《中国药典》2020版— 等电聚焦电泳法

0541电泳法

第六法等电聚焦电泳法

等电聚焦（ISOELECTRIC FOCUSING，IEF）电泳法是两性电解质在电泳场中形成一个 pH 梯度，由于蛋白质为两性化合物，其所带的电荷与介质的 pH 值有关，带电的蛋白质在电泳中向极性相反的方向迁移，当到达其等电点(此处的 pH 值使相应的蛋白质不再带电荷)时，电流达到最小，不再移动，从而达到检测蛋白质和多肽类供试品等电点的电泳方法。

本法用于蛋白质的定性鉴别、等电点测定、限度检查以及定量测定。方法 1：垂直板电泳法

除各论中另有规定外，按以下方法测定。

1.仪器装置

恒压或恒流电源、带有冷却装置的垂直板电泳槽和制胶模具。

2.试剂

(1)水(电阻率不低于 18.2MΩ•cm)。

(2)A 液称取丙烯酰胺29.1g、亚甲基双丙烯酰胺0.9g，加适量水溶解，并稀释至 100ml，双层滤纸滤过，避光保存。

(3)B 液10%过硫酸铵溶液，临用前配制。

(4)供试品缓冲液(4 倍浓度) 取甘油8ml、40%两性电解质(pH3〜10)溶

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