阿司匹林含量测定方法综述

阿司匹林原料和制剂在体内及体外含量测定方法

摘要阿司匹林（Aspirin，C9H804，180．16）又名：2-(乙酰氧基)苯甲酸或乙酰水杨酸，是一种历史悠久，应用最早，最广和最普通的解热阵痛药，收载于（中国药典2005版—283）。该文主要分析阿司匹林原料及以阿司匹林为主药的多种制剂在体内和体外的含量测定方法。

关键词阿司匹林含量测定方法

正文

1.阿司匹林原料药在体内含量测定方法

反相高效液相色谱法

①色谱条件：填充剂十八烷基硅烷键合硅胶（5um）；色谱柱4.6mm×150mm；流动相甲醇-水-正丁醇-磷酸（300:200:10:0.05）；检测波长237nm；柱温：室温。

②对照品溶液制备：精密称取阿司匹林对照品适量，加甲醇溶解并制成浓度分别为0.5mg/ml

③样品处理：

取血清样品0.1ml，置于1.5ml具塞离心管中，加入50ul高氯酸（30%），再加不同浓度的阿司匹林及内标溶液适量，使浓度均为10ug/ml.涡旋振荡2min，于10000r/min离心5min。

④测定方法：

取上清液20μl进样，用峰面积计算浓度C X。

⑥计算公式：

C X=（C R×A X）/A R

（C R为对照品溶液的浓度（ug/ml）；A X和A R分别为样品溶液与对照品溶液中阿司匹林的峰面积）

2.阿司匹林原料药在体外含量测定方法

1）直接滴定法

直接滴定法即将阿司匹林溶于中性乙醇、甲醇或丙酮中，以酚酞、酚红或酚硫酞为指示剂，用氢氧化钠滴定液直接滴定。

①阿司匹林含量测定的反应原理：

②测定方法：

取本品约0.4g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示剂显中性）20ml溶解后，加酚酞指示剂3滴，用氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于18.02mg的C9H8O4。

③计算公式：

NaOH滴定度T=0.1×180.16×(1/1)=18.02（mg/ml）

F=M（实际）/M(规定)

含量（%）=（V×T×F）/W×100%

（V为滴定液体积（ml）； T为氢氧化钠的滴定度，W为供试品称样量（g）；F为滴定液浓度校正因子（F=滴定液实际浓度/滴定液规定浓度））

2）水解后剩余量滴定法

利用阿司匹林酯结构在碱性溶液中易于水解的特性，加入定量过量的氢氧化钠滴定液，加热使酯键水解后，再用硫酸滴定液回滴定剩余的氢氧化钠滴定液。

①反应原理：

②测定方法：

取本品 1.5g，精密称定，加氢氧化钠滴定液（0.5mol/L）50.0ml，混合，缓缓煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（0.25mol/L）滴定，并将滴定结果用空白试验校正。

③计算公式：

从上述反应式可知：阿司匹林与硫酸的摩尔比为1:1

硫酸的T=0.25×（1/1）×180.16=45.04(mg/ml)

含量（%）=﹝（V0-V）×F×T﹞/W×100%

（V0为空白试验消耗硫酸滴定液的体积（ml）；V为样品测定时消耗硫酸滴定液的体积（ml）；W为阿司匹林样品的称取量（g）；F为硫酸的浓度校正因数；T为硫酸溶液的滴定度）

3.阿司匹林制剂药在体内含量测定方法

高效液相色谱法

高效液相色谱法可用于小剂量阿司匹林制剂的体内研究。

①色谱条件：色谱柱 Inertsil C18(250mm ×4．6mm，5um)；流动相甲醇一2．5％醋酸(45：55，v／v)；柱温 35℃；流速 1．2 ml/min；检测波长 237nm。

②溶液的配制：

水杨酸标准储备液：精密称取厄贝沙坦标准品10．00mg，置100mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀即为100 g/ml的水杨酸标准储备液，并用甲醇稀释成不同浓度的系列溶液。

③标准曲线的建立：

分别精密吸取适量水杨酸溶液，加入空白血浆，配制成浓度为0．3、0．5、l、2、4、6、8ug/ml的血浆样品，精密移取血浆样品0．5ml于10 ml离心管内，加入100ul磷酸，混匀。加入2．5 ml乙醚，涡旋提取3min，4000r/min 离心10 min，取上清液2．0ml，37℃水浴中氮气流吹干。残留物用100ul流动相溶解，取20ul 进样分析。以样品峰面积(y)对血药浓度(c)作线性回归，得回归方程

Y=78038c-18518．r=0．9996。

③血浆样品的处理：

精密移取血浆0．5ml于10 ml离心管内，加入100ul磷酸，混匀。加入2．5 ml 乙醚，涡旋提取3min，4000r/min 离心10 min，取上清液2．0ml，37℃水浴中氮气流吹干。残留物用100ul流动相溶解。

④测定方法：

取20ul进样，将血浆样品的峰面积Y代入标准曲线方程，计算样品浓度C。

4.阿司匹林制剂药在体外含量测定方法

1）两步滴定法

因阿司匹林片剂中除存在其水解产物水杨酸及醋酸外，在制剂工艺中添加了抑制阿司匹林水解的稳定剂酒石酸或枸橼酸，因而采用此法。

两步滴定法系指测定过程分两步进行：第一步中和制剂中的酸性水解产物和酸性稳定剂（同时中和阿司匹林的游离羧基），以消除其干扰；第二步水解与滴定，即水解后剩余量滴定法。

①阿司匹林片含量测定的原理：

中和：

水解与滴定：

②测定方法：

中和：取本品10片，精密称定，研细，精密称取片粉适量（约相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示剂显中性）20ml，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/ml）至溶液显粉红色。此时中和了供试品中存在的游离酸，阿司匹林也同时成为钠盐。

水解与滴定：在中和后的供试品溶液中，精密加氢氧化钠滴定液（0.1mol/ml）40ml，置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（0.05mol/ml）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。

③计算公式：

从上述反应式可知：阿司匹林与硫酸的摩尔比为2：1