诊断学-实验一白细胞计数
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精品课件 4
精品课件 5
精品课件
毛细血管采血标准操作程序
操作步骤： 1 采血部位成人以左手无名指内侧为宜，
半岁以下婴幼儿通常自拇指内侧或足跟 两侧采血。 2 轻轻按摩采血部位。 3 用棉签蘸消毒液消毒局部皮肤、待干。
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精品课件
4 紧捏刺血部位，使其自然充血。 5 用无菌刺针穿刺取血，动作应迅速，深 度 2～3mm，稍加挤压以血液流出为宜。 6 用干棉球擦去第一滴血。 7 按需要依次采血。 8 采血完毕，用干棉球压住伤口，止血片 刻。
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诊断学-实验一
白细胞计数
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精品课件
实验一、 白细胞计数
1.原理：血液经稀乙酸定量稀释并破坏 成熟红细胞，在血细胞计数池内计数规 定区域内的白细胞总数，换算成每升血 液中白细胞数。
2.试剂器材
白细胞稀释液：冰乙酸 2.0ml
蓝 3滴
10g/L亚甲
加蒸馏水 2
精品课件
器材
改良牛鲍血细胞计数板及 专用盖片、微量吸管、 带孔吸头、1ML刻度 移液管、小试管、洁 净软纱布、干棉球、 光学显微镜。
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精品课件
3.器材
光学显微镜
推片，载玻片
[试剂]
Wright染液
Wright
1.0g
甲醇
600ml
磷酸盐缓冲液（PH6.4～6.8）
香柏油
[标本来源]
EDTA-K2抗凝全血 16
精品课件 17
3．白细胞分类：
细胞分布均匀的体尾交界处，滴 加香柏油一滴，油镜下分类计数。 分类时要有秩序的连续进行，避 免主观选择视野。通常分类计数 100个白细胞，计算并报告各种白
精品课件 12
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诊断学 实验二
白细胞分类
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精品课件
1.分类原理：白细胞分类计数是 将血液制备成涂片，瑞氏染色后 显微镜下根据白细胞的形态特征 进行分类计数。通常分类100个白 细胞，计算得出各种白细胞所占 百分比
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2.瑞氏染色原理：瑞氏染料溶于甲醇，离解 为带正电的碱性美兰（M+）和带负电的酸性伊 红（E-）离子。细胞的染色既有物理的吸附作 用，又有化学的亲和作用。各种细胞成分的化 学性质不同，对染料的亲和力也不一样，故可 呈不同的着色特点。
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3.操作步骤
（1）加稀释液 用移液管向小试管内加入0.38ml白细胞稀释液。 （2）采血、稀释 用微量吸管采血20ul，拭去管外余血，释放于小试
管底部，用上部稀释液洗净吸管内余血，轻摇试管混匀，静置等其 溶血。 （3）清洁计数板及盖片（动作轻柔），夹持盖片缘纵向前推轻放于两 侧支持堤上。 （4）充计数池 将小试管轻微振荡2min，立即以一次性微量吸管吸取 混匀后的白细胞悬液，充入计数池内。静置2-3min，使细胞沉于计 数池底面。 （5）调试显微镜 将计数板放置载物台上，选择（4 × ）低倍镜，调节 聚光器使光线较暗，调节旋钮找到方格线，转至低倍镜（10×），调 节光亮 。 （6）计数 低倍镜下计数四角4个大方格内白细胞总数，压线细胞数上 不数下，数左不数右。
细胞所占比例。
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结果记录方式：
Ne 正 一 Ly 正 Mo 正 Eo 正 Ba 正
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各类成熟白细胞的形态学：
中性粒细胞（Ne）：在瑞氏染色血涂片上呈圆形，胞浆染 粉红色，核形一叶（杆状核）至五叶不等，以三叶者多见， 染成深紫红色，胞浆中有许多细小均匀紫红色颗粒。
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嗜酸性粒细胞（Eo）：较中性粒细胞稍大，胞核多 为两叶，呈眼镜、八字形，核染色质粗糙染深紫红 色，胞浆内充满粗大均匀的嗜酸性颗粒，瑞氏染色 时呈桔红色，有折光性。
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嗜碱性粒细胞（Ba）：胞浆中含有大小不等的嗜碱性颗 粒，瑞氏染色时呈兰黑色。于光学显微镜下常见胞浆中 有小空泡，乃因嗜碱性颗粒易溶于水或因功能活动而脱 颗粒所致；核呈淡紫红色常看不清，呈杆状或分叶状。
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淋巴细胞（Ly）：胞体呈圆形，在成人血涂片中以小淋 巴细胞为多见，核大呈深紫色致密而浓染，胞浆量极少； 大淋巴细胞胞浆量较多，呈清澈的淡蓝色，可见少量嗜 苯胺蓝颗粒，胞核圆或椭圆，常偏向细胞一侧，染色较 深。
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微量吸管的使用
1将带孔乳胶吸头轻轻套在微量吸管上，连接紧密不漏气； 2拇指和中指夹住吸头中下端，示指盖住吸头小孔，拇、
中指轻微挤压排出适量空气； 3将微量吸管插入抗凝血，拇、中指缓慢松劲（松动快血
液会吸入吸头），吸取抗凝血至所需刻度略上方（不能有 气泡），吸管呈水平略下垂，松开示指； 4用干棉球顺吸管向下拭尽管外余血（保证血量准确）， 轻触吸管下口吸去多余血量，使管内抗凝血正处所需刻度； 5将微量吸管插入小试管底部，三指轻微用力慢慢排出血 液，用上清液冲洗管内余血2-3次，轻摇试管混匀； 6拔出微量吸管弃入污物桶。
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单核细胞（Mo）：在瑞氏染色涂片上为12～20µm， 胞体圆形、椭圆形或不规则形；核形多种多样，最 重要的特点是染色质较细致疏松，呈丝网状或条缕 状，着色较淡胞浆较多，淡兰色，含大量细小尘土 样颗粒。
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正常成人外周血白细胞分类参考值：
Ne
50%～70%
Ly
20%～40%
Mo
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4. 结果计算
白细胞总数 =4大格白细胞数（N） /4×10 ×20 ×106 = N÷ 20 ×109/L
用△. △ ×109/L（小数点后一位）表示
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5细胞计数原则
大方格四边压 线细胞数左不 数右，数上不 数下，
弓形移动
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实验报告内容
原理 试剂器材 操作步骤 实验结果 讨论
3%～8%
Eo
0.5%～5%
Hale Waihona Puke Baidu
Ba
0%～1%
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实验报告
精品课件
原理 方法 各类细胞百分比报告 讨论
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毛细血管采血标准操作程序
操作步骤： 1 采血部位成人以左手无名指内侧为宜，
半岁以下婴幼儿通常自拇指内侧或足跟 两侧采血。 2 轻轻按摩采血部位。 3 用棉签蘸消毒液消毒局部皮肤、待干。
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4 紧捏刺血部位，使其自然充血。 5 用无菌刺针穿刺取血，动作应迅速，深 度 2～3mm，稍加挤压以血液流出为宜。 6 用干棉球擦去第一滴血。 7 按需要依次采血。 8 采血完毕，用干棉球压住伤口，止血片 刻。
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诊断学-实验一
白细胞计数
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实验一、 白细胞计数
1.原理：血液经稀乙酸定量稀释并破坏 成熟红细胞，在血细胞计数池内计数规 定区域内的白细胞总数，换算成每升血 液中白细胞数。
2.试剂器材
白细胞稀释液：冰乙酸 2.0ml
蓝 3滴
10g/L亚甲
加蒸馏水 2
精品课件
器材
改良牛鲍血细胞计数板及 专用盖片、微量吸管、 带孔吸头、1ML刻度 移液管、小试管、洁 净软纱布、干棉球、 光学显微镜。
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3.器材
光学显微镜
推片，载玻片
[试剂]
Wright染液
Wright
1.0g
甲醇
600ml
磷酸盐缓冲液（PH6.4～6.8）
香柏油
[标本来源]
EDTA-K2抗凝全血 16
精品课件 17
3．白细胞分类：
细胞分布均匀的体尾交界处，滴 加香柏油一滴，油镜下分类计数。 分类时要有秩序的连续进行，避 免主观选择视野。通常分类计数 100个白细胞，计算并报告各种白
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诊断学 实验二
白细胞分类
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精品课件
1.分类原理：白细胞分类计数是 将血液制备成涂片，瑞氏染色后 显微镜下根据白细胞的形态特征 进行分类计数。通常分类100个白 细胞，计算得出各种白细胞所占 百分比
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2.瑞氏染色原理：瑞氏染料溶于甲醇，离解 为带正电的碱性美兰（M+）和带负电的酸性伊 红（E-）离子。细胞的染色既有物理的吸附作 用，又有化学的亲和作用。各种细胞成分的化 学性质不同，对染料的亲和力也不一样，故可 呈不同的着色特点。
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3.操作步骤
（1）加稀释液 用移液管向小试管内加入0.38ml白细胞稀释液。 （2）采血、稀释 用微量吸管采血20ul，拭去管外余血，释放于小试
管底部，用上部稀释液洗净吸管内余血，轻摇试管混匀，静置等其 溶血。 （3）清洁计数板及盖片（动作轻柔），夹持盖片缘纵向前推轻放于两 侧支持堤上。 （4）充计数池 将小试管轻微振荡2min，立即以一次性微量吸管吸取 混匀后的白细胞悬液，充入计数池内。静置2-3min，使细胞沉于计 数池底面。 （5）调试显微镜 将计数板放置载物台上，选择（4 × ）低倍镜，调节 聚光器使光线较暗，调节旋钮找到方格线，转至低倍镜（10×），调 节光亮 。 （6）计数 低倍镜下计数四角4个大方格内白细胞总数，压线细胞数上 不数下，数左不数右。
细胞所占比例。
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结果记录方式：
Ne 正 一 Ly 正 Mo 正 Eo 正 Ba 正
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各类成熟白细胞的形态学：
中性粒细胞（Ne）：在瑞氏染色血涂片上呈圆形，胞浆染 粉红色，核形一叶（杆状核）至五叶不等，以三叶者多见， 染成深紫红色，胞浆中有许多细小均匀紫红色颗粒。
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嗜酸性粒细胞（Eo）：较中性粒细胞稍大，胞核多 为两叶，呈眼镜、八字形，核染色质粗糙染深紫红 色，胞浆内充满粗大均匀的嗜酸性颗粒，瑞氏染色 时呈桔红色，有折光性。
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嗜碱性粒细胞（Ba）：胞浆中含有大小不等的嗜碱性颗 粒，瑞氏染色时呈兰黑色。于光学显微镜下常见胞浆中 有小空泡，乃因嗜碱性颗粒易溶于水或因功能活动而脱 颗粒所致；核呈淡紫红色常看不清，呈杆状或分叶状。
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淋巴细胞（Ly）：胞体呈圆形，在成人血涂片中以小淋 巴细胞为多见，核大呈深紫色致密而浓染，胞浆量极少； 大淋巴细胞胞浆量较多，呈清澈的淡蓝色，可见少量嗜 苯胺蓝颗粒，胞核圆或椭圆，常偏向细胞一侧，染色较 深。
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微量吸管的使用
1将带孔乳胶吸头轻轻套在微量吸管上，连接紧密不漏气； 2拇指和中指夹住吸头中下端，示指盖住吸头小孔，拇、
中指轻微挤压排出适量空气； 3将微量吸管插入抗凝血，拇、中指缓慢松劲（松动快血
液会吸入吸头），吸取抗凝血至所需刻度略上方（不能有 气泡），吸管呈水平略下垂，松开示指； 4用干棉球顺吸管向下拭尽管外余血（保证血量准确）， 轻触吸管下口吸去多余血量，使管内抗凝血正处所需刻度； 5将微量吸管插入小试管底部，三指轻微用力慢慢排出血 液，用上清液冲洗管内余血2-3次，轻摇试管混匀； 6拔出微量吸管弃入污物桶。
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单核细胞（Mo）：在瑞氏染色涂片上为12～20µm， 胞体圆形、椭圆形或不规则形；核形多种多样，最 重要的特点是染色质较细致疏松，呈丝网状或条缕 状，着色较淡胞浆较多，淡兰色，含大量细小尘土 样颗粒。
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正常成人外周血白细胞分类参考值：
Ne
50%～70%
Ly
20%～40%
Mo
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4. 结果计算
白细胞总数 =4大格白细胞数（N） /4×10 ×20 ×106 = N÷ 20 ×109/L
用△. △ ×109/L（小数点后一位）表示
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5细胞计数原则
大方格四边压 线细胞数左不 数右，数上不 数下，
弓形移动
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实验报告内容
原理 试剂器材 操作步骤 实验结果 讨论
3%～8%
Eo
0.5%～5%
Hale Waihona Puke Baidu
Ba
0%～1%
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实验报告
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原理 方法 各类细胞百分比报告 讨论
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