ATCC菌种保藏与使用

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LYFO DISK 操作流程
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KwikKwik-Stik & Lyfo Disk 推荐生长条件
如何选择最适合的菌种生长条件
1.最初的生长最好是在非选择性琼脂培养基上。 1.最初的生长最好是在非选择性琼脂培养基上。 最初的生长最好是在非选择性琼脂培养基上 除非特殊情况或特别推荐， 除非特殊情况或特别推荐，最初的生长一般不 考虑液体培养基。 考虑液体培养基。这是由于在液体培养基中获 得冻干菌株的纯种比较困难，污染所带来的杂 得冻干菌株的纯种比较困难， 菌可能会过度生长，影响得到目标菌株的纯种。 菌可能会过度生长，影响得到目标菌株的纯种。 2、以下列出可供选择的琼脂培养基和相应的 生长条件，供各实验室培养菌种时参考。 生长条件，供各实验室培养菌种时参考。
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各类菌种推荐培养方法
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方法5 方法5
沙保氏葡萄糖 Emmons琼脂——25℃，正常 环 境 ， Emmons琼脂 琼脂——25℃ 2~7天 2~7天； 非选择性羊血琼脂也可选用 ； 以下培养基也可选用：营养琼脂，胰蛋白胨大豆琼脂， 以下培养基也可选用：营养琼脂，胰蛋白胨大豆琼脂， 马铃薯 葡萄糖琼脂和标准平板计数琼脂 ，只是需额 外培养24小时 小时。 外培养24小时。
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微生物实验室需有相关实验装备，且有可接收、 处理、储存、丢弃生物危害材料的设备。 使用这类设备的微生物实验室工作人员必须在 生物危害材料的操作过程，维护，储存，丢弃 等方面接受过培训，具备一定经验，能熟练示 范。 相关机构和法规对生物危害材料的处理作了规 定。各实验室需了解并遵守该生物危害 材料 处理规定。
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方法1 方法1
胰蛋白胨大豆琼脂，非选择性羊血琼脂，标准计数平 胰蛋白胨大豆琼脂，非选择性羊血琼脂， 或营养琼脂——35℃ 正常环境，24-48小时 小时。 板，或营养琼脂——35℃,正常环境，24-48小时。
方法2 方法2
非选择性羊血琼脂——35℃ 正常环境，24~48小 非选择性羊血琼脂——35℃，正常环境，24~48小 在培养链球菌属和隐秘杆菌属时，CO2环境可提 时。在培养链球菌属和隐秘杆菌属时，CO2环境可提 高其生长。推荐使用5%CO2环境来培养肺炎链球菌 高其生长。推荐使用5%CO2环境来培养肺炎链球菌 和其他甲型溶血性链球菌。 和其他甲型溶血性链球菌。
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方法11 方法11
先接种于MRS肉汤中 先接种于MRS肉汤中——35℃，正常环境， 肉汤中——35℃ 正常环境， 48小时; 48小时 小时; 然后接入含羊血的哥伦比亚CNA培养基中 CNA培养基中— 然后接入含羊血的哥伦比亚CNA培养基中— —35℃，5-10%CO2环境，48小时。 35℃ 10%CO2环境 48小时 环境， 小时。
ATCC标准菌种 ATCC标准菌种 复苏与使用指南
“KWIK“KWIK-STIK Microorganisms” 产品的使用说明
防范与限制 Precaution and Limitation 这类产品仅适用于体外实验。 这些设备以及后来在培养基上生长出的微生物属 生物危害材料 这些设备含具有活性的微生物，在一定的环境下 可能致病。需使用适当的技术避免任何微生物的 暴露和接触。
KwikKwik-Stik 操作流程
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注:请严格按照操作流程”、“推荐生长条 请严格按照操作流程” 推推荐培养方法”活化标准菌株， 件”和“推推荐培养方法”活化标准菌株， 不建议使用实验室自己的方法及文献方法 活化标准菌株，否则菌种供应商不保证菌 活化标准菌株， 株的质量且不提供相应的售后服务。 株的质量且不提供相应的售后服务。
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加拿大PROLAB 加拿大PROLAB microbank 菌种保藏管
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操作步骤 A．准备
1．使用一个准备的标签，管上条码，每管接种一个 使用一个准备的标签，管上条码， 生物。（也可以看步骤6 。（也可以看步骤 生物。（也可以看步骤6）。 2．在无菌的条件下打开小管的盖。 在无菌的条件下打开小管的盖。 3．将纯培养的小菌落（18-24h 培养）挑取3-4 个 将纯培养的小菌落（18培养）挑取3 麦氏管缓冲液接种到液体保存剂中。 麦氏管缓冲液接种到液体保存剂中。 4．盖好瓶盖并颠倒4-5 次以吸附微生物，不要旋涡。 盖好瓶盖并颠倒4 次以吸附微生物，不要旋涡。 5、此时微生物将被吸附到小珠，这缓冲液需倒掉使 此时微生物将被吸附到小珠， 接种小珠尽可能无液体，盖上瓶盖。 接种小珠尽可能无液体，盖上瓶盖。 6、在瓶上提供的培养条码做下记录或其它的记录。 在瓶上提供的培养条码做下记录或其它的记录。 7、贮存接种的冻存管在-70℃为了最好长期效果。 贮存接种的冻存管在-70℃为了最好长期效果。
储存不正确; 储存不正确; 有过度暴露在湿热环境中的迹象; 有过度暴露在湿热环境中的迹象; 己过有效期。
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Microorganisms公司产品 Microorganisms公司产品
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方法8 方法8
缓冲活性炭酵母提取物琼脂——35℃ 缓冲活性炭酵母提取物琼脂——35℃，正常 环境， 环境，3-5天。
方法9 方法9
V琼脂或巧克力琼脂——35℃，5%~10%， 琼脂或巧克力琼脂——35℃ 5%~10%， CO2环境 48小时 CO2环境，48小时。 环境， 小时。
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方法6 方法6
巧克力琼脂——35℃ 微需氧环境，48-72小时 巧克力琼脂——35℃，微需氧环境，48-72小时。 小时。
方法7 方法7
Lowenstein Jensen琼脂或Middlebrook琼脂— Jensen琼脂或 琼脂或Middlebrook琼脂 琼脂— —35℃，5%~10%CO2环境或正常环境，7天。 35℃ 5%~10%CO2环境或正常环境 环境或正常环境， M. fortuitum subsp. fortuitum, M. peregrium 和M. smcgmatis也可以选用胰蛋白 smcgmatis也可以选用胰蛋白 胨大豆琼脂(TSA)和 Jensen琼脂或 胨大豆琼脂(TSA)和Lowenstein Jensen琼脂或 Middlebrook琼脂一样 只是需额外培养一些时间。 Middlebrook琼脂一样，只是需额外培养一些时间。 琼脂一样，
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储存与有效期 Storage and expiration
在原装密封瓶或含干燥剂的袋中的 KWIKKWIK-STIKTM应存放在2℃~8℃。 应存放在2 ~8℃ 冻干的微生物制剂在有效期内将保持其规 格和性能，有效期在设备标签上标明。 格和性能，有效期在设备标签上标明。 若出现以下情况则不能使用： 若出现以下情况则不能使用：
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方法10 方法10
菌种水解可选用无菌脑心浸出液肉汤，胰蛋白 菌种水解可选用无菌脑心浸出液肉汤， 胨大豆肉汤， 0.85%生理盐水 生理盐水。 胨大豆肉汤，或0.85%生理盐水。无菌水水 解可能会导致活力下降或不复苏。 KWIK解可能会导致活力下降或不复苏。在KWIKSTIK包装中自带的培养基使得菌种很好的复 STIK包装中自带的培养基使得菌种很好的复 苏。 在胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)上生长 上生长——35℃ 在胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)上生长——35℃， 正常环境，24-48小时 小时。 SP.也可在 正常环境，24-48小时。Vibro SP.也可在 Marine琼脂上生长 Marine琼脂上生长
简介与说明： 简介与说明：
微生物的长期保存是一个挑战，生物需要低温贮存并 微生物的长期保存是一个挑战， 尽量提供最少干扰的可能性。然而， 尽量提供最少干扰的可能性。然而，Microbank™ 提供了一种保存液来应对对这个问题。 提供了一种保存液来应对对这个问题。
用途： 用途：
标记颜色的25 标记颜色的25 个小珠被包装容纳在包含保存剂的保 存管里，小珠被冲洗和吸附细菌在上面， 存管里，小珠被冲洗和吸附细菌在上面，之后保存管 在贮存期内保持在-70° 当需要培养， 在贮存期内保持在-70°C，当需要培养，单个小珠 很简单的移出保存管，并直接划线在微生物培养基上。 很简单的移出保存管，并直接划线在微生物培养基上。
方法3 方法3
巧克力琼脂——35℃ 5%~10%的CO2环境 巧克力琼脂——35℃，5%~10%的CO2环境， 环境， 24-48小时。 24-48小时 小时。
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方法4 方法4
厌氧血琼脂——35℃ 厌氧环境，48-72小时； 厌氧血琼脂——35℃，厌氧环境，48-72小时； 小时 部分专性厌氧菌可能需要5~7天 才能充分生长； 部分专性厌氧菌可能需要5~7天，才能充分生长； 对于梭菌，以下新鲜配制的平板也可选用：营养琼脂， 对于梭菌，以下新鲜配制的平板也可选用：营养琼脂， 胰蛋白胨大豆琼脂和标准平板计数琼脂( 胰蛋白胨大豆琼脂和标准平板计数琼脂(标准方法琼 只是需额外培养24小时 小时。 脂)；只是需额外培养24小时。
方法12 方法12
马铃薯葡萄糖琼脂——55℃ 正常环境，48小 马铃薯葡萄糖琼脂——55℃,正常环境，48小 时。
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