酵母菌培养基的培养技术

酵母菌的培养技术

一.酵母菌的培养基的配方

1.麦芽汁培养基的配制

培养基成分:新鲜麦芽汁一般为10-15波林。

配制方法:(1)用水将大麦或小麦洗净，用水浸泡6-12h，置于15℃阴凉处发芽，上盖纱布，每日早、中、晚淋水一次，待麦芽伸长至麦粒的两倍时，让其停止发芽，晒干或烘干，研磨成麦芽粉，贮存备用。

(2)取一份麦芽粉加四份水，在65℃水浴锅中保温3-4h，使其自行糖化，直至糖化完全(检查方法是取0.5ml的糖化液，加2滴碘液，如无蓝色出现，即表示糖化完全)

(3) 糖化液用4-6层纱布过滤，滤液如仍混浊，可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清，加水20 m1，调匀至生泡沫，倒入糖化液中，搅拌煮沸，再过滤)。

(4)用波美比重计检测糖化液中糖浓度，将滤液用水稀释到10-15波林，调pH至6.4。如当地有啤酒厂，可用未经发酵，未加酒花的新鲜麦芽汁，加水稀释到10-15波林后使用。

(5)如配固体麦芽汁培养基时，加入2％琼脂，加热融化，补充失水。

(6)分装、加塞、包扎。

(7)高压蒸汽灭菌100 Pa灭菌20 min。

2.马铃薯葡萄糖培养基的配制

培养基成分:马铃薯20g 葡萄糖2 g 琼脂1.5-2g 水100ml 自然pH 配制方法:(1)配制20％马铃薯浸汁取去皮马铃薯200g，切成小块，加水1000m1。80℃浸泡lh用纱布过滤，然后补足失水至所需体积。100 Pa灭菌20 min。即成20％马铃薯浸汁，贮存备用。

（2)配制时，按每100 m1马铃薯浸汁加入2g葡萄糖，加热煮沸后加入2g琼脂，继续加热融化并补足失水。

(3)分装、加塞、包扎。

(4)高压蒸汽灭菌100 Pa灭菌20 min。

3.豆芽汁葡萄糖培养基的配制

培养基成分:黄豆芽10g 葡萄糖5g 琼脂 1.5～2g 水100ml 自然pH 配制方法:（1）称新鲜黄豆芽10g，置于烧杯中，再加入100ml水，小火煮沸30min，用纱布过滤，补足失水，即制成10％豆芽汁。

（2）配制时，按每100ml10％豆芽汁加入5g葡萄糖，煮沸后加入2g琼脂，继续加热融化，补足失水。

（3）分装、加塞、包扎。

（4）高压蒸汽灭菌100Pa灭菌20min。

4.蔡氏（Czapck）培养基的配制

培养基成分:蔗糖3g NaNO3 0.3g K2HPO40.1g KCl 0.05g MgSO4•7H2O 0.05g FeSO40.001g 琼脂 1.5～2g 蒸馏水100ml 自然pH

配制方法:（1）称量及溶化量取所需水量约2/3左右加入到烧杯中，分别称取蔗糖、NaNO3、K2HPO4、KCl、MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每100ml培养基加入1ml0.1％的FeSO4溶液。

（2）定容候药品全部溶解后，将溶液倒入量筒中，加水至所需体积。

（3）加琼脂加入所需量琼脂，加热融化，补足失水。

（4）分装、加塞、包扎。

（5）高压蒸汽灭菌100Pa灭菌20min。

5.YPD培养基的配制

YPD 或YPED，：Yeast Extract Peptone Dextrose Medium(1L)，又叫酵母浸出粉胨葡萄糖培养基，加入琼脂的又叫酵母膏胨葡萄糖（YPD）琼脂培养基用于酵母菌的培养

配方：1% Yeast Extract（酵母膏）2% Peptone（蛋白胨）2% Dextrose (glucose)（葡萄糖），若制固体培养基，加入2%琼脂粉

配制方法：（1）溶解10gYeast Extract（酵母膏）, 20gPeptone（蛋白胨）于900ml 水中，如制平板加入20g琼脂粉

(2) 高压121度20min

(3) 加入100ml 10×Dextrose (glucose)（葡萄糖）,葡糖糖溶液灭菌后加入

注：葡萄糖，yeast extract ,peptone溶液混合后在高温下可能会发生化学反应，

导致培养基成分变化，所以要分别灭菌后再混合。

YPEG：除了用3%乙醇和3%甘油代替葡萄糖作为碳源外，其他成分同YPD 二.酵母菌的培养条件

营养：酵母菌同其它活的有机体一样需要相似的营养物质，像细菌一样它有一套胞内和胞外酶系统，用以将大分子物质分解成细胞新陈代谢易利用的小分子物质，属于异养生物。

酸度：酵母菌能在PH值为3.0～7.5的范围内生长，最适PH值为4.5～5.0。

水分：像细菌一样，酵母菌必须有水才能存活，但酵母需要的水分比细菌少，某些酵母能在水分极少的环境中生长，如蜂蜜和果酱，这表明它们对渗透压有相当高的耐受性。

温度：在低于水的冰点或者高于47℃的温度下，酵母细胞一般不能生长，最适生长温度一般在20～30℃。

氧气：酵母菌在有氧和无氧的环境中都能生长，即酵母菌是兼性厌氧菌，在有氧的情况下，它把糖分解成二氧化碳和水且酵母菌生长较快。在缺氧的情况下，酵母菌把糖分解成酒精和二氧化碳。

三.酵母菌培养的工艺流程

四.酵母菌培养的设备

纯培养罐种子培养罐分离机高温灭菌设备真空转鼓造粒机干燥床震荡筛干酵母贮罐均质器包装机