 系。每人各发三枪，结果如图:
表示甲的弹着点 表示乙的弹着点 表示丙的弹着点
结论：
精密度高，准确度不一定高；高精密度是获得高准确 度的先决条件，精密度与准确度都高的测量值才可取。
三、提高分析结果准确度的方法
（一）选择适当的分析方法 （二）减小测量误差
分析天平的称量误差为±0.0002g，为使称量的相对误差不大 于0.1%,所称试样量不能小于0.2g；
滴定管的读数误差为±0.02ml，为使滴定的相对误差不大于 0.1%，消耗滴定液的体积应不小于20ml。
1.对照试验
（三）减小系统误差 2.空白试验
试样体积（ml） > 10 10~1 1~0.01 < 0.01
中国药典2024年版生物样品定量分析方法验证指导原则
一、验证目标和范围生物样品定量分析方法的验证目标是评估方法的适用性、准确性、精密度、灵敏度、线性范围、选择性、稳定性和测定限等指标。
验证的范围应包括常规样品、稳定样品和特殊样品等方面。
二、验证计划和报告验证计划应包括验证的目的、范围、方法、样品、检测设备和仪器的选择、验证标准和指标的确定、样品的制备与处理、实验设计和统计分析等内容。
验证报告应包括验证计划的执行情况，具体的验证结果和分析，以及结论和建议等内容。
三、适用性验证方法要考虑分析方法的适用性，包括样品的特性和要求、方法的灵敏度和特异性、样品制备和处理的方法、测定限和线性范围等因素。
四、准确性和精密度准确性和精密度是衡量定量分析方法的重要指标。
准确性的评估包括系统误差的测定和修正，常用方法有标准样品、对比法和加标回收法等。
精密度的评估要考虑到实验操作的稳定性和方法的重复性等因素。
五、选择性和特异性选择性和特异性是评估定量分析方法对目标物质的识别和测定能力的指标。
选择性的评估要考虑方法的干扰物质的影响和实际样品的复杂性。
特异性的评估要考虑到方法对其他物质的干扰以及交叉反应的影响。
六、线性范围和灵敏度线性范围是评估定量分析方法测定结果与目标物质浓度之间的关系的指标。
灵敏度是评估定量分析方法对目标物质低浓度范围内变化的敏感性的指标。
线性范围的评估要包括线性相关系数、回归方程和相关系数的确定。
灵敏度的评估要考虑到检测限和测定限等因素。
七、稳定性稳定性是评估定量分析方法在时间、温度、湿度、光照等条件下的稳定性和耐受性的指标。
稳定性的评估要包括样品的稳定性、试剂的稳定性和仪器的稳定性等方面。
八、测定限测定限是评估定量分析方法可以测定的最低浓度的指标。
测定限的评估要考虑方法的灵敏度和噪声的干扰等因素。
综上所述，中国药典2024年版生物样品定量分析方法验证指导原则（草案）主要涵盖了验证目标和范围、验证计划和报告、适用性、准确性和精密度、选择性和特异性、线性范围和灵敏度、稳定性和测定限等方面的内容。
最新哈医大药分第4章定量分析与分析方法验证.PPT课件
I H3COCHN
COOH I
+ 11NaOH + Zn
NHCOCH3 I
回流
△
H2 N
COO Na
+ 3NaI + 2CH3COONa
N H2
NaI+AgNO3
+ 2Na2ZnO2 + H2O
AgI +NaNO3
三、经有机破坏的分析方法
目的：将药物分析中有机结构部分 完全破坏，使有机结合形式的待测 原子转变为可测定的无机离子。
NH3↑+H3BO3→NH4BO2 →H2SO4滴定
将含氮药物与硫酸在凯氏烧瓶中共热，药 物分子中有机结构被氧化分解成二氧化碳 和水，有机结合的氮则转变为无机氨，并 与过量的硫酸结合为硫酸氢铵及硫酸铵， 经氢氧化钠碱化后释放出氨气，并随水蒸 气馏出，用硼酸溶液或定量的酸滴定液吸 收后，再用酸或碱滴定液滴定。
2、酸水解后测定法 将含金属的有机药物与适当的矿酸（
如盐酸）共热，将不溶性金属盐类水解 置换为可溶性盐，然后用配位滴定法或 剩余的酸碱滴定法测定。 例：十一烯酸锌
（三） 经还原分解后测定法
将含碘有机药物在碱性下，加还原 剂（如锌粉）加热回流，药物产生还 原裂解反应，使其转变为无机的碘， 然后采用银量法测定。
难以分解的药物 辅助氧化剂 30% 过氧化氢和高氯酸
不能在高温时加入，应待消解液 放冷后加入，并再次加热继续消解
3.应用范围：含有氨基或酰胺结构的 药物含量
偶氮或肼结构的含氮药物，在消解过程 易生成氮气而损失，在消解前加入锌粉还 原
杂环中的氮不易断键而难以消解，可用 氢碘酸或红磷还原为氢化杂环后在消解
哈医大药分第4章定量分析与 分析方法验证.
药物分析第四章定量分析与分析方法验证
标准偏差
三、专属性 系指在其它成份（如杂质、降解产物、辅料等） 系指在其它成份（如杂质、降解产物、辅料等）可能存在 采用的方法能准确测定出被物的特性。 下，采用的方法能准确测定出被物的特性。 四、检测限（LOD） 检测限（ ） 指试样中被测物能被检出的最低浓度或量。 指试样中被测物能被检出的最低浓度或量。 五、定量限（LOQ） 定量限（ ） 指样品中被测物能被定量测定的最低量， 指样品中被测物能被定量测定的最低量，其测定结果具有 一定的准确度和精密度。 一定的准确度和精密度。 六、线性 系指在设计的范围内， 系指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接 呈正比关系的程度，相关系数R-->1 ,用软件可得回归方程 用软件可得回归方程. 呈正比关系的程度，相关系数 用软件可得回归方程
VT 含量% = × 100% W
T—滴定度 滴定度;V—消耗滴定液体积 消耗滴定液体积;W—供试品取量 滴定度 消耗滴定液体积 供试品取量 校正因子F: 校正因子 当滴定液浓度与药典中规定浓度不相同时,要校正 要校正: 当滴定液浓度与药典中规定浓度不相同时 要校正 实际摩尔浓度 F= 规定摩尔浓度 在药检部门实验里的试剂瓶子一般不标浓度,而是 值 在药检部门实验里的试剂瓶子一般不标浓度 而是F值. 而是 实际滴定度:T’=TF 实际滴定度
二、光谱分析法 光照在物质上，物质内部发生能级跃迁而产生辐射， 光照在物质上，物质内部发生能级跃迁而产生辐射，利用 光谱进行定性或定量的结构分析称为光谱分析法。 光谱进行定性或定量的结构分析称为光谱分析法。 1、紫外-可见分光光度法（200nm—760nm) 、紫外 可见分光光度法 可见分光光度法（ (1)朗伯 比耳定律 朗伯-比耳定律 朗伯 A=ELC A-吸光度；L-液层厚度；C-溶液浓度；E-吸收系数 吸光度； 液层厚度 液层厚度； 溶液浓度 溶液浓度； 吸收系数 吸光度 （2）百分吸收系数 ）百分吸收系数E 1% 溶液浓度为1%（ 溶液浓度为 （W/V）厚度为 ）厚度为1cm的吸收度 E1cm 的吸收度 A （3）吸收系数法测含量 ） ×D 1% E1cm 含量%= ×100% W × l ×100 A-供试品吸光度；D-供试品稀释倍数； 供试品吸光度； 供试品稀释倍数 供试品稀释倍数； 供试品吸光度 W-供试品取量（标示量）（ ）； 液层厚度（cm） 供试品取量（ ）（g）； 液层厚度（ ） 供试品取量 标示量）（ ）；L-液层厚度
第四章药物的含量测定方法与验证
第四章药物的含量测定方法与验证第一节定量分析方法的分类与特点（自学）第二节样品分析的前处理方法（自学）第三节药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证的目的是证明采用的方法适合于相应检测要求。
在建立药品质量标准时，分析方法需经验证；在药品生产工艺变更、制剂的组分改变、原分析方法进行修订时，质量标准分析方法也需进行验证，该验证过程亦被称为方法再验证，方法再验证的内容可以是全面验证或是部分验证。
方法验证理由、过程和结果均应记载在药品标准起草或修订说明中。
需验证的分析项目有：鉴别试验，杂质定量或限度检查，原料药或制剂中有效成分含量测定，以及制剂中其他成分（如防腐剂等）的测定。
药品溶出度、释放度等检查中，其溶出量等的测试方法也应作必要验证。
验证内容有：准确度、精密度（包括重复性、中间精密度和重现性）、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性。
视具体方法，拟定需要验证的内容。
表4-3中列出的分析项目和相应的验证内容要求，可供参考。
一、准确度准确度系指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率（％）表示。
准确度应在规定的范围内测试。
（一）含量测定方法的准确度1、原料药的含量测定：可用已知纯度的对照品或供试品进行测定，并按下式计算回收率；或用本法所得的结果与己知准确度的另一方法测定的结果进行比较。
加入量：加入对照品的量。
一般与制剂原有的含量按1:1加入。
如该分析方法已经测试并求得其精密度、线性和专属性，在准确度无法直接测试（采用对照品对照法计算含量的方法，如高效液相色谱法）或可推算出的情况下，该项目可不再进行验证。
2、制剂的含量测定：主要测试制剂中其他组分及辅料对含量测定方法的影响。
可用含已知量被测物的制剂各组分混合物（包括制剂辅料）进行测定，回收率的计算同原料药的含量测定项下。
如不能获得制剂的全部组分，则可向制剂中加入已知量的被测物进行测定，回收率则应按下式计算；或用本法所得的结果与已知准确度的另一方法测定的结果进行比较。
分离及复杂物质分析 第四章 定量分析的一般步骤
第四章定量分析的一般步骤及复杂物质的分析示例定量分析大致包括以下几个步骤：取样、试样的分解、干扰组分的分离掩蔽、测定、数据处理及分析结果的表示。
本章仅就试样的采取和处理，分析试样的制备和分解，测定方法的选择以及分析结果准确度的保证和评价，进行简单讨论。
§4-1 试样的采取和制备试样的采取和制备必须保证所取试样具有代表性，即分析试样的组成能代表整批物料的平均组成。
否则，无论分析工作做得怎样认真、准确，所得结果也毫无实际意义；而无代表性的分析数据，会给实际工作造成严重的混乱。
因此，慎重地审查试样的来源，使用正确的取样方法是非常重要的。
(举例)取样大致可分三步：(1) 收集粗样；(2) 将每份试样混合或粉碎、缩分，减少至适合分析所需的数量；(3) 制成符合分析用的样品。
为了保证取样有足够的准确性，又不致花费过多的人力、物力，应该了解取样过程所依据的基本原则、方法。
1. 取样的基本原则正确取样应满足以下几个要求：(1) 大批试样(总体)中所有组成部分都有同等的被采集的几率；(2) 根据给定的准确度，采取有次序的和随机的取样，使取样的费用尽可能低。
(3) 将n个取样单元(如车、船、袋或瓶等容器的试样彻底混合后，再分成若干份，每份分析一次，这样比采用分别分析几个取样单元的办法更优化。
2. 取样操作方法试样种类繁多，形态各异，试样的性质和均匀程度也各不相同。
因此，首先将被采取的物料总体分为若干单元。
它可以是均匀的气体或液体，也可以是车辆或船支装载的物料。
其次，了解各取样单元间和各单元内的相对变化。
如煤在堆积或运输中出现的偏析，即颗粒大的会滚在堆边上，颗粒小或密度大的会沉在堆下面，细粉甚至可能飞扬。
正确划分取样单元和确定取样点是十分重要的。
以下，针对不同种类的物料简略讨论一些采样方法。
⑴组成比较均匀的物料这一类试样包括气体、液体和某些固体，取样单元可以较小。
对于大气样品，根据被测组分在空气中存在的状态(气态、蒸气或气溶胶)、浓度及测定方法的灵敏度，可用直接法或浓缩法取样。
定量分析样品的前处理_OK
高硫酸的沸点，增强硫酸的氧化破坏能力，且防止硫酸 的分解损失。
凯氏定氮法
含 N 药 H 2 S 4 物 O H 2 S 4 O N 4 H 4 H ( N S 4 ) 2 S 4 H O N O a N 3 O
吸 收 液 吸酸 收 /碱 滴 定
2021/7/29
11
H2SO4：氧化剂和炭化剂。消解一般在通风橱中进行。 K2SO4：提高H2SO4沸点， 缩短消解时间 CuSO4：催化剂，使消解速度加快 消解产物：(NH4)2SO4、NH4HSO4
湿法破坏法 干法破坏法
氧瓶燃烧法
2021/7/29
5
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6
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7
(三)经氧化还原后测定法
（1）碱性还原后测定
卤素结合于芳环上,由于分子碘的结合较牢固,需在
碱性溶液中加还原剂（如锌粉）,加热回流,使碳-碘 键断裂,形成无机碘化物后测定。
如:泛影酸（卤素原子与芳环相连,化学键牢固）
注意：
E
1应%>100
1cm
2021/7/29
41
例：精密称取B12样品25.0mg，用水溶液配成100ml。 精密吸取10.00ml，又置100ml容量瓶中，加水至刻度。 取此溶液在1cm的吸收池中，于361nm处测定吸光度为 0.507，求B12的百分含量？
2021/7/29
16
仪器装置
2021/7/29
17
① 硬质玻璃碘瓶 容量大小随样品量而定,一般500ml、1000ml。
※ 含氟药物用石英制或聚氯乙烯制的燃烧瓶,因
样品燃烧后,产生HF,对玻璃有腐蚀作用,与玻璃中 的硼生成氟化硼,BF3在水中不能完全解离,而使测 定结果偏低。
凯氏定氮法
含 N 药 H 2 S 4 物 O H 2 S 4 O N 4 H 4 H ( N S 4 ) 2 S 4 H O N O a N 3 O
吸 收 液 吸酸 收 /碱 滴 定
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H2SO4：氧化剂和炭化剂。消解一般在通风橱中进行。 K2SO4：提高H2SO4沸点， 缩短消解时间 CuSO4：催化剂，使消解速度加快 消解产物：(NH4)2SO4、NH4HSO4
湿法破坏法 干法破坏法
氧瓶燃烧法
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(三)经氧化还原后测定法
（1）碱性还原后测定
卤素结合于芳环上,由于分子碘的结合较牢固,需在
碱性溶液中加还原剂（如锌粉）,加热回流,使碳-碘 键断裂,形成无机碘化物后测定。
如:泛影酸（卤素原子与芳环相连,化学键牢固）
注意：
E
1应%>100
1cm
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例：精密称取B12样品25.0mg，用水溶液配成100ml。 精密吸取10.00ml，又置100ml容量瓶中，加水至刻度。 取此溶液在1cm的吸收池中，于361nm处测定吸光度为 0.507，求B12的百分含量？
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仪器装置
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17
① 硬质玻璃碘瓶 容量大小随样品量而定,一般500ml、1000ml。
※ 含氟药物用石英制或聚氯乙烯制的燃烧瓶,因
样品燃烧后,产生HF,对玻璃有腐蚀作用,与玻璃中 的硼生成氟化硼,BF3在水中不能完全解离,而使测 定结果偏低。
无机及分析化学第四章定量分析概论
30.32其中最大值是否舍去？ 解：30.56为最大值，定为可疑值。 平均值为30.27 ，d平均偏差0.065 若|可疑值－x|≥4d，则可疑值应舍去； 若|可疑值－x|＜4d， 则可疑值应保留。
Q检验法
当测定次数为3-10次时，根据所要求的置信度，
用Q值检验法检验可疑数据是否可以舍去。
精密度好的分析结果准确度一定好吗？
精密度只与偶然误差有关，而准确度与偶然误差、
系统误差均有关。精密度好只说明偶然误差小，
但是否存在系统误差及系统误差有多大都不知道，
因此精密度好准确度未必高。准确度好需要两种
误差均小，即准确度高也需要精密度好。
甲、乙、丙三人分析同一试样中某组分含量，分别得出三组 数据，（真实值为30.39）你认为哪组数据更可靠，为什么？
四舍六入五成双
有效数字的运算
其有效数字的保留应以小数点
加减法
后位数最少的数为准确定位数， 将多余的数字修约后进行计算。
例4-2
乘除法
其有效数字的保留应以有效数 字位数最少的数为准确定位数， 将多余的数字修约后进行计算。
例4-3
分析数据的评价
4d法检验
例：测得如下一组数据，30.18、30.56、30.23、30.35、
定量分析概论
定量分析的一般程序
试样的采集和制备 试样的预处理 干扰组分的掩蔽与分离 测定 数据处理与结果评价
试样的采集和制备
取样：从大量的分析对象中抽取一小部分作为分析材料的过程。 要求：所取的试样具有代表性和客观性。
原则：多点采样原则
采取试样的一般原则
收集资料，详细了解采样对象及其周围环境
在实际分析中，真实值xT是未知的，常用多次平行测定的
Q检验法
当测定次数为3-10次时，根据所要求的置信度，
用Q值检验法检验可疑数据是否可以舍去。
精密度好的分析结果准确度一定好吗？
精密度只与偶然误差有关，而准确度与偶然误差、
系统误差均有关。精密度好只说明偶然误差小，
但是否存在系统误差及系统误差有多大都不知道，
因此精密度好准确度未必高。准确度好需要两种
误差均小，即准确度高也需要精密度好。
甲、乙、丙三人分析同一试样中某组分含量，分别得出三组 数据，（真实值为30.39）你认为哪组数据更可靠，为什么？
四舍六入五成双
有效数字的运算
其有效数字的保留应以小数点
加减法
后位数最少的数为准确定位数， 将多余的数字修约后进行计算。
例4-2
乘除法
其有效数字的保留应以有效数 字位数最少的数为准确定位数， 将多余的数字修约后进行计算。
例4-3
分析数据的评价
4d法检验
例：测得如下一组数据，30.18、30.56、30.23、30.35、
定量分析概论
定量分析的一般程序
试样的采集和制备 试样的预处理 干扰组分的掩蔽与分离 测定 数据处理与结果评价
试样的采集和制备
取样：从大量的分析对象中抽取一小部分作为分析材料的过程。 要求：所取的试样具有代表性和客观性。
原则：多点采样原则
采取试样的一般原则
收集资料，详细了解采样对象及其周围环境
在实际分析中，真实值xT是未知的，常用多次平行测定的
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在实际工作中，滴定液的浓度可能与药典规定的浓度并不一致，所以应该进行校正
实际摩尔浓度 F 规定摩尔浓度
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直接滴定法的 含量计算方法
直接读取
药典规定
自己标定
V T F 含量 (%) 100 % W
取样量
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间接滴定法
不直接对待测物进 行滴定，而采用间 接途径滴定
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③、根据主药含量的多少 主药含量大，分布均匀，要求严些 主药含量少，难以分布均匀，要求宽些
④ 、根据所选方法 容量分析法 UV法 HPLC 氧瓶燃烧法
99.0-101.0% 97.0-103.0% 96.0-104.0% 93.0-107.0%
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（二）、含量表示方式
Mb=0.05mol/L
C6 H8O6 I 2 C6 H 6O 6 2HI
a 1 T =m× ×M=0.05× ×176.13=8.806(mg/ml) b 1
1 MA=176.13
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a T ( m g / m l) m M b
示例二 异烟肼的滴定度 溴酸钾法测定异烟肼含量[M(C6H7N3O)=137.14]， C溴酸钾=0.01667 mol/L
用B来 滴定A
WB a WA αMA n B MA bMB b
a m B VB M A b
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浓度乘体 积=nB
浓度 mB
等于1ml
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示例一 计算Vc的滴定度T
碘量法测定Vc含量[M(C6H6O6)=176.13]，C(I2)=0.05mol/L
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第四章 药物的含量测定方法与验证
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主要内容
药品含量测定方法与特点
药品分析的前处理
药品质量标准分析方法验证 有效数字的处理
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第一节 药物的含量测定方法与验证
一、药品含量测定方法
1、重量分析法 原料 挥发法、萃取法、沉淀法 2、容量分析法 原料 直接滴定、间接法、返滴定法 3、光谱法 制剂 UV法 荧光法 AAS法 4、色谱法 原料、制剂 HPLC GC TLC 5、其他方法如电化学分析法，热分析法等
原料药用质量百分含量表示； 制剂用标示量的百分含量表示： 标示量%=测得量/标示量×100%
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二、
一、容量分析法
定量分析方法特点
（一）容量分析法的特点：
操作简单、快速；
比较准确（RSD＜0.2%）； 仪器普通易得； 主要用于原料药的测定；
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（二）容量分析法的计算问题
计算题
1.取乙酰唑胺2g，加水100ml加热溶解后，迅速放冷， 滤过，取滤液25ml，依法检查氯化物，规定含氯 化物不得超过0.014%，应取标准氯化钠溶液（每 1ml相当于0.01mgCl）多少ml？ 2.溴化钠中检查砷盐杂质，规定含砷量不得超过百 万分之四，取标准砷溶液（每1ml相当于 0.001mgAs）2ml，依法检查，应取供试品多少克。
aA bB cC dD
被测药物 滴定液
被测药物反应的质量
被测药物的摩尔质量
WA WB = aMA bMB
滴定液反应的质量
滴定液的摩尔质量
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第一节 定量分析方法的分类与特点 容量分析法有 关计算
滴定度计算
滴定液 待测液
计算有一个从质 量到物质的量， 再到浓度再到滴 定度的转变过程
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②根据生产的实际水平 由植物中提取得到的原料药，因原料中含有多 种成分，药品的纯度要由提取分离水平而定，故含量 限度也应根据生产的实际水平而定。
如硫酸长春新碱因开始生产时不易提纯，故原 料药规定含量为不得低于92%，中国药典（1990年版） 根据近几年的实际生产水平，改为95.0%～105.0%；其 供注射用的本品订为标示量的90.0%～110.0%；
生成物滴定法
剩余量滴定法
被测药物与化合物 A作用生成 化合物 B，再用滴定液滴 定化合物B
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也称回滴法，本法先加入定 量过量滴定液A与药物作用， 再用滴定液B与剩余的滴定液 A反应，然后再进行含量计算
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②制剂的含量测定应首选色谱法。 当辅料不干扰测定时，也可选用UV法。对于复方制剂 常用HPLC法。 ③对于酶类药品应首选酶分析法 抗生素药品应首选HPLC法及微生物法，放射性药品应首选 放射性测定法等等 ④在上述方法均不适合时，可考虑使用计算分光光度法。 ⑤对于新药的研制，应选用原理不同的两种方法进行对照性 测定。
1. 滴定度（T）的概念
每1ml溶液相当于被测物质的质量(mg)
用碘量法测定维生素C的含量时，《中国药典》 规定：每1ml碘滴定液（0.05mol/L）相当于 8.806mg的维生素C（C2H8O6）
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第一节 定量分析方法的分类与特点 容量分析法有 关计算
滴定度计算
用B来 滴定A
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（一）常用的测定方法
用化学或仪器法或效价法测定，以%表示 UV、Vis、FR、 AAS、 IR、GC、 TLC、HPLC
重量法 容量法 精密度高准 确度好 原料药
灵敏度高专 属性好
制剂、中成药
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（1）选择含量测定法的基本原则 ①化学原料药（西药）的含量测定应首选容量分析法。 滴定终点的确定，应用适宜的电化学方法确定等当点 的变色域，例如酸碱滴定可用电位滴定法。
3C6H7 N3O 2KBrO3 3C6H5 NO2 3N2 2KBr 3H2O
a 3 ×M=0.01667× T =m× ×137.14=3.429(mg/ml) b 2
b
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a
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含量计算方法
直接滴定法
直接滴定法 间接滴定法
V T 含量 (%) 100 % W
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（2）含量限度的确定
含量限度的制订一般可依据下列三种情况来综合考虑
①根据不同的剂型 例如维生素B1， 口服用的含量标准不得少于98.5%， 供注射用的不得少于99.0%， 片剂的含量应为标示量的90.0%～110.0%， 注射液的含量应为标示量的93.0%～107.0%。 不同品种的相同剂型的药物，其含量限度也不同。
实际摩尔浓度 F 规定摩尔浓度
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直接滴定法的 含量计算方法
直接读取
药典规定
自己标定
V T F 含量 (%) 100 % W
取样量
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间接滴定法
不直接对待测物进 行滴定，而采用间 接途径滴定
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③、根据主药含量的多少 主药含量大，分布均匀，要求严些 主药含量少，难以分布均匀，要求宽些
④ 、根据所选方法 容量分析法 UV法 HPLC 氧瓶燃烧法
99.0-101.0% 97.0-103.0% 96.0-104.0% 93.0-107.0%
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（二）、含量表示方式
Mb=0.05mol/L
C6 H8O6 I 2 C6 H 6O 6 2HI
a 1 T =m× ×M=0.05× ×176.13=8.806(mg/ml) b 1
1 MA=176.13
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a T ( m g / m l) m M b
示例二 异烟肼的滴定度 溴酸钾法测定异烟肼含量[M(C6H7N3O)=137.14]， C溴酸钾=0.01667 mol/L
用B来 滴定A
WB a WA αMA n B MA bMB b
a m B VB M A b
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浓度乘体 积=nB
浓度 mB
等于1ml
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a T ( m g / m l) m M b
示例一 计算Vc的滴定度T
碘量法测定Vc含量[M(C6H6O6)=176.13]，C(I2)=0.05mol/L
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第四章 药物的含量测定方法与验证
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主要内容
药品含量测定方法与特点
药品分析的前处理
药品质量标准分析方法验证 有效数字的处理
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第一节 药物的含量测定方法与验证
一、药品含量测定方法
1、重量分析法 原料 挥发法、萃取法、沉淀法 2、容量分析法 原料 直接滴定、间接法、返滴定法 3、光谱法 制剂 UV法 荧光法 AAS法 4、色谱法 原料、制剂 HPLC GC TLC 5、其他方法如电化学分析法，热分析法等
原料药用质量百分含量表示； 制剂用标示量的百分含量表示： 标示量%=测得量/标示量×100%
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二、
一、容量分析法
定量分析方法特点
（一）容量分析法的特点：
操作简单、快速；
比较准确（RSD＜0.2%）； 仪器普通易得； 主要用于原料药的测定；
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（二）容量分析法的计算问题
计算题
1.取乙酰唑胺2g，加水100ml加热溶解后，迅速放冷， 滤过，取滤液25ml，依法检查氯化物，规定含氯 化物不得超过0.014%，应取标准氯化钠溶液（每 1ml相当于0.01mgCl）多少ml？ 2.溴化钠中检查砷盐杂质，规定含砷量不得超过百 万分之四，取标准砷溶液（每1ml相当于 0.001mgAs）2ml，依法检查，应取供试品多少克。
aA bB cC dD
被测药物 滴定液
被测药物反应的质量
被测药物的摩尔质量
WA WB = aMA bMB
滴定液反应的质量
滴定液的摩尔质量
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第一节 定量分析方法的分类与特点 容量分析法有 关计算
滴定度计算
滴定液 待测液
计算有一个从质 量到物质的量， 再到浓度再到滴 定度的转变过程
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②根据生产的实际水平 由植物中提取得到的原料药，因原料中含有多 种成分，药品的纯度要由提取分离水平而定，故含量 限度也应根据生产的实际水平而定。
如硫酸长春新碱因开始生产时不易提纯，故原 料药规定含量为不得低于92%，中国药典（1990年版） 根据近几年的实际生产水平，改为95.0%～105.0%；其 供注射用的本品订为标示量的90.0%～110.0%；
生成物滴定法
剩余量滴定法
被测药物与化合物 A作用生成 化合物 B，再用滴定液滴 定化合物B
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也称回滴法，本法先加入定 量过量滴定液A与药物作用， 再用滴定液B与剩余的滴定液 A反应，然后再进行含量计算
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②制剂的含量测定应首选色谱法。 当辅料不干扰测定时，也可选用UV法。对于复方制剂 常用HPLC法。 ③对于酶类药品应首选酶分析法 抗生素药品应首选HPLC法及微生物法，放射性药品应首选 放射性测定法等等 ④在上述方法均不适合时，可考虑使用计算分光光度法。 ⑤对于新药的研制，应选用原理不同的两种方法进行对照性 测定。
1. 滴定度（T）的概念
每1ml溶液相当于被测物质的质量(mg)
用碘量法测定维生素C的含量时，《中国药典》 规定：每1ml碘滴定液（0.05mol/L）相当于 8.806mg的维生素C（C2H8O6）
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第一节 定量分析方法的分类与特点 容量分析法有 关计算
滴定度计算
用B来 滴定A
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（一）常用的测定方法
用化学或仪器法或效价法测定，以%表示 UV、Vis、FR、 AAS、 IR、GC、 TLC、HPLC
重量法 容量法 精密度高准 确度好 原料药
灵敏度高专 属性好
制剂、中成药
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（1）选择含量测定法的基本原则 ①化学原料药（西药）的含量测定应首选容量分析法。 滴定终点的确定，应用适宜的电化学方法确定等当点 的变色域，例如酸碱滴定可用电位滴定法。
3C6H7 N3O 2KBrO3 3C6H5 NO2 3N2 2KBr 3H2O
a 3 ×M=0.01667× T =m× ×137.14=3.429(mg/ml) b 2
b
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a
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含量计算方法
直接滴定法
直接滴定法 间接滴定法
V T 含量 (%) 100 % W
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（2）含量限度的确定
含量限度的制订一般可依据下列三种情况来综合考虑
①根据不同的剂型 例如维生素B1， 口服用的含量标准不得少于98.5%， 供注射用的不得少于99.0%， 片剂的含量应为标示量的90.0%～110.0%， 注射液的含量应为标示量的93.0%～107.0%。 不同品种的相同剂型的药物，其含量限度也不同。