分子生物学-05真核转录
分子生物学转录
分子生物学转录分子生物学是研究生命过程的学科,其中转录是一个非常重要的过程。
转录被定义为转化DNA链上的信息成为RNA链上的信息。
这个过程分为三个主要步骤:启动、延伸和终止。
启动阶段在转录开始之前,转录起始复合物(transcriptional initiation complex)必须被形成。
这个复合物由多种核酸酶和蛋白质组成。
最关键的一点是RNA聚合酶(RNA polymerase)必须存在。
RNA聚合酶是一个大型的多亚基蛋白质,在真核生物中有三种类型(RNA polymerase I,RNA polymerase II和RNA polymerase III)。
在细菌中,只有一种RNA polymerase。
RNA polymerase的活性需要很多辅助因子,其中最重要的是TATA结合蛋白(TBP)。
TBP是一个通过与DNA上的TATA盒子结合来启动转录的转录因子。
延伸阶段在转录启动后,RNA polymerase开始沿着DNA链扫描,实现RNA链的合成。
RNA链是DNA链的互补链,这意味着RNA链上的每个碱基都与DNA链上的一个特定碱基有钙镁离子的配对。
在RNA聚合酶的过程中,RNA链是相对不稳定的。
因此,在mRNA合成的早起阶段,特别是在细菌中,当新合成的RNA链长出来时,它通常会形成一个近似U型的结构,被称为“剪切线(loop)”。
这个结构可以通过转录因子的协同作用来解开。
终止阶段一旦RNA polymerase合成的RNA链已经达到终点,终止因子开始发挥作用,让RNA链从DNA链分离。
这个过程在不同的生物体内发生有所不同,但是终止因子通常是核糖核酸的一段序列,它会诱导RNA polymerase停止转录,并释放新合成的RNA链。
总结转录是许多基因表达过程中的重要步骤。
其过程涉及到许多转录因子和蛋白质,并需要多种辅助因子的协作作用。
研究转录的结构和机制已经成为分子生物学研究的重要领域,这将有助于增进我们对基因表达的理解,并为基因治疗的发展提供更多的思路和方法。
《现代分子生物学》第五章 1 转录
表 12-1 E.coli RNA Pol 的结构和功能 亚基 基因 分子量 数目 组分 可能的功能 (KDa) α rpoA 40 2 核心酶 酶 组 装 及 与 调 节 蛋白作用 β rpoB 155 1 核心酶 和底物(核苷酸) 结合 β ’ rpoC 160 1 核心酶 模板结合 ω 10 1 核心酶 σ rpoD 70 1 σ 因子 和启动子结合, 识 别模板链 参照 B. Lewin:《GENES》Ⅴ.1994, Table 14.1 14.2
转录过程中,DNA双链中的一条链为模板链 (template/antisense strand ),而另一条链为 编码链(coding/sense strand)。
转录起始于RNA聚合酶和启动子(promoter) 结合之后,转录起始的第一个碱基称为转录 起始点(start point) 。在RNA聚合酶的作用下 合成RNA,至终止子(terminator)终止。 由启动子到终止子之间的序列称为转录单位 (transcription unit)。转录起始点前面的序列 称为上游(upstream),后面的序列称为下游 (downstream)。
亚基可能参与全酶的组装及全酶识别启 动子。另外, 亚基还参与RNA聚合酶与 一些转录调控因子间的作用。 亚基具有与底物(NTP及新生的RNA链) 结合的能力。利福霉素可以阻断转录的起 始,链霉溶菌素可抑制延伸反应,二者均 是通过与亚基的结合而发挥作用的。
’亚基可能与模板结合。 肝素可与’亚基结合而抑制转录,并且可 以和’亚基竞争DNA的结合位点。 亚基和’亚基提供了RNA聚合酶的活性 中心,其一级结构与真核生物RNA聚合酶 大亚基有同源性。 亚基的功能是帮助全酶识别启动子并与之 结合。 亚基也可被看作一种辅助因子,因 此又可称为因子( Sigma factor)。
分子生物学第五章2
含不同TAFs的TFⅡD可以识别不同的启动 子。
人类Ⅱ型启动子的转录因子 因子 分子量 功能 RNA PolⅡ ≥10K 依赖模板合成RNA TFⅡA 12,19,35K 稳定TFⅡD和DNA的结合,激活TBP亚基 TFⅡB 33K 结合模板链(-10~+10),起始PolⅡ结合,和TFⅡE/F 相互作用 TFⅡD (TBP,30K) TBP亚基识别TATA,将聚合酶组入复合体中,TAFs识别 特殊启动子 TFⅡE 34K(β ) 结合在PolⅡ的前部,使复合体的保护区延伸到下游 57K(α ) TFⅡF 38, 74K 大亚基具解旋酶活性(RAP74),小亚基和PolⅡ结合, 介导其加入复合体 TFⅡH 具激酶活性,可以磷酸化PolⅡC端的CTD,使PolⅡ逸出, 延伸 TFⅡI 120K 识别Inr,起始TFⅡF/D结合 TFⅡJ 在TFⅡF后加入复合体,不改变DNA的结合方式 TFⅡS RNA合成延伸
当两种辅助因子与DNA结合以后,RNA 聚合酶Ⅰ才能与核心启动子结合,从而 起始转录。
RNA聚合酶Ⅱ的转录起始
RNA聚合酶Ⅱ自身不能起始转录,必须 在其他辅助因子的作用下,RNA聚合酶 Ⅱ和其他辅助因子组成一个基础转录装 置(basal transcription apparatus),起始 真核生物Ⅱ类基因的转录。
2. 真核生物转录的起始
RNA聚合酶Ⅰ的转录起始
RNA聚合酶Ⅰ起始转录需要两种辅助因 子UBF1和SL1的参与。 UBF1可特异地识别核心启动子和上游调 控元件(Upstream Control Element)中富 含GC对的区域。
在UBF1和DNA结合以后,SL1才可结合 上来。SL1类似于原核生物的σ因子,它 可与启动子特异地结合,并保证RNA聚 合酶Ⅰ定位于转录起始位点。
分子生物学习题集答案 第五章
第五章基因表达自测题(一)选择题A型题1. 基因表达包括①复制②转录③逆转录④翻译A. ①+②B. ①+③C. ②+④D. ③+④E. ①+②+④2. 真核生物的转录不.需要A. 依赖DNA的RNA聚合酶B.三磷酸核苷C.DNAD.RNAE.蛋白质3. 关于转录和复制的区别,说法正确的是A. DNA双链均复制和转录B.复制的原料是一磷酸脱氧核苷,转录的原料是一磷酸核苷C.复制需要引物,转录不需要引物D.复制酶是依赖DNA的DNA聚合酶,转录酶是依赖RNA的DNA聚合酶E.均遵守碱基配对规律,模板中A对应的产物是T4. 关于转录和复制的相同点,说法错误..的是A. 核苷酸以3', 5'-磷酸二酯键连接B.以DNA为模板C.原料为dNTP或NTP,组成核酸链的是dNMP或NMPD.产物可与变性的模板杂交E.新生核酸链的延伸方向是3' → 5'5. 已知某基因转录产物的部分序列是5'-AUCCUGGAU-3',那么该基因中反意义链的相应序列为A.5'-ATCCAGGAT-3'B.5'-TAGGTCCTA -3'C.5'-TAGGACCTA-3'D.5'-UAGGACCUA-3'E.5'-ATCCUGGAT-3'6. E.coli的RNA聚合酶中,辨认转录起始点的组分是A. 核心酶B. σC. αD. βE. β'7. 真核生物中,RNA聚合酶II的转录产物是A. 45S rRNAB. 5S rRNAC. tRNAD. U6 snRNAE. hnRNA8. 关于真核生物的RNA聚合酶,说法正确的是A.RNA聚合酶II对鹅膏蕈碱极敏感B.RNA聚合酶I的转录产物往往是小分子RNAC.RNA聚合酶的氨基端重复序列可发生磷酸化D.不一定需要蛋白质因子辅助E.RNA聚合酶III的转录产物是45S rRNA9. 关于E.coli RNA聚合酶的σ因子的说法错误..的是A.不参与转录延长过程B.辨认–35区和–10区起始转录C.σ因子若不脱落,转录不能进入延长阶段D.σ因子的量少于核心酶,可反复利用E.转录开始后,补加σ因子可提高RNA的生成量10. 在某个体外转录体系中,若模板链含有连续的A,加入何种物质可对产物进行放射性标记A. α-32P-UMPB.γ-32P-dTTPC. β-32P-UDPD. α-32P-UTPE. γ-32P-UTP11. 下列哪项不.是ρ因子依赖的转录终止的特点A.转录终止信号存在于RNA而非DNA模板B.ρ因子有ATP酶活性和解螺旋酶活性C.ρ因子结合RNA的能力弱于对DNA的结合力D.生成的RNA链的3' 端往往富含CE.ρ因子通过与转录产物结合而发挥转录终止作用12. 真核生物II类基因的启动子核心序列通常位于A. –25区B. –10区C. –35区D. +1区E. +10区13. 真核生物中,与原核生物的Pribnow box功能相当的是A. GC boxB. CAAT boxC. CACA boxD. 八聚体(8 bp)元件E. Hogness box14. 下列物质中,能够辅助真核生物的RNA聚合酶结合启动子的是A. 起始因子B. 增强子C. 转录因子D. 延长因子E. σ因子15. 真核生物的RNA聚合酶II在进入转录延长阶段之前,其最大亚基羧基末端结构域发生磷酸化是必需的,催化这一步骤的转录因子是A. TF II BB. TF II DC. TF II HD. TF II EE. TF II F16. 关于转录因子的说法,错误..的是A. 原核细胞中转录起始复合物的形成不需要转录因子B.转录因子的化学本质是蛋白质C.转录因子通过DNA-蛋白质、蛋白质-蛋白质相互作用控制转录起始D.转录因子的转录激活域包括锌指、螺旋-转角-螺旋等结构域E.少量转录因子的不同排列组合即可精确调控众多基因的转录17. 关于真核生物的转录延长,说法正确的是A. 组蛋白发生磷酸化利于核小体解聚B.组蛋白发生乙酰化利于核小体解聚C.转录延长的同时出现多聚核蛋白体现象D.延长因子辅助RNA聚合酶催化核苷酸加入E.转录前后,核小体解聚并在原位重新聚合18. 下列哪种物质不.需要进行转录后加工即可发挥功能A. 大肠杆菌 mRNAB. 大肠杆菌tRNAC.大肠杆菌rRNAD.酵母mRNAE.酵母tRNA19. 关于加帽修饰,说法正确的是A. snRNA不能被加帽B.由加帽酶催化5' 端加入7甲基鸟苷酸C.加帽酶可以与RNA聚合酶I、II、III相结合D.hnRNA转录终止后才开始加帽E.RNA聚合酶发生磷酸化后,使加帽酶与之脱离20. 关于加尾修饰,说法错误..的是A. 组蛋白的成熟mRNA无需加poly A尾B.加尾信号包括AAUAAA和富含GU的序列C.剪切过程需要多种蛋白质因子的辅助D.加尾不需模板E.多聚A形成的过程是缓慢、匀速的反应21. 关于剪接的说法,正确的是A. 初级转录物中不存在内含子B.内含子一定是非编码序列C.内含子两端的结构通常是5'-GU-----AG-3'D. snRNP催化套索RNA发生转酯反应,使内含子和剪接接口一起被去除E.剪接后的mRNA不能与模板链DNA杂交22. RNA编辑发生在A. 成熟的mRNAB. tRNA和rRNA的前体C. hnRNAD.成熟的tRNA和rRNAE. snRNA23. 下列哪种情况下,DNA双链贮存的遗传信息没有..改变A. RNA编辑B.转换C.错义突变D.倒位E.移码突变24. 关于真核rRNA的转录以及加工,说法正确的是A. rDNA位于核仁,呈串联重复排列B.转录出的5S rRNA组成多顺反子RNA的一部分C.rDNA之间被可转录的基因间隔所分隔D.基因间隔等同于内含子E.45S rRNA前身可剪接成为16S、5.8S和28S rRNA25. 生命活动涉及核酸和蛋白质两类生物大分子之间的相互作用,下列物质中不.属于核酸-蛋白质复合物的是A. telomereB.splicesomeC.ribozymeD.SRPE.mRNP26. 蛋白质的生物合成不直接...需要A. RNAB. RNA剪切因子C.分子伴侣D.帽子结合蛋白E.GTP27. mRNA在蛋白质合成中的功能是A. 运输遗传密码所对应的氨基酸B.与蛋白质结合,提供合成场所C.与帽子结合蛋白结合启动翻译D.由三联体密码指引氨基酸的排列顺序E.通过剪切因子切除poly A尾调控翻译效率28. 某种情况下,基因的点突变可能不会影响它所编码的蛋白质的一级结构,遗传密码的哪种特点对此发挥了重要作用A. 方向性B. 连续性C. 摆动性D. 通用性E. 简并性29. 关于遗传密码说法错误..的是A. 遗传密码的阅读方向是5'→3'B. 细胞核和线粒体的遗传密码完全通用C. 61组有意义密码分别编码20种氨基酸D. 密码子的第三位的作用没有前两位重要E. 不同生物对密码子有不同的偏爱30. 密码子与反密码子之间存在摆动配对现象,如果密码子为CGU,则识别它的反密码子可能是A. ICGB. GCAC. CCGD. UCGE. GCI31. 原核生物的核糖体大亚基是A. 30SB. 40SC. 50SD. 60SE. 70S32. 真核生物的核糖体不.含有A. E位B. P位C. A位D. 5S rRNAE. 转肽酶33. 氨基酰-tRNA合成酶的特点是A. 能水解磷酸二酯键,发挥校正功能B. 对氨基酸有绝对专一性C. 对tRNA有相对专一性D. 对氨基酸和tRNA都有高度特异性E. 能水解肽键,发挥校正功能34. 活化后的氨基酸才能与tRNA结合,每个氨基酸的活化过程需要消耗几个高能磷酸键A. 1B. 2C. 3D. 4E. 535. 关于起始tRNA说法错误..的是A. 在肽链延长阶段,起始tRNA不能继续运输蛋氨酸B. 原核与真核起始tRNA所携带的氨基酸不同C. 真核生物中识别AUG的tRNA至少有两种D. 原核生物的起始tRNA可以辨认AUG、GUG和UUGE. 原核生物的起始tRNA可以运输N-甲酰甲硫氨酸、缬氨酸和亮氨酸36. 原核生物的70S 翻译起始复合物不.包括A. 50S亚基B. IF-2C. fMet-tRNAD. mRNAE. 30S 亚基37. 真核生物参与蛋白质合成的起始因子有几种A. 1B. 2C. 3D. 4E. > 538. 原核生物的翻译起始阶段,帮助fMet-tRNA结合AUG的是A. IF-2B. IF-1C. eIF-2D. eIF-3E. eIF-439. SD序列与下列哪种rRNA相互作用A. 5SB. 23SC. 16SD. 5.8SE. 18S40. 原核生物的翻译过程中,能进入P位的是A.fMet-tRNAB.Met-tRNAC.Val-tRNAD. Leu-tRNAE. Ile-tRNA41. 关于真核生物的翻译起始,不.正确的说法是A. 翻译起始的过程较原核生物复杂B. eIF-2是调节真核翻译起始的关键因子C. 起始氨基酰-tRNA进入核糖体的P位D. mRNA的SD序列与其在核糖体上就位有关Met组成翻译起始复合物E. 由80S核糖体、mRNA和Met-tRNAi42. 真核生物肽链合成的延长阶段,促使氨基酰-tRNA进入A位的蛋白质因子是A. EF-1B. EF-2C. EFTD. EFGE. 转肽酶43. 关于转肽酶的说法正确的是A. 是rRNA的一部分B. 由数种核糖体蛋白组成C. 成肽反应不需要延长因子D. 催化氨基酸的α-羧基与核苷酸的3'-OH形成酯键E. 催化新生的肽酰-tRNA转移到P位44. 狭义的真核生物核蛋白体循环所涉及的蛋白质因子是① IF ②转肽酶③ EF ④ RFA. ①+②+③+④B. ①+③+④C. ②+③+④D. ①+③E. ②+③45. 真核生物中参与翻译终止的释放因子的数目是A. 1B. 2C. 3D.4E. > 546. 蛋白质合成时消耗能量的步骤发生在①氨基酸活化②进位③成肽④转位⑤新生肽链的释放A. ①+③+⑤B. ①+②+③C. ①+④+⑤D. ①+②+④E. ①+②+④+⑤47. 蛋白质合成时,每增加1个肽键至少需要消耗几个高能磷酸键A. 1B. 2C. 3D. 4E. 548. 具有酯酶活性并能释放新生肽链的蛋白质因子是A. RF-3B. RRC. 转肽酶D. 转位酶E. IF49. 翻译后加工不.包括A. 由分子伴侣辅助折叠成空间构象B. 新生多肽链从tRNA上水解释放C. 亚基聚合D. 氨基酸残基的共价修饰E. 辅基的结合50. 关于分子伴侣的叙述,错误..的是A. 识别并结合非天然构象的蛋白质B. 自身是一类较为保守的蛋白质C. 热休克蛋白是常见的分子伴侣D. 广泛存在于原核和真核细胞E. 其作用不依赖于蛋白质一级结构的信息51. 新生多肽链中,不.发生共价修饰的氨基酸残基是A. CysB. ThrC. MetD. ProE. Lys52. 下列哪项不.是信号肽的特点A. N端一小段富含亲水氨基酸的序列B. 与细胞质中的信号识别颗粒结合C. SRP受体是蛋白进入内质网所必须的D. N端一小段富含疏水氨基酸的序列E. 翻译的同时引导新生多肽链穿过内质网膜53. 引导新生多肽链靶向输送到细胞核的核酸序列称为A. signal peptideB. NLSC. KDELD. MLSE. SD54. 采用翻译后转运机制的蛋白质是A. 免疫球蛋白B. 肽类激素C. 核DNA编码的线粒体蛋白D. 凝血因子E. 水解酶55. 哪一项不.属于基因表达的范畴A. mRNA模板指导的蛋白质合成B. DNA模板指导的hnRNA合成C. DNA模板指导的DNA合成D. DNA模板指导的rRNA合成E. DNA模板指导的snRNA合成56. 下列哪一项不.是转录的原料A. TTPB. ATPC. CTPD. UTPE. GTP57. 转录生成的RNA链中存在A. dAMPC. UDPD. dTTPE. UMP58. 初级转录产物是A. 以转录调控序列为模板转录的序列B. 以结构基因为模板转录的全部序列C. 以外显子为模板转录的序列D. 以内含子为模板转录的序列E. 以上都不对59. 断裂基因的转录过程是A. 不对称、不连续B. 对称、不连续C. 对称、连续D. 不对称、连续E. 以上都不对60. 在复制和转录中均起作用的是A. RNA引物B. DNA聚合酶D. dNTPE. 蛋白质因子61. 比较复制和转录的聚合酶,错误..的说法是A. 底物不同B. 催化聚合反应的方向不同C. 产物不同D. 碱基配对略有不同E. 模板链不同62. 以DNA为模板合成RNA的过程称为A. DNA replicationB. transcriptionC. reverse transcriptionD. translationE. RNA replication63. 转录时模板与产物之间不.存在的碱基对应关系是A. A→TB. U→AC. A→UD. C→GE. G→C64. RNA转录合成需要的酶是A. DNA-dependent DNA polymeraseB. DNA-dependent RNA polymeraseC. RNA-dependent RNA polymeraseD. RNA-dependent DNA polymeraseE. Taq DNA polymerase65. 真核生物的RNA聚合酶有几种A. 1B. 2C. 3D. 4E. 566. 原核生物的RNA聚合酶有几种A. 1B. 2C. 3D. 4E. 567. E.coli RNA聚合酶的核心酶含有的亚基是A. α、β、β'、σB. α、β、σ 、ωC. α、β'、σ 、ωD. α、β、β' 、ωE. β、β'、σ 、ω68. 大肠杆菌的转录全过程始终需要A. αβ2β'ωB. α2ββ'ωC. αββ'2ωD. α2β2β'ωE. αββ'ω69. E.coli RNA聚合酶的全酶与核心酶的差别在于A. α亚基B. β亚基C. β'亚基D. σ亚基E. 以上都包括70. 真核生物中催化合成tRNA的酶是ββ'A. α2ββ'σB. α2C. RNA polymerase ID. RNA polymerase IIE. RNA polymerase III71. 遗传密码的简并性是指A. 一种三联体密码编码一种氨基酸B. 一种三联体密码编码几种氨基酸C. 几种三联体密码编码同一种氨基酸D. 不同的三联体密码编码不同的氨基酸E. 三联体密码中第一位碱基的差异不影响编码氨基酸的特异性72. 关于各种原核生物RNA聚合酶的σ亚基,描述错误..的是A. 种类很多B. 分子量不同C. 参与转录延长过程D. 与转录起始点相结合E. 决定转录的特异性73. 原核生物RNA聚合酶的σ亚基辨认转录起始点的实质是A. DNA-蛋白质相互作用B. RNA-蛋白质相互作用C. 蛋白质-蛋白质相互作用D. DNA-DNA相互作用E. DNA-RNA相互作用74. 下列哪一项不.属于核酸A. 转录因子B. 操纵子C. 转录子D. 复制子E. 顺反子75. 下列位置关系叙述正确的是A. 启动子从不会位于转录起始点下游B. 增强子全部位于结构基因内部C. 大部分TATA盒位于转录起始点下游D. 转录调控序列全部位于基因之外E. 翻译起始密码子位于转录起始点下游76. 不.需要引物的酶是A. Klenow片段B. RNA聚合酶C. 反转录酶D. Taq DNA聚合酶E. DNA-pol δ77. 真核生物的RNA聚合酶发生哪种修饰后,进入转录延长阶段A. 磷酸化B. 去磷酸化C. 甲基化D. 去甲基化E. 乙酰化78. 大肠杆菌中催化mRNA链延长的酶是A. Klenow fragmentB. αββ'σ ω2C. DNA-pol IIIββ'ωD. α2E. RNA-pol II79. 转录起始生成RNA的第一位核苷酸最常见的是A. ATPB. AMPC. GTPD. GMPE. CMP80. 真核生物合成mRNA的起始阶段不.涉及A. Hogness boxB. release factorC. transcriptional factorD. RNA-pol IIE. cis-acting element81. 狭义的核糖体循环是指A. 翻译起始、延长和终止的全过程B. 翻译的起始过程C. 翻译延长的进位、成肽和转位过程D. 翻译的终止过程E. 翻译与翻译后加工的全过程82. 关于选择性剪接,正确的说法是A. 选择性转录内含子B. 选择性转录外显子C. 初级转录产物相同,后加工过程不同D. 成熟mRNA相同,翻译过程不同E. 初级转录产物的序列发生改变83. RNA编辑发生在哪一个层次A. 复制水平B. 转录水平C. 转录后水平D. 翻译水平E. 翻译后水平84. 真核生物中编码哪种蛋白质的mRNA不.具有poly (A) 尾A. 细胞色素CB. 胰岛素C. 角蛋白D. 血红蛋白E. 组蛋白85. 下列哪一项不.是蛋白质的分拣信号A. SD sequenceB. signal peptideC. MLSD. KDELE. NLS86. 在转录后加工过程中可以观察到A. 套索RNAB. 羽毛状结构C. 锤头状RNAD. 叉状结构E. 转录空泡87. 下列核酸-蛋白质复合物中,哪一项与真核生物的RNA合成无关..A. ribosomeB. hnRNPC. snRNPD. splicesomeE. mRNP88. 以mRNA为模板合成蛋白质的过程称为A. DNA replicationB. RNA replicationC. transcriptionD. reverse transcriptionE. translation89. 关于多聚核蛋白体的描述,正确的是A. 结合了核蛋白体的几条mRNA链聚在一起B. 一个核蛋白体连续翻译多肽链C. 一条mRNA链上结合多个核蛋白体D. mRNA、核蛋白体和多肽链的复合体E. DNA、mRNA、核蛋白体和多肽链的复合体90. 电子显微镜下观察到原核生物的基因表达呈现羽毛状结构,其根本原因在于A. 多聚核蛋白体形成B. 多个转录过程同时进行C. 多个翻译过程同时进行D. 转录与翻译偶联进行E. 新生的多肽链不脱落91. 原核生物mRNA中的哪种结构与核糖体相结合A. AUGB. SD序列C. ORFD. 5' 端非翻译区E. 3' 端非翻译区92. 原核生物的翻译起始阶段,mRNA中的SD序列与哪段序列互补结合A. 23S rRNA的5' 端序列B. 16S rRNA的5' 端序列C. 5S rRNA的5' 端序列D. 23S rRNA的3' 端序列E. 16S rRNA的3' 端序列93. 参与蛋白质合成的蛋白质因子不.包括A. 起始因子B. 延长因子C. 释放因子D. 转肽酶E. 反式作用因子94. 密码子与反密码子之间有时不严格遵守碱基配对规律,这是由遗传密码的哪种性质决定的A. 方向性B. 连续性C. 通用性D. 简并性E. 摆动性95. 遗传密码具有通用性,但下列哪一项例外..A. 大肠杆菌的基因组DNAB. 人的线粒体基因组C. 鲸鱼的核DNAD. 线虫的染色体基因组E. 小麦的染色体DNA96. 不.属于直接进入蛋白质合成的氨基酸是A. 羟赖氨酸B. 精氨酸C. 谷氨酰胺D. 瓜氨酸E. 胱氨酸97. 在翻译起始阶段发挥作用的蛋白质因子是A. IFB. EFC. RFD. RRE. 转肽酶98. 翻译的实质是A. 将4种脱氧核糖核苷酸的排列顺序转换为4种核糖核苷酸的排列顺序B. 将4种核糖核苷酸的排列顺序转换为4种脱氧核糖核苷酸的排列顺序C. 将4种脱氧核糖核苷酸的排列顺序转换为20种氨基酸的排列顺序D. 将4种核糖核苷酸的排列顺序转换为20种氨基酸的排列顺序E. 将蛋白质一级结构的信息转换为空间结构的信息99. 关于多顺反子mRNA,正确的说法是A. 几个mRNA分子有不同的开放阅读框B. 几个结构基因由不同的启动子调控转录C. 一个mRNA分子有几个开放阅读框D. 多个结构基因编码一类蛋白质E. 一个结构基因编码多种蛋白质100. 抑制真核生物蛋白质合成的抗生素是A. 放线菌酮B. 氯霉素C. 四环素D. 新霉素E. 链霉素B型题A. σB. αC. βD. β'E. CTD101. 原核生物的RNA聚合酶中,辨认转录起始点的组分是102. 原核生物的RNA聚合酶中,决定转录速度的亚基是103. 真核生物的RNA聚合酶的结构组成部分A.IFB.σ因子C.snRNPD.ρ因子E.TFII104. 与原核生物转录终止相关的是105.真核生物mRNA转录起始需要106. 真核生物mRNA剪接加工需要107. 原核生物的翻译起始需要A. 胱氨酸B. 谷氨酸C. 鸟氨酸D. 脯氨酸E. 甲硫氨酸108. 不属于...构成蛋白质的氨基酸是109. 能组成蛋白质但没有遗传密码的氨基酸是110. 能作为起始氨基酸的是111. 属于酸性氨基酸的是112. 属于亚氨基酸的是A. GTPB. UMPC. dTTPD. dAMPE. CDP113. 复制的原料包括114. 转录的原料包括115. 复制产物中包含116. 转录产物中包含117. 为翻译过程提供能量的核苷酸是A. U6 snRNAB. mRNAC. tRNAD. 5S rRNAE. 45S rRNA118. RNA聚合酶I催化合成119. RNA聚合酶II催化合成A. Taq DNA polymeraseB. Klenow fragmentC. RNA polymerase IIIββ'ωD. α2E. αββ'σ2120. 真核生物合成tRNA的过程依赖121. 原核生物合成mRNA的转录延长阶段需要122. 原核生物合成rRNA的转录起始阶段需要123. 体外催化DNA合成并能耐受高温的酶是A. 核糖体小亚基B. 核糖体大亚基C. 起始因子D. 起始氨基酰-tRNAE. mRNA124. 30S翻译起始复合物不.包括125. 70S翻译起始复合物不.包括X型题126. 基因表达的最终产物包括A.蛋白质B.mRNAC.tRNAD.rRNAE. 其他小分子RNA127. 转录的特点是A. 细胞内并非所有的基因都转录B. 不对称转录C. 特异性转录因子决定转录的时序性D. 模板可以分布在DNA的两条链上E. 不同单链上的模板转录方向一致128. 与模板链同义的是A. 正链B. 负链C. 有意义链D. 反意义链E. 编码链129. 原核生物的RNA聚合酶在转录延长过程中不.脱落的组分是A. σB. αC. βD. β'E.核心酶130. 可被RNA聚合酶保护的核酸区域是A. 5' 端帽子B. 顺反子C. Pribnow boxD. 羧基末端结构域E. –35区131. 转录生成的RNA链中,5′端第一个核苷酸通常是A. ATPB. CTPC. GTPD. CMPE. GMP132. 原核生物和真核生物的RNA聚合酶的区别在于A. 能否辨认Pribnow box或者TATA boxB.能否催化生成5' 端的四磷酸二核苷酸结构C.与模板结合需否辅助因子D.能否生成转录起始复合物E.是否对利福平敏感133. 真核生物细胞核内进行的mRNA转录后加工包括A. 5' 端加帽B.3' 端加尾C.修饰生成稀有碱基D.选择性剪接E.RNA编辑134. 基因组序列测定的研究结果表明,真核生物的基因数量远远少于预期值,你认为机体如何满足编码多种蛋白质的生理需要A. 自发突变B.多蛋白的水解修饰C.染色体易位D. RNA编辑E.选择性剪接135. 选择性剪接的作用机制包括A. 使用不同的剪接位点B.选择性使用外显子C.反式剪接D.使用不同的启动子E.使用不同的多腺苷酸化位点136. 不.属于有意义密码的是A. UGAB. UAAC. AUGD. UAGE. GUA137. 当mRNA中密码子的第三位是碱基C时,tRNA中反密码子的第一位碱基可能为A. IB. GC. UD. AE. C138. 30S翻译起始复合物和70S翻译起始复合物含有的相同组分是Met E. IF A. 50S亚基 B. 30S亚基 C. mRNA D. fMet-tRNAf139. 在真核生物的翻译起始阶段,参与大小亚基拆分的蛋白质因子是A. eIF-2B. eIF-3C. eIF-4ED. eIF-6E. eIF-4F 140. 在肽链合成的延长阶段,真核生物与原核生物的区别在于A. 反应体系B. 延长因子C. 卸载tRNA的脱落方式D. 肽链延伸的方向E. 消耗GTP141. 能占据核糖体A位的是A. fMet-tRNAB. IF-1C. eRFD. RF-3E. Val-tRNA 142. 蛋白质的生物合成过程具有高保真性,可能的机制包括A. 密码子与反密码子的碱基配对B. 氨基酰-tRNA合成酶的专一性和校正功能C. EF-GTP的存在时间极短,防止错误进位D. 耗能水解清除任何步骤出现的不正确连接E. mRNA和氨基酰-tRNA在核糖体中的正确就位(二)名词解释1. 基因表达(gene expression)2. 不对称转录(asymmetric transcription)3. 翻译(translation)4. TATA盒(TATA box)5. 套索RNA(lariat RNA)6. 选择性剪接(alternative splicing)7. RNA编辑(RNA editing)8. 密码子的简并性(degeneracy)9. 密码子的摆动性(wobble)10. SD序列(Shine-Dalgarno sequence)11. 多聚核糖体(polyribosome)12. 核糖体循环(ribosome cycle)13. 分子伴侣(molecular chaperon)14. 信号肽(signal peptide)(三)简答题1. 试比较DNA复制和转录的异同。
分子生物学智慧树知到课后章节答案2023年下山东农业大学
分子生物学智慧树知到课后章节答案2023年下山东农业大学山东农业大学第一章测试1.格里菲斯转型实验得出了什么结论()答案:DNA是生命的遗传物质,蛋白质不是遗传物质2.现代遗传工程之父Paul Berg建立了什么技术()答案:重组DNA技术3.下列哪种技术可以用于测定DNA的序列()答案:双脱氧终止法4.RNA干扰是指由单链RNA诱发的基因沉默现象,其机制是通过阻碍特定基因的翻译或转录来抑制基因表达。
()答案:错第二章测试1.比较基因组学是基于基因组图谱和测序基础上,对已知的基因和基因组结构进行比较,来了解基因的功能、表达机理和物种进化的学科。
()答案:对2.以下哪项是原核生物基因组的结构特点()答案:操纵子结构3.细菌基因组是()答案:环状双链DNA4.下列关于基因组表述错误的是()答案:真核细胞基因组中大部分序列均编码蛋白质产物5.原核生物的结构基因多为单顺反子,真核生物的结构基因多为多顺反子。
( )答案:错6.病毒基因组可以由DNA组成,也可以由RNA组成。
( )答案:对第三章测试1.在原核生物复制子中以下哪种酶除去 RNA 引发体并加入脱氧核糖核苷酸?()答案:DNA 聚合酶 I2.使 DNA 超螺旋结构松驰的酶是()。
答案:拓扑异构酶3.从一个复制起点可分出几个复制叉?()答案:24.所谓半保留复制就是以 DNA 亲本链作为合成新子链 DNA 的模板,这样产生的新的双链 DNA 分子由一条旧链和一条新链组成。
( )答案:对5.DNA 的5′→3′合成意味着当在裸露3′→OH 的基团中添加 dNTP 时,除去无机焦磷酸 DNA链就会伸长。
( )答案:对第四章测试1.对RNA聚合酶的叙述不正确的是()。
答案:全酶不包括ρ因子2.原核生物RNA聚合酶识别启动子位于()。
答案:转录起始位点上游3.增强子与启动子的不同在于()。
答案:增强子与转录启动无直接关系4.启动子总是位于转录起始位点的上游。
优选分子生物学第五章原核转录
在某些细菌中含有识别不同启动子的σ因子, 以适应不同生长发育阶段的要求,控制不 同基因转录的起始。
大肠杆菌RNA聚合酶的组成分析
亚基 基因 分子量 亚基数 组分
功能
α rpoA 36500
2
核心酶 核心酶组装,启动子识别
β rpoB 151000
1
核心酶 β和β‘共同形成RNA合成的
活性中心,形成磷酸二酯键
β' rpoC 155000
1
核心酶
ω? σ rpoD
11000 70000
1
核心酶
与DNA模板结合
Active center cleft
启动子的结构和功能
启动子是一段位于结构基因5’端上游区的保 守的DNA序列,能活化RNA聚合酶,使之 与模板DNA准确地相结合并具有转录起始 的特异性。
启动子位于转录起始位点(+1)上游,因 此不被转录。
-10区的发现
1975年,Pribnow和 Schaller将RNA聚合酶全 酶与模板DNA结合后, 用DNaseI降解DNA,得 到41~44个核苷酸对的 DNA片段。
不同点:不同点聚合酶;不同的底物;转 录不需要引物,能够起始新链的合成,而 且保留5‘端3磷酸;产生的RNA不需要与 DNA模板结合;正确率比复制低;转录对 某个基因的重复的转录,产生多个拷贝, 复制1:1;终止方式
RNA聚合酶
RNA聚合酶是催化RNA合成的大分子:
RNA聚合酶的反应条件
1. 需双链DNA模板; 2. 转录时,按5’ 3’方向合成RNA链; 3. 以4种NTP(A,U,G,C)为底物; 4. 不需引物,能够起始新链的合成,而且保留5‘端3磷酸。
武大分子生物学05年真题的名词解释
2005年1.遍在蛋白Ubiquitin遍在蛋白是一种小的76氨基酸蛋白质。
其被添加到被蛋白酶体作为攻击靶子的其它蛋白质上。
遍在蛋白(Ubiquitin)是目前所知道的“保存”得最好的蛋白质之一,在所有动物身上都存在。
“遍在蛋白-蛋白酶体”这个体系是细胞存活与细胞分裂的关键体系。
2.核糖体结合位点ribosome binding site核糖体识别并结合mRNA的位点。
原核生物mRNA起始密码子的上游含有核糖体识别和结合序列;真核生物mRNA的5′帽子结构对核糖体的识别起一定作用。
3.siRNA和miRNA4.蛋白质组学(proteome)蛋白质组学一词,源于蛋白质(protein)与基因组(genome)两个词的杂合,意指“一种基因组所表达的全套蛋白质”,即包括一种细胞乃至一种生物所表达的全部蛋白质。
蛋白质组本质上指的是在大规模水平上研究蛋白质的特征,包括蛋白质的表达水平,翻译后的修饰,蛋白与蛋白相互作用等,由此获得蛋白质水平上的关于疾病发生,细胞代谢等过程的整体而全面的认识。
5.DNA印迹法DNA footprinting又称Southern blotting (Southern印迹法)将经过凝胶电泳分离的DNA转移到适当的膜(如硝酸纤维素膜、尼龙膜等)上的技术。
可以采用毛细管作用或电泳法转移,转移到膜上的DNA再与标记的特异核酸探针杂交等进行分析。
6. 单核苷酸多态性single nucleotide polymorphism;SNP;不同物种、个体基因组DNA序列同一位置上的单个核苷酸存在差别的现象。
有这种差别的基因座、DNA序列等可作为基因组作图的标志。
人基因组上平均约每1000个核苷酸即可能出现1个单核苷酸多态性的变化,其中有些单核苷酸多态性可能与疾病有关,但可能大多数与疾病无关。
单核苷酸多态性是研究人类家族和动植物品系遗传变异的重要依据。
7. chromosome walking染色体走读法从基因文库中任取一个克隆作为染色体走读的起点,将之两端序列分别亚克隆,亚克隆片段在0.5 - 2.0 kb范围内。
现代分子生物学(第3版)_课后答案-五章
第一章 绪论1, 简述孟德尔、摩尔根和沃森等人对分子生物学发展的主要贡献。
答:孟德尔的对分子生物学的发展的主要贡献在于他通过豌豆实验,发现了遗传规律、分离规律及自由组合规律;摩尔根的主要贡献在于发现染色体的遗传机制,创立染色体遗传理论,成为现代实验生物学奠基人;沃森和克里克在1953年提出DAN 反向双平行双螺旋模型。
反向双平行双螺旋模型。
2, 写出DNA 和RNA 的英文全称。
答:脱氧核糖核酸(答:脱氧核糖核酸(DNA, Deoxyribonucleic acid DNA, Deoxyribonucleic acid DNA, Deoxyribonucleic acid)), 核糖核酸(核糖核酸(RNA, Ribonucleic acid RNA, Ribonucleic acid RNA, Ribonucleic acid))3, 试述“有其父必有其子”的生物学本质。
答:其生物学本质是基因遗传。
子代的性质由遗传所得的基因决定,而基因由于遗传的作用,其基因的一半来自于父方,一般来自于母方。
自于父方,一般来自于母方。
4, 早期主要有哪些实验证实DNA 是遗传物质?写出这些实验的主要步骤。
答:一,肺炎双球菌感染实验,答:一,肺炎双球菌感染实验,11,R 型菌落粗糙,菌体无多糖荚膜,无毒,注入小鼠体内后,小鼠不死亡。
型菌落粗糙,菌体无多糖荚膜,无毒,注入小鼠体内后,小鼠不死亡。
22,S 型菌落光滑,菌体有多糖荚膜,有毒,注入到小鼠体内可以使小鼠患病死亡。
型菌落光滑,菌体有多糖荚膜,有毒,注入到小鼠体内可以使小鼠患病死亡。
33,用加热的方法杀死S 型细菌后注入到小鼠体内,小鼠不死亡;后注入到小鼠体内,小鼠不死亡;二,噬菌体侵染细菌的实验:二,噬菌体侵染细菌的实验:11,噬菌体侵染细菌的实验过程:吸附→侵入→复制→组装→释放。
,噬菌体侵染细菌的实验过程:吸附→侵入→复制→组装→释放。
2 2 2,,DNA 中P 的含量多,蛋白质中P 的含量少;蛋白质中有S 而DNA 中没有S ,所以用放射性同位素35S 标记一部分噬菌体的蛋白质,用放射性同位素32P 标记另一部分噬菌体的DNA DNA。
分子生物学第五章课后思考题答案【修订版】
分子生物学第五章作业1、哪些重要的科学发现和实验推动了DNA重组技术的产生及发展?答:近半个世纪来,分子生物学主要取得了三大成就:第一,20世纪40年代确定了遗传信息的携带者,即基因的分子载体是DNA而不是蛋白质,解决了遗传的物质基础问题;第二,50年代提示了DNA分子的双螺旋结构模型和半保留复制机制,解决了基因的自我复制和世代交替问题;第三,50年代末至60年代,相继提出了“中心法则”和操纵子学说,成功地破译了遗传密码,充分认识了遗传信息的流动和表达。
但事实上,DNA分子体外切割与连接技术及核苷酸序列分析技术的进步直接推动了重组DNA技术的产生和发展。
其中,限制性内切核酸酶和DNA连接酶等工具酶的发现和应用是现代生物工程技术史上最重要的事件。
DNA重组技术的产生及发展过程中比较重要的科学发现和实验如下:1957年A.Kornberg从大肠杆菌中发现了DNA聚合酶I。
1965年S. W. Holley完成了酵母丙氨酸tRNA的全序列测定;科学家证明细菌的抗药性通常由"质粒"DNA所决定。
1967年年世界上有五个实验室几乎同时宣布发现了DNA连接酶。
1970 年H.O.Smith,K.W.Wilcox和T.J.Kelley分离了第一种限制性核酸内切酶。
H.M.Temin和D.Baltimore从RNA肿瘤病毒中发现反转录酶。
1972-1973 年H.Boyer,P.Berg等人发展了DNA重组技术,于72年获得第一个重组DNA分子,73年完成第一例细菌基因克隆。
1978 年首次在大肠杆菌中生产由人工合成基因表达的人脑激素和人胰岛素。
1981 年R. D. Palmiter和R. L. Brinster获得转基因小鼠;A. C. Spradling和G. M. Rubin得到转基因果蝇。
1982 年美、英批准使用第一例基因工程药物--胰岛素;Sanger等人完成了入噬菌体48,502bp全序列测定。
分子生物学课件--真核生物表达调控
(4)DNA拓扑结构变化 天然双链DNA的构象大多 是负性超螺旋。当基因活跃转录时,RNA聚合酶转 录方向前方DNA的构象是正性超螺旋,其后面的 DNA为负性超螺旋。正性超螺旋会拆散核小体,有 利于RNA聚合酶向前移动转录;而负性超螺旋则有 利于核小体的再形成。
(5)DNA碱基修饰变化:真核DNA中的胞嘧啶约有 5%被甲基化为5甲基胞嘧啶(5methylcytidine,m5C), 而活跃转录的DNA段落中胞嘧啶甲基化程度常较低。 这种甲基化最常发生在某些基因5′侧区的CpG序列中, 实验表明这段序列甲基化可使其后的基因不能转录。 甲基化可能阻碍转录因子与DNA特定部位的结合从而 影响转录。
分子生物学课件--真核生物表达 调控
1
一、转录前调控
1、DNA水平的调控:是真核生物发育调控的一种形式,它包括:基因
丢失、甲基化、扩增、重排、等方式。 (1) 基因丢失:目前认为这种调节方式主要是在较低等的真核生物中。如
马蛔虫,只有在生殖细胞核中保持个体发育的全部基因,而体细胞核 中却失去了一部分基因。在原生动物和昆虫中也有类似现象,体细胞 不具有全能性。高等生物没有发现类似的现象,可进行体细胞核移植。
③碱性-亮氨酸拉链(basic leucine zipper,bZIP)
这结构的特点是蛋白质分子的肽链上 每隔6个氨基酸就有一个亮氨酸残 基,结果就导致这些亮氨酸残基都 在α螺旋的同一个方向出现。两个 相同的结构的两排亮氨酸残基就能 以疏水键结合成二聚体,这二聚体 的另一端的肽段富含碱性氨基酸残 基,借其正电荷与DNA双螺旋链上 带负电荷的磷酸基团结合。若不形 成二聚体则对DNA的亲和结合力明 显降低。
(1) 启动子
真核启动子间不像原核那样有明显共同一致的序列,而且单靠RNA聚合 酶难以结合DNA而起动转录,而是需要多种蛋白质因子的相互协调作 用。
《现代分子生物学》第五章 3 真核生物的转录后加工
各种参与剪接的成分形成一个剪接体系, 称为剪接体(spliceosome)。该体系由 几种snRNP和大量的其他的蛋白质分子 组成,这些蛋白质分子称为剪接因子, 估计有40多种。 剪接点和分支点序列由剪接体识别, snRNA和蛋白质都参与了识别,特别是 snRNA之间以及与mRNA间的碱基配对 起重要作用。
RNA印迹法(RNA blotting)可用于分析核 RNA剪接过程中的中间体,从而确定内含 子的去除顺序。 实验中可以发现含有不同内含子的中间产 物,因此内含子的去除似乎没有特定的顺 序,但也发现有一定的规律,说明剪接有 特定的途径。
剪接反应并不是按内含子在RNA前体上 的顺序进行的。 RNA的构象影响剪接点的选择。在去除 特定的内含子后,RNA的构象发生一定 的变化,再选择新的剪接点。
剪接体Splicesome: snRNA:U1, U2, U4, U5, U6 snRNP:U+蛋白 质
剪接体按一定的顺序组装,已分离到一些 组装的中间体。只有组装完整的剪接体才 有功能。在剪接反应中,剪接体还会释放 和添加某些成分。 转酯反应只是磷酸酯键的直接转移,没有 水解反应的出现,因此不需要外部的能量, 也不需要供能物质如ATP或GTP的参与。 剪接体中起催化转酯反应的成分尚未弄清 楚,也不知道是蛋白质还是RNA在起作用。
一、核基因mRNA的剪接 一、核基因mRNA的剪接
mRNA的基因在低等真核生物中只有少数含 有内含子,为不连续基因。随着进化程度的 增高,不连续基因的数目不断增加。 细胞核中有一类RNA,十分不稳定,平均长 度比mRNA要长,序列的复杂程度非常高, 称为核内不均一RNA( heterogeneous nuclear RNA,hnRNA )。
RNA processing 1
分子生物学试题_完整版(Felisa)
05级分子生物学真题一、选择题1、激活子的两个功能域,一个是转录激活结构域,另一个是(DNA结合域)2、转录因子包括通用转录因子和(基因特异转录因子)3、G-protein 激活needs ( GTP ) as energy.4、Promoters and (enhancers) are cis-acting elements.5、噬菌体通过(位点专一重组)整合到宿主中6、在细菌中,色氨酸操纵子的前导区转录后,(翻译)就开始7、mRNA的剪切跟(II)类内含子相似8、UCE是(I)类启动子的识别序列9、TATA box binding protein 在下列哪个启动子里面存在(三类都有)10、(5S rRNA)是基因内部启动子转录的11、人体全基因组大小(3200000000 bp)12、与分枝位点周围序列碱基配对的剪接体(U2 snRNP)13、tRNA基因是RNA聚合酶(III)启动的14、在细菌中,色氨酸操纵子的前导区转录后,(翻译)就开始15、乳糖操纵子与阻遏蛋白结合的物质是(异构乳糖)。
16、核mRNA的内含子剪接和(II类内含子剪接)的过程相似17、基因在转录时的特点(启动子上无核小体)18、RNA干涉又叫(转录后的基因沉默,PTGS)19、内含子主要存在于(真核生物)20、snRNA在下列哪种反应中起催化酶的作用(mRNA的剪接)二、判断题1、原核生物有三种RNA聚合酶。
2、抗终止转录蛋白的机制是使RNA聚合酶忽略终止子。
3、RNA聚合酶II结合到启动子上时,其亚基的羧基末端域(CTD)是磷酸化的。
4、Operon is a group of contiguous, coordinately controlled genes.5、RNA聚合酶全酶这个概念只应用于原核生物。
6、聚腺苷酸尾是在mRNA剪接作用前发生的。
7、σ在转录起始复合复合物中使得open到closed状态(closed转变成open)8、剪接复合体作用的机制:组装、作用、去组装,是一个循环三、简答题1、原核生物转录终止的两种方式。
分子生物学——转录
转录起始复合物
RNApol (α2ββ′σ - DNA - pppGpN- OH 3′ α ββ′σ) ′
(二)转录延长
1. σ亚基脱落,RNA–pol聚合酶核心酶变 亚基脱落, 聚合酶核心酶变 构,与模板结合松弛,沿着DNA模板前 与模板结合松弛,沿着 模板前 移; 2. 在核心酶作用下,NTP不断聚合, 核心酶作用下 作用下, 不断聚合, 不断聚合 RNA链不断延长。 链不断延长。 链不断延长 (NMP) n + NTP → (NMP) n+1 + PPi
• 在DNA分子双链上某一区段,一股链 分子双链上某一区段, 分子双链上某一区段 可转录,另一股链不转录; 可转录,另一股链不转录; • 模板链并非永远在同一单链上。 模板链并非永远在同一单链上。
聚合酶( 二、RNA聚合酶(DDRP) 聚合酶 )
1. 原核生物的 原核生物的RNA聚合酶 聚合酶 E.coli的RNA聚合酶是由四种亚基 的 聚合酶是由四种亚基 组成的六聚体( ωσ) 组成的六聚体( α2 β β′ ωσ)
TF II B
TF II H
DNA
转录 前 起 始 复 合 物
4. 拼板理论 拼板理论(piecing theory)
一个真核生物基因的转录需要3至 个 一个真核生物基因的转录需要 至5个 转录因子。转录因子之间互相结合,生成 转录因子。转录因子之间互相结合, 有活性和专一性的复合物,再与 有活性和专一性的复合物,再与RNA聚合 聚合 酶搭配而有针对性地结合、 酶搭配而有针对性地结合、转录相应的基 因。
一、原核生物的转录过程
南师大 分子生物学第五章 转录因子
Molecular Biology
第一节 转录因子的结构
一、转录因子常见的基本结构 二、转录因子的种类
Molecular Biology
一、转录因子常见的基本结构
转录因子有一个共同的特性,即由不同的功能结 构域组成可调变的蛋白质结构,而这些功能结构 域从蛋白总体分离出来后,无论是单独作用还是 与其它来源的蛋白连接后,仍保持原有的功能。
乙烯应答元件结合因子(ERF),最先是从烟草中,作为 GCC-box结合蛋白分离出来的。 ERF蛋白具有一个高度保守的含58或59个氨基酸的DNA 结合域。 在拟南芥基因组中,有124个ERF 基因,参与对低温、干 旱、病原体及其诱发因子的反应,构成一个转录因子基因 家族。 这类基因家族在植物的生长、发育、抗病、抗胁迫以及次 生代谢等方面起着非常重要的作用。 该家族现只在高等植物中被发现。
Molecular Biology
转录因子的DNA芯片技术研究
Molecular Biology
Molecular Biology
Molecular Biology
第三节 一些常见的植物转录因子
一、植物中常用的特异性转录因子 二、植物中特有的转录因子——Dof
Molecular Biology
Molecular Biology
二、转录因子的研究方法
与传统的“单基因” 技术比较,微阵列具有无可 比拟的优势。 该技术能在同一时间内对数千个基因表达谱的差 异进行平行分析,从而可以对基因进行大量、快 速、平行研究,实现高通量筛选; 而且,还可得出其所筛选出的特异性配基的相对 亲和力信息。
Molecular Biology
分子生物学 复习资料
分子生物学复习资料3、真核生物转录水平的调控机制?答:真核生物在转录水平的调控主要是通过反式作用因子、顺式作用元件和RNA聚合酶的相互作用来完成的,主要是反式作用因子结合顺式作用元件后影响转录起始复合物的形成过程。
○1转录起始复合物的形成:真核生物RNA聚合酶识别的是由通用转录因子与DNA形成的蛋白质-DNA复合物,只有当一个或多个转录因子结合到DNA上,形成有功能的启动子,才能被RNA聚合酶所识别并结合。
转录起始复合物的形成过程为:TFⅡD 结合TATA盒;RNA聚合酶识别并结合TFⅡD-DNA复合物形成一个闭合的复合物;其他转录因子与RNA 聚合酶结合形成一个开放复合物。
在这个过程中,反式作用因子的作用是:促进或抑制TFⅡD与TATA盒结合;促进或抑制RNA 聚合酶与TFⅡD-DNA复合物的结合;促进或抑制转录起始复合物的形成。
○2反式作用因子:一般具有三个功能域(DNA识别结合域、转录活性域和结合其他蛋白结合域);能识别并结合上游调控区中的顺式作用元件;对基因的表达有正性或负性调控作用。
○3转录起始的调控:⑴反式作用因子的活性调节:①表达式调节——反式作用因子合成出来就具有活性;②共价修饰——磷酸化和去磷酸化,糖基化;③配体结合——许多激素受体是反式作用因子;④蛋白质与蛋白质相互作用——蛋白质与蛋白质复合物的解离与形成。
⑵反式作用因子与顺式作用元件的结合:反式作用因子被激活后,即可识别并结合上游启动子元件和增强子中的保守性序列,对基因转录起调节作用。
⑶反式作用因子的作用方式——成环、扭曲、滑动、Oozing。
⑷反式作用因子的组合式调控作用:每一种反式作用因子结合顺式作用元件后虽然可以发挥促进或抑制作用,但反式作用因子对基因调控不是由单一因子完成的而是几种因子组合发挥特定的作用。
10、标记探针的方法?答:1、缺口平移法:此法是利用适当浓度的DNase Ⅰ在DNA双链上随机切割单链,造成单链切口。
《分子生物学》第五章期末习题
《分子生物学》第五章期末习题第5章原核生物基因表达调控-习题答案一、名词解释基因表达调控:所有生物的信息,都是以基因的形式储存在细胞内的DNA(或RNA)分子中,随着个体的发育,DNA分子能有序地将其所承载的遗传信息,通过密码子-反密码子系统,转变成蛋白质或功能RNA分子,执行各种生理生物化学功能。
这个从DNA到蛋白质或功能RNA的过程被称之为基因表达,对这个过程的调节称之为基因表达调控。
组成性基因表达:是指在个体发育的任一阶段都能在大多数细胞中持续进行的基因表达。
其基因表达产物通常是对生命过程必须的或必不可少的,一般只受启动序列或启动子与RNA聚合酶相互作用的影响,且较少受环境因素的影响及其他机制调节,也称为基本的基因表达。
管家基因:某些基因产物对生命全过程都是必须的获必不可少的。
这类基因在一个生物个体的几乎所有细胞中均表达,被称为管家基因。
诱导表达:是指在特定环境因素刺激下,基因被激活,从而使基因的表达产物增加。
阻遏表达:是指在特定环境因素刺激下,基因被抑制,从而使基因的表达产物减少。
反式作用因子:又称为分子间作用因子,指一些与基因表达调控有关的蛋白质因子。
它们由某一基因表达后通过与特异的顺式作用元件相互作用,反式激活另一基因的转录。
操纵子:是指原核生物中由一个或多个相关基因以及转录翻译调控元件组成的基因表达单元。
SD序列:存在于原核生物起始密码子AUG上游7~12个核苷酸处的一种4~7个核苷酸的保守片段,它与16S rRNA 3’端反向互补,所以可将mRNA的AUG起始密码子置于核糖体的适当位置以便起始翻译作用。
根据首次识别其功能意义的科学家命名。
阻遏蛋白:是一类在转录水平对基因表达产生负控作用的蛋白质,在一定条件下与DNA结合,一般具有诱导和阻遏两种类型。
在诱导类型中,信号分子(诱导物)使阻遏蛋白从DNA释放下来;在阻遏类型中,信号分子使阻遏蛋白结合DNA,不管是哪一种情况,只要阻遏蛋白与DNA结合,基因的转录均将被抑制。
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TFIIIA: a zinc finger.
TFIIIB: three subunits.
TFIIIC: at least 5 subunits, >500 kD.
TFIIIA and TFIIIC are assembly factors, whose role is to assist the binding of TFIIIB at the right location.
➢ RNA polymerase III has a internal promoter
Deletion analysis shows that the promoter for 5S RNA genes is internal; initiation occurs a fixed distance (~55 bp) upstream of the promoter.
RNA polymerase III: a minor enzyme activity. in nucleoplasm; tRNAs and other small RNAs (5S rRNA)transcription. inhibited or not by a-amanitin.
All eukaryotic RNA polymerases are large proteins, >500 kD, 8-14 sFra bibliotekbunits.
RNA polymerases II
The largest subunit has a carboxy-terminal domain (CTD), which consists of multiple repeats of a consensus sequence of 7 amino acids. The sequence is unique to RNA polymerase II.
RNA polymerase II: in nucleoplasm , heterogeneous nuclear RNA (hnRNA) transcription (the precursor for mRNA). inhibited by low concentrations of a-amanitin.
Core promoter: ~70 bp.
UBF1: a single polypeptide, it binds to both regions (GC-rich), after which SL1 can bind. RNA pol I then binds to the core promoter. UBF1: SL1: 4 subunits, one subunit--TBP interacts with RNA polymerase. SL1 resembles sigma factor.
Promoter structure of RNA polymerase III
The binding of the assembly factors TFIIIA and TFIIIC, the initiation factor TFIIIB, and RNA polymerase III.
Promoter structure of RNA polymerase III
Chapter 5 . Transcription & RNA Processing in Eukaryotic cells
1. RNA polymerase: 3 types
RNA polymerase I: in nucleolus; rRNA transcription; the most cellular RNA synthesis. Did not inhibited by a-amanitin
➢ Promoter structure of RNA polymerase II
TBP: TATA-binding protein, ~30 kD.
TAFs: for TBP-associated factors.
One upstream promoter, with relatively fixed location.
The RNA polymerase activities of mitochondria and chloroplasts are smaller, and resemble bacterial RNA polymerase.
2. Promoter
➢ RNA polymerase I promoter has two sequence components
TATA box: ~25 bp upstream, 8 bp consensus sequence consists entirely of AT.
The TATA box tends to be surrounded by G C-rich sequences.
It is almost identical with the -10 sequence found in bacterial promoters.
➢ RNA polymerase III has a internal promoter
Promoters for RNA polymerase III consist of bipartite sequences: boxA separated from either boxC or boxB. Or they may consist of separated sequences upstream of the startpoint (Oct, PSE, TATA).