试谈肠道致病菌的检验与鉴定培训课件
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肠道感染细菌(共35张PPT)
内毒素：发热、白细胞数下降等； 肠毒素：引起水样腹泻
粘附在小肠粘膜
细菌
上皮细胞并穿入
粘膜固有层的
到上皮下层繁殖
吞噬细胞吞噬
（二）所致疾病
1、肠热症：
发生变态反应，
肠局部坏死溃疡 致肠出血、肠穿孔
发热、不适、
全身疼痛
病人
带菌者
粪-口
肠壁固有层 淋巴结
淋巴液 肠系膜 胸导管 淋巴结
血
第一次 菌血症
胆囊、肝、脾、肾
明确诊断
四、防治原则
预防： 控制传染源，切断传播途径 抵抗力：低于其他肠道杆菌，对酸敏感
水样便，恶心，呕吐，发热 环境卫生和食品卫生学中，常被用作粪便污染的卫生学检测指标
我国卫生标准：大肠菌群
口服减毒活疫苗（Sd活疫苗） 肠道致病菌
多数不发酵乳糖
无芽孢，多数有周鞭毛和菌毛，少数有荚膜或微荚膜。
SS平板（无色透明小菌落）
上皮细胞绒毛结构破坏，导致吸收受损和腹泻
口服减毒活疫苗（Sd活疫苗）
大部分中等大小的G-杆菌。
第三节 沙门菌属
双糖培养基（生化反应）
60℃30min可被杀死
治疗： 多种抗菌素可选择， 型别多且各型间无交叉免疫
菌毛（包括普通菌毛和性菌毛） 培养特性：营养要求不高，在SS平板上为无色半透明菌落。
口服减毒活疫苗（Sd活疫苗）
H与O抗体的性质及其消长意义
抗体 类型
O抗 IgM
低
体
H抗 IgG
低
体
患病可能 性小
体内出现情况
高
高
低
高
低
高
患肠热症 可能性大
感染早期、预防接种；
其他沙门 非特异性 菌引起的 回忆反应 交叉反应
粘附在小肠粘膜
细菌
上皮细胞并穿入
粘膜固有层的
到上皮下层繁殖
吞噬细胞吞噬
（二）所致疾病
1、肠热症：
发生变态反应，
肠局部坏死溃疡 致肠出血、肠穿孔
发热、不适、
全身疼痛
病人
带菌者
粪-口
肠壁固有层 淋巴结
淋巴液 肠系膜 胸导管 淋巴结
血
第一次 菌血症
胆囊、肝、脾、肾
明确诊断
四、防治原则
预防： 控制传染源，切断传播途径 抵抗力：低于其他肠道杆菌，对酸敏感
水样便，恶心，呕吐，发热 环境卫生和食品卫生学中，常被用作粪便污染的卫生学检测指标
我国卫生标准：大肠菌群
口服减毒活疫苗（Sd活疫苗） 肠道致病菌
多数不发酵乳糖
无芽孢，多数有周鞭毛和菌毛，少数有荚膜或微荚膜。
SS平板（无色透明小菌落）
上皮细胞绒毛结构破坏，导致吸收受损和腹泻
口服减毒活疫苗（Sd活疫苗）
大部分中等大小的G-杆菌。
第三节 沙门菌属
双糖培养基（生化反应）
60℃30min可被杀死
治疗： 多种抗菌素可选择， 型别多且各型间无交叉免疫
菌毛（包括普通菌毛和性菌毛） 培养特性：营养要求不高，在SS平板上为无色半透明菌落。
口服减毒活疫苗（Sd活疫苗）
H与O抗体的性质及其消长意义
抗体 类型
O抗 IgM
低
体
H抗 IgG
低
体
患病可能 性小
体内出现情况
高
高
低
高
低
高
患肠热症 可能性大
感染早期、预防接种；
其他沙门 非特异性 菌引起的 回忆反应 交叉反应
肠道感染细菌ppt课件1教学文案
由痢疾志贺菌I型和II型菌产生，称 志贺毒素(shiga toxin,ST)。该毒素具有 神经毒性、细胞毒性和肠毒性3种生物活 性。
（二）所致疾病：人类细菌性痢疾
传染源：患者和带菌者，无动物宿主。 传播途径：粪-口途径 志贺菌感染可分为急性和慢性两类。
①急性细菌性痢疾：
其特点是潜伏期短，起病急，临床症 状主要有高热、腹痛、腹泻、里急后重及 脓血粘液便等。
伤寒杆菌
大肠杆菌 痢疾杆菌
2、培养特性相同
➢需氧菌或兼性厌氧菌 ➢营养要求不高 ➢普通的琼脂平板--光滑型菌落 ➢液体培养基--混浊生长
大肠杆菌在SS平板上的菌落特征 痢疾杆菌在SS平板上的菌落特征
3、生化反应活泼
➢分解多种糖类和蛋白质
➢利用乳糖发酵试验可初步鉴别肠道杆菌 有无致病性。
乳糖发 致病性肠道杆菌（－） 酵试验 非致病性肠道杆菌（＋）
3、抗原构造
O抗原——分组，42组 H抗原——分群，将组内沙门菌分
成不同菌型 Vi抗原——微荚膜
4、抵抗力
对理化因素抵抗力不强
二、致病性和免疫性
（一）致病物质
侵袭力--Vi抗原、菌毛 内毒素 肠毒素
（二）所致疾病
1、肠热症：即伤寒、副伤寒。
病原体：为伤寒沙门菌、甲 型副伤寒沙门菌、乙型副伤寒沙 门菌、丙型副伤寒沙门菌。
② O＞正常、H＜正常：可能是感染的早期或 与伤寒沙门菌O抗原有交叉反应的其他沙门菌的 感染；
③ O＜正常、H＞正常：可能是以往预防接种 的结果或非特异性回忆反应。
（三）带菌者检查
四、防治原则
(一)防:接种菌苗 (二)治:氯霉素，长疗程，但停药后 可复发。
第四节 霍乱弧菌
（V.cholerae）
（二）所致疾病：人类细菌性痢疾
传染源：患者和带菌者，无动物宿主。 传播途径：粪-口途径 志贺菌感染可分为急性和慢性两类。
①急性细菌性痢疾：
其特点是潜伏期短，起病急，临床症 状主要有高热、腹痛、腹泻、里急后重及 脓血粘液便等。
伤寒杆菌
大肠杆菌 痢疾杆菌
2、培养特性相同
➢需氧菌或兼性厌氧菌 ➢营养要求不高 ➢普通的琼脂平板--光滑型菌落 ➢液体培养基--混浊生长
大肠杆菌在SS平板上的菌落特征 痢疾杆菌在SS平板上的菌落特征
3、生化反应活泼
➢分解多种糖类和蛋白质
➢利用乳糖发酵试验可初步鉴别肠道杆菌 有无致病性。
乳糖发 致病性肠道杆菌（－） 酵试验 非致病性肠道杆菌（＋）
3、抗原构造
O抗原——分组，42组 H抗原——分群，将组内沙门菌分
成不同菌型 Vi抗原——微荚膜
4、抵抗力
对理化因素抵抗力不强
二、致病性和免疫性
（一）致病物质
侵袭力--Vi抗原、菌毛 内毒素 肠毒素
（二）所致疾病
1、肠热症：即伤寒、副伤寒。
病原体：为伤寒沙门菌、甲 型副伤寒沙门菌、乙型副伤寒沙 门菌、丙型副伤寒沙门菌。
② O＞正常、H＜正常：可能是感染的早期或 与伤寒沙门菌O抗原有交叉反应的其他沙门菌的 感染；
③ O＜正常、H＞正常：可能是以往预防接种 的结果或非特异性回忆反应。
（三）带菌者检查
四、防治原则
(一)防:接种菌苗 (二)治:氯霉素，长疗程，但停药后 可复发。
第四节 霍乱弧菌
（V.cholerae）
肠道致病菌 PPT精品课件
肠道杆菌双糖铁培养特点
弧菌属 (Vibrio)
形态染色结构特点
G-, 弯曲如逗点, 单鞭毛, 运 动活泼
主要致病菌
霍乱弧菌, 副溶血弧菌, 其他 (创伤弧菌等)
第一节 霍乱弧菌
Vibrio cholerae
一、主要生物学性状
形态结构 G-弧菌，单端单鞭毛，运动活泼， 悬滴标本可见“鱼群样穿梭”
肠道致病菌
主要致病菌
肠杆菌科
埃希菌属 Escherichia 沙门菌属 Salmonella 志贺菌属 Shigella
弧菌属
霍乱弧菌/ 副溶血性弧菌
螺杆菌属和弯曲菌属
幽门螺杆菌 / 空肠弯曲菌
肠杆菌科共同特点
G－ 杆菌, 排列无规则 有菌毛,大多有周鞭毛 (痢疾杆菌除外) 抗原构造---O, H, K (Vi) 生化反应:鉴别 多为肠道正常菌群, 少数为致病菌 变异: 耐药性变异，H-O, S-R
肠产毒型大肠埃希菌
ETEC (Enterotoxigenic E. coli )
旅游者腹泻/婴幼儿腹泻 轻度→霍乱样腹泻 致病物质：肠毒素、定植因子
肠产毒型大肠埃希菌
ETEC (Enterotoxigenic E. coli )
不耐热肠毒素 LT
A→cAMP↑ →分泌↑
B:与GM1神经节 苷脂结合
肠出血型大肠埃希菌
EHEC (Enterohemorrhagic E. coli)
O157:H7
致病因子
Vero毒素/志贺样毒素
Transmission electron micrograph
菌毛
所致疾病
出血性结肠炎（血性腹泻）
溶血性尿毒综合征（HUS）
死亡率10%
肠道致病菌ppt课件
2 葡萄球菌属 （Staphylococcus）
葡萄球菌属（Staphylococcus）
• 是一群革兰氏阳性球菌。 • 多数为非致病菌，少数可导致疾病。葡萄 球菌是最常见的化脓性球菌，是医院交叉 感染的重要来源。
• 菌体直径约0.8μm，小球形 – 金黄色葡萄球菌（S-taphylococcusaureus ） – 白色葡萄球菌（S．albus） – 柠檬色葡萄球菌（S．citreus）。
– – – – – 致病性大肠杆菌(EPEC) 肠产毒性大肠杆菌(ETEC) 肠侵袭性大肠杆菌(EIEC) 肠出血性大肠杆菌(EHEC) 肠黏附性大肠杆菌(EAEC)
• 革兰氏阴性短杆菌，大小0.5×1～3微米。周身鞭毛，能运 动。是人和动物肠道中的正常栖居菌，婴儿出生后即随哺 乳进入肠道，与人终身相伴。
临床表现
• 胃肠炎型：前驱症状有头痛、头晕、恶心、腹痛、寒战。 以后出现呕吐、腹泻、发热。大便为黄色或黄绿色、带粘 液和血。因呕吐、腹泻大量失水，一般急救处理是补充水 份和电解质。对重症、发热和有并发症患者，可用抗菌素 治疗。一般3～5天可恢复，病死率在1%左右。主要是儿 童和老人或体弱者治疗不及时所致。 • 类霍乱型：起病急、高热、呕吐、腹泻次数较多，且有严 重失水现象。 • 类伤寒型：胃肠炎症状较轻。但有高热并出现玫瑰疹。 • 类感冒型：头晕、头痛、发热、全身酸痛、关节痛、咽炎、 腹痛、腹泻等。 • 败血症型： 寒战、高热持续1～2周，并发各种炎症、肺 炎、脑膜炎、心内膜炎.
• 沙门氏菌性食物中毒中最常见的致病菌，在我国 占食物中毒的第一位。猪、牛、羊等健康家畜、 家禽和蛋类的带菌率较高，有宰前感染，也有宰 后污染。 • 猪的生前感染沙门氏菌是比较严重的，其检出率 高达26.5%。猪肉的沙门氏菌检出率为12.5%。 肉类食品从畜禽的宰杀到烹调加工的各个环节中， 都可受到污染。烹调后的熟肉，如果再次受到污 染，并且在较高的温度下存入，食前又不再加热， 则更为危险。 • 沙门氏菌食物中毒，主要发生的夏秋季节外，全 年都可发生引起中毒的食物主要为肉类、禽类、
肠道细菌实验ppt课件
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效价的判定
1
2
3
4
5
6 效价判定
阴性对
照
H抗原 +++ +++ ++ ++ + － +
O抗原 +++ +++ ++ + + － +
PA抗原 － － － － －
金 黄 色 葡 萄 球 菌
铜 绿 假 单 胞 菌
细菌菌落的溶血现象观察
乙型溶血性链球菌:透明的无色溶血环。
一、糖发酵试验
1.了解糖发酵的原理和在肠道细 菌鉴定中的重要作用。
2.掌握通过糖发酵鉴别不同微生 物的方法。
糖发酵试验：
乳糖酶 乳糖
乳酸
葡萄糖发酵试验：
细菌
葡萄糖
丙酮酸
各种酸类
脱氢酶
[参考值] 伤寒杆菌凝集价H<1：160，O<1：80； 副伤寒凝集价A<1：80，B<1：80，
C<1：80
[临床意义]机体感染伤寒、副伤寒杆菌后会产生相
应抗体，正常人因隐性感染或预防接种，血清中可 含有一定量的抗体。一般当H≥1：160，O≥1：80， 副伤寒凝集价≥1：80时，才有诊断意义。病程中应 每周复查一次，如病人H与O的凝集价均高于参考值 或较原凝集价升高4倍以上，则患伤寒的可能性很 大。若H凝集价高而O低于正常值，则可能是以往预 防接种疫苗的结果或非特异性回忆反应所致。
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五、微生物检验的基本程序
检样→处理→增菌培养→分离培养→ 生化试验→血清学鉴定→报告
试谈肠道致病菌的检验与鉴定
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第二节、沙门氏菌检验
一、概况 （一）沙门氏菌的命名
根据所致疾病命名 根据菌的发现地区命名 以发现者的名字命名 （二）沙门氏菌的抵抗力 60 ℃ 30′可杀死
试谈肠道致病菌的检验与鉴定
1 、 需 氧 或 兼 性 厌 氧 ， 最 适 温 度 37℃ ， PH7.2~7.4。
试谈肠道致病菌的检验与鉴定
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试谈肠道致病(沙菌的门检验氏与鉴菌定（红色）侵入人体11细胞
2、对营养要求不高，在普通培养基生长良好， 37 ℃，24h，能形成菌落中等大小，直径2～ 3mm，圆形或卵形，表面光滑湿润，无色半 透明，边缘整齐的菌落
3、在液体培养基中，呈均匀混浊性生长，无 菌膜。
试谈肠道致病菌的检验与鉴定
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（三）、生化特性
1、发酵GLU，甘露醇，山梨醇产酸产气（伤寒鸡伤 寒沙门氏菌少数不产气）
2、不发酵乳糖，蔗糖，侧金盏花醇 3、多数产生H2S（+），不产靛基质（-），不分解尿
素（-），不产生乙酰甲基甲醇（V—P）（-）， 4、能还原硝酸盐为亚硝酸盐（+） 5、在KCN培养基中生长（-），苯丙氨酸脱氨酸（-）
试谈肠道致病菌的检 验与鉴定
第一节 概述
一、食品中常见的肠道致病菌
• 沙门氏菌 • 志贺氏菌 • 大肠艾希氏菌 • 变形杆菌 • 耶尔森菌
试谈肠道致病菌的检验与鉴定
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二、生物学特性
1、形态与染色 均为革兰氏阴性杆菌，中等大小，无芽胞，多ห้องสมุดไป่ตู้具有周身鞭 毛能运动，志贺氏菌属无鞭毛无动力。
2、培养和生化反应 （1）需氧或兼性厌氧，菌落中等大小，表面光滑，液体培养
三、沙门氏菌食物中毒
（一）、引起食物中毒最常见的沙门氏菌：
鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌
（二）、易引起沙门氏菌中毒的食品 肉、蛋、乳类食品
行业关注：美国两种花生酱含沙门氏菌
试谈肠道致病菌的检验与鉴定
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(三)、中毒原因
1、食用病畜禽的肉制品食品 2、病畜禽、带菌人和动物使食品受污染 3、用不洁净水处理食品
试谈肠道致病菌的检验与鉴定
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（四）、临床病状（所致病菌）
1、肠热病：伤寒与副伤寒病，为慢性发热的菌血病。 由伤寒与副伤寒菌引起，潜伏期7~20天
2、急性肠胃类：主要症状：头痛、发热、恶心、呕吐、 腹泻、出冷汗、及全身不适，病程2~3天
3、败血病：高烧、寒战、厌食、局部发炎、由猪霍乱沙 门氏菌等引起
4、生化试验：鉴定分离出来的细菌是否符合所检项目 的细菌;
5、血清学鉴定：进一步鉴定。
试谈肠道致病菌的检验与鉴定
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（二）、检验操作关键点
1、前增菌：使待检菌复壮
前增菌：增菌液一般用BPW, 36±℃，18~24h，长有杂菌。 2、选择性增菌：抑制杂菌生长，提高检出率
试谈肠道致病菌的检验与鉴定
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（四）、抗原结构 主要两种：
A、O抗原 B、H抗原 C、表面抗原（K抗原） D、菌毛抗原
试谈肠道致病菌的检验与鉴定
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2 、O抗原 （1） O抗原的表示方法 共有58种，用字母O和阿拉伯数字标记：O1 、
O2 、O3、 O4 如：
伤寒杆菌： O9 、O12
试谈肠道致病菌的检验与鉴定
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（2）沙门氏菌的分群及表示方法
用大写字母及相关符号表示： A、B、C、D、E… 、 O51 ~O63、 O65~
O67
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（3）沙门氏菌中的主要菌群及其群特异性抗原
A群----O2 B群----O4 C群----O6
C1群----O7、 C2群---- O6 O8 、 C3群----O8 、 C4群----O6 O7 O14 D群----O9 F群----O11 E群----O3 E2群----O3、 O10族 E3群----O3、 O15 E4群----O1 、O3 、O19
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（三）沙门氏菌的分类地位及定义
1、地位：是肠杆菌科中的细菌 2、定义
肠杆菌科中形态和培养特征，生化反应及抗 原结构相似，被O1噬菌体裂解的一群革兰氏 阴性杆菌。
试谈肠道致病菌的检验与鉴定
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二、生物学特性
（一）、形态与染色： 革兰氏染色阴性，无荚膜，无芽胞，多数
有鞭毛，有动力，短小杆菌。 （二）、培养特性
试谈肠道致病菌的检验与鉴定
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3、H抗原（鞭毛抗原）
耐热性差：60℃15′或酒精处理可破坏
沙门氏H抗原有两种： 第 1 相 ： 特 异 相 ， 用 英 文 小 写 字 母 表 示 a 、 b 、 c……z
z1~z55 第2相：非特异相，用阿拉伯数字表示1、2、3……其
中也有用小写字母a、n、x等表示。
基混浊生长。 （2）肠道致病菌一般不分解乳糖，而非致病菌多能分解乳糖、
葡萄糖产酸或产酸产气。 （3）可还原硝酸盐为亚硝酸盐。
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三、抗原类型
O抗原 H抗原 K抗原
菌毛抗原
也称菌体抗原，细胞壁脂肪糖，耐热100℃不 被破坏
也称鞭毛抗原，鞭毛蛋白，不耐热，60℃ 30′可破坏
也称表面抗原（荚膜抗原），多糖，具有阻抑 O抗原发生凝集的现象，加热60℃30′可消除 抑阻作用
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4、表面抗原：
沙门氏菌有三种：Vi、M、K抗原
Vi抗原位于菌体的最表层，包围了O抗原，可阻碍O抗原的血清 学凝集试验。破坏Vi抗原：60℃ 30′，100 ℃ 5′
含有Vi 抗原的沙门氏菌： 伤寒沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌、都柏林沙门氏菌
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四、 致病性
（一）、致病物质 1、内毒素：能引起机体发热，白细胞减少，低血糖，
血压降低，严重者休克。 2、外毒素：对小肠粘膜细胞具有特殊毒害作用，引起
腹泻。
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（二）、所致病疾 1、伤寒和副伤寒 2、食物中毒 3、细菌性痢疾
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四、微生物检验
（一）、基本步骤（程序） 检样→增菌（前增菌）→分离培养→生化
试验初步鉴定→血清学反应最后鉴定→报告
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1、前增菌：用无选择性的培养基使处于濒死状态的细 菌恢复活力;
2、选择性增菌：使沙门氏菌优势繁殖，其它细菌受到 抑制;
3、选择性平板分离培养：分离出所需的细菌;