血清丙氨酸氨基转移酶测定

血清丙氨酸氨基转移酶测定

1 检验目的

指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。

2 实验原理

本试剂以国际临床化学会(IFCC)推荐方法为基础，所采用的反应原理与反应式如下。

⑴样本中的丙氨酸氨基转移酶（ALT）催化丙氨酸的氨基转换至α-氧代戊二酸，生成丙酮酸和L谷氨酸。

⑵丙酮酸被试剂中的乳酸脱氢酶（LDH）还原为L-乳酸的同时还原型辅酶I（NADH+ H+）被氧化为辅酶I（NAD+），而使波长340nm处的吸光度值下降。通过对波长340nm处吸光度值的下降速率进行监测，即可测得样本中丙氨酸氨基转移酶（ALT）的活性。

(3)样本中内源性丙酮酸的干扰，可由试剂中的乳酸脱氢酶（LDH）在测定的延迟时间内快速、完全地消除，不会对测定产生干扰。

ALT

L-丙氨酸 + -酮戊二酸丙酮酸 + L-谷

LDH（乳酸脱氢酶）

氨酸

丙酮酸+ NADH + H+L-乳酸 + NAD+ + H2O

3 标本

3.1病人准备：12小时禁食。

3.2 类型：血清。

3.3. 标本存放：3天内的活性损失：2～8℃保存：<10%；15～

25℃保存：<17%；标本稳定性：-20℃保存至少可稳定4周。

3.4 标本运输：常温条件下保存运输。

3.5 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。

4 实验材料

4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司ALT试剂盒（沪

食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）

4.1.1 试剂组成

试剂1 L丙氨酸 600mmol/L 乳酸脱氢酶＞1820U/L

（R1）：

NADH 0.26mmol/

L

Tris缓冲液 80mmol/L

试剂2（R2）：Tris缓冲

液

80mmol/L α氧代戊二

酸

36mmol/L

EDTA 5.0mmol/

4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存：在2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂盒自生产之日起有效期为12个月。

4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

4.1.5 注意事项：试剂中含有稳定剂，可能存在一定的刺激作用和毒性，请勿直接接触皮肤及眼睛。一旦接触，即用大量清水冲洗。请勿吞服。

4.2 校准品：使用上海复星长征医学科学有限公司提供的ALT校准品对自动分析仪进行校准。

4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。

5 仪器

AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪，西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪

6 操作步骤

6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。

6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。

6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪，西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。

6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪，西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪操作规程。

7 质量控制

在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。

8 计算方法

以ALT复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以U/L报告。

9 参考值范围

男性：≤40U/L（≤0.67μkat/L）女性：≤31U/L（≤0.52μkat/L）

我室的参考值:7-50U/L

10 临床意义

丙氨酸氨基转移酶（ALT）旧称谷丙转氨酶（GPT），天门冬氨酸氨基转移酶（AST）旧称谷草转氨酶（GOT）。它们是氨基转移酶类的典型代表。氨基转移酶催化氨基从氨基酸转移给 -酮酸的反应。ALT是肝脏的特异性酶，仅在肝胆疾病时显著升高。而AST水平的升高和心肌或骨骼肌损伤，以及肝组织损害等都有关。因此同时进行ALT和AST的检测，可

用于鉴别肝损伤和心肌或骨骼肌损伤。AST/ALT比率用于肝病的鉴别诊断。比率<1预示中度的肝损伤；比率>1和严重肝病有关，常见慢性肝病。

ALT活性在下列疾病可见增多：（1）肝胆疾病：传染性肝炎、肝硬化活动期，中毒性肝炎、脂肪肝、胆管炎和胆囊水等。（2）心血管疾病：心肌梗塞、心肌炎、心力衰竭时的肝脏瘀血、脑血出等。（3）骨骼肌疾病、多发性肌炎、肌营养不良等。

一些药物和毒物可引起ALT活性升高：如氯丙嗪、异菸奎宁、水扬酸制剂及酒精，铅泵、四氯化碳或有机磷等。11 操作性能

11.1 线性范围：试剂（盒）线性范围应覆盖[5～500]U/L。

a)线性相关系数（r）应不小于0.990。

b) [5～50]U/L 范围内，线性偏差应不超过±3.0U/L；[51～500] U/L 范围内，线性偏差应不超过±10％。

11.2 精密度：(1)重复性：变异系数（CV%）≤5%；(2)批间差：相对极差（%）≤5%。