细胞中过氧化物酶类、脂类和碳水化合物的鉴定

细胞中过氧化物酶类、脂类和碳水 化合物的鉴定

掌握细胞中过氧化物酶类的鉴定方法

马铃薯、洋葱根尖



1、器材 显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、刮胡刀、染色缸、牙签、 载玻片、盖玻片等 2、试剂及配制 （1）0.1%钼酸铵：取0.1g钼酸铵溶于100ml双蒸水中 （2）1%联苯胺：取1g联苯胺溶于100ml双蒸水中 （3）生理盐水：取Nacl9g溶于1000ml蒸馏水中 （4）3%过氧化氢溶液：量取过氧化氢溶液1.5ml，加入到 48.5ml蒸馏水中

低倍镜下所见多角形的薄壁细胞中有许多 椭圆形蓝色颗粒，即淀粉粒

（一）实验目的 掌握测定植物细胞中蛋白质贮藏颗粒的 方法。 （二）实验材料 大豆种子

（三）实验器具与药品 1.器材 显微镜、载玻片、盖玻片、 镊子、滴管、小碟子、水、 吸水纸、旧毛笔、刀片。

（1）碘-碘化钾试剂 （2）苏丹Ⅲ溶液：取0.1g苏丹Ⅲ，溶解在 20ml 95%酒精中。可用来染木栓、角质层 和脂肪。由于脂肪能溶解在酒精中，因此， 染脂肪时不能超过10min。

联苯胺
1、洋葱根尖细胞过氧化物酶的显示 （1）取新鲜洋葱根尖于载玻片上压片 （2）加一滴0.1%钼酸胺，放置5min （3）加一滴联苯胺溶液一滴，待其出现蓝色。 （4）用生理盐水冲洗一次 （5）加盖玻片观察。


2、植物细胞中过氧化物酶的间接显示
（1）徒手切片：取马铃薯以徒手切片法切 取小薄片于载玻片上。 （2）滴加3%的过氧化氢溶液于载玻片上， 可见组织四周出现大量的气泡，证明植物 细胞中有过的过氧化氢酶存在。

细胞中存在的过氧化物酶能把许多胺类氧化 成化合物，联苯胺可被细胞中的过氧化物酶 氧化成蓝色或棕色产物（蓝色物质为中间产 物联苯胺蓝，很不稳定，可转变为棕色的苯 胺腙），因而显示出细胞内过氧化物酶的分 布。另外细胞代谢过程会产生对有机体有害 的过氧化氢（H2O2），过氧化氢酶使其分解 为水，对机体起保护作用。通过植物块茎与 过氧化氢相遇后发生的反应可间接的证实该 酶的存在。

糖类是生物机体生命活动的主要来源，淀 粉是植物细胞内储藏能量的多糖物质、淀 粉有直链和支链之分，遇碘显蓝色反应， 形成复合物——碘化淀粉，碘化淀粉不稳定， 容易被醇、氢氧化钠和热分解而使颜色退 去。

Baidu Nhomakorabea
1.制片
切取马铃薯薄片于载玻片上。用吸管吸取 革兰氏碘液1滴于马铃薯薄片上，盖上盖玻 片。 2.观察

1.碘-碘化钾法 染色：把大豆种子浸软，剥去种皮，分 开子叶，做横成片，将切片放在载玻片上 滴加碘-碘化钾，盖上盖玻片。 观察：蛋白质染成黄褐色（蛋白质与碘 作用呈现黄色反应），淀粉染成蓝色。

2.苏丹Ⅲ法 把大豆种子浸软，剥去种皮，分开子叶，做 横切片，从中挑选最薄的一片，用毛笔移到 载玻片的水滴里，倾斜的盖上盖玻片。 装片制成以后，放在显微镜下观察，就能看 到子夜的细胞里满是一颗颗油滴。在标本的 边缘，还可以看到从破碎的的细胞中散出的 油滴。 在盖玻片的一边加一滴苏丹Ⅲ溶液，在盖玻 片的另一边用吸水纸吸水，让苏丹Ⅲ溶液迅 速扩散进去。染色后再用显微镜观察，油滴 已染上橙黄色。


种子里含有脂肪。脂肪染色后必须马上观 察，不能超过10min，否则，油滴将陆续破 碎。这是因为苏丹Ⅲ溶液中含有酒精，而 脂肪能溶解在酒精中的缘故。
（一）.实验目的 掌握细胞碳水化合物的鉴定方法。

（二）实验材料 马铃薯


1.器材
显微镜、镊子、小平皿、吸水纸、纱布、 载玻片、盖玻片。 2.试剂 革兰氏碘液：称取1g碘化钾，溶于50ml蒸 馏水，再加0.5g碘，使之溶解，最后用蒸馏 水稀释至150ml，盛于棕色瓶内、暗冷处保 存。