卵内精子输入法
卵细胞浆内单精子注射——治疗男性不育的法宝
形 态 和 活力 正 常 的精 子 直 接 注 射 到 Ｉ Ｓ 受 精 结 果 不 受 精 子 浓 度 、 子 Ｃ Ｉ 精
成 熟 的 卵 细 胞 浆 内 ，只 需 一 个 精 子 活 动 度 和 精 子 形 态 的 影 响 ，是 严 重 即 可 使 卵 细 胞 受 精 ，它 是 治 疗 严 重 男 性 因 素 不 育 患 者 的 最 有 效 的 治 疗
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最新：卵胞质内单精子注射(ICSI)技术中国专家共识(2023年)
最新：卵胞质内单精子注射(ICS1)技术中国专家共识(2023年)摘要人类卵胞质内单精子注射(intracytop1asmicsperminjection,ICSI)技术开展至今已有30余年。
其最初主要应用于针对严重少、弱、畸形精子症导致的男性不育患者的治疗，但随着未成熟卵体外培养、卵子冷冻、胚胎植入前遗传学检测等辅助生殖技术的开展，ICSI使用比例已大幅提升。
虽然目前ICSI技术相对成熟，但仍有很多细节值得关注和完善。
为规范与优化人类辅助生殖技术从业者的ICS1操作，由中国医师协会生殖医学专业委员会发起，并联合全国多家生殖医学中心共同编撰了本共识。
20世纪90年代首例卵胞质内单精子注射(intracytop1asmicsperminjection,ICSI)婴儿的诞生［1］,标志着对男性不育的治疗取得了突破性进展。
如今该技术已常规应用于全球各生殖中心，并且随着未成熟卵体外成熟培养(invitromaturation,IVM),卵子冷冻、胚胎植入前遗传学检测(preimp1antationgenetictesting,PGT)等辅助生殖技术(assistedreproductivetechno1ogy,ART)的广泛开展，ICSI的使用比例也大幅增加［2］。
因此，能够熟练、高效、安全地进行ICS1操作是每一个胚胎学家应具备的基本技能。
虽然ICSI技术比较成熟，基本流程也具有较高的标准化，但仍有部分细节值得关注或有待完善。
本共识将从ICSI的适应证、正常及常见异常形态卵子、卵子的显微注射、受精观察、ICS1特殊情况的应对及其他细节、ICS1技术的质控及培训等几个方面进行阐述并提出相应推荐意见，旨在为人类ART实验室从业者提供实用性参考，从而为广大不孕患者提供更高质量的服务。
-.ICSI的适应证虽然ICSI技术成功解决了一些严重男性因素导致的不孕问题，但在部分非男性因素不孕的治疗方面，其有效性和安全性仍不明确［3-4］o因此，ICS1技术的使用需更加谨慎。
卵胞质内单精子注射(ICSI)技术中国专家共识(2023年)版解读PPT课件
通过不断更新和完善共识内容，推动生殖医 学领域的技术创新和进步，为不孕不育患者 提供更多有效的治疗方案。
03
ICSI技术操作规范及要点
卵母细胞准备与评估
卵母细胞来源
自然周期或控制性超排卵周期获取的卵母细胞均可用于ICSI。
卵母细胞成熟度评估
通过形态学观察和/或卵丘细胞扩散程度等方法评估卵母细胞成熟 度。
。
04
ICSI技术应用范围与策略
不孕不育患者应用策略
男性因素
对于严重少弱精子症、梗阻性无精子症等男性因素导致的 不孕不育，ICSI技术可显著提高受精率和妊娠率。
女性因素
对于排卵障碍、子宫内膜异位症等女性因素导致的不孕不 育，ICSI技术可结合辅助生殖技术，提高受孕成功率。
不明原因不孕
对于不明原因的不孕不育夫妇，ICSI技术可作为一线治疗方 案，提高受孕机会。
前景
随着生殖医学的快速发展和人们对生育需求的不断增加，ICSI技术在中国有着广阔的应用前景。未来，通过加强 技术创新和人才培养，有望进一步提高ICSI技术的成功率和安全性。
02
共识制定背景与过程
共识制定背景
01 02
不孕不育问题日益突出
随着环境污染、生活压力等因素的影响，不孕不育问题在全球范围内呈 上升趋势，卵胞质内单精子注射（ICSI）技术作为一种重要的辅助生殖 技术，受到广泛关注。
有关。
预防措施建议
提高显微操作技术水平
熟练掌握ICSI技术，选择适当大小的注射针头和合适的操作方法 ，以减少卵母细胞损伤。
控制精子数量
在注射前对精子进行严格筛选，确保注射的精子数量适中，避免多 精受精的发生。
优化培养环境
改善胚胎培养条件，如调整培养基成分、温度和湿度等，以促进胚 胎发育。
卵细胞浆内单精子注射-适应症,实验室工作,影响icsi治疗的因素,icsi治疗的安全性-PPT课件
(一)ICSI治疗的适应证
由于只需找到数条精子即可进行ICSI操作，因此，ICSI广泛用于严重 男性因素不育患者的治疗。目前还没有统一而明确的ICSI治疗标准， 各实验室之间掌握的指征差异较大，而且由于患者精液常规参数的波 动，常常对增加或取消ICSI治疗带来不同意见。多数情况下，ICSI治 疗按照以下指标进行：
卵细胞浆内单精子注射
民权县中医院不孕科
概述
在所有不育夫妇中，男性因素引起的不育大约占 30% ，还有 20% ～ 30%是夫妇双方因素共同导致，因此男性因素是造成不育的重要原因 之一。由于男方精子数量不够，或活动力不足，或畸形率升高、功能 异常，致使精卵结合障碍，男性不育的治疗非常棘手。1978 年首例 IVF-ET成功为男性不育的治疗翻开了新的篇章。但在对少、弱精子症 患者实施体外受精时，即使采取一些辅助措施，其受精率也往往难以 令人满意。
(二)ICSI操作方法
1.ICSI操作系统的建立：ICSI操作系统通常由五部分组成：倒置显微 镜、显微操纵仪、显微操作工具、体视显微镜和环境控制设备。 (1) 操作环境：操作地点应保持恒定的外部环境条件，避免发生大 的波动。环境温度为25℃、湿度30%～40%、洁净度为100～1000。 (2) 倒置显微镜：倒置显微镜应具有足够的放大倍率和分辨率，以 便清楚地观察操作中的每个细节。通常选用10 ×、20×、40×物镜， 可使用相差、微分干涉或Hoffman调制相差装置增强分辨效率。其中 Hoffman调制相差装置在ICSI操作中使用最为普遍，因为它可以很方 便地使用一次性塑料器皿进行操作。
(二)ICSI操作方法
(3)显微操纵仪：根据工作方式的不同，显微操纵仪有以下数种：机 械式、电动式、机械+液压式、电动+液压式、机械+电动式、气压式 等。现在使用最多的为 Narishige 的电动 ( 粗调 )+ 液压式 ( 细调 ) 和 Eppendorf的电动(粗调、细调)式显微操纵仪。 (4)体视显微镜：应装备一台放大倍率为10～100的体视显微镜用于 卵子、胚胎的转移和显微操作之前的预处理。体视显微镜的安装位置 应靠近显微操作装置，以避免过远距离的移动。
单精子卵胞浆内注射操作常规
单精子卵胞浆内注射(ICSI)操作常规显微操作糸统显微操作系统是由NIKON-TE2000倒置显微镜、NARISHIGE显微操作系统、Eppendorf液压显微注射臂和NARISHIGE气压持卵臂组成。
显微操作系统配备恒温台，其设置温度应使ICSI注射器中的液滴保持37℃。
显微注射针和持卵针内的压力由操作器控制，显微注射臂连接的管中充满矿物油．使整个管路中不含空气，持卵臂连接的管中为空气。
显微注射针ICSI显微注射针对于成功的ICSI是非常重要的，采用的是Origio公司生产的Humagen ICSI针和Holding针。
精子处理1. 将Isolate“upper”和“lower”和sperm washing medium平衡至室温。
2. 制备梯度：在离心管中各加入1.5 ml -2.0 ml“upper”和“lower”，“upper”在上，“lower”在下，注意加样时动作轻柔，避免产生气泡及将二者充分混匀，两者之间应形成明显的界面。
在制好的密度梯度上加1.5 ml -2.0 ml的液化的精液。
3. 离心300g×15min。
4. 弃上清液，用吸管将离心管底层的白色沉淀转移至另一支含2 ml -3 ml sperm washing medium的离心管中，转移沉淀时应避免过多地将洗液吸上来，同时还要保证能尽量多地吸取沉淀。
5. 离心200g×10min。
6. 弃上清液，留沉淀0.3ml-0.5 ml备用，同时取样镜检。
卵细胞准备，颗粒细胞（放射冠）去除（拆蛋）：1. 选用透明质酸酶和PVP均为商品化试剂，提前预温，透明质酸酶需在使用前1小时放置于二氧化碳培养箱中平衡。
2. 拉制口径200～300μm毛细管数根。
准备两个3037皿，分别标上ICSI前和ICSI后以及患者姓名和日期。
两个3037皿中间均加入1ml G1并覆盖矿物油，移入培养箱备用。
3. 在已预热的4孔板1、2和3号孔、中间孔中加入G-MOPS液各1ml。
卵胞质内单精子注射(ICSI)技术中国专家共识(2023年)版解读 PPT课件
解读
汇报人：xxx 2023-12-12
目录
• ICSI技术背景与现状 • 共识制定过程与原则 • ICSI技术适应症与禁忌症 • ICSI技术操作流程与要点 • ICSI技术应用中的安全性与有效性评价 • ICSI技术未来发展趋势与展望 • 共识推广与实施建议
• 挑战与机遇：中国ICSI技术发展面临诸多挑战，如技术普及程度不均衡、患者 认知度不足以及伦理道德争议等。然而，随着社会经济的发展和人民生活水平 的提高，ICSI技术在中国的需求将持续增长，为行业发展带来广阔的市场前景 。
02
共识制定过程与原则
共识制定背景
1 2
不孕不育问题突出
随着环境污染、生活压力等因素的影响，不孕不 育问题日益突出，ICSI技术成为解决男性因素导 致不孕的重要手段。
移植后护理
移植后需对女性进行护理，包 括休息、饮食、药物使用等方
面的指导。
05
ICSI技术应用中的安全性与有效 性评价
ICSI技术应用中安全性评价
遗传安全性
ICSI技术不增加子代遗传 风险，与自然受孕相比， 子代遗传疾病发生率无显 著差异。
操作安全性
ICSI操作过程中，显微操 作技术对卵子和胚胎的损 伤较小，不增加胚胎发育 异常的风险。
卵母细胞准备
从女性体内获取卵母细胞，并 在体外培养至成熟。
显微操作器械准备
准备显微操作针、持卵针、注 射针等器械，并进行质量检查
。
操作环境准备
确保操作室干净、整洁，保持 适宜的温度和湿度。
ICSI技术操作步骤
卵母细胞固定
将卵母细胞固定在显微 操作台上，保持其稳定
卵胞浆内单精子注射在受精基础研究中的应用
卵胞浆内单精子注射在受精基础研究中的应用
陈秋菊;朱伟杰
【期刊名称】《中国优生与遗传杂志》
【年(卷),期】2003(11)3
【摘要】卵胞浆内单精子注射 (ICSI)近十年来广泛应用于人类辅助生育。
作为一种旁路受精方式 ,精子绕过了自然受精的多个环节 ,如精子与卵透明带的结合、顶体反应以及精子与卵胞膜融合等 ,丰富了经典的受精理论 ,也为研究受精机制提供了一个有效的实验模型。
本文概述了ICSI受精后的精子变化、顶体反应、活化卵细胞的分子机制、不同发育阶段精子及生精细胞受精潜力等方面的进展。
【总页数】3页(P122-124)
【关键词】卵胞浆内单精子注射;受精
【作者】陈秋菊;朱伟杰
【作者单位】暨南大学生殖免疫研究中心
【正文语种】中文
【中图分类】R321.33
【相关文献】
1.早期补救性卵胞浆内单精子显微注射在可疑受精障碍患者中的应用 [J], 王琰;王志强;柴三明;倪亚莉;安锦霞;冯帆
2.卵胞浆内单精子注射在常规体外受精失败病例中的应用 [J], 史哲;黄敏珍;陈创奇
3.早期补救及后续卵胞浆内单精子显微注射在常规体外受精受精失败及低受精率周
期的应用 [J], 赵志明;曹金凤;杜元杰;崔娜;郝桂敏;徐素欣
4.卵胞浆内单精子注射在前次常规体外受精失败病例中的应用价值 [J], 李脉;靳镭
5.早期补救卵胞浆内单精子注射在常规体外受精不受精或低受精周期中的应用 [J], 殷慧群;姜宏;何瑞冰;汪存利
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卵胞浆内单精子注射（ICSI）简介
卵胞浆内单精子注射（ICSI）简介ICSI是一项技术，可以帮助接受IVF的夫妻增强所取卵的受精能力。
它于1992年推出，现在已成为世界上大多数成熟的IVF中心的常规程序。
使用这种技术已经诞生了全世界成千上万的孩子。
如果需要ICSI，我们的工作人员将为您提供咨询，并在进行下一步操作之前共同做出决定。
以下信息对希望了解有关ICSI的夫妇很有帮助。
什么是ICSI？ICSI是一种侵入性程序，其中选择单个精子，然后直接穿过卵壳（透明带）和卵菌膜（卵的外膜）注入卵中以增强受精能力。
ICSI的好处是什么？ICSI有助于精子数量少或精子活动性和形态（即睾丸精子）差的患者受精。
还建议对蛋壳有缺陷的患者使用，以防止精子进入卵子。
或那些有常规试管婴儿受精失败的病史。
如果没有受精，则意味着精子无法独自完成受精。
ICSI或IVF的妊娠结局是否有所不同？ICSI后的妊娠结局与IVF相似。
研究表明，ICSI孕妇的流产，死产或产前死亡率没有更大的提高。
使用此程序受孕的儿童是否有异常风险？研究表明，IVF和ICSI所生的孩子之间没有重大区别。
正常妊娠也可能发生胎儿异常的风险很小。
还可能存在与程序本身无关的其他风险；例如精子携带染色体异常和遗传缺陷的传播。
为什么需要ICSI？受精失败可能是由于卵子，精子或两者兼而有之。
在很大程度上，ICSI有助于克服此问题。
在以下情况下，ICSI可能对您有帮助：（a）精子数量极少（b）精子活力极低（c）从睾丸或附睾中手术切除的精子，它们不能穿透卵壳并受精（d）由于受精不良或没有受精而导致先前的失败周期（e）取到的卵子很少所有的卵子都可以做ICSI吗？可以对所有卵子进行ICSI。
但是，如果您取到大量卵子，则可以将卵子分为两组。
如果您有无法解释的生育状况，在与您和您的伴侣讨论后，可以分别进行常规IVF和ICSI。
经过ICSI的胚胎在胚胎移植过程中有什么区别吗？胚胎移植过程或胚胎移植没有任何区别，无论您的胚胎是否通过了ICSI或IVF。
经皮附睾穿刺取精术结合单精子卵细胞质内显微注射技术
经皮附睾穿刺取精术结合单精子卵细胞质内显微注射技术背景1985年丹麦C. Y. G. Nordling首次报告了通过经皮附睾穿刺（PESA）技术成功取出精子的情况，这一发现为不育症患者提供了新的治疗方式。
而1992年，Schlegel和Li在经皮睾丸穿刺（TESE）的基础上发明了一种新的技术，经皮附睾穿刺（PESA）技术，成功地把这种普遍用于精液常规检查中的方法开发成为一个新的治疗方案。
在此基础上，单精子卵细胞质内显微注射（ICSI）技术便顺理成章地产生了。
PESA技术PESA技术指的是通过经皮穿刺睾丸或附睾，使用注射器抽出精液，针对一些因为输精管堵塞或其他原因无法正常射精的男性进行治疗。
该技术具有无创伤性、轮廓美观且更加安全的优势，常被用于一些不育症的治疗中。
PESA技术成功地抽出的精子可以很方便的用于辅助生育技术如单精子注射（ICSI）等。
ICSI技术传统的人工授精仅利用精子与卵子在体外的自然结合，但因为许多原因，某些男性患者的精子数量、活力或形态可能不合格，这些情况都不能用传统的人工授精方式实现受孕。
ICSI技术是目前应用最广泛的辅助生殖技术之一，ICSI技术相对于人工授精技术而言，其前期的操作难度相对较大，所以也有人们把它看做是一项“精密手术”。
ICSI技术操作过程中需要使用显微操作系统，医生使用非常精密的显微针将一只精子注入到卵子内，并在注入后使其结合。
结合成功后，置入孵化器中，待24-48小时孵化后，获得有发育潜力的胚胎，胚胎以后可以用于移植等下一步操作。
PESA/ICSI技术的应用PESA技术和ICSI技术的结合，在某些不孕症案例中得到了良好的结果。
该技术可以用于几乎所有精子无法正常射出的男性，如睾丸和附睾切除、先天性纯粹性无精子症、宫颈粘液抗体阳性。
单精子ICSI技术现在是不孕症治疗的热门选择之一。
PESA/ICSI技术的风险由于PESA/ICSI技术涉及到大量的操作，操作结束后可能会出现一些副作用和风险。
卵泡内精子显微注射治疗弱精子症
卵泡内精子显微注射治疗弱精子症中华泌尿外科杂志CHINESE JOURNAL OF UROLOGY1999年第2期434001湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科黄强韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科章咏裳弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。
Palermo 等［1］首先报道的卵泡内精子显微注射（ICSI），是一种新发展起来的辅助授精技术，方法是将获得的精子直接注入卵泡内完成受精［1-3］。
本技术精子无需发生顶体反应，明显提高了弱精子症的受精率和妊娠率，故可用于常规体外授精治疗后仍无正常受精或受精率低于5%、活力精子数目在5×105/ml以下，近端精路梗阻者［3］。
李蓉等［4］采用ICSI授精技术治疗严重男性不育患者也获得成功。
一、促卵巢排卵从治疗前一个月经周期的黄体期开始，每天经皮下注射1mg 醋酸利普安使垂体处于脱敏状态。
在月经的第1天开始卵巢被药物刺激，以促进卵泡发育，此时血清雌二醇水平低于0.22nmol/L，经阴道的超声波检查无卵泡生长，卵巢呈静止状态。
在卵巢药物刺激的第1、2天，每天给予150IU的人绝经期促性腺激素（HMG）和150IU纯化的卵泡刺激素（FSH），在卵巢药物刺激的第3、4、5天，每天只给予150IU的HMG。
从卵巢刺激的第6天开始，根据人体血清雌二醇水平和经阴道超声波检查图像决定HMG的注射量。
当血清雌二醇≥2.94nmol/L，B超检查有两个或更多的直径在1.9cm以上的卵泡时,给予10 000IU HCG促使排卵。
在HCG 注射后，停止给予醋酸利普安和HMG［3］。
二、取卵及分离(一)卵子的收集［5］1.通过腹腔镜穿刺卵泡取卵。
用腹腔镜检查卵巢状况后，插入特制的双腔针穿刺卵泡，以负压小于14kPa，吸出卵细胞及卵泡液，并即刻在显微镜下检查以确定吸出完整的卵子。
必要时可进行第二次抽吸，抽吸出的卵子转移至培养液中。
2.B超引导下穿刺取卵。
其途径有经腹部和经阴道二种。
育儿知识-卵胞浆内单精子注射 男性不育好疗法
卵胞浆内单精子注射男性不育好疗法'卵胞浆内单精子注射（ICSI）是治疗男性不育症最常见的方法，它涉及到单个精子直接注入到一个卵子内，是近年来在辅助生殖技术中最重要的进步之一。
ICSI被认为是治疗男性不孕不育问题的一个突破。
年轻的夫妇更有可能通过ICSI得到较好的结果，卵子质量太差或者高龄产妇等因素都可能会导致成功率降低。
你的卵巢通常一个月只释放一个成熟的卵子，所以医生会开一些生育药物，你在月经周期开始的时候服用，以刺激卵巢多产生几个成熟的卵子。
一旦你的卵子成熟了，医生会做一个超声波找到它们，并且对你使用一种麻醉剂，医生可能会通过使用细的空心针来收集卵子。
大约在同一时间，你的伴侣会给医生提供精液样本。
如果在精液样本中没有足够的精子，他将会被给予麻醉剂，并会经历一个被称为经皮附睾精子抽吸术的过程。
医生会用针从他的睾丸中取出精子，如果这一过程没有收集到足够多的精子，那么医生将会对男性的睾丸组织进行活检，从而抽取到足量的精子。
一旦你的卵子和你伴侣的精子被收集好了，一个单一的卵子将被保存在一个专门的吸管（微观的滴管）内，你的医生会轻轻地拿起并用一个非常细小尖锐的空心针固定住单一的精子。
针将会被小心翼翼地插入卵子的壳内，单精子会在针被小心地取出之前被插入。
这个过程将在任何其他成熟的卵子上面重复操作。
每个微小的受精需要不到10分钟的时间，并且不以任何方式损害卵子或精子。
两天后，你的医生会检查你的卵子看它们是否已经受精过。
如果已经被受精过，那么两个或三个受精卵现在就会被称为胚胎，将会使用细导管通过你的子宫颈转移到你的子宫内。
卵胞浆内单精子注射如果成功，胚胎将会植入在你的子宫壁里面，并长成一个婴儿。
大约三分之一的ICSI怀孕是多胎妊娠。
ICSI的最大的益处是，它让男性不育的夫妻有了生育的机会，它也消除了受精问题发生的几率，因为医生在你的身体外面进行仔细监控。
此外，最近研究显示，生育药物不增加患卵巢癌的机会，甚至服药一年多也不会增加患病概率。
卵细胞浆内单精子注射(ICSI)技术与出生子代概况
卵细胞浆内单精子注射（ICSI）技术与出生子代概况作者：曾艳来源：《养生保健指南》2015年第09期【摘要】卵细胞浆内单精子注射（ICSI）是辅助生殖技术的一个重要方面，主要用于治疗男性不育，包括严重少、弱畸精症，输精管阻塞，先天性双侧输精管缺如等，其在世界各国的运用越来越广泛。
与此同时，ICSI在技术上、生理学上、遗传学上的所带来的子代风险也应该受到关注。
现就该领域的现状及子代风险情况等进行综述.【关键词】辅助生殖技术；卵细胞浆内单精子注射；子代概况1978年世界上诞生第一例“试管婴儿”，使体外受精（IVF）构成了辅助生殖技术（ART）的主体，由此揭开了人类生殖工程研究的序幕并逐步取得突破性进展。
IVF技术现在已经是世界上广泛运用的经典辅助生殖技术。
然而，胚胎在体外发育的过程中会受到诸多因素的影响，这就需要实验室技术的不断改进和临床实际运用中的优化来增强辅助生殖技术操作的成功率。
1992年Palermo等在显微镜下将单个精子直接注射到卵细胞胞浆内，并获得世界上首例卵细胞浆内单精子注射（ICSI）婴儿[1]。
ICSI在治疗男性不育症方面是一项突破，一些发达国家该技术的使用近年来占ART操作的比率接近了70%。
1.ICSI技术及其风险ICSI是指在显微镜下将单个精子直接注射到卵母细胞胞浆中的一种辅助生殖技术，其整个过程绕过了精子获能、顶体反应和自发穿透卵细胞膜等自然受精过程中的必经阶段，主要用于治疗男性不育，包括严重少、弱畸精症，输精管阻塞，先天性双侧输精管缺如等[2]。
来自自然射精的精液，取自附睾、睾丸的精子无论是新鲜的还是冷冻-复苏的进行ICSI，都获得了成功。
通过实施ICSI，一些难治性不育症成功获得了妊娠，且妊娠率和活产率与运用经典IVF 方法治疗的相近。
对于非男性不育症但多次IVF周期失败的不明原因性不育症患者，ICSI治疗也是有效的。
近年来ICSI在世界各国的使用越来越广泛，2007年统计的欧洲各国的ART中使用ICSI完成体外受精的比率占了68%，在美国该比率也占到了63%。
单精子卵胞浆内注射操作常规
单精子卵胞浆内注射(ICSI)操作常规显微操作糸统显微操作系统是由NIKON-TE2000倒置显微镜、NARISHIGE显微操作系统、Eppendorf液压显微注射臂和NARISHIGE气压持卵臂组成。
显微操作系统配备恒温台，其设置温度应使ICSI注射器中的液滴保持37℃。
显微注射针和持卵针内的压力由操作器控制，显微注射臂连接的管中充满矿物油．使整个管路中不含空气，持卵臂连接的管中为空气。
显微注射针ICSI显微注射针对于成功的ICSI是非常重要的，采用的是Origio公司生产的Humagen ICSI针和Holding针。
精子处理1. 将Isolate“upper”和“lower”和sperm washing medium平衡至室温。
2. 制备梯度：在离心管中各加入1.5 ml -2.0 ml“upper”和“lower”，“upper”在上，“lower”在下，注意加样时动作轻柔，避免产生气泡及将二者充分混匀，两者之间应形成明显的界面。
在制好的密度梯度上加1.5 ml -2.0 ml的液化的精液。
3. 离心300g×15min。
4. 弃上清液，用吸管将离心管底层的白色沉淀转移至另一支含2 ml -3 ml sperm washing medium的离心管中，转移沉淀时应避免过多地将洗液吸上来，同时还要保证能尽量多地吸取沉淀。
5. 离心200g×10min。
6. 弃上清液，留沉淀0.3ml-0.5 ml备用，同时取样镜检。
卵细胞准备，颗粒细胞（放射冠）去除（拆蛋）：1. 选用透明质酸酶和PVP均为商品化试剂，提前预温，透明质酸酶需在使用前1小时放置于二氧化碳培养箱中平衡。
2. 拉制口径200～300μm毛细管数根。
准备两个3037皿，分别标上ICSI前和ICSI后以及患者姓名和日期。
两个3037皿中间均加入1ml G1并覆盖矿物油，移入培养箱备用。
3. 在已预热的4孔板1、2和3号孔、中间孔中加入G-MOPS液各1ml。
icsi名词解释
icsi名词解释
ICSI是全称为"Intracytoplasmic Sperm Injection"，即卵胞浆内单精子注射技术，是一种辅助生殖技术（ART）中的一种治疗方法。
ICSI通过将一个精子直接注射到卵细胞内，以辅助受孕和解决不育问题。
ICSI主要适用于以下情况：
1. 男性因素不育：包括精子数量、形态或运动能力异常，无精子症等情况。
2. 免疫因素不育：如抗精子抗体阳性。
3. 受精困难：通常指体外受精（IVF）过程中，精子与卵细胞自然结合困难。
4. 卵细胞质质量差：包括成熟度低、卵浆膜异常等。
5. 前次IVF失败：在前一次体外受精尝试中，没有成功受孕。
ICSI技术的步骤包括以下几个关键步骤：
1. 卵细胞采集：通过超声引导下，从女性卵巢中取出卵泡，提取卵细胞。
2. 精子采集：从男性捐赠的精液中，选择质量最好的精子。
3. 精子注射：使用特殊的显微操作仪器将单个精子注入卵细胞内。
4. 受精评估：约24-48小时后，观察卵细胞是否成功受精。
5. 胚胎培养和移植：如果受精成功，胚胎会在培养皿中进一步发育，然后经过一段时间后移植到女性子宫内。
ICSI技术被广泛用于辅助生殖治疗，对解决不孕不育问题起到了重要作用。
然而，ICSI也有一些风险和限制，包括可能引发染色体异常、遗传疾病传递等问题。
因此，在进行ICSI治疗前应咨询专业医生，并充分了解相关信息和风险。
卵胞浆内单精子注射的精子优选
卵胞浆内单精子注射的精子优选
汪彩珠;冯贵雪
【期刊名称】《中国生育健康杂志》
【年(卷),期】2018(029)002
【摘要】胚胎的发育受卵子和精子质量的影响,因此提高用于授精的精子质量能提高辅助生殖技术(ART)的助孕结局.在卵胞浆内单精子注射(ICSI)技术中用于精子选择的方法在一定程度上提高了精子质量,但是由于各自潜在的缺陷,应用效果并不尽如人意.因此,本文对国内外报道的关于ICSI精子优选的新方法,主要有:微流小室电泳法、电动电位法、磁性活化细胞分选法、透明质酸结合法、精子双折射检测法和超高倍镜下精子细胞器形态选择法等进行了全面地分析,探讨了这些方法的应用情况及应用效果,旨在为临床ICSI精子的选择提供参考价值.
【总页数】3页(P197-199)
【作者】汪彩珠;冯贵雪
【作者单位】530003南宁,广西壮族自治区妇幼保健院生殖中心;530003南宁,广西壮族自治区妇幼保健院生殖中心
【正文语种】中文
【相关文献】
1.精液精子、附睾精子和睾丸精子卵胞浆内单精子注射助孕结局的比较 [J], 罗开玲;邓志华;丘映;刘锋
2.严重少弱精子症患者微量精子冻融后行卵胞浆内单精子注射的妊娠结局分析 [J], 吴贤玲;喻乔;罗树伟;黄启江;谢舜
3.卵胞浆内单精子注射的精子优选技术的研究进展 [J], 李洁;郑娟;周黎明
4.精子透明带结合法优选精子行卵胞浆内单精子注射临床研究 [J], 金锐;包俊华;白刚;刘永杰;刘芳;王莹;唐大伟
5.常规体外受精失败周期早补救卵胞浆内单精子注射与部分-卵胞浆内单精子注射受精方式的回顾性分析 [J], 吴丽敏;金仁桃;刘雨生;童先宏;周桂香;付应云
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212个周期卵胞质内单精子显微注入术的临床效果
212个周期卵胞质内单精子显微注入术的临床效果韩金兰;曹英;董曦;曹翔;彭献东;严敬明【期刊名称】《生殖与避孕》【年(卷),期】2001(021)001【摘要】目的:分析本中心212周期卵胞质内精子显微注入(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)的结果.方法:采用短方案超排卵后,分析其得卵率,ICSI后的卵裂率、妊娠率及妊娠率与女方年龄的关系.结果:超排卵后每个周期的得卵率10.6个,ICSI后的卵裂率为87.04%,妊娠率为32.55%,妊娠结果为6例流产,63例分娩,获新生儿74个.此外,妇女年龄与ICSI成功率有关.结论:男方因素不孕夫妇用ICSI 及胚胎移植后,能获得较好的妊娠效果,女方年龄与ICSI妊娠成功率有关.【总页数】3页(P47-49)【作者】韩金兰;曹英;董曦;曹翔;彭献东;严敬明【作者单位】上海集爱遗传与不育诊疗中心,;上海集爱遗传与不育诊疗中心,;上海集爱遗传与不育诊疗中心,;上海集爱遗传与不育诊疗中心,;上海集爱遗传与不育诊疗中心,;上海集爱遗传与不育诊疗中心,【正文语种】中文【中图分类】Q492.6;R711.6【相关文献】1.卵胞质内单精子显微注射术治疗梗阻性无精子症妊娠分娩1例 [J], 陈少轻;徐琨2.不同参数精子对卵胞质内单精子注射术结局的影响 [J], 陈锋;金帆3.冻融和新鲜睾丸精子行卵胞质内单精子显微注射的妊娠结局对比分析 [J], 高彩凤;黎佩怡;李敦高;陈志云4.卵胞质内单精子显微注射周期显微镜下睾丸切开取精术治疗非梗阻性无精子症患者的效果分析 [J], 孟令波5.先天性输精管缺如行显微取精联合卵胞质内单精子显微注射的护理 [J], 沈婉佳;冯素文因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
卵母细胞质内单精子注射技术的临床应用
卵母细胞质内单精子注射技术的临床应用
冯云;高士友
【期刊名称】《山东医科大学学报》
【年(卷),期】1999(037)001
【摘要】应用卵母细胞人单精子注射（ＩＯＳＳＩ）国性因素所致。
自１９９７年７月至１９９８年６月，因男性严重少精、弱精及精子畸形来诊的不育夫妇２１对。
女方采用药物超促排卵后，经阴道Ｂ超引导下取卵，应用ＩＯＳＳＩ技术获得体外受精卵及早期胚胎，然后行胚胎移植，２１个周期获得２１８个卵母细胞，其中１５０个成熟卵母细胞进行注射，１１６个（７７．３％）成活，正常受精８９个，受精率为５９．３％，卵裂５５个，卵裂率６１．８
【总页数】3页(P44-46)
【作者】冯云;高士友
【作者单位】山东省立医院生殖医学研究中心;山东省立医院生殖医学研究中心【正文语种】中文
【中图分类】R321－33
【相关文献】
1.卵胞浆内单精子显微注射技术的临床应用 [J], 季钢;朱健生;张玲;洪名云
2.卵胞浆内单精子显微注射技术的临床应用 [J], 祁强;朱健生;姚桂东;季钢
3.卵母细胞胞浆内单精子注射的临床应用研究 [J], 周伟方;周黎明;孙亦婷;赵雅云;丁亚军;张檀;王华;陈剑茹
4.卵母细胞浆内单精子显微注射技术的临床应用 [J], 王晓红;罗亚宁;姚元庆
5.在体外受精和卵母细胞单精子显微注射结局中由精子染色质散布试验测得的精子脱氧核糖核酸碎片水平的价值 [J],
Muriel;L;Garrido;N;Fernández;J.;L;M.;Meseguer
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卵内精子输入法 (ICSI)
什么是卵内精子输入法？
卵内精子输入法是体外受孕的一种专门形式，用于治疗某些由于男性因素而导致的不孕症。
具体做法是将一个精子直接注射到一个成熟的卵子里。
什么时候使用卵内精子输入法？
大约30%的不孕症是由男性问题所引起的，卵内精子输入法的出现彻底改变了男性不孕症的治疗。
在1992年首宗成功的怀孕个案之前，男性不孕的夫妇除了选用捐精之外，并无它计可施。
较有可能受惠于卵内精子输入法的包括普通体外授精法效果不佳的夫妇以及有下列情况的男性：
精子輸入之後
精子輸入
卵内精子输入法是怎么做的？
在能够进行卵内精子输入法之前，我们首先得通过普通的体外受精法取得成熟的卵子。
男伴侣的精液在实验室里经过处理，尽量分离出多个健康的、有活力的精子。
卵子在实验室里休息了4-6个小时之后，我们会将它们的硬外膜除去，从而鉴定出它们是否成熟，不成熟的卵子不能接受输入。
我们会用一个特殊的仪器将卵子固定，仪器小到它的尖端肉眼几乎看不见。
我们再用一根更细小的针（输入针）将一个外表正常的精子吸起，以极高的准确性将针穿过卵子的外壳（透明带）直达卵子的内部。
精子被慢慢地注射到卵子里头，针管被拔出来，精子被留在卵子里。
输入后的卵子被放在保温箱里过夜，第二天早上我们会检查看有没有受精的迹象。
再过24小时之后我们便能断定有多少受精卵已经分裂，并进一步形成胚胎。
并非每个卵子都会受精，也并非每个受精卵都会形成胚胎。
跟标准的体外受精法一样，植入多少个胚胎取决于几个因素包括妇女的年龄。
如果胚胎看上去健康的话，用剩的胚胎可用于冷藏。
●
精子形态差 ●
精子活力差 ●
精子数目过低 ●
睾丸或附睾阻塞，妨碍精子的释放。
● 体内出现抗精子抗体，妨碍精子的正常
功能。
● 输精管结扎后重新接驳，但不成功，或
接驳后导致精子的数量和质量极低。
可能的风险
卵内精子输入法所产生的婴儿已有成千上万，目前为止，没有证据显示卵内精子输入法或体外受精法所产生的婴儿的的生理缺陷率高于自然怀孕的生理缺陷率。
母亲分娩时的年龄、家族健康史、以及妊娠并发症仍是新生儿身体健康的最主要预知素。
然而，一小部分通过卵内精子输入法所诞生的男婴可能会遗传他们父亲的生育毛病。
某些男性的精子问题是后天造成的，不会遗传（例如输精管阻塞、脊髓外伤等），然而其他男性的精子问题却可能是与生俱有的。
这些问题会被遗传给下一代，因为染色体会出现重新排列，或Y染色体中的一小部分会被删去。
再者，男性精虫数目极低或输精管阻塞都可能是多囊性纤维化的基因携带者。
除了将精子问题遗传给下一代之外，他们也有更高的机会生下一个患有该病的孩子，尤其是如果他们的伴侣也携带这种基因的话。
正如母亲的年龄影响婴儿罹患生理缺陷的机会一样，精子数目极低的男性也有更大的机会（约1%）生下一个染色体数目异常的男孩（例如XXY或XYY而不是通常的XY）。
这些儿童外表正常，智商也与常人无异，但他们日后会出现学习困难、行为问题、或不孕症。
夫妻一方或双方可以去验血来筛检出许多（但不是全部）这方面的问题，例如染色体排列异常和多囊性纤维化的基因等等。
可以做遗传咨询，以及在妊娠期间做基因检测（例如羊膜穿刺或胎盘组织活检）来查出这方面的问题。
卵内精子输入法有多成功？
目前世界上很多人工受孕诊所都用过了卵内精子输入法，在Genesis诊所，平均70-80%的成熟卵子会正常受精。
除此之外，有些卵子在注射过程中会被损坏（最多不超过2%），其它则会非正常受精。
使用卵内精子输入法的夫妇超过90%以上至少会有一个胚胎可以移植。
但即使使用了卵内精子输入法，仍有少许的机会一个卵子都不会受精。
怀孕的成功率跟标准体外受精法近似，随妇女年龄的不同而不同。
每一具体年龄的怀孕率请参阅我们的网站。
心理咨询
不孕症及其治疗都可以给人带来压力。
除了医疗照顾之外，尚有一个半小时的免费心理咨询也包括在治疗费当中。
提供这一服务的是一群分布于B.C.省各地的心理辅导员，他们擅长生育方面的心理治疗。
费用多少？
卵内精子输入法每一次的疗程费用是$6000，外加$2000到$3000的药费。
卵内精子输入法的费用所有保险公司都不包，但可以用于报税。
有的保险公司则会包药费。
请与你的保险公司打听清楚，看他们是否包药费，包多少，及包几个疗程。