PAGE胶蛋白微量回收试剂盒使用说明
PAGE胶蛋白微量回收试剂盒使用说明
PAGE胶蛋白微量回收试剂盒使用说明胶蛋白微量回收试剂盒（以下简称试剂盒）是一种用于从聚丙烯酰胺凝胶电泳（）胶中回收目标蛋白质的试剂盒。
本文将详细介绍试剂盒的使用方法。
一.实验前准备1.准备好实验室所需的培养基、显微镜玻片等。
2.检查试剂盒中的试剂瓶是否有球结，如有疑问请勿使用。
二.胶回收实验步骤1.准备样品：取适量的包含目标蛋白质的胶，将其剪碎并放入E盒洗涤缓冲液中，孵育15分钟，然后通过藻蓝溶液染色观察胶中的蛋白条带。
2.胶块处理：将BL3溶液倒入胶块处理管中，将样品转移到胶块处理管中，尽量避免将胶块带入胶块处理管。
然后用吸滤纸吸去底部的液体，加入2次体积的洗涤缓冲液洗涤胶块。
3.添加胶析试剂：将胶块处理管倒置并放置在收集管上，将胶析试剂加入胶块处理管中，使其接触胶块。
注意避免产生气泡。
缓慢旋转收集管，使胶析试剂均匀分布。
4.离心：将收集管与胶块处理管在离心机上离心10分钟，使胶析试剂顺着离心力聚集在胶块底部。
保留悬液。
5.胶结析：从收集管底部用吸头吸去尽量多的溶液，用吸头吸取底部的胶，放入重结析管中，加入BL3溶液充满整个管子。
注意避免产生气泡。
离心2分钟，废液倒掉。
6. 洗涤蛋白：重置重结析管的位置，用2ml洗涤缓冲液洗涤胶2次，每次洗涤10分钟。
收集液体。
7. 胶脱水：加入3ml脱水溶液，重置离心管的位置，离心2分钟，废液倒掉。
重复此步骤2次，最后倒掉废液。
8.再溶解：加入约30μl再溶解缓冲液，然后离心2分钟，收集上清液。
9.分析：取适量的上清液进行进一步实验。
三.注意事项1.使用试剂盒前，请阅读使用说明书，并严格按照说明操作。
2.实验中使用的所有试剂和器材都必须经过严格的无菌操作。
3.在实验过程中，应注意避免直接接触试剂与胶液。
4.在洗涤、离心和脱水过程中，要小心操作，避免试剂或胶溶液外溢。
5.在试剂盒过程中，应注意实验室内的清洁和卫生。
四.结语。
胶原蛋白酶2,9检测试剂盒使用说明
胶原蛋白酶2,9检测试剂盒使用说明货号:M1030规格：50assays产品内容：1.2×SDS-PAGE non-reducing buffer1.5ml,−20ºC；2.10×Substrate G,50ml,−20ºC；3.10×Buffer A,50ml,4ºC,使用时用蒸馏水稀释；4.10×Buffer B,50ml,4ºC,使用时用蒸馏水稀释；5.SDS-PAGE凝胶蛋白质考马斯亮蓝染色液，4ºC。
产品说明：基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)以无活性的酶原形式分泌，活化后能够降解细胞外基质的胶原蛋白，又称胶原酶。
通过影响细胞外基质，胶原酶参与胚胎发育、形态发生、组织重塑等过程，并参与炎症、肿瘤、心血管、神经等许多疾病过程。
血浆与组织中的MMP-2、MMP-9参与各种生理与病理过程，其在临床诊断和治疗中的意义日益受到重视。
本试剂盒采用酶谱法(zymography)检测MMP-2、MMP-9活性。
Zymography是一种广为使用的、基于SDS-PAGE电泳和反相凝胶染色的蛋白酶检测方法，其灵敏度可达1nM，高于ELISA方法2，其基本原理和程序是：制备加有胶原酶底物的SDS-PAGE凝胶，含蛋白酶的样品在此凝胶中进行电泳，电泳结束后取出凝胶与酶反应Buffer孵育，凝胶染色与脱色。
凝胶中由于含底物蛋白而被深染，形成深色背景，但在有蛋白酶条带的位置，蛋白酶将降解凝胶中的底物蛋白，因而不被染色而形成透亮区域，从而能同时指示MMP-2、MMP-9的大小位置(酶谱)及活性。
本试剂盒提供MMP-2、MMP-9特异蛋白底物及酶学反应缓冲液，可检测少至0.1~0.5μl血液中的MMP-2、MMP-9酶谱及活性，检测灵敏度~1nM。
试剂盒可进行50次标准小胶检测，如果小胶加样孔为10~15个，则总计可检测500~750个样品。
page胶蛋白微量回收试剂配方
page胶蛋白微量回收试剂配方【最新版】目录一、引言1.介绍 page 胶蛋白微量回收试剂配方的背景和意义2.概述本篇文章的主要内容二、page 胶蛋白微量回收试剂的配方1.试剂的种类和作用2.各试剂的比例和配制方法三、试剂的特性和应用1.试剂的优点和特性2.试剂在 page 胶蛋白微量回收中的应用四、实验操作步骤1.实验的准备工作2.实验的具体操作流程五、实验结果与分析1.实验结果的描述2.实验结果的分析和讨论六、结论1.总结 page 胶蛋白微量回收试剂配方的特点和优点2.对未来研究的展望正文在生物科学研究中，胶蛋白是一类重要的蛋白质，它们在细胞信号传导、细胞黏附和迁移等过程中起着关键作用。
然而，由于胶蛋白的微量特性，对其进行回收和研究一直是一个难题。
近年来，page 胶蛋白微量回收试剂配方的出现，为胶蛋白的研究提供了新的可能。
本文将详细介绍page 胶蛋白微量回收试剂配方的配制方法和应用。
二、page 胶蛋白微量回收试剂的配方page 胶蛋白微量回收试剂主要包括以下几种成分：聚乙二醇（PEG）、十二烷基磺酸钠（SDS）、甘油和磷酸缓冲液。
其中，PEG 作为载体，可以增加胶蛋白的溶解度；SDS 则可以消除胶蛋白的电荷，防止其沉淀；甘油和磷酸缓冲液则可以提供稳定的 pH 环境。
这些试剂的比例一般为：PEG:SDS:甘油：磷酸缓冲液=1:1:1:1。
三、试剂的特性和应用page 胶蛋白微量回收试剂具有以下优点：一是能够高效地回收胶蛋白，回收率可以达到 90% 以上；二是操作简单，只需要将样品与试剂混合，然后离心即可；三是试剂的毒性低，对实验者的危害小。
因此，该试剂配方已经被广泛应用于胶蛋白的研究中。
四、实验操作步骤实验的准备工作主要包括：准备试剂、准备样品和准备离心机。
实验的具体操作流程如下：首先，将样品与试剂混合，然后放入离心机中离心，离心结束后，收集上清液，即为回收的胶蛋白溶液。
五、实验结果与分析实验结果显示，使用 page 胶蛋白微量回收试剂配方，可以有效地回收胶蛋白。
胶回收试剂盒成分及作用
胶回收试剂盒成分及作用
小伙伴们！今天咱们来唠唠胶回收试剂盒的那些事儿。
首先呢，胶回收试剂盒里有结合缓冲液。
这东西可重要啦！它的作用就是为了让咱们从琼脂糖凝胶里切下来的DNA片段能够很好地结合到硅胶膜上。
你想啊，如果没有这个结合缓冲液，那DNA片段就像没头的苍蝇似的，到处乱飘，根本没法好好进行下一步回收工作呢！我感觉这个结合缓冲液的量得控制好，不过具体多少有时候也得根据实际情况来定，多一点少一点可能不会有太大影响，但也别太离谱啦。
还有洗脱缓冲液。
这是干啥用的呢？它就是把吸附在硅胶膜上的DNA给洗下来。
我就这么跟你说吧，要是没有洗脱缓冲液，咱们千辛万苦把DNA吸附上去了，结果却拿不下来，那不是白忙活了嘛！一般来说按照试剂盒的说明加就好，但是呢，我试过稍微改变一点洗脱缓冲液的量，好像也能得到不错的结果，当然啦，这只是我的一点小经验哈。
另外，试剂盒里肯定有硅胶膜啦。
这个硅胶膜就像是一个小小的“DNA捕捉器”。
DNA片段经过结合缓冲液的作用后，就乖乖地被吸附在这个硅胶膜上了。
不过要注意哦，在操作的时候千万别把硅胶膜弄破了，一旦破了，那整个回收过程可能就会出问题啦！这一步一定要小心谨慎呀！
有些胶回收试剂盒可能还含有一些特殊的试剂成分，虽然我不太清楚具体每一个都是干啥的，但是它们肯定都是为了让胶回收这个过程更加顺利而存在的。
PAGE胶蛋白微量回收试剂盒使用说明
PAGE胶蛋白微量回收试剂盒使用说明一、试剂准备1.准备试剂：将胶蛋白回收试剂盒从冰箱中取出，并将试剂试剂溶解液加入热水中放置15~30分钟，使试剂完全溶解。
2.准备样品：将待回收的胶蛋白切割至适当大小，并将其置于1.5mL 离心管中。
二、胶切割1.将取出的胶蛋白样品置于透明胶切割垫上，使用蛋白胶切割刀将胶条剪下。
确保胶块大小符合回收试剂盒的规格要求。
2.将切下的胶块放入干燥的1.5mL离心管中。
三、胶块处理1.向每个离心管中加入1mL的胶切割液，轻轻摇晃离心管以使胶块充分与胶切割液接触。
2.将离心管封闭并在37°C下静置1~5小时，以使胶块完全溶解。
3.注意：如使用硫酸解胶切割液处理胶块，需在室温环境下反应15分钟后置于37°C下反应1~2小时。
4.使用旋转蒸发仪进行蒸发浓缩，将离心管开盖并将其放入旋转蒸发仪中。
按照旋转蒸发仪的操作说明操作，直至试剂完全浓缩。
四、胶块蛋白回收1.向每个浓缩离心管中加入相同体积的回收试剂试剂溶解液。
2.用移液器定量的将浓缩离心管中的液体转移到新的1.5mL离心管中。
3.将新的离心管加热至95°C，反应10~15分钟。
5.将上清液转移到新的离心管中即可。
五、样品保存1.将上清液保存于冰箱中，-20°C保存长期，4°C保存短期。
2.避免多次冻融。
六、常见问题及解决方法1.样品胶块处理后未完全溶解。
解决方法：延长胶块处理的时间，确保胶块完全溶解。
2.上清液中的蛋白质量较低。
解决方法：增加胶块处理的时间，或者增加回收试剂试剂溶解液的体积。
3.蛋白质回收效率较低。
解决方法：增加回收试剂试剂溶解液的体积，或者使用其他蛋白质回收试剂试剂溶解液进行回收。
七、注意事项1.使用试剂时请佩戴实验手套，避免跳液造成危险。
2.试剂在使用过程中请保持干燥，避免受潮。
3.试剂仅限于科研用途，禁止用于其他用途。
4.试剂使用后，请妥善保存，放置于指定温度环境下。
page胶蛋白微量回收试剂配方
page胶蛋白微量回收试剂配方摘要：一、前言二、胶蛋白微量回收试剂配方简介1.试剂成分2.操作步骤三、胶蛋白微量回收试剂的优势1.高效性2.便捷性3.准确性四、胶蛋白微量回收试剂的应用领域1.生物科学研究2.医学诊断3.食品安全检测五、结论正文：一、前言胶蛋白是一种广泛存在于生物体中的蛋白质，具有重要的生物学功能。
在科学研究、医学诊断和食品安全检测等领域，对胶蛋白进行准确、高效的检测具有重要意义。
本文将介绍一种胶蛋白微量回收试剂配方，以满足这些领域的需求。
二、胶蛋白微量回收试剂配方简介1.试剂成分胶蛋白微量回收试剂主要包含以下成分：酶标抗体、缓冲液、稳定剂、防腐剂等。
这些成分共同作用，实现胶蛋白的高效回收。
2.操作步骤（1）取一定量的胶蛋白样本，加入适量的缓冲液，进行超声处理。
（2）将处理后的样本进行离心，收集上清液。
（3）将上清液与胶蛋白微量回收试剂混合，室温下静置一段时间。
（4）再次进行离心，收集沉淀物。
（5）将沉淀物进行洗涤、干燥，即可得到回收的胶蛋白。
三、胶蛋白微量回收试剂的优势1.高效性胶蛋白微量回收试剂具有高效性，能够在短时间内实现胶蛋白的高效回收，提高实验效率。
2.便捷性该试剂操作简单，只需几个步骤即可完成胶蛋白的回收，节省实验者的时间和精力。
3.准确性胶蛋白微量回收试剂具有较高的准确性，回收的胶蛋白纯度高，有利于后续的实验研究。
四、胶蛋白微量回收试剂的应用领域1.生物科学研究胶蛋白微量回收试剂可应用于各种生物科学研究领域，为研究者提供可靠、高效的胶蛋白检测手段。
2.医学诊断胶蛋白微量回收试剂在医学诊断领域具有广泛应用，如心血管疾病、肿瘤等疾病的诊断和病情监测。
3.食品安全检测胶蛋白微量回收试剂可用于食品安全检测，检测食品中的胶蛋白成分，保障食品安全。
五、结论胶蛋白微量回收试剂具有高效、便捷、准确等优势，广泛应用于生物科学研究、医学诊断和食品安全检测等领域。
动植物总蛋白微量提取试剂盒说明书
动植物总蛋白微量提取试剂盒说明书产品编号：BTN90707规格：50T产品及特点：本产品用于快速提取动植物总蛋白，用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析以及蛋白活性测定等。
本产品的其主要特点是：1.提取过程十分简便，匀浆离心即可，整个过程只需要十几分钟。
2.采用独特的温和裂解成分，蛋白保持天然活性。
3.适用于各种动植物组织材料，包括新鲜或冰冻的材料。
4.得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D电泳、Western印迹分析以及蛋白活性测定等下游实验。
5.一次可以处理100mg左右的样品，足够进行几十次SDS-PAGE mini胶电泳检测。
规格及成分：成分规格溶液A50ml5×SDS-PAGE上样液1ml说明书1份保存条件：常温运输，4℃保存，5×SDS-PAGE上样液短期4℃保存，长期可放-20℃保存，有效期一年。
使用方法：使用前，最好请在溶液A中加入自备的1M DTT溶液50μL。
一：匀浆法注意：对致密的实体组织（如肌肉），最好用Polytron式匀浆机匀浆处理。
1.称取动物或植物组织样品100mg，剪刀剪成黄豆大小，转移到10-15mL的塑料离心管中。
2.加入1ml溶液A，在冰上用Polytron式匀浆机匀浆，直到没有肉眼可见的组织块。
为了避免产热，可以分多次匀浆，其间放冰上让匀浆液冷却。
3.将匀浆液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
4.4℃12,000g离心10分钟，组织残渣碎片将形成沉淀。
5.将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。
如果要测定蛋白浓度，请使用BCA方法，不要使用Bradford方法（如果要使用，也需要把样品稀释10倍后再测定，否则溶液A中的成分会影响浓度侧定）。
如果要进行SDS-PAGE电泳，可取部分到离心管中，加入5×SDS-PAGE上样缓冲液（终浓度为1×），在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。
PAGE彩色快速凝胶制备试剂盒（10%）说明书
产品货号：S6171S, S6171产品规格：10 gels, 125 gels储存条件：A-D组分4℃保存，E组分-20℃保存，有效期见外包装。
产品组分产品介绍PAGE 彩色快速凝胶制备试剂盒（10%）采用预混液形式的配方，制胶时只需加入改良型促凝剂即可，方便快捷。
上层胶为彩色（紫色）凝胶，便于点样。
本产品制备的凝胶也可用于非变性PAGE胶电泳实验。
本试剂盒配备改良型促凝剂，无TEMED刺激性气味，稳定性好、催化效果佳，制备一块或多块凝胶仅需二十分钟左右。
为方便取用，已开盖的改良型促凝剂可置于4℃保存至少3个月。
制胶数量（125 gels）：125块（0.75 mm）；＞90块（1.00 mm）；＞60块（1.50 mm）实验步骤1. 根据需要制备的凝胶厚度，取等体积下层胶溶液和下层胶缓冲液，混匀；加入相应体积的改良型促凝剂，混匀。
2. 立即将配制好的下层胶注入玻璃板内，使液面和短玻璃板上沿之间的距离比梳齿长0.5 cm即可，加入适量水或无水乙醇液封，待下层胶凝固，约10-15 min（当液封溶液和胶之间可见明显分界线时，说明胶已凝固），倒去上层溶液。
注：1）溶液配制体积是过量的，可留少许于管中，便于观察凝胶状态；2）室温较低时，凝固速度较慢，需适当延长凝胶时间。
3. 根据需要制备的凝胶厚度，取等体积上层胶溶液和彩色上层胶缓冲液，混匀；加入相应体积的改良型促凝剂，混匀。
4. 立即将配制好的上层胶注入玻璃板中，插入梳子，待上层胶凝固（5-10 min）拔出梳子。
凝胶配制如下：注：1）尽量使用新鲜配制的电泳缓冲液；2）推荐电泳条件：150V，约50 min 或200 V，约35 min。
注意事项1. 本产品制备的上层凝胶对样品没有浓缩效应，类似于预制胶，与传统PAGE胶相比，蛋白条带分离效果更好，小分子蛋白（比如10 kDa）也可以清晰地分离开，且蛋白条带更窄更锐利。
2. 改良型促凝剂的用量可根据个人习惯和经验调整，加入较多的促凝剂可以加速凝胶，反之亦然。
PH0331 SDS-PAGE凝胶制备试剂盒使用手册
PH0331|SDS-PAGE凝胶制备试剂盒(SDS-PAGE Gel Kit)Catalog No：PH0331Size：☐30~50gels Storage：Store@RT◆简介我们生产的SDS-PAGE凝胶配制试剂盒提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂，用户只需自备制胶器具和蒸馏水，即可配制PAGE胶(即聚丙烯酰胺凝胶)。
SDS-PAGE凝胶配制试剂盒可用于配制SDS-PAGE凝胶，也可用于配制非变性(native)PAGE凝胶。
本试剂盒约可配制30-50块常规大小的PAGE胶(即聚丙烯酰胺凝胶)。
◆组分名称规格保存条件30%丙烯酰胺(29:1)100ml4℃（避光）1M Tris-HCl,pH8.8100ml RT1M Tris-HCl,pH6.815ml RT过硫酸铵干粉0.5g RT10%SDS5ml RTTEMED0.5ml4℃度（避光）◆保存Tris-HCl,pH8.8、SDS、Ammonnium persulfate(过硫酸铵)和Tris-HCl,pH6.8室温保存。
30%Acr-Bis(29:1)和TEMED4℃避光保存。
过硫酸铵配制成10%溶液后，分装成小管-20℃保存，通常半年内有效。
◆使用参考一，取5支1.5ml离心管，将过硫酸铵干粉分装成100mg/支，标记好备用。
二，凝胶制备：1，取一支称好的100mg过硫酸铵干粉，加入1ml蒸馏水，混匀，此配好的10%过硫酸铵溶液2－8度可保存一周。
洗干净电泳玻璃板，夹好。
2，根据目标蛋白分子量大小，选取凝胶浓度，按下附表配制。
先配分离胶，再配浓缩胶。
(可根据用量自行等比加减)【注意】1，TEMED和10%过硫酸铵最后加，在加入前需混匀前面所加试剂。
10%过硫酸铵在4℃有效期为一周(-20℃三个月)，TEMED易挥发，使用后请盖紧瓶盖。
在常温下胶30分钟内可以凝固，如温度过低，可放37℃温箱凝固。
灌完分离胶后，轻轻的加1ml ddH2O封上层，胶凝固后可见到分界线。
PAGE胶蛋白微量回收试剂盒使用说明
PAGE胶蛋白微量回收试剂盒使用说明货号：G7200规格：20Assays保存：所有试剂常温下运输，收到后所有试剂2-8℃保存，溶液B避免火源，溶液A在低温下容易形成沉淀，请在使用前30℃加热，以促进溶解。
产品组成：产品名称规格Buffer A10mlBuffer B60ml干粉9.6gDTT40mg使用前将干粉和DTT完全溶解于溶液A中，配完后4℃保存，每次使用时30℃加热，以促进溶解，混合好的溶液A尽量在一个月内使用完毕。
产品说明：SDS-PAGE不仅可用于检测蛋白质的相对分子质量，而且也是分离纯化蛋白质的重要工具之一，随着蛋白质技术的微量化，有必要从凝胶中回收蛋白质以用于制备抗体、免疫印迹、氨基酸组分分析或末端序列测定等，本产品就是专门为此用途开发的微量蛋白胶回收法，本产品适用于从考染，铜染或锌染中回收蛋白质，回收效率在50-80%，能够使用20次。
产品特点：1.简单，不需要复杂而昂贵的仪器（如电洗脱仪）。
2.适用于变性胶（SDS-PAGE）和非变性胶（Native-PAGE）。
3.回收率一般在50-80%之间（跟蛋白质大小，洗脱时间相关）。
4.跟后续的实验兼容，包括1-D、2-D电泳和质谱测序等。
操作步骤：1.用手术刀片将铜染或锌染的胶块中含有目的条带的部分胶切下，放入1.5mL的离心管中，用相应的消除液将胶中蛋白质条带脱色到胶体接近无色，室温12000rpm （12830g），离心5min，尽量去除上清，保留胶体。
对于考染或其他考染方法，直接将不需要脱色液脱色的或经过脱色液脱色的胶块中含有目的条带部分切下，放入1.5mL的离心管中，用双蒸水洗两次，每次5min，再进行步骤2。
2.用研磨杆将离心管中的胶体研磨成细小的碎片，加入400μL的溶液A，在室温条件下，脱色摇床上震荡过夜（16-18小时），期间取出，偶尔震荡几次。
3.室温12000rpm，离心15min，转移上清到另外一个2mL的离心管中，加入2mL的预冷的溶液B，混匀，4℃放置30min。
SDS-PAGE配胶试剂盒使用说明书
SDS-PAGE配胶试剂盒使用说明书Cat.No：Lot No：原理：本技术中，待分离的样品在有SDS-PAGE和还原剂的存在下通过加热而变性并被去污剂所包被。
SDS可使蛋白质带上大量的负电荷，其带电荷的多少正好与多肽的长度成正比。
聚丙烯酰胺凝胶上样后，在高电压的作用下，蛋白组分向正极（阳极）迁移。
由于所有的蛋白所带的负电荷与其分子大小成正比，因而蛋白就仅仅根据其分子量的大小不同而被分离—凝胶的分子筛效应。
蛋白质的分子量就可以通过与标准蛋白的凝胶迁移率进行比对而得到。
凝胶电泳后，特定的凝胶条带可以通过染色而观察到，并且可通过被动扩散或电洗脱从凝胶上进行回收。
两种最常用的染色方法是考马斯亮蓝法和银染法，这两种方法的蛋白条带检测灵敏度可分别达到50ng和5ng。
由于考马斯亮蓝法使用简便，并可以对收集的蛋白带作进一步分析，因而较为常用。
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳应用范围：1）蛋白质纯度的分析；2）蛋白质分子量的测定；3）蛋白质浓度的测定；4）蛋白质水解的分析；5）免疫沉淀蛋白的鉴定；6）免疫印迹的第一步；7）蛋白质修饰的鉴定；8）分离和浓缩用于产生抗体的抗体的抗原；9）分离放射性标记的蛋白质。
试剂盒组成：1．30%预制聚丙烯酰胺胶（4℃保存）200ml2．1.5M TrisCl（PH=8.8）200ml3．1.0M TrisCl（PH=6.8）50ml4．10%SDS 30ml5．10%过硫酸铵（4℃保存）30ml6．去离子水250ml7．TEMED（4℃闭光保存！）1ml8．5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液250 ml9．考马斯亮蓝染色剂50ml10. 考马斯亮蓝脱色剂250ml5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液用时以去离子水1：4稀释，配成1×-甘氨酸电泳缓冲液工作液。
凝胶的配制：（1）将玻璃板安装固定好切误把玻璃弄坏（2）进行分离胶的配制（3）加入TEMED后立即混匀内容物倒入到固定好的玻璃板中，同时留出灌注浓缩胶所需空间（梳子的齿长再加0.5cm）再在胶液面上小心注入一层水（约2—3mm高）以排除气泡和阻止氧气进入凝胶溶液。
SDS-PAGE胶回收
蛋白胶回收步骤：（1）制作浓缩胶时，不插梳子（浓缩胶高度适当降低），或只插只有两个泳道的，一个小泳道点蛋白marker（预染，有颜色的），另外大的全部点目的蛋白样品。
（2）待跑完电泳后，除去浓缩胶，用高浓度的金属盐浸泡胶（本人只用过饱和硫酸铜。
SDS 和金属离子可以形成沉淀）。
15s内，胶即可分为白色和无色部分（会有蓝色本底），将无色部分切下，这个为目的切目的条带，尽量将无关的剔除干净（3）用EDTA盐浸泡清洗，除去金属离子，直至胶变为无色。
（4）用dd water清洗胶；（5）用20%乙醇清洗；液氮研磨即可直接用来免疫。
我换了种方法，锌-咪唑染色方法，效果非常好，你可以试试：硫酸锌75mM ，咪唑75mM，氯化钠200mM，效果很好。
把胶装进透析袋里，封好扔电泳槽里电泳半小时反接电源1分钟再把透析袋里的液体用丙酮沉淀一下就行了直接把它切下来!1:你可以把它放入缓冲液后撵碎越碎越好!加热!利用扩散使它出来,胶碾细了可以注射就行了，我还见过连考蓝都没脱掉就去免疫的呢!2:也可以放在透析袋中,放入水平电泳槽电压100,电泳4-6小时，在停止电泳前反向电泳15分钟。
这样蛋白就在透析袋里的缓冲液里，可以通过透析换缓冲液或浓缩3:六一卖电洗脱估计630元左右也是做这用的!请参看《蛋白质技术手册》108页一块10*10的MINI胶，一次也可以回收1mg蛋白或更多，前提是你的目标蛋白不要太杂电洗脱得收率在70%左右。
如果你不要活性，且是包含体（抗原）胶回收不需要复性，跑变性电泳就可以，只要你能跑成一条带就行，实际上粗纯的包涵体可以直接用LOADING BUFFER 煮溶上样免疫动物的抗原可以用变性的，检测用的抗原自然也可以。
反向电泳我估计是保证蛋白质游离，否则可能都吸附在透析袋上，这是我的猜测，２句话，胶碾细了可以注射就行了！甚至带着胶打！你如果目的蛋白的量还可以，也可以不考染，金属离子染色法，在坛子里也有！不用脱色也方便。
page胶蛋白微量回收试剂配方
page胶蛋白微量回收试剂配方（原创版）目录1.介绍 page 胶蛋白微量回收试剂配方的背景和目的2.详述 page 胶蛋白微量回收试剂配方的步骤和所需材料3.解释 page 胶蛋白微量回收试剂配方的作用原理4.分析 page 胶蛋白微量回收试剂配方的优缺点和可能的改进方向5.总结 page 胶蛋白微量回收试剂配方的重要性和应用前景正文一、介绍Page 胶蛋白微量回收试剂配方是一种用于实验室研究中的胶蛋白回收方法。
胶蛋白是细胞外基质的主要成分，对于细胞生长、分化和迁移等过程有着重要的影响。
在实验室研究中，胶蛋白的微量回收是一项重要的技术，对于研究细胞生物学、分子生物学等领域有着重要的意义。
二、步骤和材料Page 胶蛋白微量回收试剂配方的具体步骤如下：1.准备试剂：所需试剂包括 Page 胶蛋白回收液、蒸馏水、pH 缓冲液等。
2.制备样品：将待测的胶蛋白样品准备好，并加入适量的 Page 胶蛋白回收液。
3.离心：将样品离心，使其中的胶蛋白被沉淀。
4.洗涤：用蒸馏水和 pH 缓冲液洗涤沉淀的胶蛋白，以去除杂质。
5.再次离心：将洗涤后的胶蛋白再次离心，以获得纯净的胶蛋白。
三、作用原理Page 胶蛋白微量回收试剂配方的作用原理是利用 Page 胶蛋白回收液中的特殊物质，与胶蛋白样品中的胶蛋白结合，从而使胶蛋白沉淀。
通过多次洗涤和离心，可以有效地去除样品中的杂质，获得纯净的胶蛋白。
四、优缺点和改进方向Page 胶蛋白微量回收试剂配方的优点是操作简便，回收效率高，适用于各种类型的胶蛋白样品。
缺点是回收过程中可能会损失一部分胶蛋白，而且对于一些特殊的胶蛋白样品，回收效果可能不理想。
未来的改进方向包括寻找更有效的胶蛋白回收试剂，以及优化回收流程，以提高回收效率和减少胶蛋白的损失。
五、总结总的来说，Page 胶蛋白微量回收试剂配方是一种重要的胶蛋白回收方法，对于实验室研究有着重要的意义。
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page胶蛋白微量回收试剂配方
以下是一种可能的胶蛋白微量回收试剂配方：
- 胶蛋白酶：用于降解胶蛋白，从而使其变成可回收的形式。
可以选择某种商用胶蛋白酶，并按照其推荐的浓度使用。
- 缓冲液：用于调整试剂的酸碱度和维持适宜的工作条件。
可以使用一种合适的缓冲剂（如Tris-HCl）来制备具有适宜pH值的缓冲液。
- 蛋白酶抑制剂：用于抑制酶的活性，从而保护被回收的胶蛋白。
可以选择一种合适的蛋白酶抑制剂（如PMSF）并按照其推荐的浓度使用。
- 重组蛋白：用于辅助胶蛋白的回收。
可以选择一种与胶蛋白相互作用并具有良好相容性的重组蛋白，并按照其推荐的浓度使用。
- 乙酸酒石酸盐：用于调整试剂的离子强度和保持适宜的工作条件。
可以按照实验需要调整乙酸酒石酸盐的浓度。
以上是一种可能的配方，具体配方应根据具体实验要求和试剂的特性进行优化和调整。
另外，为了保证实验结果的准确性和可重复性，使用前应对试剂进行充分的验收和验证。
GST标记蛋白质微量纯化试剂盒使用说明
GST标记蛋白质微量纯化试剂盒编号名称北京华越洋生物GT172 GST标记蛋白质微量纯化试剂盒GST标记蛋白质微量纯化试剂盒简介：重组蛋白N 端的GST 谷胱甘肽S 转移酶（Glutathione S Transferase）能提高重组蛋白的水溶性，所以常用于蛋白质重组表达。
GST-谷胱甘肽亲和层析是利用GST 标记的蛋白能与谷胱甘肽层析介质结合，并能被还原型谷胱甘肽洗脱的特点而建立，是目前分离纯化GST 标记蛋白质的重要方法。
GST标记蛋白质微量纯化试剂盒规格：成分规格20T 保存条件谷胱甘肽-Agarose 介质，50% 4 ml 4℃10×PBS 缓冲液100 ml RTGST 洗脱缓冲液成分一25 ml RTGST 洗脱缓冲液成分二约80 mg 4℃溶菌酶（20 KU/mg）30 mg -20℃Benzonase（2U/ul）20 ul -20℃PMSF（10 mg/ml）0.5 ml RT6 mL 层析柱(带筛板) 1 套RTGST标记蛋白质微量纯化试剂盒使用方法：注意：1. 每步得到的样品最好都留存少量作为SDS-PAGE 分析的对照，在下面描述中就不再提醒。
2. GST标记蛋白质微量纯化试剂盒实验需要用到的1×PBS 缓冲液可用自备的超纯水稀释本试剂盒提供10×PBS 缓冲液而得。
PBS 缓冲液用超纯水稀释后极其容易长细菌，注意防止污染。
3. GST 洗脱液的配制方法是将约80mg GST 洗脱液成分二干粉全部加入到GST 洗脱液成分一溶液中，摇晃直到干粉全部溶解即得GST 洗脱液，分装成小份放-20℃保存，每次用一管。
一:重组蛋白的表达和细菌收集1. 37℃振荡培养20 mL含表达质粒的细菌到OD600=0.6-0.8。
2. 加IPTG 到终浓度为0.1 mM，30℃振荡培养3 小时或22℃振荡培养8 小时（或过夜）。
3. 4℃ 5000 g 离心10 分钟收集20 mL表达菌液，弃上清。
page蛋白回收
蛋白量比较少的话用我的方法恐怕回收率会差些！我的方法是：先跑SDS-PAGE，然后用预冷的0.25M KCl染色（预先放在4度冰箱中），目的条带会出现白色条带，根据你已经跑过的考马斯亮蓝染色的位置可以判断哪条带是你的目的条带，如果蛋白浓度高的话，染1分钟就可以看到目的条带，蛋白浓度低的话，要染时间长一些，大概5-10分钟，如果太低，估计是看不到目的条带了。
无法用此方法看到目的条带。
那用该方法就不行了。
注意：蛋白浓度底，目的条带颜色很浅，要在背景深色的时候才能看到（可以放在透明的玻璃板上操作），因为这种染色方法灵敏度比考马斯亮蓝染色低很多。
当看到目的条带时，可用一干净的刀片切下目的蛋白所在的凝胶条带，将凝胶条放在蒸馏水里浸泡，直至无色透明，目的是使得KCl离开胶条（当然目的蛋白会损失一些，但绝大多数还在胶里，因为这个自由扩散的过程不会太久），一般也就是五到十分钟就可以目测观察到胶条变成无色透明状。
将无色透明的胶条从蒸馏水中取出，装入一准备好的1.5ml离心管中，用镊子夹碎（或在放入离心管之前用刀片切碎），我常用的是灭过菌的镊子夹碎。
然后再在管里加入你所需要溶解蛋白的溶液，比如蒸馏水（生理盐水或PBS等）。
将离心管放入4度冰箱过夜，第二天吸出管中的液体（吸之前震荡一下），至少50%蛋白可以从凝胶中析出（这要看你的凝胶和水溶液的体积比）。
再加入蒸馏水抽提两次，就可以将胶条中绝大部分蛋白抽提出。
我对多次抽提的蛋白经Brandford考马斯亮蓝染色法测蛋白浓度测定，证明浓度依次递减，后一次的浓度均不超过上次的50%。
我所得到的蛋白浓度可达到1mg/ml。
经电泳检测，只有单一条带。
无任何杂带。
对于后面抽提的浓度比较低的，浓缩的办法很多。
也可选最简单的办法。
Novagen有专门用于page胶回收的电洗脱管子，很方便，我用过，所得的蛋白浓度在0.5-1mg/ml。
胶回收试剂盒使用步骤
胶回收试剂盒使用步骤：
1）在紫外灯下从电泳胶上切下所需回收的条带，注意刀片需消毒，胶块应尽量小，使之易融化完全；
2）事先将一个eppendorf管称重，然后将胶块放入后再次称重，获得胶块的重量；
3）以每100mg胶块加入300μl的量加入Binding Buffer，查看胶块是否浸在液体中；
4）56℃水浴10min以融化胶块释放DNA，期间每2-3min 需取出震荡；
5）待胶块完全融化后按照每100mg胶块150μl的量加入异丙醇，充分震荡混匀；
6）将High Pure Filter Tube 安装到Collection Tube上；
7）将所有eppendorf管中的液体转移到High Pure Filter Tube中去，注意不要超过700μl，若超过需分两次离心；
8）12000 rpm 离心1 min，倒掉收集管中的液体；
9）加入500μl Wash Buffer后再次离心1min；
10）倒掉收集管中的液体后再次加200μl的Wash Buffer，12000 rpm 离心1 min；11）小心将Filter Tube取下后装入一个新的Effendorf管上；
12）在滤芯的正中加上30μl的Elution Buffer，室温放置1min，12000 rpm 离心1 min。
胶回收试剂盒说明书（生工）
胶回收试剂盒说明书（生工）SanPrep柱式DNA胶回收试剂盒产品编号：SK8131/SK8132包装规格：50次/100次试剂盒组成组分 SK8131，50次 SK8132，100次纯化套件（吸附柱+收集管） 50套 100套Buffer B2 30 ml 60 mlWash Solution 12 ml 24 mlElution Buffer 5 ml 10 ml操作手册1份1份保存方法及注意事项本试剂盒在室温（15~25°C）干燥保存，有效期见包装。
Buffer B2中含有刺激性的化合物，操作过程中应穿上实验服，戴好乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服，防止吸入口鼻。
沾染皮肤或眼睛后，请立即用清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医生的帮助。
产品介绍本试剂盒适用于从TAE和TBE琼脂糖凝胶中回收100 bp~10 kb 的DNA片段，回收效率可达80%。
该试剂盒采用特殊的吸附膜，能够有选择性地吸附核酸分子，去除其他杂质，得到高质量的DNA回收产物。
本试剂盒采用的膜结合液中不含有干扰酶活性的碘化钠，所得到的DNA可直接用于酶切、连接、测序等后续的分子生物学试验。
本试剂盒具有以下特点：1. 适用范围广，回收效率高，对于100 bp~10 kb之间的DNA片段回收效率在80%以上。
2. 操作简单快速，整个回收过程仅须15分钟左右。
3. 洗脱效率高，洗脱体积最小可低至15 μl。
快速操作流程（胶回收）1. 准备工作。
a. 检查Wash Solution 中是否已经加入乙醇。
b. 检查Buffer B2是否出现沉淀。
c. 将水浴锅调至55°C 。
2. 从琼脂糖凝胶中割下含目标片段的胶块，称重。
3. 加入胶块重量3-6倍的Buffer B2，50°C 水浴5-10分钟溶胶。
4. （选做）对于 < 500 bp 的片段，加入1/3 Buffer B2体积的异丙醇。
5. 将溶胶液移入吸附柱中，8,000 × g 离心30秒。
UElandy SDS-PAGE 胶凝固剂试剂盒说明书
产品说明书凝胶配制试剂盒SDS-PAGE（任意浓度）产品货号：P80111-KIT产品规格：50块胶（0.75mm）产品组分：组分编号试剂A试剂B试剂C试剂D试剂E试剂F试剂G名称上层胶缓冲液下层胶缓冲液30%Acr-Bis(29:1)10%SDSPAGE胶凝固剂PAGE胶促凝剂储存缓冲液（5×）含量50mL100mL100mL5mL0.5g0.6mL100mL储存条件4℃避光保存，有效期见外包装。
PAGE胶凝固剂（粉剂）：4℃保存时需拧紧瓶盖注意防潮，受潮后会很快失效。
PAGE胶凝固剂（粉剂）用水配制成10%溶液后，分装成小管-20℃保存，半年内有效；配制好的凝胶请浸没在1×储存缓冲液（凝胶保存液）中，室温保存，6个月保质期。
产品介绍本产品采用Tris-甘氨酸凝胶体系，按照使用说明书操作，只需自备制胶器具和蒸馏水，加入促凝剂即可配成任意浓度的SDS PAGE凝胶。
操作简单，成本低。
本试剂盒约可配制50块常规大小的（0.75mm）SDS-PAGE凝胶。
具体可以配制的凝胶数量与凝胶厚薄、大小有关。
产品特点保质期长：改良配方，制备的SDS PAGE凝胶可在室温下保存半年以上；上样方便：可制备有颜色的上层胶，点样孔清晰易辨，方便点样；效果优秀：跑胶条带清晰，敏锐，蛋白分辨率高。
高效兼容传统的电泳/转膜液。
使用方法1.准备工作PAGE胶凝固剂（粉剂）溶于5mL蒸馏水中，将溶液分装为10管，0.5mL/管，于-20℃长期保存。
10%PAGE胶凝固剂（粉剂）溶液可在4℃保存一周。
2.分离胶的配制（1）根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度，再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶（即下层胶）：不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范SDS-PAGE分离胶浓度6%胶8%胶10%胶12%胶15%胶最佳分离范围50-150kD30-90kD20-80kD12-60kD10-40kD 如果样品蛋白分子量范围较广，建议使用梯度预制胶。
SDS-PAGE及WesternBlot简明操作指南
SDS-PAGE及WesternBlot简明操作指南SDS-PAGE及Western Blot简明操作指南⼀．蛋⽩样品制备推荐使⽤RIPA裂解液。
⼀般使⽤强裂解液，对于coIP可⽤弱裂解液。
1.准备⼯作：1)取⾜量裂解液，加⼊PMSF和（或）蛋⽩酶抑制剂；若要检测蛋⽩磷酸化，推荐加⼊磷酸酶抑制剂。
置于冰上预冷。
2)准备⾜量PBS，置于冰上预冷。
3)提前打开离⼼机预冷⾄4度。
2.裂解样品：（注意保持样品处于冰上，4度离⼼）1)动物组织：取1g左右置⼊离⼼管，加⼊配制好的裂解液0.5-1ml，置于冰上，⽤匀浆器充分匀浆；2)悬浮细胞：以6孔板的⼀个孔为例（⾯积约10平⽅cm）；300g离⼼10分钟，去除培养基，收集细胞；1ml 预冷的PBS重悬后，转移到1.5ml离⼼管中，300g离⼼10分钟，去除上清；加⼊60-200ul裂解液重悬细胞，置于冰上，裂解5-10分钟；裂解期间，每隔⼀分钟使⽤涡旋仪震荡5秒或使⽤移液器吹打5秒。
3)贴壁细胞：以6孔板的⼀个孔为例（⾯积约10平⽅cm）；去除培养基，⽤1ml PBS洗涤细胞；去除PBS，加⼊60-200ul裂解液，置于冰上，裂解2-3分钟；⽤细胞铲刮掉细胞，⽤移液器转移到1.5ml离⼼管中；置于冰上，裂解5-10分钟，裂解期间，每隔⼀分钟使⽤涡旋仪震荡5秒或使⽤移液器吹打5秒。
3.收集蛋⽩：1)将上述裂解样品于4度10000g离⼼10-20分钟，转移上清⾄⼀新的离⼼管，此即为蛋⽩样品。
此处样品可于-20或-80度长期保存。
4.蛋⽩的相对定量：BCA法为保证各样品western上样蛋⽩量⼀致，须定量蛋⽩；推荐相对定量；绝对定量需要在本⽅法基础上额外做BSA标准曲线。
备注：每个蛋⽩要做2个重复，blank对照须使⽤步骤2中的裂解液。
1)参考说明书，配制⾜量BCA⼯作液（多配制10%，以免不⾜）；2)取⼀96孔酶标板，在要⽤到的孔中加⼊上述BCA⼯作液，每孔100ul;3)在上述孔中分别加⼊1-2ul各蛋⽩样品及blank对照；4)将酶标板于37度孵育10-30分钟，直到出现较明显颜⾊变化即可；5)测定吸光度；6)计算相对蛋⽩含量：各吸光度去除blank背景，以吸光度最低者为参考，进⾏归⼀化处理，即计算吸光度倍数关系；western上样时，须依据此倍数关系调整各样品上样体积，以保证各样品上样蛋⽩量⼀致。
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PAGE胶蛋白微量回收试剂盒使用说明
货号：G7200
规格：20Assays
保存：所有试剂常温下运输，收到后所有试剂2-8℃保存，溶液B避免火源，溶液A在低温下容易形成沉淀，请在使用前30℃加热，以促进溶解。
产品组成：
产品名称规格
Buffer A10ml
Buffer B60ml
干粉9.6g
DTT40mg
使用前将干粉和DTT完全溶解于溶液A中，配完后4℃保存，每次使用时30℃加热，以促进溶解，混合好的溶液A尽量在一个月内使用完毕。
产品说明：
SDS-PAGE不仅可用于检测蛋白质的相对分子质量，而且也是分离纯化蛋白质的重要工具之一，随着蛋白质技术的微量化，有必要从凝胶中回收蛋白质以用于制备抗体、免疫印迹、氨基酸组分分析或末端序列测定等，本产品就是专门为此用途开发的微量蛋白胶回收法，本产品适用于从考染，铜染或锌染中回收蛋白质，回收效率在50-80%，能够使用20次。
产品特点：
1.简单，不需要复杂而昂贵的仪器（如电洗脱仪）。
2.适用于变性胶（SDS-PAGE）和非变性胶（Native-PAGE）。
3.回收率一般在50-80%之间（跟蛋白质大小，洗脱时间相关）。
4.跟后续的实验兼容，包括1-D、2-D电泳和质谱测序等。
操作步骤：
1.用手术刀片将铜染或锌染的胶块中含有目的条带的部分胶切下，放入1.5mL的
离心管中，用相应的消除液将胶中蛋白质条带脱色到胶体接近无色，室温12000rpm （12830g），离心5min，尽量去除上清，保留胶体。
对于考染或其他考染方法，直接将不需要脱色液脱色的或经过脱色液脱色的胶块中含有目的条带部分切下，放入1.5mL的离心管中，用双蒸水洗两次，每次5min，再进行步骤2。
2.用研磨杆将离心管中的胶体研磨成细小的碎片，加入400μL的溶液A，在室温
条件下，脱色摇床上震荡过夜（16-18小时），期间取出，偶尔震荡几次。
3.室温12000rpm，离心15min，转移上清到另外一个2mL的离心管中，加入2mL
的预冷的溶液B，混匀，4℃放置30min。
4.室温12000rpm，离心15min，去除上清，再将离心管放置在通风厨中，待残
留的液体挥发干净。
也可以再次加入0.5mL的溶液B，震荡洗涤沉淀，4℃放置15min，再重复步骤4一到两次，这样得到的蛋白质更纯净。
5.选用合适的缓冲液溶解沉淀的蛋白质，以方便进行后续的电泳和质谱测序等实
验。
注意事项：
1.在保证完全切取到目的蛋白质后，尽量去除多余的胶片。
2.如果蛋白质的分子量较大，所加样的量较多，胶浓度比较大，可以适当延长温
育时间。
3.为了有比较好的回收效果，在进行胶中蛋白质回收时，每个点样孔中所加的蛋白质量最好在2μg-40μg之间。
4.采用含有Urea、Thiourea、SB3-10等强溶解能力试剂的溶解液有助于沉淀蛋白的完全溶解。
5.研磨杆研磨碎片时，越充分越好，这样有利于蛋白质扩散到溶液A中。
6.采用此试剂盒进行胶回收时，一般不建议采用银染，因为此时回收效率较低。
7.目的蛋白回收效率与蛋白的分子量大小有一定的关系，在10KD以下的多肽回收效率明显降低，如果大于120KD，则需要增加步骤2中的震荡过夜时间。
8.如果在制浓缩胶时不加梳子，将蛋白溶液均匀的铺在浓缩胶面上进行电泳，之后将整个胶块从左到右的一条完整的目的蛋白条带切下回收，则需要按照常规梳子上所带点样孔的数量，将所用试剂按照倍数增加。
9.所加溶液A和溶液B的体积需要保持一定的比例关系，溶液B的体积必须是溶液A体积5倍或5倍以上，以避免在步骤3的过程中产生不必要的杂质沉淀。
10.过程中所加试剂量是针对80×60×1mm凝胶而定，若体积较大，可适当增加各溶液的体积。