2019邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁实验指导
环境监测与评价实验指导
实验一 邻菲罗啉分光光度法测定试样中的微量铁一、实验目的1．掌握邻菲罗啉分光光度法测定微量铁的方法原理2．熟悉绘制吸收曲线的方法，正确选择测定波长3．学会制作标准曲线的方法4．通过邻菲罗啉分光光度法测定微量铁，掌握分光光度计的正确使用方法，并了解此仪器的主要构造。
二、实验原理邻菲罗啉（phen ）和Fe 2+在pH3~9的溶液中，生成一种稳定的橙红色络合物Fe(phen)2+3 ，其lg K =21.3，κ508=1.1×104 L·mol -1·cm -1，铁含量在0.1~6μg·mL -1范围内遵守比尔定律。
显色前需用盐酸羟胺或抗坏血酸将Fe 3+全部还原为Fe 2+，然后再加入邻二氮菲，并调节溶液酸度至适宜的显色酸度范围。
有关反应如下：HCl OH NH 2Fe 223⋅++ ==== 22N Fe 2++↑+ 2H 2O + 4H + + 2Cl - N N Fe 2++ 3NN Fe 32+用分光光度法测定物质的含量，一般采用标准曲线法，即配制一系列浓度的标准溶液，在实验条件下依次测量各标准溶液的吸光度A ，以溶液的浓度C 为横坐标，相应的吸光度A 为纵坐标，绘制标准曲线。
在同样实验条件下，测定待测溶液的吸光度Ax ，根据测得吸光度值Ax 从标准曲线上查出相应的浓度值Cx ，即可计算试样中被测物质的质量浓度。
三、仪器和试剂1．仪器 分光光度计，1 cm 比色皿。
2．试剂（1）100 µg·mL -1铁标准储备溶液，10 µg·mL -1铁标准使用液。
（2）100 g·L -1盐酸羟胺水溶液50mL 。
用时现配。
（3）0.1%邻菲罗啉水溶液50mL 。
避光保存，溶液颜色变暗时即不能使用。
（4）1.0 mol·L -1乙酸钠溶液100mL 。
四、实验步骤1．显色标准溶液的配制 在序号为1~6的6只50 mL 容量瓶中，用移液管分别加入0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0 mL 铁标准使用液（含铁10µg·mL -1），分别加入1.00 mL 100 g·L -1盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min ，再各加入5.0 mL 1.0 mol·L -1乙酸钠溶液，3.00 mL 0.1% 邻二氮菲溶液，以水稀释至刻度，摇匀。
邻菲罗啉分光光度法测定铁[解析]
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邻菲罗啉分光光度法测定铁实验目的1.1 进一步了解朗伯-比尔定律的应用。
1.2 学会邻菲罗啉分光光度法测定铁的方法和正确绘制邻菲罗啉-铁的标准曲线。
1.3 了解分光光度计的构造及使用。
2 实验原理邻菲罗啉（又称邻二氮杂菲）是测定微量铁的一种较好试剂，其结构如下：在pH=1.5～9.5的条件下，Fe2+与邻菲罗啉生成很稳定的橙红色的络合物，反应式如下：=21.3，ε=11000。
此络合物的logK稳在显色前，首先用盐酸羟胺把Fe3+还原为Fe2+：4 Fe3++2NH2OH═4 Fe2++N2O+H2O+4H+测定时，控制溶液酸度在pH=2～9较适宜，酸度过高，反应速度慢，酸度太低，则Fe2+水解，影响显色。
Bi3+、Ca2+、Hg2+、Ag+、Zn2+离子与显色剂生成沉淀，Cu2+、Co2+、Ni2+离子则形成有色络合物，因此当这些离子共存时应注意它们的干扰作用。
3 仪器和试剂3.1 可见分光光度计。
3.2 铁盐标准溶液的配制：A液（母液→0.1g·L-1）：准确称取1.4060g分析纯硫酸亚铁铵[(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O]于200mL烧杯中，加入50.0mL 1mol·L-1HCl，完全溶解后，移入250mL容量瓶中，加去离子水稀释至刻度，摇匀。
B液（0.01g·L-1）：用25mL移液管，准确移取A液25.00mL，置于250mL的容量瓶中，加去离子水稀释至刻度，摇匀，备用。
3.3 乙酸-乙酸钠（HAc-NaAc）缓冲溶液（pH=4.6）：称取135g分析纯乙酸钠，加入120mL冰乙酸，加水溶解后，稀释至500mL。
3.4 ω=1%的盐酸羟胺水溶液，因不稳定，需临用时配制。
3.5 ω=0.1%的邻菲罗啉水溶液：先用少许乙醇溶解后，用水稀释，新近配制。
3.6 50mL容量瓶7个（先编好1、2、3、4、5、6、7号），10mL移液管（有刻度）1支，5mL移液管（有刻度）4支，5mL量筒1个，500mL烧杯1个，洗瓶1个，洗耳球1个，小滤纸，镜头纸。
铁的测定（邻菲罗啉分光光度法）
铁的测定（邻菲罗啉分光光度法）铁的测定（邻菲罗啉分光光度法）1 量程亚铁离⼦含量为5µg/L -200µg/L⽔样的测定。
2 仪器上海欣茂723C可见分光光度计，波长510nm，配有100mm⽐⾊⽫。
3 概要先将⾼铁⽤盐酸羟胺还原成亚铁。
在pH为4~5的条件下，亚铁与邻菲罗啉⽣成浅红⾊络合物。
4 试剂4.1 10%盐酸羟胺溶液（重/容）：称取10g盐酸羟胺，加⼊少量⾼纯⽔，待溶解后⽤⾼纯⽔稀释⾄100ml，摇匀并贮于棕⾊瓶中，塞紧瓶塞。
4.2 0.1%邻菲罗啉溶液（重/容）：称取1g邻菲罗啉（C12H8N2·H2O）溶于100ml⽆⽔⼄醇中，⽤⾼纯⽔稀释⾄1L，摇匀，贮于棕⾊瓶中，并在暗处保存。
4.3 ⼄酸-⼄酸铵缓冲液：称取100g⼄酸铵溶于100ml⾼纯⽔中，加200ml冰⼄酸，⽤⾼纯⽔稀释⾄1L，摇匀后贮存。
4.4 铁⼯作溶液（1ml含1µgFe）：取铁标准溶液（1ml含100µg）10.00ml，注⼊1L容量瓶中，⽤⾼纯⽔稀释⾄刻度（使⽤时配制）。
4.5 浓盐酸（优级纯）。
4.6 浓氨⽔。
4.7氨⽔（1+1）。
4.8 刚果红试纸：试纸切成约4mm×4mm的⼩⽅块。
5分析步骤5.1 ⼯作曲线的绘制：5.1.1 按表1量取⼀定量亚铁标准溶液（1mL含1µg Fe2+），分别注⼊⼀组50mL容量瓶中，加⽔稀释⾄30mL左右。
杯中，各加⼊1ml浓盐酸，加热浓缩⾄体积略⼩于25ml。
冷却⾄30℃左右，加⼊1ml盐酸羟胺溶液，摇匀，静置5min，加⼊5ml0.1%邻菲罗啉溶液，摇匀后每个锥形瓶中各加⼊⼀⼩块刚果红试纸，慢慢滴加氨⽔调节PH⾄3.8～4.1，使刚果红试纸恰由蓝⾊转变为紫⾊，然后依次加⼊5ml⼄酸-⼄酸铵缓冲液。
摇匀后移⼊原50ml容量瓶中，⽤⾼纯⽔稀释⾄刻度。
在723C型分光光度计上，⽤波长510nm，100mm长⽐⾊⽫，以⾼纯⽔为参⽐测定吸光度。
实验五邻菲啰啉分光光度法测定水中铁
实验安排实验一、滴定分析基本操作实验内容: 水分析化学第三版P402~405实验二、水中溶解氧的测定实验内容: 水分析化学第三版P417~419实验三、水中化学需氧量的测定(重铬酸钾法-回流法)实验内容: 水分析化学第三版P421~423、补充讲义P2~4实验四水中铁的测定（邻菲啰啉分光光度法）实验内容: 水分析化学第三版P435~439及补充讲义P8~9实验五、水中氨氮的测定（絮凝沉淀法预处理—纳氏试剂光度法）实验内容:水分析化学第三版P445~449及补充讲义P4~8实验六、水中钙、镁含量测定（原子吸收光谱法）实验内容: 水分析化学第三版P458~460及补充讲义P9~12实验七、水中油的测定（红外分光光度法）实验内容:补充讲义P13~16水质分析化学实验补充讲义2015年11月实验三、水中化学需氧量的测定（重铬酸钾法）一、概述化学需氧量（COD），是指在一定条件下，用强氧化剂处理水样时所消耗氧化剂的量，以氧的毫克/升来表示。
化学需氧量反映了水中受还原性物质污染的程度。
水中还原性物质包括有机物、亚硝酸盐、亚铁盐、硫化物等。
水被有机物污染是很普遍的，因此化学需氧量也作为有机物相对含量的指标之一。
水样的化学需氧量，可受加入氧化剂的种类及浓度，反应溶液的酸度、反应温度和时间，以及催化剂的有无而获得不同的结果。
化学需氧量亦是一个条件性指标，必须严格按操作步骤进行。
对于工业废水，我国规定用重铬酸钾法，其测得的值为COD Cr。
1．方法原理在强酸性溶液中，一定量的重铬酸钾氧化水样中还原性物质，过量的重铬酸钾以试亚铁灵作指示剂、用硫酸亚铁铵溶液回滴。
根据消耗的重铬酸钾量算出水样中还原性物质消耗氧的量。
2．干扰及其消除酸性重铬酸钾氧化性很强，可氧化大部分有机物，加入硫酸银作催化剂时，直链脂肪族化合物可完全被氧化，而芳香族有机物却不易被氧化，吡啶不被氧化，挥发性直链脂肪族化合物、苯等有机物存在于蒸气相，不能与氧化剂液体接触，氧化不明显。
邻菲罗啉分光光度法测定铁
邻菲罗啉分光光度法测定铁一、实验目的1、掌握邻菲罗啉分光光度法测定铁的原理和方法；2、学习分光光度法实验条件的选择方法，应用确定的条件测出待测试样中铁的含量；3、熟悉分光光度计的结构原理和使用方法（参阅附录1、2）二、实验原理分光光度法测定铁的理论依据是朗伯－比耳定律：当一束平行单色光通过单一均匀的、非散射的吸光物质溶液时，溶液的吸光度与溶液浓度和液层厚度的乘积成正比。
如果固定比色皿厚度测定有色溶液的吸光度，则溶液的吸光度与浓度之间有简单的线性关系，可根据相对测量的原理，用标准曲线法进行定量分析。
分光光度法的显色反应条件（酸度、显色剂用量、显色时间、显色温度等）和测量条件（测定波长、参比液的选择等）都是通过实验确定的。
用分光光度法测定铁的显色剂，常用的有邻菲罗啉（邻二氮菲）、磺基水杨酸、硫氰酸盐等。
其中邻菲罗啉法灵敏度高，选择性好，络合物十分稳定，故应用甚为广泛。
在pH＝3～9的溶液中，邻菲罗啉与Fe2+生成稳定的橙红色络合物：Fe2++3NN [(NN)3Fe]2+该络合物lgβ3＝21.3（20˚C），在510nm附近有最大吸收，摩尔吸光系数ε510＝1.1×104L · mol-1 · cm-1。
邻菲罗啉与Fe3+也生成3 : 1的淡蓝色络合物，lgβ3＝14.1。
因此，在显色前需用盐酸羟胺将Fe3+还原为Fe2+：2Fe3+ + 2NH2OH = 2Fe2+ + N2↑+ 2H2O + 2H+测定时，控制溶液酸度在pH＝3～9较适宜，酸度高时，反应速度慢；酸度太低，则Fe2+部分水解，影响测定。
通常在微酸性（pH＝5）溶液中显色。
本法选择性很高，相当于含铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO32－，20倍的Cr3+、Mn2+、V(v)、PO43－，5倍的Co2+、Cu2+等均不干扰测定。
三、试剂与仪器1、铁标准溶液（100μg/mL）：称取0.8634gNH4Fe(SO4)2· 12H2O（或0.7022g (NH4)2Fe(SO4)2· 6H2O）于洁净的烧杯中，加入100ml 2mol/L的盐酸，溶解后定量转移至1L容量瓶中，加水至刻线，摇匀；2、盐酸羟胺溶液：10％水溶液，两周内有效；3、邻菲罗啉溶液：0.1％水溶液。
邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁实验指导
实验二邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁——标准曲线法一、实验目的：1．掌握邻菲罗啉分光光度法测定微量铁的原理和方法；2．学会标准曲线的绘制方法及其使用。
二、原理：1.定量分析依据：A=κbc2.有关反应：4Fe3++2NH2OH·HCl=4Fe2++N2O↑+4H++2H2O+2Cl－橙红色配合物3.显色条件pH值控制：pH≈5.0。
显色时间：15min显色温度：室温显色剂及用量：邻二氮菲2.00mL4.测量条件λmax=510nm参比溶液：试剂空白吸光度范围：0.2-0.8三、仪器：可见分光光度计，1cm比色皿、100mL 容量瓶1个，20mL 移液管 1 支，50mL 容量瓶10 个，10mL 吸量管 1 支，1mL 吸量管（或移液管）1 支，5mL 移液管 1 支，2mL 移液管1 支。
四、试剂：①铁贮备液（100µg/mL）：准确称取0.7020克分析纯硫酸亚铁铵[（NH4）2Fe（SO4）2·6H2O]于100毫升烧怀中（或0.8640g分析纯的NH4Fe(SO4)2·12H2O，其摩尔质量为482.18g/mol），加50毫升1+1 H2SO4，完全溶解后，移入1000ml的容量瓶中，并用水稀释到刻度，摇匀，此溶液中Fe的质量浓度为100.0µg/mL。
（实验室准备好）②铁标准溶液（20.00 μg·mL－1）移取100.0μg·mL－1铁标准溶液20.00mL于100mL 容量瓶中，并用蒸馏水稀释至标线，摇匀。
(学生自行配制)③10%盐酸羟胺水溶液：（用时配制）。
④0.5%邻菲罗啉水溶液：配制时加数滴盐酸能助溶液或先用少许酒精溶解，再用水稀释至所需体积。
（临用时配制）或（避光保存，两周内有效）。
⑤HAc-NaAc缓冲溶液（pH≈5.0）:称取40克纯醋酸铵加到50毫升冰醋酸中，加水溶解后稀释至100毫升。
12五、测定步骤： 1、标准曲线的绘制：（1）分别吸取铁的标准溶液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00ml 于7支50ml 容量瓶中，加水至刻度；（2）依次分别加入10%盐酸羟胺溶液1ml ，混匀，加入5ml pH ≈5.0缓冲溶液，摇匀，加入0.5%邻菲罗啉溶液2ml ，摇匀，（3）放置15分钟后，在510nm 波长处，用1cm 比色皿，以试剂空白作为参比，测定各溶液的吸光度。
邻菲罗琳分光光度法测定水样中微量铁
铁含量/ug 吸光度A
0.0
50.0
100.0
150.0
200.0
250.0
m1
m2
四、结果计算
实验二 邻菲罗啉分光光度法 测定水样中的微量铁
一、实验目的
1、掌握邻菲罗啉分光光度法测定微量铁的原 理和方法； 2、学会标准曲线绘制的方法及正确选择测定 波长。
二、实验原理
Fe2+在PH=3～9时与显色剂邻菲 罗啉反应，生成稳定的橙红色配合 物，在510nm下测定吸光度，用 标准曲线法确定待测水样中铁的含 量。
三、试剂
1、铁贮备液（100ug/mL)：
称0.7020g(NH4)2Fe(SO4)26H2O，于 50mL(1+1)硫酸溶液中溶解后，转移至 1000mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。 此溶液中Fe2+质量浓度为100ug/mL
2、铁的标准使用溶液(25ug/mL)
准确移取铁贮备液25mL于100mL容量瓶中， 用水稀释至刻度，摇匀。此溶液中Fe2+质量 浓度为25ug/mL。 （临用时配制）
3、10%盐酸羟胺溶液。（临用时配制）
4、0.5%邻菲罗啉溶液。（临用时配制） 5 、缓冲溶液：40g醋酸铵加到50mL冰醋酸中， 再用水稀释到100mL。
三、实验步骤
1、标准曲线的绘制 取6个50mL干净具塞比色管，编号后依次加 入铁的标准使用液0.00mL、2.00mL、 4.00mL、6.00mL、8.00mL、10.0mL，加入 10%盐酸羟铵溶液1mL混匀，加5mL缓冲溶液、 0.5%邻菲罗啉溶液2mL，最后加蒸馏水稀释 至50mL,摇匀。15min后在510nm波长下，用 1cm比色皿，以空白试剂为参比溶液，测定各 溶液的吸光度。以50mL比色管中溶液的含铁 量（ug）为横坐标，相应的吸光度值为纵坐 标，绘制标准曲线。
邻菲罗啉分光光度法测定铁的含量
邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁一、实验目的：1、掌握邻菲罗啉分光光度法测定微量铁的原理和方法；2、学会标准曲线的绘制方法及其使用。
二、原理：亚铁离子（Fe2+）在pH=3~9时与邻菲罗啉生成稳定的橙红色络合物，应用此反应可用比色法测定铁。
橙红色络合物的吸光度与浓度的关系符合朗伯-比耳定律。
若用还原剂（如盐酸羟胺）把高铁离子还原为亚铁离子，则此法还可测定水中的高价铁和总铁的含量。
三、仪器：721型分光光度计、1cm比色皿、具赛比色管（50ml）、移液管、吸量管、容量瓶等。
四、试剂：1、铁贮备液（100µg/mL）：准确称取0.7020克分析纯硫酸亚铁铵[（NH4）2Fe（SO4）2·6H2O]于100毫升烧怀中（或0.8640g分析纯的NH4Fe(SO4)2·12H2O，其摩尔质量为482.18g/mol），加50毫升1+1 H2SO4，完全溶解后，移入1000ml的容量瓶中，并用水稀释到刻度，摇匀，此溶液中Fe的质量浓度为100.0µg/mL。
（实验室准备好）2、铁标准使用液（20µg/mL）：准确移取铁贮备液20.00ml于100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
此溶液中Fe2+的质量浓度为20.0µg/mL。
（学生配制）3、0.5%邻菲罗啉水溶液：配制时加数滴盐酸能助溶液或先用少许酒精溶解，再用水稀释至所需体积。
（临用时配制）4、10%盐酸羟胺水溶液：5、醋酸-醋酸钠缓冲溶液（pH=4.6）：称取40克纯醋酸铵加到50毫升冰醋酸中，加水溶解后稀释至100毫升。
五、测定步骤：1、标准曲线的绘制：（1）分别吸取铁的标准溶液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00ml于7支50ml比色管中，加水至刻度；（2）依次分别加入10%盐酸羟胺溶液1ml，混匀，加入5ml醋酸－醋酸铵缓冲溶液，摇匀，加入0.5%邻菲罗啉溶液2ml，摇匀，（3）放置15分钟后，在510nm波长处，用1cm比色皿，以空白作为参比，测定各溶液的吸光度。
邻菲罗啉实验报告
一、实验目的1. 掌握邻菲罗啉分光光度法测定微量铁的原理和方法；2. 学会标准曲线的绘制方法及其使用；3. 了解分光光度计的操作流程。
二、实验原理亚铁离子（Fe2+）在pH3~9时与邻菲罗啉生成稳定的橙红色络合物，该络合物的吸光度与铁的浓度成正比。
利用这一原理，通过分光光度法可以测定水样中铁的含量。
本实验采用盐酸羟胺作为还原剂，将水中的高价铁（Fe3+）还原为亚铁离子，从而测定水中的总铁含量。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：721型分光光度计、1cm比色皿、具塞比色管（50ml）、移液管、吸量管、容量瓶等。
2. 试剂：（1）铁贮备液（100g/mL）：准确称取0.7020克分析纯硫酸亚铁铵[（NH4）2Fe （SO4）2·6H2O]于100毫升烧杯中，加50毫升11 H2SO4，完全溶解后，移入1000ml的容量瓶中，并用水稀释到刻度，摇匀；（2）铁标准使用液（20g/mL）：准确移取铁贮备液20.00ml于100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀；（3）0.5%邻菲罗啉水溶液：配制时加数滴盐酸助溶液或先用少许酒精溶解，再用水稀释至所需体积；（4）10%盐酸羟胺水溶液；（5）醋酸-醋酸钠缓冲溶液：称取40克纯醋酸铵加到50毫升冰醋酸中，加水溶解后稀释至100毫升。
四、实验步骤1. 标准曲线的绘制：（1）取7个50ml具塞比色管，分别加入0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0ml铁标准使用液；（2）向各比色管中加入5ml醋酸-醋酸钠缓冲溶液、2.5ml盐酸羟胺溶液、5ml邻菲罗啉溶液；（3）用蒸馏水稀释至刻度，摇匀；（4）以蒸馏水为空白，在510nm波长处测定吸光度；（5）以铁浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品测定：（1）取50ml具塞比色管，加入5ml待测水样；（2）按照标准曲线绘制步骤，加入醋酸-醋酸钠缓冲溶液、盐酸羟胺溶液、邻菲罗啉溶液；（3）用蒸馏水稀释至刻度，摇匀；（4）以蒸馏水为空白，在510nm波长处测定吸光度；（5）根据标准曲线，计算样品中铁的含量。
邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁实验指导图文稿
邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁实验指导集团文件版本号：（M928-T898-M248-WU2669-I2896-DQ586-M1988）实验二邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁——标准曲线法一、实验目的：1．掌握邻菲罗啉分光光度法测定微量铁的原理和方法；2．学会标准曲线的绘制方法及其使用。
二、原理：1.定量分析依据：A=κbc2.有关反应：4Fe3++2NH2OH·HCl=4Fe2++N2O↑+4H++2H2O+2Cl－橙红色配合物3.显色条件pH值控制：pH≈5.0。
显色时间：15min显色温度：室温显色剂及用量：邻二氮菲2.00mL 4.测量条件λmax=510nm参比溶液：试剂空白吸光度范围：0.2-0.8三、仪器：可见分光光度计，1cm 比色皿、100mL 容量瓶 1个，20mL 移液管 1 支，50mL 容量瓶 10 个， 10mL 吸量管 1 支，1mL 吸量管（或移液管） 1 支，5mL 移液管 1 支，2mL 移液管1 支。
四 、试剂：①铁贮备液（100μg/mL ）：准确称取0.7020克分析纯硫酸亚铁铵[（NH 4）2Fe （SO 4）2·6H 2O]于100毫升烧怀中（或0.8640g 分析纯的NH 4Fe(SO 4)2·12H 2O ，其摩尔质量为482.18g/mol ），加50毫升1+1 H 2SO 4，完全溶解后，移入1000ml 的容量瓶中，并用水稀释到刻度，摇匀，此溶液中Fe 的质量浓度为 100.0μg/mL 。
（实验室准备好） ② 铁标准溶液（20.00 μg ·mL －1） 移取 100.0μg ·mL －1铁标准溶液20.00mL 于100mL 容量瓶中，并用蒸馏水稀释至标线，摇匀。
(学生自行配制)③ 10%盐酸羟胺水溶液：（用时配制）。
④ 0.5%邻菲罗啉水溶液：配制时加数滴盐酸能助溶液或先用少许酒精溶解，再用水稀释至所需体积。
实验二十 水中微量铁的测定—邻菲啰啉分光光度法
实验二十水中微量铁的测定—邻菲啰啉分光光度法一、实验目的1.学习如何选择吸光光度分析的实验条件；2.掌握用吸光光度法测定铁的原理及方法；3.掌握分光光度计和吸量管的使用方法。
二、实验原理铁的吸光光度法所用的显色剂较多，有邻二氮菲（又称邻菲啰啉，菲绕林）及其衍生物、磺基水杨酸、硫氰酸盐、5－Br－PADAP等。
其中邻二氮菲分光光度法的灵敏度高，稳定性好，干扰容易消除，因而是目前普遍采用的一种方法。
在pH为2～9的溶液中，Fe2＋与邻二氮菲（Phen）生成稳定的橘红色络合物Fe（Phen）32＋：其中lgβ3＝21.3，摩尔吸光系数ε508＝1.1×104 L·mol-1·cm-1。
当铁为＋3价时，可用盐酸羟胺还原：Cu2＋、Co2＋、Ni2＋、Cd2＋、Hg2＋、Mn2＋、Zn2+等离子也能与Phen 生成稳定络合物，在少量情况下，不影响Fe2＋的测定，量大时可用EDTA隐蔽或预先分离。
吸光光度法的实验条件，如测量波长，溶液酸度、显色剂用量、显色时间、温度、溶剂以及共存离子干扰及其消除等，都是通过实验来确定的。
本实验在测定试样中铁含量之前，先做部分条件试验，以便初学者掌握确定实验条件的方法。
条件试验的简单方法是：变动某实验条件，固定其余条件，测得一系列吸光度值，绘制吸光度－某实验条件的曲线，根据曲线确定某实验条件的适宜值或适宜范围。
三、仪器与药品1.分光光度计，pH计，50mL容量瓶8个（或比色管8支）2.100 μg·mL-1铁标准溶液：准确称取0.8634 g 分析纯 NH4Fe（SO4）2·12H2O于200mL烧杯中，加入20mL 6mol·L-1 HCl溶液和少量水，溶解后转移至1L容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。
3.邻二氮菲 1.5 g·L-1。
（新配制）；4.盐酸羟胺100 g·L-1（用时配制）。
5.NaAc 1mol·L-1。
仪器分析实验邻菲罗啉分光光度法测定铁
在分光光度计上，用1 cm吸收池，以试剂空白溶液(1号)为参 比，在440～560 nm之间，每隔10 nm测定一次待测溶液(5号) 的吸光度A，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收 曲线，从而选择测定铁的最大吸收波长。
比色皿的使用中，每改变一次试液浓度，比色皿都要洗干净Page 8
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实验注意事项：
✓试剂的加入必须按顺序进行； ✓定容后必须充分摇匀后进行测量； ✓分光光度计必须预热30min，稳定后才能进行测量； ✓比色皿必须配套，装上待测液后透光面必须擦拭干净； 切勿用手接触透光面； ✓在进行条件试验时，每改变一次试液浓度，比色皿都 要洗干净； ✓ 同一组溶液必须在同一台仪器上测量； ✓标准曲线的质量是测定准确与否的关键，标准系列溶 液配制时，必须严格按规范进行操作
朗伯－比尔定律
A lg 1 T
朗伯－比尔定律的物理意义：当一束平行单色光垂直照射到均 匀、非散射的吸光物质的溶液时，溶液的吸光度与吸光物质的 浓度及液层厚度成正比。
吸光度具有加和性
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三、仪器和试剂：
(1)0.1 g·L-1铁标准储备液 准确称取0.7020 g NH4Fe(SO4)2·6H2O置于烧杯中，加少量水和20 mL 1:1H2SO4 溶液，溶解后，定量转移到1L容量瓶中，用水稀释至刻度， 摇匀。 (2)10-3 mol·L-1铁标准溶液 可用铁储备液稀释配制。 (3)100 g·L-1盐酸羟胺水溶液 用时现配。 (4)1.5 g·L-1邻二氮菲水溶液 避光保存，溶液颜色变暗时即不 能使用。 (5)1.0 mol·L-1乙酸钠溶液。 (6)0.1 mol·L-1氢氧化钠溶液。
以水为参比，在选定波长下，用1 cm吸收池测量各溶液的 吸光度。绘制A—pH曲线，确定适宜的pH范围。
邻菲罗啉示差分光光度法测定铁矿石中全铁含量
邻菲罗啉示差分光光度法测定铁矿石中全铁含量
邻菲罗啉示差分光光度法是一种常用于测定铁矿石中全铁含量的方法。
该方法基于邻菲罗啉与铁离子之间的络合反应，通过测定络合物的光
学旋光度差来计算铁离子的含量。
具体操作步骤如下：
1. 样品制备：将铁矿石样品粉碎至均匀细粉末，取约0.5克样品加入100毫升锥形瓶中，加入10毫升盐酸和10毫升硝酸，加热至沸腾，
使样品完全溶解，冷却至室温。
2. 邻菲罗啉试剂制备：取适量邻菲罗啉试剂加入100毫升去离子水中，摇匀，制备成0.01mol/L的邻菲罗啉试剂。
3. 样品处理：取10毫升样品溶液加入50毫升锥形瓶中，加入10毫
升邻菲罗啉试剂，摇匀，静置5分钟。
4. 光度测定：将样品转移到比色皿中，用去离子水稀释至50毫升，用紫外-可见分光光度计测定在400纳米处的吸光度值。
5. 示差测定：将样品转移到示差皿中，用示差光度计测定在546纳米
处的旋光度差。
6. 计算全铁含量：根据标准曲线计算出样品中的铁离子含量，再乘以
样品中全铁的相对含量系数，即可计算出样品中的全铁含量。
邻菲罗啉示差分光光度法具有灵敏度高、准确度高、重现性好等优点，适用于测定铁矿石中全铁含量。
但需要注意的是，样品制备过程中要
避免铁离子的污染，同时要注意邻菲罗啉试剂的保存和使用，以保证
测定结果的准确性。
邻菲罗啉分光光度法测定铁的原理
邻菲罗啉分光光度法（也称为邻菲啰啉分光光度法）是一种常用的测定溶液中铁离子浓度的方法。
其原理基于邻菲啰啉（1,10-邻菲罗啉）与两价铁离子（Fe^2+）在酸性介质中形成深紫色络合物，这种络合物具有较大的摩尔吸光系数，在特定波长下可以进行光度测定。
以下是该方法的基本原理和步骤：
1. 络合反应原理：在pH为1.5至
2.5的盐酸介质中，邻菲啰啉（o-Phenanthroline）与Fe^2+形成深紫色的络合物，化学方程式如下：
\[ 3Fe^{2+} + 2C_{12}H_8N_2 \rightarrow Fe(C_{12}H_8N_2)_3^{2+} \]
这种络合物在510 nm左右有较大的摩尔吸光系数，适合用于光度测定。
2. 测定步骤：
-取待测铁离子溶液，加入盐酸和适量的邻菲啰啉试剂，形成深紫色络合物。
-使用分光光度计在510 nm左右测定络合物的吸光度。
-利用标准曲线或已知浓度的铁离子溶液做对照，根据吸光度值计算待测溶液中铁离子的浓度。
3. 注意事项：
-实验中盐酸的浓度和pH值需要严格控制，以保证络合物的形成和稳定。
-选择合适的波长进行光度测定，通常选择络合物的最大吸光度波长。
通过邻菲罗啉分光光度法，可以对水样或者其他溶液中的铁离子进行敏感、快速的测定，具有操作简便、结果稳定可靠的优点。
仪器分析实验邻菲罗啉分光光度法测定铁
一、实验目的：
1．掌握邻二氮菲法测定铁的原理； 2．了解分光光度计的构造； 3．掌握分光光度计的正确使用； 4．学会工作曲线的制作和样品的测定
二、实验原理：
邻二氮菲(phen)和Fe2+在pH3～9的溶液中，生成一种稳定的
橙红色络合物Fe(phen) 32+，其lgK=21.3，ε508=1.1 ×
朗伯－比尔定律
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朗伯－比尔定律的物理意义：当一束平行单色光垂直照射到均 匀、非散射的吸光物质的溶液时，溶液的吸光度与吸光物质的 浓度及液层厚度成正比。
吸光度具有加和性
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三、仪器和试剂：
(1)0.1 g·L-1铁标准储备液 准确称取0.7020 g NH4Fe(SO4)2·6H2O置于烧杯中，加少量水和20 mL 1:1H2SO4 溶液，溶解后，定量转移到1L容量瓶中，用水稀释至刻度， 摇匀。 (2)10-3 mol·L-1铁标准溶液 可用铁储备液稀释配制。 (3)100 g·L-1盐酸羟胺水溶液 用时现配。 (4)1.5 g·L-1邻二氮菲水溶液 避光保存，溶液颜色变暗时即不 能使用。 (5)1.0 mol·L-1乙酸钠溶液。 (6)0.1 mol·L-1氢氧化钠溶液。
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组成部分：光源，单色器，吸收池，检测器，显示装置 可见光区采用钨灯光源，玻璃Fra bibliotek收池，单色器为光栅
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四、实验步骤：
1．显色标准溶液的配制
在序号为1～6的6只50 mL容量瓶中，用吸量管分别加入0， 0.20，0.40，0.60，0.80，1.0 mL铁标准溶液(含铁0.1 g·L-1)， 分别加入1 mL 100 g·L-1盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min， 再各加入2 mL 1.5 g·L-1邻二氮菲溶液、5 mL 1.0 mol·L-1乙酸 钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。
测铁实验报告
一、实验目的1. 掌握邻菲罗啉分光光度法测定微量铁的原理和方法；2. 学会标准曲线的绘制方法及其使用；3. 了解水样中铁含量的检测方法及其应用。
二、实验原理邻菲罗啉分光光度法是一种测定微量铁的方法，其原理为：在pH3~9的条件下，亚铁离子与邻菲罗啉形成稳定的橙红色络合物。
该络合物的吸光度与铁浓度呈线性关系，符合朗伯-比耳定律。
通过测定吸光度，可以计算出样品中铁的含量。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：721型分光光度计、1cm比色皿、具塞比色管、移液管、吸量管、容量瓶等。
2. 试剂：（1）铁贮备液：准确称取1.9297g分析纯硫酸亚铁铵[FeSO4·7H2O]，加50mL 11H2SO4，完全溶解后，移入1000mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
此溶液中Fe的质量浓度为1.0000mg/mL。
（2）铁标准使用液：准确移取铁贮备液1.00mL于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
此溶液中Fe2+的质量浓度为10.00μg/mL。
（3）%邻菲罗啉水溶液：配制时加数滴盐酸能助溶液或先用少许酒精溶解，再用水稀释至所需体积。
（4）10%盐酸羟胺水溶液：称取10g盐酸羟胺，溶于100mL水中。
（5）醋酸-醋酸钠缓冲溶液：称取40g纯醋酸铵，加到50mL冰醋酸中，加水溶解后稀释至100mL。
四、实验步骤1. 标准曲线的绘制（1）取6个50mL具塞比色管，分别加入0.00、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00mL铁标准使用液；（2）向各比色管中加入1.0mL%邻菲罗啉水溶液；（3）向各比色管中加入2.0mL10%盐酸羟胺水溶液；（4）向各比色管中加入5.0mL醋酸-醋酸钠缓冲溶液；（5）用水稀释至刻度，摇匀；（6）在510nm波长下，以水为参比，测定各比色管的吸光度；（7）以铁浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品测定（1）取50mL水样于50mL具塞比色管中；（2）按照标准曲线绘制步骤，测定水样的吸光度；（3）根据标准曲线，计算水样中铁的含量。
邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁的含量
邻菲罗啉分光光度法测定水样中微量的铁一、实验目的：1、掌握邻菲罗啉分光光度法测定微量铁的原理和方法；2、学会标准曲线的绘制方法及其使用。
二、原理：亚铁离子（Fe2+）在pH=3~9时与邻菲罗啉生成稳定的橙红色络合物，应用此反应可用比色法测定铁。
橙红色络合物的吸光度与浓度的关系符合朗伯-比耳定律。
若用还原剂（如盐酸羟胺）把高铁离子还原为亚铁离子，则此法还可测定水中的高价铁和总铁的含量。
三、仪器：721型分光光度计、1cm比色皿、具赛比色管（50ml）、移液管、吸量管、容量瓶等。
四、试剂：1、铁贮备液（100µg/mL）：准确称取0.7020克分析纯硫酸亚铁铵[（NH4）2Fe（SO4）2·6H2O]于100毫升烧怀中（或0.8640g分析纯的NH4Fe(SO4)2·12H2O，其摩尔质量为482.18g/mol），加50毫升1+1 H2SO4，完全溶解后，移入1000ml的容量瓶中，并用水稀释到刻度，摇匀，此溶液中Fe的质量浓度为100.0µg/mL。
（实验室准备好）2、铁标准使用液（20µg/mL）：准确移取铁贮备液20.00ml于100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
此溶液中Fe2+的质量浓度为20.0µg/mL。
（学生配制）3、0.5%邻菲罗啉水溶液：配制时加数滴盐酸能助溶液或先用少许酒精溶解，再用水稀释至所需体积。
（临用时配制）4、10%盐酸羟胺水溶液：5、醋酸-醋酸钠缓冲溶液（pH=4.6）：称取40克纯醋酸铵加到50毫升冰醋酸中，加水溶解后稀释至100毫升。
五、测定步骤：1、标准曲线的绘制：（1）分别吸取铁的标准溶液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00ml于7支50ml比色管中，加水至刻度；（2）依次分别加入10%盐酸羟胺溶液1ml，混匀，加入5ml醋酸－醋酸铵缓冲溶液，摇匀，加入0.5%邻菲罗啉溶液2ml，摇匀，（3）放置15分钟后，在510nm波长处，用1cm比色皿，以空白作为参比，测定各溶液的吸光度。
《邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁》实训改进研究
《邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁》实训改进研究实验室环境下，水样中含有微量的铁离子，其检测具有非常重要的意义，甚至可以影响到水质的安全性。
传统的分析方法通常使用原子吸收光谱仪、荧光光度计等昂贵的仪器，而今天我们将介绍一种更加简便、经济、有效的方法——邻菲罗啉分光光度法，一种非常实用的光谱学技术。
邻菲罗啉是一种强配位剂，可以选择性地与铁结合，形成紫色的络合物，其最大吸收波长为510nm左右，故可用于测定水样中铁的含量。
本次实验的目的是改进邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁的方法，提高灵敏度和精度，减小误差。
首先，我们需要准备标准铁离子溶液和邻菲罗啉缓冲液。
标准铁离子溶液可使用国际标准样品或者自行配制，邻菲罗啉缓冲液可按照文献方法制备。
然后，在实验开始前，我们还需进行一些预处理步骤，如pH调节、过滤。
下面介绍实验步骤。
1. 将一定量待测样品和邻菲罗啉缓冲液混合均匀，静置2-3min，使络合物充分生成。
2. 用分光光度计测定样品和空白组的吸光度A和A0（注意要在络合物光谱吸收最大处进行测定，即大约为510nm处）。
3. 用线性回归法根据标准铁离子溶液的吸光度和浓度之间的线性关系，制定标准曲线。
4. 用标准曲线计算出待测样品中铁的含量。
由于实验过程中样品处理的复杂性，我们需要注意以下几点：1. 初步筛选出合适的邻菲罗啉浓度和样品配置比例，以保证后续实验的精度。
2. 严格控制空白试剂的选择及运用，杜绝背景干扰的产生。
3. 均衡样品放置时间，避免容器接触空气产生氧化反应，造成样品变化。
4. 实验操作时应注意样品混合均匀、倾倒液体渐进、移液过程中皆避免空气泡的产生等问题。
5. 正确校准仪器，保证实验的精准性和准确性。
邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁的方法具有检测快速、准确性高、经济等优点，是水质监测和环保领域重要的检测手段之一。
在实验中，我们需要多注意细节，认真测量，避免误差的产生，以提高实验的准确度。
同时，在实验操作中我们还应注意保护环境，防止污染并做好实验废液的处理工作，充分发挥邻菲罗啉分光光度法的检测功能，为环境保护事业做出贡献。
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精心整理实验二邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁——标准曲线法
一、实验目的：
1．掌握邻菲罗啉分光光度法测定微量铁的原理和方法；
2．学会标准曲线的绘制方法及其使用。
二、原理：
1.
2.
4Fe3+
橙红色配合物
3.
4.
λ
三
可见分光光度计，1cm比色皿、100mL 容量瓶 1个，20mL 移液管 1 支，50mL 容量瓶 10 个， 10mL 吸量管 1 支，1mL 吸量管（或移液管） 1 支，5mL 移液管 1 支，2mL 移液管1 支。
四、试剂：
①铁贮备液（100μg/mL）：准确称取0.7020克分析纯硫酸亚铁铵[（NH4）2Fe（SO4）
O]于100毫升烧怀中（或0.8640g分析纯的NH4Fe(SO4)2·12H2O，其摩尔质量为
2·6H2
.
482.18g/mol），加50毫升1+1 H2SO4，完全溶解后，移入1000ml的容量瓶中，并用水稀释到刻度，摇匀，此溶液中Fe的质量浓度为 100.0μg/mL。
（实验室准备好）②铁标准溶液（20.00 μg·mL－1）移取100.0μg·mL－1铁标准溶液20.00mL 于100mL容量瓶中，并用蒸馏水稀释至标线，摇匀。
(学生自行配制)
③ 10%盐酸羟胺水溶液：（用时配制）。
④ 0.5%邻菲罗啉水溶液：配制时加数滴盐酸能助溶液或先用少许酒精溶解，再用水稀释至所需体积。
（临用时配制）或（避光保存，两周内有效）。
⑤ HAc-NaAc缓冲溶液（pH≈5.0）:称取40克纯醋酸铵加到50毫升冰醋酸中，加水溶解后稀释至100毫升。
五、测定步骤：
1、标准曲线的绘制：
（1）分别吸取铁的标准溶液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00ml于7支50ml容量瓶中，加水至刻度；
（2）依次分别加入10%盐酸羟胺溶液1ml，混匀，加入5ml pH≈5.0缓冲溶液，摇匀，加入0.5%邻菲罗啉溶液2ml，摇匀，
（3）放置15分钟后，在510nm波长处，用1cm比色皿，以试剂空白作为参比，测定各溶液的吸光度。
附721型分光光度计操作过程：
1.检查仪器各调节钮的起始位置是否正确，选择波长，并将灵敏度档置第1档
2.接通电源，打开开关
3盖上比色皿暗盒盖，用调“100%”调节器使电表指针处于透过率“100%”位，打开比色皿暗盒盖，用调“0”调节器使电表指针处于透过率“0”位；预热
20min
4.放入参比溶液及试样溶液
5.校准：拉动吸收池拉杆，使参比溶液置于光路中，打开比色皿暗盒盖，用调
“0”调节器使电表指针处于透过率“0”位；盖上比色皿暗盒盖，用调
“100%”调节器使电表指针处于透过率“100%”位。
重复校正至稳定
.
精心整理
6.若调“100%”调节器不能使电表指针处于透过率“100%”位，打开比色皿暗
盒盖，则应放大灵敏度，重新调整直至稳定
7. 盖上样品盖，拉动吸收池拉杆，依次将待测溶液推入光路，读出吸光度值A。
连续读数后，立即打开比色皿暗盒盖,取出吸收池，参比溶液不取出。
8.再放入其他浓度待测溶液，继续调“0”及”100%”，按前面的“校准”步
骤重新调整直至稳定，再测量其他浓度待测溶液的吸光度A。
七．思考题
（1）T与A两者关系如何？分光光度测定时，一般读取A值，该值在标尺上什么范围好？为什么？如何控制被测溶液的A值在此范围内？。