维生素B12注射液的定性鉴别及含量测定2

实验十一 维生素B 12注射液的定性鉴别及含

量测定

实验者：李丽贝 合作者：倪佳琴

一、实验目的

1.1掌握722G 型分光光度计的操作方法 1.2熟悉定性鉴别及定量测定方法

二、实验原理

维生素B 12注射液为含钴的有机药物，为粉红色至红色的澄明液体，用于治疗贫血等疾病。维生素B 12在278±1mm 、361±1mm 与550±1mm 波长处最大吸收，根据其吸收光谱的形状和最大吸收波长下吸光度比值，可进行定性鉴定。测量最大吸收波长下吸光度，可算出供试品浓度。

三、实验仪器与试剂

仪器 722G 型分光光度计，玻璃洗手池，容量瓶（10ml ），吸量管（1ml ） 试剂 维生素B 12注射液（1ml ：0.5mg ）

四 、操作步骤

4.1定性鉴别 根据中国药典（1995年版）规定，取含量测定项下的溶液，在361±1nm 与550±1nm 处测得的吸光光度比值应为3.15~3.45，即为合格。

4.2定量分析 精密量取本品适量，加水定量稀释成1ml 含维生素B 1225ug 的溶液，在361±1nm 处测得吸光度，维生素B 12的吸光系数（E 1%1cm ）按207计算，即得可求得样品的含量

五、实验结果 1.

（1）定性鉴别（吸光度比值）

结果=3.357

(规定为3.15~3.45)

1% E 1cm 1% E 1cm 361nm 361nm = A 361nm A 550nm

（2）定量分析（吸光系数法）

A/E1%1cm x1/100x稀释因子

标示量%= x100% =90.821

标示量（g/ml）

(规定为90.0~110.0)

六、实验体会

这个实验要求我们能正确使用分光光度计，所以还得提前捉摸一下，在这个实验过程中出现了与实际不符合的情况，应该是由于我们的操作失误，又因为数据与数据之间相差很小，所以更加需要细心，在老师的帮助下，顺利的得到了较为准确的数据，体会到自己仍应该更用心地去学习。

七、附加资料

主要功能

1.促进红细胞的发育和成熟，使肌体造血机能处于正常状态，预防恶性贫血；维护神经系统健康

2.以辅酶的形式存在，可以增加叶酸的利用率，促进碳水化合物、脂肪和蛋白质的代谢；

3.具有活化氨基酸的作用和促进核酸的生物合成，可促进蛋白质的合成，它对婴幼儿的生长发育有重要作用。

4.代谢脂肪酸，使脂肪、碳水化合物、蛋白质被身体适当运用

5.消除烦躁不安，集中注意力，增强记忆及平衡感

6.是神经系统功能健全不可缺少的维生素，参与神经组织中一种脂蛋白的形成，

一是提高叶酸利用率，与叶酸一起合成甲硫氨酸（由高半胱氨酸合成）和胆碱，产生嘌呤和嘧啶的过程中合成氰钴胺申基先驱物质如甲基钴胺和辅酶B12，参与许多重要化合物的甲基化过程。维生素B12缺乏时，从甲基四氢叶酸上转移甲基基团的活动减少，使叶酸变成不能利用的形式，导致叶酸缺乏症。

二是维护神经髓鞘的代谢与功能。缺乏维生素B12时，可引起神经障碍、脊髓变性，并可引起严重的精神症状。维生素B12缺乏可导致周围神经炎。小孩缺乏维生素B12的早期表现是情绪异常、表情呆滞、反应迟钝，最后导致贫血。

三是促进红细胞的发育和成熟。将甲基丙二酰辅酶A转化成琥珀酰辅酶A，参与三羧酸循环，其中琥珀酰辅酶A与血红素的合成有关。

四是维生素B12还参与脱氧核酸（DNA）的合成，脂肪、碳水化合物及蛋白质的代谢，增加核酸与蛋白质的合成。

缺乏症状

1.恶性贫血（红血球不足）

2.月经不顺

3.眼睛及皮肤发黄，皮肤出现局部（很小）红肿（不疼不痒）并伴随蜕皮；

4.恶心，食欲不振，体重减轻

5.唇、舌及牙龈发白，牙龈出血

6.头痛，记忆力减退，痴呆

7.可能引起人的精神忧郁，

8.引起有核巨红细胞性贫血（恶性贫血）

9.脊髓变性，神经和周围神经退化

10.舌、口腔、消化道的粘膜发炎。

11.小孩缺乏维生素B12的早期表现为精神情绪异常、表情呆滞、少哭少闹、反应迟钝、爱睡觉等症状，最后会引起贫血。

副作用：有些病人对本品有过敏反应，甚至过敏性休克，使用时应注意

主要食物来源

1.动物肝脏、肾脏、牛肉、猪肉、鸡肉、鱼类、蛤类、蛋、牛奶、乳酪、乳制品、腐乳

2.维生素 B 12 不易被胃吸收，大部分是经由小肠吸收，故长效型锭剂效果较好

3.若出现食欲不振、消化不良、舌头发炎、失去味觉等症状，便是缺乏维生素 B 12 的警讯

4.严重缺乏维生素 B 12 时，医师多会以注射方式补充

5.老年人对维生素 B 12 的吸收较困难，可至医院透过注射方式补充