高中生物基因工程的应用试题

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高中生物《基因工程》练习题(含答案解析)

高中生物《基因工程》练习题(含答案解析)XXX《基因工程》练题题号得分一一、单选题（本大题共20小题，共20.0分）1.如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次为（）二总分A.解旋酶、限制酶、DNA连接酶C.限制酶、DNA连接酶、解旋酶B.限制酶、解旋酶、DNA连接酶D.DNA连接酶、限制酶、解旋酶2.下列有关基因工程技术的叙述，正确的是（）A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体B.所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C.选用细菌为重组质粒受体细胞是因为质粒易进入细菌细胞且繁殖快D.只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达3.如图为基因表达载体的模式图。

以下有关基因工程的说法错误的是（）A.基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建B.任何基因表达载体的构建都是一样的，没有差别C.图中启动子和终止子分歧与起始暗码子和终止暗码子D.抗生素抗性基因的作用是作为标记基因，用于鉴别受体细胞中是否导入了载体4.一些细菌能借助限制性核酸内切酶抵御外来入侵者，而其自身的基因组DNA经预先修饰能躲避限定酶的降解。

以下在动物体内发生的过程当中，与上述细菌行为相似的是（）A.巨噬细胞内溶酶体杀灭病原体B.T细胞受抗原刺激分泌淋巴因子C.组织液中抗体与抗原的特异性结合D.疫苗诱导机体发生对病原体的免疫5.某目的基因两侧的DNA序列所含的限制性核酸内切酶位点如图所示，最好应选用下列哪种质粒作为载体（）XXX.C.D.6.下图是研究人员使用供体生物DNA中无限增殖调控基因制备单克隆抗体的思路流程。

以下相关叙述精确的是（）A.酶a、酶b作用位点分别为氢键和磷酸二酯键B.Ⅰ是经免疫的记忆细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞C.筛选出既能无限增殖又能产生专一抗体的Ⅱ必须通过分子检测D.上述制备单克隆抗体的方法涉及转基因技术和动物细胞核移植技术7.下列关于基因工程技术的说法，正确的是（）A.切割质粒的限制酶均只能特异性地识别3-6个核苷酸序列B.PCR反应中两种引物的碱基间应互补以保证与模板链的正常结合C.载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基因D.目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制8.在其他条件具备的情况下，在试管中进入物质X和物质Z，可得到相应产物Y．下列叙述正确的是（）A.若X是DNA，Y是RNA，则Z是逆转录酶B.若X是DNA，Y是mRNA，则Z是脱氧核苷酸C.若X是RNA，Y是DNA，则Z是限制性内切酶D.若X是mRNA，Y是核糖体上合成的大分子，则Z是氨基酸9.下图透露表现的是三种黏性末端，以下说法精确的是A.甲、乙、丙黏性末端是由两种限制酶作用产生的B.若甲中的G处发生突变，限制酶可能无法识别该切割位点C.乙中的酶切位点在A与G之间D.目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等几类原核生物10.如图是利用基因工程技术生产可使用疫苗的部分过程，其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性核酸内切酶。

高二生物基因工程练习题

高二生物基因工程练习题基因工程是一种通过改变生物体的遗传信息来获得特定目标的技术方法。

它可以被应用于医学、农业、工业等领域，为人类带来巨大的影响和改变。

本文将介绍一些高二生物基因工程练习题，以帮助学生更好地理解和掌握这一知识点。

第一题：请设计一个基因工程实验，将人类胰岛素基因导入大肠杆菌中，并使大肠杆菌能够大量产生胰岛素。

解答：要将人类胰岛素基因导入大肠杆菌中，首先需要获得人类胰岛素基因的DNA序列。

可以通过分离人类胰岛素基因的mRNA，逆转录为cDNA，并进行PCR扩增得到完整的胰岛素基因。

接下来，需要将胰岛素基因与适当的表达载体连接。

选择适宜的限制酶对载体进行线性化，再与胰岛素基因进行连接，利用DNA连接酶使两者连接成一个完整的质粒。

接下来，将质粒导入大肠杆菌中。

可以通过热冲击、电穿孔或者转化等方法将质粒导入大肠杆菌中，并利用选择性培养基筛选出带有胰岛素基因的转化子。

最后，通过培养大肠杆菌，提取并纯化胰岛素。

可以通过机械方法破碎细胞壁，离心去除细胞器和细胞碎片，再利用层析等技术手段纯化出胰岛素。

第二题：基因工程技术在农业领域也有广泛应用。

请设计一个基因工程实验，增加作物的抗虫能力。

解答：要增加作物的抗虫能力，可以选择合适的抗虫基因，并将其导入作物的染色体中。

首先，选择具有抗虫能力的基因，如Bt基因。

Bt基因可以通过特定的细菌株提供，或者利用PCR技术合成。

然后，将抗虫基因与选择性标记基因进行连接，并将其插入适当的表达载体中。

选择性基因可以使转基因植物在筛选培养基上产生抗性，方便筛选。

将载体导入植物体细胞中。

可以利用冷冻法、冲击法或者农杆菌介导转化法等技术将载体导入植物体细胞。

最后，通过筛选培养基培养转基因植株，并进行抗虫性测试。

可以通过饲养害虫或者喷洒虫食物进行实验观察，比较转基因植株与野生型植株之间的虫害程度。

以上是两道高二生物基因工程练习题的解答。

通过这些实验题，学生不仅可以巩固对基因工程技术原理的理解，还能够培养实验设计和实施的能力。

高中生物选修三“基因工程”综合练习(20题含答案)

高中生物选修三“基因工程”综合练习(20题含答案)高中生物选修三“基因工程”综合练习1. [选修三：现代生物科技专题]（15分，除注明外均为每空2分）请回答下列有关基因工程和胚胎工程的问题：（2）在基因表达载体中，启动子是_______________识别并结合的部位。

若采用原核生物作为基因表达载体的受体细胞，最常用的原核生物是______________。

（3）将目的基因导入微生物常用____________处理受体细胞，使之变成感受态细胞。

我国科学家发明的将目的基因导入植物细胞的方法是________________。

（4）研究还发现胚胎干细胞可以诱导分化为造血干细胞，这体现了胚胎干细胞具有__________。

临床上常用诱导干细胞定向分化的方法修补损伤或衰老的组织器官，从而解决了___________问题。

谜底：（1）PCR技术（1分）化学方法直接人工合成目的基因（2）RNA聚合酶大肠杆菌（或细菌）（3）Ca（或CaCl2）花粉管通道法（4）发育的万能性供体器官缺乏（或器官移植后免疫排斥反应）2. [选修三：当代生物科技专题]（15分，除注明外均为每空2分）荒漠齿肋赤藓具有超强耐旱能力的原因是其含有抗旱基因ScALDH21。

科研人员提出两种提高棉花抗旱能力的途径，回答下列相关问题:（1）第一条途径：利用酶从荒漠齿肋赤藓中提取目的基因，即。

科研人员将目的基因整合到Ti质粒的上，常利用法导入棉花的叶肉细胞。

最后，将含目的基因的棉花叶肉细胞培育成转基因植株。

（2）第二条途径：可通过技术获得荒漠齿肋赤藓与棉花的杂种植物。

在该方法中，荒漠齿肋赤藓细胞与棉花细胞融合前需用酶去除细胞壁，常用诱导两原生质体融合成杂种细胞的化学试剂为。

该技术利用的主要原理有。

答案：（1）限制（1分）抗旱基因ScALDH21T-DNA （或可转移DNA）农杆菌转化（2）植物体细胞杂交纤维素酶和果胶聚乙二醇（或PEG）细胞膜的流动性和细胞的全能性3. [选修三：现代生物科技专题]（15分，除注明外均为每空2分）逆转录病毒载体是目前应用较多的动物基因工程载体之一。

(人教版)高中生物必修二：6.2《基因工程及其应用》同步练习(含答案)

一、选择题1．中国新闻网报道，阿根廷科学家近日培育出了世界上第一头携带有两个人类基因的牛，因此有望生产出和人类母乳极其类似的奶制品。

下列叙述正确的是()①该技术将导致定向变异②DNA连接酶将目的基因与运载体黏性末端的碱基对连接起来③蛋白质中的氨基酸序列可为合成目的基因提供资料④受精卵是理想的受体A．①②③④B．③④C．②③④D．①③④解析：转基因导致的变异都属于定向变异。

DNA连接酶连接起来的是目的基因和运载体黏性末端的磷酸和脱氧核糖之间的磷酸二酯键，而不是碱基对之间的氢键。

由蛋白质中的氨基酸序列可逆推出相应mRNA可能的碱基序列，进而为人工合成目的基因提供资料。

动物的受精卵具有全能性，是理想的受体。

答案： D2．基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。

在基因工程操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的是()A．人工合成目的基因B．目的基因与运载体结合C．将目的基因导入受体细胞D．目的基因的检测与鉴定答案： C3．下列关于限制酶和DNA连接酶的理解，正确的是()A．其化学本质都是蛋白质B．DNA连接酶可以恢复DNA分子中的氢键C．它们不能被反复使用D．在基因工程操作中可以用DNA聚合酶代替DNA连接酶解析：限制酶与DNA连接酶的化学本质都是蛋白质，A正确；DNA连接酶连接的是两个DNA片段间相邻两个核苷酸间的磷酸二酯键，B错误；酶在化学反应前后其数量、性质、功能均不发生改变，因此可以反复利用，C错误；DNA聚合酶只能连接单个核苷酸，不能催化两个DNA片段连接，不能替代DNA连接酶，D错误。

答案： A4．人类利用基因工程的方法成功培育出转基因抗虫棉，以下说法正确的是()A．苏云金杆菌的毒蛋白基因与质粒结合后直接进入棉花的叶肉细胞表达B．抗虫基因导入棉花叶肉细胞后，可通过传粉、受精的方法，使抗虫性状遗传下去C．标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因D．种植转基因抗虫棉，棉铃虫不会产生抗性，这样可以有效消灭棉铃虫答案： C5．要将目的基因与运载体连接起来，在基因操作上应选用()A．只需DNA连接酶B．同一种限制酶和DNA连接酶C．只需限制酶D．不同的限制酶与DNA连接酶解析：要将目的基因与运载体连接起来，应选用同一种限制酶切割目的基因和运载体，两者暴露出相同的黏性末端，用DNA连接酶连接时，相邻两个脱氧核苷酸之间在DNA连接酶的作用下形成化学键。

(完整版)高中生物基因工程试题

阶段质量检测（一）基因工程（时间:45分钟，满分:100分）一、选择题（每小题3分，共45分）1.下列有关基因工程技术的叙述，正确的是（）A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和载体B.所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C.只要是细菌中的质粒都可以直接作为基因工程中的载体D.载体必须具备的条件之一是有多个限制酶切割位点，以便与外源基因进行连接2.（浙江高考）天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。

现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是（）A.提取矮牵牛蓝色花的mRNA,经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因BB.利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因BC.利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞D.将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞3.日本下村修、美国沙尔菲和钱永健因在发现绿色荧光蛋白（GFP）等研究方面做出突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。

GFP在紫外光的照射下会发出绿色荧光。

依据GFP 的特性，你认为该蛋白在生物工程中的应用价值是（）A.作为标记基因，研究基因的表达B.作为标记蛋白，研究细胞的转移C.注入肌肉细胞，繁殖发光小白鼠D.标记噬菌体外壳，示踪DNA路径4•下列有关质粒的叙述，正确的是（）A.质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器B.质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状DNAC.质粒只有在侵入宿主细胞后，才能在宿主细胞内复制D.基因工程中常用的载体除了质粒外，还有核DNA、动植物病毒以及入噬菌体的衍生物5•下列有关基因工程的叙述正确的是（）A.用同种限制性核酸内切酶切割载体与含目的基因的DNA片段可获得相同的黏性末端B.以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相同C.检测到受体细胞中含有目的基因就标志着基因工程育种已经成功D.质粒上抗生素的抗性基因有利于质粒与外源基因连接6•下列有关基因工程和蛋白质工程步骤的叙述不正确的是（）A.将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用显微注射法B.设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列C.蛋白质工程是通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新蛋白质的技术D.蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质7.利用细菌大量生产人的胰岛素，下列叙述错误的是（）A.用适当的酶对载体与人的胰岛素基因进行切割与黏合B.用适当的化学物质处理受体细菌表面，将重组DNA导入受体细菌C.通常通过检测目的基因产物来检测重组DNA是否已导入受体细菌D.重组DNA必须能在受体细菌内进行复制与转录，并合成人的胰岛素8.下列关于图中P、Q、R、S、G的描述，正确的是（）A.P代表的是质粒RNA，S代表的是外源DNAB.Q表示限制酶的作用，R表示RNA聚合酶的作用C.G是RNA与DNA形成的重组质粒D.G是转基因形成的重组质粒DNA9.下列关于目的基因的检测与鉴定的叙述，错误的是（）A.目的基因在真核细胞中能否稳定遗传的关键是目的基因是否插入质粒DNA中B.检测受体细胞是否含有目的基因及其是否成功转录的方法都是分子杂交法C.目的基因的鉴定通常是在个体水平上进行的D.如在受体细胞内检测到目的基因表达的蛋白质，可确定目的基因首端含有启动子10.科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中，在医学研究及相关疾病治疗方面都具有重要意义。

人教版高中生物必修二基因及基因工程练习题

基因及基因工程练习题一、选择题1．我国科学家在利用基因工程培育抗虫棉的过程中，经提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞这三个步骤后，在全部受体细胞中，能够摄入抗虫基因的受体细胞占A．全部B．大部分C．一半D．很少2．质粒是基因工程最常用的运载体，它的主要特点是：①能自主复制②不能自主复制③结构很小④蛋白质⑤环状RNA ⑥环状DNA ⑦能“友好”地“借居”A．①③⑤⑦B．②④⑥C．①③⑥⑦D．②③⑥⑦3．下列含有内含子的生物是A.大肠杆菌B.青霉C.放线菌D.蓝藻4．基因工程的设计施工是在什么水平上进行的A.细胞B.细胞器C.分子D.原子5．细胞内合成RNA聚合酶的场所是A.细胞核B.核区C.核糖体D.内质网6．下列属于基因运载体所必须具有的条件是①具有某些标志基因②具有环状的DNA分子③能够在宿主细胞内复制④具有多种限制性内切酶A. ①②B.③④C. ①③D. ②④7．细菌抗药性基因存在于A．核DNA B．质粒C．RNA D．小的直线型DNA 8．（多选）目前常被使用的基因载体有A．质粒 B．噬菌体C．染色体D．动、植物病毒9．某科学工作者把兔子的血红蛋白的信使RNA加入到大肠杆菌的提取液中，在这个细胞的合成系统中能合成兔子的血红蛋白，这个事实说明A．蛋白质合成是在核糖体上进行的 B．各种生物共用一套遗传密码C．兔子和大肠杆菌的基因发生了重组 D．兔子的基因发生了突变10．小麦根尖细胞基因分布在A.染色体，核糖体B.染色体，叶绿体C.染色体，线粒体D.染色体，线粒体，叶绿体11．人类基因组是指人体DNA分子所携带的全部遗传信息。

人类基因组计划就是分析测定人类基因组的核苷酸序列。

其主要内容包括绘制人类基因的遗传图、物理图、序列图和转录图。

工作艰巨可见一斑。

科学家应对多少染色体进行分析A.46条B.24条C.23条D.22条12．基因治疗是把健康的外源基因导入A.有基因缺陷的细胞中B.有基因缺陷的染色体中C.有基因缺陷的细胞器中D.有基因缺陷的DNA分子中13．下列不属于获取目的基因的方法是A.“鸟枪法”B.转录法C.反转录法D.根据已知氨基酸序列合成法14．用“鸟枪法”提取目的基因的步骤为①用限制性内切酶将供体细胞DNA切成许多片段②将许多DNA片段分别载入运载体③选取目的基因片段插入运载体④通过运载体转入不同的受体细胞⑤让供体DNA片段在受体细胞内大量繁殖⑥找出带有目的基因的细胞，并分离出目的基因A．①③④⑤⑥B．①②④⑤⑥C．①②③④⑤⑥D．①②③④⑤15．关于真核细胞基因结构的表达中，正确的是A.不同基因中外显子的碱基对在整个基因碱基对中所占比例很大B.外显子所含碱基对一般多于内含子C.内含子是不能转录，不能编码蛋白质的序列D.非编码区对基因的表达起调控作用16．有关基因工程的叙述正确的是A.限制性内切酶只在获得目的基因时才用B.重组质粒的形成在细胞内完成C.质粒都可以作为运载体D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料17．细胞核基因与细胞质基因相比，相同的是A.载体B.数目C.分离时机D.随机分离18．植物学家将胡萝卜的韧皮部细胞分离出来，将单个细胞放入特定培养基中培养，获得了许多完整的植株，这些植株的特点是A．彼此性状极为相似B．都是单倍体植株C．植株的变异频率较高D．都是纯合体植株19．控制细菌合成抗生素的基因、控制放线菌主要性状的基因、控制病毒抗原特异性的基因依次在①核区大型环状DNA ②质粒上③细胞染色体上④衣壳内核酸上A．①③④B．①②④C．②①③D．②①④20．基因工程中常作为基因的运载体的一组结构是A．质粒、线粒体、噬菌体B．染色体、叶绿体、线粒体C．质粒、噬菌体、动植物病毒D．细菌、噬菌体、动植物病毒21．科学家已能运用基因工程技术，让羊合成并分泌抗体。

高中基因工程试题及答案

高中基因工程试题及答案一、选择题1. 基因工程是指：A. 基因的自然选择B. 基因的人工选择C. 基因的人工重组D. 基因的自然重组答案：C2. 基因工程中常用的载体是：A. 质粒B. 病毒C. 染色体D. 线粒体答案：A3. 基因枪法属于哪种基因转移技术？A. 化学法B. 物理法C. 生物法D. 机械法答案：B4. 以下哪个不是基因工程的步骤？A. 目的基因的获取B. 目的基因的克隆C. 目的基因的表达D. 目的基因的自然选择答案：D5. 基因工程在医学领域的应用不包括：A. 基因治疗B. 基因检测C. 基因编辑D. 基因克隆答案：D二、填空题6. 基因工程的核心技术是________。

答案：重组DNA技术7. 基因工程中常用的受体细胞有________和________。

答案：大肠杆菌、酵母菌8. 基因工程在农业上的应用包括________和________。

答案：转基因作物、基因改良9. 基因工程在环境保护中的应用包括________和________。

答案：生物修复、污染物降解10. 基因工程在工业生产中的应用包括________和________。

答案：生物催化剂、生物制药三、简答题11. 简述基因工程的基本原理。

答案：基因工程的基本原理是利用分子生物学技术，将目的基因从一种生物体中提取出来，然后通过重组DNA技术将其插入到另一种生物体的基因组中，使其在新的宿主细胞中表达，从而获得具有特定性状的生物体或生产特定的生物产品。

12. 基因工程在医学领域有哪些应用？答案：基因工程在医学领域的应用包括基因治疗，通过将正常基因导入患者体内以治疗遗传性疾病；基因检测，用于疾病诊断和风险评估；基因编辑，通过修改基因序列来治疗疾病；以及生产生物药物，如胰岛素、干扰素等。

四、论述题13. 论述基因工程的伦理问题及其解决途径。

答案：基因工程的伦理问题主要包括对人类基因组的修改可能带来的未知风险、基因歧视、生物多样性的减少等。

高考复习：人教版高中生物选修三现代生物技术专题一《基因工程》经典例题创新应用训练含答案解析

高中生物选修三现代生物技术专题全套教学案含单元检测专题一基因工程本专题包括基因工程的发展过程；DNA重组技术的基本工具；基因工程的基本操作程序；基因工程的应用；蛋白质工程的崛起等部分。

b5E2RGbCAP基因工程是一门20世纪70年代以来新兴的生物科学与工程技术相结合的科学。

也叫DNA重组技术。

它是按照人类的意愿，将某种基因有计划地转移到另一种生物中去的新技术。

现已成为生命科学中发展最快、最前沿的学科，有关生物工程的内容，己成为近几年生物高考的热点内容。

其中基因工程的操作工具和基因工程操作的基本步骤以及基因工程的成果及应用前景将是近年命题的新热点plEanqFDPw基因工程操作的三种基本工具，四项基本操作程序等内容将成为考查学生分析综合问题能力的材料；另外，针对生物工程在医药、食品、农林等高新技术产业中的应用，运用有关的生物知识指导生产和实践，对有关的生产方案、生产过程进行分析、综合评价，这也是高考的另一热点。

有关基因工程的备考，今后高考中可能涉及到本考题的热点问题，有如下几个方面：DXDiTa9E3d1•基因工程的基本步骤：目的基因的获取、基因表达运载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因表达的检测与鉴定几个步骤。

RTCrpUDGiT2•转基因技术的应用：（1）转基因动植物，如抗虫、抗病、抗逆、抗除草剂，抗倒伏的植物；产肉、产蛋量高、生长快、耐粗饲料的动物；此外，转基因动物为人类异体器官移植提供了可能。

（2）基因药物：如人造胰岛素、人造生长激素、溶血栓的尿激酶原等。

（3）基因治疗：美国对复合型免疫缺陷症的治疗；糖尿病的治疗：许多科学家希望利用基因工程手段将正常的合成胰岛素基因导入患者体内，并准确表达，以此来修复或替代失去正常功能的胰岛B细胞，从而维持机体血糖平衡。

（4）利用遗传工程培养转基因固氮绿色植物的展望。

地球上的固氮途径有三条：生物固氮、工业固氮、高能固氮。

其中，生物固氮是植物可利用氮的主要来源。

高中基因工程题目

1、基因工程中，常用的运载体不包括以下哪一项？A、质粒B、噬菌体C、动植物病毒D、核糖体（答案：D）解析：基因工程中常用的运载体有质粒、噬菌体、动植物病毒等，它们都能携带外源基因进入受体细胞。

而核糖体是细胞内合成蛋白质的场所，不是运载体。

2、在基因工程中，为了将目的基因导入植物细胞，常采用的方法是？A、农杆菌转化法B、显微注射法C、花粉管通道法D、细胞融合法（答案：C）解析：将目的基因导入植物细胞常用花粉管通道法，特别是在植物的有性生殖过程中。

农杆菌转化法主要用于植物细胞的基因转化，但并非唯一或最常用方法；显微注射法主要用于动物细胞的基因转移；细胞融合法则更多应用于细胞杂交等领域。

3、基因工程中的“剪切”工具是指？A、限制酶B、DNA连接酶C、运载体D、目的基因（答案：A）解析：在基因工程中，限制酶能够识别特定的DNA序列，并在这些序列处切割DNA，因此被称为“基因剪刀”。

DNA连接酶用于连接DNA片段，运载体用于携带和传递目的基因，目的基因则是我们想要转移或表达的基因。

4、下列哪一项不是基因工程在农业上的应用？A、培育抗虫棉B、培育转基因大豆C、生产人类胰岛素D、改良作物品质（答案：C）解析：基因工程在农业上有着广泛的应用，如培育抗虫棉、转基因大豆、改良作物品质等。

而生产人类胰岛素是基因工程在医药领域的应用，不属于农业应用。

5、基因工程中，目的基因的检测与鉴定不包括以下哪个步骤？A、DNA分子水平上的检测B、个体生物学水平上的鉴定C、细胞水平上的检测D、蛋白质结构分析（答案：D）解析：在基因工程中，目的基因的检测与鉴定通常包括DNA分子水平上的检测（如PCR 检测）、细胞水平上的检测（如观察细胞形态变化）、个体生物学水平上的鉴定（如观察转基因生物的性状）。

而蛋白质结构分析不是基因工程中的常规检测步骤，它更多应用于蛋白质科学研究。

6、以下哪一项不是基因工程的安全性问题？A、生物武器B、转基因食品的安全性C、基因污染D、基因治疗的成本（答案：D）解析：基因工程的安全性问题包括生物武器可能带来的威胁、转基因食品的安全性争议、基因污染对生态环境的影响等。

高中生物基因工程练习题(含解析)

高中生物基因工程练习题学校:___________姓名：___________班级：___________一、单选题1．蛋白质工程中目前已成功的是( )A．对胰岛素进行改造，使其成为速效型药品B．蛋白质工程应用于微电子方面C．室温下可保存半年的干扰素D．耐储存的番茄2．下列有关限制性酶的描述，错误的是（）A．限制酶主要从原核生物中提取B．限制酶具有热稳定性C．限制酶和DNA连接酶作用的化学键相同D．一种限制酶一般只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列3．蛋白质工程的最终目的是（）A．分析蛋白质的三维结构B．研究蛋白质的氨基酸组成C．获取编码蛋白质的基因序列信息D．改造现有蛋白质或制造新的蛋白质，满足人类的需求4．下列基因工程的基本操作程序中，属于基因工程核心步骤的是（）A．基因表达载体的构建B．目的基因的检测与鉴定C．将目的基因导入受体细胞D．目的基因的筛选与获取5．葡萄糖异构酶在工业上应用广泛，科学家将其第 138 位甘氨酸替换为脯氨酸后，其最适温度提高了 10℃左右。

相关叙述正确的是（）A．蛋白质功能是由氨基酸的种类和数量决定B．改造蛋白质结构可通过改造基因结构实现C．蛋白质工程不可以定向改变蛋白质的结构D．酶最适温度提高是因为脯氨酸比甘氨酸更耐热6．基因和表达载体相连时既可以正向连接也可以反向连接。

下图甲、乙分别表示某质粒、含目的基因和酶切位点的DNA片段，构建基因表达载体时应用酶B和酶C进行切割，不应用酶A切割运载体和DNA片段，其原因不包括（）A．防止目的基因和运载体发生反向连接B．保证构建的重组质粒中含有标记基因C．防止目的基因或运载体重新自身环化D．保证构建的重组质粒中含有启动子7．关于基因工程和下图所示黏性末端的叙述，正确的是（）A．①与③是由相同的限制酶切割产生的B．DNA连接酶可催化①与③的连接C．经酶切形成④需要脱去2分子水D．基因工程中常用的工具酶有限制性核酸内切酶、DNA连接酶和运载体8．DNA琼脂糖凝胶电泳的分子筛效应是指作为支持介质的琼脂糖，具有网络结构，使大分子物质在通过时受到较大阻力，借此分离不同大小的DNA片段。

高中基因工程典型例题

关于酶切的几道题：1. (08江苏生物)将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。

以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。

请根据以上图表回答下列问题。

（1）在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是。

（2）PCR过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。

表1为根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图。

请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？__________。

（3）图1步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？。

（4）为将外源基因转入马铃薯，图1步骤⑥转基因所用的细菌B通常为。

（5）对符合设计要求的重组质粒T进行酶切，假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。

①采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切，得到_________种DNA片断。

②采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切，得到_________种DNA片断。

1.（1）耐高温2）引物对B （3）否（4）农杆菌（5）①2 ②1解析：答题需要以准确画出黏性末端序列为前提2、(08海南)图为某种质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，amp R为青霉素抗性基因，tct R为四环素抗性基因，P为启动因子，T为终止子，ori为复制原点。

已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。

（1）将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRI酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有_________________________________、_________________________________、______________________三种。

高中生物基因工程习题(解析版)

高中生物。

基因工程习题(解析版)解析】A选项正确，重组质粒构建需要限制性内切酶和DNA连接酶；B选项错误，愈伤组织分化产生的再生植株基因型可能存在差异；C选项错误，卡那霉素抗性基因中并不一定含有相关限制性内切酶的识别位点；D选项正确，转基因抗虫棉有性生殖的后代可能会失去抗虫性状。

目前科学家们已经成功通过蛋白质工程制造出了多种荧光蛋白，如蓝色荧光蛋白和黄色荧光蛋白。

制造蓝色荧光蛋白的过程包括以下步骤：①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列；②进行蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计；③修饰(合成)蓝色荧光蛋白基因；④表达出蓝色荧光蛋白。

限制酶是基因工程中的重要工具酶。

图甲所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有两个和四个游离的磷酸基团。

与只使用EcoRⅠ相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒和外源DNA的优点在于可以防止质粒和外源DNA在同一位点发生重组。

大肠杆菌是基因工程中较理想的受体细胞。

它们具有繁殖快、多为单细胞等优点。

大肠杆菌细胞最常用的转化方法是：首先用CaCl2处理细胞，使之成为“钙质体”，然后完成转化。

Ⅲ.植物基因工程中最常用的方法是农杆菌转化法，它通过将目的基因插入Ti质粒中形成重组Ti质粒，将目的基因整合到植物受体细胞的染色体上。

研究发现，这样得到的转基因植株符合XXX遗传规律，一般为杂合子。

为避免基因污染，目的基因一般需导入植物细胞的细胞质DNA中。

19.某一质粒载体具有Ampr和Tetr基因，插入外源DNA会导致相应的基因失活。

将该质粒用BamHⅠ酶切割后与目的基因混合连接后转化大肠杆菌，得到未被转化和被转化的三种细胞，分别为含环状目的基因、含质粒载体和含插入了目的基因的重组质粒的细胞。

如果用含氨苄青霉素的培养基进行筛选，未被转化和仅含环状目的基因的细胞无法区分，因为它们都不具备Ampr基因。

质粒载体作为基因工程的工具，应具备两个基本条件：有可克隆位点和可表达位点。

【名师精讲】2023高中生物精题特练 6-2 基因工程及其应用

新人教版必修2高中生物精题特练 6-2 基因工程及其应用1．质粒是基因工程最常用的运载体，它的主要特点是( )①能自主复制②不能自主复制③结构很小④蛋白质⑤环状RNA ⑥环状DNA ⑦能“友好”地“借居”A．①③⑤⑦B．②④⑥C．①③⑥⑦ D．②③⑥⑦解析：基因工程中的运载体作用是与目的基因结合，将目的基因导入受体细胞，并能在受体细胞中稳定存在，通过自身的复制扩增目的基因。

答案：C2．科学家们经过多年的努力，创立了一种新兴的生物技术——基因工程，实施该工程的最终目的是( )A．定向提取生物体的DNA分子B．定向地对DNA分子进行人工“剪切”C．在生物体外对DNA分子进行改造D．定向地改造生物的遗传性状解析：基因工程是通过对生物体的基因进行修饰改造，使之按照人们的意愿表现出人们所需要的性状，产生人类所需要的基因产物，可见基因工程的目的是要定向改造生物的遗传性状。

答案：D3．图中的四条DNA分子，黏性末端彼此间能配对的一组是( )A．①②B．②③C．③④D．②④解析：②与③黏性末端能碱基互补配对。

答案：B4．用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。

下列叙述不．正确的是( )A．常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒B．DNA连接酶和RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶C．可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒D．导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达解析：限制性内切酶和DNA连接酶是构建重组质粒必需的工具酶，而不需要RNA聚合酶。

答案：B5．下列应用中不属于基因工程的是( )A．转基因抗虫棉的成功培育B．利用工程菌生产胰岛素C．用紫外线处理青霉菌以提高青霉素的产量D．用奶牛生产人干扰素解析：用紫外线处理青霉菌是利用基因突变。

答案：C6．干扰素是一种糖蛋白，过去从人的血液中的白细胞中提取，产量很低。

我国的科研人员侯云院士等一批人，成功运用基因工程技术提高了其产量，如图为其原理过程图。

高中生物专题1 基因工程 3 基因工程的应用检测(含解析)新人教版选修3-新人教版高中选修3生物试

1.3 基因工程的应用一、选择题题型一植物基因工程的应用1．下列转基因植物与所选用的目的基因对应错误的是( )A．抗虫棉——Bt毒蛋白基因B．抗病毒转基因烟草——几丁质酶基因C．抗盐碱和抗旱植物——调节细胞渗透压的基因D．耐寒的番茄——抗冻基因答案 B解析抗病毒转基因植物常使用的是病毒外壳蛋白基因和病毒的复制酶基因，几丁质酶基因及抗毒素合成基因一般用作抗真菌转基因植物的目的基因，B错误。

2．我国转基因技术发展态势良好，下列关于转基因抗冻番茄和转基因水稻的叙述，不正确的是( )A．转基因抗冻番茄的目的基因来源于鱼B．转基因抗虫水稻减少了化学农药的使用，减轻了环境污染C．转基因抗虫水稻是否具有抗虫性，可通过饲养卷叶螟进行检测D．转基因抗虫水稻的外源基因是几丁质酶基因答案 D解析转基因抗冻番茄的目的基因来自于鱼的抗冻基因，转基因抗虫水稻的外源基因是Bt毒蛋白基因，而几丁质酶基因是抗真菌转基因植物常用的基因，A正确，D错误；转基因抗虫水稻减少了农药的使用，减轻了环境污染，同时降低了农业生产的成本，B正确；检测目的基因是否表达最简便的方法是进行个体水平的检测，故检测转基因抗虫水稻是否具有抗虫性，可通过饲养卷叶螟进行检测，C正确。

3．以下有关基因工程应用的说法正确的是( )A．用基因工程培育的抗虫植物也能抗病毒B．转基因矮牵牛只能变异为自然界已存在的颜色类型C．基因工程可用来培育高产、稳产、品质优良和抗逆性强的作物D．科学家将必需氨基酸含量多的蛋白质导入植物中，或者改变这些氨基酸的合成途径中某种关键酶的活性，以提高氨基酸的含量答案 C解析基因工程培育的抗虫棉只能抗某种虫害，不能抗病毒，A错误；转基因矮牵牛通过转入与花青素代谢有关的目的基因，可以使其呈现出自然界没有的颜色变异，B错误；想要提高植物的氨基酸含量，应将必需氨基酸含量多的蛋白质编码基因导入植物中，D错误。

题型二动物基因工程的应用4．下列有关乳腺生物反应器的说法中，不正确的是( )A．利用转基因哺乳动物乳腺的分泌功能生产产品B．构建的基因表达载体应该含有乳腺蛋白基因的启动子C．分泌的乳汁中含有目的基因D．乳腺生物反应器是将目的基因转入哺乳动物受精卵获得的答案 C解析利用转基因哺乳动物乳腺的分泌功能生产产品，获得高产量的外源蛋白质，A正确；表达载体含有乳腺蛋白基因的启动子才能保证目的基因只在乳腺细胞中表达，B正确；分泌的乳汁中含有目的基因控制合成的蛋白质，但不会含有目的基因，C错误；乳腺生物反应器是通过基因工程技术，将目的基因转入哺乳动物受精卵获得的，D正确。

高中生物基因试题及答案

高中生物基因试题及答案一、选择题（每题2分，共40分）1. 下列关于基因的描述，错误的是（）A. 基因是DNA分子上具有遗传效应的片段B. 基因控制生物体的性状C. 基因是遗传物质的基本单位D. 基因是蛋白质分子2. 基因突变是指（）A. 基因数量的增加或减少B. 基因结构的改变C. 基因在染色体上的位置发生改变D. 染色体数量的增加或减少3. 基因型为Aa的个体自交，后代基因型及比例为（）A. AA:Aa:aa = 1:2:1B. AA:Aa:aa = 1:1:1C. AA:Aa:aa = 3:1:3D. AA:Aa:aa = 1:1:24. 下列关于染色体的描述，正确的是（）A. 染色体是细胞核内的蛋白质B. 染色体是细胞核内的线状结构C. 染色体是细胞质内的线状结构D. 染色体是细胞核内的颗粒状结构5. 人类遗传病中，色盲属于（）A. 单基因遗传病B. 多基因遗传病C. 染色体异常遗传病D. 线粒体遗传病6. 基因工程中，常用的运载体是（）A. 质粒B. 病毒C. 细菌D. 酵母菌7. 基因表达包括（）A. 转录和翻译B. 复制和转录C. 翻译和复制D. 转录和复制8. 基因治疗是利用（）A. 基因突变B. 基因重组C. 基因表达D. 基因沉默9. 基因诊断的基本原理是（）A. 利用基因突变B. 利用基因重组C. 利用基因表达D. 利用基因沉默10. 人类基因组计划的目的是（）A. 确定人类基因组的全部基因序列B. 确定人类基因组的全部蛋白质序列C. 确定人类基因组的全部代谢途径D. 确定人类基因组的全部细胞类型二、填空题（每空1分，共20分）1. 基因是DNA分子上的一段特定______，它能够决定生物体的某一性状。

2. 基因型为Aa的个体自交，后代中AA、Aa、aa的比例为______。

3. 染色体是细胞核内由______和蛋白质组成的线状结构。

4. 人类遗传病中的色盲属于______遗传病。

新教材高中生物第3章基因工程第3节基因工程的应用课后提能集训新人教版选择性必修3

第3章第3节[基础达标]题组一基因工程在农业方面的应用1．下列哪项不是植物基因工程技术的主要应用( )A．提高农作物的抗逆性B．生产某些天然药物C．改良农作物的品质D．作器官移植的供体【答案】D【解析】D为动物基因工程技术的重要应用。

2．番茄营养丰富，是人们喜爱的蔬菜之一。

普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐储存。

科学家通过基因工程将一种抗多聚半乳糖醛酸酶的基因导入番茄细胞，获得了抗软化番茄。

下列关于培育抗软化番茄的叙述，错误的是( )A．质粒可作为载体B．受体细胞是番茄细胞C．目的基因为多聚半乳糖醛酸酶基因D．目的基因的表达延缓了细胞的软化【答案】C【解析】培育抗软化番茄时可以用质粒作为载体，目的基因是抗多聚半乳糖醛酸酶基因，受体细胞是番茄细胞，A、B正确，C错误；目的基因的表达可以延缓细胞的软化，D正确。

3．科学家在河南华溪蟹中找到了金属硫蛋白基因，并以质粒为载体，采用转基因方法培育出了硫吸收能力极强的转基因烟草。

下列有关该烟草培育的说法正确的是( ) A．金属硫蛋白基因需插入到质粒上，才能转移到受体细胞中B．需用特定的限制酶切割烟草的核酸C．同种限制酶既可以切割含目的基因的DNA片段，又可以切割质粒，因此不具有专一性D．转基因烟草与原烟草相比基因组成发生了变化，导致两者出现生殖隔离【答案】A【解析】金属硫蛋白基因需插入到质粒上，才能转移到受体细胞中，A正确；在基因工程中，需用特定的限制酶切割目的基因和运载体，而不是切割烟草的核酸，B错误；限制酶具有专一性，能识别特定的脱氧核苷酸序列，C错误；转基因烟草与原烟草之间一般不会出现生殖隔离，D错误。

题组二基因工程在畜牧业方面的应用4．利用基因工程技术将生长激素基因导入绵羊体内，转基因绵羊生长速率比一般的绵羊提高30%，体型大50%。

在基因工程操作过程中，生长激素基因的受体细胞最好采用( ) A．乳腺细胞B．体细胞C．受精卵D．精细胞【答案】C【解析】动物体细胞的全能性受到限制，而受精卵具有发育的全能性，且受精卵体积较大，容易操作，也能保证发育成的个体的所有细胞都含有生长激素基因，C正确。

专题1 基因工程专题试卷及答案解析

专题1 基因工程一、选择题1．科学家们经过多年的努力，创立了一种新兴生物技术——基因工程，实施该工程的最终目的是()A．定向提取生物体的DNA分子B．定向地对DNA分子进行人工“剪切”C．在生物体外对DNA分子进行改造D．定向地改造生物的遗传性状2．关于基因工程的叙述，正确的是()A．基因工程是指非同源染色体上非等位基因重组B．基因工程是指同源染色体上等位基因重组C．基因工程是指一种生物的基因转接到另一种生物的DNA分子上D．基因工程是指同种生物的基因转接到同种生物的其他个体DNA上3．“分子手术刀”在切割DNA时，切开的结构是()A．氢键 B. 共价键C．二硫键D．磷酸二酯键4．下列关于限制性核酸内切酶的说法，正确的是()A．限制性核酸内切酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键B．一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列C．不同的限制性核酸内切酶切割DNA后都会形成黏性末端D．限制性核酸内切酶广泛存在于各种生物中，微生物中很少分布5．作为基因的运输工具——载体，必须具备的条件之一及理由是()A．具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达B．具有标记基因，以便为检测目的基因的表达提供条件C．能够在宿主细胞中复制并稳定保存，以便于进行筛选D．能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因6．属于“分子缝合针”的是()①E•coli DNA连接酶②T4 DNA连接酶③DNA聚合酶④解旋酶⑤RNA聚合酶A．①②③B．①②C．①②⑤D．②④7．下列说法正确的是()A．DNA连接酶最初是从人体细胞中发现的B．限制酶的切口一定是GAA TTC碱基序列C．质粒是基因工程中惟一用作运载目的基因的载体D．利用载体在宿主细胞内对目的基因进行大量复制的过程可称为“克隆”8．正确表示基因操作“四步曲”的是()A．提取目的基因→将目的基因导入受体细胞→目的基因与载体结合→目的基因的检测和表达B．目的基因的检测和表达→提取目的基因→目的基因与载体结合→将目的基因导入受体细胞C．提取目的基因→目的基因与载体结合→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和表达D．目的基因与载体结合→提取目的基因→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和表达9．基因工程中科学家常采用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞，主要原因是() A．结构简单、操作方便B．繁殖速度快C．遗传物质含量少D．性状稳定、变异少10．1993年，我国科学工作者培育成的抗棉铃虫的转基因抗虫棉，其抗虫基因来源于()A．普通棉的突变基因B．棉铃虫变异形成的致死基因C．寄生在棉铃虫体内的线虫基因D．苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因11．右下图表示限制酶切割某DNA的过程，从图中可知，该限制酶能识别的碱基序列及切点是()A．CTTAAG，切点在T和C之间B．GAATTC，切点在G和A之间C．GAATTC，切点在A和G之间D．CTTAAC，切点在T和C之间12．用DNA 探针检测饮用水中病毒的具体方法是( )A ．与被检测病毒的DNA 碱基序列进行比较B ．与被检测病毒的DNA 碱基序列进行杂交C ．与被检测病毒的DNA 碱基序列进行组合D ．A 、B 、C 三种方法均可13．基因治疗是指( )A ．运用基因工程技术，把有缺陷的基因切除，达到治疗疾病的目的B ．运用人工诱变的方法，使有基因缺陷的细胞发生基因突变恢复正常C ．把健康的外源基因导入到有基因缺陷的细胞中，达到治疗疾病的目的D ．对有基因缺陷的细胞进行修复，从而使其恢复正常，达到治疗疾病的目的14．下列关于基因工程成果的概述，错误的是( )A ．在医药卫生方面，主要用于诊断治疗疾病B ．在环境保护方面主要用于环境检测和对污染环境的净化C ．在畜牧业上主要通过克隆培育出体型巨大，品质优良的动物D ．在农业上主要是培育高产、稳产、品质优良和具有抗性的农作物15．切取牛的生长激素和人的生长激素基因，构建表达载体后，用显微注射技术将含有目的基因的表达载体分别注入小鼠的受精卵中，从而获得了“超级鼠”，此项技术遵循的原理是( )A ．基因突变：DNA →RNA →蛋白质B ．基因工程：DNA →RNA →蛋白质C ．细胞工程：DNA →RNA →蛋白质D ．胚胎工程：DNA →RNA →蛋白质二、非选择题16．限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是 —G ↓GATCC —，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是 —↓GATC —。

高中生物(新人教版)选择性必修三课后习题：基因工程的应用(课后习题)【含答案及解析】

基因工程的应用必备知识基础练1.科学家已能运用基因工程技术,让羊的乳腺合成并分泌人体的某些抗体,以下叙述不正确的是()A.该技术可导致定向变异B.表达载体中需要加入乳腺蛋白基因的特异性启动子C.目的基因是抗原合成基因D.受精卵是理想的受体细胞,将目的基因导入受体细胞,可以定向改变生物性状,A项正确;运用基因工程技术,让羊的乳腺生产抗体,则表达载体中目的基因上游要加入羊乳腺蛋白基因的启动子,B项正确;目的基因是人体内控制某些抗体合成的基因,C项错误;受精卵常作为动物基因工程的受体细胞,D项正确。

2.下列关于培育转基因抗虫棉的叙述,正确的是()A.DNA连接酶能把Bt抗虫蛋白基因与噬菌体相连接B.Bt抗虫蛋白基因可借助花粉管通道进入受体细胞C.Bt 抗虫蛋白对害虫和人都有不同程度的毒害作用D.需制备好相应抗原来检测 Bt 抗虫蛋白,可用DNA连接酶将编码Bt 抗虫蛋白的基因与农杆菌的Ti 质粒相连接,构建基因表达载体,A项错误;在植物细胞基因工程中,可利用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞,也可以利用花粉管通道法将目的基因导入受精卵中,B项正确;Bt 抗虫蛋白对哺乳动物无毒害作用,C项错误;要检测目的基因是否成功翻译,可用抗原—抗体杂交技术进行检测,目的基因翻译的蛋白质作为抗原,故需制备好相应抗体来检测Bt 抗虫蛋白,D项错误。

3.将某病毒的外壳蛋白(L1)基因与绿色荧光蛋白(GFP)基因连接,构建L1-GFP融合基因,再将融合基因与质粒连接构建下图所示表达载体。

图中限制酶E1~E4处理产生的黏性末端均不相同。

下列叙述错误的是()A.构建L1-GFP融合基因需要用到限制酶有E1、E2、E4B.E1、E4双酶切确保L1-GFP融合基因与载体的正确连接C.若受体细胞中观察到了绿色荧光,说明L1基因已经表达D.培育乳汁中含L1的转基因羊需将表达载体转入乳腺细胞L1-GFP融合基因需要先用限制酶处理获得L1基因和GFP基因,并将二者连接,故需要用到E1、E2、E4三种酶,A项正确;根据题意,限制酶E1~E4处理产生的黏性末端均不相同,E1、E4双酶切可以有效减少载体自身连接和融合基因自身连接,保证L1-GFP融合基因与载体准确连接,B项正确;GFP基因可以认为是标记基因,表达出的绿色荧光蛋白(GFP)在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光,利用这一特性可用于检测细胞中目的基因是否表达,C项正确;为了获得L1蛋白,可将表达载体转入受精卵中而不是乳腺细胞中,用于培育乳汁中含有L1蛋白的转基因羊,D项错误。