LB培养基配制
LB培养基怎样配制
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LB培养基怎样配制之袁州冬雪创作LB一般被诠释为Luria-Bertani,然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字来历于英语lysogeny broth,即溶菌肉汤.LB培养基是近些年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常常使用培养基之一.LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称普通培养基,含有酵母提取物、胰化蛋白胨和NaCl.酵母提取物:酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提,再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的淡黄色粉末,其中氨基酸含量30%以上,总蛋白50%以上,核苷酸10%以上,广泛用作生物培养基和食品调味品制造原料.胰化蛋白胨:一种优质蛋白胨,是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化,稀释干燥而成的白色粉末,含有丰富的氮源、氨基酸等.酵母提取物为微生物提供碳源、动力、磷酸盐、生长因子、维生素等;蛋白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生长环境(如渗透压),其次是提供无机盐.在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝结剂.琼脂在常常使用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化.琼脂在40℃时凝结,通常不被微生物分解操纵.固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的分歧而有所分歧.由于这种培养基多用于培养细菌,因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖.LB培养基配方(每升)酵母提取物 5g胰化蛋白胨 10g氯化钠 10gNaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌.LB固体培养基LB培养基 1L琼脂粉 15gNaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌.有时需在培养基中添加抗生素,琼脂凝结点为40℃,所以添加抗生素最好在50~55℃.LB培养基用途:用于一般细菌培养,特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保管和培养.LB培养基使用原理:蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持平衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培养基的凝结剂.LB培养基配制方法配制每升培养基,应该在950 ml去液态lb培养基离子水中加入:胰化蛋白胨10g 酵母提取物5g NaCl 10g 摇动容器直至溶质溶解.用5mol/LNaOH调pH至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌20min.2.抗生素的加入:高压灭菌后,将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中,待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素,以免温度过高导致抗生素失效,并充分摇匀.3.倒板:一般10ml倒1个板子.培养基倒入培养皿后,打开盖子,在紫外下照10-15分钟.4.保管:用封口胶封边,并倒置放于4℃保管,一个月内使用. 配400ml的话成分按比例减少就好了,pH还是要按规定的.。
lb培养基配方
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lb培养基配方LB培养基是由Bertani于1951年开发的一种常用的培养基。
它是一种富含营养物质的培养基,适用于多种细菌的生长和培养。
LB培养基常被用于细菌的培养和研究中,提供了细菌生长所需的营养物质和能量来源。
下面是LB培养基的配方和制备方法。
配方如下:1. 十氯酸钾(KClO₃):0.05 g/L2. 酵母浸粉(Yeast extract):5 g/L3. 蛋白胨(Peptone):10 g/L4. 氯化钠(NaCl):10 g/L5. 水:适量制备方法:1. 将酵母浸粉、蛋白胨和氯化钠加入适量的水中,搅拌溶解。
2. 加入十氯酸钾,继续搅拌混合。
3. 将溶液加热至沸腾,然后冷却至室温。
4. 调整溶液的pH值为7.0(如果需要)。
5. 用适当的容器(如试管或烧杯)装载培养基,然后用自动灭菌器(如高压灭菌器)进行灭菌。
注意事项:1. 在制备培养基时,要注意实验室卫生和操作规范,避免污染和交叉感染。
2. 使用无菌的工具和容器,避免微生物的污染。
3. 制备后的培养基应保持在适当的温度和环境条件下,以确保细菌的生长。
4. 若长时间存储,建议将培养基分装于适当的容器中,并密封保存在低温(如4℃)的冰箱中。
总结:LB培养基是一种简单易制备、适用范围广的细菌培养基,提供了细菌所需的营养物质和环境。
其配方简单,制备方法方便,常被广泛应用于生物学研究和实验室中的细菌培养。
请注意,以上为LB培养基的一般配方和制备方法,具体使用时还需根据实验需要进行调整和优化。
同时,个人在实验室操作时应遵循相关的实验安全规范和操作规程,确保实验的顺利进行。
LB培养基怎样配制精选文档
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L B培养基怎样配制精选文档TTMS system office room 【TTMS16H-TTMS2A-TTMS8Q8-LB培养基怎样配制LB一般被解释为Luria-Bertani,然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字来源于英语lysogeny broth,即溶菌肉汤。
LB培养基是近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常用培养基之一。
LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称普通培养基,含有酵母提取物、胰化蛋白胨和NaCl。
酵母提取物:酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提,再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的淡黄色粉末,其中氨基酸含量30%以上,总蛋白50%以上,核苷酸10%以上,广泛用作生物培养基和食品调味品制造原料。
胰化蛋白胨:一种优质蛋白胨,是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化,浓缩干燥而成的白色粉末,含有丰富的氮源、氨基酸等。
酵母提取物为微生物提供碳源、能源、磷酸盐、生长因子、维生素等;蛋白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生长环境(如渗透压),其次是提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化。
琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用。
固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
由于这种培养基多用于培养细菌,因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖。
LB培养基配方(每升)酵母提取物 5g胰化蛋白胨 10g氯化钠 10gNaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌。
LB固体培养基LB培养基 1L琼脂粉 15gNaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌。
有时需在培养基中添加抗生素,琼脂凝固点为40℃,所以添加抗生素最好在50~55℃。
LB培养基用途:用于一般细菌培养,特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保存和培养。
LB培养基怎样配制
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LB培养基怎样配制之五兆芳芳创作LB一般被解释为Luria-Bertani,然而按照其创造人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字来源于英语lysogeny broth,即溶菌肉汤.LB培养基是近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的经常使用培养基之一.LB培养基是一种应用最普遍和最普通的细菌根本培养基,有时又称普通培养基,含有酵母提取物、胰化蛋白胨和NaCl.酵母提取物:酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提,再经生物酶解的富含小份子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的淡黄色粉末,其中氨基酸含量30%以上,总蛋白50%以上,核苷酸10%以上,普遍用作生物培养基和食品调味品制造原料.胰化蛋白胨:一种优质蛋白胨,是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化,浓缩枯燥而成的白色粉末,含有丰厚的氮源、氨基酸等.酵母提取物为微生物提供碳源、能源、磷酸盐、生长因子、维生素等;蛋白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生长情况(如渗透压),其次是提供无机盐.在配制固体培养基时还要参加一定量琼脂作凝固剂.琼脂在经常使用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在滚水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化.琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分化利用.固体培养基中琼脂的含量按照琼脂的质量和蔼温的不合而有所不合.由于这种培养基多用于培养细菌,因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁衍.LB培养基配方(每升)酵母提取物 5g胰化蛋白胨 10g氯化钠 10gNaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌.LB固体培养基LB培养基 1L琼脂粉 15gNaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌.有时需在培养基中添加抗生素,琼脂凝固点为40℃,所以添加抗生素最好在50~55℃.LB培养基用途:用于一般细菌培养,特别用于份子生物学试验中大肠杆菌的保管和培养.LB培养基使用原理:蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂.LB培养基配制办法配制每升培养基,应该在950 ml去液态lb培养基离子水中参加:胰化蛋白胨10g 酵母提取物5g NaCl 10g 摇动容器直至溶质溶解.用5mol/LNaOH调pH至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌20min.2.抗生素的参加:高压灭菌后,将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中,待培养基温度降到55℃时(手可触摸)参加抗生素,以免温度太高导致抗生素失效,并充分摇匀.3.倒板:一般10ml倒1个板子.培养基倒入培养皿后,打开盖子,在紫外下照10-15分钟.4.保管:用封口胶封边,并倒置放于4℃保管,一个月内使用. 配400ml的话成分按比例削减就行了,pH仍是要按规则的.。
LB培养基怎样配制
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LB培养基怎样配制之马矢奏春创作LB一般被解释为Luria-Bertani, 然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法, 这个名字来源于英语lysogeny broth, 即溶菌肉汤.LB培养基是近年来用于培养基因工程受体菌(年夜肠杆菌)的经常使用培养基之一.LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基, 有时又称普通培养基, 含有酵母提取物、胰化卵白胨和NaCl.酵母提取物:酵母经破壁后将其中卵白质、核酸、维生素等抽提, 再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成份的淡黄色粉末, 其中氨基酸含量30%以上, 总卵白50%以上, 核苷酸10%以上, 广泛用作生物培养基和食品调味品制造原料.胰化卵白胨:一种优质卵白胨, 是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化, 浓缩干燥而成的白色粉末, 含有丰富的氮源、氨基酸等.酵母提取物为微生物提供碳源、能源、磷酸盐、生长因子、维生素等;卵白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生长环境(如渗透压), 其次是提供无机盐.在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂.琼脂在经常使用浓度下96℃时溶化, 一般实际应用时在沸水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化.琼脂在40℃时凝固, 通常不被微生物分解利用.固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的分歧而有所分歧.由于这种培养基多用于培养细菌, 因此, 要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性, 以利于细菌的生长繁殖.LB培养基配方(每升)酵母提取物 5g胰化卵白胨 10g氯化钠 10gNaOH调pH至7.0, 121℃、20min高压灭菌.LB固体培养基LB培养基 1L琼脂粉 15gNaOH调pH至7.0, 121℃、20min高压灭菌.有时需在培养基中添加抗生素, 琼脂凝固点为40℃, 所以添加抗生素最好在50~55℃.LB培养基用途:用于一般细菌培养, 特别用于分子生物学试验中年夜肠杆菌的保管和培养.LB培养基使用原理:卵白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂.LB培养基配制方法配制每升培养基, 应该在950 ml去液态lb培养基离子水中加入:胰化卵白胨10g 酵母提取物5g NaCl 10g 摇动容器直至溶质溶解.用5mol/LNaOH调pH至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌20min.2.抗生素的加入:高压灭菌后, 将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中, 待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素, 以免温渡过高招致抗生素失效, 并充沛摇匀.3.倒板:一般10ml倒1个板子.培养基倒入培养皿后, 翻开盖子, 在紫外下照10-15分钟.4.保管:用封口胶封边, 并颠倒放于4℃保管, 一个月内使用. 配400ml的话成份按比例减少就行了, pH还是要按规定的.。
LB培养基怎样配制
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LB培养基如何配制之杨若古兰创作LB普通被解释为Luria-Bertani,然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字来源于英语lysogeny broth,即溶菌肉汤.LB培养基是近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的经常使用培养基之一.LB培养基是一种利用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称普通培养基,含有酵母提取物、胰化蛋白胨和NaCl.酵母提取物:酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提,再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的淡黄色粉末,其中氨基酸含量30%以上,总蛋白50%以上,核苷酸10%以上,广泛用作生物培养基和食品调味品制作原料.胰化蛋白胨:一种优良蛋白胨,是以新颖牛肉和牛骨经胰酶消化,浓缩干燥而成的白色粉末,含有丰富的氮源、氨基酸等.酵母提取物为微生物提供碳源、能源、磷酸盐、生长因子、维生素等;蛋白胨次要提供氮源;NaCl次要提供微生物生长环境(如渗透压),其次是提供无机盐.在配制固体培养基时还要加入必定量琼脂作凝固剂.琼脂在经常使用浓度下96℃时溶化,普通实际利用时在沸水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化.琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用.固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的分歧而有所分歧.因为这类培养基多用于培养细菌,是以,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖.LB培养基配方(每升)酵母提取物 5g胰化蛋白胨 10g氯化钠 10gNaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌.LB固体培养基LB培养基 1L琼脂粉 15gNaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌.有时需在培养基中添加抗生素,琼脂凝固点为40℃,所以添加抗生素最好在50~55℃.LB培养基用处:用于普通细菌培养,特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保管和培养.LB培养基使用道理:蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠保持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂.LB培养基配制方法配制每升培养基,应当在950 ml去液态lb培养基离子水中加入:胰化蛋白胨10g 酵母提取物5g NaCl 10g 动摇容器直至溶质溶解.用5mol/LNaOH调pH至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌20min.2.抗生素的加入:高压灭菌后,将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中,待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素,以避免温度过高导致抗生素失效,并充分摇匀.3.倒板:普通10ml倒1个板子.培养基倒入培养皿后,打开盖子,在紫外下照10-15分钟.4.保管:用封口胶封边,并倒置放于4℃保管,一个月内使用. 配400ml的话成分按比例减少就行了,pH还是要按规定的.。
生物学实验 LB培养基的配置

实验6 LB培养基的配置一、实验目的明确培养基配置原理通过对LB培养基的配置,掌握配置培养的一般方法二、实验原理LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。
它含有酵母提取物、蛋白胨和NaCl。
其中酵母提取物为微生物提供碳源和能源,磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源,而NaCl 提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化,以免琼脂烧焦。
琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用。
固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
由于这种培养基多用于培养细菌,因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖。
LB培养基的配方如下:酵母提取物5g 蛋白胨10gNaCl 5g 琼脂15~20g水1000mL pH 7.4~7.6三、实验设备试管,三角烧瓶,烧杯,量筒,玻棒,培养基分装器,天平,牛角匙,高压蒸汽灭菌锅,pH 试纸(pH 5.5~9.0),棉花,牛皮纸,记号笔,麻绳,纱布等。
四、实验试剂酵母提取物,蛋白胨,NaCl,琼脂;1mol/L NaOH,1mol/L HCl;五、操作步骤1.称量按培养基配方比例依次准确地称取酵母提取物、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。
蛋白胨很易吸潮,在称取时动作要迅速。
另外,称药品时严防药品混杂,一把牛角匙用于一种药品,或称取一种药品后,洗净、擦干,再称取另一药品,瓶盖也不要盖错。
2.溶化在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量,用玻棒搅匀,然后,在石棉网上加热使其溶解。
待药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积。
如果配制固体培养基,将称好的琼脂放入已溶化的药品中,再加热溶化,在琼脂溶化的过程中,需不断搅拌,以防琼脂糊底使烧杯破裂。
最后补足所失的水分。
3.调pH在未调pH前,先用精密pH试纸测量培养基的原始pH值,如果pH偏酸,用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH,边加边搅拌,并随时用pH试纸测其pH值,直至pH达7.6。
常用培养基和抗生素的配制方法
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常用培养基和抗生素的配制方法1.LB培养基:材料:10g蛋白胨、5g酵母提取物、10g氯化钠、水至1000mL。
方法:将蛋白胨、酵母提取物和氯化钠加入水中,调整pH值至7.0,用自动出厂级水蒸馏水冲洗到1000mL。
2.M9盐基培养基:材料:64gNa2HPO4•7H2O、15gKH2PO4、2.5gNaCl、5gNH4Cl、水至1000mL。
方法:将Na2HPO4•7H2O、KH2PO4、NaCl和NH4Cl加入水中,调整pH值至7.0,用自动出厂级水蒸馏水冲洗到1000mL。
3.TSB培养基:材料:17g磷酸二氢钾、20g蛋白胨、5g氯化钠、水至1000mL。
方法:将磷酸二氢钾、蛋白胨和氯化钠加入水中,调整pH值至7.3,用自动出厂级水蒸馏水冲洗到1000mL。
4.青霉素琼脂培养基:材料:5g酵母提取物、1g酪蛋白、10gD-葡萄糖、2gK2HPO4、2gKH2PO4、20g琼脂、水至1000mL。
方法:将酵母提取物、酪蛋白、D-葡萄糖、K2HPO4和KH2PO4加入水中,调整pH值至7.0,加入琼脂,用自动出厂级水蒸馏水冲洗到1000mL。
抗生素的配制方法:1.青霉素盐酸盐溶液:材料:10g青霉素盐酸盐、水至100mL。
方法:将青霉素盐酸盐加入水中,搅拌至溶解。
2.氨苄青霉素钠盐溶液:材料:10g氨苄青霉素钠盐、水至100mL。
方法:将氨苄青霉素钠盐加入水中,搅拌至溶解。
3.克拉霉素溶液:材料:10g克拉霉素、水至100mL。
方法:将克拉霉素加入水中,搅拌至溶解。
4.挠敏霉素溶液:材料:10g挠敏霉素、水至100mL。
方法:将挠敏霉素加入水中,搅拌至溶解。
5.氯霉素溶液:材料:10g氯霉素、水至100mL。
方法:将氯霉素加入水中,搅拌至溶解。
以上是常用培养基和抗生素的基本配制方法,具体使用时还需要根据实验的需求和文献资料进行相应的优化和调整。
在配制过程中,需要注意配制环境的无菌操作、避免污染和准确称量材料的重量等。
实验室常用培养基的配制方法

实验室常用培养基的配制方法实验室中常用的培养基有很多种,包括通用培养基、选择性培养基、富集培养基等。
下面以常用的LB培养基和M9培养基为例,介绍它们的配制方法。
1. LB培养基(Luria-Bertani agar)LB培养基是一种通用培养基,适用于许多不同类型的细菌。
它由三种主要成分组成:蛋白胨、酵母提取物和氯化钠。
配方如下:-蛋白胨:10克-酵母提取物:5克-NaCl:10克-精制水:1000毫升步骤如下:1)在一个大容量烧杯中加入蛋白胨、酵母提取物和NaCl。
2)加入适量的精制水,搅拌溶解。
3) 将溶液移至一个继续器中,并用精制水补足至1000ml。
4)蓄满培养基的瓶子,盖上盖子,并使用自动压力灭菌器进行高压灭菌,或者将瓶子放入高压灭菌器中,将压力调至15磅(每平方英寸)。
2.M9培养基M9培养基是一种无机盐培养基,常用于细菌的生长和培养。
它的配方相对简单,由无机盐、葡萄糖和维生素B1组成。
配方如下:-Na2HPO4:6克-KH2PO4:3克-NaCl:0.5克-NH4Cl:1克-葡萄糖:0.4克-维生素B1:0.1克-精制水:1000毫升步骤如下:1)在一个大容量烧杯中加入Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和NH4Cl。
2)加入一部分的精制水,搅拌溶解。
3)加入葡萄糖和维生素B1,搅拌均匀。
4) 将溶液移至一个继续器中,并用精制水补足至1000ml。
5)蓄满培养基的瓶子,盖上盖子,并使用自动压力灭菌器进行高压灭菌,或者将瓶子放入高压灭菌器中,将压力调至15磅(每平方英寸)。
以上是LB培养基和M9培养基的配制方法的简要介绍。
当然,实验室中还有很多其他种类的培养基,它们的配制方法也各有不同,需要根据具体的实验目的和细菌类型进行调整。
在培养基配制过程中,应当注意严格按照配方比例配制,保持清洁卫生,避免污染,并注意高压灭菌的操作安全。
培养基配方及配制方法
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培养基配方及配制方法培养基是一种用于寄养和培养细胞、微生物、组织等生物体的基质。
其配方的选择和配制方法对于不同的生物体和研究目的有很大的差异。
以下是一般常用的培养基配方及简单的配制方法:1. LB培养基(Luria-Bertani)LB培养基是常见的用于大肠杆菌等细菌的培养基,其配方包括:- 1% 蛋白胨(tryptone): 添加营养源和能量- 0.5% 酵母粉(yeast extract): 提供维生素和生长因子-1%NaCl(氯化钠):调节渗透压-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法:将蛋白胨、酵母粉和NaCl加入蒸馏水中,调整pH至7.0,将混合液体加热至溶解,过滤杂质,如需固化则加入1.5%的琼脂。
2. YPD培养基(Yeast extract-Peptone-Dextrose)YPD培养基常用于酵母菌的培养,其配方包括:- 1% 酵母提取物(yeast extract): 提供维生素和生长因子- 2% 蛋白胨(peptone): 为细菌提供碳源和能量- 2% 葡萄糖(dextrose): 为细菌提供碳源和能量-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法:将酵母提取物、蛋白胨和葡萄糖加入蒸馏水中,调整pH至7.0,将混合液体加热至溶解,过滤杂质,如需固化则加入2%的琼脂。
3. DMEM培养基(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)DMEM培养基是常用的哺乳动物细胞培养基,其配方包括:-10%胎牛血清(FBS):提供生长因子和营养物质- 1% 青霉素-链霉素溶液(Penicillin-Streptomycin Solution): 防止细菌污染- 1% L-谷氨酰胺(L-Glutamine): 提供细胞代谢所需的基础物质-DMEM基础培养液:包括氨基酸、维生素等成分-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法:将胎牛血清、青霉素-链霉素溶液、L-谷氨酰胺和DMEM基础培养液加入蒸馏水中,调整pH值至7.4,混合均匀即可。
LB培养基怎样配制
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LB培养基怎样配制LB一般被解释为Luria-Bertani,然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字来源于英语lysogeny broth,即溶菌肉汤。
LB培养基是近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常用培养基之一。
LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称普通培养基,含有酵母提取物、胰化蛋白胨和NaCl。
酵母提取物:酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提,再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的淡黄色粉末,其中氨基酸含量30%以上,总蛋白50%以上,核苷酸10%以上,广泛用作生物培养基和食品调味品制造原料。
胰化蛋白胨:一种优质蛋白胨,是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化,浓缩干燥而成的白色粉末,含有丰富的氮源、氨基酸等。
酵母提取物为微生物提供碳源、能源、磷酸盐、生长因子、维生素等;蛋白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生长环境(如渗透压),其次是提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化。
琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用。
固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
由于这种培养基多用于培养细菌,因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖。
LB培养基配方(每升)酵母提取物 5g胰化蛋白胨 10g氯化钠 10g121℃、20min高压灭菌。
LB固体培养基LB培养基 1L琼脂粉 15g121℃、20min高压灭菌。
有时需在培养基中添加抗生素,琼脂凝固点为40℃,所以添加抗生素最好在50~55℃。
LB培养基用途:用于一般细菌培养,特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保存和培养。
LB培养基使用原理:蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂。
LB培养基,电泳缓冲液配制
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LB培养基的配制:
1.称取:胰蛋白胨(Tryptone)10 g/L
酵母提取物(Yeast extract) 5 g/L
氯化钠(NaCl)10 g/L
2.加三蒸水至950ml,用烧杯加热搅拌至澄清;
3.加三蒸水至1L;
4.加固体NaOH调节该培养基pH值,使其至7.0-7.4;
对于固体培养基:
加琼脂粉15g/L,加热搅拌至澄清
5.高压蒸汽灭菌25-30min.
20ml/个3-5mm 灭菌时锥形瓶不要超过二分之一
电泳缓冲液的配制:
配制1.2%琼脂糖电泳的50×TAE贮存液
配方:TAE贮存液40ml
三蒸水2L
溴化乙锭(EB)66.7μl (移液枪加) 总体积约为2L,终浓度333μg/μl(0.333/mgμl)
将上面试剂加至2.5L细口棕色瓶中,用力摇匀,避光保存。
Bio DL2000使用说明:
保存条件:短期:2-8℃
长期:-20℃
大小:2000 1000 750 500 250 100bp
制备1.2%的电泳用凝胶:
小胶:薄胶:20ml 0.24g
厚胶:30ml 0.36g
大胶:30ml 0.36g
电泳电压:
大电泳槽:150V 时间:30min-45min
小电泳槽:80V 时间:30min-40min。
LB培养基的制备
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LB培养基的制备一、LB培养基介绍LB培养基是一种近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常用培养基。
LB一般被解释为Luria-Bertani培养基,然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字来源於英语的lysogeny broth,即溶菌肉汤。
LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。
它含有酵母提取物、蛋白胨和NaCl。
其中酵母提取物为微生物提供碳源和能源,磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源,而NaCl提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化,以免琼脂烧焦。
琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用。
固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
由于这种培养基多用于培养细菌,因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖。
二、LB培养基的配方酵母提取物 5g蛋白胨 10gNaCl 5g琼脂 15~20g水 1000mLpH 7.4~7.6三、器材酵母提取物,蛋白胨, NaCl,琼脂;1mol/L NaOH, 1mol/L HCl;试管,三角烧瓶,烧杯,量筒,玻棒,培养基分装器,天平,牛角匙,高压蒸汽灭菌锅,pH试纸(pH 5.5~9.0),棉花,牛皮纸,记号笔,麻绳,纱布等。
四、操作步骤1.称量按培养基配方比例依次准确地称取酵母提取物、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。
蛋白胨很易吸潮,在称取时动作要迅速。
另外,称药品时严防药品混杂,一把牛角匙用于一种药品,或称取一种药品后,洗净、擦干,再称取另一药品,瓶盖也不要盖错。
2.溶化在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量,用玻棒搅匀,然后,在石棉网上加热使其溶解。
待药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积。
如果配制固体培养基,将称好的琼脂放入已溶化的药品中,再加热溶化,在琼脂溶化的过程中,需不断搅拌,以防琼脂糊底使烧杯破裂。
LB培养基怎样配制e
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LB培养基怎样配制LB一般被解释为Luria-Bertani,然而根据其创造人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字来源于英语lysogeny broth,即溶菌肉汤。
LB培养基是近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常用培养基之一。
LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌根底培养基,有时又称普通培养基,含有酵母提取物、胰化蛋白胨和NaCl。
酵母提取物:酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提,再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的淡黄色粉末,其中氨基酸含量30%以上,总蛋白50%以上,核苷酸10%以上,广泛用作生物培养基和食品调味品制造原料。
胰化蛋白胨:一种优质蛋白胨,是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化,浓缩枯燥而成的白色粉末,含有丰富的氮源、氨基酸等。
酵母提取物为微生物提供碳源、能源、磷酸盐、生长因子、维生素等;蛋白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生长环境(如渗透压),其次是提供无机盐。
在配制固体培养基时还要参加一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化。
琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用。
固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
由于这种培养基多用于培养细菌,因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖。
LB培养基配方(每升)酵母提取物 5g胰化蛋白胨 10g氯化钠 10gNaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌。
LB固体培养基LB培养基 1L琼脂粉 15gNaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌。
有时需在培养基中添加抗生素,琼脂凝固点为40℃,所以添加抗生素最好在50~55℃。
LB培养基用途:用于一般细菌培养,特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保存和培养。
LB培养基使用原理:蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂。
LB培养基的配制方法
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LB培养基的配制方法LB一般被解释为Luria-Bertani,然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字来源于英语lysogeny broth,即溶菌肉汤。
LB培养基是近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常用培养基之一。
LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称普通培养基,含有酵母提取物、胰化蛋白胨和NaCl。
酵母提取物:酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提,再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的淡黄色粉末,其中氨基酸含量30%以上,总蛋白50%以上,核苷酸10%以上,广泛用作生物培养基和食品调味品制造原料。
胰化蛋白胨:一种优质蛋白胨,是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化,浓缩干燥而成的白色粉末,含有丰富的氮源、氨基酸等。
酵母提取物为微生物提供碳源、能源、磷酸盐、生长因子、维生素等;蛋白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生长环境(如渗透压),其次是提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化。
琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用。
固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
由于这种培养基多用于培养细菌,因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖。
LB培养基用途用于一般细菌培养,特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保存和培养。
LB培养基使用原理:蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂。
LB培养基的配制方法配制每升培养基,应该在950 ml去液态lb培养基离子水中加入:胰化蛋白胨10g 酵母提取物5g NaCl 10g 摇动容器直至溶质溶解。
用5mol/LNaOH调pH 至7.0。
用去离子水定容至1L。
在15psi高压下蒸汽灭菌20min。
lb固体培养基的配方
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lb固体培养基的配方
lb固体培养的配方:
1.配制:100mlLB培养基加入1.5g琼脂粉
2.抗生素的加入:高压灭菌后,将融化的lb固体培养基置与55℃的水浴中,待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素,以免温度过高导致抗生素失效,并充分摇匀。
3.倒板:一般10ml倒1个板子。
培养基倒入培养皿后,打开盖子,在紫外下照10-15分钟。
4.保存:用封口胶封边,并倒置放于4℃保存,一个月内使用。
lb固体培养基是一种培养基的名称,生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种,使菌种成倍扩增,达到使用要求。
肉膏蛋白胨培养基是一种广泛用于培养细菌的培养基。
而lb培养基则是一种近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常用培养基。
两者都属于半合成培养基。
肉膏蛋白胨的培养基主要成分是牛肉膏、蛋白胨和NaCl。
而lb固体培养基的主要成分是胰蛋白胨、酵母提取物和氯化钠。
高氏合成一号培养基是一种用于培养放线菌的合成培养基。
培养基中的可溶性淀粉作为碳源和能源。
发酵用lb培养基的配置方法

发酵用lb培养基的配置方法
1. 准备材料:
- 水:用纯净水或去离子水,约100 mL
- Trypton(胰蛋白胨):10 g
- 酵母提取物:5 g
- NaCl:10 g
- pH试纸或pH计
- 高压灭菌器或离心机
2. 在水中加入Trypton (10 g),酵母提取物 (5 g) 和NaCl (10 g),搅拌至完全溶解。
3. 调节pH值:使用pH试纸或pH计检测溶液的pH值,将其
调整为7.0。
通常使用氢氧化钠(NaOH)或盐酸(HCl)进
行调节。
4. 将培养基分装到高压灭菌器或离心机中,并进行高温高压灭菌处理,约121°C下压力15磅,大约20-30分钟。
5. 培养基冷却后,可分装入无菌瓶中,并储存在4°C下可达
数月之久,即可使用。
以上便是发酵用lb培养基的简单步骤。
特别提示,实验室操
作过程中务必遵守实验室操作安全规定。
lb培养基的配置流程
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以下是 LB 培养基的配置流程:一、实验材料1. 胰蛋白胨(Tryptone)2. 酵母提取物(Yeast Extract)3. NaCl4. 琼脂粉(Agar)5. 蒸馏水6. 1mol/L NaOH7. 1mol/L HCl8. 培养皿9. 三角瓶10. 移液器11. 电子天平12. 高压灭菌锅二、实验步骤1. 称量根据配方,称取所需量的胰蛋白胨、酵母提取物和NaCl,放入三角瓶中。
LB固体培养基配制方法

LB 固体培养基配制方法
品牌
货号
批号
2. 仪器 天平: 灭菌锅 4℃冰箱 超净台
3. 配制方法 1) 组分浓度:
1%(w/v)胰蛋 白胨,0.5%(w/ v)酵母提取物,1 %(w/v )氯化钠,1.5%(w/ v)琼脂 粉 2) 配制量:1L 3) 方法 a) 分别称取胰蛋白胨 10g、酵母提取物 5g 和 NaCl 10g,置于烧杯中; b) 加入 800mL 蒸馏水于烧杯中,用玻璃棒搅拌,使药品全部溶化; c) 用 1M NaOH 调 PH 至 7.2; d) 将溶液倒入量筒中,加入 15g 琼脂粉,补加蒸馏水至 1L; e) 高压蒸汽灭菌 20min; f) 待培养基温度降至 50℃时,在超净台上加入所需抗生素,摇匀; g) 铺板,90mm 直径的培养皿约需 20mL 培养基; h) 带培养基凝固(约 10 分钟)后,将平板倒置,