乙肝两对半定量检测结果分析
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乙肝病毒入侵机体后引起机体免疫反应，主 要感染肝细胞， 引起肝细胞病变激发机体免疫系 统 产 生 对 肝 细 胞 清 除 ，甚 至 过 度 清 除[4]，导 致 肝 功 能异常。 本文用两种方法各分析了 1000 例乙肝两 对半的测定结果， 乙肝感染者及携带者单组和双 组 分 别 是 267 例 和 241 例 ， 构 成 比 是 26.7% 和 24.1%， 与全国报道相符。 经分析两对半模式以 2
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第 30 卷第 2 期 2012 年 4 月
实验与检验医学 EXPERIMENTAL AND LABORATORY MEDICINE
Vol.30 No.2 Apr. 2012
表 1 乙肝两对半 TRFIA 法和 ELISA 法模式分布和构成比
TRFIA
构成比
ELISA
模式
构 成 比 （%）
[9]许 永 志 ，谢 志 雄 ，朱 小 东.Coulter LH750 全 自 动 血 细 胞 分 析 仪 的 性 能 评 价 [J].实 验 与 检 验 医 学 ,2010,28(4):399-400.
[10]黄 胜，黄小颜，岑凯怡，等.湛江市区健康人外周血白细胞 VCS 参 数 调 查 [J].实 验 与 检 验 医 学 ,2011,29(2):109-112.
[3] 李振甲,陈泮藻,高 平,等.时间分辨荧光分析技术与应用[M] .北 京 : 科 学 出 版 社 ,1996 ：16-20.
[4] 托 亚,张 爱 梅,孙 明 元.1246 例 乙 型 肝 炎 血 清 五 项 标 志 物 的 检 测 分 析[J].中 国 疗 养 医 学 ，2006(3)：173-174.
[1] 章 敏,万 唐,彭慧中,等.前 S2、前 S1 抗原与乙肝病毒标志 物 的 相 关 性 探 讨 [J].实 验 与 检 验 医 学 ，2009，27(6) ：609.
[2] 杭建峰，吴英松，余伟鸿,等.癌胚抗原的时间分辩免疫荧 光 分 析 及 其 诊 断 试 剂 的 研 制 [J].细 胞 与 分 子 免 疫 学 ，2006，22(1)：121124.
[5] 王晓红.乙肝两对半定性与定量检测的 意 义[J].中 国 民 族 民 间 医 药 ，2009 ，18 ：82.
(上接第 160 页)菌和病毒感染中的应用[J].中国卫生检验杂志, 2010,20(11):2698-2699. [3]乐家新，王 芳，王成彬.急性细菌感染时中性粒细胞体积、传导率 和 光 散 射 参 数 的 变 化 与 临 床 意 义 [J]. 中 华 医 院 感 染 学 杂 志 , 2010,20(5):614-617. [4]梁 湘 辉 ，白 志 敏 ，刘 文 恩.中 性 粒 细 胞 VCS 参 数 在 菌 血 症 中 的 应 用 研 究 [J].现 代 检 验 医 学 杂 志 ,2010,25(1):98-101. [5]周 冰，钱厚明.中性粒细胞 VCS 参数临床价值初探[J].现 代 检 验 医 学 杂 志 ,2008,22(5):9-10. [6]王剑超，马春芳，吕国才，等.中性粒细胞 VCS 参数在急性细菌感 染 筛 查 中 的 初 步 应 用 [J]. 中 华 检 验 医 学 杂 志 ,2009,32(2):179-182.
(n=1000) （%） (n=1000)
2，4 阳性
10
1.0
7
0.7
2 阳性
351
35.1
320
32.0
1，5 阳性
26
2.6
24
2.4
1，4，5 阳性
140
14.0
121
12.1
1，3，5 阳性
94
9.4
94
9.4
2，5 阳性
70
7.0
69
6.9
2，4，5 阳性
129
12.9
110
11.0
4，5 阳性
和免疫监测。 1 材料与方法 1.1 标 本 来 源 对 来 自 门 诊 和 住 院 病 人 送 检 的 2000 份乙肝两对半检测的血清样本， 随机进行单 组和双组编号， 用两种免疫学分析法进行乙肝两 对 半 测 定 ， 单 组 用 荧 光 免 疫 分 析 法 (TRFIA)， 共 1000 份 ，双 组 用 酶 联 免 疫 分 析 法(ELISA)，共 1000 份。 检测人员均须空腹清晨静脉采血 3~5ml，分离 血清待检测。 测定严格按照乙肝两对半试剂盒的 操作说明。 1.2 仪器和试剂 1.2.1 仪器 荧光免疫分析法(TRFIA)，时间分辨荧 光分析仪由上海新波生物技术有限公司提供，型 号 是 EFFICUTA； 酶 联 免 疫 分 析 法 (ELISA)， 酶 标 仪、 洗板机是安图斯生物有限公司提供， 型号是 PHOMO。 1.2.2 试剂 时间分辨荧光免疫分析试剂由上海新 波生物技术有限公司提供， 每天同时做血清质控 和 6 点定标； 酶联免疫分析法由珠海丽珠生物技 术有限公司提供， 质控血清由卫生部临检中心提 供。
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第 30 卷第 2 期 2012 年 4 月
实验与检验医学 EXPERIMENTAL AND LABORATORY MEDICINE
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Vol.30 No.2 Apr. 2012
乙肝两对半定量检测结果分析
·经验交流·
龙绍芬，黎铁斌
(广西北海市第二人民医院，广西 北海 536000)
中图分类号 R446.62，R512.6+2 文献标识码 B doi:10.3969/j.issn.1674-1129.2012.02.031
[7]郭希超, 杨大干, 俞研迎，等.白细胞 VCS 参数在血液细菌感染中 的 应 用 研 究 [J].中 华 检 验 医 学 杂 志 ,2008,31(12):1330-1334.
[8]李 振 华 ，许 丽 娇 ，韦 宁 ，等.全 自 动 血 液 分 析 仪 新 参 数 在 细 菌 性 感 染 疾 病 中 的 变 化 及 临 床 应 用 [J].国 际 检 验 医 学 杂 志 ,2010,31(1): 90-91.
文章编号 1674-1129(2012)02-0187-02
关 键 词 ： 荧 光 免 疫 分 析 法 (TRFIA)； 酶 联 免 疫 分 析 法 (ELISA)；乙 肝 两 对 半 ；定 量
乙型病毒性肝炎(乙肝)是严重影响我国人民 身 体 健 康 的 传 染 病[1]，我 国 是 乙 肝 多 发 区 ，病 毒 携 带者占总人口的 10%左右， 而乙肝的诊治主要依 赖乙肝两对半测定，ELISA 是目前比较常用的乙肝 两对半检测方法，其方法简便成本低，但其影响因 素多，且只能作定性检测；TRFIA 是近十年发展起 来的一种高灵敏度的定量检测方法， 其应用范围 渐扩大,为临床实验室检测乙肝两对半提供定量分 析 ， [2，3] 利 于 临 床 对 乙 肝 病 毒 感 染 的 预 防 诊 断 治 疗 和疗效的观察，是具有良好发展前景的检测方法， 可作为临床乙肝病毒感染的主要血清学诊断指标
1.3 方 法 单 组 1000 份 样 本 用 荧 光 免 疫 分 析 法 (TRFIA)， 双 组 1000 份 样 本 用 酶 联 免 疫 分 析 法 (ELISA)，分 别 进 行 两 对 半 定 量 和 定 性 检 测 ， 检 测 操 作严格按照仪器操作规程及试剂合操作说明进
行。 1.4 结果判读 ELISA 法结果由 PHOMO 酶标仪判 读, HBsAg、HBsAb 和 HBeAg OD 值≥2.1 为阳性， OD 值＜2.1 为阴性，HBeAb 和 HBcAb OD 值≥COV 为阴性，OD 值＜COV 为阳性; TRFIA 结果由全自动 荧光检测仪测定,每天用 6 点定标，HBsAg≥0.2ng/ ml、HBsAb ≥10mIU/ml、HBeAg ≥0.5 PEI U/ml、 HBeAb≥0.2 PEI U /ml 和 HBcAb≥0.9PEI U/ml 判 定为阳性,反之阴性。 为表达方便,1、2、3、4、5 分别 表示 HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb 和 HBcAb。 1.5 统计学分 采用 SPSS11.0 统计软件进行数据 分析,资料组间采用配对 χ2 检验, P＜0.05 有统计学 意义。 2 结果 2.1 检 测 结 果 用 TRFIA 和 ELISA 各 检 测 1000 份血清样本, 乙肝两对半模式分布和构成比，详见 表 1。 2.2 两 种 方 法 五 项 标 志 物 阳 性 结 果 TRFIA 和 ELISA 各 1000 份血清样本, 检测乙肝两对半五项 标志物阳性结果对比，结果两种方法 HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb 和 HBcAb 差异无 统 计 学 意 义 (P＞0.05)。 详见表 2。 3 讨论
(n=1000)
构成比 （%）
1
267
26.7
241
24.1
2
561
56.1
506
50.6
3
95
9.5
95
9.5
4
312
31.2
253
25.3
5
499
49.9
437
43.7
注 ：1、2、3、4、5 分 别 表 示 HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb 和
HBcAb。
阳性，1、4、5 阳性，2、4、5 阳性和全阴为主，分别是 35．1% 和 32．0% 、14.0% 和 12.1% 、12.9% 和 11.0% 、 11.0%和 18.0%,大三阳(1、3、5 阳性)9．4%传染性较
强，尽早治疗。 我国是乙肝病毒感染高发地， 带菌者达全国
总人口的 10%左右，对乙肝病毒的预防、治疗和控 制很大程度上依赖乙肝两对半检测工作[5]。 本文分 析得知 TRFIA 和 ELISA 检测结果相比 较 1000 例 血 清 样 本 ，HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb 和 HBcAb 差异无统计学意义(P＞0.05)。 因此可根据临床 需要选择 TRFIA 法或 ELISA 法， 虽然两种方法在 统计学上无显著性差别, 但 TRFIA 和 ELISA 相比, TRFIA 法 HBsAg 灵敏度可达 0.2 ng/ml, 而 ELISA 灵 敏 度 是 2 ng/ml,因 此 对 于 急 性 乙 肝 “窗 口 期 ”的 检测 TRFIA 法更显示其优异性, 另外还可动态分 析 HbsAg 和 HBsAb、HBeAg 和 HBeAb 的 浓 度 变 化， 能为乙肝诊断和疗效的观察提供动态的分析 数据，TRFIA 法其灵敏度和特异性高且重复性好， 线性范围宽,除了能为乙肝诊断和疗效的观察提供 动态的分析数据， 并为乙肝疫苗的接种流行病学 调查提供可靠的依据，是比较理想的检测方法。 参考文献
29
2.9
13
1.3
5 阳性
9
0.9
5
0.5
1 阳性
3
0.3
-
-
全阴性
110
11.0
180
18.0
1，3，4，5 阳性
1
0.1
1
0.1
1，4 阳性
2
0.2
1
0.1
4 阳性
1
0.1
-
-
1，2，5 阳性
1
0.1
-
-
表 2 五项标志物阳性结果比较
项目
TRFIA 阳性 构成比 例数(n=1000) （%）
ELISA 阳性 例数
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表 1 乙肝两对半 TRFIA 法和 ELISA 法模式分布和构成比
TRFIA
构成比
ELISA
模式
构 成 比 （%）
[9]许 永 志 ，谢 志 雄 ，朱 小 东.Coulter LH750 全 自 动 血 细 胞 分 析 仪 的 性 能 评 价 [J].实 验 与 检 验 医 学 ,2010,28(4):399-400.
[10]黄 胜，黄小颜，岑凯怡，等.湛江市区健康人外周血白细胞 VCS 参 数 调 查 [J].实 验 与 检 验 医 学 ,2011,29(2):109-112.
[3] 李振甲,陈泮藻,高 平,等.时间分辨荧光分析技术与应用[M] .北 京 : 科 学 出 版 社 ,1996 ：16-20.
[4] 托 亚,张 爱 梅,孙 明 元.1246 例 乙 型 肝 炎 血 清 五 项 标 志 物 的 检 测 分 析[J].中 国 疗 养 医 学 ，2006(3)：173-174.
[1] 章 敏,万 唐,彭慧中,等.前 S2、前 S1 抗原与乙肝病毒标志 物 的 相 关 性 探 讨 [J].实 验 与 检 验 医 学 ，2009，27(6) ：609.
[2] 杭建峰，吴英松，余伟鸿,等.癌胚抗原的时间分辩免疫荧 光 分 析 及 其 诊 断 试 剂 的 研 制 [J].细 胞 与 分 子 免 疫 学 ，2006，22(1)：121124.
[5] 王晓红.乙肝两对半定性与定量检测的 意 义[J].中 国 民 族 民 间 医 药 ，2009 ，18 ：82.
(上接第 160 页)菌和病毒感染中的应用[J].中国卫生检验杂志, 2010,20(11):2698-2699. [3]乐家新，王 芳，王成彬.急性细菌感染时中性粒细胞体积、传导率 和 光 散 射 参 数 的 变 化 与 临 床 意 义 [J]. 中 华 医 院 感 染 学 杂 志 , 2010,20(5):614-617. [4]梁 湘 辉 ，白 志 敏 ，刘 文 恩.中 性 粒 细 胞 VCS 参 数 在 菌 血 症 中 的 应 用 研 究 [J].现 代 检 验 医 学 杂 志 ,2010,25(1):98-101. [5]周 冰，钱厚明.中性粒细胞 VCS 参数临床价值初探[J].现 代 检 验 医 学 杂 志 ,2008,22(5):9-10. [6]王剑超，马春芳，吕国才，等.中性粒细胞 VCS 参数在急性细菌感 染 筛 查 中 的 初 步 应 用 [J]. 中 华 检 验 医 学 杂 志 ,2009,32(2):179-182.
(n=1000) （%） (n=1000)
2，4 阳性
10
1.0
7
0.7
2 阳性
351
35.1
320
32.0
1，5 阳性
26
2.6
24
2.4
1，4，5 阳性
140
14.0
121
12.1
1，3，5 阳性
94
9.4
94
9.4
2，5 阳性
70
7.0
69
6.9
2，4，5 阳性
129
12.9
110
11.0
4，5 阳性
和免疫监测。 1 材料与方法 1.1 标 本 来 源 对 来 自 门 诊 和 住 院 病 人 送 检 的 2000 份乙肝两对半检测的血清样本， 随机进行单 组和双组编号， 用两种免疫学分析法进行乙肝两 对 半 测 定 ， 单 组 用 荧 光 免 疫 分 析 法 (TRFIA)， 共 1000 份 ，双 组 用 酶 联 免 疫 分 析 法(ELISA)，共 1000 份。 检测人员均须空腹清晨静脉采血 3~5ml，分离 血清待检测。 测定严格按照乙肝两对半试剂盒的 操作说明。 1.2 仪器和试剂 1.2.1 仪器 荧光免疫分析法(TRFIA)，时间分辨荧 光分析仪由上海新波生物技术有限公司提供，型 号 是 EFFICUTA； 酶 联 免 疫 分 析 法 (ELISA)， 酶 标 仪、 洗板机是安图斯生物有限公司提供， 型号是 PHOMO。 1.2.2 试剂 时间分辨荧光免疫分析试剂由上海新 波生物技术有限公司提供， 每天同时做血清质控 和 6 点定标； 酶联免疫分析法由珠海丽珠生物技 术有限公司提供， 质控血清由卫生部临检中心提 供。
Байду номын сангаас
第 30 卷第 2 期 2012 年 4 月
实验与检验医学 EXPERIMENTAL AND LABORATORY MEDICINE
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Vol.30 No.2 Apr. 2012
乙肝两对半定量检测结果分析
·经验交流·
龙绍芬，黎铁斌
(广西北海市第二人民医院，广西 北海 536000)
中图分类号 R446.62，R512.6+2 文献标识码 B doi:10.3969/j.issn.1674-1129.2012.02.031
[7]郭希超, 杨大干, 俞研迎，等.白细胞 VCS 参数在血液细菌感染中 的 应 用 研 究 [J].中 华 检 验 医 学 杂 志 ,2008,31(12):1330-1334.
[8]李 振 华 ，许 丽 娇 ，韦 宁 ，等.全 自 动 血 液 分 析 仪 新 参 数 在 细 菌 性 感 染 疾 病 中 的 变 化 及 临 床 应 用 [J].国 际 检 验 医 学 杂 志 ,2010,31(1): 90-91.
文章编号 1674-1129(2012)02-0187-02
关 键 词 ： 荧 光 免 疫 分 析 法 (TRFIA)； 酶 联 免 疫 分 析 法 (ELISA)；乙 肝 两 对 半 ；定 量
乙型病毒性肝炎(乙肝)是严重影响我国人民 身 体 健 康 的 传 染 病[1]，我 国 是 乙 肝 多 发 区 ，病 毒 携 带者占总人口的 10%左右， 而乙肝的诊治主要依 赖乙肝两对半测定，ELISA 是目前比较常用的乙肝 两对半检测方法，其方法简便成本低，但其影响因 素多，且只能作定性检测；TRFIA 是近十年发展起 来的一种高灵敏度的定量检测方法， 其应用范围 渐扩大,为临床实验室检测乙肝两对半提供定量分 析 ， [2，3] 利 于 临 床 对 乙 肝 病 毒 感 染 的 预 防 诊 断 治 疗 和疗效的观察，是具有良好发展前景的检测方法， 可作为临床乙肝病毒感染的主要血清学诊断指标
1.3 方 法 单 组 1000 份 样 本 用 荧 光 免 疫 分 析 法 (TRFIA)， 双 组 1000 份 样 本 用 酶 联 免 疫 分 析 法 (ELISA)，分 别 进 行 两 对 半 定 量 和 定 性 检 测 ， 检 测 操 作严格按照仪器操作规程及试剂合操作说明进
行。 1.4 结果判读 ELISA 法结果由 PHOMO 酶标仪判 读, HBsAg、HBsAb 和 HBeAg OD 值≥2.1 为阳性， OD 值＜2.1 为阴性，HBeAb 和 HBcAb OD 值≥COV 为阴性，OD 值＜COV 为阳性; TRFIA 结果由全自动 荧光检测仪测定,每天用 6 点定标，HBsAg≥0.2ng/ ml、HBsAb ≥10mIU/ml、HBeAg ≥0.5 PEI U/ml、 HBeAb≥0.2 PEI U /ml 和 HBcAb≥0.9PEI U/ml 判 定为阳性,反之阴性。 为表达方便,1、2、3、4、5 分别 表示 HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb 和 HBcAb。 1.5 统计学分 采用 SPSS11.0 统计软件进行数据 分析,资料组间采用配对 χ2 检验, P＜0.05 有统计学 意义。 2 结果 2.1 检 测 结 果 用 TRFIA 和 ELISA 各 检 测 1000 份血清样本, 乙肝两对半模式分布和构成比，详见 表 1。 2.2 两 种 方 法 五 项 标 志 物 阳 性 结 果 TRFIA 和 ELISA 各 1000 份血清样本, 检测乙肝两对半五项 标志物阳性结果对比，结果两种方法 HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb 和 HBcAb 差异无 统 计 学 意 义 (P＞0.05)。 详见表 2。 3 讨论
(n=1000)
构成比 （%）
1
267
26.7
241
24.1
2
561
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506
50.6
3
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4
312
31.2
253
25.3
5
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437
43.7
注 ：1、2、3、4、5 分 别 表 示 HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb 和
HBcAb。
阳性，1、4、5 阳性，2、4、5 阳性和全阴为主，分别是 35．1% 和 32．0% 、14.0% 和 12.1% 、12.9% 和 11.0% 、 11.0%和 18.0%,大三阳(1、3、5 阳性)9．4%传染性较
强，尽早治疗。 我国是乙肝病毒感染高发地， 带菌者达全国
总人口的 10%左右，对乙肝病毒的预防、治疗和控 制很大程度上依赖乙肝两对半检测工作[5]。 本文分 析得知 TRFIA 和 ELISA 检测结果相比 较 1000 例 血 清 样 本 ，HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb 和 HBcAb 差异无统计学意义(P＞0.05)。 因此可根据临床 需要选择 TRFIA 法或 ELISA 法， 虽然两种方法在 统计学上无显著性差别, 但 TRFIA 和 ELISA 相比, TRFIA 法 HBsAg 灵敏度可达 0.2 ng/ml, 而 ELISA 灵 敏 度 是 2 ng/ml,因 此 对 于 急 性 乙 肝 “窗 口 期 ”的 检测 TRFIA 法更显示其优异性, 另外还可动态分 析 HbsAg 和 HBsAb、HBeAg 和 HBeAb 的 浓 度 变 化， 能为乙肝诊断和疗效的观察提供动态的分析 数据，TRFIA 法其灵敏度和特异性高且重复性好， 线性范围宽,除了能为乙肝诊断和疗效的观察提供 动态的分析数据， 并为乙肝疫苗的接种流行病学 调查提供可靠的依据，是比较理想的检测方法。 参考文献
29
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13
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5 阳性
9
0.9
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0.5
1 阳性
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0.3
-
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全阴性
110
11.0
180
18.0
1，3，4，5 阳性
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0.1
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0.1
1，4 阳性
2
0.2
1
0.1
4 阳性
1
0.1
-
-
1，2，5 阳性
1
0.1
-
-
表 2 五项标志物阳性结果比较
项目
TRFIA 阳性 构成比 例数(n=1000) （%）
ELISA 阳性 例数