血清中葡萄糖浓度

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③ 因红细胞的酵解将导致测定结果偏低,建议测 定样品以草酸钾-氟化钠为抗凝剂抑制葡萄糖酵 解。
④ 严重黄疸、溶血及乳糜样血清应先之辈无蛋白 血滤液,然后再进行测定。
临床意义:
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1. 生理性高血糖:摄入高糖食物,情绪紧张 2. 病理性高血糖:
①糖尿病 ②内分泌腺功能障碍 ③颅内压增高 1. ④脱水引起高血糖
项目
血清(ml)
空白管 ——
标准管 ——
葡萄糖标准液 (ml)
——
0.020
蒸馏水(ml)
0.020
——
酶-酚混合试剂
3.00
3.00
(ml)
测定管 0.020 ——
—— 3.00
混匀,置于37度水浴中,保温25min,在波长510nm处 比色,以空白管调零,读取标准管及测定管的吸光度
计算公式:
2. 生理性低血糖:见于饥饿和剧烈运动 3. 病理性低血糖:特发性功能性低血糖,依次是药源
性,肝源性和胰岛素瘤等。
思考题:
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a) 标准葡萄糖储存液与应用液中都含有苯甲酸钠, 苯甲酸钠起什么作用?
b) 列举几种血清葡萄糖定量测定的方法和原理。 c) 本实验原理为酶促化学反应,为何未加终止剂
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A测定
血清葡萄糖浓度=
×5mmol/L
A标准
参考值:
空腹血清葡萄糖浓度:3.89~6.11mmol/L
注意事项:
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① 葡萄糖氧化酶对β-D-葡萄糖高度特异,葡萄糖 的完全氧化需要α型到β型的变旋反应。
② 此法可直接测定脑脊液葡萄糖的含量,但不能 直接用于测定尿液葡萄糖含量。
终止酶的反应? d) 本实验涉及显色反应,该反应与血清碱性磷酸
酶活力测定中的显色反应有何异同? e) 本实验在设计上存在缺陷,请指出。
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Thank you!
葡萄糖氧化酶利用氧将葡萄糖氧化成葡萄糖酸,同时释 放出过氧化氢。过氧化物酶催化过氧化氢氧化色素原, 并使色素原氧化成色素,即Trinder反应。
葡萄糖+O2+H2O GOD葡萄糖酸+2H2O2
Baidu Nhomakorabea
2H2O2+4-氨基安替比林+苯酚 POD 红色醌类化合物
操作步骤:
取三只试管按表操作
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酶法分析是指用酶作为工具定量测定某
种物质含量的分析方法。定量分析的目标
可以是酶的底物,辅酶,也可以是酶的激 活剂或抑制剂。
酶法分析的主要方法: 资料仅供参考,不当之处,请联系改正。
单酶反应定量法和偶联酶反应定量法
单酶反应定量法:指用一种酶为工具酶定
量测定某种物质的方法。
偶联酶反应定量法:当单酶反应底物或产
问题:
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血清中葡萄糖浓度测定的方法有很多,在 实验设计上,这些方法分别利用了葡萄糖 的那些性质?
如何排除血清内其他物质的干扰,使所测 血清葡萄糖浓度更准确?
葡萄糖氧化酶法测血糖的原理是什么?本 实验为何需要用到两种酶?与其他方法相 比,本实验有哪些优缺点?
知识窗
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物反应底物或产物噢物理化学手段无法区 分时,还可以借助另一种酶作为指示酶, 通过欧联反应进行定量分析。
实验目的:
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① 掌握酶法测定血清葡萄糖浓度的原理。
② 掌握血糖变化的临床生理意义
实验原理:
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血清葡萄糖是用以过氧化物酶作指示酶的偶联酶反应定 量法测定的。
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