精子标准版SOP

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WHO第五版新标准解读与第四版相关参数

WHO第五版新标准解读与第四版相关参数

附注:1、精液的两个主要量化指标:1.精子总数,反应睾丸的生精状况和睾丸后管道系统的通畅程度。

2.体积反应腺体的分泌能力。

3.仅凭一次精液检查不能确定精子质量。

4.检查两到三次有助于获得可靠的基本数据2 、对于生育男性精液pH值的参考值尚未确定,现保持原有下限值7.2。

注释:如低体积低精子数目的精液样本的pH低于7.0,可能存在生殖道梗阻或先天性双侧输精管缺如。

同时也可能是精囊发育不良的一个表现。

3、非精子细胞的存在往往暗示着睾丸的损伤(未成熟生精细胞)、输精管的病理性损害(纤毛丛)或附属性腺的炎症(白细胞)。

4、正常精子的观点由于精子形态差异较大,评估较为困难,但是,我们可以从女性生殖道,尤其是从性交后子宫颈管内粘液中获得的精子,以及从透明带表面收集到的精子的形态来定义有受精潜能(形态学正常)的精子。

通过严格应用这种形态学标准,我们可以建立正常精子形态率和各种生育指标(获得妊娠间期(time-to-pregnancy TTP)以及体内、体外妊娠率)之间的关系,这对生育的预后非常有用。

子宫颈内粘液里面广泛存在的精子被认为是有受精潜能的精子,而这正是这里所描述的形态分类系统的基础。

通过这些标准,生育和不育男性的正常形态率为0~30%,很少超过25%(Menkveld et al., 2001)。

因此,正常值下限很低。

通过人透明带也可以选出一组形态相似的精子,但这种“透明带选择”精子的形态变异度比较大(Liu et al., 1990;Garrett et al., 1997)。

在有生育男性精液中,这种“透明带选择”活动精子比例也很低(8~25%)(Liu et al.,2003)。

药物参考:育之缘口嚼片(每日3次,每次2片)、维生素E(每日3次,每次1粒,按说明书指导服用)。

WHO人类精液检查与处理实验手册

WHO人类精液检查与处理实验手册

正 主段应是直的,均一的,比中段细,其 主段应是直的,均一的,比中段细,非
常 长约45um。
卷曲的,其长约为45um。
标 准
异 主段缺陷包括:短、多尾、发卡形、断 主段缺陷包括:短、多尾、发卡形、断
常裂

标 主段急剧弯曲、主段宽度不规则、主段 主段弯曲(>90度)、主段宽度不规则、
准 卷曲以及上述缺陷的任何组合
生育力评估
评估男性生育三大要点:
女方妊娠 妊娠时相 精液参数
其他男性病诊断
精子的总数:睾丸生殖功能 输精管道的通畅程度
血精、脓精:附性腺疾病 精浆生化: 附性腺功能
治疗策略制定(常规治疗及辅助生殖)
少精子症的分类和ART治疗方案
精子浓度
治疗
轻度少精子症 ≧10,<20(15) ×106/ml
主段卷曲以及上述缺陷的任何组合
精子胞浆小滴判断标准
胞浆小滴体积大于精子头部的1/3
胞浆小滴体积大于精子头部的1/3
WHO第四版与第五版精子形态学评估标准比较研究
研究目的:比较WHO第四版与第五版精子形态学评估标准的变化。 研究对象: 1000个精子图片,一张精子形态质控版 研究方法: 1.用WHO第四版的评估标准,对上述精子进行评估 2.精子库9名工作人员学习第五版精子形态学评估标准及精子图谱,并进行室内质量控
因此,有必要建立或选用特殊实验对精子功 能进行测定。
精子存活率 精子形态分析 精子顶体完整性 精子与透明带结合试验 精子细胞核成熟度与DHA损伤检测 精子表面结合抗体检测 附睾功能检测
精子形态学评估标准
在评估精子正常形态时应采用严格标准 (Krugeret al.,1986;Menkveld et al.,1990;Coetzee al.,1998)

精子说明书

精子说明书

精子质量说明书精液质量全自动检测系统一、系统简介精液常规分析是男性不育症的诊断、治疗和科研中最基本而重要的检查,常规分析中精子密度、精子活动度、精子活率等综合分析是了解和评估男性生育能力的重要依据。

目前临床以及实验室普遍使用的还是经典的人工分析方法,由于检验手段不同,实验室条件、检验人员技术水平及经验不等,造成检测结果的差异,也降低了报告的客观性和可比性,给临床诊断和科研工作带来了困难。

我公司的精子质量检测分析系统,是将精液样本通过显微镜进行超级放大,图像经电子摄像系统送入计算机,运用先进的计算机技术对精子的密度、活力、活率、运动轨迹特征等进行自动化定质定量的检测分析。

该系统的开发和研制成果已经改变传统手工的检验方式,为精液检验的专业化、科学性化提供崭新的检测手段。

尽管在国内已经出现类似精液动静态分析类的检测仪器,但由于其可操作性,实用性远远达不到临床检验的需要,因此有必要开发一种使用科学,可重复性佳,操作简单、快捷、方便,能够满足临床检验的基本需要的精子质量检测仪器。

我公司研制开发的精子质量检测分析系统是应运而生的高科技时代产物。

本系统采用现代化的计算机技术和先进的图像处理技术,对精子等微生物的动静态特征进行全面的量化分析。

特别适用于临床精液检验,能够极大的提高临床检测水平。

广泛应用于医院的生殖方面如:泌尿科、男性科、妇产(试管婴儿)科、计划生育、优生优育研究等。

也可应用于其他领域,如生物研究所、动物人工繁殖研究所及人工授精站等,也具有广泛的应用价值。

本系统较传统的分析法比较,具有速度快、量化性好、准确性高、检测参数指标丰富为临床和科研提供客观的检测依据。

另外,它还具有操作简单、全中文、电脑智能化程度高等特点。

一、系统主要技术指标1、最大采集个数1000或更高2、检测速度范围0-100 um/s3、采集图像帧数0-2004、分辨率2-60或更高um5、图像采集组数1-10组二、操作规程为了使您更直观、更方便的学习和使用本软件,我们特意在说明书中加入了图象样本,希望对您能有所帮助,由于我们是作者,对学习使用本软件的一些漏洞或不足不是很了解,希望您能够给我们提出宝贵意见,以便在今后的使用之中能够更方便、快捷!1、系统登陆进入本系统。

精液检验标准操作

精液检验标准操作

精液检验标准操作1、标本收集用清洁干燥小瓶收集精液,不宜采用避孕套内的精液。

2、检查内容记录精液量、颜色、透明度、黏稠度和是否液化。

显微镜检查包括精子计数、活动力、活动率、形态。

3、标准操作:1.1.取1滴液化混匀精液滴于载玻片上,加盖玻片。

先在低倍镜下了解总体精子活力,然后在高倍镜下观察精子的活动率及活动力。

3.2.精子活动率分析在高倍镜下,随机观察10个不同视野,计数活动及不活动精子数,算出活动精子百分比,即为精子活动率(活率)。

4.3.精子活动力分析高倍镜下观察10个视野,观察精子活动状态。

WHO将精子活动力分为如下4级:0级:不活动,无向前运动。

I级:活动不良,向前运动微弱(或原地打转)。

II级:活动一般,有中等向前运动。

In级:活动良好,向前运动活跃。

第2版《全国临床检验操作规程》(中华人民共和国卫生部医政司编)将精子活动力分为如下5级。

0级:死精子,无活动力,加温后仍不活动。

I级:不良,精子原地旋转摆动或抖动,运动迟缓。

II级:较好,运动方向不明确,不呈直线运动,也不活泼。

In级:为中速运动,但波形运动的较多。

IV级:良好,为快速的直线运动,很快超过1个视野。

运动活泼。

4、计数正常人精子计数存在明显个体差异,同一个人在不同时间内差异也较大。

正常精子数值为(50〜150)×10/L参考值为20×10/L以上。

5、精子形态观察革兰或瑞氏染色后用油镜观察。

异常精子可有:头部过大、过小、尖细、外缘不齐、双头等;中部消失、分枝或肿胀;尾部呈双尾,卷曲度短或消失(缺尾)。

参考值正常人精液中异常精子应少于20%,如超过20%为不正常。

6、细胞正常人精液中:红、白细胞V5/高倍视野。

7、PH正常7.2—8.0(平均7.8)8、其他成分精液中可以有结晶体、卵磷脂小体、淀粉样体、脂滴、脱落上皮细胞等。

9、临床意义9.1.正常精液呈灰白色,久未排精者可呈淡黄色,离体30min后,完全液化。

精液常规分析SOP

精液常规分析SOP


若用37℃为温度标准,精液标本不仅要在此 温度进行孵育,还要预热计数工具。载物台最 好也加热至37℃。
计数足够精子的重要性

手册第5版特别强调计数足够数量的精子(总 数≥400条)和重复计数(同一标本二次取样 分别检测),以期达到结果的一致性。 WHO第5版要求抽样误差<5%。检测精子总数在 400条时抽样误差为5%。检测精子总数在200条 时抽样误差为7.1%。检测精子总数在100条时 抽样误差为10%。抽样误差>10%不可取。
如何看待一份精液常规分析报告

通过一份精液标本的评估不可能确定一位男性 精液质量的特征。 检测该男子的2-3份精液标本有助于获取有效 的信息。 若多次采集标本,每次禁欲天数均应尽可能一 致。


取样前精液必须充分混匀

取样用于检测之前,应充分混匀标本。当重复 取样的结果一致时才能认可此测定值。 重复取样前,要再次充分混匀标本。 常规分析时,不要在涡旋振荡器上高速混匀精 液,这样会损伤精子,影响精子活力的测定。 稀释质控样本检测精子浓度时要将稀释后的标 本置于涡旋振荡器上以最大速度混匀20-30秒。
正常形态精子的概念



把“具备潜在受精能力精子”(亚群)的外观 作为形态正常的标准。 这些精子来自性交后的宫颈黏液或卵子透明带 表面。 借助目镜测微尺,甚至计算机系统来精确测量 精子各部分尺寸。 统计学处理大量数据后人为设定临界标准,规 定“临界形态精子都是异常”。
涂片的制作与染色


将标本600g离心10分钟, 除去大部分上清液,轻轻拍打试管,使精子团 重新混悬于剩余的上清液中。 必要时可加生理盐水重复洗涤一次。



洗涤后的精子浓度在20-50X106/ml为好。

精子检测标准

精子检测标准

精子检测标准精子检测是男性生育能力评估的重要手段,也是不孕不育症诊断的重要依据之一。

精子检测标准是指用于评估精子质量和数量的一系列指标和标准,其结果直接关系到男性生育能力和生育健康。

下面将介绍精子检测的标准及其相关内容。

1. 精子密度。

精子密度是指每毫升精液中所含精子的数量,通常以百万精子计算。

世界卫生组织(WHO)规定的正常精子密度范围为15-20百万/ml。

低于此范围的精子密度可能会影响生育能力。

2. 精子活力。

精子活力是指精子的运动能力和活动力,通常以百分比表示。

正常精子活力应该在50%以上,活动力强的精子更有可能成功受精。

3. 精子形态。

精子形态是指精子的外形和结构,正常形态的精子比例对于受精能力有重要影响。

通常,WHO规定正常形态的精子比例应在4%以上。

4. 精子总数。

精子总数是指一次射精中所含的总精子数量,通常以亿计算。

正常精子总数应在2亿以上,数量越多,成功受精的机会就越大。

5. 精液量。

精液量是指一次射精所排出的精液总量,通常以毫升计算。

正常精液量应在2毫升以上,过少的精液量可能会影响精子的活动和受精能力。

6. 精子pH值。

精子pH值是指精液的酸碱度,对于精子的存活和活动有一定影响。

正常精子pH值应在7.2-8.0之间。

7. 精子凝固时间。

精子凝固时间是指精液从液态到凝固的时间,正常凝固时间应在5-30分钟之间。

总之,精子检测标准是评估男性生育能力和生育健康的重要依据,通过对精子密度、活力、形态、总数、精液量、pH值和凝固时间等指标的检测,可以全面评估男性生育能力的健康状况,为不孕不育症的诊断和治疗提供重要参考依据。

希望本文内容对您有所帮助。

精液常规分析(世界卫生组织标准)

精液常规分析(世界卫生组织标准)

精液常规分析(世界卫生组织标准),男性生育力检查的金标准精液分析是评估男子生育力的重要方法,也是男科病诊断、疗效观察的实验依据,但精液分析的各参数也不是特异的,它并不能够确定达到受精位置的少数精子的受精能力,因此要正确评估男子生育能力还需要结合临床进行综合评估。

精液的分析结果易受射精频度,温度,实验室条件,检验人员的技术熟练程度,主观判断能力等诸多因素影响,其结果易发生偏差,因此精液采集与分析必须严格按照适宜的标准化程序进行,才能提供受检者临床状况的必要信息。

不育夫妇初诊时,男方至少要按标准程序做两次精液分析,两次分析如有明确差异,还要进行第三次分析。

精液标本可能含有致病菌和病毒(如HIV病毒,肝炎病毒,单纯疱疹病毒等),因此应视为生物危险品。

实验室技术人员应注意防护,要使用一次性手套和各种器皿。

用过的器皿要消毒处理。

精液培养,用于生物测定,宫腔内受精或体外受精,在处理过程中必须严格用无菌材料和无菌操作。

一,精液标本的采集和运送精液采集规范化是做好精液分析的前提条件,因此在精液采集前务必要详细告知受检者有关精液采集和运送的方法及注意事项。

1,标本采集前应禁欲至少48小时,但不超过7天。

为减少精液分析结果的波动,禁欲的天数应尽可能恒定。

每一份精液分析报告都应写明:病人姓名、禁欲时间、标本采集的日期和时间、标本采集是否完整以及标本从采集到分析的时间间隔等。

2,初检者应做两次精液分析,两次精液采集的间隔应大于7天,但不能超过3周。

如果两次的结果有明显的差异,应再取标本进行第三次分析。

3,标本的采集最好在实验室附近的取精室内单独进行。

否则,应在采集后1小时内送到实验室。

4,最好用手淫的方法取精液,收集精液要用对精子无毒性作用的广口玻璃或塑料容器中。

温度应保持在20~40℃,以避免降低精子活力。

如果要做微生物学方面的检查,病人应先排尿并洗净双手和阴茎,用无菌容器收集。

5,如手淫取精有困难,可用特制的避孕套进行精液采集。

精子检测操作步骤

精子检测操作步骤

WLJY-9000精子检测操作步骤SOP文件
一、提前将计数板放置在恒温台上预热一会。

二、待精液液化后,制备精液分析标本。

方法是:用微
量吸管将定量的精液(不超过5ul)滴在清洁计数板的精液池上,再盖上专用盖玻片。

三、将放好精液样本的计数板放在显微镜载物台上的
恒温板上固定。

四、在“输入项目”里输入病例信息
五、进入“活动显示”,并选择放大倍数(应与物镜一
致,通常选择20倍)
六、调节显微镜直到可在活动显示界面可看到精子或
杂质,调节微调将精子调黑便于软件捕捉(可以稍微模糊一点有利于捕捉精子)。

七、进入“计算分析”,“确定”后点活动图像界面,调
节“新域值”后“重新分割”使视野精子都被捕捉上,被选入的杂质数目填入“圆细胞数”中,“开始分析”。

(如果漏选的精子较多,提高新域值10-20后重新分割;
如果选中的杂质较多,降低新域值)
八、点“是”进入下一视场分析,切换视野,重复计算
分析直至计算的精子总数达200-300个(视野数在4个以上),点“否”得出报告,保存并打印报告。

精子评估标准

精子评估标准

精子评估标准精子评估是生殖医学领域中非常重要的一项检查,主要用于评估男性生育能力和诊断男性不育原因。

精子评估标准是指根据一定的指标和标准对精液中的精子进行细致的观察和分析,从而判断精子的质量和数量是否正常。

精子评估的主要指标包括以下几个方面:1.精子密度:也称为浓度,指的是每毫升精液中含有的精子数量。

正常的精子密度应在15-200百万/ml之间。

2.精子活动力:指的是精子的运动能力,也称为活动率。

通常根据精子的运动方式将其分为四个等级:A级(快速直线运动),B级(缓慢但直线运动),C级(非直线或活动缓慢),D级(无法活动)。

正常精液中A级和B级精子的比例应在总精子数的50%以上。

3.精子形态:指的是精子的形状和结构。

正常形态的精子应具有头部,颈部和尾部的明显结构。

一般来说,形态正常的精子应占总精子数的4%以上。

4.精子存活率:指的是精子在一定时间内存活的能力。

正常精液中的存活率应在50%以上。

5.精液量和液化时间:正常的精液量应在2-6毫升之间,液化时间应在20-30分钟之间。

通过对以上指标的评估,可以全面了解精子的质量和数量,从而判断男性生育能力是否正常。

若发现精子评估指标异常,可以进一步进行精子功能检查,如精子DNA断裂检测、精子抗体检测等,以帮助确定病因和制定治疗方案。

需要注意的是,精子评估只是男性生育能力评估的一个重要指标,不是唯一的评估标准。

对于不育患者来说,还需要综合考虑男性和女性生育能力的各项指标,以及其他可能的不育因素,才能确定最佳治疗方案。

总之,精子评估标准是对精液中的精子进行细致观察和分析,通过对精子密度、活动力、形态、存活率等指标的评估,可以初步判断男性生育能力是否正常,帮助确定不育的病因和治疗方案。

精子合格标准

精子合格标准

精子合格标准精子是生殖细胞的一种,是生殖细胞中的男性细胞。

精子的质量对于生育和健康有着重要的影响,因此精子的合格标准成为了备受关注的话题。

那么,究竟什么样的精子才能被称为合格的呢?本文将从精子的形态、数量、活力等方面进行详细介绍。

首先,精子的形态是衡量精子质量的重要指标之一。

正常形态的精子应该具有头部、中段和尾部三部分,头部应呈椭圆形,中段应呈直线或微弯曲状,尾部应呈直线或呈弯曲状。

此外,精子的头部应该具有完整的顶体和尾部,否则会影响精子的活力和受精能力。

其次,精子的数量也是衡量精子质量的重要指标之一。

正常情况下,每毫升精液中应该含有超过1500万的精子,而精液的总量应该在2毫升以上。

如果精子的数量过少,就会影响精子的受精能力,从而影响生育。

除此之外,精子的活力也是衡量精子质量的重要指标之一。

精子的活力应该在50%以上,即在一定时间内能够保持活跃状态。

活力低下的精子往往无法有效地进行受精,从而影响生育。

最后,精子的存活能力也是衡量精子质量的重要指标之一。

正常情况下,精子的存活能力应该在72小时以上,即在一定时间内能够保持存活状态。

存活能力低下的精子往往无法在女性体内存活足够的时间,从而影响受精。

综上所述,精子的合格标准包括形态正常、数量充足、活力高、存活能力强等多个方面。

只有在这些方面都达到一定标准的精子,才能够被称为合格的精子。

因此,对于想要生育健康后代的夫妇来说,保持良好的生活习惯、避免接触有害物质、及时治疗生殖系统疾病等都是非常重要的,以保证精子的质量和数量,从而提高生育的成功率。

正常精子报告单

正常精子报告单

正常精子报告单正常精子报告单是男性生育能力的重要指标之一,通过对精子的数量、活力、形态等指标的检测,可以评估男性的生育能力和生殖健康状况。

一份正常的精子报告单对于男性来说意味着他们具备了正常的生育能力,而对于计划生育的夫妇来说,也是重要的参考依据。

下面将详细介绍一份正常精子报告单的内容及其相关指标。

首先,正常精子报告单包括了多个关键指标,其中最主要的包括精子密度、精子活力、精子形态等。

精子密度是指每毫升精液中所含的精子数量,正常值一般在15-200百万/ml之间。

精子活力是指精子的运动能力,也是衡量精子质量的重要指标,正常值为50%以上。

而精子形态则是指精子的外形是否正常,正常形态的精子应该占总数的4%以上。

其次,除了上述主要指标之外,正常精子报告单还可能包括其他一些辅助指标,比如精子的存活率、精液的酸碱度、精子的凝固时间等。

这些指标虽然不如主要指标那么直接影响生育能力,但同样反映了男性生殖系统的健康状况。

另外,正常精子报告单的结果还会根据不同的标准进行评价,比如世界卫生组织(WHO)和中国生殖医学会(CSRM)等都有各自的评价标准。

因此,在查看报告单时,需要结合具体的评价标准进行分析,以便更准确地评估男性的生育能力和生殖健康状况。

总的来说,正常精子报告单是评估男性生育能力和生殖健康状况的重要依据,通过对精子数量、活力、形态等指标的检测,可以全面地了解男性的生育能力和生殖健康状况。

因此,对于计划生育的夫妇来说,及时进行正常精子报告单的检测是非常重要的,可以帮助他们更好地制定生育计划,保障家庭的健康和幸福。

同时,对于男性个人来说,也应该重视自身的生育能力和生殖健康状况,及时进行相关检测,以便及早发现和处理潜在的问题,保障自身的健康和幸福。

精液常规检验标准操作程序

精液常规检验标准操作程序

精液常规检验标准操作程序1.检验目的1.1评估男性生育功能,提供不育症诊断和疗效观察的依据;1.2辅助诊断男性生殖系统疾病;1.3输精管结扎术疗效观察;1.4计划生育科研;1.5为体外受精和精子库筛选优质精子;1.6法医学鉴定。

2.检验原理精液主要由精子和精浆两部分组成。

精子产生于睾丸,在附睾内发育成熟,是男性的生殖细胞,约占精液的5%,其余95%为精浆。

精浆是男性附性腺(附睾、精囊、前列腺、尿道球腺和尿道旁腺)分泌的混合液,是运送精子的载体,也是营养精子、激发精子活力的重要物质。

精液中含有维持精子生命活动的物质,如果糖、酸性磷酸酶、5-核苷酸酶、精胺、无机盐等(锌、镁、钙、铜、铁、钾、钠等)及其他各种具有催化作用的酶等。

此外,精液中尚含有少量白细胞、生殖道脱落的上皮细胞等。

3.标本3.1精液样本的采集是精液检查的主要步骤,收集样本的方法正确与否直接影响检查结果的准确度。

因此必须向受检者交待如何收集和转运样本。

3.2样本采集方法:最理想的是用手淫法采集,室温20-35℃,受检者可直接在实验室邻近的卫生间,由本人手淫将一次射出的精液收入洁净、干燥的容器内。

3.3样本采集时机:采集前必须禁欲3-5d。

一般不超过7d。

禁欲时间太长,精液量增加,而精子活力下降。

3.4样本采集次数:因精子生成数目日间变化较大,不能依据1次化验结果做出诊断,一般应间隔1-2周检查1次,连续检查2-3次。

3.5样本运送:样本采集后应置于洁净、干燥的容器内,加盖,勿用胶乳或塑料避孕套盛样本(套内的滑石粉可影响精子活力)。

精液采集后30min内保温(20-35℃)送检。

3.6不完整的精液样本,不宜进行精液分析。

4.设备OLYMPUS双目电光显微镜5.操作步骤5.1外观:正常人刚排出的精液有一股腥味,呈灰白色或乳白色,自行液化后为半透明的乳白色。

长时间未排精者射出的精液可略带淡黄色。

鲜红色或暗红色同时含有大量红细胞者为血性精液,见于生殖系统炎症、结核和肿瘤等。

精子fish sop

精子fish sop

人精子染色体荧光原位杂交(FISH)标准操作规程一. 目的:建立双三色FISH,研究人精子染色体的非整倍体,以及染色体倒位、易位患者所产生配子的情况。

二. 实验材料:(一).实验具器:有刻度离心管、吸管、载玻片、盖玻片、6个立式染缸、小镊子、胶水、玻璃笔。

(二).仪器设备:恒温箱、水平离心机、斜式离心机、荧光显微镜、相差生物显微镜,恒温水浴箱、变性杂交仪(Vysis公司)。

(三).试剂及配制:1.试剂和药品:美国Vysis公司的染色体计数探针(Chromosomeenumeration probe CEP)、20×SSC(32-804850)500g、NP-40(32-804818)2×1000ul 生理盐水、 6mM EDTA的PBS、DAPIⅡcounterstain(32-804831)2×500ul(125ng/ml)、无水洒精(100% ethanol)、1N NaOH 、纯水(distilled water,HO)。

22.试剂和药品的配制:O)中,混1)20×SSC溶液:132g 20×SSC加入400ml蒸馏水(H2匀,然后加蒸馏水至总量500ml。

调节PH5.3,室温保存。

有效期为6个月。

O中加入100ml 20×SSC,混匀,然后加入2)2×SSC溶液:850mlH2H2O至总量1000ml。

调节PH7.0±0.2,室温保存。

有效期为6个月。

3)2×SSC/0.1%NP-40溶液:850ml HO加入20m l 20×SSC溶液,2混匀,再加入1mlNP-40,然后加HO至总量1000 ml。

调节2PH7.0±0.2,室温保存。

有效期为6个月。

O加入20ml 20×SSC,混4)0.4×SSC/0.3 %NP-40溶液:950ml H2匀,再加入3mlNP-40,然后加入HO至总量1000ml。

精子标准版SOP

精子标准版SOP

SQA-V精子质量分析仪1.1不要在SQA-V附近使用手机,不要在同一个台子上放置会产生震动的其他仪器;避免暴露于水和灰尘。

1.2仪器工作时环境温度为:15-38℃,检测精子样本的温度为:22-26℃。

2.1 开机:打开后面板电源,点击SQA-V键盘左下方ON/OFF按键,进入自检和自稳定。

注意:有进度条提示,耗时约5分钟!2.2检查剩余测试数:通过自检后,检查屏幕提示的剩余测试数,确保剩余测试数大于日平均样本量3倍。

【自检失败请参阅附录1,添加测试数请参阅附录2】2.3检查光电测量仓:查看自检参数是否在给定的范围内,若超出范围请进行清洁。

【请参阅附录1】注意:请务必每天检查自检参数,若不能确认在可接受范围内可能影响仪器正常使用!2.4检查视频仓:调节可视化系统的成像质量至最佳状态。

【可视化系统的调节请参阅附录3】3.样本采集及预处理3.1 待测样本要求:3.2对病人取样指导:3.2.1取样前,禁欲2-7天。

只能通过手淫方式取精,禁止使用润滑剂,含精子杀伤成分的试剂和其他任何可能造成样本污染的试剂。

3.2.2所有样本必须采集进清洁无菌容器内 (建议使用医生或实验室提供的容器)采样后立即送至实验室 (如果不在现场采样) 。

3.2.3运送途中确保样本处于室温下保存,禁止加热或者冷却样本及容器。

注意:超过一小时的样本,其活力将大幅下降,样本偏离真实状态的程度与时间成正比,当通过测试结果评估病人状态时需要尽可能多的考虑外界因素对结果造成的影响!可拒收样本: 样本距离采集时间已超过两小时。

3.3等待液化:收取的样本放置在样品杯中,等待其充分液化后再采样检测。

等待60分钟后仍未液化的样本需要处理,处理方法可分为以下两种情况:①用户已采购MES官方液化剂,请根据液化剂说明书使用试剂。

②用户未采购MES官方液化剂,可根据《世界卫生组织第五版:人类精液检查与处理实验室手册》第2.3.1进行检测。

【液化延迟请参阅附录4】注意:样本需要在完全液化的情况下进行检测,否则精子无法均匀分布于样本中,取样误差对结果会造成巨大影响!3.4样品洗涤:如果样本存在肉眼可见杂质,则需要洗涤后再取样。

精液常规检查作业指导书

精液常规检查作业指导书

精液常规检查作业指导书1. 实验原理纪录精液量、颜色、透明度、粘稠度和是否液化。

显微镜检查包括精子计数、活动力、活动率、形态。

2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备:必须禁欲(包括遗精和手淫)3~7天。

这是因为少于48小时采取的精液,因相距时间太短,精液中精子的数量可能偏少,容易造成少精症的假象。

如果超过7天,精子活率、活力都有所下降,也可造成弱精子症的假象。

精液检查应间隔一周或两周,要进行2~3次检查。

因为一个人精子的产生在一年中,可因季节、气候等,诸多因素的影响而有一些变化。

2.2 标本种类:精液2.3 标本要求:用清洁干燥小瓶收集,不应采用避孕套内精液。

3. 标本储存:立即送检。

4. 标本运输:室温运输,冬季需保温运输。

5. 标本拒收标准:久置标本,污染标本,避孕套内标本。

6. 操作步骤7.1 纪录精液量、颜色、透明度、粘稠度和液化时间。

7.2 精子活动率:取新鲜标本混匀后,在温玻片上用高倍镜观察100个精子,计数活动精子与不活动精子的比例,计算精子活动的百分率。

精子活动率=活动精子数/(活动精子数+不活动精子数)×100%7.3 取上述新鲜湿片标本,观察精子的活动力,可按下列五级报告:0级:精子完全不活动,加温后仍不活动;I级:精子运动不良,运动迟缓,原地打转或抖动,向前运动能力差;II级:精子活动较好,运动速度尚可,游动方向不定,呈直线或非直线运动,带有回旋;III级:为中速运动;IV级:精子活动好,快速直线运动,很快超越一个视野,活泼有力。

7.4 精子计数:7.4.1 于试管内加精子稀释液0.38ml,吸液化精液20 l,加入稀释液内摇匀。

7.4.2 充分摇匀后,滴入血细胞计数池内,静置1-2min,待精子下沉后,以精子头部作为基准进行计数。

7.4.3 如精子数少,可计数两个大方格内精子数,总数乘以10万即为每毫升精液内精子数,再换算成×109/L报告。

7.4.4如精子数多,可计数5个中方格内精子数,总数乘以100万即为每毫升精液内精子数,再换算成×109/L报告。

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SQA-V精子质量分析仪1.1不要在SQA-V附近使用手机,不要在同一个台子上放置会产生震动的其他仪器;避免暴露于水和灰尘。

1.2仪器工作时环境温度为:15-38℃,检测精子样本的温度为:22-26℃。

2.1 开机:打开后面板电源,点击SQA-V键盘左下方ON/OFF按键,进入自检和自稳定。

注意:有进度条提示,耗时约5分钟!2.2检查剩余测试数:通过自检后,检查屏幕提示的剩余测试数,确保剩余测试数大于日平均样本量3倍。

【自检失败请参阅附录1,添加测试数请参阅附录2】2.3检查光电测量仓:查看自检参数是否在给定的范围内,若超出范围请进行清洁。

【请参阅附录1】注意:请务必每天检查自检参数,若不能确认在可接受范围内可能影响仪器正常使用!2.4检查视频仓:调节可视化系统的成像质量至最佳状态。

【可视化系统的调节请参阅附录3】3.样本采集及预处理3.1 待测样本要求:3.2对病人取样指导:3.2.1取样前,禁欲2-7天。

只能通过手淫方式取精,禁止使用润滑剂,含精子杀伤成分的试剂和其他任何可能造成样本污染的试剂。

3.2.2所有样本必须采集进清洁无菌容器内 (建议使用医生或实验室提供的容器)采样后立即送至实验室 (如果不在现场采样) 。

3.2.3运送途中确保样本处于室温下保存,禁止加热或者冷却样本及容器。

注意:超过一小时的样本,其活力将大幅下降,样本偏离真实状态的程度与时间成正比,当通过测试结果评估病人状态时需要尽可能多的考虑外界因素对结果造成的影响!可拒收样本: 样本距离采集时间已超过两小时。

3.3等待液化:收取的样本放置在样品杯中,等待其充分液化后再采样检测。

等待60分钟后仍未液化的样本需要处理,处理方法可分为以下两种情况:①用户已采购MES官方液化剂,请根据液化剂说明书使用试剂。

②用户未采购MES官方液化剂,可根据《世界卫生组织第五版:人类精液检查与处理实验室手册》第2.3.1进行检测。

【液化延迟请参阅附录4】注意:样本需要在完全液化的情况下进行检测,否则精子无法均匀分布于样本中,取样误差对结果会造成巨大影响!3.4样品洗涤:如果样本存在肉眼可见杂质,则需要洗涤后再取样。

如果样本没有肉眼可见杂质请跳过本操作,直接进行下一步取样。

3.5取样:根据样本体积用一次性精子采样管进行取样,情况如下:3.5.1大于等于0.5mL,使用采样管采取正常量样本;3.5.2大于等于0.25mL小于0.5mL,有两种测量方法:①吸入20μL精液样本仅充满采样管前端薄片区域,只获得精子活动率参数;②用稀释液按1:1稀释样本,使用采样管采取正常量样本,获得所有参数;3.5.3小于0.25mL,吸入20μL精液样本仅充满采样管前端薄片区域,只获得精子活动率参数。

3.5.4采样管前端薄片区域吸不满的样本,建议涂片后- 2 -用显微镜观察。

3.6初检:把采样管放入可视化视频仓,在SQA-V键盘上按住ZOOM-OUT直至图像不变使放大倍数在300倍,用旋钮调节成像质量至最佳。

插入采样管,在视频显示屏上观察样本。

3.6.1 预估精子数量(根据不同情况,需要在4.1.2选择相应样本类型进行测量):①精子数量较多,视频观察样本中杂质/圆细胞小于50%,样本类型选择FRESH进行检测。

②精子数量较多,视频观察样本中杂质/圆细胞超过50%,将该样本洗涤后选择WASHED进行检测。

③疑似无精与少弱精样本:•当精子数目少无需精确计数时,样本类型选择FRESH进行检测,得到部分测量结果(对应《世界卫生组织第五版:人类精液检查与处理实验手册》第2.10节);•当精子数目少需要准确计数时,样本类型选择POSTVASECTOMY模式进行检测,得到活动精子、不活动精子和总精子数目。

(对应《世界卫生组织第五版:人类精液检查与处理实验手册》第2.11节)。

3.6.2测量白细胞,测量方法可分为以下两种情况(根据测量值在4.1.2做出相应选择):①用户已采购MES官方WBC试纸条,请根据说明书测量WBC浓度(亦可测量PH值)。

②用户未采购MES官方WBC试纸条,在视频显示屏观察到相邻两方格内均有白细胞,则WBCCONC. >1M/mL;若白细胞不在相邻方格出现,则WBCCONC. <=1M/mL。

③也可根据《世界卫生组织第五版:人类精液检查与处理实验手册》第2.12进行白细胞计数。

4.1输入病人和样本信息:4.1.1按操作屏提示输入:受检者ID、出生日期、禁欲天数、样本号、采集时间、接收时间。

4.1.2按操作屏提示和样本情况:选择样本类型(选择依据参考3.6.1),输入样本体积,选择白细胞浓度(选择依据参考3.6.2),输入PH值,选择外观、液化和黏性是否正常。

4.1.3根据3.5取样情况和操作屏显示,在>=0.5mL?下面选择YES/NO:①样本量大于等于0.5mL,能吸满采样管的正常量样本(3.5.1)选择YES②仅充满采样管前端薄片区域的少量样本选择NO>LOW VOLUME-20 MICROLITERS ONLY③1:1稀释后能吸满采样管的样本选择NO>DILUTE SEMEN 1:2(1+1) WITH MEDIA4.2自动检测:信息输入、选择完成后。

等屏幕出现ISERT CAPILLARY INTO CHAMBER提示,再把待测采样管插入仪器自动测量仓。

注意:检测过程中有进度条提示,期间切勿触碰仪器和采样管!4.3显示结果:进度条走完后显示测量结果(结果共2页),按SQA-V键盘上的Enter键翻页。

4.4结果传输:按Enter键,使SQA-V下显示屏进入“IMPORTTEST”界面,在电脑的V-sperm软件上点击“ImportTest”按钮,将测量数据导入电脑。

4.5图像采集:利用V-Sperm对样本进行图像采集,生成图文报告。

根据不同的中文报告系统有三种情况:①瑞美单机中文报告系统:点击“重启接口”>选择“标本日期”>点击“读取数据”>选择病人>更改资料(如有必要)>预览打印。

② LIS系统:LIS厂商不同操作方式不同,具体操作请联系LIS工程师。

③V-Sperm系统:目前V-Sperm只能打印英文报告,中文报告正在建设中。

5.外部质控建议用户在每天开始检测样本之前,先运行质控。

MES专门为SQA-V精子质量分析仪研制了标定质控品QwikCheck TM质控珠,用户也可用CAP稳定精子作为外部质控品。

①MES官方QwikCheck TM质控珠:【QwikCheck TM质控珠的设置和检测方法请参阅附录9】②CAP稳定精子:【CAP稳定精子质控检测方法请参阅附录10】主题内容SQA-V 精子质量分析仪生效日期:20160501第 - 4 - 页 共160 页附录1光电测量仓检查和清洁指导说明:光电测量仓是仪器检测的关键部分,其清洁度影响测量结果的准确度,光电测量仓的清洁度由自检参数体现。

当某些参数超过可接受范围时,测量结果会有偏差甚至造成仪器无法正常启动。

为了确保仪器良好运行,需要每天检查仪器自检参数,按时用正确方法对光电测量仓进行清洁。

清洁前准备: •开机自检失败时(若检测样本过程中自检失败需重启SQA-V ),在SQA-V 上选择SERVICE > SERVICE DATA 进入19个参数界面仪器下屏幕示“FAILED SELF-TEST ”此时在SQA-V 键盘上按SERVICE 键进入SERVICE DATA 19个参数界面)。

•在V-Sperm 软件上,选择Utilities > Self-Test Data > Continue 进入自检参数显示界面。

何时需要清洁:每日清洁(见步骤 1),每周清洁(见步骤 2) 或者发生以下情况时:• 当仪器自检失败或发生其他故障时 • 当仪器被精液样本污染清洁套装组成:• 长柄清洁刷• 超纤清洁片(一次性使用) • 海绵干燥片(一次性使用) •清洁液 (每次仅使用“1”滴)请注意:清洁片与干燥片为一次性使用,不可重复使用!清洁方法:步骤1(每日)Motility ChannelConc. ChannelREF. 1 150 - 350 mVLED CUR. 1 5 - 25 mA AMPLITUDE 50 - 100 mV SMI 26 - 36 ZERO LEVEL 500 - 525REF. 2 2500 – 3500 mVLED CUR. 2 10 - 32 mA CONC. 1 0 - 1 M/mL CONC. 2 50 - 150 M/mL CONC. 3 300 - 600 M/mL图1 长柄清洁刷主题内容SQA-V精子质量分析仪生效日期:20160501第- 5 - 页共160 页1.将长柄清洁刷(刷毛朝下)沿着光电测量仓上边缘插入底,与插入精子采样管完全相同(见图 2)。

2.向下轻压同时朝外拉动清洁刷同时向下轻压擦拭光学组件(拉动时会有碰到“阶梯”的感觉,见图 3)。

3.同时观察电脑V-Sperm上的自检参数“REF.2”的值,把REF.2的值清洁到2500-3500mV内,尽可能接近3000mV。

清洁方法:步骤 2(每周)1.取出一片超纤清洁片(见图4)。

- 仅将1滴清洁液滴在清洁片前端(图4圆圈内)。

- 甩一下,甩掉多余的液体。

- 插入测量仓,超纤面层朝下(见图5)。

- 拔出后再次插入,来回擦拭3-5次。

2.将海绵干燥片插入测量仓,静置 10-15 秒钟(见图 6)。

注意:海绵干燥片插入光电测量仓后,切忌前后移动。

3.同时观察电脑V-Sperm上的自检参数“REF.1”的值,把REF.1的值清洁到150-350mV内,尽可能接近200mV。

4.重启仪器,如果自检失败。

再次查看自检参数,看AMPLITUDE是否在50-100mV之间,尽可能接近70mV。

若不在,重复清洁步骤2(AMPLITUDE值不实时显示,重启仪器后更新显示)。

图3 “掸去”灰尘图4 超纤清洁片图5 插入清洁片-超纤面朝下图6 海绵干燥片图7 插入海绵干燥片SQA-V精子质量分析仪光电全自动测量仓必须使用以色列MES公司生产的专用清洁套装进行清洁主题内容SQA-V精子质量分析仪生效日期:20160501第- 7 - 页共160 页附录2添加测试数步骤:1. 打开SQA-V;2. 在MAIN MENU界面上选择SERVICE,进入SERVICEMENU界面;3. 在SERVICE MEN界面选择ADD I-BUTTON TESTS,进TO LOAD I-BUTTON TESTS界面;4. 把测试卡夹在SQA-V 左下侧的I-Button Port 通讯端口处,并确认卡片已经夹好;5. 在TO LOAD I-BUTTON TESTS界面,根据操作屏提示,按“ENTER”;主题内容SQA-V精子质量分析仪生效日期:20160501第- 8 - 页共160 页6. 进入加载界面,加载完成后,提示本次添加数和剩余测试数;7. 按“ESC”,退出界面。

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