R D 血型鉴定操作规程
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【参考文献】
中华人民共和国卫生部医政司编，全国临床检验操作规程（第四版）
1.试管法
【样本】抗凝或不抗凝的样本均可用于Rh鉴定试验。红细胞可悬浮在自身血清、血浆或盐水中，也可以洗涤后悬浮于盐水中。
【试剂】
（1）IgM抗D试剂
（2）Rh对照试剂
【操作】
（1）加1滴抗D到一洁净试管，并做好标记
（2）加1滴Rh对照试剂到第二个洁净试管中，并做好标记
（3）分别加1滴2%～5%红细胞悬液到每支试管中
（5）不断地从一边到另一边轻轻倾斜转动玻片或白瓷板，持续大概2分钟
（6）读取，解释并记录所有玻片或白瓷板凹孔中的结果
【结果判定】
（1）抗D试剂与红细胞反应表现凝集，而对照为阴性反应，表明待检红细胞为RhD阳性
（2）抗D试剂与对照均为阴性反应，表明待检红细胞为RhD阴性
（3）对照管凝集则试验无效
【注意事项】玻片法可能存在感染性标本暴露的风险，需要注意防范；玻片法不适用于检测弱D表型
【试剂】适合用于玻片法的低蛋白抗D试剂
【操作】
（1）加1滴抗D到一洁净的玻璃片或白瓷板凹孔中，并做好标记
（2）加1滴适合的对照试剂到另一洁净的玻璃片或白瓷板凹孔中，并做好标记
（3）向以上玻片或白瓷板凹孔中的每一种试剂中分别加1滴混匀的40%～50%待检红细胞悬液
（4）充分混合抗体试剂和细胞，用搅拌棒将混合物均匀分散
对象：全院职工
医疗药事制度
文件名称：Rh（D）血型鉴定
编写日期：2014.1
修订日期：2017.4
执行日期：2017.4
注：①本文件仅供本院人员使用，未经同意，不得翻印②本文件最终解释权归输血科
Rh（D）血型鉴定
【原理】Rh血型系统是输血医学中仅次于ABO系统的第二大血型系统。Rh血型系统常见的抗原有D和C、c、E、e五种，分别由RHD基因和RHCE基因编码，RhD和RhCE蛋白均是反复穿膜的蛋白质。使用相应的抗D、抗C、抗c、抗E、抗e五种血型试剂可以鉴定这些抗原。临床上，D抗原是Rh抗原中免疫原性最强的抗原，也是最具有临床意义的抗原，一般只做D抗原鉴定，凡带有D抗原者称为Rh阳性，不带D抗原者称为Rh阴性。
（4）轻轻混匀，通常（900～100）×g离心15秒
（5）轻轻重悬细胞扣，检查凝集
（6）评价反应强度，记录试验管和对照管得试验结果
【结果判定】
（1）抗D管凝集，对照管不凝集表明红细胞是RhD阳性
（2）对照管和抗D管均阴性，说明待测红细胞是RhD阴性结果
（3）对照管凝集则试验无效
2.玻片法
【样本】用玻片法进行RhD定型时，待检红细胞悬液的浓度是40%～50%
3.柱凝集法
【样本】同玻片法和试管法
【试剂】已加入抗D试剂的柱凝集血型卡
【操作】
（1）配制好的检测样本的红细胞悬液和试剂红细胞悬液.通常配制为0.8%～1பைடு நூலகம்0%浓度。
（2）在专用微柱凝集卡的RhD检测管中加入样本红细胞悬液50ul
（3）在专用血型血清学用离心机内离心
（4）判读并记录凝集反应结果
【结果判定】根据红细胞在凝胶柱内的反应情况解释凝集强度。出现凝集和（或）溶血为阳性，不凝集为阴性
中华人民共和国卫生部医政司编，全国临床检验操作规程（第四版）
1.试管法
【样本】抗凝或不抗凝的样本均可用于Rh鉴定试验。红细胞可悬浮在自身血清、血浆或盐水中，也可以洗涤后悬浮于盐水中。
【试剂】
（1）IgM抗D试剂
（2）Rh对照试剂
【操作】
（1）加1滴抗D到一洁净试管，并做好标记
（2）加1滴Rh对照试剂到第二个洁净试管中，并做好标记
（3）分别加1滴2%～5%红细胞悬液到每支试管中
（5）不断地从一边到另一边轻轻倾斜转动玻片或白瓷板，持续大概2分钟
（6）读取，解释并记录所有玻片或白瓷板凹孔中的结果
【结果判定】
（1）抗D试剂与红细胞反应表现凝集，而对照为阴性反应，表明待检红细胞为RhD阳性
（2）抗D试剂与对照均为阴性反应，表明待检红细胞为RhD阴性
（3）对照管凝集则试验无效
【注意事项】玻片法可能存在感染性标本暴露的风险，需要注意防范；玻片法不适用于检测弱D表型
【试剂】适合用于玻片法的低蛋白抗D试剂
【操作】
（1）加1滴抗D到一洁净的玻璃片或白瓷板凹孔中，并做好标记
（2）加1滴适合的对照试剂到另一洁净的玻璃片或白瓷板凹孔中，并做好标记
（3）向以上玻片或白瓷板凹孔中的每一种试剂中分别加1滴混匀的40%～50%待检红细胞悬液
（4）充分混合抗体试剂和细胞，用搅拌棒将混合物均匀分散
对象：全院职工
医疗药事制度
文件名称：Rh（D）血型鉴定
编写日期：2014.1
修订日期：2017.4
执行日期：2017.4
注：①本文件仅供本院人员使用，未经同意，不得翻印②本文件最终解释权归输血科
Rh（D）血型鉴定
【原理】Rh血型系统是输血医学中仅次于ABO系统的第二大血型系统。Rh血型系统常见的抗原有D和C、c、E、e五种，分别由RHD基因和RHCE基因编码，RhD和RhCE蛋白均是反复穿膜的蛋白质。使用相应的抗D、抗C、抗c、抗E、抗e五种血型试剂可以鉴定这些抗原。临床上，D抗原是Rh抗原中免疫原性最强的抗原，也是最具有临床意义的抗原，一般只做D抗原鉴定，凡带有D抗原者称为Rh阳性，不带D抗原者称为Rh阴性。
（4）轻轻混匀，通常（900～100）×g离心15秒
（5）轻轻重悬细胞扣，检查凝集
（6）评价反应强度，记录试验管和对照管得试验结果
【结果判定】
（1）抗D管凝集，对照管不凝集表明红细胞是RhD阳性
（2）对照管和抗D管均阴性，说明待测红细胞是RhD阴性结果
（3）对照管凝集则试验无效
2.玻片法
【样本】用玻片法进行RhD定型时，待检红细胞悬液的浓度是40%～50%
3.柱凝集法
【样本】同玻片法和试管法
【试剂】已加入抗D试剂的柱凝集血型卡
【操作】
（1）配制好的检测样本的红细胞悬液和试剂红细胞悬液.通常配制为0.8%～1பைடு நூலகம்0%浓度。
（2）在专用微柱凝集卡的RhD检测管中加入样本红细胞悬液50ul
（3）在专用血型血清学用离心机内离心
（4）判读并记录凝集反应结果
【结果判定】根据红细胞在凝胶柱内的反应情况解释凝集强度。出现凝集和（或）溶血为阳性，不凝集为阴性